EKSTRAKSI (TM 2)

BIOTEKNOLOGI 2022-2023
EKO NURCAHYA DEWI
 Introduction
The use of plant-derived medicinal dates back many
centuries although it is still under estimation in modern
medicine.

 Plants remain the most important source of natural

drugs.

- More than 30% of prescription drugs are natural

products.

- More than 60% of anticancer and anti-infective drugs

are natural products.
The main sources of drugs are as follows:

1- Natural substances:
From plants, microorganisms, animals,- etc.
(totally obtained from nature).

2- Semisynthetic substances:
These are drugs that are manufactured by partial synthesis.

3- Synthetic substances:
These are drugs which are manufactured by total synthesis
Proses ekstraksi hijau adalah metode yang digunakan
untuk mendapatkan berbagai ekstrak tumbuhan
dengan dampak minimal terhadap lingkungan.
Ekstraksi hijau akan mengurangi konsumsi energi,
memungkinkan penggunaan pelarut alternatif dan
produk alami yang dapat diperbaharui, serta
memastikan bahwa ekstrak yang dihasilkan aman dan
berkualitas. Ultrasound-assisted enzymatic extraction
UAEE adalah salah satu metode ekstraksi hijau. UAEE
adalah metode ekstraksi yang mudah, efisien dan
ramah lingkungan dan telah banyak digunakan untuk
mengekstraksi berbagai jenis senyawa.
Proses ekstraksi hijau adalah metode yang digunakan
untuk mendapatkan berbagai ekstrak tumbuhan
dengan dampak minimal terhadap lingkungan.
Ekstraksi hijau akan mengurangi konsumsi energi,
memungkinkan penggunaan pelarut alternatif dan
produk alami yang dapat diperbaharui, serta
memastikan bahwa ekstrak yang dihasilkan aman dan
berkualitas. Ultrasound-assisted enzymatic extraction
UAEE adalah salah satu metode ekstraksi hijau. UAEE
adalah metode ekstraksi yang mudah, efisien dan
ramah lingkungan dan telah banyak digunakan untuk
mengekstraksi berbagai jenis senyawa.
To carry phytochemical screening the following points
must be fulfilled:

1- Selection of promising plant materials.

2- Proper collection of selected plants.
3- Authentication of plant material.
4- Drying of plant materials./Raw =segar?
5- Grinding of the dried plants.
6- Garbling of the dried plants
7- Packing, storage and preservation
8- Extraction and fractionation of constituents.
9- Methods of separation and purification.
10- Methods of identification of isolated compounds
(structure elucidation e.g. UV, IR, MS, H-NMR and C-NMR).
The following precautions should be considered during
stage of collection:

a- The proper time of the day, time of the year and maturity
stage of collection is particularly important because the
nature and quantity of constituents may vary greatly in some
species according to the season and time of collection.

b- The collected plant should be free from any contamination.

c- Collecting plants which are free from diseases (i.e. which

are not affected by viral, bacterial, fungal infection).
 1.Selection of promising plant materials:

Before investing time, effort and money in phytochemical

screening it is very important to select a promising plant.

The choice of promising plant depends upon the

following:
1- A plant which have a biological activity.
2- A plant used in folk medicine
3- A plant which show a particular toxicities.
 2. Proper collection of selected plants

Drug may be collected from:

1- Wild plants. 2- Cultivated plants.

Wild plant Cultivated plant

Disadvantage Advantage
1- Scattered in large or Present in limited area.
unlimited area

2- Difficult to reach Easy to reach

3- The collector must be highly The collector must not be skillful
skilled botanists person

4- Deficiency may occur due to Continuous supply

continuous collection
3- Authentication of plant material

This may be confirmed by:

1- Establishing the identity by a taxonomy experts.

2- Collection of a common species in their expected habitat by

a field botanist.

3- By comparing the collecting plant with a voucher specimen

( herbarium sheet)
 4- Drying of plant materials

Aim of drying:

1- Ease of transport.
2- Ease of grinding
3- Inhibit the growth of microorganisms.
4- Preservative of active constituents.

Drying is done in:

-Shade and in sunlight (Natural drying).
- Hot air drying or by freeze-drying (Artificial drying).
Changes may occur during the drying:

1- Size and weight

2- Shape and appearance
3- Color
4.- Odour
5- Taste
6- Active constituent
Extraction: is the separation of medicinally active portion
of plants or animal tissues through the use of
selective solvent and suitable methods Extraction

The principal methods of extraction are:

1- Maceration
2- Percolation
3- Infusion
4- Decoction
5- Digestion
6- Continuous hot extraction technique
(Soxhlet extraction process).
7- Liquid-liquid extraction
8- Distillation
Proses ekstraksi hijau adalah metode yang digunakan
untuk mendapatkan berbagai ekstrak tumbuhan
dengan dampak minimal terhadap lingkungan.
Ekstraksi hijau akan mengurangi konsumsi energi,
memungkinkan penggunaan pelarut alternatif dan
produk alami yang dapat diperbaharui, serta
memastikan bahwa ekstrak yang dihasilkan aman dan
berkualitas. Ultrasound-assisted enzymatic extraction
UAEE adalah salah satu metode ekstraksi hijau. UAEE
adalah metode ekstraksi yang mudah, efisien dan
ramah lingkungan dan telah banyak digunakan untuk
mengekstraksi berbagai jenis senyawa.
Penggunaan enzim dalam metode ekstraksi ini akan
mengkatalisis hidrolisis sitoderm dan glikoprotein,
sehingga meningkatkan pelepasan zat bioaktif dengan
mengganggu sel-sel tumbuhan. Kondisi operasi
optimum yang digunakan dalam penelitian ini, yaitu
konsentrasi enzim 70 mg/g, waktu hidrolisis enzimatik 2
jam dan konsentrasi etanol 50, akan menghasilkan
yield ekstraksi maksimum sebesar 48,627. Crude
extract daun keji beling diuji dengan menggunakan Gas
Chromatography dan Mass Spectrometry GC-MS dan
teridentifikasi senyawa yang memiliki aktivitas anti-
hiperkolesterolemia, yaitu asam heksadekanoat, asam
oktadekanoat dan skualen.
Ultrasonic ekstraksi Spirulina pigmen
Ekstraksi ultrasonik telah terbukti sangat efisien untuk isolasi ekstrak kualitas unggul
Mikroalgae. Pigmen Spirulina seperti phycocyanin dikenal sebagai Superfood, yang
berkontribusi pada manfaat kesehatan karena kandungan antioksidan, vitamin, dan protein
yang tinggi. Dalam rangka untuk menghasilkan suplemen yang sangat terkonsentrasi
seperti bubuk dan tablet, pigmen biru harus diekstrak dari alga Spirulina.
Spirulina Arthrospira platensis (A. platensis) dan Arthrospira Maxima (A. Maxima) yang
dikenal dengan istilah Spirulina. Spirulina adalah alga hijau biru, yang kaya akan asam
amino dan antioksidan. Dengan beban tinggi nutrisi seperti protein, enzim, mineral, dan
vitamin A, K, B12, besi dan mangan, mereka dikategorikan sebagai sebuah Superfood.
Cell wall structure of brown algae (Schiewer &
Volesky, 2000)
Structures of the main polysaccharides typical of brown algae: (a)
alginate; (b) sulfated fucan from Fucales; (c) sulfated fucan from
Ectocarpales. (d) Hypothetical model of the biochemical organization of
cell walls of brown algae (adapted from Kloareg et al., 1986).

Kira2 alat apa yg cocok u melihat kandungan

Genus alga Arthrospira memiliki kandungan protein yang sangat tinggi. Kandungan
protein berkisar dari 53 sampai 68% oleh berat kering dan menawarkan spektrum
penuh dari semua asam amino esensial. Selanjutnya, Arthrospira memiliki jumlah
asam lemak tak jenuh ganda (PUFAs) yang tinggi, yaitu sekitar 1,5 hingga 2% dari
total kandungan lipid sebesar 5 hingga 6%. PUFAs ini mengandung asam γ-
linolenic (GLA), asam lemak Omega-6 yang esensial. Senyawa bioaktif lebih lanjut
dari Arthrospira termasuk vitamin, mineral serta pigmen fotosintesis. Catatan:
secara ilmiah, Spirulina platensis (S. platensis) dan Spirulina Maxima (S. Maxima)
dengan benar disebut sebagai Arthrospira platensis (A. platensis) dan Arthrospira
Maxima (A. Maxima).
Kedua spesies tersebut pernah diklasifikasikan dalam genus Spirulina dan sampai
saat ini dikenal secara bahasa sehari-hari dengan nama Spirulina. Meskipun
pengenalan dua genera yang terpisah dari Arthrospira dan Spirulina sekarang secara
umum diterima, istilah Spirulina sering digunakan sebagai istilah payung.

Read more: https://www.hielscher.com/id/ultrasonic-extraction-of-spirulina-

pigments.htm
Ultrasonic Spirulina ekstraksi Ultrasonic sel pengganggu (juga disebut
sebagai extractors ultrasonik) terkenal karena kemampuan mereka
untuk membuka sel dalam rangka untuk melepaskan bahan
intraseluler. Ketika gelombang ultrasound intens digabungkan ke
dalam cairan, fenomena kavitasi akustik terjadi. Gaya cavitational
mengganggu dinding sel dan meningkatkan perpindahan massa
sehingga senyawa target bioaktif diangkut dari sel ke dalam cairan.
Ekstraksi ultrasonik dari sel: bagian melintang mikroskopis (TS)
menunjukkan mekanisme tindakan selama ekstraksi ultrasonik dari sel
(pembesaran 2000x) [Sumber: Vilkhu et al. 2011]

Read more: https://www.hielscher.com/id/ultrasonic-extraction-of-

spirulina-pigments.htm
• Ultrasonic Spirulina Extraction Ultrasonic cell disruptors (also termed
as ultrasonic extractors) are well known for their capability to open
cells in order to release intracellular material. When intense
ultrasound waves are coupled into fluids, the phenomenon of acoustic
cavitation occurs. The cavitational forces disrupt cell walls and
enhances mass transfer so that the bioactive target compounds are
transported from the cell into the liquid.

Read more: https://www.hielscher.com/ultrasonic-extraction-of-

spirulina-pigments.htm
Note: Scientifically, Spirulina platensis (S. platensis) and Spirulina maxima (S.
maxima) are correctly termed as Arthrospira platensis (A. platensis) and
Arthrospira maxima (A. maxima). Both species were once classified in the genus
Spirulina and are until today colloquially known under the spirulina name.
Although the introduction of two separate genera of Arthrospira and Spirulina is
now generally accepted, the term spirulina is often used as umbrella term.
Ultrasonic extractor UP400St Ultrasonic Spirulina Extraction Ultrasonic cell
disruptors (also termed as ultrasonic extractors) are well known for their capability
to open cells in order to release intracellular material. When intense ultrasound
waves are coupled into fluids, the phenomenon of acoustic cavitation occurs. The
cavitational forces disrupt cell walls and enhances mass transfer so that the
bioactive target compounds are transported from the cell into the liquid

Read more: https://www.hielscher.com/ultrasonic-extraction-of-spirulina-

pigments.htm
Reflux is the process of boiling reactants while continually cooling the vapor
returning it back to the flask as a liquid. It is used to heat a mixture for extended
periods and at certain temperatures.. A condenser is attached to the boiling flask,
and cooling water is circulated to condense escaping vapors. One should always
use a boiling stone or a magnetic stirrer to keep the boiling solution from "bumping."
The temperature of a reaction in a refluxing mixture will be approximately the boiling
point of the solvent used for the reaction.
Continuous hot extraction technique
(Soxhlet extraction process)
Rotary vacuum evaporator

• Dimethyl sulfoxide boils at

189 °C at atmospheric
pressure. Under vacuum, it
distills at 70 °C
5- Grinding of the dried plants

6- Garbling of the dried plants

7- Packing, storage and preservation

8- Extraction and fractionation of constituents

There is no general (universal) method for the extraction

of plant materials.

The precise mode of extraction depends on:

1- The texture of the plant material.

2- The water content of the plant material.
3- The type of substances to be extracted or nature of
active constituents.
 Choice of solvent
As a general empirical rule:
 Non polar solvents (petroleum ether and hexane) will dissolve
non-polar compounds (fats and waxes).

While polar solvents (methanol, ethanol and water)

dissolve polar compound (alkaloid salts and sugars).
(that mean like dissolve like)

 The affinity of the solute for the organic phase may be

greatly increased by using mixture of solvents instead
of single ones (sometimes used mixtures of solvent to
increase the solubility).
 Sonicator

Sonication is the process of converting an electrical signal into a physical

vibration that can be directed toward a substance. Sonicators are vital lab
equipment and are used for a number of purposes. Sonication is usually
performed to break apart compounds or cells for further examination. The
vibration has a very powerful effect on solutions, causing their molecules to
break apart and cells to rupture. A prime example is in DNA testing, where
the cells that may contain DNA information are subjected to sonication to
break them apart and release the DNA proteins so they can be tested.
• Should readily dissolve substance to be
extracted.
• Should not react with the substance to be
extracted.
• Should not react with or be miscible with
water (the usual second solvent( .
• Should have a low boiling point so it can be
easily removed from the product.
• Common extraction solvents are diethyl ether
and methylene chloride.
 MEMPUNYAI KEMAMPUAN MELARUTKAN SOLUTE
TTP SEDIKIT ATAU TIDAK SAMA SEKALI
MELARUTKAN DILUENT
 PERBEDAAN TITIK DIDIH CUKUP BESAR DGN
SOLUTE
 TDK BEREAKSI DENGAN SOLUTE MAUPUN DILUEN
 KEMURNIAN TINGGI,TDK BERACUN,TDK
MENINGGALKAN BAU,
 MEMPUNYAI PERBEDAAN DENSITAS YG TINGGI
DENGAN DILUEN
Pelarut
 Pelarut sendiri dapat dibedakan menjadi 2,
pelarut polar dan non polar.
 Pelarut non polar melarutkan zat-zat yang
bersifat non polar, sedang pelarut polar
mampu melarutkan senyawa-senyawa polar
dan senyawa-senyawa ion.
 Maka sebagai pelarut polar, air dapat
melarutkan lebih banyak zat dibanding
pelarut non polar.
 Dapat larut dalam air dan pelarut polar lain
 Memiliki kutub( +) dan kutub (-) , akibat tidak meratanya
distribusi elektron
 Senyawa polar memiliki perbedaan keelektronegatifan
yang besar, perbedaan harga ini mendorong timbulnya
kutub kutub listrik yang permanen ( dipol
permanent )Jadi antar molekul polar terjadi gaya tarik
dipol permanen
 Sbg pelarut polar air yang terbaik karena tidak
meninggalkan residu tetapi air juga mempunyai
kekurangan :
 Mengapa pelarut dan zat terlarut harus sejenis,
non polar dengan non polar misalnya?
 Mengapa zat yang non polar tidak dapat larut
dalam pelarut polar atau sebaliknya?
 Apa dasar pemilihan pelarut untuk ekstraksi
Mengapa senyawa ion dapat larut
dalam air
 Karena molekul air bersifat polar, berarti
memiliki muatan, yaitu kutub positif dan
kutub negatif. Senyawa ion, terdiri atas
kation (ion positif) dan anion (ion negatif).
 Karena air dan senyawa ion keduanya
memiliki muatan, maka mereka dapat saling
tarik menarik hingga keduanya dapat
bercampur homogen. Kutub positif molekul
air menarik ion negatif senyawa ion dan
kutub negatif molekul air menarik ion positif
senyawa ion.
 Ikatan kovalen polar : molekul hidrogen
klorida
 Ikatan kovalen
nonpolar :
molekul hidrogen.
 Pada hidrogen klorida terlihat bahwa pasangan
elektron bersama lebih tertarik ke arah atom
klorin karena elektronegatifitas atom klorin lebih
besar dari pada elektronegatifitas atom hidrogen.
 Akibat hal ini adalah terjadinya polarisasi pada
hidrogen klorida menuju atom klorin. Ikatan jenis
ini disebut ikatan kovalen polar.
PELARUT POLAR

Senyawa polar :
Senyawa yang terbentuk akibat adanya suatu
ikatan antar elektron pada unsur-unsurnya.Hal ini
terjadi karena unsur yang berikatan tersebut
mempunyai nilai keelektronegatifitas yang
berbeda.Contoh : H2O, HCL, HF, HI dan HBr

MAMPU MENGEKSTRAK SENYAWA ALKALOID KUARTENER,

KOMPONEN FENOLIK, KAROTENOID, TANNIN, GULA ASAM
AMINO DAN GLIKOSIDA
 Sehingga keduanya dapat bercampur secara
homogen. Demikian pula jika molekul pelarut
dan terlarut sama-sama polar, keduanya
saling memiliki dipol permanen, maka kutub
positif akan tarik menarik dengan kutub
negatif dan sebaliknya, sehingga keduanya
dapat bercampur homogen
 Hal yang berbeda terlihat pada molekul
hidrogen. Pada molekul hidrogen, pasangan
elektron bersama berada ditempat yang
berjarak sama diantara dua inti atom
hidrogen (simetris). Ikatan yang demikian ini
dikenal sebagai ikatan kovalen nonpolar.
Senyawa non polar
 Senyawa yang terbentuk akibat adanya
suatu ikatan antar elektron pada unsur-
unsur yang membentuknya. Hal ini terjadi
karena unsur yang berikatan mempunyai nilai
elektronegatifitas yangsama/hampir sama
 Contoh : O2, CO2,CH4 dan Cl2
 Sebagai contoh CI2 yang non polar
larut baik dalam CCl4 non polar dan sukar
larut dalam air.
 Contoh lain, minyak yang non polar tidak
larut dalam air.
Jika kedua jenis molekul yang dicampur
sama-sama non polar, maka mereka sama-
sama netral, tidak memiliki dipol.
Sifat ikatan kovalen Non Polar

 Memiliki titik didih yang rendah sehingga

secara fisika mudah berubah bentuk tapi
secara kimia ikatannya tidak putus
 Sebagian besar senyawa ini mudah
menguap
 Senyawa kovalen pada berbagai wujud tidak
dapat menghantar arus listrik. Hal ini
disebabkan senyawa kovalen tidak
mengandung ion-ion sehingga posisi
molekulnya tidak berubah (stabil)
KEBERHASILAN

 JMLPELARUT
 SENYAWA BIOAKTIF YG AKAN
DIEKSTRAK
 Struktur Sel (CHORELLA HARUS
DIHANCURKAN DULU SONIKASI)
Pelarut Non-Polar
Heksana
 CH3-CH2-CH2-CH2-CH2-CH3, 69 °C, 2.0,

0.655 g/ml
 Benzena

 C6H6, 80 °C, 2.3 , (konst dielektrik), 0.879

g/ml (masa jenis)

 Toluena, C6H5-CH3, 111 °C, 2.4, 0.867 g/ml

 Dietil eter, klorofrom dll

 SEMI POLAR : ASETON
(CH3COCH3)

 METANOL : POLAR

Non Polar : O2, CO2,CH4 dan

Cl2
Phytopharmacological screening:

● Antimicrobial activity
Cinnamomum verum ‫القرفة‬ (Eugenol)
Thymus vulgaris ‫الزعتر‬ (Thymol)
Lavendula officinalis ‫الخزامى‬ (Linalool)

● Antineoplastic activity
Catharanthus roseus (Vincrestine, vinblastin)
Taxus brevifolia (Taxol)

● Antimalarial:
Cinchona succirubra (Quinine)
Artemisia annua (Artemisinin)
Phytopharmacological screening:

● Hypoglycemic:
Garlic (Allium sativum) (Allicin)

● Cardiotonic
Digitalis purpurea (Digoxin and Digitoxin)
Strophanthus kombe (K-strophanthoside)

● Antiarrythemic
Cinchona succirubra (Quinidine)
Ekstraksi Padat-Cair (SLE atau Solid Liquid Extraction)
Pelarut organik telah banyak digunakan untuk ekstraksi
senyawa bioaktif menggunakan SLE. Hasil ekstraksi senyawa
antioksidan tergantung pada kelarutannya dalam pelarut atau
campuran pelarut yang diberikan. Selain itu, jenis ekstraktan
memiliki pengaruh yang besar terhadap total senyawa fenol
(TPC) dan kandungan senyawa bioaktif lain, misalnya pigmen,
polisakarida, protein, peptida, serta aktivitas antioksidan .
Etanol adalah pelarut yang lebih efisien untuk ekstraksi
polifenol dari spesies rumput laut yang berbeda, dibandingkan
air, heksana, atau kloroform.
Ekstraksi Padat-Cair (SLE atau Solid Liquid Extraction)

Sistem pelarut yang paling efisien dengan menggunakan

teknik SLE dapat berupa sistem pelarut biner yang mengandung
air dan pelarut organik, yang lebih unggul dari pelarut
monokomponen dalam ekstraksi senyawa fenolik. Ekstraktan
yang direkomendasikan efektif adalah larutan etanol dan aseton
dalam air. Efektivitas etanol mungkin karena fakta bahwa etanol
dapat mengekstrak sebagian besar protein dan meninggalkan
beberapa larutan senyawa fenolik yang terikat secara reversibel .
CAMPURAN BINER Campuran biner adalah campuran yang terdiri atas dua zat
yang dapat bercampur. Misal etanol dan air
 Metode yang paling sering digunakan adalah ekstraksi padat-cair
(SLE atau Solid Liquid Extraction) dengan menggunakan pelarut.
Namun, penggunaan pelarut tradisional untuk ekstraksi senyawa
bioaktif memiliki beberapa kelemahan, seperti kebutuhan pelarut
organik dalam jumlah besar, waktu ekstraksi yang lebih lama, masalah
selektivitas. Oleh karena itu, beberapa dekade terakhir telah dilakukan
optimalisasi SLE tradisional, serta pengembangan beberapa teknik
yang efisien dan lebih ramah lingkungan untuk ekstraksi senyawa
bioaktif dari bahan tanaman, misalnya, ekstraksi fluida superkritis
(SFE atau Supercritical Fluid Extraction) dan ekstraksi cairan
bertekanan (PLE atau Pressurized Liquid Extraction). Metode seperti
SFE dan PLE dianggap sebagai teknik ekstraksi hijau karena dampak
lingkungannya yang rendah karena pengurangan penggunaan pelarut
yang beracun dan berbahaya.
Referensi
Jacobsen, C., Sørensen, A. D. M., Holdt, S. L., Akoh, C. C., dan Hermund, D.
B. (2019). Source, Extraction, Characterization, and Applications of novel
Antioxidants from Seaweed. Annual review of food science and
technology, 10, 541-568.
TERIMAKASIH