Prinsip dasar dari analisis multi komponen dengan spektrofotometri adsorpsi molekuler

yaitu bahwa total absorpsi larutan adalah jumlah absorpsi dari tiap tiap komponennya.
Hal ini tentu saja akan berlaku jika komponen komponen tersebut tidak berinteraksi
dalam bentuk apapun. Secara teori bisa saja terdapat banyak komponen tetapi dalam
praktek, lebarnya puncak absorpsi dalam spektrometri UV sinar tampak memastikan
bahwa tidak ada panjang gelombang yang cukup sesuai untuk penentuan sampel
dengan jumlah komponen yang banyak (Wiryawan, A dkk, 2008).
Wiryawan, A dkk. 2008. Kimia Analitik Untuk SMK. Direktorat Pembinaan Sekolah
Menengah Kejuruan. Jakarta.

Spektrofotometer sesuai dengan namanya adalah alat yang terdiri dari spektrometer
dan fotometer. Spektrometer menghasilkan sinar dari spektrum dengan panjang
gelombang tertentu dan fotometer adalah alat pengukur intensitas cahaya yang
ditransmisikan atau yang diabsorpsi. Jadi spektrofotometer digunakan untuk mengukur
energi secara relatif jika energi tersebut ditransmisikan, direfleksikan atau diemisikan
sebagai fungsi dari panjang gelombang. Pada spektrofotometer, panjang gelombang
yang benar-benar terseleksi dapat diperoleh dengan bantuan alat pengurai cahaya
seperti prisma. Suatu spektrofotometer tersusun dari sumber spektrum tampak yang
kontinyu, monokromator, sel pengabsorpsi untuk larutan sampel atau blangko dan suatu
alat untuk mengukur perbedaan absorpsi antara sampel dan blangko ataupun
pembanding (Khopkar, 1990).
Khopkar, S.M. 1990. Konsep Dasar Kimia Analitik. Jakarta : UI Press.




Spektrofotometri serap adalah pengukuran serapan radiasi elektromagnetik panjang
gelombang tertentu yang smpit, mendekati monokromatik yang diserap zat.
Pengukuran serapan dapat dilakukan pada daerah ultraviolet ( 190 380 nm) atau
pada daerah cahaya tampak ( 380 780 nm). Daya serap atau serapan jenis zat pada
batas-batas kadar tertentu adalah tetap, tidak tergantung dari intensitas radiasi,
panjang jalan sinar dan kadar larutan, sehingga spektrofotometri serap dapat
digunakan untuk penetapan kadar.
Alat spektrofotometer pada dasarnya terdiri atas sumber sinar monokromator,
tempat sel untuk zat yang diperiksa, detector, penguat arus, dan alat ukur atau
pencatat. Spektrofotometer dapat bekerja secara otomatik ataupun tidak, dapat
mempunyai system sinar tunggal atau ganda.
(Anonim, 1979)
Anonim. 1979. Farmakope Indonesia Edisi III. Depkes RI. Jakarta
Bagian molekul yang mengabsorbsi dalam daerah ultraviolet dan daerah sinar tampak
dinyatakan sebagai kromofor. Dalam satu molekul dapat dikandung beberapa
kromofor. Jika kromofor dipisahkan satu sama lain paling sedikit oleh dua atom
karbon jenuh, maka tidak ada kemungkinan adanya konjugasi antara gugus kromofor.
(Hermann dan Gottfried, 1998)
Roth, Hermann. J. dan Blaschke, Gottfried. 1988. Analisi Farmasi.UGM. Yogyakarta.


Aspek Kualitatif
Data spektra UV secara tersendiri tidak dapat digunakan untuk identifikasi
kualitatif obat atau metabolitnya. Akan tetapi digabung dengan cara lain seperti
Spektrostopi Inframerah, resonansi magnet inti, dan spektrostopi massa, dapat
digunakan untuk maksud identifikasi/analisis kualitatif senyawa tersebut.
Aspek Kuantitatif
Dalam aspek kuantitatif, suatu berkas radiasi dikenakan pada cuplikan (larutan
sampel) dan intensitas sinar radiasi yang diteruskan diukur besarnya.
Analisis 2 campuran secara bersama-sama
Bila diinginkan pengukuran 2 buah senyawa secara bersama-sama secara
spektrofotometri, maka dapat dilakukan pada 2 panjang gelombang yang mana
masing-masing komponen tidak saling mengganggu atau gangguan dari komponen
yang lain paling kecil. Dua buah kromofor yang berbeda akan mempunyai kekuatan
absorbsi cahaya yang berbeda pula pada satu daerah panjang gelombang. Pengukuran
dilakukan pada masing-masing larutan pada dua panjang gelombang, sehingga
diperoleh dua persamaan hubungan antara absorbansi dengan konsentrasi pada dua
panjang gelombang, akibatnya konsentrasi masing-masing komponen dapat dihitung.
(Gandjar, 2007)
Gandjar, Ibnu Gholib dan Rohman. 2007. Kimia Farmasi Analisi. Pustaka Pelajar.
Yogyakarta.