JURNAL PRAKTIKUM PEMISAHAN KIMIA

JURNAL PRAKTIKUM
PERCOBAAN VII
PEMISAHAN METILEN BIRU DAN FLUORESCEIN MENGGUNAKAN
KROMATOGRAFI KOLOM
Tanggal Praktikum
Judul Percobaan
Kelompok

: Kamis, 5 Pebruari 2015

: Pemisahan Metilen Biru dan Fluorescein Menggunakan
Kromatografi Kolom
: 6 (Enam)
1. Anis Khoirun Nisa
2. Karlina Saptanti
3. Niken Yustika

1. Tujuan Percobaan
Percobaan ini bertujuan untuk memisahkan metilen biru dan fluorescein dengan cara
kromatografi kolom menggunakan eluen yang berbeda
2. Prinsip Percobaan
Kromatografi menyangkut metode pemisahan yang didasarkan atas distribusi diferensial
komponen sampel di antara dua fasa. Dalam kromatografi kolom, fasa diam berupa
adsorben, sedangkan fasa gerak bias berupa cairan. Pemisahan dengan menggunakan
kromatografi kolom terjadi berdasarkan migrasi komponen-komponen dalam sampel.
Komponen yang terpisah akan Nampak sebagai pita-pita dalam fasa diam, yang
selanjutnya masing-masing pita komponen dapat didorong keluar kolom dengan
pengaliran fasa gerak (eluen) secara terus-menerus. Selama pengaliran eluen, terjadi
kesetimbangan dinamis antara komponen yang berinteraksi dengan fasa diam dengan
yang terlarut dalam fasa gerak. Kecepatan migrasi yang berbeda menyebabkan distribusi
di fasa diam dan fasa gerak juga berbeda. Hal tersebut yang menyebabkan komponen
dalam sampel dapat dipisahkan.

3. Alat dan Bahan

Alat
a.
b.
c.
d.

Statif dan klem

Botol film
Plat tetes
Kolom Kromatografi

e.
f.
g.
h.

Pipet tetes
Gelas ukur
Botol semprot
Kapas

Bahan
a. Sampel campuran metilen biru dan fluorescein
b. Akuades
c. Etanol
1

Anis Khoirun Nisa Offering A/PKIM 2012

JURNAL PRAKTIKUM PEMISAHAN KIMIA

d. Alumina
4. Cara Kerja dan Pengamatan
Langkah Kerja

Hasil Pengamatan

Alumina
Kapas dimasukkan dalam pipet Pasteur
Ditambah akuades
Dibuat menjadi bubur
Ditimbang 1 gram, dimasukkan dalam gelas kimia
Ditambah akuades
Bubur
Alumina kolom kromatografi dari pipet Pasteur
Disiapkan
Dimasukkan kapas pada ujung bawah kolom
Dimasukkan dalam kolom hingga 4 cm, sambil
dialiri akuades

Kolom Kromatografi
Dimasukkan 1 ml sampel campuran metilen biru

dan fluorescein
Ditambahkan eluen etanol
Diamati warna eluat
Dicatat waktu yang dibutuhkan oleh tiap fraksi
Eluat ditampung pada botol film 2 ml tiap
tampungan (warna yang keluar terlebih dahulu

metilen biru/ fluoresence)

Diperkirakan konsentrasi relative
Hasil

Anis Khoirun Nisa Offering A/PKIM 2012

Warna dalam kolom :

Warna eluat :
Waktu :