Produk pertanian diabaikan (NAP) didefinisikan sebagai bahan dibuang di

produksi pertanian. Tongkol jagung adalah buang-buang utama jagung

pertanian. Di sini, ekstrak metanol dari tongkol jagung (MEC) diperoleh.
MEC mengandung fenolik senyawa, protein, karbohidrat (1,4: 0,001:
0,001). Kami mengevaluasi in vitro dan in vivo potensi antioksidan dari
MEC. Selanjutnya, yang properti antiproliferatif terhadap tumor Sel dinilai
melalui tes MTT dan protein yang berhubungan dengan apoptosis pada sel
tumor diperiksa oleh blot Barat. MEC tidak menunjukkan kapasitas
scavenger radikal hidroksil,tapi itu menunjukkan aktivitas antioksidan
dalam Jumlah Kapasitas Antioksidan dan DPPH pemulung kemampuan tes.
MEC menunjukkan Mengurangi Daya tinggi dari asam askorbat dan
dipamerkan Kegiatan Scavenging superoksida yang tinggi. Dalam kultur
sel tumor, MEC meningkat katalase.
metallothionein dan ekspresi superoksida dismutase sesuai dengan
antioksidan tes. Dalam uji antioksidan vivo, MEC dipulihkan SOD dan CAT,
penurunan malondialdehid kegiatan dan menunjukkan tinggi Trolox
Kapasitas Antioksidan Setara pada hewan diperlakukan dengan CCl4.
Selanjutnya, MEC menurun sel HeLa kelayakan oleh apoptosis karena
peningkatan Bax / Bcl-2 rasio, caspase 3 aktif. Ekspresi protein kinase C
meningkat juga terdeteksi pada sel tumor diobati. Dengan demikian,
temuan kami menunjukkan potensi bioteknologi jagung tongkol sebagai
sumber molekul dengan aktivitas farmakologi.
1. Perkenalan
Spesies reaktif adalah molekul atau atom yang memiliki ketidakstabilan
elektronik dan untuk alasan ini harus karakteristik yang sangat reaktif [1].
Akibatnya, spesies reaktif dapat mempromosikan oksidasi biomolekul
ekstraseluler dan intraseluler memproduksi beberapa kerusakan hidup
organisme [2]. Untuk melindungi biomolekul mereka dari kerusakan yang
disebabkan oleh spesies reaktif, hidup organisme telah mengembangkan
sistem antioksidan, yang bertindak dengan mencegah atau bertindak
langsung menghalangi pembentukan spesies reaktif dan mencegah
kerusakan yang disebabkan oleh molekul-molekul tidak stabil / atom [3].
Sel manusia telah menggunakan sistem antioksidan enzimatik
mengandung enzim superoxide seperti dismutase (SOD), katalase (CT)
dan sistem yang mengandung molekul kecil (non-proteic), seperti askorbat
asam, tokoferol, dan glutathione [4]. Sistem ini sangat penting untuk
status redoks homeostasis dan untuk melindungi sel-sel manusia. Bahkan,
ketika homeostasis ini terganggu dan ada lebih reaktif spesies dari
antioksidan beberapa penyakit dapat berkembang. Sebenarnya, beberapa
laporan menunjukkan dekat hubungan antara spesies reaktif dan penyakit
degeneratif manusia seperti penuaan, arthritis, neoplasma ganas dan
penyakit kardiovaskular [5]. Selain itu, organisme manusia juga telah
menggunakan antioksidan eksogen terutama diperoleh dari makanan
untuk melindungi sel-sel mereka. Dengan demikian, dalam rangka untuk
menghambat atau mengurangi efek dari spesies reaktif dianjurkan

antioksidan intake dan menambah antioksidan dalam produk makanan.

Karena itu, senyawa sintetik, seperti butylated hydroxyanisole (BHA),
butylated hydroxytoluene (BHT), ters-butil-hydroquinone(TBHQ) dan propil
gallate (propil 3,4,5- trihydroxybenzoate, PG) yang banyak digunakan
sebagai antioksidan dalam industri makanan [6]. Namun, senyawa ini
telah dianggap sebagai beracun [7]. Menunjukkan Karena mungkin
masalah yang terkait dengan penggunaan antioksidan sintetik, identifikasi
antioksidan baru telah sangat menarik. Dalam beberapa dekade terakhir,
beberapa studi telah melaporkan bahwa ekstrak dari berbagai sumber
daya alam, terutama tanaman, dimiliki aktivitas antioksidan [8,9]. Selain
itu, banyak molekul dimurnikan dari sumber-sumber ini telah dilaporkan
sebagai senyawa antioksidan potensial [10]. Selain itu, beberapa
penelitian telah menunjukkan hubungan antara antioksidan dan
antiproliferatif kegiatan senyawa dari sumber tanaman [11,12]. Fitokimia
telah ditunjukkan untuk menghambat proliferasi sel tumor yang berbeda,
seperti sel-sel kanker usus besar HT29, sel-sel kanker payudara MCF-7
[13] dan sel-sel kanker hati manusia HepG2 [14,15]. Tindakan antitumor
antioksidan tampaknya menunjukkan mekanisme yang berbeda dan reaksi
spesifik setiap sel, tapi ini umumnya akan mengurangi jumlah radikal
bebas yang dapat memulai pengembangan tumor [16].
Banyak penelitian telah melaporkan kegiatan antioksidan dan
antiproliferatif ekstrak dari tanaman sumber. Namun, beberapa studi telah
mengevaluasi senyawa dari produk pertanian diabaikan (NAP). Termasuk
dalam NAP merupakan sumber seperti kulit buah (exocarp), endocarp,
kulit, kayu, daun yang biasanya tidak dikonsumsi oleh manusia,
exoskeletons krustasea, dll Dalam konteks ini, pertanian jagung
menghasilkan berbagai NAP dan tongkol jagung dapat digambarkan
sebagai salah satu yang utama. Jagung produksi 2010/2011 adalah sekitar
810 juta ton dan perkiraan produksi tongkol jagung yang kira-kira jumlah
yang sama. Namun, hanya sejumlah kecil tongkol jagung yang dihasilkan
mempunyai aplikasi iotechnological. Misalnya, tongkol jagung telah
dieksplorasi untuk mengembangkan selulosa baru serat dengan sifat mirip
dengan serat tekstil umum [17]. Selain itu, tongkol jagung adalah
menjanjikan substrat fermentasi biofuel karena biaya rendah dan selulosa
dan hemiselulosa tinggi konten [18]. Ada insentif besar untuk lebih
mengeksploitasi jagung dan NAP dalam rangka untuk memberikan lebih
karakterisasi lengkap manfaatnya. Dalam konteks ini, polisakarida dari
tongkol jagung telah belajar, mereka menunjukkan imunogenik [19],
mitogenik [20], antioksidan dan antiproliferatif kegiatan [21]. Selain itu,
potensi farmakologi dari molekul lain dari tongkol jagung seperti senyawa
fenolik belum dievaluasi sejauh ini. Dengan demikian, tujuan dari
penelitian ini adalah untuk mendapatkan sebuah metanol polisakarida
ekstrak bebas dari tongkol jagung, dan menilai aktivitas antioksidan
menggunakan in vitro dan dalam tes vivo, serta, efeknya pada sel
adenocarcinoma manusia (sel HeLa) viabilitas.
2. Hasil dan Pembahasan

2.1. MEC up-Mengatur Kegiatan Antioksidan di Vitro

Pelarut polar seperti etanol, etil asetat dan aseton, dll secara luas
digunakan untuk ekstraksi komponen antioksidan dari bahan tanaman.
Namun, ekstraksi dengan metanol sering menyebabkan pemulihan yang
lebih tinggi dari jumlah senyawa diekstrak [22]. Dengan demikian, kita
memilih untuk bekerja dengan metanol ekstrak. Karena karakteristik
fisiko-kimia dari kelarutan tinggi senyawa fenolik di pelarut organik,
molekul-molekul ini mungkin terlibat dalam antioksidan yang ditemukan
dalam ekstrak metanol. Dalam ekstrak metanol diperoleh dalam pekerjaan
kami, fenolik, protein dan karbohidrat total konten adalah 1,4: 0,001:
0,001 masing-masing, yang menunjukkan bahwa aktivitas biologis yang
diamati mungkin terkait untuk senyawa fenolik karena proporsi dalam
dibandingkan dengan protein dan karbohidrat. Jumlah tinggi senyawa
fenolik dalam ekstrak metanol sangat umum, bahkan pada mereka yang
diperoleh dari NAP seperti kayu dan pericarp dari Caesalpinia decapetala
[23]. Senyawa fenolik dianggap antioksidan penting, sehingga dalam
pekerjaan kami, kami memutuskan untuk mengevaluasi potensi
antioksidan dari ekstrak metanol dari tongkol jagung (MEC), dan untuk
tujuan ini berbeda tes antioksidan digunakan. Antioksidan adalah senyawa
yang dapat mencegah biologi dan kimia zat dari kerusakan oksidasi
radikal-diinduksi. Karena oksidasi radikal substrat terjadi melalui reaksi
berantai yang melibatkan tiga tahap (yaitu, inisiasi, propagasi dan
terminasi), antioksidan menunjukkan efek mereka melalui berbagai
mekanisme. Jadi, kami menggunakan metode yang berbeda untuk
mengevaluasi pengaruh ekstrak tongkol jagung inisiasi (kapasitas
antioksidan total, uji DPPH, dan kekuasaan mengurangi), propagasi
(chelating besi) dan terminasi (superoksida dan radikal hidroksil kegiatan
pemulungan) tahap Awalnya, MEC dievaluasi dalam tes yang dikenal
sebagai Kapasitas Antioksidan Total (TAC) [24]. Ekstrak metanol
menunjukkan relatif TAC ke 98,03 mg AAE (asam askorbat setara) / g
sampel. Bahan diekstraksi dengan pelarut cukup efisien dalam
mengurangi molibdenum di assay, menunjukkan potensi antioksidan
tinggi sampel. Nilai-nilai TAC diperoleh dengan MEC adalah mirip dengan
ekstrak alami lainnya [21,25], bahkan jika dibandingkan dengan penelitian
lain yang dilakukan uji TAC dengan ekstrak metanol [26]. MEC juga
menunjukkan DPPH aktivitas radikal tinggi; aktivitas maksimum dicapai
menggunakan sekitar 10 ug / mL sampel, yang mencapai nilai 50% dari
DPPH scavenging (Gambar 1). Hasil pemulungan DPPH dari MEC adalah
serupa dengan -tokoferol-antioksidan didirikan Senyawa-dan hanya
dalam konsentrasi tinggi melakukan vitamin ini melampaui aktivitas MEC
(Gambar 1). Li dkk. [27] diperoleh ekstrak buah hawthorn menggunakan
pelarut organik yang berbeda dan dievaluasi mereka kapasitas
antioksidan. Dibandingkan dengan semua kondisi ekstraksi pekerjaan
yang dikutip di atas, metanol kami ekstrak dari tongkol jagung mencapai
nilai 10 kali lebih tinggi dari memulung dari DPPH. Gambar 1. Dalam vitro
aktivitas DPPH scavenging dari MEC. Kegiatan metanol Extract adalah

diwakili oleh garis kontinyu. Garis putus-putus menyatakan aktivitas

antioksidan dikenal a-tokoferol. MEC dan kontrol positif digunakan pada
konsentrasi yang sama (0; 0,5; 1,0; 2,5; 5.0; 10; 15 ug / mL). Huruf a, b, c,
d, e Tunjukkan signifikan perbedaan antara yang berbeda konsentrasi
sampel yang sama. x, y Mewakili signifikan perbedaan antara yang
berbeda sampel pada konsentrasi yang sama. Tes siswa-Newman-Keuls (p
<0,05).
Dalam studi lain, ekstrak metanol dari tongkol jagung menunjukkan
aktivitas sekitar 16% dari radikal pemulungan di uji DPPH yang sama [28].
Perbedaan dalam hasil bila dibandingkan dengan data kami bisa dikaitkan
dengan sifat sumber. Ketika jagung tunduk pada periode yang berbeda
dari radiasi matahari, kelembaban, suhu dan curah hujan sepanjang
tahun, ini dapat menyebabkan untuk sintesis yang berbeda proporsi
molekul yang akan mempengaruhi dalam kegiatan ekstrak. The norma
antioksidan ekstrak kulit gandum dievaluasi dalam studi lain dan gratis
sifat radikal terhadap DPPH lebih rendah daripada yang ditemukan untuk
MEC [29]. Kapasitas untuk mengais DPPH radikal juga diukur dengan
ekstrak metanol dari dedak gandum, lain NAP [30]. Dalam karya ini,
ekstrak bekatul dari varietas gandum lima adat untuk Pakistan dievaluasi,
dan tidak ada sampel menunjukkan nilai-nilai pembilasan DPPH lebih
tinggi dari MEC. Molekul 2014, 19 5364 Selain tes dijelaskan, hasil yang
menjanjikan diperoleh di uji daya mengurangi. Singkatnya, metode ini
menilai kapasitas sampel untuk menyumbangkan elektron di hadapan besi
klorida dalam kondisi asam dan dengan demikian mengurangi Fe + 3
untuk Fe + 2. MEC menunjukkan nilai absorbansi lebih tinggi dari asam
askorbat ketika kita menggunakan massa yang sama untuk melakukan tes
(Gambar 2). Hasil diperoleh dengan MEC lebih tinggi dari yang diperoleh
dengan ekstrak metanol lainnya, seperti yang diperoleh dengan ekstrak
Armillaria mellea yang diperlukan konsentrasi lima kali lebih tinggi dari
MEC untuk menyajikan kegiatan yang sama [31]. Hal ini menunjukkan
bahwa MEC memiliki kapasitas elektron-donatur besar untuk besi atom
dalam lingkungan sedikit asam, dan kemudian ekstrak dapat bertindak
sebagai antioksidan dalam kondisi ini.
Gambar 2. Dalam vitro mengurangi efek kekuatan MEC. Tes
mengungkapkan kemampuan sampel untuk mengurangi ion besi Fe3 +
menjadi Fe2 +. Aktivitas ekstrak metanol telah diwakili untuk garis
kontinyu. Garis putus-putus menyatakan kegiatan untuk yang sudah
dikenal antioksidan (askorbat AC id). MEC dan asam askorbat yang
digunakan dalam konsentrasi tindak 0; 20; 40; 80; 120; 160; 300 ug / mL.
a, b, c, d, e Tunjukkan signifikan perbedaan antara konsentrasi yang
berbeda dari sampel yang sama. x, y Mewakili signifikan perbedaan antara
sampel yang berbeda di konsentrasi yang sama. Tes siswa-Newman-Keuls
(p <0,05) Absorbance pada 700 nm. Kami menggunakan dua metode
yang mengevaluasi kemampuan / kapasitas sampel untuk
menyumbangkan elektron karena kita mencoba mensimulasikan situasi
yang mungkin ditemukan dalam organisme hidup. Karena lingkungan

kimia setiap metode berbeda, molekul dapat menunjukkan aktivitas yang

baik dalam satu metode tetapi tidak yang lain. Menurut hasil TAC dan
kekuasaan mengurangi, MEC memiliki kemampuan proton-sumbangan dan
bisa berfungsi inhibitor radikal bebas dan bertindak dalam tahap inisiasi
oksidasi senyawa seluler, mencegah molekul tertentu yang harus
terdegradasi dalam kondisi lingkungan yang berbeda yang ditemukan di
sel seperti sebagai lisosom dan mitokondria .
MEC menunjukkan tidak ada aktivitas di bawah salah satu kondisi yang
digunakan untuk uji kapasitas pengkelat besi dan hidroksil pemulungan uji
aktivitas. Kemampuan chelating senyawa didefinisikan sebagai
pembentukan ikatan antara dua atau lebih situs mengikat terpisah dalam
molekul yang sama dan satu atom pusat. Karakteristik ini biasanya
dikaitkan dengan senyawa organik, seperti polisakarida, yang mengikat
atom logam membentuk kelat [32]. Menganalisis demikian, indikasi yang
kuat membuat kita percaya Molekul 2014, 19 5365 bahwa tidak adanya
aktivitas MEC di besi kapasitas chelating assay adalah karena jumlah
rendah polisakarida dalam ekstrak. Beberapa radikal bebas terbentuk
dalam mitokondria sebagai akibat dari sistem transpor elektron dilakukan
dalam organel ini [23]. Kelebihan elektron dapat bergerak keluar dari
sistem mitokondria ini dan bereaksi dengan molekul oksigen untuk
membuat banyak spesies oksigen reaktif (ROS). Molekul oksigen dengan
elektron tambahan, disebut anion superoksida, sangat reaktif dan dapat
mempromosikan oksidatif degradasi lipid dan protein penting yang
meningkatkan kemungkinan penyakit degeneratif, seperti penyakit
Alzheimer [33]. Data yang disajikan dalam makalah ini menunjukkan
bahwa MEC memiliki substansial Kegiatan anion superoksida pemulungan,
dengan nilai aktivitas sekitar 97,4% 3,7% yang diperoleh dengan jumlah
yang rendah (40 mg / mL), suatu kegiatan yang tetap konstan dengan
jumlah yang lebih tinggi dari MEC (Gambar 3). Ekstrak metanol lainnya
menunjukkan aktivitas anion superoksida pemulungan tinggi, seperti
ekstrak dari buah-buahan dan bunga dari Hypericum lydium Boiss (sekitar
100% dari aktivitas scavenging anion superoksida). Namun, jumlah
ekstrak yang digunakan untuk memperoleh kegiatan ini jauh lebih tinggi
(10 mg / mL) [34] ketika dibandingkan dengan MEC yang digunakan.
Dalam karya lain menggunakan NAP, spesies oksigen reaktif radikal bebas
dan kegiatan pemulungan kulit kacang tanah (exocarp) ekstrak diukur;
yang pemulungan maksimum Kegiatan dicapai hanya ketika 500 ug / mL
sampel yang digunakan, nilai kegiatan yang 10 kali lipat lebih rendah
dibandingkan MEC [35]. Hasil kami mendukung kapasitas anion
superoksida pemulungan kuat MEC. Secara keseluruhan, data diperoleh
dengan menggunakan antioksidan MEC menunjukkan potensi antioksidan
menjanjikan jagung tongkol. Selain itu, dapat meningkatkan pemanfaatan
tongkol jagung dan mengurangi pencemaran lingkungan.
Gambar 3. Dalam radikal superoksida vitro aktivitas MEC pemulungan.
Ekstrak metanol mencapai aktivitas maksimum dengan 40 ug / mL
sampel. Konsentrasi sampel yang digunakan adalah 0;2,5; 5.0; 10; 20; 40;

50 ug / mL. Huruf a, b, c, d, e Tunjukkan signifikan perbedaan antara

konsentrasi yang berbeda dari sampel yang sama. Tes siswa-NewmanKeuls (p <0,05).
2.2. Pengaruh MEC di Sel Antioksidan Enzim Di antara berbagai penyebab
mutasi pada bahan genetik, kerusakan DNA yang disebabkan oleh
peningkatan stres oksidatif muncul sebagai acara penting untuk
meningkatkan jumlah perubahan signifikan dalam ini penting molekul.
Sejumlah besar mutasi dapat memperburuk tingkat keparahan sel tumor,
dapat mengubah perilaku dari sel-sel ini memungkinkan mereka untuk
menyerang jaringan di dekatnya atau menyebar ke organ jauh dari lokasi
asal. Sel tumor sering memiliki sistem antioksidan melemah dan berulang
kali kegagalan sistem terjadi karena Molekul 2014, 19 5366 mutasi pada
gen penting yang terlibat dalam perbaikan molekul yang rusak selain
kekurangan enzim dan senyawa untuk memerangi stres oksidatif [36,37].
Karena kita telah menunjukkan bahwa MEC menampilkan aktivitas
antioksidan, ini mendorong kami untuk menyelidiki jika garis sel kanker
manusia (sel HeLa) diobati dengan MEC akan menampilkan setiap
perubahan status redoks. Untuk melakukan hal ini, ekspresi katalase
(CAT), superoksida dismutase (SOD) dan metallothionein (MT) di HeLa sel
diperiksa. Sistem enzim antioksidan menyajikan dirinya sebagai pejuang
efektif spesies oksigen reaktif. Katalase adalah enzim penting yang
mengkatalisis dekomposisi hidrogen peroksida untuk air dan oksigen [38],
sementara MT mengikat atom logam dan menurunkan produksi radikal
hidroksil [39] dan SOD mengkatalisis dismutasi superoksida menjadi
oksigen dan hidrogen peroksida [40]. Pengobatan sel HeLa dengan MEC
mengakibatkan perubahan jumlah protein antioksidan diproduksi (Gambar
4). CAT dan MT ekspresi lebih tinggi pada sel diperlakukan yang
menunjukkan bahwa MEC diberikannya tindakan antioksidan dalam sel-sel
dengan meningkatkan produksi intraseluler enzim antioksidan utama.