c-DNA

c-DNA (Complementary
(Complementary
DNA)
DNA)

Sintesis
c-DNA
Sintesis c-DNA
c-DNA
c-DNA (complementary
(complementary
DNA),
DNA), merupakan
merupakan DNA
DNA
berkas
berkas tunggal
tunggal (single(singlestranded)
stranded) sintetik/buatan
sintetik/buatan
yang
disalin
dari
yang
disalin
dari
berkas
RNA
dan
berkas
RNA
dan
memanfaatkan
enzim
memanfaatkan
enzim
reverse
reverse transcriptase.
transcriptase.

Penggunaan
Penggunaan cDNA
cDNA sangat
sangat
luas,
luas, terutama
terutama dalam
dalam analisis
analisis
ekspresi
genetik
dan
ekspresi
genetik
dan
transkriptomika.
transkriptomika. RNA
RNA berkas
berkas
tunggal
tunggal atau
atau transkriptom
transkriptom
bersifat
bersifat tidak
tidak stabil
stabil karena
karena
mudah
mudah dicerna
dicerna dan
dan dilebur
dilebur
dalam
dalam sel.
sel. Pengubahan
Pengubahan RNA
RNA
berkas
berkas tunggal
tunggal menjadi
menjadi cDNA
cDNA
membuatnya
membuatnya lebih
lebih mudah
mudah
dianalisis
dianalisis karena
karena DNA
DNA lebih
lebih
stabil
stabil (tidak
(tidak mudah
mudah dilebur).
dilebur).

Pembentukan
Pembentukan DNA
DNA menggunakan
menggunakan proses
proses
replikasi
replikasi DNA.
DNA. Semua
Semua tahu
tahu bahwa
bahwa RNA-kurir
RNA-kurir atau
atau
mRNA
mRNA memiliki
memiliki tugas
tugas utama
utama menjadi
menjadi "pembawa
"pembawa
pesan"
pesan" kode
kode dari
dari DNA
DNA kepada
kepada rRNA
rRNA untuk
untuk
"dibaca"
dan
selanjutnya
diterjemahkan
"dibaca"
dan
selanjutnya
diterjemahkan
(translasi)
(translasi) menjadi
menjadi urutan
urutan protein.
protein. Bentuknya
Bentuknya
berupa
berupa rantai
rantai basa
basa tunggal
tunggal lurus
lurus dengan
dengan
kerangka
kerangka fosfat
fosfat dan
dan gula
gula ribosa.
ribosa.
Untuk
Untuk membentuk
membentuk DNA
DNA dari
dari mRNA
mRNA tersebut
tersebut
adalah
dilakukannya
transkripsi
balik
adalah
dilakukannya
transkripsi
balik
menggunakan
menggunakan enzim
enzim revers
revers transkriptase.
transkriptase.

Mula-mula mRNA ditambahkan yang namanya

Primer

yang

berfungsi

sebagai

awal

penerjemahan. Kemudian dari Primer tersebut

ditambahkan

enzim

revers

transkriptase

tadi

sehingga terjadi penerjemahan dari mRNA menjadi

cDNA single strande. Untuk menjadi double strand,
maka mRNA+cDNA yang masih berikatan harus
dihilangkan

dulu

mRNA

nya

dengan

menjadi

cDNA

cara

denaturasi.
Setelah

benar-benar

single

strand, maka cDNA tersebut membentuk Harpin

loop.

Kemudian

ditambahkan

enzim

DNA

polimerase yang mampu membuat DNA single