VI.

ANALISA DATA
Kromatografi adalah suatu teknik pemisahan molekul beerdasarkan perbedaaan pola

pergerakan antara fase gerak dan fase diam untuk memisahkan komponen (molekul) yang
berada pada larutan.molekul yang terlarut dalam fase gerak akan melewati kolom yang
merupakan fase diam. Molekul yang memiliki ikatan yang kuat dengan kolom akan
cenderung bergerak ialah lambat di banding molekul yang berikatan lemah.
Setelah komponen telusuri dari kolom,komponen tersebut dengan analisis dengan
menggunakan detector atau dapat dikumpulkan untuk analisa lebih lanjut. Senyawa-senyawa
dipisahkan berdasarkan karakter hidropobiknya. Pelarut harus dihawagaskan,prinsif kerja
kerja HPLC adalah dengan bantuan pompa fase gerak cair yang dialirkan melalui kolom ke
detector.
Sampel yang di gunakan pada percobaan ialah kafein. Sampel dimasukan kedalam
aliran fase gerak dengan cara penyuntikan,cafein yang dikunakan sebesar 15 ppm dengan
proses injeksi dengan injeksi dengan micros syringe sebanyak 20 mikro liter dan sebelum
proses injeksi mengatur panjang cahaya uv sebesar 272 nm. Di dalam kolom terjadi
pemisahaan komponenkomponen campuran,karena perbedaaan kekuatan interaksi antara
solute-solute terhadap fase diam. Solute-solut yang kurang kuat interaksinya dengan fase
diam akan keluar dari kolom lebih dulu. Sebaliknya,solute-solut yang kuat berinteraksi
dengan fase diam akan keluar dari kolom lebih dahulu,dan di rekam dalam bentuk
kromotogram gas dengan computer dapat digunakan untuk mengontrol kerja system HPLC
dan mengumpulkan serta pengelolah data hasil pengukuran HPlC
Cara kerja kerja,mula-mula solve diamil memalui pompa,solven ini dikemudian
masuk kedalam katup injeksi berputar,yang dipasang tepat pada sample loop dengan
pertolongan mikrosiring,sample dimasukan kedalam kolom . hasil pemisahan dideteksi oleeh
detector yang penampakannya di tunjukan oleh recoder.
Tekanan solve diatur dengan pengatur dan pengukur tekanan. Pompa pemasuk solve
pada tekanan kostan hingga tekanan kurang lebih 4500 psi dengan laju alir rendah,yakni
beberapa militer/mnt.Recodermenghasilkan kromatografi zat-zat yang dipisakan dari suatu
sampel.

Kelebihan HPLC (KCKT) di antaranya ialah ;

Percobaan dapat dilaksanakan dalam suhu kamar

Cepat dan mudah melaksanakannya
Peka,detector HPLC dapat divariasi dan unik
Bias dipakai berulang kali
Ideal untuk molekul besar dan ion
Mudah memperoleh cuplikan
Daya pisahnya baik
Dapat dihindari terjadi dekomposisi
HPLC juga dapat menganalisa senyawa yang tidak mudah menguap dan termolabil.

Kelemahan dari alat HPLC antara lain:

Harga sebuah alat HPLC cukup mahal.

Sering ada larutan standar yang tertinggal diinjektor.
Pada kolom dengan diameter rata-rata partikel fase diam dengan ukuran 5 dan 3
mikrometer sela-sela partikel lebih mudah tertutup oleh kotoran, jadi harus seringkali
dicuci dan kemurnian larutan harus dijaga.

VII. KESIMPULAN

 HPLC adalah alat untuk menganalisa suatu zat atau senyawa yang kompleks,
bertekakanan tinggi ( sampai 400 atm ) serta berak mokel yang besar ( > 2.000Dalton)

baik secara kualitatif ataupun kuantitatif dengan menggunakan fase gerak dan diam
Kromatogram Ret. time yang didapat pada 4 ( empat ) kali perobaan sebesar 3.95
Prinsip kerja HPLC adalah pemisahan analit-analit berdasarkan kepolaran
Menggunakan kolom C 18
Rentan Sinar UV ( UltraViolet ) adalah 100 400 nm
Rentan Sinar Vis ( Sinar Tampak ) adalah 400 800 nm
Menggunakan fase diam pada Aclaim 120 ialah campuran silika gel dengan
hidrokarbon non polar seperti fenil, oktadesilena dan oktasilana menjadi ODS
( oktadesilsitan ) C18.

VIII.

PERTANYAAN
1. Fase diam yang digunakaan Aclaim 120

Jawab :
Aclaim 120 menggunakan fase diam ODS ( oktadesilsitan )
C18, yang merupakan campuran silika gel dengan hidrokarbon non polar
seperti fenil, oktadesilena dan oktasilana . C 18 merupakan fase diam
digunakan karena intuk memisahkan senyawa-senyawa dengan kepolarn
kecil,sedang bahkan tinggi
2. Rentang daerah kerja Ultravilet ( UV ) dan Sinar Tampak ( Vis )
Jawab :
Untuk Ultravile UV derah kerjanya ialah dari 100 nm 400 nm ,
sedangkan Sinar Tampak ( VIS ) dari 400 nm 800 nm.

Daftar Pustaka
Jobsheet.Kimia
Palembang;2015

Analitik

Instrumen.Politeknik

Negeri

Sriwijaya.

http:// sumar handrayana/2016/kimia analitik II/Malang:JICA FMIPA UNM

GAMBAR ALAT

Proses Kerja Alat HPLC ( High Performance Liquid Chromatografy )

Kolom C8