I

ALAT DAN BAHAN

A. Alat
1. Tabung reaksi
2. Rak tabung
3. Plate
4. Inkubator
5. Stopwatch
6. Labu semprot
B. Bahan
NaCl 0,9%
C. Reagen
1. Coombs serum
2. Bovine albumin 22%
3. Anti-A
4. Anti-B
5. Anti-D
6. Coombs control serum
7. Test sel standar A
8. Test sel B standar
9. Test sel O standar

II CARA KERJA
Metode Blood Grouping ( 10%)
a. Anti A
1. Disiapkan plate dan diisi label I, II, III
2. Masing masing sumur uji diisi :
Tabung I
: 1 tetes sel A 10%
Tabung II
: 1 tetes sel B 10%
Tabung III
: 1 tetes sel O 10%
3. Masing masing sumur ditambahkan 2 tetes anti A (pada sumur I,II,III)
4. Digoyang goyangkan plate hingga tercampur dan terbentuk aglutinasi
5. Dibaca reaksi
Pembacaan hasil :
Pada sumur 1 terjadi aglutinasi
(positif)
Pada sumur 2 tidak terjadi aglutinasi
(negatif)
Pada sumur 3 tidak terjadi aglutinasi
(negatif)
b. Anti B
1. Disiapkan plate dan diisi label I, II, III
2. Masing masing sumur uji diisi :
Tabung I
: 1 tetes sel A 10%
Tabung II
: 1 tetes sel B 10%
Tabung III
: 1 tetes sel O 10%
3. Masing masing sumur ditambahkan 2 tetes anti B (pada sumur I,II,III)
4. Digoyang goyangkan plate hingga tercampur dan terbentuk aglutinasi

5. Dibaca reaksi
Pembacaan hasil :
Pada sumur 1 tidak terjadi aglutinasi
(negatif)
Pada sumur 2 terjadi aglutinasi
(positif)
Pada sumur 3 tidak terjadi aglutinasi
(negatif)
c. Anti D
1. Disiapkan plate dan diisi label I, II, III
2. Masing masing sumur uji diisi :
Tabung I
: 1 tetes sel A 10% rhesus positif
Tabung II
: 1 tetes sel B 10% rhesus negatif
6. Masing masing sumur ditambahkan 2 tetes anti D(pada sumur I,II,III)
7. Digoyang goyangkan plate hingga tercampur dan terbentuk aglutinasi
8. Dibaca reaksi
Pembacaan hasil :
Pada sumur 1 aglutinasi
(positif)
Pada sumur 2 tidak terjadi aglutinasi
(positif)
Metode Tube Test ( 5%)
a. Anti A
Tabung I :
2 tetes anti A + 1 tetes

Tabung II :
2 tetes anti A + 1 tetes

Tabung III :
2 tetes anti A + 1 tetes

sel A 5% (positif)

sel B 5% (negatif)
sel O 5% (negatif)
Homogenkan
Centrifuge dengan kecepatan 3000 rpm selama 1 menit

b. Anti B
Tabung I :
2 tetes anti B + 1 tetes

Tabung II :
2 tetes anti B + 1 tetes

Tabung III :
2 tetes anti B + 1 tetes

sel A 5% (negatif)

sel B 5% (positif)
sel O 5% (negatif)
Homogenkan
Centrifuge dengan kecepatan 3000 rpm selama 1 menit

c. Anti D
Tabung I :
2 tetes anti D + 1 tetes

Tabung II :
2 tetes bovine albumin + 1

sel A 5% rhesus positif

tetes sel A 5% rhesus

positif
Homogenkan
Centrifuge dengan kecepatan 3000 rpm selama 1 menit
Bovine Albumin 22%
Validasi Bovine

1 tetes suspense sel

1 tetes suspense sel

1 tetes suspense sel

Albumin 22 %

A 5% + 2 tetes BA

B 5% + 2 tetes BA
22%

O 5% + 2 tetes BA
22%

22%
Dikocok agar homogen, kemudian diinkubasi pada suhu 37oC
Hasil Pemeriksaan
Validasi Anti
Human Globulin

selama 15 menit. Diputar 3000 rpm selama 15 menit baca reaksi

Tidak terjadi
Tidak terjadi
Tidak terjadi
aglutinasi
aglutinasi
aglutinasi
Dicuci 3x dengan saline, kemudian reaksi dilanjutkan dengan
menambahkan masing masing tabung 2 tetes anti human
globulin. Dikocok secara perlahan lahan, kemudian diputar 3000
rpm selama 15 detik lalu dibaca reaksi
Diamati aglutinasi dengan mengocok perlahan - lahan
Coombs control cell (CCC)
Kontrol semua tabung bila hasil negatif dengan CCC.
Ditambahkan ke dalam masing masing tabung dengan 1 tetes
CCC. Dikocok perlahan lahan, kemudian diputar 3000 rpm

Hasil Pemeriksaan

selama 15 detik lalu reaksi dibaca

Dibaca reaksinya dengan mengocok secara perlahan