Abstrak

Hubungan antara dosis intravena streptozotocin (N-nitroso turunan

glukosamin) dan respon diabetogenic telah dieksplorasi dengan
menggunakan indeks berikut Tindakan diabetogenic: glukosa serum, volume
urin, dan glikosuria, ketonuria, serum insulin immunoreactive (IRI), dan
konten IRI pankreas. Kegiatan diabetogenic bisa ditunjukkan antara dosis 25
dan 100 mg / kg, semua indeks yang digunakan menunjukkan beberapa
tingkat korelasi dengan dosis yang diberikan. Ketonuria hanya terlihat
dengan dosis terbesar, 100 mg / kg. Yang paling mencolok dan korelasi yang
tepat adalah bahwa antara dosis dan pankreas konten IRI 24 jam setelah
pemberian obat, dan disarankan bahwa ini merupakan nyaman sistem tes
baik untuk kedua terkait dan tidak terkait senyawa beta sitotoksik atau untuk
skrining untuk memodifikasi agen atau zat antidiabetes dari jenis novel.
Kemampuan untuk menghasilkan penipisan bergradasi penyimpanan IRI
pancreas Kapasitas menyebabkan analisis hubungan antara pankreas IRI
konten dan metabolisme karbohidrat gila. Toleransi glukosa abnormal dan
respon insulin terlihat ketika pankreas IRI telah habis oleh sekitar sepertiga,
sedangkan puasa hiperglikemia dan kotor glikosuria terjadi ketika deplesi
telah mencapai dua pertiga dan tiga perempat, masing-masing. Ringan
namun anomali gigih diproduksi oleh streptozotocin terendah yang efektif
dosis, 25 mg / kg, menunjukkan karakteristik menyerupai keadaan diabetes
kimia pada manusia dan kekuatan dengan demikian menjamin studi lebih
lanjut sebagai model mungkin. Akhirnya, hilangnya aksi diabetogenic dari
streptozotocin oleh pretreatment dengan nicotinamide dikonfirmasi dan
terbukti fungsi dari dosis relatif nicotinamide dan streptozotocin dan interval
antara suntikan.

Metode

Hewan-hewan percobaan tikus Wistar jantan putih, dibesarkan di

laboratorium kami, dengan berat antara 170 dan 230 g. Mereka berpuasa
selama 16 jam sebelum injeksi streptozotocin ke dalam vena saphena, di
bawah sinar eter anestesi. Selanjutnya, hewan-hewan yang harus
dikorbankan 1-10 jam setelah injeksi terus cepat, sementara mereka yang
harus dikorbankan kemudian ditempatkan di metabolic kandang dengan
akses gratis ke air dan laboratorium chow pelet. Mereka juga berpuasa lagi,
16 jam sebelum mereka dikorbankan.
Streptozotocin (banyak 4621 hkj 126 D dan 6742 DEG 30-5, hadiah dari The
Upjohn Company, Kalamazoo, Mich.) adalah dilarutkan dalam diasamkan
0,9% saline (pH 4,5) segera sebelum injeksi (1). Volume injeksi 0,5 ml / 200 g
berat badan, konsentrasi streptozotocin disesuaikan sesuai dosis yang
diinginkan. Kontrol hewan, disuntik dengan diasamkan garam saja, termasuk
dalam setiap percobaan dan dikorbankan pada interval waktu yang sama
sebagai hewan percobaan. Perawatan ini adalah tanpa efek pada pankreas
dan IRI serum. Dengan demikian, hasil percobaan control dilaporkan hanya di
mana perbandingan langsung yang diinginkan dan dan pada 0-waktu dalam
eksperimen berkaitan dengan waktu urutan kejadian metabolik. Pentingnya
menyesuaikan dengan cepat dan mempertahankan pH solusi streptozotocin
sekitar 4,5 sekali lagi ditekankan. Hewan-hewan, oleh kelompok 4-12,
dikorbankan oleh pemenggalan kepala setelah cahaya intraperitoneal
anestesi pentobarbital. Darah dikumpulkan dari hewan dipenggal dan
diizinkan untuk menggumpal pada suhu kamar selama 2 jam. Serum
kemudian dipisahkan oleh sentrifugasi dan disimpan di -20'C untuk
pengukuran lebih lanjut. Sekitar dua pertiga dari pankreas, bebas dari lemak
dan ganglia, juga disimpan di -20'C sampai mengalami acidethanol ekstraksi
sesuai dengan metode Scott dan Fisher (7). Glukosa serum diukur dengan o-
toluidin (8), sedangkan kedua serum dan pankreas IRI diperkirakan oleh
sedikit modifikasi dari metode Hales dan Randle (9), dan Morgan dan
Lazarow (10). Tikus ditimbang dan urin mereka, akumulasi untuk periode 24-
jam, dikumpulkan mingguan. Glikosuria ditentukan secara semikuantitatif
dengan Clinitest (The Ames Co, Elkhart, Ind.) Atau Tes-Tape (Eli Lilly & Co,
Indianapolis, Ind.) Pada diencerkan sesuai urin, sementara ketonuria
diperkirakan dengan tablet Acetest (Ames).

Untuk pengukuran toleransi glukosa, hewan dipuasakan selama 16 jam

sebelum tes, yang dilakukan baik sebelum atau 1 minggu setelah injeksi
streptozotocin; 3 g glukosa / kg berat badan diberikan sebagai solusi o 20%
oleh tabung lambung. Sampel darah (0,4 ml) diperoleh dari ekor sebelum
ujian dan lagi setelah 30, 60, dan 120 menit. Mereka dikumpulkan dalam
tabung microfuge plastik dan segera disentrifugasi selama 2 menit di
microfuge Beckman Spinco di 15.000 rpm. Setelah 4 jam, binatang
dikorbankan oleh pemenggalan kepala setelah cahaya intraperitoneal
pentobarbital anestesi.

darah dikumpulkan, dan ekor dan tubuh pancreas yang membedah bebas
dari lemak dan ganglia dan segera disimpan pada -200C. Setelah
sentrifugasi, plasma dikumpulkan secara terpisah untuk glukosa dan IRI
estimasi dan disimpan pada -200C sampai digunakan. Nicotinamide (hadiah
dari Hoffmann-La Roche dan Co, Basel, Swiss) dilarutkan di steril 0,9% o
NaC1 untuk administrasi intraperitoneal di berbagai kali sebelum injeksi
streptozotocin. Itu hewan dikorbankan 24 jam setelah streptozotocin yang inj
ection.