Mikroalga dianggap sebagai sumber biomassa yang menarik terhadap berbagai aplikasi, termasuk biofuel,

nutraceuticals dan obat-obatan. Selain itu, mereka menunjukkan potensi besar untuk digunakan sebagai bahan
fungsional dalam produk makanan, karena mereka kaya dalam beberapa komponen gizi dan kesehatan-manfaat
seperti omega-3 polyunsaturated fatty

asam (ω3-PUFA), protein dan antioksidan [1]. Selain itu, mikroalga memiliki banyak keunggulan dibandingkan
tanaman konvensional, seperti e fi siensi fotosintesis tinggi dan tidak ada kompetisi untuk lahan subur [2]. Dalam
beberapa dekade terakhir, penelitian terutama berfokus pada ekstraksi komponen spesifik dari mikroalga, seperti
antioksidan, pigmen dan minyak diperkaya ω3PUFA [3]. Namun, pendekatan yang lebih menarik adalah
penggabungan total biomassa kering menjadi produk makanan. Dengan cara ini, beberapa komponen nutrisi dan
kesehatan-manfaat diperkenalkan dalam produk makanan dan aliran limbah dihindari. Namun, pendekatan ini dapat
mempengaruhi sifat reologi dari produk makanan yang diperkaya, aspek kualitas penting dari produk makanan.

Produk makanan olahan menyajikan keragaman besar dalam sifat reologi, tergantung pada jenis produk. Sebagai
akibatnya, karakteristik rheologi yang tepat harus dipertimbangkan ketika memilih spesies mikroalga untuk aplikasi
dalam produk makanan tertentu. Viskositas rendah biasanya diinginkan untuk produk makanan cairan, seperti susu
dan jus buah. Sebaliknya, produk semi-padat seperti sup dan saus menyajikan karakteristik sistem yang lebih
terstruktur, termasuk viskositas yang lebih tinggi yang sering dicapai dengan penambahan zat pengental. Dalam
konteks ini, beberapa penelitian menyelidiki perilaku reologi dari exopolysaccharides sulfat dari Porphyridium sp.,
Menunjukkan solusi viskos pada konsentrasi rendah dan sifat gelling sampai batas tertentu [4,5]. Sebagai akibatnya,
penambahan biomassa spesies mikroalga tertentu ke produk makanan dapat menciptakan peluang untuk
meningkatkan properti struktural dari produk yang diperkaya, memungkinkan penggunaannya sebagai bahan
multifungsi (yaitu menggabungkan properti yang berhubungan dengan kesehatan dan struktural). Bahkan,
penambahan biomassa Isochrysis galbana (hingga 3% b / b) dalam biskuit manis menghasilkan tidak hanya dalam
pengayaan ω3-PUFA, tetapi juga meningkatkan sifat tekstur dari biskuit [6]. Namun, informasi tentang potensi
penstrukturan biomassa mikroalga dalam produk makanan terbatas pada beberapa studi kasus, di mana hanya
sejumlah kecil spesies mikroalga yang dipelajari dalam sistem makanan tertentu [7-9].

Pendekatan yang lebih mendasar, karakteristik sifat rheologi dari beberapa spesies mikroalga dalam sistem model
seperti suspensi berair, akan memberikan basis pengetahuan ilmiah yang diperlukan terhadap aplikasi ini. Dalam
konteks ini, suspensi mikroalga dapat digambarkan sebagai sistem kompleks yang terdiri dari sel-sel alga dan puing-
puing sel yang tersebar dalam fase kontinu yang mengandung air, garam terlarut dan zat polimer (misalnya
polisakarida ekstraselular). Sifat reologi suspensi mikroalga dapat dikaitkan dengan kedua karakteristik partikel,
seperti konsentrasi biomassa dan sifat fisik sel alga, serta sifat reologi dari fase kontinu [10]. Selain itu, penelitian
sebelumnya telah menunjukkan bahwa sebagian besar suspensi mikroalgal menunjukkan perilaku aliran Newton
pada konsentrasi biomassa rendah, sementara di atas konsentrasi kritis, tergantung pada spesies mikroalga, suspensi
mikroalgal menunjukkan perilaku non-Newtonian [11-13].

Dengan tujuan menggunakan mikroalga biomassa sebagai bahan fungsional (multi), aplikasi yang baik, pengetahuan
dasar lebih lanjut tentang perilaku reologi mereka setelah diproses. Pemrosesan mekanik sering diterapkan untuk
fungsionalisasi produk makanan, mis. menciptakan sifat struktural yang diinginkan dari produk berbasis sayuran
[14]. Di sisi lain, pengolahan termal adalah teknik pengawetan konvensional dalam pengolahan makanan untuk
menciptakan produk makanan yang stabil rak. Keamanan serta kualitas produk harus dijamin, menargetkan
mikroorganisme patogen dan pembusuk, masing-masing. Kehadiran dan / atau pertumbuhan mikroorganisme ini
ditentukan oleh sifat-sifat intrinsik dari produk, seperti pH. Umumnya, makanan rendah asam (pH> 4,5)
memerlukan proses sterilisasi, menargetkan pengurangan 12 log spora yang membentuk mikroorganisme
Clostridium botulinum. Makanan tinggi asam (pH <4,5) sebaliknya dilestarikan oleh proses pasteurisasi yang
kurang intens, biasanya menargetkan organisme pembasmi Alicyclobacillus acidoterrestris [15]. Sebagai akibatnya,
perbedaan-perbedaan dalam intensitas pemrosesan panas ini dapat menghasilkan perubahan karakteristik rheologi.

Sebagai proses mekanis, homogenisasi tekanan tinggi (HPH) telah terbukti sebagai teknik efektif untuk gangguan
sel-sel mikroba [16,17]. Selanjutnya, pengolahan termal suspensi mikroalga dapat merusak dinding sel dan
menghasilkan solubilisasi komponen dan aglomerasi puing-puing sel [18]. Perubahan dalam ukuran partikel dan
morfologi serta pelepasan komponen intraseluler ke dalam fase kontinu mungkin mempengaruhi sifat reologi dari
suspensi. Selain itu, pH suspensi juga dapat mempengaruhi sifat reologi suspensi mikroalga, karena interaksi
tergantung pH antara beberapa biopolimer dapat hadir.
Sampai saat ini, sifat-sifat rheologi dari suspensi mikroalga sangat terbatas dijelaskan dalam literatur. Selain itu,
perbandingan antara studi yang berbeda sulit karena variasi konsentrasi biomassa (mulai dari 0,05 sampai 25% b /
b), komposisi medium dan analisis reologi yang diterapkan (misalnya kisaran tingkat geser selama pengukuran
steadyshear). Lebih jauh lagi, sejauh pengetahuan kami, tidak ada penelitian yang dilakukan tentang pengaruh
pengolahan mekanik dan termal pada sifat-sifat rheologi dari suspensi mikroalga. Tujuan dari penelitian ini adalah
untuk mengkarakterisasi perilaku reologi dari beberapa spesies mikroalga yang menarik secara komersial dalam
suspensi berair. Spesies mikroalga yang digunakan dalam penelitian ini dipilih berdasarkan potensi mereka sebagai
bahan makanan fungsional (multi) fungsional, karena sebagian besar dariemarerichin-3-PUFA, protein dan / atau
antioksidan [1,3]. Di satu sisi, sistem makanan asam seperti jus buah dan diasamkan. produk-produk makanan
dijinakkan dengan cara menyesuaikan kembali dosis-dosis yang satu ini menjadi 4. Di sisi lain, suspensi-suspensi
pada pH 6 dimasukkan untuk meniru sistem asam-rendah ke sistem makanan netral, seperti makanan berbasis nabati
dan produk-produk susu. Kedua perilaku viskoelastik (di bawah deformasi kecil) dan perilaku aliran (di bawah
deformasi yang lebih besar) dipelajari. Selain itu, efek HPH dan pengolahan termal pada sifat reologi dan
karakteristik partikel dari suspensi mikroalgal diselidiki. Intensitas perawatan termal didasarkan pada proses termal
industri yang digunakan dalam industri makanan. Pemahaman perilaku reologi sebelum dan sesudah pemrosesan
memberikan basis pengetahuan ilmiah untuk pemilihan spesies mikroalga yang tepat untuk aplikasi makanan (dan
non-makanan).

2. Bahan-bahan dan metode-metode

2.1. Biomassa mikroalga

Biomal mikroalga komersial tersedia dibeli dari berbagai perusahaan. Biomik lanofilisasi dari Nannochloropsis sp.
diperoleh dari Proviron (Hemiksem, Belgia), Odontella aurita dari Innovalg (Bouin, Perancis) dan cyanobacterium
Arthrospira platensis dari Earthrise (Irvine, CA, USA). Biomik terleofilisasi dari Schizochytrium sp. dengan baik
hati disumbangkan oleh Mara Renewables Corporation (Dartmouth, Kanada). Biomassa semprot kering dari
Chlorella vulgaris diperoleh dari Allma (Lisbon, Portugal). Biomassa Phaeodactylum tricornutum dan Porphyridium
cruentum diperoleh sebagai pastefrom Necton (Olhão, Portugal) dan lyophilized sebelum digunakan. Semua
biomassa disimpan dalam wadah tertutup pada suhu -80 ° C hingga digunakan.

2.2. Persiapan dan pengolahan suspensi airal mikroalga

Gambaran skematik persiapan dan pemrosesan suspensi berair mikroalga disajikan pada Gambar. 1.

2.2.1. Persiapan suspensi berair mikroalga Biomasa mikroalga kering disuspensikan semalam dalam air
demineralisasi dengan pengadukan lembut dan pH suspensi disesuaikan dengan pH 4 atau 6 menggunakan HCl. Air
demineralisasi kemudian ditambahkan untuk mendapatkan konsentrasi akhir 8 g biomassa per 100 g suspensi (8% b
/ b). Sistem kemudian dicampur selama 10 menit pada 3500 rpm (kecuali untuk P. cruentum 10 menit pada 5500
rpm) dengan mixer laboratorium (Silverson L5M-A, East Longmeadow, MA, USA) untuk mendapatkan suspensi
homogen. Suspensi yang diperoleh pada pH masing-masing dianggap sebagai suspensi kontrol. Semua penangguhan
disiapkan dalam rangkap dua.

2.2.2. Perawatan mekanis Suspensi encer Microalgal secara mekanis dirawat oleh HPH (Panda 2K, Gea Niro Soavi,
Parma, Italia) pada 100 MPa untuk sekali jalan. Inlet dari homogenizer itu termostasi pada 4 ° C menggunakan
cryostat (Haake, Karlsruhe, Jerman) dan sampel yang dihomogenisasi dikumpulkan dalam bak es.

2.2.3. Perlakuan panas Suspensi yang dihomogenkan secara termal dirawat baik oleh pasteurisasi (suspensi pada pH
4) atau proses sterilisasi (suspensi pada pH 6). Perawatan termal dilakukan dalam retort aircascading skala pilot
(aliran Barriquand Steri, Paris, Perancis). Stoples kaca (tinggi 95 mm, diameter 45 mm) diisi dengan 80 mL suspensi
dan ditutup dengan tutup logam. Profil suhu dicatat baik dalam retort dan di titik terdingin dari tabung menggunakan
termokopel tipe T dan didaftarkan oleh perangkat lunak Ellab Valsuite Plus (Ellab, Hillerǿd, Denmark). Intensitas
ofthaltmaltreatments didinginkan berdasarkan pengolahan panas yang relevan secara industri untuk produk makanan
yang stabil rak. Suspensi pada pH 4, mensimulasikan matriks makanan asam, dipasteurisasi pada 90 ° C untuk
mendapatkan nilai proses 10 ° CPU90 ° C = 3 menit. Untuk suspensi pada pH 6, yang mewakili produk makanan
rendah asam, proses sterilisasi pada 121 ° C dipilih dengan nilai proses 10 ° CF121.1 ° C = 5 menit. Karena
perbedaan karakteristik perpindahan panas dari spesies mikroalga yang diteliti, panjang proses termal bervariasi dari
44 hingga 84 menit untuk proses pasteurisasi, dan antara 70 dan 94 menit untuk proses sterilisasi.

2.3. Pengukuran rematik

2.3.1. Karakterisasi rematik suspensi mikroalga Sebelum analisis rheologi, stabilitas suspensi terhadap
creamingorsedimentation telah diperiksa selama 30 menit, yaitu waktu paling lama dari pengukuran reologis,
dengan menggunakan Turbiscan MA 2000 (Formulaction, L'Union, Perancis). Tak satu pun dari suspensi
menunjukkan creaming signifikan atau sedimentasi dalam rentang waktu ini. Sifat reologi suspensi mikroalga
kemudian dianalisis dengan rheometer yang dikontrol tegangan (MCR 302, Anton Paar, Graz, Austria) pada 25 ° C.
Silinder konsentris Couette (CC27, diameter 26,6 mm dan mengukur tinggi 40,0 mm) digunakan sebagai sistem
pengukuran. Volume standar sebesar 22 mL suspensi dimuat ke cangkir (diameter 28,9 mm) untuk setiap
pengukuran. Untuk menghindari efek pembebanan pada struktur, sampel yang sebelumnya 30 detik pada laju geser
20 detik − 1 diikuti oleh 120 detik istirahat, yaitu laju geser 0 − 1, sebelum setiap pengukuran. Batas torsi minimum
ditetapkan pada 0,1 μN m untuk memastikan keandalan data yang diperoleh. Perilaku viskoelastis dari suspensi
dipelajari oleh pengukuran geser osilasi. Pertama, wilayah viskoelastik linier ditentukan dengan melakukan uji
regangan regangan pada frekuensi sudut konstan 10 rad / sandalogarithmically increasings ofhearstrain dari 0,01
sampai 1000%. Sebuah regangan geser konstan 1% dalam wilayah viskoelastis linier kemudian dipilih untuk
menyapu frekuensi, dengan pengecualian suspensi kontrol O. aurita di mana regangan geser konstan 0,139%
digunakan. Uji sweep frekuensi dilakukan untuk menentukan ketergantungan frekuensi modulus penyimpanan (G ′)
dan modulus kerugian (G ″), dengan menurunkan frekuensi sudut logaritmik dari 10 menjadi 0,1 rad / s.

Perilaku aliran suspensi dipelajari oleh pengukuran geser stabil, dengan logaritmik meningkatkan laju geser dari 0,1
hingga 100 d − 1. Selama pengujian ini, 50 titik pengukuran dicatat dan setiap laju geser diterapkan selama 10 detik.
Semua pengukuran dilakukan dalam rangkap dua. Sampel baru dimasukkan ke dalam cangkir untuk setiap
pengukuran.

2.3.2. Pengukuran viskositas fase serum Suspensi mikroalga disentrifugasi selama 30 menit pada 10000 g dan 25 ° C
(J2-HS centrifuge, Beckman, CA, USA) untuk memisahkan partikel dari fase kontinu. Supernatan dikumpulkan dan
dilambangkan sebagai fase serum. Viskositas fase serum diukur dengan rheometer yang dikontrol tegangan (MCR
302, Anton Paar, Graz, Austria) menggunakan geometri Couette dinding ganda (DG26.7, diameter dalam 12,3 mm,
diameter eksternal 13,3 mm dan tinggi ukur 40 mm) untuk memaksimalkan jangkauan torsi yang dapat diakses.
Volume standar 6,5 mL serum dimuat ke dalam cangkir (diameter internal 11,9 mm, diameter eksternal 13,8 mm)
untuk setiap pengukuran. Kecepatan geser meningkat secara logaritmik dari 0,1 hingga 100 d −1 dan setiap laju
geser diterapkan selama 10 detik. Prasyarat kondisi seperti yang dijelaskan dalam Bagian 2.3.1 digunakan.

2.4. Karakterisasi struktur mikro

2.4.1. Distribusi ukuran partikel Partikel kebersamaan dengan reaksi radikal (Beckman Coulter LS 13 320, Miami,
FL, USA). Sampel ditambahkan ke tangki pengaduk diisi dengan air deionisasi dan dipompa melalui sel pengukur
pada kecepatan pompa 30%, di mana partikel tersebar oleh sinar laser (panjang gelombang sumber penerangan
utama: 750 nm; panjang gelombang ofhalogen cahaya untukpolarisasi intensitas berbeda hamburan: 450 nm , 600
nm, 900 nm). Distribusi ukuran partikel volumetrik dihitung dengan model optik Fraunhofer dengan menggunakan
perangkat lunak instrumen. Semua pengukuran dilakukan dalam rangkap dua.

2.4.2. Mikroskopi kontras interferensi kontras Struktur mikro sampel divisualisasikan dengan gambar mikroskopis,
menggunakan mikroskop Olympus BX-51 yang dilengkapi dengan kamera digital XC50 (Olympus, Optical Co.Ltd.,
Tokyo, Jepang) dan divisualisasikan menggunakan perangkat lunak CellF. Tujuan 10 ×, 40 × atau 100 × digunakan
dan setidaknya sepuluh gambar diperoleh untuk setiap sampel.

2.5. Analisis statistik

Semua perawatan suspensi mikroalgal dilakukan dalam rangkap dua dan untuk setiap sampel individu, analisis
dilakukan dalam rangkap dua. Akibatnya, data yang diperoleh disajikan sebagai rata-rata dari empat pengukuran ±
kesalahan standar. Kurva aliran suspensi kontrol disesuaikan dengan model reologi menggunakan prosedur regresi
linier dan non-linier dengan perangkat lunak statistik SAS (SAS 9.4, Cary, NC, USA). Perkiraan parameter model
dari sampel yang berbeda secara statistik dibandingkan dengan menggunakan interval kepercayaan 95%. Perbedaan
dalam nilai rata-rata viskositas mekanis dan / atau perlakuan panaspensipensi dianalisis secara statistik dengan
menggunakan ANOVA satu arah yang dikombinasikan dengan uji Tukey untuk beberapa perbandingan (P <0,05)
dengan perangkat lunak statistik JMP (JMP Pro 12, Cary, NC, USA).

3. Hasil dan Pembahasan

3.1. Karakterisasi rematik suspensi kontrol

Perilaku reologi suspensi mikroalga ditandai pada dua tingkat. Di satu sisi, pengukuran osilasi amplitudo kecil
dilakukan untuk mempelajari perilaku viskoelastik linier dari suspensi. Dalam hal ini, deformasi kecil diterapkan
untuk mendapatkan wawasan ke dalam struktur jaringan, tanpa mengganggu sifat struktural sistem. Dengan
menerapkan deformasi dalam wilayah viskoelastik linier, struktur asli suspensi dapat dikarakterisasi. Di sisi lain,
perilaku aliran dipelajari di bawah deformasi yang lebih besar. Perilaku aliran non-linear ini dapat dikaitkan dengan
operasi makanan, termasuk operasi unit seperti pencampuran dan pemompaan, serta mengunyah dan menelan
selama konsumsi produk makanan [19]. Kombinasi dari perilaku viskoelastik dan aliran linier memberikan
pemahaman yang lebih baik tentang sifat reologi suspensi mikroalga.

3.1.1. Perilaku viskoelastik linier Pengukuran osilasi amplitudo kecil dilakukan untuk mendapatkan wawasan ke
dalam struktur jaringan dari suspensi mikroalgal. Pertama, uji regangan menyapu dilakukan untuk menentukan
daerah viskoelastik linier. Kurva regangan menyapu dari A. platensis, C. vulgaris, O. aurita dan P. cruentum
disajikan pada Gambar. 2, sebagai nilai torsi yang dapat diandalkan (> 0,1μN · m) yang hanya diamati dari
luarrogiviesecemies.Inthesegraphs, zona dari viskoelastisitas linier dapat diamati sebagai dataran tinggi pada strain
geser rendah, dengan modulus penyimpanan (G ′) dan modulus kerugian (G ″) independen dari regangan geser. Di
wilayah viskoelastik linier ini, suspensi C. vulgaris, O. aurita dan P. cruentum pada kedua nilai pH menunjukkan G
′> G ″, menunjukkan perilaku dominan elastis. Sebaliknya, kontrol suspensi A. platensis pada pH 6 ditampilkan
terutama perilaku kental, karena G ′ <G ″ di wilayah viskoelastik linier. Peningkatan lebih lanjut dari
shearstrainledtreecreaseofbothG ′ andG ″ forA.platensis, C.vulgaris dan O. aurita, menunjukkan bahwa pada
deformasi ini struktur jaringan dihancurkan, khas untuk sistem polimerik. Sebaliknya, P. cruentum menunjukkan
peningkatan G ″ bersama-sama dengan peningkatan G ′ pada akhir dari wilayah viskoelastik linier. Yang terakhir
adalah perilaku suspensi yang khas. Tujuan utama dari penyapuan regangan adalah memilih regangan geser konstan
untuk uji sapuan frekuensi. Suatu regangan geser sebesar 1% ditemukan berada dalam wilayah viskoelastis linier
untuk suspensi A. platensis, C. vulgaris dan P. cruentum. Di sisi lain, strain geser 0,139% dipilih untuk suspensi
kontrol O. aurita.

Kedua, pengukuran frekuensi menyapu dilakukan untuk mengkarakterisasi struktur jaringan dari suspensi
mikroalgal. Frekuensi penyapuan C. vulgaris, P. cruentum dan O. aurita suspensi pada kedua nilai pH disajikan pada
Gambar. 3. Suspensi ini menunjukkan perilaku seperti elastis dengan G ′> G ″ selama rentang frekuensi sudut yang
lengkap. Begitu pula, energi radioaktif tidak bisa menampilkan nilai yang lebih rendah daripada seluruh rentang
frekuensi sudut, mereka tidak akan dibahas lebih lanjut dalam paragraf ini. Untuk menentukan ketergantungan
frekuensi G ′ dan G ″, data dari sapuan frekuensi dipasangkan oleh model hukum kekuatan:

G aω c (1) ″ =

G bω d (2)

dengan ω parameter frekuensi sudut (rad / s) dan a, b, c dan d. Perkiraan untuk parameter-parameter ini disajikan
pada Tabel 1. Pembahasan terutama akan berfokus pada ketergantungan frekuensi G ′, karena nilai-nilai G are lebih
sensitif terhadap fenomena inersia dari sistem pengukuran ketika menganalisis sampel dengan sifat struktural
terbatas. Semua suspensi menunjukkan nilai parameter c yang serupa dan dengan demikian ketergantungan
frekuensi serupa dari G ′. Dengan nilai-nilai ini berkisar antara 0,11 dan 0,17 dan dengan G ′> G ″ atas seluruh
rentang frekuensi sudut, perilaku reologi dari suspensi ini bertepatan dengan gel yang lemah. Memang, sedangkan
fluida viskoelastik menunjukkan ketergantungan frekuensi tinggi dengan G′∝ω2 dan G ″ ∝ω1 pada frekuensi sudut
rendah, parameter c <0,5 menunjukkan transisi menuju perilaku padat seperti [20,21]. Menurut Kavanagh dan Ross-
Murphy, gel yang lemah terdiri dari rantai yang secara fisik berikatan silang ke jaringan, tetapi ikatan silang adalah
energi finite kecil dan / atau seumur hidup terbatas [20]. Di samping kemungkinan ikatan silang kovalen, juga ikatan
silang non-kovalen mungkin ada dalam suspensi mikroalgal ini. Jelas bahwa tidak satupun dari suspensi mikroalga
ini dapat digambarkan sebagai 'gel sejati' dari jaringan kovalen yang terhubung silang, yang akan menunjukkan
independensi yang jelas dari frekuensi sudut dengan G′∝G ″ ∝ω0. Rasio G ″ / G ′ pada frekuensi sudut rendah (ω =
0,1 rad / s) adalah antara 0,19 dan 0,49, sebanding dengan gel yang lemah (urutan 10−1) [22].

Nilai yang lebih tinggi dari parameter a dan b diperoleh untuk suspensi P. cruentum dibandingkan dengan O. aurita
dan C. vulgaris. Ini menunjukkan bahwa struktur jaringan yang lebih kuat terbentuk di suspensi P. cruentum.
Kehadiran exopolysaccharides sulfat di P. cruentum, yang mana telah diketahui struktur kelainannya [23], mungkin
salah satu alasan untuk struktur jaringan sti er dibandingkan dengan spesies mikroalga lainnya. Nilai parameter a
dan b untuk suspensi O. aurita memiliki urutan besaran yang sama seperti C. vulgaris. Sementara suspensi P.
cruentum dan O. aurita pada pH 6 menunjukkan nilai parameter yang lebih tinggi dibandingkan dengan pH 4 (dan
dengan demikian struktur jaringan sti), sebaliknya ditemukan untuk C. vulgaris. Ini mungkin menunjukkan
pentingnya ikatan silang ion antara partikel dalam pembentukan jaringan dalam suspensi mikroalga ini.

3.1.2. Aliran perilaku

Perilaku aliran semua suspensi mikroalgal divisualisasikan pada Gambar. 4, disajikan sebagai viskositas (η) sebagai
fungsi dari laju geser (γ̇). Dengan kedua sumbu dalam skala logaritmik, penyimpangan dari perilaku Newton dapat
dengan mudah diamati. Di antara semua suspensi mikroalga, hanya Nannochloropsis sp. pada kedua nilai pH
dipamerkan perilaku aliran Newton (yaitu independentness ofofpliedshearrate) .Dari semua suspensi lainnya,
viskositas menurun dengan meningkatnya laju geser, menunjukkan perilaku aliran shear-thinning. Karena suspensi
mikroalga adalah dispersi sel mikroalga dan puing-puing sel dalam fase cair mengandung air, zat polimer (misalnya
exopolysaccharides) dan garam terlarut, perilaku aliran non-Newtonian dapat diharapkan [11]. Dari Gambar. 4 dapat
diamati bahwa suspensi P. cruentum adalah yang paling kental atas seluruh rentang tingkat geser, diikuti oleh
suspensi C. vulgaris dan O. aurita. Untuk menggambarkan karakteristik rheological dari suspensi kontrol secara
kuantitatif, kurva aliran disesuaikan dengan model rheological. Newtonian, Power Law dan Herschel-Bulkley model
sering digunakan untuk menggambarkan perilaku aliran Newtonian atau shear-thinning flow, yang disajikan dalam
Pers. (3), (4) dan (5) masing-masing:

dengan σ mewakili tegangan geser (Pa), γ̇ laju geser (s − 1), μ viskositas dinamis (Pa ·s), K koefisien konsistensi (Pa
· sn), n indeks perilaku aliran (-) dan σ0 tegangan hasil dinamis (Pa). Mantan dua model dapat dianggap sebagai
kasus-kasus khusus dari HerschelBulkleymodel, withyieldstressσ0 = 0dan flowfactorindexn = 1atau n <1 untuk
Newton Law dan Power Law model masing-masing [19]. Untuk memilih model yang sesuai untuk setiap suspensi,
tegangan geser diplot logaritmik sebagai fungsi dari laju geser yang meningkat secara logaritmik. Karena tidak ada
nilai konstan log (σ) yang dicapai pada laju geser rendah dan dengan demikian tidak ada tegangan leleh yang jelas
yang diamati, semua suspensi pengurang geser disesuaikan dengan model Hukum Daya. Model yang digunakan dan
estimasi parameter disajikan pada Tabel 2. Seperti juga diamati secara visual dari Gambar. 4, Nannochloropsis sp.
adalah satu-satunya spesies mikroalga yang menyajikan perilaku aliran Newton pada konsentrasi yang diperiksa.
Viskositas dinamis (yaitu parameter koefisien konsistensi dalam model Newton) rendah pada pH 4 dan 6, mendekati
viskositas air murni (1 mPa · s). Dengan demikian, dapat disimpulkan bahwa tidak ada interaksi antara partikel dan
hanya terbatasnya solubilisasi komponen sel yang terjadi pada Nannochloropsis sp. skorsing. Semua suspensi
mikroalgal lainnya menunjukkan perilaku shear-thinning dengan indeks perilaku aliran n <1. Semakin kecil nilai n,
semakin besar deviasi dari perilaku Newtonian. Dalam hal ini, mikroalga yang diteliti menunjukkan variasi besar
dalam sifat reologi dengan n mulai dari 0,86 hingga 0,20. Perkiraan terkecil dari n ditemukan untuk suspensi C.
vulgaris, O. aurita dan terutama P. cruentum, viskositas sehingga menunjukkan ketergantungan tertinggi pada laju
geser diterapkan. Tidak ada efek yang konsisten dari pH pada indeks perilaku aliran n yang diamati di antara
suspensi mikroalgal yang berbeda. Sedangkan C. vulgaris menunjukkan nilai yang lebih kecil dari n untuk suspensi
pada pH 6 dibandingkan dengan pH 4, sebaliknya diamati untuk suspensi A. platensis dan P. cruentum.
Sebaliknya, tidak ada efek pH pada n yang diamati untuk spesies mikroalga lainnya. Mempertimbangkan nilai-nilai
konsistensi koefisien (K), spesies mikroalga dapat dibagi menjadi dua kelompok. Kontrol suspensi dari
Nannochloropsis sp., P. tricornutum, Schizochytrium sp. dan A. platensis hanya menyajikan konsistensi terbatas
pada kedua nilai pH. Di sisi lain, nilai estimasi untuk K sekitar 10 hingga 100 kali lebih tinggi untuk suspensi C.
vulgaris, O. aurita dan P. cruentum. Meskipun, perhatian harus diambil ketika membandingkan nilai perkiraan untuk
K. Bahkan, nilai-nilai ini dinyatakan dalam mPa · sn. Karena variasi besar dalam perilaku (non-) Newtonian di
antara spesies mikroalga yang diperiksa, perbedaan besar ditemukan pada n yang menghasilkan unit yang sedikit
berbeda dari konsistensi koefisien antara spesies mikroalga yang berbeda. Namun demikian, tegangan geser yang
diperoleh pada setiap laju geser dapat digambarkan sebagai kombinasi komponen elastis dan hidrodinamik [24].
Ketika mempertimbangkan K sebagai kontribusi hidrodinamik pada tegangan geser pada γ̇ = 1s − 1, parameter K
dinyatakan dalam mPa, terlepas dari model regresi linier (non-) yang digunakan. Semakin besar K, semakin besar
tegangan geser yang diperlukan untuk mendapatkan laju geser tertentu dan dengan demikian semakin konsisten
fluida, yang mengarah pada kesimpulan. Pengaruh berikutnya dalam perilaku aliran antara spesies mikroalga yang
diteliti, perbedaan yang signifikan diamati antara suspensi pada pH 4 dan pH 6 untuk setiap spesies mikroalga. Nilai
K yang lebih tinggi diperoleh untuk suspensi pada pH 6 (dengan pengecualian Schizochytrium sp.), Menunjukkan
adanya interaksi ion antara partikel atau polimer dalam suspensi mikroalga.

Meskipun model Herschel-Bulkley tidak dipilih untuk memenuhi data, untuk beberapa spesies mikroalga, sebuah
dataran tinggi dari nilai log konstan (σ) mungkin hadir pada tingkat geser yang lebih rendah daripada uji
eksperimental 0.1 −1. Ekstrapolasi kurva di log (σ) - γ log (̇) plot akan menghasilkan perkiraan hasil tegangan
sekitar 4 Pa untuk P. cruentum pada kedua nilai pH dan jauh di bawah 1 Pa untuk suspensi C. vulgaris dan O. aurita.
Namun demikian, karena ini adalah nilai tegangan hasil rendah, kontribusinya akan sangat terbatas dalam produk
makanan.

Hanya sedikit penelitian yang ditemukan dalam literatur tentang karakteristik reologi suspensi airal mikroalga.
Selain itu, hasil sulit untuk membandingkan karena perbedaan dalam konsentrasi biomassa, menangguhkan metode
menengah dan analitis (misalnya kisaran tegangan geser yang digunakan untuk pencocokan model rheological).
Seperti disebutkan sebelumnya, suspensi mikroalga berperilaku sebagai fluida Newton di bawah konsentrasi kritis
padatan tersuspensi [11,13]. Dari hasil yang diperoleh dapat disimpulkan bahwa konsentrasi terkandung dari 8%
berat / dahwa berada di atas konsentrasi kritis ini, menghasilkan perilaku aliran geser yang menipis untuk semua
spesies mikroalga kecuali untuk Nannochloropsis sp.Thelatterharus dilaporkan memiliki sel yang lebih kecil dan
lebih kaku dibandingkan dengan spesies lain, sehingga menjadi kurang sensitif terhadap elastisitas. deformasi di
bawah geser [11,25]. Namun, pada konsentrasi yang lebih tinggi hingga 25% b / b, perilaku aliran geser-luntur telah
dilaporkan untuk Nannochloropsis sp. penangguhan [12,13].

Karakteristik aliran shear-thinning juga telah dilaporkan untuk kultur A. platensis [26], sesuai dengan hasil yang
diperoleh. Sebaliknya, Wileman, Ozkan dan Berberoglu melaporkan tidak ada penyimpangan dari perilaku
Newtonian (n = 1) untuk suspensi P. tricornutum pada konsentrasi (80 kg / m3) serupa dengan yang digunakan
dalam penelitian ini [11]. Bubur C. vulgaris digambarkan sebagai bahan pseudoplastik oleh penulis yang sama (n =
0,62), namun mereka melaporkan nilai yang lebih rendah untuk K dibandingkan dengan temuan kami. Variasi dalam
perilaku aliran mungkin dijelaskan oleh perbedaan dalam menangguhkan media. Perbedaan pH dapat mengubah
perilaku aliran suspensi mikroalga, sebagaimana terbukti dalam penelitian ini. Selain itu, keberadaan garam terlarut
dalam media kultur dapat meningkatkan interaksi yang mungkin antara polimer mikroalga, yang menghasilkan
perubahan karakteristik rheologi. Terakhir, adalah mungkin bahwa sifat-sifat rheologi dipengaruhi selama panen
atau pengeringan langkah-langkah dari biomassa mikroalga, menghasilkan perbedaan ketika membandingkan hasil
yang diperoleh dengan karakteristik rheological dari budaya yang berkembang seperti kebanyakan dilaporkan dalam
literatur.

3.2. Pengaruh pengolahan mekanik dan termal pada sifat reologi suspensi mikroalgal
Selanjutnya karakterisasi rheological dari suspensi mikroalgal yang tidak diobati, efek pengolahan pada sifat reologi
diselidiki. Proses dipilih berdasarkan relevansi industri mereka dalam pengolahan makanan. Di satu sisi, dampak
dari perawatan mekanis diperiksa, yang sering diterapkan untuk menyesuaikan sifat struktural produk makanan [14].
Selain itu, HPH telah dijelaskan dalam literatur sebagai teknik sukses untuk gangguan sel mikroalga [16,17]. Di sisi
lain, efek gabungan dari perawatan mekanik dan termal pada sifat rheological dari suspensi mikroalgal diselidiki.
Ini, tekanan suspensi homogen tinggi mengalami proses pasteurisasi (suspensi pada pH 4) atau proses sterilisasi
(suspensi pada pH 6), untuk mensimulasikan penciptaan produk makanan stabil rak. Sebagai akibatnya, intensitas
perlakuan panas dalam penelitian ini selalu dikaitkan dengan pH suspensi, fakta penting yang harus diingat selama
interpretasi hasil yang diperoleh.

3.2.1. Pengaruh pengolahan pada perilaku viskoelastik linier Untuk mempelajari perilaku viskoelastik dari suspensi
yang diproses, penyapuan regangan dan pengukuran sapuan frekuensi dilakukan. Sebuah regangan geser sebesar 1%
ditemukan berada di wilayah viskoelastik linier untuk semua suspensi yang dirawat. Untuk memberikan presentasi
yang jelas dari semua data, nilai G′ pada frekuensi sudut tertentu (yaitu = 10 rad / s) dipilih untuk setiap sampel
untuk mewakili perilaku reologi. Hasilnya ditunjukkan pada Gambar. 5. Karena pengukuran sweep frekuensi
dilakukan pada regangan geser konstan dalam wilayah viskoelastis linier dan dengan G ′ menunjukkan
ketergantungan terbatas ω, pendekatan ini diasumsikan memberikan representasi yang memadai dari hasil. Itu
divalidasi bahwa tidak ada perbedaan utama yang diamati ketika membandingkan nilai G ′ pada frekuensi sudut
yang lebih rendah (ω = 1 rad / s) (data tidak ditampilkan).
Pengukuran Oscillatory pada P. tricornutum dan Schizochytrium sp. suspensi menunjukkan bahwa tidak ada struktur
jaringan yang dibuat dalam suspensi dari dua spesies mikroalga ini, baik sebelum maupun setelah pemrosesan.
Selanjutnya, tidak ditemukan G ′ yang diamati untuk kontrol dan suspensi yang ditangani HPH dari
Nannochloropsis sp., Sedangkan kombinasi HPH dan sterilisasi pada pH 6 menghasilkan G ′ yang terukur. Namun
demikian, dibandingkan dengan (tidak) suspensi yang diproses dari spesies mikroalga lainnya, peningkatan G ′ ini
agak terbatas. Untuk spesies mikroalga lainnya, efek yang berbeda dari pengolahan diamati. Sedangkan HPH dan /
atau pemrosesan termal dari suspensi A. platensis dan C. vulgaris menghasilkan peningkatan G ′, sebaliknya diamati
untuk suspensi P. cruentum dan O. aurita.

Kontrol suspensi A. platensis menunjukkan struktur jaringan yang dapat diabaikan pada kedua nilai pH. Sementara
tidak ada nilai yang dapat diandalkan dari G ′ diamati pada HPH pada pH 6, HPH pada pH 4 secara signifikan
meningkatkan G ′. Tidak ada peningkatan lebih lanjut yang diamati karena proses pasteurisasi. Sebaliknya, sterilisasi
suspensi pada pH 6 menghasilkan peningkatan besar G ′, menyiratkan bahwa struktur jaringan sti diciptakan oleh
perlakuan panas intens suspensi A. platensis pada pH 6. Perilaku yang sama diperhatikan untuk suspensi C vulgaris.
Peningkatan G ′ pada HPH hanya diamati pada pH 4 dan perawatan pasteurisasi berikutnya tidak menghasilkan
peningkatan G ′ yang signifikan, sedangkan proses sterilisasi pada pH 6 menyebabkan nilai G of terbesar.

Di sisi lain, HPH menghasilkan penurunan yang signifikan dari G ′ untuk suspensi P. cruentum dan O. aurita pada
kedua nilai pH. Dengan demikian, struktur jaringan yang hadir dalam suspensi kontrol dari spesies mikroalga
dihancurkan oleh perawatan mekanis di bawah kondisi yang diteliti. Ramus dan Kenney melaporkan kerugian dalam
sifat rheologi massal dari exopolysaccharides mikroalga karena stres geser. Gaya geser disarankan untuk
mengganggu interaksi antara kopolimer, sehingga merusak struktur jaringan eksopolisakarida ini [27]. Selanjutnya,
Yap, Martin dan Scales menunjukkan HPH menyebabkan kerusakan jaringan agregat sel di bubur mikroalga,
menghasilkan pengurangan sifat reologi [12]. Dari hasil kami, pH tampaknya tidak memainkan peran penting
selama perawatan mekanis P. cruentum dan O. aurita. Selama pemrosesan panas berikutnya, struktur jaringan agak
pulih tergantung pada intensitas perlakuan panas (dalam kombinasi dengan pH).
Namun, meskipun peningkatan yang signifikan dalam G ′ diamati setelah sterilisasi pada pH 6 dibandingkan dengan
suspensi yang diobati HPH, tidak ada perbedaan yang signifikan yang ditemukan di G ′ antara suspensi yang
dipasteurisasi dan disterilkan. Jelas bahwa sedikit regenerasi struktur jaringan setelah perlakuan termal tidak
mengembalikan nilai awal G ′ untuk suspensi P. cruentum.

3.2.2. Pengaruh pengolahan pada perilaku aliran Perilaku aliran dari suspensi diproses dipelajari di bawah deformasi
yang lebih besar. Hasil disajikan pada Gambar. 6 sebagai viskositas pada laju geser tertentu (γ̇ = 10.5 s − 1) untuk
setiap suspensi. Membandingkan nilai η pada laju geser yang lebih rendah (γ̇ = 1,1 s − 1) mengarah ke kesimpulan
yang sama (data tidak ditampilkan). Suspensi dari Nannochloropsis sp., P. tricornutum dan Schizochytrium sp.
disajikan viskositas rendah dibandingkan dengan spesies mikroalga lainnya. Dalam kasus Nannochloropsis sp.,
Hanya perawatan sterilisasi pada pH 6 yang menyebabkan peningkatan η yang signifikan. Karena hal yang sama
diamati untuk G ′ (Bagian 3.2.1), dapat disimpulkan bahwa proses sterilisasi terutama mempengaruhi karakteristik
partikel yang menghasilkan peningkatan baik G ′ dan η. Meskipun tidak ada perbedaan yang signifikan ditemukan
antara suspensi kontrol dan suspensi setelah HPH dan / atau pasteurisasi, harus dicatat bahwa baik perawatan
mekanik dan termal mengubah perilaku aliran Nannochloropsis sp. suspensi dari Newtonian ke perilaku shear-
thinning (data tidak ditampilkan). Tidak ada efek yang jelas dari proses yang diperhatikan untuk suspensi
Schizochytrium sp. dan P. tricornutum.
Untuk spesies mikroalga lainnya, kesimpulan konsisten dengan yang dibahas dalam paragraf 3.2.1. Sedangkan
pengolahan mekanik dan / atau termal (terutama sterilisasi) menghasilkan viskositas yang meningkat dari suspensi
A.platensisand C.vulgaris, adecreaseinviscosity diamati setelah HPH dalam kasus P. cruentum dan O. aurita. Oleh
karena itu, struktur jaringan yang dibentuk oleh interaksi partikel sepanjang pemrosesan memiliki kontribusi besar
terhadap viskositas dan fluktuasi karakteristik suspensi mikroalga. Namun, perbandingan sifat viskoelastik dan sifat
aliran menunjukkan pentingnya fase kontinu untuk beberapa suspensi. Sedangkan suspensi kontrol dari C. vulgaris
pada pH 4 dan pH 6 menunjukkan nilai yang sama dari G ′, viskositas yang secara signifikan lebih tinggi diamati
untuk suspensi pada pH 6. Dengan kata lain, sebagai kontribusi struktur jaringan terhadap sifat reologi adalah serupa
untuk kedua suspensi, nilai viskositas menunjukkan bahwa penambahan struktur tambahan dibawa oleh fase serum
cair. Alasan yang sama adalah singkatan dari suspensi yang dirawat HPH dari C. vulgaris, karena viskositas yang
lebih besar diperoleh pada pH 6 sementara G yang lebih rendah diamati dibandingkan dengan pH 4. Demikian pula,
untuk suspensi P. cruentum itu juga menyarankan bahwa pH adalah faktor penting yang menentukan viskositas di
seluruh proses.
Kontribusi dari fase serum untuk viskositas keseluruhan suspensi lebih lanjut diselidiki oleh menentukan
theviscosity dari dipisahkanserumphase. Memang, fordilutedsuspensionscomprisingrigid partikel, hubungan
Einstein (Persamaan. (6)) menunjukkan bahwa viskositas ditentukan baik oleh sifat dari partikel yang tersebar dan
oleh karakteristik fase serum terus menerus:
η η η φ ·(1 [ ]· )s (6)

dengan η viskositas suspensi (Pa ·s), ηs viskositas medium pensuspensi yaitu fase serum (Pa ·s), [η] viskositas
intrinsik (dL / g) dan φ volume fasa partikel tersuspensi (g / dL) [21]. Hubungilah kontribusian sebelumpemukaan
untukmenghasilkan semua viskositas suspensi, percobaan geser stabil dilakukan pada fase serum terpisah. Karena
kandungan lipid yang tinggi dari Schizochytrium sp., Tidak ada pemisahan sempurna dari serum dan fase partikel
dapat dicapai dengan kondisi sentrifugasi yang diterapkan untuk spesies mikroalga ini.

Kurva aliran fase serum suspensi kontrol divisualisasikan pada Gambar. 7. Kedua grafik jelas menunjukkan perilaku
non-Newtonian fase serum P. cruentum suspensi, sementara semua fase serum lainnya berperilaku sebagai fluida
Newton. Kurva aliran fase serum suspensi P. cruentum dipasangkan oleh model hukum kekuatan (Persamaan. (4)).
Nilai estimasi rendah dari indeks perilaku aliran n (0,38 ± 0,01 dan 0,32 ± 0,01 untuk pH 4 dan pH 6, masing-
masing) menunjukkan perilaku shear-thinning yang kuat. Perilaku shear-thinning ini mungkin dikaitkan dengan
keberadaan exopolysaccharides dalam fase serum. Dalam literatur, dispersi exopolysaccharides P. cruentum telah
dilaporkan untuk menunjukkan sifat aliran geser-pengaluran dalam berbagai besar tingkat geser, karena orientasi
dan pemisahan rantai polimer di bawah geser [23,28]. Sel-sel diasumsikan utuh dalam suspensi kontrol, menyiratkan
bahwa perilaku penggesitan geser dan viskositas fase serum dapat terutama dikaitkan dengan exopolysaccharides
yang mudah larut dalam fase serum terus menerus. Sebaliknya, fase serum dari spesies mikroalga lainnya dicirikan
oleh perilaku aliran Newton, tetapi dengan nilai viskositas yang berbeda. Ini mungkin karena jenis dan jumlah
garam dan / atau zat polimerik yang larut dalam fase serum biomassa mikroalga yang berbeda. Terjadinya
exopolysaccharides dalam fase serum ini tidak dapat dikecualikan, namun dapat disimpulkan bahwa kontribusi
mereka terhadap perilaku aliran diabaikan.

Sifat partikel dan fase serum dapat diubah setelah diproses, kemungkinan menyebabkan perubahan viskositas serum.
Diamati bahwa fase serum dari semua spesies mikroalga (kecuali P. cruentum) juga menunjukkan perilaku Newton
setelah pemrosesan mekanik dan termal. Oleh karena itu, viskositas serum dari masing-masing suspensi (yang tidak
diproses) diperkirakan dengan menggunakan model Newtonian (Persamaan (3)). Spesies fiemikroalga yang baru.
Data ini dipastikan dengan nilai ηs pada γ̇ = 10.5s − 1 untuk (non-Newtonian) fase serum P. cruentum pada Gambar.
8. Pada tingkat geser yang dipilih ini, viskositas serum P. cruentum lebih dari sepuluh kali lebih tinggi dibandingkan
dengan spesies mikroalga lainnya, sebelum dan sesudah pemrosesan. Selanjutnya, fase serum P. cruentum sebagian
besar dipengaruhi oleh pengolahan. Setelah HPH, penurunan ηs diamati. Oleh karena itu, hasil ini mendukung
hipotesa bahwa HPH menghancurkan jaringan exopolysaccharide pada suspensi P. cruentum. Perlakuan panas
berikutnya tampaknya menginduksi interaksi antara polimer dalam fase serum. Telah diketahui bahwa proses termal
mengarah pada solubilisasi polisakarida larut air atau partikulat biomassa [29,30], yang mungkin menghasilkan
perubahan viskositas fasa serum.

Pengaruh yang berbeda dari pengolahan pada viskositas serum diamati untuk spesies mikroalga lainnya. Fase serum
Nannochloropsis sp. dan P. tricornutum menunjukkan viskositas konstan sekitar 1 mPa sebelum dan sesudah
pengolahan, menunjukkan bahwa tidak ada komponen peningkatan viskositas yang hadir dalam fase serum dari
spesies mikroalga ini. Sebaliknya, kontrol suspensi A. platensis, C. vulgaris dan O. aurita menunjukkan viskositas
serum yang lebih tinggi, dengan nilai yang secara signifikan lebih tinggi pada pH 6 dibandingkan dengan pH 4. Hal
ini mengarah pada kesimpulan bahwa interaksi yang bergantung pada pH hadir dalam kontinu. fase suspensi ini.
Setelah diproses, viskositas serum menurun untuk ketiga spesies mikroalga yang disebutkan di atas. Viskositas
serum yang lebih rendah pada saat pemrosesan mungkin menunjukkan transfer komponen peningkatan viskositas
dari fase serum, mungkin terkait dengan perubahan dan interaksi dengan partikel selama proses mekanis dan termal.

3.3. Hubungan antara sifat reologi dan karakteristik mikrostruktur partikel dan fase serum selama pemrosesan

Pengaruh pengolahan mekanik dan / atau termal pada mikro dievaluasi dengan mempelajari distribusi ukuran
partikel dan divisualisasikan dengan gambar mikroskopis. Sebagai efek yang berbeda dari pengolahan pada
karakteristik rheological yang diamati pada paragraf 3.2, efek pada struktur mikro juga tergantung pada spesies
mikroalga dan pada pH. Distribusi ukuran partikel volumetrik disajikan untuk seleksi spesies mikroalga pada
Gambar. 9 dan mikrograf perwakilan (100 × pembesaran) ditunjukkan pada Gambar. 10.

Ukuran partikel A. platensis terutama dipengaruhi oleh pengolahan dalam suspensi pada pH 6, sementara perubahan
minimal diamati untuk suspensi pada pH 4 (Gambar 9A). Pada pH 6, HPH mengakibatkan gangguan lengkap sel
mikroalga, menghasilkan distribusi ukuran partikel yang sempit di bawah 1μm. Gangguan lengkap mungkin
dianggap berasal dari karakteristik dinding sel A. platensis. Spesies ini, termasuk cyanobacteria prokariotik, berisi
lapisan-lapisan peptidoglycan, yang mudah diganggu, yang mudah terganggu oleh kekuatan mekanik [31]. Proses
sterilisasi selanjutnya menyebabkan agregasi menjadi partikel yang lebih besar hingga 100 μm. Fenomena ini
diasumsikan sebagai agregasi protein terdenaturasi, karena kandungan protein dapat mencapai hingga 63% dari
totalbiomassofA.platensis [32-34]. Kontribusi dari viskositas serum sangat terbatas, peningkatan besar dalam
parameter rheologi G ′ dan η setelah sterilisasi A. suspensi platensis dapat dikaitkan dengan pembentukan agregat
ini. Pengamatan serupa dilakukan untuk suspensi O. aurita (Gambar 9B). HPH menghasilkan ukuran partikel yang
menurun oleh gangguan lengkap sel mikroalga, karena ukuran partikel di bawah 50μm (rata-rata panjang sel utuh O.
aurita [35]) diamati. Ini juga secara visual dikonfirmasi oleh mikrograf yang disajikan pada Gambar. 10. Perlakuan
termal menghasilkan ukuran partikel meningkat karena pembentukan agregat. Perubahan sifat reologi G ′ dan η pada
pengolahan O. aurita

suspensi dapat dikaitkan dengan perubahan ukuran partikel ini. Untuk spesies mikroalga ini, tidak ada pengaruh pH
yang diamati, baik pada karakteristik rheological maupun pada distribusi ukuran partikel.

HPH dalam kondisi yang diterapkan terbukti teknik yang sukses untuk gangguan sel A. platensis dan O. aurita.
Namun, Nannochloropsis sp. Sel menunjukkan lebih tahan terhadap kondisi tekanan ini, karena tidak ada perbedaan
dalam distribusi ukuran partikel yang diamati sebelum dan sesudah HPH pada kedua nilai pH (Gambar 9C) dan sel
utuh divisualisasikan dalam mikrograf setelah HPH (Gambar. 10). Nannochloropsis sp. dikenal sangat tahan
terhadap aliran listrik yang digunakan [17], yang dianggap berasal dari komposisi dinding sel, struktur bilayer
cellulosicandalgaenanpolymers [25] .Spidenetal. Dilaporkan bahwa 80% Nannochloropsis sp. Sel-sel utuh setelah
HPH untuk 1 lulus pada 90-102 MPa berdasarkan analisis jumlah sel [16]. Tingkat gangguan sel yang rendah ini
sesuai dengan hasil yang diperoleh dalam penelitian ini. Namun, peningkatan ukuran partikel diamati setelah
pemrosesan termal, terutama untuk suspensi yang disterilkan pada pH 6. Mikrograf menunjukkan agregat sel utuh
yang tampaknya tertanam dalam bahan sel terlarut. Aglomerasi puing-puing sel setelah perlakuan termal biomassa
mikroalga telah dilaporkan sebelumnya dalam literatur tanpa perlakuan HPH sebelumnya [18]. Karena tidak ada
perubahan dalam viskositas serum yang diamati untuk Nannochloropsis sp. suspensi, dapat disimpulkan bahwa
peningkatan parameter rheological G ′ dan η setelah sterilisasi disebabkan oleh pembentukan agregat yang lebih
besar ini.

Sementara HPH dan proses termal sebagian besar mempengaruhi sifat reologi suspensi P. cruentum (Gambar. 5 dan
Gambar. 6), hanya perubahan kecil dalam ukuran partikel dari spesies mikroalga yang diamati (Gambar 9D).
Distribusi ukuran partikel bimodal diamati dalam suspensi kontrol pada kedua nilai pH, di mana satu puncak (1-
10μm) menyumbang sel tunggal dan puncak lainnya (10-100μm) untuk kelompok sel utuh, seperti yang diamati
secara visual di mikrograf ( Gambar. 10). Exopolysaccharides di P. cruentum mungkin bertindak sebagai perekat
antara sel utuh, dengan cara itu meningkatkan pengelompokan sel. HPH selanjutnya menghasilkan ukuran partikel
yang menurun untuk suspensi pada pH 6, sementara partikel yang lebih besar terbentuk dalam suspensi yang
dihomogenisasi pada pH 4. Hal ini diamati dari gambar mikroskopis (tidak ditunjukkan) bahwa tingkat gangguan sel
tampaknya tergantung pada pH, karena sel yang lebih utuh ditemukan pada suspensi HPH yang diremajakan pada
pH 4 dibandingkan dengan pH 6. Agregat yang lebih besar pada pH 4 terdiri dari sel utuh yang tertanam dalam
matriks materi sel, sementara pada pH 6 agregat yang lebih kecil dari sebagian besar materi yang dirilis diamati.
Pengaruh dari partikulat pada partikulat konsisten dengan alarger G ′ untuk pH 4 dibandingkan dengan pH 6 (namun
tidak signifikan). Agregat ini mungkin terdiri dari beberapa komponen, seperti protein denaturasi dan dinding sel
terkait (exo) polisakarida, karena jumlah protein dan karbohidrat yang sama ditemukan dalam P. cruentum biomassa
[36]. Selain itu, perbedaan dalam formasi agregat antara pH 4 dan pH 6 menunjukkan adanya interaksi yang
tergantung pH antara komponen yang disebutkan di atas. Sedangkan pasteurisasi pada pH 4 tidak menyebabkan
perubahan ukuran partikel yang signifikan, proses sterilisasi pada pH 6 menghasilkan peningkatan ukuran partikel.
Namun, agregat ini masih lebih kecil dibandingkan dengan partikel dalam suspensi yang dipasteurisasi. Kekentalan
viskositas dari sampel yang dihaluskan dari P. cruentum dengan demikian tidak hanya dianggap berasal dari ukuran
partikel, tetapi juga pada kontribusi sifat partikel lain dan viskositas fase serum yang agak lebih tinggi.

Demikian pula untuk P. cruentum, distribusi ukuran partikel bimodal diamati untuk suspensi kontrol C. vulgaris
(Gambar 9E). Agregat yang lebih besar dari sel utuh menunjukkan adanya gel polisakarida ekstraselular dalam
spesies mikroalga ini. Namun, dari literatur tidak jelas apakah exopolysaccharides terbentuk oleh spesies Chlorella.
Sedangkan beberapa penulis telah menggambarkan adanya polisakarida ekstraseluler sulfat dari Chlorella sp.
[37,38], penelitian lain tidak melaporkan adanya sel amplop di mikroalga ini [39]. Ketika suspensi C. vulgaris
diobati oleh HPH, agregat yang lebih besar terbentuk, terutama pada pH 6. Dari mikrograf itu dapat diamati bahwa
agregat terbuat dari bahan sel yang dilepaskan, menunjukkan bahwa gangguan sel telah terjadi. Pengamatan ini
sesuai dengan studi tentang Spiden et al., Di mana HPH dalam kondisi serupa (1 lulus pada 86-96 MPa) ditemukan
mengganggu sekitar 50% Chlorella sp. sel [16]. Ini mungkin bahkan meremehkan tingkat gangguan sel, karena
kerusakan dinding sel mungkin menghasilkan protoplas yang utuh. Protoplas ini menunjukkan ukuran dan bentuk
yang sama dengan sel yang tidak rusak, mempersulitnya untuk membedakannya dari sel utuh selama penghitungan
sel [18]. Memang, Yap et al. mengamati hanya 25% sel utuh setelah satu kali HPH pada 100 MPa [40].

Pemrosesan termal selanjutnya menghasilkan peningkatan ukuran partikel, terutama untuk suspensi yang
disterilisasi pada pH 6. Karena biomassa C. vulgaris mengandung sekitar 49-57% protein [34,41], kemungkinan
besar bahwa peningkatan ukuran partikel dapat dianggap sebagai agregasi. protein terdenaturasi. Berdasarkan
perubahan yang diamati dalam struktur mikro, perilaku reologi suspensi C. vulgaris selama pemrosesan dapat
dijelaskan. Kombinasi sel utuh dan kelompok sel menghasilkan G ′ besar suspensi kontrol, dengan nilai η lebih
tinggi pada pH 6 dibandingkan dengan pH 4 karena viskositas serum yang lebih tinggi. Setelah pemrosesan mekanik
dan / atau termal, viskositas suspensi meningkat karena pembentukan partikel yang lebih besar. Sebaliknya,
viskositas fase serum menurun. Seperti yang diamati dari mikrograf (Gambar. 10), dilepaskan bahan sel yang
ditemukan diagregat dalam sampel yang dirawat HPH-andHPH + TT. Dihipotesiskan bahwa metabolit yang
tersuspensi juga terlibat dalam pembentukan agregat, yang mengarah ke komponen yang kurang meningkatkan
viskositas dalam fase serum dan dengan demikian menghasilkan viskositas serum yang lebih rendah.

4. Kesimpulan

Penelitian ini membandingkan sifat reologi dari tujuh spesies mikroalga yang tersedia secara komersial dalam
suspensi berair. Karakteristik rheologi sebagian besar tergantung pada spesies mikroalga. Suspensi P. cruentum, C.
vulgaris dan O. aurita menyajikan sifat struktural terbesar, sedangkan suspensi lainnya tidak dapat dianalisis dengan
deformasi kecil. Hal ini menunjukkan perbedaan dalam biopolimerkomposisi di antara mikroba yang diteliti.
Komposisi biomassa mikroalga tergantung pada kondisi budidaya dan panen, karakterisasi komposisi biopolimer
dari biomassa mikroalga yang diteliti akan memberikan wawasan tambahan yang berguna ke dalam perilaku reologi
mereka. Selanjutnya, diamati bahwa sifat reologi suspensi kontrol adalah pH-dependent, karena nilai koefisiensi
konsistensi yang lebih besar diamati untuk suspensi pada pH 6 dibandingkan dengan pH 4. Interaksi beberapa
biopolimer, seperti polisakarida dan protein dinding sel, dipengaruhi oleh kondisi lingkungan seperti pH. Oleh
karena itu, penyelidikan rinci dari struktur polisakarida dinding sel akan memberikan pemahaman yang lebih baik
dari potensi penstrukturan mikroalga, informasi yang saat ini sangat langka dalam literatur.

Hasil yang diperoleh juga membuktikan bahwa sifat-sifat reologi suspensi mikroalga dapat diubah selama
pemrosesan mekanik dan / atau termal. Perbedaan dalam ruptur sel oleh HPH ditemukan antara spesies mikroalga
yang diteliti, yang dapat dikaitkan dengan ukuran dan kekakuan sel. Pengaruh pengolahan termal berikutnya pada
struktur mikro dan sifat reologi dipengaruhi oleh perawatan mekanis sebelumnya, karena pemrosesan termal
ditunjukkan untuk meningkatkan interaksi antara materi sel yang dilepaskan. Di sisi lain, diamati bahwa proses
sterilisasi juga dapat menyebabkan solubilisasi komponen sel utuh, seperti halnya untuk Nannochloropsis sp.
skorsing. Oleh karena itu, menerapkan urutan yang berbeda dari proses mekanis dan termal mungkin memberikan
informasi tambahan yang menarik dalam menyesuaikan sifat structural suspensi mikroalga.

Penelitian ini memungkinkan pemilihan spesies mikroalga terhadap aplikasi yang diinginkan. Misalnya, biomassa
Nannochloropsis sp., P. tricornutum dan Schizochytrium sp. dapat menarik untuk memperkaya produk makanan di
ω3-PUFA, tanpa mengganggu sifat struktural produk. Ini dapat diinginkan dalam sistem makanan cair, seperti jus
buah dan smoothie. Di sisi lain, biomassa P. cruentum menunjukkan potensi penataan besar dan dengan demikian
dapat digunakan sebagai bahan multifungsi dalam produk makanan, memberikan nilai gizi yang lebih baik serta efek
penebalan pada produk makanan. Demikian pula, biomassa dari C. vulgaris dan A. platensis menemukan aplikasi
sebagai bahan multifungsi dalam produk makanan yang diproses secara mekanis dan / atau termal, seperti sup
berbasis sayuran atau beberapa produk susu. Meskipun potensi besar ditunjukkan untuk aplikasi biomassa mikroalga
dalam produk makanan berdasarkan sifat penataan, penelitian tambahan diperlukan pada stabilitas gizi komponen
mikroalproproses yang lebih baik daripada aspek kualitas makanan yang baik, seperti warna dan aroma dari produk
makanan yang diperkaya.