2.

Bahan dan Metode

2.1. Bahan
Ceftriaxone diberikan oleh Roche (batch n ° 100193830405973001) atau Discovery
Fine Chemical (batch n ° 73777) dan sesuai dengan European Pharmacopoeia edisi 9
monograf (European Pharmacopoeia 9.0, 2017). Semua eksipien merupakan pharmaceutical
grade, dibeli dari pemasok farmasi umum. Semua bahan kimia dan pelarut digunakan
adalah kelas analitis, dibeli dari Sigma-Aldrich (Prancis) atau VWR (Prancis).

2.2. Metode

2.2.1. Persiapan sampel CTX

CTX dipelajari dengan berbagai kondisi, sebagai bahan baku (flowability, kelarutan,
kontrol kondisi untuk eksposur) atau terkena berbagai kondisi atmosfer yang berbeda-beda
zona iklim, jumlah yang berbeda dari formulasi simulasi air yang mengandung beberapa air,
atau operasi farmasi yang berbeda. Setelah paparan CTX, sampel melepuh di alu / alu lepuh
dan menjalani pengujian stabilitas yang dipercepat (RH 40 ° C / 75%) dengan kontrol analitik
pada Waktu yang ditetapkan (inspeksi visual, HPLC mendefinisikan kandungan CTX, Karl
Fischer menetapkan kadar air, NIR, PXRD) dan pengujian kompatibilitas dengan eksipien,
seperti yang dijelaskan di bawah ini

2.2.1.1. Paparan CTX terhadap berbagai kondisi kelembaban / suhu

Bubuk CTX terpapar pada berbagai kondisi yang mensimulasikan kelembaban udara
di berbagai tempat zona iklim. Sampel dari 4g bubuk CTX secara akurat ditimbang dalam
wadah timbangan aluminium. Sampel disimpan di Chamber iklim (Firlabo SP540_BVEHF)
sesuai dengan kondisi ICH berikut untuk suhu dan kelembaban:
- HR 25 ° C / 60% untuk waktu pemaparan 6h atau 24 jam
- HR 25 ° C / 75% untuk waktu pemaparan 6h atau 24 jam
- HR 40 ° C / 75% untuk waktu pemaparan 6h atau 24h atau 7 hari
Durasi paparan 24 jam atau 7 hari dipilih untuk meniru kemungkinan paparan iklim
selama pekerjaan farmasetikal. Sampel mengalami agitasi tiga dimensi
memastikan homogenitas menggunakan alat Turbula pada akhir periode paparan dan
kemudian blister dikemas dalam blister aluminium untuk analisis langsung atau studi
stabilitas lebih lanjut.
2.2.1.2. Membasahi CTX
Air disemprotkan pada sampel CTX (4g) yang diletakkan di atas nampan kaca,
menggunakan semprot manual bertekanan dengan selang plastik. Sampel ditimbang secara
akurat sebelum dan sesudah penyemprotan untuk mempelajari dampak air yang ditambahkan
selama proses perumusan pada stabilitas CTX.
Kondisi dengan 0%, 5%, 10%, 15% dan 20% berat / berat (b / b) air ditambahkan untuk di
amati efeknya. Sampel basah CTX dicampur menggunakan alat Turbula pada akhir
penyemprotan dan melepuh di blister aluminium untuk segera atau untuk analisis stabilitas
lebih lanjut.

2.2.1.3. Simulasi proses farmasi pada CTX

Dampak dari beberapa proses farmasi umum dipelajari. Setiap proses itu
disimulasikan sebagai berikut:
- Grinding : Bubuk CTX digiling dengan mortar dan penumbung selama 5 menit.
- Pemadatan / penghancuran (simulasi granulasi kering) : ruang kompresi
tekan tablet (K0000114, Korsch Pressen, Jerman) diisi secara manual. Bubuk CTX
yang terkandung dalam ruang kompresi kemudian dikompres. Tablet diproduksi
kemudian dihancurkan dengan mortar dan penumbuk.
- Kompresi : Tablet CTX murni dibuat dengan kompresi langsung menggunakan
alat hydraulic press (Perrier Labotest®, Perancis). Ruang kompresi
secara manual diisi dengan CTX 200 mg dan dikompres dengan tekanan 80 MPa
atau 150 MPa pada serbuk dengan permukaan datar dengan ukuran 10 mm.
- Pembasahan / Pengeringan (simulasi granulasi basah) : bubuk CTX ditimbang,
ditransfer ke dalam mortar, disemprot dengan air murni (15% b / b atau 30% b / b) dan
dicampur dengan spatula. Campuran basah dikeringkan dalam oven pada suhu 40 ° C selama
24 jam.

Setelah dipersiapkan, semua sampel percobaan diproses (grinding, compaction /

crushing, kompresi dan pembasahan / pengeringan) ditimbang, ditempatkan dalam tabung
kaca dan dihomogenisasi di Turbula ® selama 10 menit pada 67 rpm. Setiap sampel dibagi
menjadi 4 botol kaca untuk dipelajari kandungan CTX pada waktu 0 (T0), 1 bulan (T1m), 3
bulan (T3m) dan 6 bulan (T6m). Setiap termos kaca itu dikemas dan disegel di lepuh
aluminium.
2.2.1.4. Studi kelarutan CTX dalam cairan eksipien
Untuk studi kelarutan CTX dalam cairan eksipien, 500mg CTX ditimbang secara
akurat dan secara progresif ditambahkan ke 10 ml cairan eksipien di bawah pengadukan
magnetik, botol kaca dalam keadaan tertutup. Setiap kali dissolusi tercapai (larutan menjadi
jernih), jumlah lebih lanjut ditambahkan.

2.2.1.5. Flowabilitas bubuk CTX

Flowabilitas bubuk mentah CTX diuji menurut European Pharmacopoeia (9
th ed.). Secara singkat, 105g bubuk CTX ditempatkan di corong dari peralatan aliran
(Pharmatest, PTG-S4, Jerman) dengan nosel 25mm, 15mm dan 10mm. Aparatus
mendaftarkan waktu yang diperlukan untuk 100 g bubuk agar mengalir melalui spontan saat
membuka nosel ke keseimbangan di bawahnya. Tiga langkah diambil. Waktunya
dianggap tak terbatas ketika 100g gagal mengalir.
CTX dicampur dengan dicalcium phosphate (Encompress, 8% b / b), silika koloid (Aerosil,
0,5% b / b), bedak (0,5% b / b) dan stearat Mg (0,5% b / b) atau kombinasi dari semua yang
dikutip eksipien diuji dengan protokol yang sama.

2.2.2. Studi stabilitas sampel CTX

Sampel ditempatkan di ruang iklim (Prolabo, Prancis) dengan kelembaban relatif 40 °

C / 75% (HR) yang sesuai dengan kondisi ICH yang ditentukan untuk zona tropis (zona IV)
untuk mempercepat penilaian Konferensi Internasional tentang Harmonisasi (ICH) stabilitas.
T0 sampel disimpan pada suhu 4 ° C sampai analisis. Pada waktu yang ditentukan (T0, T1m,
T3m, T6m) sampel ) sampel dipindahkan dan disimpan pada suhu 4 ° C sampai dianalisis.

2.2.3. HPLC

Sebuah metode reverse HPLC pasangan pasangan ion dikembangkan untuk analisis
CTX. Secara singkat, pemisahan kromatografi dilakukan pada kolom fase terbalik C18
(YMC ODS-H80 150 x 4,6 mm, 4 μm) pada 40 ° C, dan digabungkan ke detektor array dioda
yang ditetapkan antara 220 dan 330 nm. Laju aliran ditetapkan pada 1 mL / menit dan sampel
dianalisis selama 15 menit setelah 2 jam equilibrium. Fase gerak adalah kombinasi larutan
tetrametilamonium bromida (18 mM, agen pasangan ion) dilarutkan dalam buffer fosfat (25
mM, pH 7,5) dan dicampur dengan metanol (72:28,% volume / volume (v / v)) di bawah
mode elusi isokratik. Untuk persiapan sampel, langkah pembubaran awal menggunakan
metanol dan / atau buffer fosfat sebagai pelarut diaplikasikan, dilanjutkan dengan langkah
filtrasi melalui saringan membran 0,45 μm. Metode divalidasi berdasarkan pedoman ICH.
Pengujian bersifat linier pada kisaran konsentrasi 24-36 μg / ml.

Metode spesifitas dievaluasi dengan menyuntikkan masing-masing eksipien sendirian

pada konsentrasi yang sama dengan campuran CTX-eksipien. Diamati bahwa tidak ada
puncak muncul pada waktu retensi yang sama dengan puncak CTX. Disimpulkan bahwa
metode HPLC selektif dalam kaitannya dengan eksipien persiapan campuran.

2.2.4. Karl Fischer

Kandungan air dalam sampel diukur dengan metode titrasi volumetrik Karl Fischer
dengan menggunakan Titralab TIM 580 t suplai sistem oleh Radiometer analitis (Titration
Manager). sistem dilengkapi dengan sel titrasi (100 mL), 10 mL autoburette dan M 241
Elektroda Platinum. Titrator Karl Fischer diisi dengan reagen Hydranal-Komposit 5
dan dikalibrasi dengan 10 μL air murni untuk menentukan titer yang tepat dari
reagen (10,0 mg H 2 O / g). Parameter titrator Karl Fischer berikut telah digunakan: a
polarisasi elektroda 50 mA, voltase titik akhir 200 mV, laju titrasi maksimum
5 mL / menit, drift sebagai kriteria berhenti 50 µg / menit dan pada 500 t / min pengadukan
magnet.
Metode Karl Fischer untuk penentuan kadar air digunakan sebagai berikut: 40 mL
dari metanol ditempatkan di dalam sel titrasi dan dititrasi dengan komposit Hydranal 5 sejauh
titik akhir yang ditunjukkan oleh elektroda terpolarisasi. Hasil bobot sampel serbuk yang
akurat (dari 100 mg sampai 150 mg) kemudian ditambahkan ke sel Karl Fischer, dilarutkan
dalam labu metanol selama 10 menit sebelum titrasi. Kemudian reagen titrasi ditambahkan ke
ujung yang baru titik. Jumlah air dalam sampel yang dianalisis ditampilkan secara otomatis
dan kelembaban isi dihitung Titrasi triplikat dilakukan untuk setiap sampel.

2.2.5. Near spektroskopi InfraRed (NIR)

Alat analisa FT-NIR Antaris II (Instrumen ThermoScientific, Madison, USA)
digunakan untuk mendapatkan semua spektrum. Spektrometer FT-NIR terdiri dari
interferometer Michelson, sumber cahaya kuarsa halogen (50 W), detektor InGaAs yang
cocok dan integrasi Antaris II sphere untuk pantulan difusi. Akuisisi dan perlakuan spektrum
dilakukan menggunakan Result,
Analis TQ (versi 6.21) dan perangkat lunak Omnic (versi 6.1a). Sampel dianalisis
menggunakan Botol gelas 1,5 mL (Chromacol, diameter 10 mm, Instrumen
ThermoScientific). Bubuk diletakkan di botol kaca ditempatkan di jendela safir dan dipindai
untuk mendapatkan spektrum reflektansi difus. Parameter akuisisi adalah rata-rata 32
pemindaian tambahan, 8 cm -1 dari resolusi, rentang spektral 9999-4000 cm -1 , spektrum latar
belakang harian ruangan lingkungan Hidup. Untuk setiap sampel, spektra dicatat dalam
rangkap tiga. Vial diputar dalam tiga dimensi gerak secara manual untuk homogenise sampel
sebelum masing-masing akuisisi.

2.2.6. Principal Component Analyses (PCA)

Semua model PCA dibuat menggunakan perangkat lunak Analis TQ. Tiga model
dibangun untuk dievaluasi dampak paparan, penambahan air dan proses farmasi pada CTX.
Semua spektrum pra-perlakuan dengan menggunakan koreksi awal dan Standard Normal
Variate (SNV). Untuk model pemaparan, seluruh rentang spektral tanpa pra-perlakuan lebih
lanjut diperlukan. Pra- perlakuan tidak digunakan untuk melestarikan informasi tentang sifat
fisik sampel. Dalam kasus penambahan air dan model proses farmasi, rentang spektral
dibatasi (7482.45 sampai 4666,89 cm -1 ) digunakan untuk fokus pada zona khusus CTX dan
air.
Untuk meningkatkan informasi spektral dan memungkinkan pemisahan yang lebih
baik, turunan pertama Savitzky-Golay adalah diterapkan pada rentang spektral yang dipilih
dalam kasus model penambahan air. Spektrum spesifik Daerah untuk model penambahan air
kemudian dipilih antara 7482,45 sampai 4666,89 cm -1. Didalam zona, pita penyerapan air
spesifik dan kelompok fungsional CTX digabungkan memungkinkan diskriminasi yang lebih
baik.

2.2.7. Difraksi sinar X

Analisis difraksi sinar-X dengan resolusi tinggi (PXRD) dianalisis secara PANalytical
X'Pert Pro diffractometer menggunakan anticathode Cu dan monokromator utama (Ge 111)
kristal untuk mendapatkan radiasi monokromatik (λCu = 1,5406 Å). Difraktogram rutin dari
Serbuk kontrol CTX dan preformulasi CTX direkam menggunakan PANalytical X'Pert Pro
Difraktometer terdiri dari monokromator grafit dengan radiasi CuKα (λ = 1,5418 Å).
Data dikumpulkan dengan menggunakan geometri refleksi dengan goniometer 2 sumbu (theta
/ theta atau theta / 2theta) dan pemegang sampel yang berputar untuk membatasi efek
orientasi pilihan. Program DICVOL06 digunakan untuk mengindeks pola x-ray CTX
(Boultif, 2004). Difractogram dianalisis dan disimulasikan menggunakan algoritma Le Bail
(Le Bail, 2005) untuk mengekstrak intensitas difraksi dan disempurnakan dengan
menggunakan metode pencocokan profil dengan FullProf Suite perangkat lunak (Rodriguez-
Carvajal, 1993) atau program JANA2006 (Petricek, 2014). parameter mikrostruktur (ukuran
dan strain kristal) diekstrak dari diagram PXRD dengan mengurangi kontribusi pelebaran
puncak instrumental sesuai dengan kalibrasi dengan standar LaB 6 NIST atau dengan
pendekatan parameter fundamental.

2.2.8. Kesesuaian studi dari CTX dengan eksipien

Daftar 87 eksipien potensial untuk pengembangan farmasi lebih lanjut telah dibuat.
Eksipien untuk formulasi padat, semi padat dan cair lebih disukai (tapi tidak secara eksklusif)
dipertimbangkan dari eksipien yang umum digunakan pada anak-anak yang dikomersialkan
formulasi (Tabel S1). Kompatibilitas studi campuran biner CTX - eksipien adalah dilakukan
sebagai berikut: Timbangan dengan tepat jumlah CTX (500 mg, 600 mg atau 750 mg)
dicampur dengan masing-masing eksipien yang diuji dengan rasio 1: 4 atau rasio 1: 1
tergantung pada sifat eksipien (Tabel S1). Setiap campuran dibagi menjadi tiga fraksi dan
disimpan di dalamnya botol kaca tertutup pada kondisi studi stabilitas umum, yaitu pada suhu
4 ° C untuk kondisi T0, di kamar suhu (RT) dan dalam oven pada 40 ° C (T40) hingga 6
bulan. Ekstrak halus bubuk dicampur dengan CTX secara langsung dalam mixer Turbula®
pada suhu 67 rpm selama 10 menit. Serpihan dan pelet eksipien digiling secara manual
dengan lesung dan alu (5 menit) sebelum dicampur dengan CTX dalam mixer Turbula® pada
suhu 67 rpm selama 10 menit.
Eksipien cairan dan berminyak dicampur dengan CTX dengan pengadukan magnet
sampai homogenisasi lengkap (10 menit) tercapai, ketika masing-masing fraksi ditarik sambil
diaduk. Eksipien semi padat dan wax dicairkan dengan pemanasan 10 ° C di atas titik leleh
dan diperlakukan seperti cairan dan minyak. Di beberapa kasus khusus, untuk cairan yang
sangat kental, sampel digabungkan dengan CTX sampai
homogenisasi (10 menit). Semua sampel dipisahkan dan aliquot dikemas dalam
lepuh aluminium untuk memudahkan studi stabilitas. Penentuan kadar CTX dalam campuran
biner diukur dengan metode HPLC setelahnya persiapan sampel sebagai berikut:
Massa yang tepat dari campuran CTX dengan eksipien setara dengan 30 mg CTX adalah
ditimbang secara akurat dan dilarutkan dalam labu volumetrik 100,0 mL dengan buffer fosfat.
SEBUAH Fraksi metanol yang cukup sedikit ditambahkan bila diperlukan sesuai dengan
kelarutannya eksipien. Solusinya disaring melalui membran nilon 0,45 µm dan diencerkan
menjadi sepersepuluh dengan buffer fosfat sebelum injeksi ke dalam sistem HPLC.
Konten CTX adalah dianalisis dalam rangkap tiga dan kehadiran puncak produk
degradasi dievaluasi. Eksipien dianggap kompatibel ketika konten CTX berada di 100 ± 10%
setelah 6 bulan di 40 ° C / 75% RH dan tidak ada produk degradasi yang diamati
dibandingkan dengan CTX kontrol. Mereka dianggap tidak kompatibel saat konten CTX
berada di luar batas 100 ± 20% atau, dari 100 ± 10% di hadapan produk degradasi. Jika
kontennya berada di luar batas CTX ± 10% tapi dalam batas 100% ± 20% dan tidak ada
produk degradasi yang diamati, eksipiennya dianggap sebagai eksipien lini kedua, untuk diuji
lebih lanjut jika digunakan.

2.2.9. Analisis statistik

Hasil statistik dibandingkan dengan uji t Student dengan p <0,05 sebagai batas
signifikansi pada perangkat lunak Excel.

3. Hasil dan Pembahasan

3.1 karakterisasi zat mentah CTX

Tes preformulasi awal, yaitu sifat mengalir dari bedak, air yang sesuai metode dosis,
kadar air bahan baku, kelarutan dalam pelarut tidak berair dan struktur kristal dilakukan pada
bahan baku CTX. CTX digunakan untuk preformulasi ini Penelitian adalah batch bahan baku
ceftriaxone sodium yang sesuai dengan Eropa Pharmacopoeia 9.0 monograf. Itu adalah
bubuk kristal yang tidak berbau. Studi flowabilitas kami dilakukan menurut European
Pharmacopoeia (9 th ed.) menunjukkan hal itu CTX tidak mengalir bebas dari corong.
Kemampuan mengalir diklasifikasikan sebagai mengambil tak terbatas
waktu, karena seluruh sampel (100 g) CTX mentah gagal mengalir melalui nosel. Tambahan
dari pengencer (Encompress), atau glidants / pelumas umum (silika koloid, talek, stearat Mg)
tidak memungkinkan aliran lengkap melalui campuran bubuk. Morfologi tidak teratur
aspek bubuk (data tidak ditampilkan) mungkin menjelaskan flowability miskin, yang mana
 Oleh karena itu diidentifikasi sebagai tantangan penting untuk pengembangan dosis
kering lebih lanjut. Sejak CTX solusi berair dilaporkan tidak stabil (de Diego Glaria 2003,
2010, Gaudin dkk. 2015), kandungan air formulasi diidentifikasi berpotensi kritis
stabilitas. CTX adalah hidrat yang mengandung 3,5 molekul air untuk satu molekul CTX,
yang mewakili 9,5% b / b air dari berat totalnya. Isi air CTX yang akurat hanya bisa
ditentukan dengan menggunakan metode Karl Fischer. Rugi pengeringan tidak bisa
digunakan sebagai pengganti Karl Fischer karena tidak bisa mendeteksi air kristal terikat.

CTX dilaporkan tidak stabil di air. Pemaparannya terhadap kondisi penuaan yang dipercepat
(40 ° C / 75% RH) pada nampan menghasilkan degradasi visual dan pencoklatan bubuk CTX
setelah 2 bulan. Lepuh plastik ternyata tidak cukup melindungi dan degradasi
CTX diamati (data tidak ditampilkan). Lepuh alumunium diperlukan untuk melindungi CTX
dari degradasi selama 6 bulan pada RH 40 ° C / 75% sambil mempertahankan kadar airnya
(98,1% +/- 3% dan 104,8 +/- 5% untuk CTX dan kadar air masing-masing setelah 6 bulan
dibandingkan dengan T0 kondisi).
Kelarutan CTX dipelajari di berbagai pelarut farmasi (misal eksipien yang dikutip
oleh studi kompatibilitas pada data pelengkap Tabel S1). Tidak ada yang mencapai kelarutan
500 mg Dosis CTX kurang dari 10 ml, yang sesuai dengan pemberian oral atau dubur.
Hal ini sesuai dengan monografi European Pharmacopoeia 9.0 CTX dimana kelarutannya
digambarkan sebagai tinggi air tapi rendah dalam pelarut tidak berair.
Untuk mengkarakterisasi fase kristal dan mikrostruktur CTX dan mengikuti
evolusi dalam kondisi yang berbeda, PXRD resolusi tinggi dilakukan pada CTX mentah
bahan. Diagram diindeks dan parameter sel satuan yang ditemukan disempurnakan oleh profil
metode pencocokan. Hasil penyempurnaan yang mengarah ke keandalan koreksi latar
belakang terbaik koefisien (Rwp) memberikan parameter sel satuan monoklinik berikut: a =
15,439 (6) Å, b = 18,534 (5) Å, c = 4,765 (1) Å, dan β = 98,66 (3) yang mengarah ke volume
sel ca. 1348 (1) Å 3.
Bahkan jika kualitas data tidak cukup untuk memvalidasi sel satuan ini, perlu dicatat
bahwa menurut kepadatan yang wajar, 2 molekul harus berada di dalam sel satuan, yaitu
kompatibel dengan kelompok ruang monoklinik non centro-simetris seperti yang diharapkan
untuk sebuah senyawa kiral. Selain itu, sel unit ini memungkinkan reproduksi diagram
PXRD. Parameter mikrostruktur dapat diperoleh dari perluasan puncak setelah dikurangi
kontribusi instrumental Ukuran rata-rata kristal CTX diperkirakan mencapai ca. 70 nm dan
mikro-strain dalam kristal diperkirakan mencapai ca. 25.10 -4. Nilai-nilai ini
selanjutnya dijadikan acuan untuk perbandingan dengan CTX dengan berbagai kondisi.

3.2 Sensitivitas CTX terhadap air

3.2.1. Sensitivitas CTX terhadap air di bawah kondisi atmosfir (hygroscopicity)
Tujuan dari penelitian ini adalah untuk mengevaluasi konsekuensi stabilitas jangka
panjang dari pemaparan untuk air selama pengolahan. Karena larutan berair CTX sebelumnya
tidak stabil (de Diego Glaria et al., 2003, 2010; Gaudin et al, 2015; Sar et al., 2006; Zajac dan
Muszalska, 1998), kadar air CTX dan stabilitas CTX dipantau saat terkena berbagai
kondisi lingkungan (suhu dan kelembaban relatif). Dampak pada konten CTX,
kadar air dan stabilitas (disimulasikan oleh studi penuaan dipercepat terkena dan melepuh
CTX) diamati. Pada T0, untuk semua kondisi yang diuji, eksposur CTX yang lebih lama
sampai kelembaban sekitar (6h, 24h atau 7 hari, hasil tidak ditampilkan selama 6 jam) tidak
menghasilkan pengambilan air yang lebih tinggi (Gambar 1). Pada 25 ° C / 60%
RH dibandingkan dengan kontrol, tidak ada pengambilan air utama yang diamati (kurang dari
0,2%). Di Sebaliknya, ketika CTX terkena suhu yang sama tetapi kelembaban yang lebih
tinggi ada a serapan air yang kecil tetapi signifikan (3,1% dan 1,8% dibandingkan dengan
kontrol untuk 25 ° C / 75% RH dan kondisi RH 40 ° C / 75% masing-masing, p-value <0,05).
Dengan demikian, CTX tampaknya tidak menjadi obat higroskopis. Anehnya,
pengambilan air awal hanya setelah paparan lebih tinggi 25 ° C / 75% RH dibandingkan
dengan 40 ° C / 75% RH. Ini bisa dikaitkan dengan sifat termal dari CTX dijelaskan dalam
literatur (Zhang et al, 2005b). Sebagai langkah dehidrasi pertama dimulai sekitar 40 ° C,
mungkin CTX mulai kehilangan air pada 40 ° C, yang mengarah ke air yang lebih rendah
serapan dibandingkan dengan 25 ° C. Semua (HPLC ditentukan) hasil konten CTX dianggap
sama terlepas dari awal paparan atau penuaan dipercepat. NIR spektrum kelembaban dan
suhu terkena CTX sampel dianalisis lebih lanjut. Plot scatter 3D menyoroti fakta bahwa
selama paparan 25 ° C / 75% RH, serapan air lebih tinggi daripada di 25 ° C / 60% kondisi
RH (Gambar 2). Hasil ini menguatkan titrasi Karl-Fisher: paparan awal memiliki pengaruh
pada serapan air CTX. Selanjutnya, sampel yang diajukan untuk mempercepat penuaan
adalah ditandai dengan skor PC3 yang lebih tinggi pada 6 bulan dibandingkan dengan kondisi
T0. Karena tidak ada jurusan variasi kadar air diamati antara T0 dan 6 bulan untuk masing-
masing spesifik kondisi (RH CTX atau 25 ° C / 60% atau RH 25 ° C / 75%), peningkatan
skor PC3 ini dapat terkait dengan beberapa perubahan fisik.
Paparan terhadap kelembaban tidak mengubah stabilitas jangka panjang CTX seperti yang
ditunjukkan oleh HPLC meskipun menyebabkan serapan air (kecil) yang signifikan, dan
beberapa perubahan fisik diamati di NIR. Hasil ini memastikan bahwa produksi lokal dapat
dipertimbangkan di berbagai negara zona iklim.

3.2.2. Sensitivitas CTX terhadap air ditambahkan

Ketika jumlah air yang berbeda (5 hingga 20% b / b) disemprotkan ke atas bubuk
CTX, stabilitas CTX jangka pendek dan jangka panjang diukur dari T0 hingga 6 bulan dalam
suatu studi stabilitas dipercepat dan kandungan air yang tepat dianalisis menggunakan Karl
Fischer metode untuk semua kondisi pada semua titik waktu (Gambar 3). Beberapa sampel
(15% air dan 20% disiram air) pada 6 bulan tidak dianalisis atau termasuk dalam kestabilan
dan studi NIR karena degradasi visual yang masif.
Hasilnya menunjukkan bahwa semakin banyak air yang disemprotkan, semakin
banyak air yang ditemukan di CTX sampel, pada T0 dan pada setiap titik waktu stabilitas.
Persentase air yang lebih tinggi kering sebagian selama stabilitas, namun tetap berada di atas
kondisi kontrol. Semakin banyak air ditambahkan, semakin banyak terjadi degradasi CTX.
Semua kondisi dan waktu menunjukkan degradasi dengan signifikan
penurunan kandungan CTX (p <0,05) kecuali kondisi di mana 5% air disemprotkan (p> 0,05
untuk semua waktu T0 sampai 6 bulan). NIR spektrum CTX kontrol dan CTX dengan
penambahan air selama penuaan dipercepat mereka digunakan untuk PCA.
Seperti yang disajikan pada Gambar 4 pengaruh air ditunjukkan dengan perbedaan 5
kelompok: CTX, CTX dengan 5%, 10%, 15% dan 20% penambahan air. Semua sampel
kontrol CTX serupa, menunjukkan stabilitas yang baik selama percepatan penuaan (T0, 1
bulan dan 3 bulan) seperti yang ditunjukkan oleh hasil HPLC. Namun, hasil dari empat
kondisi lainnya di T0, 1 bulan dan 3 bulan dipisahkan dengan baik menunjukkan perubahan
(fisik dan / atau kimia) dengan PC1 menurun dan PC2 meningkat mengingat satu kelompok
tertentu. Ini model memungkinkan karakterisasi cepat kadar air dan degradasi sampel CTX
dan kemungkinan akan berguna selama penilaian perumusan di masa depan. Singkatnya, air
yang ditambahkan dengan penyemprotan dapat dipantau secara memadai dengan
menggunakan Karl Fischer dan Teknik NIR.
Kestabilan jangka panjang CTX tidak terpengaruh secara signifikan oleh penambahan
awal dari 1,4% b / b air (sesuai dengan 5% air disemprot, dikeringkan sebagian). Namun,
CTX degradasi signifikan dari T0 setelah 2,8% air ditambahkan (sesuai dengan 10%
air yang disemprot). Sensitivitas CTX terhadap air dinyatakan tinggi, tidak termasuk
kemungkinan adanya merumuskan CTX dengan adanya air. Air yang teradsorpsi oleh
eksipien (misalnya selulosa turunan) atau terkandung dalam beberapa pelarut hidrofilik
(etanol, PEG, dll.) berpotensi menyebabkan degradasi CTX Oleh karena itu, penelitian lebih
lanjut tentang campuran biner dilakukan.

3.3 Sensitivitas CTX terhadap operasi farmasi umum

Beberapa proses farmasi disimulasikan untuk mengevaluasi pengaruhnya terhadap

CTX secara segera dan stabilitas jangka panjang. Grinding dipelajari untuk melihat dampak
kekuatan fisik pada CTX integritas. Pemadatan - penghancuran dipertimbangkan dalam
simulasi proses granulasi kering Dalam hal ini dua proses hadir, pemadatan dan
penghancuran, yaitu dilakukan dalam mortar dan dianggap mirip dengan penggilingan.
Pembasahan dan pengeringan di uji coba mensimulasikan proses granulasi basah,
menggunakan dua jumlah air yang berbeda, 15% atau 30% w / w. Kandungan air, spektrum
NIR dan HPLC segera dimonitor (T0) dan selama 6 bulan dari studi stabilitas dipercepat.

Kandungan air dari CTX olahan tidak bervariasi secara signifikan dibandingkan
dengan kontrol (non- diproses) CTX untuk semua proses yang diuji. Karena proses farmasi
berdampak fisik Sifat-sifat sampel CTX, NIR tampaknya menjadi teknik analisis yang cocok.
Pra- pengolahan dikurangi menjadi hanya SNV dan koreksi awal untuk menjaga informasi
yang terkait untuk sifat fisik Model PCA menyoroti dampak proses farmasi
(Gambar 5). Pertama, model dibagi dalam dua bagian berdasarkan pada skor PC1: satu
mengandung kontrol CTX dan grinding, dan yang lainnya dengan kondisi simulasi granulasi
(baik kering atau basah). Kedua, kontrol CTX dan sampel penggilingan dipisahkan oleh PC2
skor. Model PCA memungkinkan kita untuk memisahkan sampel berdasarkan proses farmasi
terapan. Model ini didasarkan pada karakteristik fisik CTX dan karena alasan ini
tidak mencerminkan degradasi CTX secara khusus dari waktu ke waktu.
HPLC menentukan kandungan CTX dimonitor untuk memeriksa stabilitas kimia CTX
dan degradasi. Hasil menunjukkan (Gambar 6) bahwa kandungan CTX tidak berbeda secara
signifikan pada T0 untuk salah satu proses yang diuji Namun, setelah 6 bulan menjalani studi
stabilitas penuaan dipercepat, CTX Kandungan penggilingan dan pemadatan / penghancuran
berpengaruh secara signifikan (p < 0,05), menghasilkan penurunan CTX 23% dan 20% yang
signifikan dan signifikan masing-masing. Akibatnya, sebelum mempertimbangkan
pengurangan ukuran bahan baku CTX, lebih jauh studi akan diperlukan untuk menetapkan
kondisi yang tidak merosot. Kerugian dalam kondisi pemadatan / penghancuran berhubungan
dengan hasil dari penggilingan saja, dan mendukung hipotesis bahwa grinding adalah
penyebab utamanya. Untuk memeriksa titik ini, CTX yang dipadatkan dianalisis untuk isinya
sampai 6 bulan dalam studi stabilitas yang dipercepat. Hasil penelitian menunjukkan tidak
adanya degradasi CTX dengan 100 ± 1,6% konten CTX setelah 6
bulan pada RH 40 ° C / 75% dibandingkan dengan kontrol (CTX tidak dikompres).
Akibatnya, memang begitu hipotesis bahwa kehilangan CTX yang diamati terkait
dengan penggilingan yang digunakan untuk menghancurkan dipadatkan CTX. Granulasi
kering tetap merupakan teknik yang mungkin, tetapi perhatian harus diberikan kepada
kekuatan diterapkan untuk menghancurkan CTX. Diperlukan penelitian lebih lanjut untuk
mengkarakterisasi yang optimal parameter proses, jika teknik ini harus dipertimbangkan
dalam merumuskan bentuk sediaan CTX. Bila sampel dikeringkan dengan baik (kadar air
tidak lebih tinggi dari pada awalnya hadir dalam rawit CTX bahan), pembasahan tidak
mempengaruhi stabilitas jangka panjang CTX. Oleh karena itu granulasi basah tetap ada
sebuah alternatif untuk memecahkan masalah aliran daya CTX. Secara bersamaan, data ini
menunjukkan bahwa proses farmasi yang diuji tidak mempengaruhi CTX
kadar air, tetapi menginduksi beberapa perubahan fisik dan / atau kimia, seperti yang
ditunjukkan oleh NIR dan Hasil HPLC. Proses granulasi kering kering atau moderat dapat
dipertimbangkan memperbaiki sifat aliran CTX namun penggilingan tampak berisiko untuk
stabilitas jangka panjang CTX.

3.4 Analisis PXRD dari sampel CTX yang diproses

Untuk mengetahui perubahan fase kristal dan parameter mikrostruktur

CTX di bawah operasi farmasi umum, beberapa diagram PXRD dicatat.
Diagram PXRD rutin ditunjukkan pada Gambar 7a untuk CTX setelah penggilingan, setelah
dibasahi dengan 20% air, setelah kompresi 80MPa dan 150MPa, dengan dan tanpa awal
menghancurkan dan dibandingkan dengan kontrol CTX sebagai referensi. Selain itu, PXRD
beresolusi tinggi dicatat setelah membasahi dengan 20% air, membasahi dengan 30% air dan
pengeringan, dan Setelah kompresi di tablet untuk mengekstrak parameter mikrostruktur.
Seperti yang ditunjukkan pada Gambar 7a, semua puncak yang diamati dalam kontrol
CTX, diagram PXRD tetap di posisi yang sama dalam kondisi berbeda. Akibatnya, tidak ada
transisi struktural atau modifikasi parameter sel unit yang diamati segera setelah diuji beda
kondisi. Meskipun demikian, semua diagram menunjukkan sedikit perbedaan. Beberapa
variasi intensitas puncak, dan beberapa perluasan puncak diamati dengan jelas dalam diagram
b ke g Gambar 7a. Perbedaan intensitas puncak, kebanyakan diamati untuk CTX di bawah
kompresi (Gambar 7a diffractograms c dan d) mungkin karena efek orientasi preferensial,
seperti itu diamati selama kompresi aksial dari bubuk kristal. Perluasan puncak bisa jadi
karena untuk reduksi ukuran kristal dan / atau peningkatan regangan mikro di dalam kristal,

mantan mungkin merupakan tanda tangan dari kristal merusak karena sesuai dengan
peningkatan tingkat default Efek pelebaran maksimum diamati untuk CTX setelah
penggilingan dan pembasahan dengan 20% dari air (Gambar 7b). Selain itu, peningkatan
garis latar belakang diamati untuk CTX setelah penggilingan dan setelah kompresi dengan
menghancurkan, yang bisa disebabkan oleh (i) parsial amorfisasi senyawa atau (ii)
kemunculan produk samping amorf karena degradasi CTX (Gambar S4).
Efek perluasan sedang terdeteksi di CTX setelah kompresi. Sangat menarik untuk dicatat
bahwa efek ini meningkat dengan tingkat kompresi (Gambar 7c) mencapai nilai yang dekat
dengan apa diamati setelah membasahi.
Untuk mengekstrak efek mikrostruktur yang bertanggung jawab atas perluasan
puncak ini, tinggi Diagram resolusi PXRD dicatat dan disempurnakan sesuai dengan
parameter sel yang ditemukan untuk senyawa referensi. Hasil yang diperoleh untuk CTX
setelah membasahi 20% air, pembasahan dengan 30% air, dikeringkan dan tablet CTX
ditunjukkan pada Tabel 1. Hasil Penyempitan tersedia pada Gambar S1 sampai S3 dalam
informasi pelengkap.
Seperti ditunjukkan dengan jelas pada Tabel 1, perluasan puncak bukan karena efek
yang sama di bawah proses yang berbeda, tetapi tergantung pada kondisi. Sementara
perluasan pada dasarnya disebabkan oleh peningkatan strain mikro untuk CTX setelah
membasahi 20% air, sebagian besar disebabkan oleh penurunan ukuran kristal dalam semua
kasus lain. Konsekuensi fisiknya sangat berbeda untuk CTX, karena peningkatan strain mikro
dikaitkan dengan peningkatan laju default di dalam kristal yang bisa disebabkan oleh
kerusakan fasa kristal. Untuk meringkas analisis PXRD CTX dalam kondisi yang berbeda,
berikut ini kesimpulan ditarik: Pada T0, untuk semua kondisi yang diuji, tidak ada fase
transisi dan fase kristal yang sama tetap Namun, semua proses yang diuji mempengaruhi sifat
mikrostruktur CTX bedak, namun dengan berbagai cara. Kompresi CTX menimbulkan
ukuran kristal yang lebih kecil tapi tidak tidak mempengaruhi tingkat default di dalam
kristalit, yang menyebabkan kerusakan yang sangat terbatas kristalit. Telah dicatat bahwa
ukuran kristal menurun ketika tekanan meningkat. Saat CTX terkena pembasahan dengan
30% air dan dikeringkan, kesimpulan yang sama adalah ditarik bahkan jika sedikit
peningkatan mikro-strain diamati; ini bisa mencerminkan awal degradasi kristal yang
dihentikan oleh proses pengeringan. Perilaku berbeda diamati ketika CTX terkena
pembasahan dengan 20% air tanpa pengeringan. Dalam hal ini, tingkat default meningkat
tajam sedangkan ukuran kristal lebih sedikit terpengaruh Hal ini menyebabkan kerusakan
kristal yang signifikan, yang mungkin mengindikasikan hal itu Kerusakan kristalit berlanjut
ketika CTX basah tidak dikeringkan. Perilaku CTX di bawah grinding atau kompresi dan
penghancuran mungkin berbeda karena amorphisation terjadi, yang tidak terdeteksi pada
kondisi lain. Ini

Perilaku paling mungkin terjadi karena efek grinding / crushing daripada kompresi,
seperti Kompresi saja tidak menyebabkan amorphisation signifikan.
Kesimpulannya, efek air pada CTX jelas menginduksi kerusakan cepat dari kristal. Kapan
CTX dikeringkan setelah terpapar air, kerusakan ini dihentikan. Pengamatan ini sesuai
dengan hasil stabilitas, karena proses granulasi basah tidak menginduksi CTX yang signifikan
konten berkurang. Menghancurkan atau menggiling CTX menginduksi terjadinya suatu
amorf fase, yang bisa menjelaskan perilaku tunggal CTX di bawah kondisi ini selama
studi stabilitas.

3.5 Kompatibilitas CTX dengan eksipien farmasi umum

Sebagai CTX dikomersialisasikan sebagai bubuk murni untuk rekonstitusional

rekontruksi dari solusi suntik, sedikit informasi telah tersedia pada kompatibilitas CTX
dengan umum eksipien farmasi. Terlepas dari ketidakmampuan kelembaban yang telah
dibahas sebelumnya, sumber utama CTX yang dilaporkan data ketidakcocokan berasal dari
aplikasi klinis. Kalsium bersamaan dilaporkan terkait dengan reaksi obat bermerek yang
mengancam jiwa (Bradley et al, 2009) dan telah menghasilkannya dalam kontra-indikasi
administrasi CTX dengan kalsium yang mengandung larutan intravena. SEBUAH ulasan
terbaru (Donnelly et al, 2017) menegaskan data yang mendukung tindakan pencegahan ini.
Sebagai interaksi eksipien obat dalam bentuk sediaan padat diketahui (Narang et al, 2012)
untuk mempengaruhi stabilitas produk obat dalam hal fisik (perubahan organoleptik dan
pengurangan pembubaran), atau aspek kimia (menyebabkan degradasi obat), penelitian
tambahan dilakukan untuk lebih mengeksplorasi kompatibilitas CTX dengan berbagai
eksipien. Daftar 87 eksipien farmasi umum pemberian obat padat, cair dan semi-padat
formulir ditinjau untuk pengujian dalam campuran biner untuk jangka waktu segera dan
jangka panjang (6 bulan di 40 ° C / 75% RH) Kompatibilitas CTX. Untuk setiap eksipien,
spesifisitas metode analisis diperiksa dengan cara menyuntikkan eksipien itu sendiri. Metode
ini ditentukan untuk spesifik semua eksipien diuji Studi kompatibilitas ini memungkinkan
pembuatan daftar yang kompatibel eksipien (48 eksipien dari 87 yang diuji), incipible
excipient dan second line eksipien; yang terakhir mungkin digunakan dengan hati-hati agar
tidak ada cairan eksipien lain yang sesuai tersedia (materi tambahan, Tabel S1).
Di antara alat peningkat penyerapan yang diuji, semua eksipien kompatibel kecuali
Capmul MCM dan Labrasol, yang kompatibilitasnya dengan CTX ditemukan menginduksi
degradasi CTX. Sodium chenodeoxycholate ditemukan kompatibel. Sebagian besar eksipien
dipertimbangkan gunakan dalam bentuk sediaan padat yang kompatibel. Hanya empat
eksipien - sorbitol, karboksimetilselulosa, gelatin dan kitosan - tidak sesuai dengan CTX.
Cair eksipien menghadirkan masalah kompatibilitas yang lebih besar. Secara khusus, ada
kekurangan kompatibilitas antara CTX dan pelarut hidrofilik dan beberapa pengemulsi
agen / surfaktan. Di antara bentuk cair, Capryol 90, Miglyol 812N, Captex 355 dan Capmul
PG12 memberi hasil yang dapat diterima. Hasil kompatibilitas PEG menunjukkan bahwa
PEG tidak cocok untuk supositoria terlarut. Untuk supositoria yang meleleh, satu-satunya
eksipien yang dapat digunakan adalah lilin putih. Ini daftar (bahan pelengkap, Tabel S1)
cenderung membantu farmasi lebih lanjut pengembangan, menggunakan pendekatan DOE
(desain eksperimen). Namun, studi kompatibilitas tidak dapat menggantikan studi stabilitas
formulasi akhir; penggunaan eksipien yang kompatibel hanya akan mengurangi risiko
degradasi CTX. Semua formulasi akhir memerlukan uji stabilitas lebih lanjut.