Nama : Sarwan Hamid Natser

NIM : 416331051

Kelas : Biologi Ekstensi B 2016

No : 17
Efek modulatory dari PlectranthusamboinicusLour. pada nefrolitiasisetilen glikol
yang diinduksi pada tikus
Nefrolitiasis tersebar di seluruh dunia dan mempengaruhi 2% populasi dunia.[1] Untuk
menemukan obat herbal untuk penyakit ini, penelitian ini dilakukan untuk mengevaluasi
aktivitas antilithiotic jus segar terkonsentrasi dari daun PlectranthusamboinicusLour. Ini
populer dikenal dalam bahasa Inggris sebagai borage India, syn. Coleusamboinicus
(Keluarga: Lamiaceae). Orang India menggunakannya[3] secara luas untuk[4] berbagai
penyakit, termasuk batu ginjal.[2] Secara ilmiah dievaluasi untuk aktivitas antibakteri dan
antioksidannya.
Tumbuhan segar P. amboinicus dikumpulkan dari kebun herbal, Avinasilingam Deemed
University, Coimbatore dan disahkan di departemen botani. Sekitar 500 g daun segar
dipotong-potong kecil dan jus segar disiapkan dengan menambahkan air (30 ml), dengan
bantuan mixer. Jus segar disaring dan dipekatkan ke massa kering dengan distilasi vakum;
residu kering hitam diperoleh (16 g). LD50dilakukan dengan menggunakan OECD pedoman
untuk pengujian bahan kimia revisi rancangan pedoman 423. The sepersepuluh dari LD 500
mg / kg 50 dipilih sebagai dosis untuk studi lebih lanjut.
Tikus albino jantan dewasa dari galur Wistar, dengan berat antara 150-200 g digunakan
untuk penelitian ini. Hewan-hewan diaklimatisasi dan dipelihara pada 24o C ± 2o C, 70% RH
dan 12h / 12h siklus terang dan gelap selama penelitian. Mereka diberi makan dengan pakan
pelet standar (terbatas hati Hindustan, Bangalore, India) dan ad libitum air. CPCSEA dan
komite etik lokal menyetujui penelitian. Hewan-hewan dibagi menjadi tiga kelompok G1, G2,
dan G3 masing-masing enam hewan. Mengikuti metode Tamilselvan,[5]nephrolithiasis
diinduksi. Kelompok 1 (G1: kontrol) diberi makan dengan air minum biasa. Kelompok 2 (G2:
kontrol lithiotic) diberi makan dengan 1%etilen glikol air selama 35 hari. Kelompok 3 (G3:
kelompok uji) diberi makan dengan air etilena glikol 1% dan secara bersamaan diberikan,
dengan tabung lambung, 500 mg / kg jus segar terkonsentrasi dari daun
PlectranthusamboinicusLour selama 35 hari. Pada34ke-harisemua hewan ditempatkan dalam
sangkar metabolik dan urin dikumpulkan[6] selama 24[7] jam dan urin dianalisis untuk
mengetahui adanya kalsium, oksalat, dan total protein. Kalsium, dan total protein
diperkirakan oleh penganalisa otomatis (Logotechsrl, tecno-168). Oksalat dianalisis dengan
metode Hodgkinson dan Williams.[8] Pada Hari ke 35 hewan-hewan tersebut dikorbankan,
ginjal dieksisi, dicuci dengan saline dingin, difiksasi dalam larutan formalin 10% dan dikenai
studi histopatologis.

Hasilnya dinyatakan sebagai rata-rata ± SEM. Data menjadi sasaran ANOVA satu arah
diikuti oleh tes perbandingan berganda Turkey-Kramer. Nilai P <0,05 dianggap signifikan.
Studi histopatologi dengan jelas mengungkapkan bahwa sampel jaringan dari kelompok
kontrol (G1) menunjukkan tubulus dengan lapisan epitel tunggal sepanjang margin dan
berukuran normal. Pada G2 (kontrol lithiotik), semua tubulus menunjukkan adanya kristal,
ditandai adanya dilatasi tubulus dan degenerasi total lapisan epitel dengan infiltrasi sel-sel
inflamasi ke dalam ruang interstitial. Dalam G3 (kelompok uji) spesimen menunjukkan
karakter yang mirip dengan kelompok kontrol. Analisis urin menunjukkan peningkatan kadar
kalsium, oksalat dan protein total yang signifikan pada kelompok kontrol lithiotic (G2), bila
dibandingkan dengan kontrol normal. Kelompok uji (G3), menunjukkan pengurangan yang
signifikan pada semua parameter yang hampir sebanding dengan kontrol normal. Hasil urin
dan histopatologis dengan jelas mengungkapkan aktivitas antilithiotic P. amboinicus,
terutama yang berasal dari kalsium oksalat. Penelitian lebih lanjut diperlukan untuk
mengeksplorasi prinsip aktif yang tepat yang bertanggung jawab atas aktivitas antilithiotic
dan mekanisme aksi.
Pengaruh jus kering daun PlectranthusamboinicusLour. pada nefrolitiasis yang diinduksi etilen
glikol pada tikus jantan albino
Obat Dosis Kalsium urin Oksalat kemihTotal
urine
Tingkat(mg / dl) Tingkat (mg / dl) Tingkat
protein (mg /
dl) Tingkat
protein (mg /
dl)
Kontrol (salin normal) 10 ml / kg 5,4 ± 0,56 0,5 ± 0,06 200 ± 5,16
Kontrol litiotik (etilen 1% air 11,2 ± 0,12 1,5 ± 0,07 280 ± 5,77
glikol)etilen glikol
P. amboinicus 500 mg / kg 5,6 ± 0,58 ** 0,8 ± 0,06 ** 200 ± 8.56 **
Satu arah ANOVA
F 1613 65 48
df 2,15 2,15 2,15
P <0,01 <0,01 <0,01
Nilai rata-rata ± SEM. n = 6 di setiap kelompok. ** P <0,001 bila
dibandingkan dengan kontrol lithiotic.
Farmakol J India | Februari 2005 |Vol 37 | Edisi 1
| 37-45 43
Farmasi, Coimbatore - 641039, TamilNadu, India E-Mail:
pharmjose73@yahoo.co.inSurat Penelitian

Referensi
1. Mohan H. Buku teks patologi. 4th Ed. New Delhi: Publikasi Medis Jaypee Brother (P) Ltd;
2000.
2. OrientLongman. Tanaman Obat India. Vol. 4. Madras. Microprint; 1995.
3. Timer CE, Marzini ME, Fernandez A, Gonzalez ML. Penilaian fisiokimia minyak esensial
dari daun PlectranthusamboinicusLour. Sprena tumbuh di Kuba. RevCubanaFarm 1992;
251: 63-8.
4. Padma PR, Bhuvaneswari V, Chelvi SK. Aktivitas antioksidan enzimatik pada daun hijau
pilihan. Indian J NutritionDietetics 1998; 35: 1-3.
5. Tamilselvan S, Raymond L, Khan SR. Peroksidasi lipid dalam etilen glikol menginduksi
hiperoksaluria dan nefrolitiasis kalsium oksalat. J Urol 1997; 157: 1059-63.
6. Sarkar RC, Chauhan SP. Metode baru untuk menentukan jumlah mikro kalsium dalam
bahan biologis. Anal Biochem 1967; 20: 155-6.
7. Goruall AG, Bardawill CJ. Penentuan protein serum melalui reaksi biuret. J BiolChem 1949;
177: 751-66.
8. Hodgkinson A, Williams A. Prosedur kolorimetri yang lebih baik untuk urine oksalat.
ClinChem 1972.
Kondensat asap rokok mengurangi kemampuan detoksifikasi lensa tikus
Pak,studi Epidemiologis menunjukkan bahwa merokok meningkatkan risiko pengembangan
katarak sementara penghentian merokok mengurangi risiko.[1] Didalilkan bahwa campuran
kompleks logam jejak, hidrokarbon aromatik polisiklik dan senyawa nitro dalam asap rokok
bertindak sebagai pro-oksidan yang memberikan kerusakan oksidatif pada lensa dan
kemungkinan memulai katarakaktogenesis.[2] Dengan demikian, ini mungkin merupakan
mekanisme katarctogenesis yang penting pada perokok. Namun, sangat sedikit penelitian
yang tersedia tentang efek merokok pada mekanisme antioksidan endogen. Oleh karena itu,
kami melakukan studi pendahuluan untuk merekam efek asap rokok pada mekanisme
detoksifikasi lensa kultur organ dan memvalidasi model skrining in vitro cepat untuk agen
anti-katarak potensial.
Tikus Wistar dewasa (150-200 g) dari kedua jenis kelamin, digunakan sesuai dengan
pedoman etika institusional.
Mereka dikorbankan menggunakan eter anestesi dan lensa dibedah (kisaran berat 0,02-0,04 g)
untuk penelitian ini. Kondensat asap rokok (CSC) disiapkan sesuai dengan metode
Shalinietal.[2] Sistem anti bocor diimprovisasi dengan filter yang dibakar dengan ujung rokok,
dalam aliran udara yang stabil. Kadar asap dari enam batang rokok (Wills, ITC Ltd)
terperangkap dengan menggelegak melalui air suling (24 ml) yang mengandung
dimetilsulfoksida (DMSO, 50 μl). Ini disaring melalui glasswool dan disentrifugasi pada 9000
rpm selama 5 menit untuk menghasilkan CSC.
CSC distandarisasi dengan memastikan bahwa kepadatan optik (OD) adalah 0,6 pada
maksimum penyerapan 270 nm (BeckmanSpectrophotometer). Pengenceran CSC 1: 1 dengan
ModifiedEagle's Medium (DMEM) Dulbecco telah disiapkan dan lensa tikus yang diberi
kapsul diinkubasi di dalamnya. Lensa tikus kontrol diinkubasi dengan DMEM.[2]Kondisi
cahaya dan suhu sekitar (37 ° C) dipertahankan. Lensa tikus dihomogenisasi dalam 1 ml asam
trikloroasetat (TCA) 5% dan disentrifugasi pada 5000 rpm selama 15 menit
(Eltekrefrigeratedcentrifuge, RC 4100 D). Prosedur yang dikatakan Ellman diikuti untuk
estimasi pengurangan glutathione (GSH).[3] Lensa dihomogenisasi dalam larutan salin fosfat
(PBS) untuk menyiapkan 10% homogen. Aktivitas Glutathione-S-transferase (GST) di
homogenat diperkirakan sesuai dengan metode Habig, etal.[4] Profil kinetik dibaca pada 340
nm untuk setiap 30 detik hingga 180 detik. Untuk menjelaskan efek berbagai konsentrasi CSC
pada aktivitas GST dalam homogenat, peningkatan volume CSC (10, 20, 40 dan 80 μl)
ditambahkan ke normal. Enzim mengkatalisis konjugasi 1-kloro-2, 4dinitrobenzena (CDNB)
dengan GSH untuk membentuk kompleks dan produk diukur secara spektrofotometri.
Hasilnya dinyatakan sebagai nmol protein terkonjugasi / min / mg CDNB. Tingkat protein
lensa tikus diperkirakan dengan metode standar
Lowry.[5]
Uji-t dua ekor tidak berpasangan diterapkan untuk membandingkan tingkat signifikansi
antara rata-rata kelompok perlakuan dan kelompok kontrol untuk titik waktu yang sesuai.
Dalam estimasi GST, setiap konsentrasi CSC dibandingkan dengan level normal dan P <0,05
dianggap signifikan secara statistik.
Ada penurunan signifikan dalam tingkat GSH normal pada lensa tikus (5,98 ± 0,41 μl)
karena durasi paparan CSC meningkat dari 0,5 menjadi 2 jam (0,49 ± 0,10 μl) (Gambar 1).
Dibandingkan dengan aktivitas normal GST dalam lensa tikus, ada penurunan signifikan
dalam aktivitasnya dengan 20, 40 dan 80 μLCSC (Gambar 2).
Studi epidemiologis, studi in vivo bersamaan dengan studi in vitro, memberikan korelasi
antara merokok dan katarak.[1] Karena lensa terisolasi secara imunologis

Gambar 1: Kadar GSH dalam lensa tikus normal dan CSC. Data direpresentasikan sebagai
mean+SEM. * P <0,05, *** P <0,0001 berbeda secara signifikan dari kelompok kontrol; n = 6

Gambar 2: Aktivitas GST dalam lensa tikus normal dan CSC yang terpapar. Setiap titik adalah
representasi dari mean+SEM. * P <0,05, ** P <0,01 berbeda secara signifikan dari nilai
normal; n = 6