BIOTEKNOLOGI

EMBRIO

ARIEF BOEDIONO
Lab. Embriologi
Fakultas Kedokteran Hewan IPB
E-mail: aboedi@yahoo.com
pembelahan

fe
rt
ili
asi

sa
ul

si
st
a
bl

game ulasi
togen
esis gastr

ne ur
ulasi
ir
lah

Manipulasi
embrio
 REPRODUKSI (konvensional):
Betina Jantan

FERTILISASI

Zigot

Embrio

REPRODUKSI:
- KONVENSIONAL
- INTRODUKSI BIOTEKNOLOGI REPRODUKSI

INTRODUKSI BIOTEKNOLOGI
REPRODUKSI:
Insemination Buatan (IB)
Fertilisasi In Vitro (FIV)
Transfer Embrio (TE)
Intracytoplasmic Sperm Injection (ICSI)
Kriopreservasi
 KOLEKSI DAN PEMBEKUAN SPERMA

Koleksi Sperma Pembekuan Sperma

PERALATAN KOLEKSI SPERMA DAN

INSEMINASI BUATAN PADA
RUMINANSIA KECIL
 EMBRYO FLUSHING

keberhasilan embrio transfer…….

 KEMATIAN/ bukan akhir dari proses
DISFUNGSI kehidupan (reproduksi)

KOLEKSI GAMET
PRODUKSI EMBRIO
SEL TELUR IN VITRO
SPERMATOZOA

TRANSFER EMBRIO

TEKNOLOGI FERTILISASI:
IVF (In Vitro Fertilization)

Fertilisasi Mikro:
PZD (Partial Zona Dissection)
SuZI (Sub Zona Insemination)
ICSI (Intracytoplasmic Sperm Injection)
PRODUKSI EMBRIO IN VITRO:
MATURASI

KOLEKSI SEL TELUR

FERTILISASI

KOLEKSI
SPERMATOZOA

KULTUR

TEKNOLOGI ALTERNATIF:

BIOTEKNOLOGI REPRODUKSI:

FERTILISASI MIKROINJEKSI
IN VITRO SPERMA TUNGGAL
 OLYMPUS IX-70

INVERTED MICROSCOPE, MICRO-

MANIPULATOR DAN AUDIO VISUAL
 Glass tubes Micropipette puller Microforge

Pembuatan
perangkat mikro
Home-made needles Micropipette beveller

Commercial needles Needle washing kit

FERTILISASI MIKRO
Partial zona dissection (PZD)
(Cohen et al, 1988)

Injection pipette

Holding pipette Metaphase II Oocyte

Sperm
Subzonal sperm insemination (SUZI)
(Ng et al, 1988)

Injection pipette

Holding pipette Metaphase II Oocyte

Intracytoplasmic sperm injection (ICSI)

(Palermo et al, 1992) Sperm

Injection pipette

Holding pipette Metaphase II Oocyte

FERTILISASI MIKRO:

Assisted Hatching
(AH)

Cutted

Cutted
 BANK:
PENYIMPANAN YANG AMAN
DAPAT DIGUNAKAN SETIAP
SAAT DIPERLUKAN

PROGREMABLE
FREEZING MACHINE
AND LN2 CONTAINER
FOR GENETIC BANKING
AB
PENYIMPANAN MATERIAL BIOLOGI:

PRESERVASI:
JANGKA PENDEK
EKSTENDER
KRIOPRESERVASI:
JANGKA PANJANG
KRIOPROTEKTAN
AB

KRIOPRESERVASI:

DENGAN KRISTAL ES:

SLOW COOLLING
RAPID FREEZING

TANPA KRISTAL ES:

VITRIFICATION

AB
 SLOW FREEZING:
0oC
Cooling
-1oC/min

Thawing
Temperature

-7oC
Seeding
-0.3oC/min
(10 min)

-30oC

-196oC
AB Time

VITRIFICATION:

15% EG+15% DMSO

mPBS 10% EG 0.5M Sucrose

Ekuilibrasi

0.1M Sucrose 0.25M Sucrose 0. 5M Sucrose

LN2
Wharming (-196oC)
AB
 BIOPSI EMBRIO
(PREIMPLANTATION GENETIC DIAGNOSIS)

PRE-IMPLANTATION
GENETIC DIAGNOSIS
(PGD)
 Embryo Biopsy

KARYOTYPING

FISH PROBE:
Orange:LSI 13
Green:LSI 21
Aqua:CEP 18
Blue:CEP X
Gold:CEP Y
47,XY,+13
 KLONING:
MELALUI PRODUKSI EMBRIO KEMBAR IDENTIK

Pemotongan Embrio
(bedah mikro)

Embrio Paruh

Identical twins

AB

KLONING MELALUI PRODUKSI EMBRIO

KEMBAR IDENTIK DENGAN METODE
BEDAH MIKRO
 KLONING PADA SAPI

KEMBAR IDENTIK PEDET

MELALUI BEDAH MIRO

Somatic Cell Nuclear Transfer

ENUCLEATION, NUCLEAR TRANSFER
KAMBING GULING???
Who are my parents???

Produksi Anti Trombin III

melalui teknologi transgenik dan kloning

Transfer
Pembekuan sel genetika
Biopsi sel kulit Kultur sel
kulit

Sel telur Aspirasi Injeksi

Fusi sel
matang material material
genetik genetik baru

Anak kambing hasil Embrio hasil kloning

kloning
 TRANSGENIC MICE
The growth hormone gene has been engineered to be expressed
at high levels in animals.

The result: BIG ANIMALS

metallothionein promoter Mice fed heavy metals are 2-3 times larger
regulated as heavy metals
 PRODUKSI KHIMERA

Fresian Holstein PENGHILANGAN Limousin

+ ZONA PELUSIDA +
Japanese Black Japanese Red
AGREGASI

KHIMERA SAPI

PRODUKSI KHIMERA EMBRIO

PADA SAPI
 KHIMERA SAPI

TETUA:
1. FRESIAN HOLSTEIN
2. JAPANESE BLACK
3. LIMOUSIN
4. JAPANESE RED

ARIFU CHIMERA
Born: Yamaguchi, March 13, 1993
Semoga tidak pernah
terjadi begini…..

…….gagal kloning