PERBEDAAN EFEKTIFITAS ANTIBAKTERI ANTARA EKSTRAK BIJI

PINANG (Areca Catechu L) DENGAN MINYAK ATSIRI SERAI

(Cymbopogon Citratus) TERHADAP Enterococcus faecalis

SECARA IN VITRO

Karya Tulis Ilmiah

Untuk memenuhi sebagai persyaratan

Mencapai gelar Sarjana Kedokteran Gigi

DiajukanOleh

Galih Ridho Hardjanto

112090077

Diajukan Oleh

Febia Astiawati Sugiarto

112100132

Kepada

FAKULTAS KEDOKTERAN GIGI

UNIVERSITAS ISLAM SULTAN AGUNG

SEMARANG

2013
 KARYA TULIS ILMIAH
PERBEDAAN EFEKTIFITAS ANTIBAKTERI ANTARA EKSTRAK BIJI
PINANG (Areca Catechu L) DENGAN MINYAK ATSIRI SERAI
(Cymbopogon Citratus) TERHADAP Enterococcus faecalis
SECARA IN VITRO

Yang dipersiapkan dan disusun oleh

Febia Astiawati Sugiarto
112100132

Telah dipertahankan di depan Dewan Penguji

Pada Tanggal 10 September 2013
Dan dinyatakan telah memenuhi syarat

Susunan Tim Penguji

Anggota Tim Penguji Ketua Tim Penguji

drg. Yayun Siti Rochmah.,Sp.BM drg. Diyah Fatmasari., MDSc

Anggota Tim Penguji

drg. Arlina Nurhapsari.,Sp.KG

Semarang, 8 Oktober 2013

Fakultas Kedokteran Gigi
Universitas Islam Sultan Agung
Dekan,

drg. Hj. Siti Chumaeroh, MS

ii
 PRAKATA

Assalammu’alaikum Wr. Wb.

Puji dan syukur kehadirat Allah SWT yang Maha Pengasih lagi Maha
Penyayang atas segala limpahan rahmat dan karunia-Nya. Sholawat dan salam
tercurahkan kepada junjungan kita Nabi Muhammad SAW, beserta keluarga,
sahabat dan para pengikutnya sehingga penulis dapat menyelesaikan karya tulis
ilmiah dengan judul : “Perbedaan Efektifitas Antibakteri Antara Ekstrak Biji
Pinang (Areca Catechu L) dengan Minyak Atsiri Serai (Cymbopogon Citratus)
Terhadap Enterococcus faecalis Secara In Vitro”.
Karya tulis ilmiah ini disusun sebagai salah satu syarat untuk mendapatkan
gelar Sarjana Kedokteran Gigi di Fakultas Kedokteran Gigi Universitas Islam
Sultan Agung Semarang. Selesainya karya tulis ilmiah ini tidak terlepas dari
dukungan dan bimbingan serta bantuan dari berbagai pihak, oleh karena itu pada
kesempatan ini penulis mengucapkan terima kasih sebesar-besarnya kepada yang
terhormat :
1. drg. Hj. Siti Chumaeroh, MS selaku Dekan Fakultas Kedokteran Gigi
Universitas Islam Sultan Agung Semarang yang telah memberikan ijin pada
penulis untuk melakukan penelitian.
2. drg. Yayun Siti Rohmah, Sp,BM selaku dosen pembimbing I yang telah
meluangkan waktu, tenaga, pikiran, memberikan bimbingan, arahan, nasihat
dan motivasi selama penyusunan karya tulis ilmiah ini.
3. drg. Arlina Nurhapsari, Sp.KG selaku dosen pembimbing II yang telah
meluangkan waktu, tenaga, pikiran, memberikan bimbingan, arahan, nasihat
dan motivasi selama penyusunan karya tulis ilmiah ini.
4. drg. Diyah Fatmasari, MDSc selaku penguji yang telah membantu dalam
proses sidang karya tulis ilmiah ini.
5. Papa Drs.Bambang Sugiarto, Msi., Mama Farha Mubarak, adik Reananda
Mubarak Sugiarto dan Zhebiyna Mubarak serta seluruh keluarga yang saya
sayangi atas dukungan moril, spiritual, dan materiil sehingga penulis dapat
menyelesaikan karya tulis ilmiah ini dengan baik.
6. Bapak Jimanto bagian laboratorium mikrobiologi Balai Laboratorium
Kesehatan Provinsi Jawa Tengah yang telah memberikan bantuan selama
berjalannya penelitian untuk kelancaran karya tulis ilmiah ini.
7. Mbak Fitri bagian laboratorium Jurusan Biologi Fakultas MIPA Universitas
Negeri Semarang yang telah memberikan bantuan selama berjalannya
penelitian untuk kelancaran karya tulis ilmiah ini.
8. Sahabat tercinta saya My SS Arum, Mentari, Karina, Shifa, Maya (Almh)
dan Aulia yang telah memberikan inspirasi, motivasi, nasihat dan bantuan
selama penyusunan karya tulis ilmiah ini.
9. Semua teman-teman Triconodont Angkatan 2010 Fakultas Kedokteran Gigi
Universitas Islam Sultan Agung Semarang yang telah memberikan
dukungan, bantuan dan berbagi ilmu kepada penulis.

iii
10. Nesha, Danang dan Ullya sahabat tercinta yang telah memberikan motivasi,
membantu menemani dalam melakukan penelitian dan pembuatan karya
tulis ilmiah ini.
11. Seluruh staf pengajar di Fakultas Kedokteran Gigi Universitas Islam Sultan
Agung Semarang yang telah mendidik, membimbing dan membantu selama
menuntut ilmu di masa pendidikan.
12. Semua pihak yang tidak dapat penulis ucapkan satu persatu yang telah
membantu penulis dalam menyelesaikan karya tulis ilmiah ini.
Semoga amal budi semua pihak yang tertulis diatas mendapatkan balasan
yang setimpal dari Allah SWT. Penulis menyadari bahwa penyusunan karya tulis
ilmiah ini masih jauh dari sempurna, untuk itu saran dan kritik yang bersifat
membangun dari berbagai pihak sangat penulis harapkan.
Akhir kata, penulis mengharapkan semoga karya tulis ilmiah ini dapat
memenuhi tujuan dan bermanfaat bagi perkembangan dan kemajuan ilmu
pengetahuan khususnya dalam bidang kedokteran gigi .
Wassalammu’alaikum Wr. Wb.

Semarang, 28 Agustus 2013

Penulis

iv
 DAFTAR ISI

Halaman
HALAMAN JUDUL............................................................................................. i
HALAMAN PENGESAHAN ............................................................................... ii
PRAKATA ............................................................................................................ iii
DAFTAR ISI ......................................................................................................... v
DAFTAR TABEL ................................................................................................ vi
DAFTAR GAMBAR ............................................................................................ vii
DAFTAR LAMPIRAN ......................................................................................... viii
SURAT PERNYATAAN ..................................................................................... ix
INTISARI.............................................................................................................. x
ABSTRACT .......................................................................................................... xi
BAB I PENDAHULUAN .................................................................................... 1
A. Latar Belakang .......................................................................................... 1
B. Rumusan Masalah ..................................................................................... 4
C. Tujuan Penelitian....................................................................................... 4
D. Manfaat ...................................................................................................... 5
BAB II TINJAUAN PUSTAKA......................................................................... 6
A. Tinjauan Pustaka ....................................................................................... 6
1.Perawatan saluran akar ........................................................................... 6
2.Enterococcus faecalis ............................................................................. 7
3.Tanaman pinang (Areca Catechu L) ...................................................... 9
4.Tanaman serai (Cymbopogon Citratus) ................................................. 12
B. Kerangka Teori .......................................................................................... 15
C. Kerangka Konsep ...................................................................................... 16
D. Hipotesis .................................................................................................... 16
BAB III METODE PENELITIAN .................................................................... 17
A. Jenis Penelitian dan Rancangan Penelitian ............................................... 17
B. Variabel Penelitian .................................................................................... 17
C. Definisi Operasional .................................................................................. 18
D. Populasi dan Sampel ................................................................................. 21
E. Instrumen dan Bahan Penelitian ................................................................ 22
F. Cara Penelitian .......................................................................................... 26
G. Tempat dan Waktu .................................................................................... 30
H. Analisis Hasil ............................................................................................ 30
I. Skema Alur Penelitian ............................................................................... 31
BAB IV HASIL PENELITIAN DAN PEMBAHASAN................................... 32
A. Hasil Penelitian ......................................................................................... 32
B. Pembahasan ............................................................................................... 40
BAB V KESIMPULAN DAN SARAN .............................................................. 45
A. Kesimpulan ................................................................................................. 45
B. Saran ........................................................................................................... 46
DAFTAR PUSTAKA ........................................................................................... 47
LAMPIRAN .......................................................................................................... 50

v
 DAFTAR TABEL

Halaman

Tabel 1.1 Diameter zona bunuh ekstrak biji pinang 10%, minyak atsiri serai 20%
dan Chlorhexidine 2% terhadap pertumbuhan Enterococcus faecalis . 33
Tabel 1.2 Diameter zona hambat ekstrak biji pinang 10%, minyak atsiri serai 20%
dan Chlorhexidine 2% terhadap pertumbuhan Enterococcus faecalis . 33
Tabel 2.1 Uji normalitas data diameter zona bunuh ekstrak biji pinang 10%,
minyak atsiri serai 20% dan Chlorhexidine 2% terhadap pertumbuhan
Enterococcus faecalis ........................................................................... 34
Tabel 2.2 Uji homogenitas data diameter zona bunuh ekstrak biji pinang 10%,
minyak atsiri serai 20% dan Chlorhexidine 2% terhadap pertumbuhan
Enterococcus faecalis ........................................................................... 34
Tabel 2.3 Rerata diameter zona bunuh ek strak biji pinang 10%, minyak atsiri
serai 20% dan Chlorhexidine 2% terhadap pertumbuhan Enterococcus
faecalis .................................................................................................. 35
Tabel 2.4 Uji One-Way ANOVA daya bunuh ekstrak biji pinang 10%, minyak
atsiri serai 20% dan Chlorhexidine 2% terhadap pertumbuhan
Enterococcus faecalis ........................................................................... 35
Tabel 2.5 Hasil uji Post Hoc daya bunuh ekstrak biji pinang 10%, minyak atsiri
serai 20% dan Chlorhexidine 2% terhadap pertumbuhan Enterococcus
faecalis .................................................................................................. 36
Tabel 3.1 Uji normalitas data diameter zona hambat ekstrak biji pinang 10%,
minyak atsiri serai 20% dan Chlorhexidine 2% terhadap pertumbuhan
Enterococcus faecalis ........................................................................... 37
Tabel 3.2 Uji homogenitas data diameter zona hambat ekstrak biji pinang 10%,
minyak atsiri serai 20% dan Chlorhexidine 2% terhadap pertumbuhan
Enterococcus faecalis ........................................................................... 37
Tabel 3.3 Rerata diameter zona hambat ekstrak biji pinang 10%, minyak atsiri
serai 20% dan Chlorhexidine 2% terhadap pertumbuhan Enterococcus
faecalis .................................................................................................. 38
Tabel 3.4 Uji One-Way ANOVA daya hambat ekstrak biji pinang 10%, minyak
atsiri serai 20% dan Chlorhexidine 2% terhadap pertumbuhan
Enterococcus faecalis ........................................................................... 39
Tabel 3.5 Hasil uji Post Hoc daya hambat ekstrak biji pinang 10%, minyak atsiri
serai 20% dan Chlorhexidine 2% terhadap pertumbuhan Enterococcus
faecalis .................................................................................................. 39

vi
 DAFTAR GAMBAR

Halaman

Gambar 1. Koloni Enterococcus faecalis.............................................................. 8

Gambar 2. Tanaman pinang .................................................................................. 10
Gambar 3. Tanaman serai ..................................................................................... 13
Gambar 4. Diagram pengukuran diamter zona bunuh dan zona hambat .............. 20
Gambar 5. Autoklaft.............................................................................................. 22
Gambar 6. Pipet mikro .......................................................................................... 23
Gambar 7. Blender ............................................................................................... 23
Gambar 8. Inkubator ............................................................................................. 24
Gambar 9. Lampu spirtus ..................................................................................... 24
Gambar 10. Chlorhexidine 2%.............................................................................. 25
Gambar 11. Koloni Enterococcus faecalis ........................................................... 25
Gambar 12. Kertas cakram ................................................................................... 26
Gambar 13. Pembersihan dan pemotongan biji pinang ........................................ 27
Gambar 14. Proses biji pinang diblender menjadi serbuk..................................... 27
Gambar 15. Batang serai ....................................................................................... 64
Gambar 16. Buah pinang....................................................................................... 64
Gambar 17. Ekstrak biji pinang 10%, minyak atsiri serai 20% dan Chlorhexidine
digluconate 2%. .................................................................................. 64
Gambar 18. Pembuatan kekeruhan bakteri Enterococcus faecalis ....................... 64
Gambar 19. Pengambilan Enterococcus faecalis dengan ose steril ..................... 65
Gambar 20. Pengolesan bakteri Enterococcus faecalis pada seluruh permukaan
cawan MHA ....................................................................................... 65
Gambar 21. Perendaman disk dalam larutan coba ............................................... 66
Gambar 22. Peletakan 3 disk larutan coba pada cawan petri ............................... 66
Gambar 23. Proses inkubasi seluruh cawan MHA selama 24 jam pada
suhu 37˚C ........................................................................................... 67
Gambar 24. Pengukuran zona hambat dan bunuh pada seluruh cawan petri ....... 67
Gambar 25. Hasil Uji efektifitas antibakteri, P = Ekstrak biji pinang 10%,
S = Minyak atsiri serai 20%, C = Kontrol positif
(Chlorhexidine 2%) (9 Replikasi) ..................................................... 68

vii
 DAFTAR LAMPIRAN

Halaman

Lampiran 1. Surat Permohonan Ijin Penelitian ..................................................... 50

Lampiran 2. Surat Keterangan Pembuatan Ekstraksi Bahan Perlakuan di
Laboratorium Jurusan Biologi FMIPA UNNES .............................. 51
Lampiran 3. Surat Keterangan Penelitian di Balai Laboratorium Kesehatan
Provinsi JATENG ............................................................................ 52
Lampiran 4. Jadwal kegiatan ................................................................................ 53
Lampiran 5. Hasil perhitungan uji normalitas dan uji homogenitas daya bunuh.. 54
Lampiran 6. Hasil pergitungan uji One-Way ANOVA daya bunuh ....................... 57
Lampiran 7. Hasil perhitungan uji Post Hoc daya bunuh ..................................... 58
Lampiran 8. Hasil perhitungan uji normalitas dan uji homogenitas daya bunuh.. 59
Lampiran 9. Hasil perhitungan uji One-Way ANOVA daya hambat ..................... 62
Lampiran 10. Hasil perhitungan uji Post Hoc daya hambat ................................. 63
Lampiran 11. Foto penelitian ................................................................................ 64

viii
 SURAT PERNYATAAN

Dengan ini saya :

Nama : Febia Astiawati Sugiarto

NiM : 112100132

Fakultas : Kedokteran Gigi

Menyatakan kesediaan untuk membuat surat pernyataan bahwa Karya Tulis

Ilmiah yang saya buat benar-benar murni karya saya sendiri, tidak memplagiat

dari karya tulis orang lain, dan apabila di kemudian hari saya terbukti melakukan

tindakan plagiat tersebut maka saya siap menerima sanksi apapun termasuk

pencabutan gelar sarjana yang telah diberikan.

Semarang, 4 Oktober 2013

Yang Menyatakan,

(Febia Astiawati Sugiarto)

ix
 INTISARI

Enterococcus faecalis adalah bakteri anaerob gram positif merupakan

bakteri pathogen penyebab kegagalan perawatan saluran akar (PSA).
Penggunaan bahan herbal menjadi alternatif dalam pengobatan. Biji pinang dan
minyak atsiri serai salah satu bahan herbal yang memiliki kemampuan sebagai
antibakteri. Penelitian ini bertujuan mengetahui perbedaan efektifitas antibakteri
antara ekstrak biji pinang 10% dengan minyak atsiri serai 20% terhadap
E.faecalis.

Jenis penelitian ini adalah penelitian eksperimen laboratoris. Pembuatan

ekstrak biji pinang menggunakan maserasi dan minyak atsiri serai diperoleh
melalui penyulingan uap langsung. Koloni bakteri E.faecalis ditanam pada MHA
diinkubasi selama 24 jam pada suhu 37°C. Pengujian daya antibakteri dengan
metode difusi menggunakan 9 replikasi cawan petri, setiap cawan terdapat 3
jenis kertas cakram berisi ekstrak biji pinang 10%, minyak atsiri serai 20% dan
Chlorhexidine 2% selanjutnya diinkubasi 24 jam pada suhu 37°C. Kemudian
hasil diameter zona hambat dan zona bunuh diuji dengan One-Way ANOVA dan
Post Hoc.

Berdasarkan uji One-Way ANOVA didapatkan nilai signifikansi 0,00

(p<0,05) sehingga dapat disimpulkan bahwa terdapat perbedaan diameter zona
hambat dan zona bunuh secara bermakna antar kelompok ekstrak biji pinang
10%, minyak atsiri serai 20% dan Chlorhexidine 2%. Uji Post Hoc menunjukkan
nilai signifikansi 0,00 (p<0,05) dan dapat diinterpretasikan bahwa ada perbedaan
signifikan efek antibakteri antara kelompok ekstrak biji pinang 10%, minyak
atsiri serai 20% dan Chlorhexidine 2%.

Kesimpulan dari penelitian ini, terdapat perbedaan efek antibakteri antara

ekstrak biji pinang 10% dengan minyak atsiri serai 20% terhadap E.faecalis
dimana ekstrak biji pinang 10% memiliki diameter zona hambat dan bunuh yang
lebih besar dibandingkan minyak atsiri serai 20%.

Kata Kunci : Ekstrak biji pinang, minyak atsiri serai, antibakteri.

x
 ABSTRACT

Enterococcus faecalis is a bacteria that causes failure of root canal treatment

(PSA). Root canal treatment is the treatment of pulp disease with necrotic pulp
tissue retrieval of root canal filling material was replaced. E faecalis bacteria can
avoid irrigation materials used in biomechanical preparation on PSA. This study
aims to determine the effectiveness of antibacterial difference between areca seed
extract 10% to lemongrass essential oil 20% against E.faecalis.

Type of research is a laboratory experiment. Making use of maceration

extract of areca nuts and lemongrass essential oil is obtained through steam
distillation directly. E.faecalis bacterial colonies grown on MHA incubated for 24
hours at 37°C. Testing of antibacterial power diffusion method using 9 replication
petri dish, each dish there are 3 types of paper discs containing areca nut seed
extract 10%, lemongrass essential oil 20% and Chlohexidine 2% further
incubated 24 hours at 37°C. Then the results of inhibition zone and kill zones
tested with One-Way ANOVA and Post Hoc.

Based on One-Way ANOVA test obtained significance value 0.00 (p <0.05)

so that it can be concluded that there are differences in inhibition zone diameter
and kill zone significantly between groups areca nut seed extract 10%,
lemongrass essential oil 20% and Chlorhexidine 2%. Post Hoc test showed a
significance value 0.00 (p <0.05) and can be interpreted that there is a significant
difference antibacterial effect between the groups areca nut seed extract 10%,
lemongrass essential oil 20% and Chlorhexidine 2%..

The conclusion of this research, there are differences between the antibacterial
effects of areca nut extract 10% to lemongrass essential oil 20% against E.
faecalis where areca nuts extract 10% have a diameter of inhibition zone and
commit greater than lemongrass essential oil 20%.

Keywords: areca nut seed extract, essential oils lemongrass, antibacterial.

xi
 BAB I

PENDAHULUAN

A. Latar Belakang

Enterococcus faecalis adalah bakteri anaerob gram positif yang dapat

hidup dalam keadaan dengan atau tanpa oksigen (Mulyawati, 2011). Bakteri

ini hidup dalam rongga mulut manusia yaitu mendominasi pada saluran akar

sebanyak 32%-70% (Wang dkk, 2012). Bakteri Enterococcus faecalis

menjadi penyebab kasus kegagalan perawatan saluran akar (PSA) dengan

prevalensi 24-77% (Mulyawati, 2011).

Perawatan saluran akar (PSA) adalah perawatan untuk penyakit pulpa

pada saluran akar gigi non vital atau nekrosis pulpa dengan pengambilan

jaringan pulpa nekrotik dari saluran akar dan menggantinya menggunakan

bahan pengisi (Stock dkk, 2004). Angka keberhasilan perawatan saluran

akar sebesar 98% yang keberhasilan ini dipengaruhi oleh prosedur PSA

yang baik. Prosedur PSA terbagi menjadi 3 tahapan utama yaitu preparasi

biomekanik saluran akar meliputi pembersihan dan pembentukan saluran

akar, sterilisasi dan pengisian saluran akar (obturasi saluran akar) (Soedjono

dkk, 2009). Bakteri Enterococcus faecalis penyebab kegagalan PSA mampu

menghindar dari instrumentasi alat-alat preparasi dan bahan irigasi yang

digunakan selama dilakukannya preparasi biomekanikal karena bakteri ini

mempunyai kemampuan untuk melakukan penetrasi ke dalam tubuli

dentinalis (Ferrari dkk, 2005).

1
 2

Irigasi saluran akar adalah salah satu tahapan PSA yang mempengaruhi

keberhasilan dari perawatan saluran akar (Tanumihardja, 2010). Larutan yang

tepat untuk irigasi turut berkontribusi dalam pembersihan saluran akar (Ford,

2004). Fungsi dari larutan irigasi sebagai pelarut debris, lubrikasi sistem

saluran akar sehingga pergerakan instrumen saat preparasi saluran akar lebih

mudah, pelarut sisa jaringan organik dan sebagai larutan disinfektan

(Darjono, 2011). Bahan irigasi yang ideal sebaiknya mempunyai efek toksik

yang rendah, harus mampu melarutkan jaringan organik dan anorganik,

melancarkan masuknya alat endodontik, bersifat antimikroba, mudah

penggunaannya dan tidak mahal (Arifah, 2009; Darjono, 2011).

Salah satu bahan irigasi saluran akar adalah Chlorhexidine. Chlorhexidine

2% bersifat antimikroba terhadap bakteri Enterococcus faecalis (Harahap dan

Retnowati, 2008). Kemampuan Chlorhexidine yang digunakan sebagai

disinfektan sangat besar karena Chlorhexidine bersifat antimikroba yang baik

terhadap bakteri gram positif, gram negatif, spora bakteri dan jamur. Namun

kelemahan Chlorhexidine sebagai bahan irigasi perawatan saluran akar tidak

memiliki kemampuan untuk melarutkan jaringan nekrotik dan menyebabkan

diskolorisasi (Tanumihardja, 2010).

Penggunaan bahan herbal pada pengobatan tradisional telah banyak

dilakukan oleh masyarakat Indonesia. Bahan pada pengobatan tradisional

dapat digunakan sebagai pilihan pengganti bahan pengobatan utama

(Darjono, 2011). Bahan herbal memiliki efek samping yang lebih sedikit

daripada bahan kimia sehingga penggunaan bahan herbal dinilai lebih aman
 3

daripada penggunaan bahan moderen (Sari, 2006). Dibutuhkan alternatif

bahan irigasi salah satunya dengan menggunakan bahan herbal.

Tanaman Pinang (Areca Catechu L) adalah tanaman yang digunakan

sebagai obat tradisional yang dapat menyembuhkan berbagai penyakit yang

diakibatkan oleh infeksi bakteri. Biji pinang mempunyai kandungan

proantosianidin yaitu merupakan tannin yang terkondensasi yang termasuk

dalam golongan flavonoid. Proantosianidin inilah yang mempunyai efek

antibakteri, antivirus, antikarsinogenik, anti-inflamasi, anti-alergi, dan

vasodilatasi (Fine, 2000). Pada penelitian Yulineri dkk (2006) mengatakan

bahwa biji pinang mempunyai sifat sebagai antibakteri terhadap bakteri

pathogen di rongga mulut yang di aplikasikan sebagai antiseptik obat kumur.

Menurut Sumarni (2010) ekstrak biji pinang pada konsentrasi 10%

menunjukkan daya hambat terhadap bakteri Staphylococcus aureus.

Obat herbal lainnya adalah tanaman serai dapur (Cymbopogon Citratus).

Minyak atsiri serai adalah minyak atsiri yang diperoleh dengan proses

penyuling bagian atas dari tumbuhan tersebut. Penelitian minyak atsiri serai

oleh Arswendiyumna (2011) menyebutkan bahwa minyak atsiri serai aktif

sebagai antibakteri. Hasil penelitian Darjono (2011) dengan menggunakan

berbagai konsentrasi menunjukkan bahwa minyak atsiri serai memiliki daya

antibakteri terhadap pertumbuhan Enterococcus faecalis dimana konsentrasi

minyak atsiri serai sebesar 20% memiliki daya hambat yang hampir sama

dengan EDTA (bahan irigasi saluran akar) terhadap pertumbuhan

Enterococcus faecalis.
 4

Oleh karena itu peneliti tertarik untuk mengetahui perbedaan efektifitas

antibakteri antara ekstrak biji pinang konsentrasi 10% dengan minyak atsiri

serai konsentrasi 20% terhadap Enterococcus faecalis secara in vitro.

B. Rumusan Masalah

Apakah ada perbedaan efektifitas antibakteri antara ekstrak biji pinang

konsentrasi 10% dengan minyak atsiri serai konsentrasi 20% terhadap

Enterococcus faecalis?

C. Tujuan Penelitian

1. Tujuan umum

Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui perbedaan efektifitas

antibakteri antara ekstrak biji pinang konsentrasi 10% dengan minyak

atsiri serai konsentrasi 20% terhadap Enterococcus faecalis secara in

vitro.

2. Tujuan khusus

a. Menentukan zona hambat dan zona bunuh ekstrak biji pinang

konsentrasi 10% terhadap bakteri Enterococcus faecalis.

b. Menentukan zona hambat dan zona bunuh minyak atsiri serai

konsentrasi 20% terhadap bakteri Enterococcus faecalis.

c. Menentukan zona hambat dan zona bunuh Chlorhexidine konsentrasi

2% terhadap bakteri Enterococcus faecalis.

d. Membandingkan efektifitas antibakteri ekstrak biji pinang dan minyak

atsiri serai berdasarkan zona hambat dan zona bunuh.

 5

D. Manfaat

1. Manfaat Teoritis

Penelitian ini diharapkan dapat memberikan pengetahuan dan

mekanisme antibakteri ekstrak biji pinang dan minyak atsiri serai

terhadap bakteri Enterococcus faecalis.

2. Manfaat Praktis

a. Memberikan informasi bagi dokter gigi tentang alternatif bahan

irigasi saluran akar ekstrak biji pinang dan minyak atsiri serai yang

mempunyai efektifitas antibakteri yang sama dengan larutan irigasi

kimia.

b. Sebagai dasar untuk penelitian lebih lanjut penggunaan klinis ekstrak

biji pinang dan minyak atsiri serai dalam praktisi kedokteran gigi.
 BAB II

TINJAUAN PUSTAKA

A. Tinjauan Pustaka

1. Perawatan saluran akar

Perawatan saluran akar (PSA) adalah jenis perawatan untuk

mempertahankan gigi yang nekrosis agar tetap dapat berfungsi (Soedjono

dkk, 2009). Perawatan saluran akar bertujuan untuk membersihkan dan

mendisinfeksi sistem saluran akar dengan menghilangkan jaringan

nekrotik, menghilangkan bakteri dan produk metabolismenya sehingga

mengurangi munculnya bakteri, mencegah perluasan penyakit dari pulpa

ke jaringan periapikal, dan membantu proses penyembuhan periapikal

(Rhodes, 2006). Tahap perawatan saluran akar (PSA) meliputi preparasi

biomekanik, sterilisasi dan pengisian saluran akar. Preparasi biomekanik

merupakan tahap pembentukan dan pembersihan saluran akar

menggunakan jarum endodontik dan bahan irigasi (Arifah, 2009).

Bahan irigasi saluran akar yang tepat mempengaruhi keberhasilan dari

perawatan saluran akar (Tanumihardja, 2010). Bahan irigasi dikatakan

baik apabila dapat melarutkan kotoran organik dan anorganik, mampu

melancarkan alat endodontik, membunuh mikroba, efek tosik rendah dan

ekonomis. Jenis bahan irigasi terbagi menjadi tiga golongan besar yaitu,

golongan chelating agent, golongan detergen dan golongan halogen

(Arifah, 2009). Jenis bahan irigasi golongan halogen adalah larutan yang

6
 7

bersifat lubrikan, pelarut jaringan pulpa, pemutih dan antiseptik yang kuat.

Jenis bahan irigasi golongan detergen akan menambah kebersihan karena

golongan ini efektif menghilangkan sisa jaringan lemak. Bahan irigasi

golongan chelating solution adalah bahan yang digunakan untuk

mendekalsifikasi saluran akar yang sempit.

Chlorhexidine 2% adalah salah satu bahan irigasi saluran akar dan

bersifat antimikroba terhadap bakteri Enterococcus faecalis (Harahap dan

Retnowati, 2008). Penggunaan Chlorhexidine 2% sebagai bahan irigasi

saluran akar tidak mengiritasi jaringan periapikal, bau tidak menyengat,

kurang toksik bila dibandingkan dengan bahan lainnya, tetapi

Chlorhexidine 2% tidak mampu untuk melarutkan jaringan nekrotik dan

dapat menyebabkan diskolorisasi pada gigi (Tanumihardja, 2010).

2. Enterococcus faecalis

Bakteri Enterococcus faecalis merupakan jenis bakteri fakultatif

anaerob termasuk dalam bakteri gram positif dengan bentuk kokus, yang

dapat tumbuh pada keadaan ada atau tidak ada oksigen dan merupakan

flora normal yang biasanya terdapat pada rongga mulut (Mulyawati,

2011). Bakteri Enterococcus faecalis adalah spesies yang paling umum

dan merupakan penyebab dari 85% - 90% infeksi bakteri genus

Enterococcus (Brooks dkk, 2007). Enterococcus faecalis sangat resisten

terhadap medikasi selama dilakukannya perawatan saluran akar dan

menjadi penyebab utama pada kasus kegagalan perawatan saluran akar.

 8

Habitat dari bakteri ini berada pada saluran pencernaan, saluran kemih

dan juga dapat berkoloni di rongga mulut manusia. Enterococcus faecalis

merupakan bakteri yang tidak membentuk spora, berbentuk ovoid dan

memiliki diameter 0,5 – 1 µm, terdiri dari rantai pendek, tunggal ataupun

berpasangan (Kundabala dan Suchitra, 2002).

Gambar 1. Koloni Enterococcus faecalis (Fisher K, P.C., 2009)

a. Klasifikasi Enterococcus faecalis

Menurut Kundabala dan Suchitra (2002) Enterococcus faecalis

diklasifikasikan dalam :

Kingdom : Bacteri

Filum : Firmicutes

Famili : Enterococcaceae

Genus : Enterococcus

Species : Enterococcus faecalis

b. Enterococcus faecalis sebagai bakteri yang berperan dalam infeksi

saluran akar

Prevalensi dari bakteri Enterococcus faecalis pada saluran akar

adalah sebanyak 32% - 70%, dengan ini bakteri tersebut menjadi

 9

mikroflora dominan yang ada pada saluran akar (Wang dkk, 2012).

Bakteri ini ditemukan sebanyak 4% - 40% dalam infeksi endodontik

primer dan lebih banyak dengan prevalensi 24% - 77% pada lesi

periradikular persistensi (Stuart dkk, 2006). Menurut Selcuk dkk

(2009) bakteri Enterococcus faecalis sebanyak 74,4% menjadi

penyebab kegagalan perawatan saluran akar.

Pada kasus kegagalan PSA, kualitas dari obturasi juga sangat

mempengaruhi kolonisasi bakteri Enterococcus faecalis dan mikroflora

lainnya yang ada didalam saluran akar (Wang dkk, 2012). Menurut

Stuart (2006) bakteri Enterococcus faecalis dapat bertahan dalam

saluran akar karena mempunyai kemampuan untuk bertahan dalam

keadaan tidak tersedia nutrisi, mampu berikatan dengan dentin, dapat

merubah respon host, membentuk biofilm, menekan kerja limfosit dan

menginvasi tubulus dentin. Bakteri Enterococcus faecalis dapat

terhindar dari instrumentasi alat-alat preparasi dan bahan irigasi yang

digunakan selama dilakukannya preparasi biomekanikal karena bakteri

tersebut mempunyai kemampuan untuk melakukan penetrasi ke dalam

tubuli dentinalis (Ferrari dkk, 2005).

3. Tanaman pinang

Tanaman Pinang (Areca Catechu L) adalah tanaman yang digunakan

sebagai obat tradisional karena potensi yang dimilikinya. Khasiat yang

dimiliki oleh buah pinang dapat menyembuhkan berbagai penyakit yang

diakibatkan oleh infeksi bakteri. Tanaman pinang ditanam dan tumbuh di

 10

pekarangan, di taman ataupun di budidayakan (Dalimartha, 2009).

Tanaman ini juga dapat ditemukan di tepi sungai dan ditempat lainnya,

juga dapat ditemukan dari 1 -1.400 m di atas permukaan laut (Arisandi dan

Andriani, 2011).

Pinang memiliki morfologi dengan tinggi 10-30 m dengan berdiameter

15-20 cm, dan pada daerah bekas daun yang lepas tidak bercabang

(Arisandi dan Andriani, 2011). Tanaman ini memiliki batang pohon yang

langsing dan tumbuh tegak. Daun majemuk dan menyirip, tumbuh di

ujung batang berkumpul dan membentuk roset batang (Dalimartha, 2009).

Buah berbentuk buni bulat seperti telur sungsang memanjang, dengan

panjang 3,5-7 cm, memiliki dinding bulat berserabut dan berwarna merah

jingga jika masak (Prasetyono, 2012). Biji tunggal berbentuk seperti

kerucut yang pendek dengan ujungnya membulat, pangkal yang agak datar

dengan lekukan dangkal, memiliki panjang 15-30 mm, permukaan luar biji

pinang berwarna kecoklatan sampai merah kecoklatan yang berlekuk-

lekuk menyerupai jala dengan warnanya lebih muda (Arisandi dan

Andriani, 2011).

Gambar 2. Tanaman Pinang

 11

a. Klasifikasi tanaman pinang

Klasifikasi tanaman pinang menurut Prasetyono (2012) yaitu :

Divisi : Spermatophyta

Subdivisi : Angiospermae

Kelas : Monocotyledonae

Bangsa : Arecales

Famili : Arecaceae

Marga : Areca

Sinonim : A. hortensis Lour

Spesies : Areca Catechu L

b. Kandungan dalam biji pinang

Kandungan biji pinang adalah senyawa alkaloid sebanyak 0,3-

0,6%, yaitu seperti arekolin (C8 H13 NO2), arekolidine, arekain,

guvakolin, guvasine dan isoguvasine (Prasetyono, 2012). Selain itu

juga mengandung tannin terhidrolisis 15%, areca red, lemak 14%

(palmitic, oleic, linoleic, palmitoleic, stearic, caproic, caprylic, lauric,

myristic acid), saponin (diosgenin), steroid (kryptogenin, β-sitosterol),

asam amino, choline, dan catechin (Dalimartha, 2009).

c. Biji pinang sebagai antibakteri

Tanaman Pinang telah banyak dimanfaatkan oleh masyarakat

Indonesia sejak lama. Kandungan proantosianidin dalam biji pinang

merupakan tannin yang terkondensasi yang termasuk dalam golongan

flavonoid mempunyai efek antibakteri, antivirus, antikarsinogenik,

 12

anti-inflamasi, anti-alergi, dan vasodilatasi (Fine, 2000). Flavonoid

merupakan salah satu dari sekian banyak senyawa metabolit sekunder

yang dihasilkan oleh suatu tanaman, yang bisa dijumpai pada bagian

daun, akar, kayu, kulit, tepung sari, bunga dan biji. Secara kimia,

flavonoid mengandung cincin aromatik tersusun dari 15 atom karbon

dengan inti dasar tersusun dalam konjugasi C6-C3-C6 (dua inti

aromatik terhubung dengan 3 atom karbon). Senyawa flavonoid

memiliki kemampuan untuk menghambat siklus sel sehingga

proliferasi sel terganggu. Flavonoid juga dapat merusak dinding sel

bakteri gram positif dengan cara memanfaatkan perbedaan kepolaran

antara gugus alkohol pada rantai polifenol senyawa flavonoid dengan

lipid penyusun sel bakteri (Saputra dan Suryani, 2012).

4. Tanaman serai

Tanaman serai di Indonesia merupakan salah satu tanaman jenis

rumput-rumputan yang sudah lama dibudidayakan (Naik dkk, 2010).

Tanaman serai terbagi menjadi 2 jenis tanaman yaitu serai dapur

(Cymbopogon Citratus) dan serai wangi (Cymbopogon nardus L).

Tanaman serai tumbuh di daerah liar (Sastrapradja, 2012). Tanaman ini

hidup dengan memerlukan iklim yang panas dengan banyak cahaya

matahari dan curah hujan yang cukup. Tanaman serai dapur tumbuh di

daerah panas dengan suhu rata-rata 23-30˚ dan berada di ketinggian 50-

2700 m di atas permukaan air laut. Tanaman ini akan tumbuh baik pada

tanah dengan keasaman pH 5,5,-7,5.

 13

Tanaman serai dapur merupakan tanaman merumpun seperti rumput

yang memiliki daun memita panjang (Sastrapradja, 2012). Tinggi dari

batang tanaman serai mencapai 2-3 m dan memadat pada bagian

bawahnya. Terdapat lapisan lilin, halus dan berbubuk di bagian pangkal

daun dengan panjang daun berkisar 0,6-1,2 m. Daunnya yang memita dan

panjang menyerupai ilalang yang meruncing pada ujungnya.

Gambar 3. Tanaman Serai

a. Klasifikasi tanaman serai

Klasifikasi dari tanaman serai dapur yaitu :

Kingdon : Plantae

Subkingdom : Tracheobionta

Divisi : Spermatophyta

Kelas : Liliopsida

Subkelas : Commelinidae

Ordo : Poales
 14

Famili : Poaceae

Genus : Cymbopogon

Spesies : Cymbopogon Citratus

b. Kandungan serai dapur sebagai antibakteri

Kandungan dari tanaman serai terutama adalah minyak atsiri,

kavikol, augenol, elemol, kadonon, kadinen, vanillin, limonen dan

kamfen (Astuti, 2012). Minyak atsiri yang terkandung dalam serai

dapur menurut Agusta (2000) terdiri dari komponen β-Mirsena 4,16%,

sineol 0,39%, β-cis-Osimena 0,55%, osimena 0,28%, β-linalool 0,74%,

2-metil-1,6-heptadiena 0,31%, cis-geraniol 0,40%, α-pinena oksida

1,01%, 7-metil-3,4-oktadiena 1,44%, β-sitral 20,61%, α-sitral 26,99%,

(Z)-3,7-dimetil-2,6-pktadien-1-ol 0,47%, β-elemena 0,41%, kariofilena

1,35%, α-bergamotena 1,11%, (Z) β-farnesena 1,37%.

Minyak Atsiri serai dapur mempunyai kandungan utama yaitu

senyawa sitral yang memiliki 2 isonomer terdiri dari geranial (α-sitral)

26,99% dan neral (β-sitral) 20,61% (Agusta, 2000., Astuti, 2012).

Menurut Bassole dkk (2011) senyawa sitral tersebut bersifat

antimikroba dan menunjukkan aktivitas tertinggi dalam menghambat

pertumbuhan bakteri Enterococcus faecalis. Senyawa sitral memiliki

kemampuan untuk merusak membrane sel, menyebabkan kerusakan

asam nukleat dan membuat inaktif protein (Kadarohman dkk, 2011)

 15

B. Kerangka Teori

Kandungan flavonoid
yang mampu untuk
merusak dinding sel dan Ekstrak biji
menghambat proliferasi pinang
sel.

Antibakteri
Kandungan sitral terdiri
dari geranial (α-sitral)
dan neral (β-sitral) yang Minyak atsiri serai
mampu untuk merusak
membrane sel

Bakteri Enterococcus
faecalis
Gangguan fungsi sel
Mempunyai kemampuan
bertahan dalam keadaan
tidak tersedia nutrisi,
mampu berikatan dengan
dentin, dapat merubah Penyebab
respon host, membentuk kegagalan PSA
biofilm, menekan kerja
limfosit dan menginvasi
tubulus dentin.

Daya bunuh Daya hambat

Enterococcus faecalis Enterococcus faecalis

Penurunan jumlah bakteri

Enterococcus faecalis
 16

C. Kerangka Konsep

Ekstrak biji pinang

Pertumbuhan bakteri Penurunan jumlah bakteri

Enterococcus faecalis Enterococcus faecalis

Minyak atsiri serai

D. Hipotesis

Terdapat perbedaan efek antibakteri antara ekstrak biji pinang konsentrasi

10% dengan minyak atsiri serai konsentrasi 20% terhadap bakteri

Enterococcus faecalis.
 BAB III

METODE PENELITIAN

A. Jenis Penelitian dan Rancangan Penelitian

Jenis penelitian ini merupakan penelitian eksperimen laboratoris.

Rancangan penelitian menggunakan Posttest Only Control Group Design.

Penelitian ini untuk mengetahui perbedaan efektifitas antibakteri antara

ekstrak biji pinang konsentrasi 10% dengan minyak atsiri serai konsentrasi

20% terhadap bakteri Enterococcus faecalis.

B. Variabel Penelitian

1. Variabel bebas

Variabel bebas dalam penelitian ini adalah ekstrak biji pinang dengan

konsentrasi 10% dan minyak atsiri serai dengan konsentrasi 20%.

2. Variabel tergantung

Variabel tergantung dalam penelitian ini adalah daya hambat dan daya

bunuh terhadap bakteri Enterococcus faecalis.

3. Variabel terkendali

Variabel terkendali dalam penelitian ini adalah :

a. Jenis Bakteri : Enterococcus faecalis

b. Jenis media pertumbuhan bakteri : MHA (Mueller Hinton Agar)

c. Waktu pembiakan murni bakteri Enterococcus faecalis diinkubasi 24

jam

d. Suhu inkubasi 37˚C

17
 18

e. Larutan Chlorhexidine 2% sebagai kontrol positif

f. Sterilisasi instrumen dan bahan percobaan

C. Definisi Operasional

1. Ekstrak biji pinang

Ekstrak biji pinang adalah ekstrak yang dibuat dari proses maserasi biji

pinang. Pembuatan ekstrak biji pinang dalam bentuk serbuk sebanyak 200

gram dimaserasi dengan 1000 ml larutan metanol 96% selama 3x24 jam

pada suhu kamar (Sumarni, 2010). Ekstrak biji pinang tersebut dibuat

dengan konsentrasi 10%. Penetapan konsentrasi tersebut ditetapkan

berdasarkan penelitian sebelumnya dimana telah diketahui nilai MIC

(Minimum Inhibitory Concentration) ekstrak biji pinang sebagai

antibakteri pada konsentrasi 10% (Sumarni, 2010).

2. Minyak atsiri serai

Minyak atsiri serai dapur adalah salah satu senyawa organik yang

berasal dari jaringan tumbuhan serai dapur. Minyak atsiri serai dapur

diperoleh melalui penyulingan uap langsung (steam distillation) dari

batang serai dapur. Minyak atsiri serai tersebut dibuat dengan konsentrasi

20%. Penetapan konsentrasi tersebut ditetapkan berdasarkan penelitian

sebelumnya dimana telah diketahui nilai MIC (Minimum Inhibitory

Concentration) minyak atsiri serai terhadap bakteri Enterococcus faecalis

pada konsentrasi 20% (Darjono, 2011).

 19

3. Chlorhexidine

Chlorhexidine adalah bahan desinfektan yang bersifat antimikroba

yang baik terhadap bakteri gram positif dan gram negatif dengan

kemampuan antibakteri bersepktrum luas serta memiliki toksisitas yang

rendah. Chorhexidine yang digunakan dalam penelitian ini adalah

konsentrasi 2% dan digunakan sebagai kontrol positif.

4. Pertumbuhan bakteri Enterococcus faecalis

Koloni Enterococcus faecalis adalah bakteri yang berasal dari stem

cell Enterococcus faecalis ATCC 29212. Pertumbuhan bakteri

Enterococcus faecalis dari biakan murni yang dikultur pada media MHA

(Mueller Hinton Agar) dalam suasana anaerob selama 24 jam pada suhu

37˚C.

5. Zona bunuh dan zona hambat bakteri

Metode yang digunakan dalam penentuan zona hambat dan zona

bunuh adalah metode difusi dengan uji potensi berdasarkan pengamatan

luas daerah hambat pertumbuhan bakteri. Zona bunuh adalah daerah

disekitar disk yang sama sekali tidak ditemukan pertumbuhan bakteri

ditandai dengan daerah berwarna bening. Pengukuran diameter zona

bunuh menggunakan jangka sorong dengan cara pengukuran dari tepi

daerah zona bunuh hingga ke tepi zona bunuh terpanjang lainnya

menggunakan satuan milimeter. Zona hambat adalah daerah disekitar disk

dimana pertumbuhan bakteri dihambat tetapi tidak dimatikan dengan

 20

pengukuran menggunakan jangka sorong dalam satuan milimeter. Skala

yang digunakan dalam penelitian ini yaitu skala rasio.

Pengukuran zona bunuh dan zona hambat diperoleh dari :

a. Pengukuran jarak garis : AD, ad, BE, be, CF, cf yang dibuat dengan

penggaris siku-siku dan spidol pada cawan petri.

b. Pengukuran menggunakan jangka sorong dengan ketelitian 0,01mm

C
b c

a d
A D

f e
F

Gambar 4. Diagram pengukuran diamter zona bunuh dan zona hambat

Keterangan :

Lingkaran abcdef : kertas cakram (disk) berisi larutan coba

Lingkaran ABCDEF : Zona bunuh / zona hambat bakteri

c. Perhitungan diameter zona bunuh dan zona hambat bakteri dari

esktrak biji pinang dan minyak atsiri serai terhadap Enterococcus

faecalis dengan rumus :

(𝐴𝐷 − 𝑎𝑑) + (𝐵𝐸 − 𝑏𝑒) + (𝐶𝐹 − 𝑐𝑓)

3
 21

D. Populasi dan Sampel

1. Populasi

Populasi penelitian merupakan keseluruhan objek dari penelitian atau

objek yang akan diteliti (Notoadmodjo, 2010). Populasi dalam penelitian

ini adalah bakteri Entercoccus faecalis seri ATCC 29212.

2. Sampel

Sampel yang digunakan adalah koloni Entercoccus faecalis dari biakan

murni yang dikultur pada media MHA (Mueller Hinton Agar) dalam

suasana anaerob selama 24 jam pada suhu 37˚C yang dilakukan di

Laboratorium Mikrobiologi Fakultas MIPA Universitas Negeri Semarang.

3. Besar sampel

Besar sampel yang akan dilakukan pada penelitian ini menggunakan

rumus Frederer :

(t-1) (r-1) ≥ 15

Keterangan :

t : jumlah perlakuan dalam penelitian

r : jumlah perlakuan ulang (sampel)

Penelitian ini menggunakan 3 kelompok perlakuan. Jika jumlah

perlakuan (t) sebanyak 3 kelompok, maka banyaknya jumlah perlakuan

ulang (r) adalah:

(t-1) (r-1) ≥ 15

(3-1) (r-1) ≥ 15

2(r-1) ≥ 15
 22

2r – 2 ≥ 15

2r ≥ 17

r ≥ 8,5

r=9

Banyaknya jumlah perlakuan ulang (r) adalah 9 sesuai dengan rumus

diatas, artinya dilakukan 9 kali pengulangan pada setiap kelompok

perlakuan. Kelompok perlakuan dalam penelitian ini adalah :

 Kelompok 1 : ekstrak biji pinang konsentrasi 10%  9 sampel

 Kelompok 2 : minyak atsiri serai konsentrasi 20%  9 sampel

 Kelompok 3 : larutan chlorhexidine 2% (kontrol positif)  9 sampel

E. Instrumen dan Bahan Penelitian

1. Instrumen penelitian

a. Masker

b. Sarung tangan

c. Autoklaf ( merk Hirayama model HVE 50 AUTOCLAVE made in

Jepang )

Gambar 5. Autoklaft
 23

d. Oven

e. Pipet mikro 1 ml (merk Transferpette)

Gambar 6. Pipet mikro

f. Cawan petri (diameter 100mm)

g. Rotary evaporator (merk IKA made in Germany)

h. Blender (merk Miyako)

Gambar 7. Blender

i. Spatula
 24

j. Inkubator ( BD Series merk Binder made in Germany )

Gambar 8. Inkubator

k. Gelas ukur

l. Kertas saring

m. Lampu spirtus

Gambar 9. Lampu spirtus

n. Ose steril

o. Kaca pembesar

p. Jangka sorong

q. Alat tulis

r. Penggaris

s. Kamera digital Sony

 25

2. Bahan penelitian

a. Biji pinang

b. Batang serai dapur

c. Chlorhexidine 2% (merk BISCO made in USA)

Gambar 10. Chlorhexidine 2%

d. Suspensi bakteri Enterococcus faecalis

Gambar 11. Koloni Enterococcus faecalis

e. Larutan metanol 96% 100 ml

f. Media MHA (Mueller Hinton Agar)

g. Spirtus
 26

h. Kertas cakram (merk OXOID)

Gambar 12. Kertas cakram

i. Kapas steril

j. Larutan NaCl 0,9%

k. Larutan Alkohol 70%

l. Akuades

F. Cara Penelitian

1. Sterilisasi

Sterilisasi peralatan dan bahan yang akan digunakan untuk penelitian

ini merupakan langkah pertama yang akan dilakukan dengan tujuan agar

peralatan yang akan digunakan tidak terkontaminasi oleh mikroba atau

bakteri yang tidak diinginkan. Sterilisasi alat dilakukan dengan

menggunakan autoklaf yang menggunakan tekanan yang disebabkan uap

air, sehingga suhu dapat mencapai 1210C dengan tekanan 2 atm selama 30

menit.

2. Pembuatan ekstrak biji pinang

a. Pembuatan ekstrak biji pinang menurut penelitian Sumarni (2010)

dengan cara mempersiapkan biji pinang dan dicuci bersih terlebih

 27

dahulu. Biji pinang dipotong setebal 1-2 cm dan dikering anginkan

dalam suhu ruangan selama 24 jam, selanjutnya dikeringkan dalam

oven dengan suhu 45˚C selama 2x24jam.

Gambar 13. Pembersihan dan pemotongan biji pinang

b. Biji buah pinang yang sudah dikering dihaluskan menggunakan

blender untuk menghasilkan serbuk biji pinang.

Gambar 14. Proses biji pinang diblender menjadi serbuk

c. Sebanyak 200 gram serbuk biji pinang dimaserasi dengan 1000 ml

larutan metanol 96% selama 3x24 jam dengan suhu temperatur kamar.

d. Maserat yang diperoleh dari proses maserasi dikisatkan menggunakan

penguap putar atau rotary evaporator dengan suhu 65˚C. Kemudian

ekstrak diencerkan dengan akuades hingga diperoleh konsentrasi 10%.

 28

3. Pembuatan minyak atsiri serai

a. Pembuatan minyak atsiri serai menurut penelitian Bassole (2011)

dengan cara mempersiapkan daun serai dapur yang telah dicuci bersih.

Daun serai dirajang dengan panjang sekitar 10 cm dan kemudian

dimasukkan dalam ketel suling untuk dilakukan penyulingan dengan

uap langsung.

b. Penyulingan dilakukan dengan tekanan 1 atm dengan waktu antara 1-3

jam. Setelah proses penyulingan selesai akan diperoleh rendaman

minyak atsiri serai.

c. Selanjutnya konsentrasi minyak atsiri serai dibuat dengan konsentrasi

20% yang didilusikan dalam Mueller Hinton Broth. Sebanyak 2 ml

minyak atsiri serai dilarutkan dalam 10 cc Mueller Hinton Broth untuk

mendapatkan konsentrasi 20%.

4. Pembuatan media MHA (Mueller Hinton Agar)

a. Bahan Mueller Hinton Agar sebanyak 7,6 gram dilarutkan ke dalam

200 ml akuades, lalu dipanaskan di atas tungku pemanas sampai

mendidih.

b. Media yang telah masak masukkan ke dalam erlenmeyer dan

distrerilkan di dalam autoklaf selama 15 menit dengan 2 atm pada suhu

121˚C, kemudian media disimpan dalam lemari pendingin.

 29

c. Apabila media MHA akan digunakan maka dipanaskan kembali

hingga mendidih lalu dituangkan ke dalam cawan petri dan dibiarkan

hingga dingin.

5. Pembuatan suspensi bakteri Enterococcus faecalis

a. Pembiakan murni bakteri Enterococcus faecalis menggunakan ose

steril di tanam ke media MHA (Mueller Hinton Agar).

b. Biakan bakteri diinkubasi selama 24 jam pada suhu 37˚C.

6. Uji daya hambat dan daya bunuh

a. Pengujian daya hambat dan daya bunuh sesuai dengan metode Kirby

Bauer. Langkah pertama siapkan cawan petri yang telah berisi media

MHA sebanyak 9 cawan.

b. Suspensi bakteri yang telah disiapkan diambil menggunakan ose steril,

lalu ulaskan diseluruh permukaan cawan MHA secara merata pada

semua cawan petri yang telah disiapan. Diamkan cawan petri tersebut

selama 5 menit.

c. Siapkan kertas cakram dan celupkan bahan coba dengan dibagi

menjadi tiga daerah (meliputi ekstrak biji pinang 10%, minyak atsiri

serai 20% dan chlorhexidine 2%), lalu biarkan sejenak dan letakkan

kertas cakram tersebut pada permukaan media MHA. Tekan kertas

cakram menggunakan pinset supaya menempel sempurna dipermukaan

media MHA.

d. Inkubasi seluruh cawan petri pada suhu 37ºC selama 24 jam. Setelah

diinkubasi lakukan pengukuran diameter daerah berwarna bening

 30

menggunakan jangka sorong untuk menentukan zona hambat.

Kemudian bandingkan seluruh dimameter dari ketiga bahan coba.

e. Pengukuran zona bunuh dengan menggunakan jangka sorong pada

daerah berwarna abu-abu dimana sama sekali tidak ditemukan

pertumbuhan bakteri. Kemudian bandingkan seluruh dimameter dari

ketiga bahan coba.

G. Tempat dan Waktu

1. Tempat : Balai Laboratorium Kesehatan Provinsi Jawa Tengah

2. Waktu : Selasa - rabu, 4 - 5 Juni 2013

H. Analisis Hasil

Hasil data yang didapatkan dianalisis secara statistik menggunakan SPSS.

Pengujian normalitas data dengan uji Shapiro-Wilk dan pengujian

homogenitas data dengan uji Levene. Data didapatkan normal dan homogen

maka dianalisa menggunakan uji One-Way ANOVA. Lakukan uji Post Hoc

setelah pengujian dengan One-Way ANOVA untuk mengetahui letak

perbedaan rerata antar kelompok uji.

 31

I. Skema Alur Penelitian

Sterilisasi Alat dan Bahan

Pembuatan sediaan bakteri Enterococcus

faecalis pada 9 cawan petri media MHA

Cawan petri MHA

diberikan 3 bahan uji

Ekstrak Biji Minyak Atsiri Chlorhexidine

Pinang 10% Serai 20% 2%

Inkubasi 24 jam
pada suhu 37˚C

Daya hambat bakteri Daya bunuh bakteri

Pengukuran zona hambat Pengukuran zona bunuh pada

pada setiap cawan petri setiap cawan petri MHA
MHA dengan mengukur dengan mengukur diameter
diameter berwarna berwarna daerah daerah berwarna
keruh. bening.

Analisa Data
 BAB IV

HASIL PENELITIAN DAN PEMBAHASAN

A. Hasil Penelitian

1. Uji efektifitas antibakteri ekstrak biji pinang dan minyak atsiri serai

terhadap Enterococcus faecalis

Hasil penelitian uji efektifitas antibakteri ekstrak biji pinang dan

minyak atsiri serai terhadap pertumbuhan Enterococcus faecalis secara in

vitro didapatkan zona bunuh yang ditandai dengan daerah berwarna bening

dan zona hambat yang ditandai dengan daerah berwarna keruh. Diameter

zona hambat dan zona bunuh antibakteri ekstrak biji pinang dan minyak

atsiri serai didapatkan dengan cara perhitungan mengukur garis diameter

dari batas daerah yang terbentuk disekitar disk cakram dikurangi dengan

diameter kertas cakram yang berukuran sebesar 6 mm. Data zona bunuh

dan zona hambat tersebut disajikan dalam tabel 1.1 dan tabel 1.2.

Pada kelompok ekstrak biji pinang membentuk diameter zona bunuh

dan zona hambat dengan rata-rata berturut-turut adalah 2,06 mm dan

2,35 mm. Diameter zona bunuh dan zona hambat yang terbentuk pada

kelompok minyak atsiri serai dengan rata-rata berturut-turut adalah

0,93 mm dan 0,93 mm. Pada kelompok Chlorhexidine 2% yang digunakan

sebagai kontrol positif membentuk diameter zona bunuh dan zona hambat

dengan rata-rata berturut-turut adalah 12,29 mm dan 12,29 mm.

32
 33

Tabel 1.1 Diameter zona bunuh ekstrak biji pinang 10%, minyak
atsiri serai 20% dan Chlorhexidine 2% terhadap
pertumbuhan Enterococcus faecalis
Diameter zona bunuh (mm)
Replikasi
Pinang 10% Serai 20% Chlorhexidine 2%
1 1,8 0,86 12,3
2 2,26 0,96 12,13
3 2,03 0,93 12,33
4 2 1,06 12,33
5 2 0,93 12,43
6 1,93 0,86 12,03
7 2,2 0,96 12,3
8 2,16 0,96 12,23
9 2,2 0,83 12,5
rata-rata 2,06 0,93 12,29
Sumber data : Primer (Hasil Penelitian di Balai Laboratorium Kesehatan)

Tabel 1.2 Diameter zona hambat ekstrak biji pinang 10%, minyak
atsiri serai 20% dan Chlorhexidine 2% terhadap
pertumbuhan Enterococcus faecalis
Diameter zona hambat (mm)
Replikasi
Pinang 10% Serai 20% Chlorhexidine 2%
1 2,33 0,86 12,3
2 2,6 0,96 12,13
3 2,26 0,93 12,33
4 2,33 1,06 12,33
5 2,43 0,93 12,43
6 2,43 0,86 12,03
7 2,36 0,96 12,3
8 2,3 0,96 12,23
9 2,13 0,83 12,5
rata-rata 2,35 0,93 12,29
Sumber data : Primer (Hasil Penelitian di Balai Laboratorium Kesehatan)

2. Analisa data daya bunuh ekstrak biji pinang dan minyak atsiri serai

terhadap Enterococcus faecalis

Untuk mengetahui perbedaan efektifitas daya bunuh antara ekstrak biji

pinang 10%, minyak atsiri serai 20% dan Chlorhexidine 2% terhadap

 34

bakteri Enterococcus faecalis dilakukan uji One-Way ANOVA dengan

syarat data berdistribusi normal dan homogen. Data terlebih dahulu

dilakukan uji normalitas dengan uji Shapiro-Wilk dan uji homogenitas

dengan uji Levene.

Tabel 2.1 Uji normalitas data diameter zona bunuh ekstrak biji
pinang 10%, minyak atsiri serai 20% dan Chlorhexidine
2% terhadap pertumbuhan Enterococcus faecalis
Kelompok Kemaknaan
Chlorhexidine 2% 0.802
Pinang 10% 0.582
Serai 20% 0.409

Hasil analisis menunjukkan bahwa nilai Shapiro-Wilk pada keseluruhan

kelompok memiliki nilai p > 0.05 sehingga dapat disimpulkan data zona

bunuh berdistribusi normal. Selanjutnya data dilakukan uji homogenitas.

Tabel 2.2 Uji homogenitas data diameter zona bunuh ekstrak biji
pinang 10%, minyak atsiri serai 20% dan Chlorhexidine
2% terhadap pertumbuhan Enterococcus faecalis
Levene Statistic

2.518 Sig. 0.102

Hasil uji homogenitas menunjukkan keseluruhan nilai Signifikasi

adalah 0.102 (p > 0.05) maka dapat disimpulkan bahwa varian data

homogen.

a. Uji One-Way Anova

Setelah seluruh data diameter zona bunuh diketahui berdistribusi

normal dan homogen, maka data selanjutnya diuji dengan

menggunakan uji One-Way ANOVA. Uji One-Way ANOVA ini

 35

dilakukan untuk menguji hipotesis yang membandingkan nilai rerata

lebih dari 2 kelompok perlakuan.

Tabel 2.3 Rerata diameter zona bunuh ekstrak biji pinang 10%,
minyak atsiri serai 20% dan Chlorhexidine 2%
terhadap pertumbuhan Enterococcus faecalis
Kelompok perlakuan X dan SB
Biji pinang 10% 2,064 ± 0,150
Minyak atsiri serai 20% 0,927 ± 0,070
Chlorhexidine 2% (kontrol) 12,286 ± 0,143

Berdasarkan tabel 2.3 dapat diketahui bahwa rerata diameter zona

bunuh yang terbentuk pada ekstrak biji pinang 10% merupakan nilai

terbesar dibandingkan dengan rerata diameter zona bunuh yang

terbentuk pada minyak atsiri serai 20% , sedangkan kontrol

menunjukkan terbentuknya zona bunuh paling besar diantara

kelompok lain sebesar 12,286 dengan simpang baku ± 0,143.

Tabel 2.4 Uji One-Way ANOVA daya bunuh ekstrak biji pinang
10%, minyak atsiri serai 20% dan Chlorhexidine 2%
terhadap pertumbuhan Enterococcus faecalis
E.faecalis
Rerata Kemaknaan
Antar kelompok 352.215 0.000
Dalam kelompok 0.016

Hasil analisis data dengan uji One-Way ANOVA menunjukkan

nilai p (Sig.) = 0.000 yang berarti nilai p < 0.005, sehingga dari hasil

tersebut dapat disimpulkan bahwa ada perbedaan daya bunuh ekstrak

biji pinang 10%, minyak atsiri serai 20% dan Chlorhexidine 2%

terhadap bakteri Enterococcus faecalis. Dengan demikian hipotesis

yang diajukan peneliti dapat diterima.

 36

b. Uji Post Hoc

Uji Post Hoc dilakukan untuk mengetahui kelompok yang

memiliki mean yang berbeda secara signifikan dari masing-masing

kelompok tersebut. Berdasarkan uji Post Hoc dengan menggunakan

Fisher’s Least Significant Difference (Fisher’s LSD) diperoleh hasil

sebagai berikut :

Tabel 2.5 Hasil uji Post Hoc daya bunuh ekstrak biji pinang 10%,
minyak atsiri serai 20% dan Chlorhexidine 2%
terhadap pertumbuhan Enterococcus faecalis

Perbedaan
Kelompok Rerata Kelompok Rerata Kemaknaan
rerata
Chlorhexidine 2% 12,2867 Pinang 10% 2,0644 10,22222 0.000
Chlorhexidine 2% 12,2867 Serai 20% 0,9278 11,35889 0.000
Pinang 10% 2,0644 Serai 20% 0,9278 1,13667 0.000

Berdasarkan tabel uji Post Hoc diatas diketahui perbedaan rerata

antar kelompok yang memiliki nilai tertinggi terdapat pada kelompok

Chlorhexidine 2% terhadap minyak atsiri serai 20% yaitu sebesar

11.35889, sedangkan perbedaan rerata antar kelompok yang memiliki

nilai terendah terdapat pada kelompok minyak atsiri serai 20%

terhadap ekstrak biji pinang 10% yaitu dengan nilai -1.13667.

Pada tabel uji Post Hoc juga diperoleh nilai p (Sig.) antara

kelompok perlakuan satu dengan kelompok perlakuan lainnya adalah

p = 0.000. Hasil nilai p (Sig.) = 0.000 pada seluruh kelompok

menunjukkan bahwa terdapat perbedaan rerata diameter zona bunuh

 37

yang signifikan antara kelompok ekstrak biji pinang 10%, minyak

atsiri serai 20% dan Chlorhexidine 2%.

3. Analisa data daya hambat ekstrak biji pinang dan minyak atsiri serai

terhadap Enterococcus faecalis

Untuk mengetahui perbedaan efektifitas daya hambat antara ekstrak

biji pinang 10%, minyak atsiri serai 20% dan Chlorhexidine 2% terhadap

bakteri Enterococcus faecalis dilakukan uji One-Way ANOVA dengan

syarat data berdistribusi normal dan homogen. Data terlebih dahulu

dilakukan uji normalitas dengan uji Shapiro-Wilk dan uji homogenitas

dengan uji Levene

Tabel 3.1 Uji normalitas data diameter zona hambat ekstrak biji
pinang 10%, minyak atsiri serai 20% dan Chlorhexidine
2% terhadap pertumbuhan Enterococcus faecalis
Kelompok Kemaknaan
Chlorhexidine 2% 0.802
Pinang 10% 0.810
Serai 20% 0.112

Hasil analisis menunjukkan bahwa nilai Shapiro-Wilk pada

keseluruhan kelompok memiliki nilai p > 0.05 sehingga dapat disimpulkan

data zona hambat berdistribusi normal. Selanjutnya data dilakukan uji

homogenitas.

Tabel 3.2 Uji homogenitas data diameter zona hambat ekstrak biji
pinang 10%, minyak atsiri serai 20% dan Chlorhexidine
2% terhadap pertumbuhan Enterococcus faecalis
Levene Statistic

1.346 Sig. 0.279

 38

Hasil uji homogenitas menunjukkan keseluruhan nilai Signifikasi

adalah lebih dari 0.05, maka dapat disimpulkan bahwa varian data

homogen.

a. Uji One-Way Anova

Setelah seluruh data diameter zona hambat diketahui berdistribusi

normal dan homogen, maka data dapat diuji dengan menggunakan uji

One-Way ANOVA. Uji One-Way ANOVA ini dilakukan untuk menguji

hipotesis yang membandingkan nilai rerata lebih dari 2 kelompok

perlakuan.

Tabel 3.3 Rerata diameter zona hambat ekstrak biji pinang 10%,
minyak atsiri serai 20% dan Chlorhexidine 2%
terhadap pertumbuhan Enterococcus faecalis
Kelompok perlakuan X dan SB
Biji pinang 10% 2,352 ± 0,129
Minyak atsiri serai 20% 0,398 ± 0,065
Chlorhexidine 2% (kontrol) 12,286 ± 0,143

Berdasarkan tabel 3.3 dapat diketahui bahwa rerata diameter zona

hambat yang terbentuk pada ekstrak biji pinang 10% merupakan nilai

terbesar dibandingkan dengan rerata diameter zona bunuh yang

terbentuk pada minyak atsiri serai 20%, sedangkan kontrol

menunjukkan terbentuknya zona hambat paling besar diantara

kelompok lain sebesar 12,286 dengan simpang baku ± 0,143.

 39

Tabel 3.4 Uji One-Way ANOVA daya hambat ekstrak biji pinang
10%, minyak atsiri serai 20% dan Chlorhexidine 2%
terhadap pertumbuhan Enterococcus faecalis
E.faecalis
Rerata Kemaknaan
Antar kelompok 365.742 0.000
Dalam kelompok 0.014

Hasil analisis data dengan uji One-Way ANOVA menunjukkan

nilai p (Sig.) = 0.000 yang berarti nilai p < 0.005, sehingga dari hasil

tersebut dapat disimpulkan bahwa ada perbedaan daya hambat ekstrak

biji pinang 10%, minyak atsiri serai 20% dan Chlorhexidine 2%

terhadap bakteri Enterococcus faecalis. Dengan demikian hipotesis

yang diajukan peneliti dapat diterima.

b. Uji Post Hoc

Uji Post Hoc dilakukan untuk mengetahui kelompok yang

memiliki mean yang berbeda secara signifikan dari masing-masing

kelompok tersebut. Berdasarkan uji Post Hoc dengan menggunakan

Fisher’s Least Significant Difference (Fisher’s LSD) diperoleh hasil

sebagai berikut :

Tabel 3.5 Hasil uji Post Hoc daya hambat ekstrak biji pinang
10%, minyak atsiri serai 20% dan Chlorhexidine 2%
terhadap pertumbuhan Enterococcus faecalis

Perbedaan
Kelompok Rerata Kelompok Rerata Kemaknaan
rerata
Chlorhexidine 2% 12,2867 Pinang 10% 2,3522 9,93444 0.000
Chlorhexidine 2% 12,2867 Serai 20% 0,3989 11,88778 0.000
Pinang 10% 2,3522 Serai 20% 0,3989 1,95333 0.000
 40

Berdasarkan tabel uji Post Hoc diatas diketahui perbedaan rerata

antar kelompok yang memiliki nilai tertinggi terdapat pada kelompok

Chlorhexidine 2% terhadap minyak atsiri serai 20% yaitu sebesar

11.88778, sedangkan perbedaan rerata antar kelompok yang memiliki

nilai terendah terdapat pada kelompok minyak atsiri serai 20%

terhadap ekstrak biji pinang 10% yaitu dengan nilai -1.95333.

Pada tabel uji Post Hoc juga diperoleh nilai p (Sig.) antara

kelompok perlakuan satu dengan kelompok perlakuan lainnya adalah

p = 0.000. Hasil nilai p (Sig.) = 0.000 pada seluruh kelompok

menunjukkan bahwa terdapat perbedaan rerata diameter zona bunuh

yang signifikan antara kelompok ekstrak biji pinang 10%, minyak

atsiri serai 20% dan Chlorhexidine 2%.

B. Pembahasan

Penelitian ini merupakan jenis penelitian eksperimental laboratoris

dengan membandingkan efektifitas antibakteri antara ekstrak biji pinang 10%

dan minyak atsiri serai 20% terhadap bakteri Enterococcus faecalis. Metode

yang digunakan dalam penelitian ini adalah metode difusi cakram yang

membentuk zona bunuh ditandai dengan daerah berwarna bening disekitar disk

dan zona hambat ditandai dengan daerah berwarna keruh disekitar disk.

Berdasarkan sumber primer dari hasil penelitian yang dilakukan di Balai

Laboratorium Kesehatan Provinsi Jawa Tengah sesuai dengan tabel 1.1 dan

tabel 1.2 diketahui bahwa nilai rata-rata diameter zona bunuh dan zona hambat

dari kelompok ekstrak biji pinang 10% dan kelompok minyak atsiri serai 20%
 41

yang terbentuk paling besar adalah kelompok ekstrak biji pinang 10%.

Kelompok Chlorhexidine 2% yang digunakan sebagai kontrol positif

menunjukkan diameter zona hambat dan zona bunuh paling besar dengan

perbedaan rata-rata diameter yang signifikan dibandingkan kelompok ekstrak

biji pinang 10% dan kelompok minyak atsiri serai 20%.

Rerata diameter zona bunuh dan zona hambat dari kelompok ekstrak biji

pinang 10% dan kelompok minyak atsiri serai 20% diuji hipotesis dengan

One-Way ANOVA yang hasilnya menunjukkan adanya perbedaan efektifitas

antibakteri terhadap bakteri Enterococcus faecalis, maka dengan demikian

hipotesis yang diajukan oleh peneliti dapat diterima yaitu terdapat perbedaan

efektifitas antibakteri antara esktrak biji pinang 10% dengan minyak atsiri

serai terhadap bakteri Enterococcus faecalis. Pada hasil uji Post Hoc dapat

ditarik kesimpulan bahwa perbedaan rerata diameter zona hambat dan zona

bunuh kelompok Chlorhexidine 2% memiliki selisih terbesar yang signifikan

dimana rerata diameter zona hambat dan zona bunuh kelompok Chlorhexidine

2% terbentuk paling besar dibandingkan kelompok ekstrak biji pinang 10%

dan kelompok minyak atsiri serai 20%, sedangkan kelompok minyak atsiri

serai 20% membentuk rerata diameter yang terkecil.

Berdasarkan hasil penelitian yang dilakukan dapat disimpulkan bahwa

kedua kelompok perlakuan yaitu kelompok ekstrak biji pinang 10% dan

kelompok minyak atsiri serai 20% memiliki efek antibakteri terhadap bakteri

Enterococcus faecalis, hal ini menunjukkan adanya kandungan senyawa yang

memiliki efek antibakteri pada kedua bahan herbal tersebut. Kemampuan

 42

antibakteri yang dimiliki biji pinang ditimbulkan dari kandungan biji pinang

terutama senyawa flavonoid yang dapat menghambat pertumbuhan

mikroorganisme karena mampu menghambat siklus sel sehingga proliferasi

sel terganggu. Rantai polifenol dan fenol pada senyawa flavonoid bekerja

sebagai antibakteri dengan mendenaturasi protein sel dimana terjadi kerusakan

struktur tersier protein. Struktur tersier protein mudah terganggu oleh agen

kimia atau fisik sehingga menyebabkan protein tidak berfungsi. Kerusakan

dinding sel bakteri dilakukan oleh zat senyawa yang berkumpul pada

permukaan sel yang akan mengubah sifat fisika dan kimia dari dinding sel,

sehingga dinding sel yang berkerja sebagai sawar yang selektif akan dicegah

untuk berfungsi dengan normal dan zat senyawa akan membunuh atau

menghambat sel (Brooks dkk, 2007).

Mekanisme kerja senyawa flavonoid yang menyebabkan ekstrak biji

pinang memiliki efek antibakteri yang lebih tinggi dibandingkan minyak atsiri

serai, dimana minyak atsiri serai mengandung senyawa sitral yang terdiri dari

2 isonomer yaitu geranial (α-sitral) dan neral (β-sitral) (Agusta, 2000., Astuti,

2012). Senyawa sitral merupakan antibakteri yang bekerja sebagai

antimikroba dengan merusak membran sel dengan cara menyebabkan

kerusakan asam nukleat dan membuat inaktif protein (Kadarohman dkk,

2011). Mekanisme antibakteri sitral tersebut berbeda dengan mekanisme

antibakteri dari senyawa flavonoid sehingga menyebabkan senyawa flavonoid

memiliki efektifitas antibakteri yang lebih tinggi dibandingkan senyawa sitral.

 43

Penelitian lain yang pernah dilakukan pada ekstrak biji pinang

menunjukkan bawah ekstrak biji pinang mempunyai sifat antibakteri terhadap

bakteri pathogen di rongga mulut yaitu pada bakteri Streptococcus mutans

yang dilakukan oleh Yulineri dkk (2006) dan pada bakteri Staphylococcus

aureus yang dilakukan oleh Sumarni (2010). Penelitian tersebut menyebutkan

kandungan flavonoid merupakan kandungan utama ekstrak biji pinang sebagai

antibakteri, walaupun penelitian mengenai efek antibakteri ekstrak biji pinang

terhadap bakteri Enterococcus faecalis belum pernah dilakukan tetapi hal

tersebut mendukung penelitian ini yang menunjukkan ekstrak biji pinang

memiliki efek antibakteri terhadap bakteri Enterococcus faecalis dikarenakan

kandungan senyawa flavonoid. Penelitian lain yang dilakukan oleh Darjono

(2011) mengenai efektifitas daya hambat minyak atsiri serai terhadap bakteri

Enterococcus faecalis menunjukkan bahwa minyak atsiri serai memiliki daya

antibakteri terhadap pertumbuhan Enterococcus faecalis, hal tersebut sesuai

dengan hasil penelitian ini yang menunjukkan minyak atsiri serai memiliki

efek antibakteri terhadap bakteri Enterococcus faecalis.

Kelompok Chlorhexidine 2% digunakan sebagai kontrol positif

dikarenakan Chlorhexidine 2% merupakan larutan kimia yang terbukti efektif

sebagai antibakteri terhadap pertumbuhan bakteri Enterococcus faecalis. Pada

penelitian ini kelompok Chlohexidine 2% memiliki efek antibakteri yang

terbentuk paling besar dibandingkan kelompok lainnya dikarenakan

mekanisme antibakteri Chlorhexidine dengan cara berinteraksi dengan

membran sel bakteri karena adanya interaksi antara muatan positif dari
 44

molekul-molekul Chlorhexidine dan dinding bakteri yang bermuatan negatif

sehingga menyebabkan meningkatnya permeabilitas dinding sel (Leonard dkk,

2006), maka molekul Chlorhexidine dapat berpenetrasi ke dalam bakteri dan

menyebabkan kerusakan integritas dari sel membran yang selanjutnya akan

melakukan penetrasi kedalam sitoplasma dan menyebabkan pengendapan

cairan dalam sitoplasma sehingga menyebabkan kematian dari

mikroorganisme (Mulyawati, 2011). Mekanisme antibakteri yang dimiliki

Chlorhexidine 2% tersebut yang menyebabkan Chlorhexidine 2%

menunjukkan efektifitas antibakteri terbesar dibandingkan kelompok ekstrak

biji pinang 10% dan minyak atsiri serai 20% yang dilakukan dalam penelitian

ini.
 BAB V

KESIMPULAN DAN SARAN

A. Kesimpulan

Berdasarkan hasil penelitian yang telah dilakukan maka dapat diambil

suatu kesimpulan sebagai berikut :

1. Ada perbedaan efek antibakteri antara ekstrak biji pinang 10% dengan

minyak atsiri serai 20% terhadap bakteri Enterocccus faecalis dimana

ekstrak biji pinang 10% memiliki efek antibakteri yang lebih besar

dibandingkan minyak atsiri serai 20%.

2. Ekstrak biji pinang 10% memiliki diameter zona hambat sebesar 2,352

mm dan diameter zona bunuh sebesar 2,064 mm.

3. Minyak atsiri serai 20% memiliki diameter zona hambat sebesar 0,398

mm dan diameter zona bunuh sebesar 0,927 mm.

4. Chlorhexidine 2% memiliki diameter zona hambat sebesar 12,286 mm

dan diameter zona bunuh sebesar 12,286 mm.

5. Diameter zona hambat dan zona bunuh yang terbentuk paling besar

adalah pada ekstrak biji pinang 10% dibandingkan dengan minyak atsiri

serai 20% sehingga ekstrak biji pinang 10% memiliki kemampuan

antibakteri yang lebih besar daripada minyak atsiri serai 20%.

45
 46

B. Saran

Berdasarkan penelitian yang telah dilakukan maka peneliti menyarankan

untuk :

1. Perlu dilakukan penelitian lebih lanjut mengenai efek antibakteri antara

ekstrak biji pinang dan minyak atsiri serai dengan konsentrasi yang lebih

besar.

2. Perlu dilakukan penelitian lebih lanjut mengenai biokompabilitas ekstrak

biji pinang dan minyak atsiri serai pada jaringan gigi dan mulut.

3. Perlu dilakukan penelitian lebih lanjut mengenai penggunaan klinis

ekstrak biji pinang dan minyak atsiri serai sebagai alternatif bahan irigasi

saluran akar.
 DAFTAR PUSTAKA

Agusta, A., 2000. Buku Minyak Atsiri Tumbuhan Tropika Indonesia. Penerbit ITB
: Bandung. h:113.

Arifah, S., 2009. Sodium Hypoclorite Sebagai Bahan Irigasi saluran Akar.
e-USU Repository. Departemen Ilmu Material dan Teknologi Kedokteran
Gigi FKG USU.

Arisandi, Y., Andriani, Y., 2011. Buku Khasiat Berbagai Tanaman Untuk
Pengobatan. Jakarta : Eska Media. h:351-53.

Arswendiyumna, R., 2011. Minyak Atsiri dari Daun dan Batang Tanaman Dua
Spesies Genus Cymbopogon, Famili Gramineae Sebagai Insektisida Alami
dan Antibakteri. EBSCO HOST Digital Library ITS . h:13297.

Astuti, E. P., 2012. Pemisahan Sitral dari Minyak Atsiri Serai Dapur
(Cymbopogon Citratus) sebagai Pelangsing Aromaterapi. Journal IPB.
Vol.594:69-72.

Bassole, I.H.N., Lamien-Meda, A., Bayala, B., Obame, L.C., Ilboudo, A.J., Franz,
C., Novak, J., Nebie, R.C., Dicko, M.H., 2011. Chemical Composition
and Antimicrobial Activity of Cymbopogon Citratus and Cymbopogon
Giganteus Essential Oils Alone and in Combination. International Journal
of Phytotherapy and Phytopharmacology. Vol.18(12) :1070-074.

Brooks, G.F., Butel, J.S., Morse, S.A., 2007. Jawetz, Melnick, & Adelberg: Buku
Mikrobiologi Kedokteran 1st Ed. Jakarta: EGC.

Dalimartha, S., 2009. Buku Atlas Tumbuhan Obat Indonesia Jilid 6. Penerbit
Pustaka Bunda : Jakarta. h:127-31.

Darjono, U. N. A., 2011. Analisis Minyak Atsiri Serai (Cymbopogon Citratus)

Sebagai Alternatif Bahan Irigasi Saluran Akar Gigi dengan Menghambat
Pertumbuhan Enterococcus faecalis. Makalah Ilmiah Kesehatan
Universitas Islam Sultan Agung Semarang. Vol.XLIX(124): 105-15.

Ferrari, P.H.P., Cai, S., Bombana, A.C., 2005. Effect of Endodontic Procedures on
Enterococci, enteric Bacteria and Yeasts in Primary Endodontic Infection.
International Endodontic Journal, Vol.38:372-80.

Fine, A.M., 2000. Oligomeric Proanthocyanidin Complexes : History, Structure,

and Phytopharmaceutical Applications. Altern Med Rev, Vol.5(2):144-51.

Fisher K, P. C., 2009. The ecology, epidemiology and virulence of Enterococcus.

Microbiology. Vol.155: 1749–57.

47
 48

Ford, T.R.P., 2004. Harty’s Endodontics in Clinical Practice. Elsevier Churchil

Livingstone. h:85-6.

Harahap, L., Retnowati, E., 2008. Perawatan Saluran Akar Ulang Pada Gigi
Insisivus Sentralis Kiri Maksila dengan Abses Periapikal dan Fistula.
Majalah Kedokteran Gigi. Vol.15(1):25-30.

Kadarohman, A., Dwiyanti, G., Anggraeni, Y., Khumaisah, L. L., 2011.

Komposisi Kimia dan Uji Aktivitas Antibakteri Minyak Kemangi
(Ocimum americanum L) Terhadap Bakteri Escherichia coli, Shigella
sonnei, dan Salmonella enteritidis. Berk. Penel. Hayati, Vol.16:101-10.

Kundabala, M., Suchitra, U., 2002. Enterococcus Faecalis: An Endodontic

Pathogen. Journal of Edodontology. Vol.18(2):11-3.

Leonard, A., Sudirman, A., Samadi, K., 2006. Inhibition effect of calcium
hydroxide point and chlorhexidine point on root canal bacteria of necrosis
teeth. Majalah Kedokteran Gigi (Dent. J.), No. 1, Vol. 39, h.24–27.

Mulyawati, E, 2011. Peran Bahan Disinfeksi pada Perawatan Saluran Akar.

Majalah Kedokteran Gigi, Vol.18(2):205-09.

Naik, MI., Fomda, B.A., Jaykumar, E., Bhat, J.A., 2010. Antibacterial Activity of
Lemongrass (Cymbopogon Citratus) Oil Againts Some Selected
Phatogenic Bacterials. Asia Pasific Journal of Tropical Medicine.
Vol.3(7):535-38.

Notoatmodjo, S., 2010. Buku Metodologi Penelitian Kesehatan. Penerbit Rineka

Cipta : Jakarta. h:115.

Prasetyono D.S., 2012. Buku A-Z Daftar Tanaman Obat Ampuh di Sekitar Kita.
Perbitan FlashBooks : Jakarta. h:70-4.

Rhodes, J.S., 2006. Clinical Retreatment and Surgery. Advanced Endodontics,

Vol.616(31):130.

Saputra, T., Suryani, L., 2012. An Antimicrobial Activity of Tamarind Fruit

(Tamarindus indica Linn) Tuber Infusion Toward Several Pathogenic
Microbial. Jurnal Publikasi UMY. Vol.8(9).

Sari, L.O.R.L., 2006. Pemanfaatan Obat Tradisional dengan Pertimbangan

Manfaat dan Keamanannya. Majalah Ilmu Kefarmasian, Vol.III:1.

Sastrapradja, D., 2012. Buku Perjalanan Panjang Tanaman Indonesia. Penerbit

Pustaka Obor Indonesia : Jakarta. h:141-42.
 49

Selcuk, M.O., Ahmet., Aziz S.E., 2009. Analysis of Enterococcus faecalis in

Samples from Turkish Patients with Primary Endodontic Infections and
Failed Endodontic Treatment by Real-Time PCR SYBR Green Method.
Journal Of Applied Oral Surgery, Vol.17(5):370-74.

Soedjono, P., Mooduto L., Setyowati, L., 2009. Penutupan Apeks pada Pengisian
Saluran Akar dengan Bahan Kalsium Oksida Lebih Baik dibandingkan
Kalsium Hidroksida. Jurnal Persatuan Dokter Gigi Indonesia,
Vol.58(2):1-5.

Stock, C., Walker, R., Gulabivaa, K., 2004. Endodontic, ed 3. Mosby, London.
h:1-25.

Stuart, CH., Schwartz, S.A., Becson, T.J., Owatz, C.B., 2006. Enterococcus
faecalis: Its Role in Root Canal Treatment Failure and Current Concepts in
Retreatment. Journal of Endodontic, Vol.32(2):93-8.

Sumarni, 2010. Daya Hambat Ekstrak Biji Pinang (Areca Catechu L) Terhadap
Pertumbuhan Staphylococcus aureus. Majalah Ilmiah Fakultas MIPA
Universitas Negeri Papua : Manokwari.

Tanumihardja, 2010. Larutan Irigasi Saluran Akar. Journal Of Dentofasial,

Vol.9(2):108-115.

Wang., Zhang., Chu., Zhu., 2012. Prevalence of Enterococcus faecalis in Salica

and Filled Root Canals of Teeth Associated with Apical Periodontitis.
International Journal of Oral Science. Vol.4:19-23.

Yulineri., Kasim., Nurhidayat., 2006. Selium dari Ekstrak Biji dan Akar Pinang
(Areca Catechu L) yang Difermentasi dengan Konsorsium Acetobacter-
Saccharomyces sebagai Antiseptik Obat Kumur. Biodiversitas,
Vol.7(1):18-20.
 50

Lampiran 1. Surat Permohonan Ijin Penelitian

 51

Lampiran 2. Surat Keterangan Pembuatan Ekstraksi Bahan Perlakuan di

Laboratorium Jurusan Biologi FMIPA UNNES

 52

Lampiran 3. Surat Keterangan Penelitian di Balai Laboratorium Kesehatan

Provinsi JATENG
 53

Lampiran 4. Jadwal Kegiatan

1. Pembuatan ekstrak biji pinang 10% dan minyak atsiri serai 20%

Waktu : Jumat, 24 Mei 2013

Tempat : Laboratorium Jurusan Biologi FMIPA Universitas Negeri

Semarang

2. Metode difusi disk terhadap Enterococcus faecalis

Waktu : Selasa, 4 Juni 2013

Tempat : Balai Laboratorium Kesehatan Provinsi Jawa Tengah

3. Pengukuran hasil penelitian

Waktu : Rabu, 5 Juni 2013

Tempat : Balai Laboratorium Kesehatan Provinsi Jawa Tengah

 54

Lampiran 5. Hasil Perhitungan Uji Normalitas dan Uji Homogenitas Daya

Bunuh

Descriptives
Kadar Statistic Std. Error
E.faecalis Chlorhexidi Mean 12.2867 .04770
ne 95% Confidence Lower Bound 12.1767
Interval for Mean Upper Bound 12.3967
5% Trimmed Mean 12.2891
Median 12.3000
Variance .020
Std. Deviation .14309
Minimum 12.03
Maximum 12.50
Range .47
Interquartile Range .20
Skewness -.445 .717
Kurtosis .191 1.400
Pinang 10% Mean 2.0644 .05022
95% Confidence Lower Bound 1.9486
Interval for Mean Upper Bound 2.1803
5% Trimmed Mean 2.0683
Median 2.0300
Variance .023
Std. Deviation .15067
Minimum 1.80
Maximum 2.26
Range .46
Interquartile Range .24
Skewness -.384 .717
Kurtosis -.687 1.400
Serai 20% Mean .9278 .02338
95% Confidence Lower Bound .8739
Interval for Mean Upper Bound .9817
 55

5% Trimmed Mean .9259

Median .9300
Variance .005
Std. Deviation .07014
Minimum .83
Maximum 1.06
Range .23
Interquartile Range .10
Skewness .398 .717
Kurtosis .326 1.400

Case Processing Summary

Cases
Valid Missing Total
Kadar N Percent N Percent N Percent
E.faecalis Chlorhexidi
9 100.0% 0 .0% 9 100.0%
ne
Pinang 10% 9 100.0% 0 .0% 9 100.0%
Serai 20% 9 100.0% 0 .0% 9 100.0%

Tests of Normality
Kolmogorov-Smirnova Shapiro-Wilk
Kadar Statistic df Sig. Statistic df Sig.
E.faecalis Chlorhexidi
.204 9 .200* .960 9 .802
ne
Pinang 10% .181 9 .200* .940 9 .582
Serai 20% .212 9 .200* .922 9 .409
a. Lilliefors Significance Correction
*. This is a lower bound of the true significance.

Test of Homogeneity of Variance

Levene
Statistic df1 df2 Sig.
E.faecalis Based on Mean 2.518 2 24 .102
Based on Median 1.837 2 24 .181
 56

Based on Median and

1.837 2 19.202 .186
with adjusted df
Based on trimmed mean 2.477 2 24 .105
 57

Lampiran 6. Hasil Perhitungan Uji One-Way ANOVA Daya Bunuh

Test of Homogeneity of Variances

E.faecalis
Levene
Statistic df1 df2 Sig.
2.518 2 24 .102

Descriptives
E.faecalis
95% Confidence Interval for
Std. Std. Mean
N Mean Deviation Error Lower Bound Upper Bound Minimum Maximum
Chlorhexidin
9 12.2867 .14309 .04770 12.1767 12.3967 12.03 12.50
e
Pinang 10% 9 2.0644 .15067 .05022 1.9486 2.1803 1.80 2.26
Serai 20% 9 .9278 .07014 .02338 .8739 .9817 .83 1.06
Total 2
5.0930 5.20656 1.00200 3.0333 7.1526 .83 12.50
7

ANOVA
E.faecalis
Sum of
Squares df Mean Square F Sig.
Between
704.431 2 352.215 2.197E4 .000
Groups
Within Groups .385 24 .016
Total 704.815 26
 58

Lampiran 7. Hasil Perhitungan Uji Post Hoc Daya Bunuh

Multiple Comparisons
E.faecalis
LSD
Mean 95% Confidence Interval
Difference (I- Lower
(I) Kadar (J) Kadar J) Std. Error Sig. Bound Upper Bound
Chlorhexidi Pinang 10% 10.22222* .05969 .000 10.0990 10.3454
ne Serai 20% 11.35889* .05969 .000 11.2357 11.4821
Pinang 10% Chlorhexidi
-10.22222* .05969 .000 -10.3454 -10.0990
ne
Serai 20% 1.13667* .05969 .000 1.0135 1.2599
Serai 20% Chlorhexidi
-11.35889* .05969 .000 -11.4821 -11.2357
ne
Pinang 10% -1.13667* .05969 .000 -1.2599 -1.0135
*. The mean difference is significant at the 0.05
level.
 59

Lampiran 8. Hasil Perhitungan Uji Normalitas dan Uji Homogenitas Daya

Bunuh

Case Processing Summary

Cases
Valid Missing Total
Kadar N Percent N Percent N Percent
E.faecalis Chlorhexidi
9 100.0% 0 .0% 9 100.0%
ne
Pinang 10% 9 100.0% 0 .0% 9 100.0%
Serai 20% 9 100.0% 0 .0% 9 100.0%

Descriptives
Kadar Statistic Std. Error
E.faecalis Chlorhexidi Mean 12.2867 .04770
ne 95% Confidence Lower Bound 12.1767
Interval for Mean Upper Bound 12.3967
5% Trimmed Mean 12.2891
Median 12.3000
Variance .020
Std. Deviation .14309
Minimum 12.03
Maximum 12.50
Range .47
Interquartile Range .20
Skewness -.445 .717
Kurtosis .191 1.400
Pinang 10% Mean 2.3522 .04333
95% Confidence Lower Bound 2.2523
Interval for Mean Upper Bound 2.4521
5% Trimmed Mean 2.3508
Median 2.3300
Variance .017
Std. Deviation .12998
 60

Minimum 2.13
Maximum 2.60
Range .47
Interquartile Range .15
Skewness .310 .717
Kurtosis 1.398 1.400
Serai 20% Mean .3989 .02189
95% Confidence Lower Bound .3484
Interval for Mean Upper Bound .4494
5% Trimmed Mean .4032
Median .4000
Variance .004
Std. Deviation .06566
Minimum .26
Maximum .46
Range .20
Interquartile Range .10
Skewness -1.182 .717
Kurtosis 1.474 1.400

Tests of Normality
Kolmogorov-Smirnova Shapiro-Wilk
Kadar Statistic df Sig. Statistic df Sig.
E.faecalis Chlorhexidi
.204 9 .200* .960 9 .802
ne
Pinang 10% .164 9 .200* .961 9 .810
Serai 20% .176 9 .200* .866 9 .112
a. Lilliefors Significance Correction
*. This is a lower bound of the true significance.

Test of Homogeneity of Variance

Levene
Statistic df1 df2 Sig.
E.faecalis Based on Mean 1.346 2 24 .279
Based on Median 1.036 2 24 .370
 61

Based on Median and

1.036 2 18.856 .374
with adjusted df
Based on trimmed mean 1.297 2 24 .292
 62

Lampiran 9. Hasil perhitungan Uji One-Way ANOVA Daya Hambat

Descriptives
E.faecalis
95% Confidence Interval for
Std. Std. Mean Minimu Maxim
N Mean Deviation Error Lower Bound Upper Bound m um
Chlorhexidi
9 12.2867 .14309 .04770 12.1767 12.3967 12.03 12.50
ne
Pinang 10% 9 2.3522 .12998 .04333 2.2523 2.4521 2.13 2.60
Serai 20% 9 .3989 .06566 .02189 .3484 .4494 .26 .46
Total 27 5.0126 5.30536 1.02102 2.9139 7.1113 .26 12.50

Test of Homogeneity of Variances

E.faecalis
Levene
Statistic df1 df2 Sig.
1.346 2 24 .279

ANOVA
E.faecalis
Sum of
Squares df Mean Square F Sig.
Between
731.484 2 365.742 2.632E4 .000
Groups
Within Groups .333 24 .014
Total 731.817 26
 63

Lampiran 10. Hasil Perhitungan Uji Post Hoc Daya Hambat

Multiple Comparisons
E.faecalis
LSD
Mean 95% Confidence Interval
Difference (I- Lower
(I) Kadar (J) Kadar J) Std. Error Sig. Bound Upper Bound
Chlorhexidi Pinang 10% 9.93444* .05556 .000 9.8198 10.0491
ne Serai 20% 11.88778* .05556 .000 11.7731 12.0025
Pinang 10% Chlorhexidi
-9.93444* .05556 .000 -10.0491 -9.8198
ne
Serai 20% 1.95333* .05556 .000 1.8387 2.0680
Serai 20% Chlorhexidi
-11.88778* .05556 .000 -12.0025 -11.7731
ne
Pinang 10% -1.95333* .05556 .000 -2.0680 -1.8387
*. The mean difference is significant at the 0.05
level.
 64

Lampiran 11. Foto Penelitian

Gambar 15. Batang Serai Gambar 16. Buah pinang

Gambar 17. Ekstrak biji pinang 10%, minyak Gambar 18. Pembuatan kekeruhan

atsiri serai 20% dan Chlorhexidine bakteri Enterococcus faecalis

digluconate 2%.
 65

Gambar 19. Pengambilan Enterococcus faecalis dengan ose steril

Gambar 20. Pengolesan bakteri Enterococcus faecalis pada seluruh

permukaan cawan MHA

 66

Gambar 21. Perendaman disk dalam larutan coba

Gambar 22. Peletakan 3 disk larutan coba pada cawan petri

 67

Gambar 23. Proses inkubasi seluruh cawan MHA selama 24 jam pada suhu 37˚C

Gambar 24. Pengukuran zona hambat dan bunuh pada seluruh cawan petri
 68

Gambar 25. Hasil Uji efektifitas antibakteri, P = Ekstrak biji pinang 10%, S =

Minyak atsiri serai 20%, C = Kontrol positif (Chlorhexidine 2%) (9 Replikasi)

69
70