PRAKTIKUM MIKROBIOLOGI DAN PERTANIAN ORGANIK

ISOLASI MIKROORGANISME

Nama : Roisatul Ummah

NIM : 201810200311008
Kelas/Kelompok : 3A-A2/3
 A. TUJUAN
Tujuan dari praktikum ini adalah untuk membuat praktikan dapat memisahkan mikroba dari
campurannya sehingga mendapatkan kultur murni.

B. BAHAN DAN METODE

Tempat dan Waktu

Kegiatan praktikum yang telah di lakukan praktikan dilaksanakan di Laboratorium 1 Agronomi
UMM pada hari Rabu tanggal 02 Oktober 2019 pukul 13.00 – 14.40 WIB.

Alat dan Bahan

Alat yang dipakai praktikan dalam praktikum adalah dua cawan petri, empat tabung reaksi,
bunsen, korek api, rak tabung reaksi , pipet tetes, pipet ukur, gelas beker, timbangan, seeker,mikroskop
binokuler, kaca preparat, cover glass, kamera dokumentasi, alat tulis, spektrofotometer.

Bahan yang digunakan dalam praktikum ini adalah sampel tanah TPA, media PDA, plastik wrape,
kertas label, aluminium foil, aquades, garam fisiologis, alkohol, growmore merah dan hijau.
Metode Praktikum

Pelaksanaan dari kegiatan praktikum isolasi mikroorganisme di laboratorium menggunakan

metode sebagai berikut. Pertama mempersiapkan alat dan bahan yang diperlukan selama praktikum.
Kemudian menuang media PDA ke dalam cawan petri yang sebelumnya telah disterilkan, dan
menunggu sampai mengeras. Selanjutnya mengambil sampel tanah TPA dan menimbang sebanyak 1
gram. Memasukkannya kedalam tabung reaksi pertama yang berisi garam fisiologis yang diencerkan.
Lalu menghomogenkan tabung tersebut. Setelah itu mengambil sampel sebanyak 1 ml menggunakan
pipet tetes dari tabung pertama, dan memindahkan pada tabung kedua yang berisi media standart.
Menutup tabung reaksi menggunakan aluminium foil dan menghomogenkannya kembali. Melakukan
secara berulang untuk tabung kedua hingga tabung ke empat yang telah diberi label. Kemudian
meneteskan dari tabung ke empat diatas permukaan media PDA yang telah padat pada cawan petri
yang steril yang sebelumnya di dekatkan pada api bunsen. Selanjutnya menutup cawan petri dengan
plastik wrape. Tabung reaksi di sheaker selama 24 jam serta mendiamkan cawan petri 3 hari. Lalu
mengamati jumlah koloni, warna koloni, bentuk ,tepi dan permukannya bakteri pada cawan petri
selama 3 hari. Kemudian menghitung OD awal dan OD akhir sampel tanah TPA dengan menggunakan
spektrofotometer. Menghitung OD akhir setelah 24 jam di sheaker. Terakhir mengambil foto untuk
dokumentasi selama praktikum.

HASIL DAN PEMBAHASAN

1. Media Potato Dextrose Agar (PDA)

Pengamatan Kerja
Sampel/Tanah Pengamatan Dokumentasi
Jumlah Warna Bentuk Tepi Permukaan
Rhizosfer C1 = Putih
Tanah PDA C2= Keruh

2. Media Standart
OD Pertumbuhan Bakteri (600 nm)
Sampel Tanah TPA Laju Pertumbuhan
Awal (OD1) Akhir (OD2)
1.

Tabel 2. Identifikasi Mikroorganisme

 Pengamatan
Sampel / Bahan Literatur Keterangan
Makroskopis Mikroskopis
Rhizosfer Tanah
Sumber
TPA