ACARA VIII DAN IV

UJI POTENSI SENYAWA ABIOTIK SECARA DIFUSI SUMURAN DAN

DIFUSI PAPERDISK SERTA PENGARUH FAKTOR LINGKUNGAN
TERHADAP MIKROBA

A. Tujuan

1. Mengetahu

B. Dasar Teori

C. Alat dan Bahan

1. Alat dan Bahan Uji Potensi Senyawa Antibiotik
a. alat gelas : petridish steril, tabung reaksi, Erlenmeyer, pipet ukur, gelas ukur.
b. mikropipet, pelubang gabus, jangka sorong, penggaris, jarum ose spidol, kertas
label, vortex mixer, spreader.
c. senyawa uji antibiotic dengan variasi konsentrasi 0,005; 0,05; dan 0,1 mg/ml
d. kultur murni bakteri dalam media NB umur 24 jam
e. media NA
f. media NB untuk pembuatan suspensi bakteri uji
g. Aquades Steril untuk pelarut senyawa uji
i. alcohol 70%
2. Alat dan Bahan Pengaruh Faktor Penyinaran UV
a. kultur murni
b. petridish steril
c. spatel dirgalsky
d. Media NA
e. mikropipet
d. Yellowtrip
g. Lampu UV
 3. Alat dan bahan Faktor Suhu
a. kultur murni
b. tabung reaksi berisi NB
c. mikropipet
d. yellowtip
e. incubator suhu 370 C, refrigator suhu 40C dan oven Suhu 550 C
4. Alat dan Bahan Pengaruh Faktor pH
a. kultur murni
b. tabung reaksi berisi NB
c. mikropipet
d. ose
e. NaOH dan HCl
5. Alat dan Bahan Pengaruh Faktor Logam
a. kultur murni
b. petridish steril
c. pinset steril
d. spatel dirgalsky
e. Media NA
f. mikropipet
g. Bunsen spiritus
D. Cara Kerja
1. cara kerja uji senyawa potensi abiotik
Dibuat berbagai variasi konsentrasi senyawa uji 0,005; 0,05 dan 0,1 mg/ml

Disiapkan kultur murni bakteri

Disiapkan beberapa petri berisi 20 ml media nutrient agar

Teknik semuran digunakan diinokulasikan kultur cair murni bakteri uji ke

permukaan media cawan petri. Setelah meresap dan kering kemudian dibuat
lubang 0,5 cm

Dimasukkan senyawa uji ke dalam lubang tandai berbagai konsentrasi dibawah

petri menggunakan spidol

Untuk teknik paper disk dilakukan dengan merendam terlebih dahulu paperdisk
kedalam berbagai varian konsentrasi senyawa uji selama 1 menit

Diletakkan paperdisk berbagai konsentrasi pada permukaan media

Diletakkan paperdisk berbagai konsentrasi pada permukaan media

Diinkubasikan selama 24 jam, amati keberadaan zona jernih dan dihitung

diamternya

2. cara kerja penyinaran UV

Diambil 0,1 ml kultur cair dan dinokulasikan ke dalam petridish berisi NA yang
telah memadat, diratakan dengan spatel.

Diber label petridish dengan penyinaran 5 menit dan 20 menit

Dipaparkan petridish berisi kultur dengan sinar UV sema 5 menit dan 20 menit
dengan tutup petridisk dibuka

Setelah penyinaran tutup kembali petridish dan diikubasi selama 24 jam

Diamati pengaruh penyinaran terkait banyaknya koloni yang tumbuh

3.Cara Kerja faktor suhu

Diambil 0,1 ml kultur cair dan dinokulasikan ke dalam petridish berisi NB

Diberi label petridisk masing-masing dengan keterangan suhunya 370 C, 40C dan 550
C

Diinkubator masing-masing tabung reaksi berdasarkan kebutuhan 370 C, 40C dan

550 C selama 24 jam

Diamati kekeruhan tiap tabung reaksi

F. Pembahasan

G. Kesimpulan

DAFTAR PUSTAKA