PERCOBAAN 6

AKTIVITAS SPESIFIK ENZIM α-AMILASE

1. Sebutkan dan jelaskan metode yang digunakan dalam penentuan aktivitas spesifik enzim α-
amilase disertai prinsipnya.
2. Sebanyak 1 mL larutan amilum 1% ditambahkan 0,1 mL larutan enzim dan 3,9 mL buffer
fosfat. Campuran lalu diinkubasi pada suhu 37ºC selama 30 menit. Sebanyak 0,1 mL larutan
hasil inkubasi ditambahkan air hingga volume 1,5 mL kemudian ditambahkan 0,2 mL
Ba(OH)2 0,01 M dan 0,2 mL larutan ZnSO4 0,01 M. Campuran digojog lalu disentrifugasi. 1 mL
supernatan dibubuhi 1 mL reagen Nelson-soumogyi, lalu dipanaskan di dalam air mendidih
dan didinginkan. Selanjutnya, dibubuhi 1 mL reagen arsenomolibdat dan dibiarkan selama 1
menit. Setelah diukur absorbansinya diperoleh hasil sebagai berikut:

No Enzim Absorbansi
1 Ekstrak Kasar 0.0495
2 Fraksi 1 0.0575
3 Fraksi 2 0.0700
Jika y = 0,0108x+0,0054
BM glukosa = 180 g/mol
Tentukan kadar gula pereduksi terbesar diantara ketiganya!