Peran GFAP dalam cedera SSP

Abstrak

Peran GFAP dalam cedera SSP ditinjau sebagaimana diungkapkan oleh penelitian yang
menggunakan GFAP tikus null. Untuk memberikan informasi latar belakang studi ini, efek dari
tidak adanya GFAP pada astrosit yang tidak cedera juga dijelaskan.

Aktivitas yang disebabkan GFAP termasuk menekan ploriferasi saraf dan sambungan akson
pada otak dewasa, membentuk penghalang fisik untuk mengisolasi jaringan yang rusak,
mengatur aliran darah yang diikuti iskemia, berkontribusi terhadap sawar darah otak,
mendukung mielinisasi, dan memberikan kekuatan mekanik. Namun, temuan dari berbagai peran
ini berbeda diantara laboratorium, menunjukkan adanya kompleksitas yang tidak dipahami
dalam fungsi GFAP. Satu kompleksitas mungkin berbeda wilayah dalam aktivitas GFAP; dan
peran yang lain belum ditemukan.

Kata Kunci: GFAP; astrosit; Cedera SSP; gliosis reaktif; ischemia; neurotrauma

Pengantar

Glial fibrillary acidic protein (GFAP) merupakan protein filamen intermediate yang terutama
diekspresikan dalam astrosit (diulas dalam [1]). Perkembangan protein filamen intermediet
spesifik untuk astrosit menunjukkan bahwa protein memainkan peran penting, dan ditandai
peningkatan regulasi pada cedera CNS yang mengindikasikan menunjukkan bahwa salah satunya
adalah kontrol kerusakan cedera. Ulasan ini menguji peran GFAP dalam cedera SSP; dan untuk
memberikan dasar untuk topik ini, juga menjelaskan apa yang telah diketahui tentang fungsi
GFAP dalam kondisi tidak cedera. Studi ini sangat terbatas hanya menignvestigasi efek yang
semata-mata disebabkan oleh GFAP, dan dengan demikian kerja substansi memeriksa
konsekuensi dari tidak adanya GFAP dan vimentin tidak didiskusikan, kecuali ketika
mencerahkan temuan yang diperoleh untuk GFAP saja.
Subtema untuk tinjauan ini muncul dari hasil yang sangat berbeda di antara laboratorium untuk
temuan fungsi GFAP. Ada kecenderungan untuk setiap laboratorium untuk mempertanyakan
(meskipun diam-diam), kompetensi pesaing mereka yang menyajikan pengamatan yang
bertentangan. Tetapi penjelasan yang lebih mungkin, yang diadopsi disini, apakah itu perbedaan-
perbedaan yang memperlihatkan kempleksitas belum dihargai, dan memberikan kesempatan
untuk pemahaman yang lebih dalam tentang repertoar astrosit.

Kelebihan ekpresi GFAP

Salah satu pendekatan untuk menyelidiki peran GFAP adalah meningkatkan ekspresinya seperti
yang terjadi selama respon reaktif untuk menentukan perubahan apa yang mungkin terjadi,
sedangkan yang lain adalah mencegah peningkatan regulasi GFAP, atau menghentikannya sama
sekali. Pendekatan pertama yang dilakukan oleh Messing et al. [3], yang menggunakan transgen
GFAP manusia untuk meningkatkan ekspresi GFAP dalam astrosit, sehingga menghindari efek
perancu dari cedera yang sebenarnya. Tiba-tiba, Tingkat GFAP kronis yang tinggi terbukti
mematikan, dan disertai oleh deposisi berlimpah dari agregat protein yang mengandung GFAP
dalam astrosit. Pengamatan ini menyebabkan mutasi GFAP diidentifikasi sebagai penyebab
utama penyakit Alexander penyakit, kelainan neurodegeneratif yang biasanya fatal yang ditandai
dengan inklusi astrositik (diulas dalam [4]). Namun, karena mutasi tampaknya bertindak dengan
mekanisme perolehan fungsi toksik [4], pendekatan kelebihan ekspresi kronis GFAP ini tidak
memberikan informasi tentang peran normal protein dalam cedera.

GFAP Null Mice

Penekanan ekspresi GFAP pertama kali dilakukan dengan mentransfeksi astrositoma U251 sel
dengan konstruksi antisense GFAP [5]. Sedangkan kontrol sel U251 prosesnya diperpanjang
dengan kuat ketika dikultur bersama dengan neuron, respons ini hampir sepenuhnya tidak ada
dalam sel yang ditransfusikan. Mengingat pentingnya proses astrositik untuk membimbing
migrasi neuronal, menginduksi sawar darah-otak, dan membungkus sinapsis, syarat ini untuk
proses ekstensi GFAP proses disarankan bahwa GFAP tikus Null akan menjadi tikus mati. Tidak
terpengaruh, empat laboratorium secara independen menghasilkan GFAP dalam waktu satu
tahun satu sama lain, dan menemukan mereka layak, tiga dari kelompok ini Gomi et al. [6],
Pekny et al. [7] and McCall et al. [8], melaporkan temuan yang sangat mirip dari efek minimal
tidak adanya GFAP. Semua ditemukan perkembangan normal, pertumbuhan, kesuburan dan
umur. Ketiganya juga melaporkan tidak ada perbedaan dari tipe liar dalam arsitektur otak,
termasuk jumlah neuron yang tidak berubah dan astrosit. Tidak ada peningkatan kompensasi
pada filamen antara lain yang diamati. Sawar darah-otak ditemukan utuh sebagaimana dinilai
oleh mikroskop elektron dan eksklusi Evans blue dan microperoxidase, yang terakhir memiliki
berat molekul hanya 1862. Perilaku jelas dan aktivitas motorik normal.

Lini GFAP null yang diproduksi oleh kelompok keempat Liedtke et al. [9], juga layak, tetapi
menampilkan beberapa cacat yang mencolok. Setengah dari tikus null lebih dari 18 bulan
menjadi hidrosefalus. Tikus null yang berusia di atas 18 bulan juga mengalami penurunan kadar
myelin korpus callosum, dan tikus null berusia kurang 6 bulan memiliki mielinisasi yang lebih
sedikit dari kolom anterior sumsum tulang belakang. beberapa akson non-myelinisasi baik di
sumsum tulang belakang dan saraf optik, dan myelinisasi, hiperplastik oligodendrositik pada
saraf optik. Secara total lebih sedikit.

pembuluh darah, terutama yang berdiameter lebih besar, ditemukan pada materi putih saraf optik
dan sumsum tulang belakang pada usia 4 bulan. Meskipun morfologi menyimpang melibatkan
optic saraf, tidak ada perbedaan dalam ketebalannya, dan potensi visual yang ditimbulkan dalam
visualkorteks normal. Penggunaan 125I-albumin mengungkapkan kebocoran sawar darah-otak
di sumsum tulang belakang lumbal tikus yang berumur lebih dari 1 tahun. Perbedaan dalam
arsitektur jaringan di sumsum tulang belakang dan saraf optik tampaknya wilayah yang spesifik
karena tidak ada perbedaan yang terlihat pada otak besar, batang otak, atau otak kecil; meskipun
kemudian, Gimenez et al. [10]melaporkan adanya gangguan beberapa selubung mielin di materi
putih serebelar dan lapisan granular dari Pekny et al. [7] GFAP tikus null mouse. Tiga
laboratorium lainnya mungkin luput dalam mengamati hidrosefalus karena tikus mereka tidak di
pantau setelah usia14 bulan, tetapi mereka juga tidak mengamati perubahan mielinisasi,
vaskularisasi dan sawar darah-otak yang terjadi jauh lebih awal di garis Liedtke. Analisis ini
termasuk studi ultrastruktural dari sumsum tulang belakang, yang menemukan diameter
pembuluh darah menjadi lebih besar, daripada lebih kecil dari tipe liar [7,11], dan dari saraf optik
[8]. Demikianlah perbedaan antara barisan Liedtke dan orang-orang dari kelompok lain muncul
dari beberapa kondisi yang tidak diketahuiberinteraksi dengan GFAP null. Dasar untuk
pengamatan yang berbeda ini belum dilanjutkan; hal tersebut dapat memberikan banyak
informasi tentang interaksi pasangan GFAP yang mengatur perannya dalam pengembangan dan
fungsi SSP.

Proses Astrocyte

Keadaan proses astrositik dalam null GFAP adalah kepentingan khusus yang diberikan
sebelumnya ditemukan dalam kultur sel pengurangan dramatis mereka dalam ketiadaan GFAP
[5]. Kapan iniPercobaan diulangi menggunakan GFAP null astrosit primer sebagai pengganti
U251 yang ditransfusikan sel, hasilnya tidak direplikasi [12]; alih-alih, proses ekstensi dengan
GFAP yang dikultur astrosit nol dalam menanggapi neuron tidak dapat dibedakan dari tipe liar.
Selanjutnya analisis GFAP nol astrosit yang dikultur sendiri juga tidak menunjukkan perbedaan
morfologi dari astrosit tipe liar [13]. In vivo, pengamatan di tingkat mikroskop cahaya proses
astrositik pada GFAP null tikus menemukan mereka meluas secara normal ke dan di sekitar
darah pembuluh darah di hippocampus [6], dan pemeriksaan ultrastruktural hippocampus juga
tidak menemukan perbedaan dari tipe liar [7,8. Namun, pada proses astrositik saraf optik diamati
lebih kecil dari pada tipe liar [8], termasuk yang meluas ke pial permukaan atau ke pembuluh
darah. Di sumsum tulang belakang, studi ultrastruktural dari funiculus lateral[7] mengamati tidak
ada perbedaan dalam ukuran proses astrosit, tetapi analisis ultrastruktural dalam kolom anterior
dari sumsum tulang belakang leher di C7 mengungkapkan proses astrosit menjadi pendek dan
klub-suka, dan ruang ekstraseluler meningkat [9]. Temuan untuk otak kecil GFAP null tikus
mencerminkan orang-orang dari sumsum tulang belakang yang tidak konsisten. Shibuki et al.
[14] mengamati tidakada perbedaan dalam struktur otak kecil antara GFAP null dan tikus tipe
liar menggunakanstudi cahaya dan elektron mikroskopis terperinci, tetapi analisis ultrastruktural
oleh Gimenez et al.[10] menemukan proses glial Bergmann lebih pendek dan lebih tipis, dan
lebih banyak ruang ekstraseluler hadir Cakupan glial tidak lengkap dari soma sel Purkinje,
Purkinje dendrit, pembuluh darah, dan permukaan pial, dan endfeet tampaknya tidak menempel
erat permukaan pial. Tidak ada penjelasan untuk perbedaan ini. Gimenez et al. [10] tidak
tentukan latar belakang genetik tikus mereka, tetapi mereka kemungkinan adalah campuran
C57BL / 6 dan SJL seperti halnya Shibuki et al. [14] tikus, dan Shibuki et al. [14] tidak
menentukan usia tikus mereka, tetapi mereka kemungkinan adalah orang dewasa muda seperti
tikus berusia 3 bulan yang digunakan oleh Gimenez et al. [10]. Mungkin yang lebih penting,
tidak ada kelompok yang menyatakan daerah otak kecil diperiksa, meningkatkan kemungkinan
bahwa lobus yang berbeda dari otak kecil, yang diketahui memiliki fungsi yang berbeda dan
berevolusi pada waktu yang berbeda, bisa juga berbeda peran untuk GFAP. Jadi secara
keseluruhan, pengamatan tentang proses astrosit menunjukkan hal itu tidak adanya GFAP sangat
mempengaruhi pembentukan mereka di beberapa wilayah CNS di bawah beberapa kondisi, tetapi
tanpa konsekuensi pada orang lain. Eksperimen yang dirancang khusus untuk menyelidiki
perbedaan regional ini harus memberikan wawasan ke dalam peraturan pembentukan proses
astrosit dan peran penting proses ini dalam fungsi SSP.
Efek ketidakhadiran GFAP pada proses ekstensi setelah cedera diselidiki olehWilhelmsson et al.
[15] Untuk mengamati proses gliosis reaktif tanpa adanya karena mengacaukan kerusakan
jaringan traumatis lokal, mereka membuat lesi korteks entorhinal dan meneliti efek hilir pada
reaktifitas astrosit di lapisan molekul luar gyrus dentate hippocampal. Di sisi yang tidak terluka,
pewarnaan untuk glutamin sintetase mengungkapkan tidak ada perbedaan dari tipe liar dalam
penampilan proses astrositik pada tikus dua kali lipat nol untuk GFAP dan vimentin. Namun, di
pihak yang terluka, proses dalam GFAP / vimentin nol ganda tampaknya hanya sekitar 50%
selama jenis liar, dan orang-orang dari GFAP nol sekitar 80% selama. Pewarnaan astrosit
mengungkapkan tidak perbedaan volume jaringan yang diakses oleh tipe liar reaktif dan nol
ganda astrosit, tetapi astrosit nol ganda memiliki lebih sedikit proses yang tebal dan panjang, dan
yang ada lebih berliku. Jadi panjang keseluruhan proses tidak diubah dalam reaktif ganda null
astrosit dalam dentate gyrus, tetapi lebih tidak teratur dan kurang hipertrofi. Pewarna mengisi
data untuk astrosit reaktif secara tunggal nol untuk GFAP akan sangat menarik

Laju Pertumbuhan
Meskipun mereka tidak menemukan efek null GFAP pada perpanjangan proses dalam budidaya
mereka eksperimen, Pekny et al. [12] memang mencatat bahwa laju pertumbuhan astrosit nol
adalah hampir dua kali lipat dari tipe liar. Ini tidak dikonfirmasi oleh Xu et al. [16] Ini hasil yang
berbeda mungkin disebabkan oleh sumber astrosit; Pekny et al. [12] digunakan seluruh otak
anak-anak P1 atau P2, sedangkan Xu et al. [16] menggunakan korteks serebral anak anjing P0;
itu latar belakang genetik untuk keduanya adalah campuran C57BL / 6 dan 129 SV. In vivo tidak
ada bukti untuk perbedaan tingkat pertumbuhan - seperti disebutkan di atas, beberapa kelompok
menemukan jumlah yang sama astrosit pada GFAP null dan tikus tipe liar, dan GFAP null
astrosit ditemukan berkembang biak dengan tingkat yang sama seperti tipe liar setelah luka tusuk
otak [11]. Data ini menggambarkan kesulitan mengekstrapolasi studi kultur sel pada hewan, dan
meningkatkan kembali kemungkinan perbedaan regional dalam fungsi GFAP.

Interaksi dan Adhesi Astrosit-Neuronal

Selain digunakan untuk mempelajari pembentukan proses astrosit, ko-kultur GFAP null astrosit
dan neuron juga telah digunakan untuk memeriksa efek pada neuron. Ketika GFAP null astrosit
kortikal dikultur bersama selama 8 jam dengan neuron DRG yang diisolasi dari tikus E15,
ekstensi neurit adalah sama seperti di hadapan astrosit tipe liar [16]. Namun, ketika GFAP nol
kortikal atau astrosit sumsum tulang belakang dikultur bersama sebagai gantinya selama 7 hari
dengan