Hormon I: Auxins

Tanaman multiselular adalah organisme kompleks dan perkembangannya yang teratur

membutuhkan ukuran koordinasi yang luar biasa antar sel. Untuk mengkoordinasikan kegiatan
mereka, sel harus bisa saling berkomunikasi. Sarana utama komunikasi antar sel dalam tanaman
adalah hormon. Hormon adalah molekul sinyal yang secara individu atau kooperatif
mengarahkan perkembangan sel individual atau membawa informasi antar sel dan dengan
demikian mengkoordinasikan pertumbuhan dan perkembangan. Hormon tanaman telah menjadi
subyek penyelidikan intensif sejak auksin pertama kali ditemukan hampir seabad yang lalu.
Pembahasan setiap hormon dalam bab ini dan selanjutnya akan dimulai dengan tinjauan
biosintesis dan metabolisme. Pemahaman tentang biokimia hormon membuat lebih mudah untuk
memahami jenis molekul mereka dan bagaimana fungsinya. Selain itu, banyak dari apa yang
diketahui tentang apa yang dilakukan molekul ini dan bagaimana cara melakukannya didasarkan
pada penelitian tentang mutan yang mengganggu biosintesis atau metabolisme mereka. Omset
metabolisme molekul hormon juga merupakan faktor penting dalam regulasi aktivitas seluler.
Ini pertama dari empat bab tentang hormon tanaman dikhususkan untuk auksin. Bab-bab
berikut akan membahas tentang gibberelin, sitokinin, asam absis, etilen, dan brassinosteroid.
Dalam kasus setiap hormon, kita akan membahas tiga pertanyaan dasar yang sama: apa itu, apa
fungsinya, dan bagaimana cara melakukannya?
Karena ini adalah bab pertama tentang hormon, kita akan mulai dengan pengenalan
konsep hormon pada tanaman. Saldo bab ini meliputi
  biokimia dan metabolisme auksin,
 sebuah tinjauan tentang efek utama auksins pada pertumbuhan dan perkembangan,
 bagaimana auksin mengontrol pembesaran sel,
 transportasi auksin di tanaman, dan
 auksin kontrol ekspresi genetik.
18.1 KONSEP HORMONE DI TANAMAN
Konsep hormon, pembawa pesan kimiawi yang memungkinkan sel berkomunikasi satu
sama lain, muncul dalam studi fisiologi mamalia. Paruh terakhir abad kesembilan belas
menyaksikan kemajuan menarik dalam fisiologi dan kedokteran. Pada tahun 1850, diketahui
bahwa zat pembawa darah berasal dari karakteristik seksual yang diobati dengan testis. Pada saat
yang sama, dokter yang mengejar penelitian klinis tertarik pada efek ekstrak dan sekresi kelenjar
dalam perjalanan berbagai penyakit. Pada pergantian abad, sejumlah zat yang menimbulkan efek
spesifik pada pertumbuhan dan fisiologi mamalia telah ditunjukkan dan konsep bahwa fungsi
tubuh dikoordinasikan oleh produksi dan peredaran bahan kimia yang mendapat penerimaan
luas. Pada tahun 1905, dokter Inggris E. H. Starling memperkenalkan istilah hormon (Gr., Untuk
merangsang atau membangkitkan) untuk menggambarkan pembawa pesan kimia ini.
Penerapan konsep hormon ke tanaman dapat ditelusuri sejauh pengamatan Duhamel du
Monceau pada tahun 1758. Du Monceau mengamati pembentukan akar pada pembengkakan
yang terjadi di atas luka korset yang mengganggu jaringan phloem di sekitar tangkai tanaman
berkayu. Untuk menjelaskan fenomena ini dan yang serupa, ahli botani Jerman Julius Sachs
(ca.1860) mendalilkan zat pembentuk organ tertentu pada tanaman. Sachs mendalilkan bahwa
zat pembentuk akar, misalnya, diproduksi di daun dan bermigrasi ke bawah batang, akan
menjelaskan inisiasi akar di atas luka. Awal sebenarnya dari penelitian hormon tanaman,
bagaimanapun, ditemukan dalam serangkaian eksperimen sederhana namun elegan yang
dilakukan oleh Charles Darwin (lihat Kotak 18.1). Itu adalah pengamatan dan eksperimen
Darwin yang pada akhirnya menyebabkan F. W. Went, hampir setengah abad kemudian, untuk
menggambarkan zat mirip hormonal sebagai agen penyebab ketika tanaman tumbuh ke arah
cahaya. Pada saat yang hampir bersamaan, H. Fitting memperkenalkan istilah hormon ke dalam
literatur fisiologi tanaman.
Apa itu hormon? Hormon terjadi secara alami, molekul organik yang, pada konsentrasi
rendah, memberikan pengaruh besar pada proses fisiologis. Selain itu, hormon, seperti yang
didefinisikan oleh ahli fisiologi hewan, adalah (1) disintesis dalam organ atau jaringan diskrit,
dan (2) diangkut ke aliran darah ke jaringan target tertentu dimana mereka (3) mengendalikan
respons fisiologis dalam konsentrasi yang bergantung cara. Meskipun ada banyak kesejajaran
antara hormon hewan dan tumbuhan, ada juga beberapa perbedaan yang signifikan. Seperti
hormon hewani, hormon tanaman secara alami merupakan zat organik yang sangat
mempengaruhi proses fisiologis pada konsentrasi rendah. Situs sintesis dan moda transportasi
untuk hormon tanaman, bagaimanapun, tidak selalu begitu jelas terlokalisir. Meskipun beberapa
jaringan atau bagian jaringan dapat dicirikan oleh kadar hormon yang lebih tinggi daripada yang
lain, sintesis hormon tanaman tampaknya jauh lebih menyebar dan tidak selalu dapat terlokalisir
ke organ diskrit.
Hormon dapat berfungsi secara efektif sebagai sinyal peraturan hanya jika molekul
memiliki masa pakai terbatas di dalam sel target. Setiap molekul yang cukup berumur panjang
untuk digunakan berulang kali akan mengorbankan fungsi pengaturnya yang dinamis. Ini berarti
bahwa jumlah hormon dalam kolam seluler harus diatur secara ketat dan menunjukkan tingkat
omset metabolik yang cepat dibandingkan dengan respons yang dikontrolnya.
Jumlah hormon yang tersedia untuk sel target akan diatur terutama oleh tingkat di mana
molekul hormon aktif masuk (input) dan keluar (output) pada kolam hormon. Hormon dapat
masuk ke dalam kolam dengan (1) sintesis hormon de novo, (2) pengambilan hormon aktif dari
bentuk penyimpanan yang tidak aktif, seperti konjugat kimiawi, dan (3) pengangkutan hormon
ke kolam dari tempat lain di tempat lain. tanaman. Sarana utama untuk menghilangkan hormon
dari kolam setelah bertindak meliputi: (1) oksidasi atau bentuk degradasi kimia lainnya yang
membuat sintesis molekul tidak aktif atau (2) dari konjugasi yang tidak dapat dipulihkan secara
ireversibel. Jelas, untuk memahami peraturan dinamis aktivitas hormon pada tumbuhan, penting
untuk mengetahui sesuatu dari input dan keluaran ini. Tidak ada pemahaman fungsi hormon
yang bisa lengkap tanpa pengetahuan tentang biosintesis dan metabolisme hormon.

18.2 AUXIN DISTRIBUSI DI SELURUH TANAMAN

Auxin (fr. G. auxein, meningkat) adalah hormon tanaman klasik. Auxin adalah hormon tanaman
pertama yang ditemukan dan memiliki peran utama dalam respons tanaman paling mendasar -
pembesaran sel tumbuhan. Auxin disintesis di daerah meristematik dan organ aktif lainnya
seperti koleoptil
 GAMBAR 18.1 Distribusi Auxin pada bibit oat (Avenasativa), menunjukkan
konsentrasi hormon yang lebih tinggi pada akar koleoptile dan akar yang aktif tumbuh.
(Berdasarkan data dari Thimann, K. V. 1934. Jurnal Fisiologi Umum 18: 23-34).

apeks, tip akar, benih berkecambah, dan tunas apikal batang tumbuh (Gambar 18.1). Daun muda
yang tumbuh dengan cepat, mengembangkan perbungaan, dan embrio setelah penyerbukan dan
pemupukan juga merupakan tempat penting sintesis auksin. Auxin, lebih dari zat pertumbuhan
lainnya, tampaknya didistribusikan secara aktif ke seluruh pabrik.

18.3 AUXIN PRINSIP DALAM TANAMAN ADALAH ACT-3-ACETIC ACID (IAA)

Meskipun sejumlah besar senyawa telah ditemukan dengan aktivitas auksin, asam indol-
3-asetat (IAA) adalah auksin alami yang paling banyak didistribusikan (Gambar 18.2). Selain
IAA, beberapa turunan indol alami lainnya diketahui untuk mengekspresikan aktivitas auksin,
termasuk indole-3-ethanol, indole-3-acetaldehyde, dan indole-3-acetonitrile. Namun, senyawa ini
semuanya berfungsi sebagai prekursor IAA dan aktivitasnya karena konversi ke IAA di jaringan.
Penemuan awal IAA pada tanaman dan pengakuan perannya dalam pertumbuhan dan
perkembangan merangsang pencarian bahan kimia lain dengan aktivitas serupa. Hasilnya adalah
serangkaian bahan kimia sintetis yang menunjukkan aktivitas seperti auksin. Salah satu bahan
kimia ini adalah asam indole-3-butyric (IBA) (IV, Gambar 18.2). Baru-baru ini, IBA telah
diisolasi dari biji dan daun jagung dan beberapa spesies lainnya. Analog terklorinasi IAA (asam
4-kloroindoleacetic, atau 4-chloroIAA; II, Gambar 18.2) juga telah dilaporkan dalam ekstrak biji
legum dan asam aromatik alami, asam fenil asetat (PAA) yang terkait secara alami, 18.2) baru-
baru ini dilaporkan memiliki aktivitas auksin. Karena IBA, 4-kloroIAA, danPAA sekarang telah
diisolasi dari tumbuhan, secara struktural mirip dengan IAA, dan menghasilkan banyak
tanggapan yang sama dengan IAA, ada argumen kuat untuk mempertimbangkan hormon alami
tersebut. Namun, belum jelas apakah mereka aktif sendiri atau apakah mereka pertama kali
dikonversi menjadi IAA. Secara kimia, karakter pemersatu tunggal dari molekul yang
mengekspresikan aktivitas auksin tampaknya merupakan rantai sisi asam pada cincin aromatik.

GAMBAR 18.2 Struktur kimia dari auksin alami dan sintetis. Indole-3-acetic acid
(I) diyakini sebagai auksin aktif pada semua tanaman. Asam fenilasetat (III) tersebar luas
dan dua lainnya, asam 4-chlorindole-3-acetic dan indole-3-butyric acid, telah
diidentifikasi pada ekstrak tumbuhan. Yang terakhir ini menginduksi respons auksin bila
diterapkan secara eksogen, tapi mungkin bertindak via konversi ke IAA. Struktur VI, VII,
dan VIII adalah herbisida aktif.
 Jumlah IAA saat ini akan bergantung pada sejumlah faktor, seperti jenis dan usia jaringan
dan keadaan pertumbuhannya. Pada jaringan vegetatif, misalnya, jumlah IAA umumnya berada
pada kisaran antara 1 μg dan 100 μg (5,7 sampai 570 nanomoles) kg-1 bobot segar, namun pada
biji tampaknya jauh lebih tinggi. Dalam sebuah penelitian, diperkirakan bahwa endosperma
benih jagung tunggal empat hari setelah perkecambahan mengandung 308 picomoles (pmole =
10-12 mol) IAA. Pada saat yang sama, pemotretan jagung mengandung 27 pmol IAA dan
membutuhkan perkiraan masukan sekitar 10 pmoles IAA hr-1 untuk mendukung
pertumbuhannya. Tingginya tingkat IAA pada benih ternyata berfungsi untuk mendukung
pertumbuhan bibit muda yang cepat saat benih tersebut berkecambah.

18.4 IAA disintesis dari ACID AMINO l-TRYPTOPHAN

Sejak tahun 1930-an, ketika KV Thimann pertama kali mengamati sintesis IAA pada
jamur Rhizopus suinus, yang telah diberi makan triptofan asam amino, konversi triptofan ke IAA
telah dipelajari secara in vivo di lebih dari 20 spesies tanaman dan in vitro yang berbeda. paling
sedikit 10 preparat enzim bebas sel yang berbeda. Sintesis IAA biasanya dipelajari dengan
memberi makan tanaman triptofan yang membawa label radioaktif, biasanya karbon (14C) atau
tritium (3H), dan memeriksa radioaktivitas IAA yang diisolasi selanjutnya atau zat antaranya.
Percobaan makan diperumit oleh beberapa faktor dan hasilnya harus selalu didekati
dengan hati-hati. Sebagai contoh, tryptophan dengan radiolabeled rupanya dapat mengalami
dekomposisi radiokimia, sehingga menyebabkan IAA melalui reaksi nonenzimatik. Selain itu,
ukuran kolam tryptophan (juga merupakan prekursor untuk sintesis protein) sangat besar
dibandingkan dengan IAA dan hanya ada sedikit data tentang jumlah sebenarnya dari IAA yang
disintesis. Akhirnya, perawatan harus dilakukan untuk memastikan bahwa percobaan dilakukan
di bawah kondisi steril, karena banyak mikroorganisme dengan mudah mengubah triptofan
menjadi IAA. Sementara komplikasi ini menyulitkan untuk memastikan jalur yang tepat yang
berfungsi secara in vivo, bukti yang ada dengan jelas menetapkan bahwa tanaman mampu
mensintesis IAA dari triptofan.
Pada sebagian besar tanaman, sintesis IAA terjadi dalam tiga tahap, dimulai dengan
pengangkatan gugus amino pada rantai samping triptofan. Produknya adalah asam indole-3-
pyruvic (IPA) (Gambar 18.3). Reaksi ini dikatalisis oleh tryptophanamino transferase, enzim
multispecific yang tersebar luas yang tampaknya bertindak juga untuk menghilangkan gugus
amino dari analog struktural triptofan seperti fenilalanin dan tirosin. Langkah kedua adalah
dekarboksilasi IPA untuk membentuk indole-3-acetaldehyde (IAAld). Enzim yang mengkatalisis
langkah ini, indo-3-piruvat dekarboksilase,

GAMBAR 18.3 Jalur untuk biosintesis tergantung pada triptofan asam indole-3-
asetat. Enzim yang terlibat adalah (1) tryptophan aminotransferase; (2) dekarboksilase
indol-3-piruvat; (3) oksidase indol-3-asetaldehida.

telah dijelaskan di beberapa jaringan tanaman dan ekstrak bebas sel. Akhirnya, IAAld dioksidasi
menjadi IAA oleh oksidase indo-3-asetaldehida NAD-dependent. Kehadiran enzim ini telah
ditunjukkan pada sejumlah jaringan, termasuk oat coleoptile. IAAld juga dapat dikurangi secara
reversibel menjadi indole-3-ethanol.
Indole-3-etanol aktif dalam bioassay menggunakan bagian batang, tapi ini mungkin
karena konversi kepada IAA dalam jaringan. Akhirnya, IAA dapat reversibel dikonversi ke IBA
oleh enzim sintase asam indole-3-butyric.
Ada beberapa bukti untuk jalur biosintesis alternatif yang melibatkan zat antara selain
IPA, namun beban bukti biokimia menunjukkan bahwa jalur IPA adalah jalur utama untuk
sintesis IAA dari triptofan pada tanaman yang lebih tinggi. Meskipun mutan defisien IAA
diharapkan dapat memberikan informasi lebih lanjut, tidak ada yang teridentifikasi sampai saat
ini. Ini mungkin karena defisiensi IAA mungkin akan mematikan.

18.5 BEBERAPA TANAMAN TANPA MEMBUTUHKAN TRYPTOPHAN UNTUK

BIOSMETHESIS IAA
Bukti untuk biosintesis IAA melalui jalur triptofan-independen telah diperoleh dari mutan jagung
dan Arabidopsis. Bibit oranye pericarp (orp) mutan Zea mays kekurangan enzim tryptophan
synthase, yang mengkatalisis tahap akhir sintesis tryptophan (lihat Gambar 18.3). Meskipun
benih yang membawa mutasi orp berkecambah secara normal, mereka tidak bertahan karena
kapasitas sintesis tryptophan berkurang. Kandungan IAA dari bibit mutan, bagaimanapun, adalah
sebanyak 50 kali lipat lebih tinggi daripada bibit wildtype. Beberapa mutan yang membutuhkan
triptofan juga telah diisolasi dari Arabidopsis. Dua mutan ini, trp2 dan trp3, juga kekurangan
tryptophan synthase dan tidak dapat mengubah fosfat indol-3-gliserol menjadi triptofan. Bibir
trp2 dan trp3, tidak seperti orp, tidak mengumpulkan IAA bebas tetapi mengandung kadar IAA
terkonjugasi (lihat di bawah). Ternyata, trp2 dan trp3 menyimpan kelebihan IAA dalam bentuk
terkonjugasi. Percobaan pelabelan radioisotop pada jagung dan Arabidopsis telah
mengkonfirmasi bahwa IAA disintesis dari beberapa prekursor selain triptofan.
Jalur yang tepat untuk sintesis IAA triptofan tidak diketahui. Namun, mutan Arabidopsis
trp2 dan trp3 menumpuk indole-3-acetonitrile. Arabidopsis juga mengandung enzim nitrilase
yang diperlukan untuk mengubah indol-3-asetonitril menjadi IAA, sehingga melibatkan indole-
3-asetonitril sebagai zat antara. Sumber indole-3-acetonitrile tidak diketahui, walaupun
akumulasi mutan triptofan menunjukkan jalur triptofan-independen untuk biosintesis indole-3
asetonitril juga. Diketahui bahwa indole-3-asetonitril dapat diturunkan dari glucobrassicin,
glukosinolat utama yang ada pada anggota keluarga Cruciferae. Rincian jalur indol-3-asetonitril
triptofan-independen untuk biosintesis auxin dan apakah terbatas pada Arabidopsis atau
kuningan, atau lebih luas, tetap harus ditentukan.

18.6 IAA MUNGKIN DIPERLUKAN SEBAGAI CONHUGAT INAKTIF

Pada awal studi auxins, dua populasi hormon dikenali - satu bebas bergerak dan dapat diperoleh
dengan difusi menjadi agar; yang lain tampaknya terikat di dalam sel dan bisa diisolasi hanya
dengan ekstraksi dengan pelarut atau hidrolisis dalam kondisi basa. Populasi terakhir ini, disebut
'' auxin terikat, '' sekarang diakui sebagai IAA yang memiliki

GAMBAR 18.4 Contoh konjugat IAA. Konjugasi mengikat kelompok karboksil

rantai samping, yang penting untuk aktivitas auksin. Biasanya, konjugasi dengan gula
secara reversibel menonaktifkan molekul auksin sementara penonaktifan dengan
konjugasi dengan asam amino tidak dapat diubah.

membentuk konjugat kimia dengan gula untuk membentuk ester glikosilik. Konjugasi terbentuk
dengan esterifikasi molekul glukosa atau inositol ke kelompok asam rantai samping (Gambar
18.4). Konjugat IAA-glycosyl sendiri tidak aktif tetapi melepaskan IAA aktif secara biologis
secara aktif pada ekstraksi pelarut, hidrolisis alkali, atau hidrolisis enzimatik secara in vivo.
Meskipun data kuantitatif kurang untuk kebanyakan tanaman, kolam besar ester glisofil
IAA telah ditunjukkan pada biji Zea mays. Kolam konjugat IAA ini terbentuk di endosperma
susu saat benih berkembang dan tampaknya menjadi sumber hormon aktif yang penting untuk
embrio selama beberapa hari pertama perkecambahan. Diperkirakan, misalnya, bahwa sebanyak
60 persen kebutuhan IAA untuk tunas jagung berkecambah dapat dipenuhi dengan hidrolisis
konjugat IAA yang awalnya dipasok oleh endosperma. Karena sebagian besar pengetahuan kita
tentang IAA
Dilepaskan oleh hidrolisis konjugasi berasal dari penelitian dengan benih berkecambah, belum
diketahui apakah hidrolisis konjugasi sama pentingnya dalam pertumbuhan tanaman dewasa.

18,7 IAA DEAKTIFKAN OLEH OXIDASI DAN CONJUGASI DENGAN ASAM AMINO
IAA dalam larutan berair relatif tidak stabil dan mudah terdegradasi oleh berbagai agen,
termasuk asam, radiasi ultraviolet dan pengion, dan cahaya tampak, yang terakhir terutama
dengan adanya pigmen peka seperti riboflavin. Degradasi IAA in situ, bagaimanapun,
nampaknya terutama disebabkan oleh oksigen dan peroksida, baik secara terpisah atau
kombinasi, dengan adanya sistem redoks yang sesuai.
Inaktivasi zat pendukung pertumbuhan Avena oleh ekstrak daun berair pertama kali
dilaporkan pada tahun 1930an, bahkan sebelum prinsip aktif diidentifikasi sebagai IAA. Enzim
yang bertanggung jawab untuk menginaktivasi IAA pertama kali diisolasi dari ekstrak tumbuhan
pada tahun 1940an dan disebut oksidase IAA. Kemudian, enzim peroksidase, bersamaan dengan
flavoprotein, terbukti dapat mengkatalisis oksidasi IAA sementara pada saat bersamaan
melepaskan CO2. Dekarboksilasi oksidatif IAA oleh peroksidase sekarang diketahui identik
dengan oksida IAA. Dekarboksilasi oksidatif in vitro IAA telah dipelajari secara ekstensif
dengan peroksidase lobak yang dimurnikan. Karena produk akhir oksidasi IAA bersifat fisiologis
tidak aktif, oksidasi IAA adalah cara efektif untuk mengeluarkan molekul hormon begitu telah
mencapai tujuannya. Studi yang lebih baru dengan buah tomat hijau, Vicia faba, dan spesies
lainnya telah menunjukkan bahwa konjugasi IAA dengan asam amino seperti asam alanin atau
aspartat juga menyebabkan penonaktifan ireversibel (Gambar 18.4).

18.8 AUXIN TERLIBAT DALAM TAHAN SETIAP TAHAP PENGEMBANGAN

TANAMAN
Auxins dicirikan terutama oleh kemampuan mereka untuk merangsang pemanjangan sel pada
bagian batang dan coleoptik yang dipotong, namun juga terlibat dalam serangkaian respons
perkembangan lainnya, termasuk inisiasi akar sekunder, diferensiasi vaskular, dan perkembangan
tunas aksila, bunga, dan buah-buahan. . Auxins juga merupakan komponen penting dalam rantai
sinyal yang memungkinkan akar dan tunas untuk merespons gravitasi dan cahaya sepihak.
Faktanya, auxin terlibat dalam hampir setiap tahap pertumbuhan dan perkembangan tanaman
dari organisasi embrio awal hingga pembibitan dan pengembangan buah.

18.8.1 TUJUAN PRINSIP UNTUK BEBERAPA ADALAH STIMULASI PEMBUKAAN SEL

DALAM TISSUES YANG DITETAPKAN
Peraturan pembesaran sel di Avena coleoptiles adalah dasar penemuannya dan tindakan ini telah
berulang kali ditunjukkan dengan jaringan tanaman yang dilapisi seperti jaringan koleoptil
subkapis dan segmen batang yang dipotong dari bibit kacang polong yang tumbuh gelap.
Kurva respons konsentrasi Auxin biasanya menunjukkan peningkatan respons dengan
meningkatnya konsentrasi auksin sampai konsentrasi optimum tercapai (Gambar 18.5).
Konsentrasi yang melebihi hasil optimum menghasilkan pertumbuhan yang berkurang. Jika
konsentrasi auksin cukup tinggi, pertumbuhan bisa terhambat dibandingkan dengan kontrol.
Ciri khas lain dari fisiologi auksin adalah bahwa batang dan koleoptik utuh tidak
menunjukkan respons yang signifikan terhadap penerapan hormon eksogen. Ternyata kandungan
auksin endogen dari jaringan utuh cukup tinggi untuk mendukung pemanjangan maksimum dan
penambahan auksin memiliki sedikit atau tidak ada efek tambahan. Jadi, ini adalah aturan umum
bahwa efek auksin yang diberikan secara exogen pada pembesaran sel dapat ditunjukkan hanya
pada jaringan yang telah dikeluarkan dari suplai auksin normal. Ini termasuk segmen batang dan
koleoptik yang dipotong dari media buatan.

18.8.2 AUXIN MENGATUR PERBEDAAN VASKULAR

Selain merangsang pembesaran sel, auksin juga memiliki peran dalam mengatur
diferensiasi sel. Sistem yang paling banyak dipelajari adalah induksi diferensiasi vaskular pada
tunas, yang berada di bawah kontrol auksin
 GAMBAR 18.5 Kurva respon konsentrasi untuk dua respons beraturan auksin
klasik. (A) lanjutkan uji kelengkungan Avena. Kubus kecil agar-agar yang mengandung
auksin ditempatkan pada permukaan potong dari sebuah oole coleoptile yang dipenggal.
Auksin berdifusi ke dalam koleoptil, merangsang pertumbuhan sel di bawah gel agar-
agar. Pertumbuhan diferensial menyebabkan koleoptile melengkung menjauh dari blok.
(B) Kelengkungan dalam uji Avena berhubungan linear dengan konsentrasi auksin.
(Redrawn dari data Went, F. W., K. V. Thimann, 1937. Phytohormones Dengan izin dari
K. V. Thimann.) (C) Uji segmen batang kacang. Bagian batang dari bibit kacang hijau
tumbuh melayang pada media dengan atau tanpa auksin. (D) Respons konsentrasi khas
pada uji bagian batang kacang polong. Perhatikan konsentrasi auxin dinyatakan pada
skala logaritmik. (Digali dari data Galston, A. W., M. E. Hand 1949. American Journal of
Botany 36: 85-94. Dengan izin dari American Journal of Botany.)

diproduksi di daun muda yang berkembang dengan cepat. Produksi helai xylem di dasar tangkai
Coleus, misalnya, berbanding lurus dengan aliran IAA yang tidak bergerak yang bergerak
melalui tangkai daun. Defoliasi episotil Coleus sangat mengurangi diferensiasi xilem pada
petiole, namun efek ini dapat dibalik dengan menerapkan jumlah IAA yang setara dalam pasta
lanolin.
Sistem favorit untuk mempelajari diferensiasi vaskular adalah regenerasi pembuluh darah
dan tabung semprotan floem di sekitar luka di batang Coleus, yang juga berada di bawah kendali
auksin (Gambar 18.6). Coleus, seperti anggota keluarga mint lainnya (Lamiaceae), memiliki
batang persegi yang khas dengan bundel pembuluh darah di setiap sudutnya. Jika sayatan
berbentuk baji dibuat yang menyela salah satu dari kumpulan vaskular ini, sel parenkim di
daerah luka akan berdiferensiasi menjadi vascularelements baru. Unsur-unsur vaskular ini pada
akhirnya akan membangun kembali kontinuitas dengan bundel aslinya.
Diferensiasi elemen xilem dan tabung ayakan floem di sekitar luka terbatas dan
dikendalikan oleh suplai auksin. Hal ini dapat ditunjukkan dengan menghilangkan daun (sumber
auksin) di atas luka, misalnya yang mengurangi regenerasi vaskular. Di sisi lain, karena auxin
bergerak secara istimewa ke bawah batang, pengangkatan daun di bawah luka memiliki sedikit
efeknya. Selanjutnya, tingkat regenerasi vaskular berbanding lurus dengan suplai auksin

GAMBAR 18.6 Regenerasi xilem yang diinduksi oleh IAA. Pandangan

longitudinal elemen kapal xilem yang diregenerasi di sekitar luka (W) pada rongga timun
decapitasi (Cucumis sativus). Lanolin yang mengandung 0,1 persen IAA dioleskan ke sisi
atas ruas segera setelah melukai. Regenerasi kutub ditandai dengan munculnya banyak
elemen tracheary xylem (panah) di daerah bundel pembuluh darah yang rusak di atas
luka. Ini adalah wilayah di mana IAA yang mengalir basipetally awalnya akan
terakumulasi karena terganggu oleh luka dan dipaksa untuk menemukan jalur baru di
sekitar rintangan. (Pembesaran: × 60) (Foto milik Prof. R. Aloni, Universitas Tel Aviv).
Bila auksin eksogen diganti dengan daunnya. Secara umum, diferensiasi tabung ayakan phloem
disukai oleh konsentrasi auksin rendah (0,1% IAA w / w pada lanolin) sedangkan diferensiasi
xilem disukai oleh konsentrasi auksin yang lebih tinggi (1,0% IAA w / w pada lanolin).
Auxin juga diperlukan untuk membedakan vaskular dalam kultur jaringan tanaman. Bila
tunas, yang merupakan sumber auksin, ditanamkan ke dalam rumpun jaringan kalus yang tidak
berdiferensiasi dalam kultur, diferensiasi parenkim kalus ke jaringan vaskular terjadi di daerah
yang berdekatan dengan implan. Efek yang sama dicapai saat wedges yang mengandung IAA
dan gula diganti dengan tunas implan.

18.8.3 AUXIN MENGENDALIKAN PERTUMBUHAN BUDIDAN AWARD

Sebagai tunas terus tumbuh dan meristem apikal meletakkan primordia daun baru,
kelompok kecil sel di asil (sudut antara batang dan primordium daun) primordia terisolasi dari
meristem apikal dan menghasilkan tunas aksilaris. Dalam beberapa kasus, seperti kacang
(Phaseolus), tunas terus tumbuh, meski pada tingkat yang jauh lebih lambat daripada tunas
apikal. Namun, di banyak tanaman, mitosis dan perluasan sel pada tunas aksila ditangkap pada
tahap awal dan tunas gagal tumbuh. Telah diketahui beberapa saat bahwa pemindahan apeks
pucuk, teknik hortikultura yang umum untuk menghasilkan tanaman lebat, merangsang tunas
aksiler untuk melanjutkan pertumbuhan (Gambar 18.7). Ternyata kuncup apikal mampu
mengerahkan pengaruh dominan yang menekan pembelahan sel dan pembesaran pada tunas
aksilaris. Untuk alasan ini, fenomena perkembangan budidaya terkoordinasi dikenal sebagai
dominasi apikal.
Sesaat setelah auksin pertama kali ditemukan, K. V. Thimann dan F. Skoog
mempertanyakan apakah mungkin ada hubungan antara kapasitas ujung tunas untuk melepaskan
auxin dan kemampuannya untuk menekan perkembangan tunas aksila - dengan kata lain, apakah
dominasi apikal yang dikendalikan oleh auksin? Thimann dan Skoog menguji gagasan ini
dengan memenggal tanaman kacang lebar (Vicia faba) dan menerapkan auksin pada tunggul
yang dipotong. Perkembangan tunas aksiler tetap ditekan dengan adanya auksin. Sejak
demonstrasi awal ini, kapasitas auxin menjadi pengganti
 GAMBAR 18.7 Dominasi apikal di broadbean (Vicia faba). (Kiri) Tanaman
kontrol (Pusat) Penghapusan ujung batang, sumber auksin, mendorong pertumbuhan
tunas aksila di dasar batang muda. (Kanan) Dominasi dapat dipulihkan dengan
menerapkan auksin (dalam pasta lanolin) ke permukaan batang yang dipotong.

Untuk ujung tunas dalam mempertahankan dominasi apikal sudah dikonfirmasi berulang kali.
Bagaimana auksin dari apeks tunas menekan perkembangan tunas aksiler? Teori yang
paling banyak diterima menyatakan bahwa konsentrasi auksin optimum untuk pertumbuhan
tunas aksiler jauh lebih rendah daripada elongasi batang. Aliran auksin yang mengalir keluar dari
apeks tunas menuju pangkal tanaman dianggap mempertahankan konsentrasi lebah auksin pada
tunas aksilaris. Penghapusan suplai auksin ini dengan pemenggalan mengurangi suplai auksin di
daerah tunas aksila dan dengan demikian mengurangi kuncup penghambatan. Bukti lebih
langsung untuk peran transportasi auksin ditawarkan oleh pengamatan bahwa penghambat
transportasi auksin (TIBA dan NPA) merangsang pelepasan kuncup dari dominasi saat
diterapkan pada batang antara apeks tunas dan tunas. Selain itu, garis tomat yang menunjukkan
percabangan produktif (yaitu, tidak adanya dominasi apikal) juga gagal mengekspor IAA
berlabel radioaktif dari apeks pucuk.

18.9 HIPOTESIS PERTUMBUHAN ACID MENJELASKAN PENGENDALIAN AUXIN

SELULER SELULAR
Apapun tindakan utamanya, auksin dapat mengubah laju ekspansi sel hanya dengan
akhirnya mempengaruhi satu atau lebih parameter yang sebelumnya diidentifikasi dalam
persamaan 17.1 (Bab 17). Kenaikan tingkat pertumbuhan, misalnya, memerlukan peningkatan
perluasan dinding (m), peningkatan tekanan turgor (P), atau penurunan ambang batas hasil (Y).
(Konduktansi hidrolik, L, membran plasma bergantung pada keberadaan aquaporin dan biasanya
bukan parameter pembatas.) Pengukuran langsung P, dengan menggunakan probe mikropresur,
telah mengindikasikan bahwa tekanan turgor tidak berubah secara signifikan selama peningkatan
distorsi auksin. tingkat pertumbuhan bagian batang kacang polong. Meskipun Y tidak dapat
diukur secara langsung, hasil tes tidak langsung menunjukkan bahwa ambang batas juga tidak
berubah. Itu bisa diperpanjang, m. Ekstensibilitas sulit untuk dinilai. Di satu sisi ada koefisien
laju, tapi juga ukuran kapasitas dinding sel untuk mengalami deformasi irreversible (plastik).
Sejumlah tes untuk mengukur kemampuan diperpanjang telah dirancang. Bagaimanapun
metodenya, bagaimanapun, jawabannya selalu sama - induksi pembesaran sel yang cepat oleh
auxin disertai dengan peningkatan besar dan cepat pada perluasan dinding.
Peran pH rendah dalam pembesaran sel diperkenalkan pada Bab 17. Pada saat bersamaan
bahwa hubungan antara pH asam dan pembesaran sel menjadi jelas, ditemukan juga bahwa
auksin akan menyebabkan sel tumbuh mengeluarkan proton. Beberapa baris bukti menunjukkan
bahwa sekresi proton sangat penting untuk pembesaran sel tambahan auksin. (1) Dengan Avena
coleoptiles pH apoplastik, atau dinding sel, larutan turun dari 5,7 menjadi 4,7 dalam 8 sampai 10
menit dari aplikasi auksin. Periode lag ini konsisten dengan periode lag yang diamati antara
penambahan auksin dan awal respon pertumbuhan. (2) Sekresi proton yang dipicu oleh Auxin
adalah proses yang bergantung pada energi yang dihambat oleh inhibitor metabolik dan inhibitor
pertumbuhan yang disebabkan auksin. (3) Jika ruang dinding bagian koleoptil disusupi dengan
buffer netral untuk mencegah perubahan pH, pertumbuhan yang disebabkan auksin hampir
sepenuhnya dicegah. (4) Agen selain auksin yang menyebabkan ekskresi proton memiliki efek
yang mirip dengan auksin pada promosi pertumbuhan. Salah satu agen tersebut adalah
fusicoccin, phytotoxin dari jamur Fusicoccum amygdali, yang menyebabkan sel
mengekskresikan proton dengan kecepatan tinggi.
Pada tahun 1970, R. Cleland dan D. Rayle mengajukan sebuah teori sederhana namun
agak provokatif untuk menjelaskan kenaikan auxinstimulated pada perluasan dinding sel.
Mereka menyarankan bahwa auksin menyebabkan pengasaman lingkungan dinding sel dengan
merangsang sel untuk mengeluarkan proton. Ada pH yang lebih rendah yang mengaktifkan satu
atau lebih enzim pengatur dinding, yang memiliki pH optimum asam. Pada sekitar waktu yang
sama, A. Hager, yang bekerja di Jerman, menerbitkan sebuah proposal serupa namun melangkah
lebih jauh untuk menyarankan agar auxin merangsang ekskresi proton dengan mengaktifkan
pompa proton ATPase membran-membran plasma. Proposal Cleland-Hager gabungan dikenal
sebagai hipotesis pertumbuhan asam. Meskipun hipotesis pertumbuhan asam telah diuji di
jaringan yang relatif sedikit (telah diuji secara menyeluruh hanya pada Avena coleoptiles),
buktinya pada umumnya bersifat suportif. Dalam bentuknya sekarang, hipotesis pertumbuhan
asam mengusulkan bahwa auksin mengaktifkan pompa ATP-proton yang terletak di membran
plasma (Gambar 18.8A). Pengasaman yang dihasilkan dari ruang dinding sel menurunkan pH ke
kisaran optimal untuk aktivitas ekspansif. Peningkatan aktivitas ekspansif, pada gilirannya,
 GAMBAR 18.8 Skema yang menunjukkan peran auksin dalam hipotesis
pertumbuhan asam untuk pembesaran sel. (A) Polimer dinding sel (mikrofibril
selulosa) secara luas dihubungkan silang dengan xyloglycans bantalan beban (1),
yang membatasi kapasitas sel untuk berkembang. Pompa protoprotektor ATPase-
auksin yang terletak di membran plasma mengasamkan ruang dinding sel dengan
memompa proton dari sitoplasma. PH yang lebih rendah mengaktifkan enzim
pelongsong dinding, seperti ekstensin, yang melonggarkan ikatan bantalan beban
(2). Kekuatan turgor yang bekerja pada membran dan dinding sel menyebabkan
polimer berpindah (3) dan membiarkan sel membesar. (B) Rantai transduksi
sinyal hipotetik yang menghubungkan auksin dengan aktivasi pompa ATPase-
proton. Lihat teks untuk rinciannya. Singkatan: ABP1, protein pengikat auksin 1;
PLA, fosfolipase A2; FA, asam lemak; LPC, lysophospholipid; PK, protein
kinase.

meningkatkan ekstensibilitas dinding dan memungkinkan perluasan sel yang diinduksi turgor
seperti yang dijelaskan sebelumnya pada Bab 17.
Meskipun auksin meningkatkan aktivitas pompa ATPase-proton dalam membran plasma,
auksin itu sendiri tidak berikatan dengan ATPase. Oleh karena itu, harus ada reseptor auksin
yang memulai rantai transduksi sinyal yang menghubungkan keberadaan auxin dengan aktivitas
ATPase yang meningkat. Reseptor auksin putatif telah diisolasi dari jagung (Zea mays), namun
rincian rantai transduksi sinyal itu sendiri tetap tidak jelas.
Reseptor auksin jagung adalah protein terkait membran yang ditunjuk ABP1 (Auxin-
Binding Protein 1). ABP1 adalah dimer glikoprotein 43 kDa dari subunit 22 kDa yang memiliki
afinitas tinggi untuk IAA. ABP1 telah dilokalisasi terutama dalam retikulum endoplasma, namun
populasi kecil juga ditemukan terkait dengan membran plasma dan dinding sel. ABP1 adalah
kandidat utama reseptor auksin yang memediasi pemanjangan sel, walaupun bukti untuk peran
ini tidak langsung. Mungkin bukti yang paling meyakinkan berasal dari eksperimen dengan
antibodi. Antibodi adalah protein yang diproduksi oleh sistem kekebalan tubuh hewan sebagai
respons terhadap kehadiran antigen. Antibodi akan mengikat antigen, biasanya protein '' asing '',
untuk membuat protein tersebut tidak aktif. Antibodi (IgG yang ditunjuk) dapat diangkat
melawan protein tanaman dengan menyuntikkan protein yang dimurnikan ke dalam hewan
seperti tikus atau kelinci. Antibodi adalah alat yang berguna karena spesifisitas reaksi antibodi-
antigen. Antibodi juga bisa '' ditandai '' dengan bahan kimia fluoresen atau spidol lainnya
sehingga lokasinya dapat segera divisualisasikan dengan mikroskopi. Antibodi yang diajukan
terhadap protein pengikat auksin (yang ditunjuk IgG-antiABP) secara khusus menghambat
elongasi coleoptile yang diinduksi oleh auksin dan hiperpolasiasi membran plasma auxin. Juga,
IgG-antiABP yang diterapkan pada bagian koleoptile dilokalisasi di sel-sel pidermal luar, yang
diyakini sebagai sel yang paling banyak responsif pada koleoptil.
Saran bahwa ABP1 adalah auksin-reseptor telah menarik beberapa kontroversi. Kesulitan
utama berkaitan dengan lokasi ABP1 di dalam sel. ABP1 ditemukan terutama di lumen
retikulum endoplasma (ER) dan beberapa penyidik
telah mampu mendeteksi ABP1 pada membran plasma. ABP1 bahkan mengandung urutan asam
amino di kedua ujung molekul yang khas protein yang biasanya tersimpan di dalam lumen UG.
Namun, teknik imunolokalisasi yang lebih sensitif sekarang telah mengkonfirmasi populasi kecil
(mungkin 1000 molekul) pada membran plasma protoplas jagung. Masalah kedua adalah bahwa,
berdasarkan urutan asam amino, protein ABP1 tampaknya tidak memiliki domain pembentuk
lipofilik. Untuk mendamaikan pengamatan ini, telah diusulkan bahwa ABP1 membentuk
kompleks dengan protein pendorong transmembran. Menurut model ini, protein docking
memberikan kelarutan lipid yang diperlukan untuk menyandarkan ABP1 ke membran. Kompleks
protein penguat ABP1 kemudian diekspor dari UG ke membran plasma dimana disisipkan
dengan ABP1 menghadap ke luar (Gambar 18.8B). Telah diusulkan bahwa komplek protein
ABP1-docking itu sendiri tidak aktif, namun pelekatan molekul auxin mengaktifkan kompleks
dan memulai jalur transduksi sinyal. Protein docking yang diusulkan belum diidentifikasi, namun
ada beberapa saran bahwa ini mungkin merupakan reseptor GCPR dalam keluarga protein G
(Bab 17).
Auxin juga mengaktifkan enzim phospholipase A2 (PLA2) dan beberapa percobaan telah
melibatkan PLA2 dalam rantai transduksi sinyal. Misalnya, aktivasi PLA2 bisa diblok oleh IgG-
antiABP. Juga, baik lysophospholipids dan asam lemak (produk PLA2) merangsang sekresi
proton dan pemanjangan. Efek ini dihambat oleh vanadate, yang secara spesifik menghambat
proton-ATPase membran plasma. Data ini menunjukkan bahwa PLA2 mengikuti ABP1 dalam
rantai dan bahwa lysophospholipids dan asam lemak tampak lebih jauh. Akhirnya, efek IAA dan
lysophospholipids pada sekresi proton dan pemanjangan dapat diblokir oleh penghambat protein
kinase, menunjukkan bahwa lipid mengaktifkan proton-ATPase dengan melibatkan protein
kinase cascade. Sebuah model yang menggambarkan komponen ini mungkin berinteraksi
disajikan pada Gambar 18.8B

18.10 PEMELIHARAAN PERTUMBUHAN AUXIN-INDUCED DAN EFEK LAINNYA

MEMBUTUHKAN AKTIVASI GEN.
Hipotesis pertumbuhan asam tidak sendiri menyelesaikan pertanyaan tentang bagaimana
auksin mengatur pertumbuhan sel, apalagi masalah perkembangan yang lebih kompleks seperti
pematangan dan diferensiasi sel. Satu kesulitan adalah bahwa bagian batang hijau, yang
merespons auxins, tidak merespon dengan baik (jika sama sekali) pada asam. Kesulitan lain
adalah bahwa asam eksogen hanya menginduksi stimulasi pertumbuhan sementara dari koleoptil.
Baik asam maupun fusikokin efektif setelah 30 sampai 60 menit pertama. Kinetika pertumbuhan
yang diinduksi auksin menunjukkan peningkatan pesat pada laju pertumbuhan yang maksimal
dalam 30 sampai 60 menit. Ledakan awal ini diikuti oleh tingkat penurunan yang stabil atau
bertahap selama 16 jam berikutnya (Gambar 18.9). Penjelasan yang paling masuk akal untuk
kurva respons dua fase tersebut adalah bahwa respon pertumbuhan asam terbatas terutama pada
respons pertumbuhan awal yang cepat. Faktor tambahan auksin-peraturan kemudian harus
diperlukan untuk pemeliharaan pertumbuhan dalam jangka panjang, termasuk perkembangan sel
yang didefinisikan dengan baik melalui pembagian urutan ekspansi pematangan
diferensiasi. Faktor
tambahan ini melibatkan transkripsi gen dan sintesis protein yang mempromosikan
pertumbuhan.
 GAMBAR 18.9 Kinetika pemanjangan auksin dari jagung (Zea mays) coleoptiles.
Kedua kurva berbeda dalam durasi tindakan auksin. Pada masing-masing kasus, auksin
(10-5 MIAA) ditambahkan pada waktu = 0 dan dikeluarkan setelah periode yang
ditunjukkan (5 atau 80 menit). (Dari Dela, Fuente, R. K., A. C. Leopold 1970. Fisiologi
Tanaman 46: 186. Hak Cipta American Society of Plant Physiologists.)
Auksin dengan cepat dan secara khusus merangsang transkripsi satu set gen yang dikenal
sebagai gen responsif auksin primer. Ini termasuk SAUR (auksin kecil upregulated RNAs) dan
AUX / IAA. Gen SAUR mengkodekan pendek, transkrip RNA yang relatif tidak stabil. Pada
hypocotyl kedelai, ekspresi gen SAUR tampak terlokalisasi dalam jaringan yang biasanya
merespons auksin dan transkrip RNA dapat dideteksi dalam 2 sampai 3 menit dari aplikasi
auksin - bahkan sebelum pemanjangan induksi auksin dapat diamati. Selanjutnya, distribusi
transkrip SAUR yang asimetris telah terdeteksi pada bibit yang distimulasi gravitasi. Asimetri
berkorelasi dengan perpanjangan sel diferensial dalam merespon bibit, namun dapat dideteksi
bahkan sebelum ada tanda kelengkungan yang terlihat. Akhirnya, beberapa mutan tahan auksin
di Arabidopsis menunjukkan rendahnya tingkat ekspresi SAUR sebagai respons terhadap
pengobatan auksin.
Gen AUX / IAA diinduksi selama periode 4 sampai 30 menit setelah aplikasi auksin. Ini
adalah keluarga besar gen-setidaknya ada 29 gen AUX / IAA berbeda dalam genom
Arabidopsis-yang berfungsi sebagai regulator transkripsional. AUX / IAA Protein tidak
mengikat secara langsung dengan DNA, namun menggunakan efek pengaturannya dengan
berinteraksi dengan protein lain yang disebut faktor respons auksin (ARF). ARF mengikat
daerah promotor gen auksin-responsif dan dapat bertindak baik untuk mengaktifkan atau untuk
menekan ekspresi gen. Karena protein AUX / IAA menekan aktivitas ARF, mereka dapat
bertindak sebagai regulator positif atau negatif.
Studi awal menunjukkan bahwa banyak dari gen responsif ini juga dapat diinduksi oleh
inhibitor sintesis protein sikloheksimida. Pengamatan ini menunjukkan bahwa gen ini dapat
dikendalikan oleh protein represor berumur pendek yang biasanya mencegah transkripsi.
Menurut satu model, auksin dianggap untuk memulai degradasi protein yang diinduksikan oleh
ubiquitin. Model ini dikonfirmasi dengan ditemukannya gen TIR1 di Arabidopsis. Awalnya
diidentifikasi dalam layar genetik untuk inhibitor transportasi auksin (oleh karena itu namanya
Transport Inhibitor Response 1), segera ditunjukkan bahwa TIR1 adalah protein reseptor auksin
yang dapat larut dan ditempatkan nuklir yang bekerja bersamaan dengan auxin untuk melepaskan
transkripsi auksin- gen responsive.
TIR1 adalah protein F-box (lihat Bab 17, Kotak 17.3, untuk peran protein F-box).
Namun, selain memiliki situs pengenalan yang memungkinkannya mengikat dengan perancah
SCF, TIR1 juga memiliki situs pengenal untuk auksin. Sebuah studi baru-baru ini tentang
struktur kristal TIR1 telah menunjukkan bahwa pada permukaan protein terdapat kantong yang
mengakomodasi peptida AUX / IAA. Namun, afinitas TIR1 untuk AUX / IAA sangat rendah
kecuali jika ada molekul auxin. Molekul auxin berada di bagian bawah kantong dimana
keduanya berinteraksi dengan kedua protein. Auxin berfungsi sebagai '' molecular lem '' yang
meningkatkan ikatan TIR1-AUX / IAA. Setelah protein auxin dan AUX / IAA berada pada
tempatnya, TIR1 kemudian dapat terhubung dengan komplek SCF untuk ubiquitination dan
degradasi represes oleh jalur proteasom ubiquitin-26S (Gambar 18.10). Penghapusan protein
represor AUX / IAA menurunkan gen auksin-responsif, yang memungkinkan gen untuk
melanjutkan transkripsi rNA pembawa pesan dan, sebagai konsekuensinya, terjemahan protein
yang disebabkan auksin. Auxin tampaknya memodulasi perkembangan melalui depresi gen
auksin-responsif, bukan melalui aktivasi sederhana.
Sebagai catatan, sangat menarik bahwa studi kristalografi sekarang membuat lebih
mudah untuk menjawab pertanyaan lama - '' Apa yang membuat auksin? '' Pada dasarnya setiap
molekul yang sesuai dengan kantong pengikat TIR1 untuk meningkatkan TIR1-AUX / IAA
Interaksi akan memenuhi syarat sebagai auksin. Efektivitas relatif berbagai molekul auksin
tergantung pada seberapa baik mereka masuk dalam saku.
18.11 BANYAK ASPEK PEMBANGUNAN TANAMAN TERKAIT DENGAN
TRANSPORTAN POLAR OF AUXIN
Transportasi Auxin secara alami telah dipelajari hampir secara eksklusif pada bibit muda,
di mana sintesis terjadi di jaringan proliferasi aktif. Dari daerah ini

GAMBAR 18.10 Sebuah model untuk gen auksigen yang diturunkan. (1)
Auxin response factor protein (ARF) mengikat DNA di daerah promoter gen
auksin-responsif, namun transkripsi gen dicegah dengan adanya protein represor
AUX / IAA. Bila tingkat auksin meningkat, auksin (A) digabungkan dengan
reseptor auksin yang terletak di inti nuklir, TRI1, untuk membentuk kompleks
auksin-TRI1. (2). Auxin meningkatkan afinitas TRI1 untuk AUX / IAA dan
memfasilitasi disosiasi AUX / IAA dari ARF (3). Penghapusan protein AUX /
IAA dari gen ARF menurunkan gen (4), memungkinkan transkripsi mRNA dan
translasi protein yang mengandung auksin, termasuk AUX / IAA (5). Sementara
itu, TRI1 merekrut AUX / IAA ke enzim pengikatan ubiquitin E3, atau kompleks
SCF (6), di mana (7) AUX / IAA diolokutinasi. Protein ubiqitinasi kemudian
direkrut ke proteasom 26S (8), di mana ia terdegradasi. Hasilnya adalah ketika
tingkat auksin tinggi, TIR1 memfasilitasi transkripsi aktif mRNA dengan terus
mengeluarkan protein represor. Bila kadar auksin rendah, TIR1 tidak dapat
 mengikat dengan represor, protein represor terakumulasi, dan transkripsi
dimatikan.
Tampaknya ada arus auxin yang mengalir dari tunas ke akar. Setidaknya pada bibit Arabidopsis,
beberapa aliran ini tampaknya menurunkan gradien konsentrasi dalam floem. Namun, porsi yang
signifikan bergerak melalui mekanisme transportasi polar yang kompleks dan diatur dengan
ketat.

GAMBAR 18.11 Polaritas dalam transportasi auksin di segmen oat

coleoptile. Blok donor berisi 14C-IAA. Terlepas dari orientasi segmen,
translokasi IAA yang diberi label radio selalu dari akhir morfologis apikal (A) ke
akhir basal morfologis (B) segmen ini.

Arah gerakan digambarkan sebagai basipetal. Gerakan ke arah yang berlawanan, menuju puncak
morfologi, disebut sebagai acropetal. Bila batang atau bagian koleoptil terbalik, seperti yang
ditunjukkan pada Gambar 18.11, arah gerakan asli dipertahankan. Namun, karena lebih banyak
yang dipelajari tentang transportasi auksin, semakin jelas bahwa transportasi auksin terarah
mungkin bersifat lateral dan juga naik turun.
Transportasi kutub auksin pada tunas cenderung didominasi basipetal pada kecepatan
antara 5 dan 20mm jam-1. Transportasi asropetal pada tunas minimal. Di akar, di sisi lain,
tampaknya ada dua arus transportasi. Aliran acropetal, yang tiba dari tunas, mengalir melalui sel
parenkim xilem di silinder pusat akar dan mengarahkan auksin ke ujung akar. Aliran basipetal
kemudian membalikkan arah aliran, memindahkan auksin menjauh dari ujung akar, atau
basipetal, melalui sel-sel epidermis dan sel korteks luar.
Fenomena transport auksin polar telah menarik perhatian luas karena anggapan bahwa
konsentrasi auksin merupakan variabel penting dalam beberapa respons perkembangan. Auxin
gradien karena transportasi polar telah dipanggil untuk menjelaskan, setidaknya sebagian,
fenomena perkembangan seperti dominasi apikal, pembentukan akar adventif dan sekunder, dan
respons pertumbuhan diferensial terhadap cahaya dan gravitasi. Aliran auksin di akar, misalnya,
sangat terkait dengan respons akar terhadap gravitasi dan akan dibahas dalam bab selanjutnya.
 Beberapa pengamatan menunjukkan bahwa transportasi kutub melibatkan mekanisme
transpor aktif pembawa pembawa di kedua tunas dan akar. Pertama, dapat ditunjukkan bahwa
transportasi kutub dihambat oleh anaerobosis atau oleh racun pernafasan seperti sianida dan 2,4-
dinitrophenol. Ini dianggap sebagai bukti bahwa transportasi polar adalah proses yang
membutuhkan energi yang bergantung pada metabolisme oksidatif di mitokondria. Kedua, bahan
kimia tertentu, yang disebut phytotropin, telah diketahui beberapa waktu untuk menjadi spesifik,
penghambat transportasi polar yang tidak kompetitif. Ini termasuk TIBA (asam 2,3,5-
triiodobenzoat), morfaktin (asam 9-hydroxyfluorine-9-carboxylic), dan NPA (asam N-1-
naftilphalalamat) (Gambar 18.12). Diperkirakan bahwa penghambat tersebut menghalangi
pengangkutan auksin dengan mengikat molekul pembawa diskrit yang terlibat dalam sistem
transportasi polar. Ketiga, pengambilan IAA radioaktif paling sedikit terhambat oleh IAA
nonradioaktif. Pengamatan terakhir ini menunjukkan bahwa IAA berlabel dan IAA yang tidak
berlabel bersaing satu sama lain untuk jumlah terbatas lokasi pembawa.
Pengamatan ini menjadi dasar bagi model chemiosmotik untuk transportasi auksin, yang
diajukan oleh P. H. Rubery, A. R. Sheldrake, dan J. A. Raven pada pertengahan tahun 1970an.
Dalam bentuknya yang sekarang, model chemiosmotic mengandung tiga fitur penting: (1)
gradien pH atau kekuatan motif proton melintasi membran plasma yang memberi kekuatan
pendorong pengambilan IAA, (2) pembawa arus masuk IAA, dan (3) IAA pengangkut efflux
yang lebih disukai berada pada dasar sel pengangkut auksin (Gambar 18.13). Prinsip-prinsip
model kimiawi dapat diringkas sebagai berikut.IAA adalah asam lemah, molekul lipofilik.
Bergantung pada pH, IAA mungkin ada dalam bentuk terprotonasi (IAAH) atau bentuk anionik
yang tidak terpapar (IAA-). Ruang dinding sel cukup asam dengan pH sekitar 5,5. Pada pH
tersebut, sekitar 20 persen IAA akan diprotonasi (IAAH). Akibatnya, ruang dinding sel akan
berisi IAA anionik dan terprotonasi. Berdasarkan kelarutan lipidnya, sebagian kecil molekul
IAAH bermuatan akan diharapkan untuk menyebar secara perlahan melintasi membran plasma
dari ruang dinding sel

GAMBAR 18.12 Phytotropin. Dua contoh inhibitor transportasi IAA polar

 GAMBAR 18.13 Model difusi chemiosmotic-polar untuk transport polar IAA. Di
ruang dinding sel asam (pH 5.5) kira-kira 20% IAA diprotonasi. Protonated IAA (IAAH)
dapat memasuki sel dengan difusi melintasi membran sel (panah putus-putus) sementara
bentuk anion (IAA-) dapat diambil melalui AUX1 (lingkaran), pembawa symport proton /
IAA yang terletak secara acak di membran plasma. Di dalam sel (pH 7.0) bentuk
deprotonasi IAA- akan mendominasi. IAA- dapat keluar dari sel hanya melalui
pengangkut cairan dari keluarga PIN (kuadrat) yang terletak secara istimewa di dasar sel.
Pompa proton ATPase-membran yang dibatasi membran membantu mempertahankan
perbedaan pH yang tepat di seluruh membran dan memberikan proton untuk sympor IAA
/ H+. Lokasi dasar yang unik dari pembawa eflux adalah kunci transportasi polar.

ke dalam sel. Sebagian besar IAA, bagaimanapun, akan memasuki sel sebagai IAA- melalui
pembawa pembawa sinyal H + / auxin (pembawa influuks) yang terdistribusi secara merata di
sekitar sel.
Begitu berada di sitoplasma, dimana pH mendekati 7,0, IAAH akan terdisosiasi menjadi
IAA dan H+. Auxin sekarang terjebak di dalam sel karena IAA- tidak dapat dengan mudah
berdifusi melintasi membran. Kunci model chemiosmotik, bagaimanapun, adalah adanya
pembawa, yang terletak hanya di membran basal sel, yang menengahi eflux IAA- dari sel. Ini
adalah lokasi unik dari pembawa eflux ini, lebih dari faktor tunggal lainnya, yang menetapkan
polaritas pada transportasi auksin.
Bukti langsung pertama untuk keberadaan pembawa eflux basal mengambil keuntungan
dari fakta bahwa protein transpor IAA yang putatif mengikat NPA phytotropin. Protein pengikat
NPA diisolasi, antibodi dinaikkan untuk melawannya, dan antibodi kemudian diberi label dengan
fluorescein pewarna fluoresen untuk membuat antibodi terlihat di bawah mikroskop. Ketika
kacang bagian batang diobati dengan antibodi berlabel, fluorescein ditemukan dilokalisasi pada
membran plasma basal dari sel-sel induk.
Baru-baru ini, sebagian besar karena penelitian mutan auxin Arabidopsis, dua kandidat
yang baik untuk masuknya auksin dan pembawa eflux telah diidentifikasi. Pembawa influuks
putatif adalah protein membran, AUX1. Gen AUX1 telah dikaitkan dengan metabolisme dan
transpor auksin karena mutasi pada lokus tersebut menunjukkan pertumbuhan akar resisten IAA,
inisiasi akar lateral yang berkurang, dan respon akar terhadap gravitasi yang berkurang. Fenotip
seperti itu konsisten dengan pengurangan kapasitas untuk mengambil IAA. Gen AUX1 telah
dikloning dan urutan protein polipeptida mirip dengan asam amino yang diketahui. Keharusan
asam amino adalah protein membran yang berfungsi sebagai pembawa asam amino / proton
symport. Homolog protein bersama dengan kesamaan struktural antara IAA dan asam amino
prekursornya, triptofan, telah menyebabkan saran bahwa protein AUX1 berfungsi sebagai auksin
/ proton symporter. Dukungan lebih lanjut untuk model ini ditawarkan dengan pengamatan
bahwa auxin NAA sintetis mengembalikan respons gravitropik terhadap bibit mutan (aux1).
Serapan NAA oleh sel tidak carrier-dimediasi, sehingga hilangnya AUX1 tidak mengganggu
respon.
Keluarga gen, gen PIN, yang mengodekan pembawa auksin auxid efflux juga telah
diidentifikasi. (Sebanyak delapan gen PIN sekarang telah diidentifikasi di Arabidopsis.) Salah
satu yang pertama ditemukan adalah gen PIN1 yang mengendalikan pengembangan bunga di
Arabidopsis. Mutan pin1 ditandai oleh pengaruh yang berhenti pada struktur seperti pin dan
menunjukkan sedikit atau tidak ada bukti pengembangan tunas bunga. Transportasi auksin polar
berkurang secara signifikan pada maling pin1 penduga dan karakteristik mutan dapat ditiru
dengan menghalangi transportasi polar dengan phytotropin. Seperti yang diprediksi oleh model
chemiosmotic, antibodi berlabel neon telah menunjukkan bahwa protein PIN1 dilokalisasi di
membran basal sel parenkim xilem. Selain itu, sesuai dengan model chemiosmotic, protein
AUX1 dan PIN1 terletak di ujung sel akar phydem akar (protophloem).
Gen kedua disebut PIN2, EIR1, WAV6, atau AGR1. Beberapa nama disebabkan oleh
fakta bahwa gen tersebut diidentifikasi secara independen di laboratorium yang berbeda, semua
mempelajari mutan dengan respon akar yang terganggu terhadap gravitasi. PIN2 dinamakan
demikian karena mengkodekan protein yang sangat mirip dengan protein yang dikodekan oleh
PIN1. Seperti protein PIN1, percobaan imunolokalisasi telah menunjukkan bahwa protein PIN2
dilokalisasi di membran basal (yaitu, terjauh dari ujung akar) file sel di korteks akar dan
epidermis. Selain itu, seperti AUX1, struktur protein PIN menyerupai asupan asam amino bakteri
dan karenanya merupakan kandidat yang mungkin untuk transporter IAA.
Polaritas dalam transportasi auksin sangat penting untuk pengembangan tanaman dan
protein PIN mengarahkan transportasi ini dengan berpindah dari satu permukaan sel ke
permukaan lainnya, sesuai dengan tuntutan asimetri auxin. Satu masalah, misalnya, yang telah
lama membingungkan para ahli biologi perkembangan adalah bagaimana sumbu basikal apikal
terbentuk pada embrio muda. Protein PIN tampak bagian dari kuncinya. Segera setelah
pembagian zigot pertama, protein PIN yang terletak secara akropetal di sel basal mengarahkan
aliran auksin ke dalam sel apikal, yang menentukan bahwa sel sebagai pendiri proembrio.
Sebagai sel apikal berkembang biak membentuk tahap embrio bulat, mereka mulai mensintesis
auksin sendiri. Protein PIN kemudian bergeser ke lokasi basipetal dan arah aliran auksin
membalik, sehingga membentuk posisi kutub akar yang berkembang. Pola perubahan distribusi
PIN yang serupa dan perubahan polaritas pada transportasi auksin yang sama sama pentingnya
pada respon lainnya seperti inisiasi akar sekunder dan respon tunas dan akar terhadap gravitasi
dan pencahayaan unilateral, yang akan dibahas secara rinci pada bab berikutnya.

RINGKASAN
Hormon banyak mengandung zat kimia alami yang sangat mempengaruhi, pada konsentrasi
mikromolar, pertumbuhan dan diferensiasi sel tumbuhan dan organ. Efektivitas hormon
tergantung pada pemeliharaan ukuran kolam yang diatur secara ketat, yang dicapai dengan
keseimbangan biosintesis, penyimpanan sebagai konjugat tidak aktif, dan degradasi katabolik
molekul.
Auksin dicirikan oleh kapasitas mereka untuk merangsang pemanjangan pada segmen
koleoptile dan batang tetapi terlibat dalam hampir semua aspek pengembangan tanaman,
termasuk perkecambahan benih, diferensiasi vaskular, pengembangan tunas lateral, inisiasi akar
sekunder, respon akar dan tunas terhadap gravitasi, dan bunga dan perkembangan buah.
Sejumlah besar senyawa sintetis menunjukkan aktivitas auksin, namun asam indo-3-
asetat (IAA) dianggap satu-satunya kelainan alami. Pada sebagian besar tanaman, IAA disintesis
dari triptofan asam amino walaupun studi mutan yang memerlukan triptofan telah menetapkan
bahwa di beberapa tanaman, seperti Arabidopsis, IAA disintesis melalui jalur triptofan-
independen. IAA dapat disimpan sebagai konjugat kimia seperti glycosyl ester, yang akan
melepaskan IAA aktif pada hidrolisis enzimatik. Ester glikosil merupakan sumber penting IAA
selama perkecambahan biji. Setelah IAA telah mencapai tujuannya, ia dapat dihilangkan dengan
peroksidasi menjadi produk tidak aktif atau dikonversi menjadi konjugat asam amino. Auxins
dapat diangkut dalam floem atau sel-ke-sel dengan transportasi polar. Kunci untuk transportasi
polar adalah lokasi pengangkut efflux pada dinding sel tertentu.
Peran auksin dalam pembesaran sel paling baik digambarkan oleh hipotesis pertumbuhan
asam. Inti dari hipotesis ini adalah aktivitas expansins; enzim yang melemahkan hubungan silang
antara molekul selulosa, meningkatkan ekstensibilitas dinding, dan memungkinkan perluasan sel
yang diinduksi turgor. Auxin juga bertindak untuk menurunkan derek gen dengan menargetkan
protein represor untuk degradasi oleh jalur proteasom 26S, sebuah proses yang menyebabkan
respons perkembangan yang disebabkan oleh auksin.

BAB REVIEW
1. Mengapa perlu agar hormon cepat berbalik? Jelaskan bagaimana ukuran kolam hormon aktif
diatur untuk auksin.
Jawab:
2. Beberapa biji tampaknya menumpuk konjugat auksin. Dapatkah Anda menyarankan
keuntungan fisiologis untuk ini?
Jawab:
3. Tinjau sintesis IAA dari triptofan. Apakah semua tanaman mensintesis IAA dari triptofan?
Apa bukti jalur alternatif?
Jawab:
4. Kebutuhan auksin dari benih berkecambah pada awalnya dipenuhi oleh konjugat auxin yang
 tersimpan. Apakah semua hormon-mengkonjugalkan bentuk 'penyimpanan' hormon?
Jawab:
5. Jelaskan jalur pensinyalan auksin untuk pembesaran sel.
Jawab:
6. Jelaskan jalur pemberian tanda auksin untuk mengendalikan ekspresi gen.
Jawab:
7. Transportasi Auxin secara unik bersifat polar. Bagaimana transportasi terarah ini bisa dicapai?
Jawab: