See discussions, stats, and author profiles for this publication at: https://www.researchgate.

net/publication/322306917

UJI TOKSISITAS AKUT EKSTRAK ETANOL SIRIH MERAH (Piper crocatum Luiz
and Pav) PADA MENCIT SWISS WEBSTER

Conference Paper · January 2015

CITATIONS READS

0 4,788

4 authors, including:

Puspa Sari Dewi

Universitas Jenderal Achmad Yani
13 PUBLICATIONS   0 CITATIONS   

SEE PROFILE

Some of the authors of this publication are also working on these related projects:

Uji Aktivitas Antimalaria Ekstrak Etanol Herba Ketumpang (Tridax procumbens L) pada Plasmodium falciparum Galur 3D7 View project

All content following this page was uploaded by Puspa Sari Dewi on 08 January 2018.

The user has requested enhancement of the downloaded file.

 UJI TOKSISITAS AKUT EKSTRAK ETANOL SIRIH MERAH
(Piper crocatum Luiz and Pav) PADA MENCIT SWISS WEBSTER

Puspa Sari Dewi*, Ita Nur Anisa, Suryani, Suci Ayuza

Program Studi Farmasi, Fakultas Farmasi, Universitas Jenderal Achmad Yani
*s4rid3wi.puspa@gmail.com

Abstrak— Tanaman sirih merah merupakan tanaman obat sekaligus berperanan sebagai tanaman hias. Penelitian
tentang sirih merah menunjukkan bahwa tanaman ini memiliki efek antidiabetes, antidislipidemia, antituberkulosis
dan hepatoprotektor. Beragamnya khasiat yang dimiliki menjadi dasar dilakukannya pengujian toksisitas akut ekstrak
etanol sirih merah untuk mengetahui tingkat keamanannya pada pemberian kurang dari 24 jam. Pengujian toksisitas
akut ekstrak etanol sirih merah dilakukan terhadap mencit Swiss Webster jantan dan betina. Hewan uji
dikelompokkan menjadi 6 kelompok perlakuan, yang terdiri dari 1 kelompok kontrol dan 5 kelompok uji. Dosis yang
digunakan merujuk pada OECD (Organization of Economic Cooperation and Development) 420 yaitu 5, 50, 300,
2000 dan 5000 mg/kg bb. Pengamatan yang dilakukan meliputi pengamatan perilaku hewan uji terhadap gejala toksik
selama 4 jam setelah pemberian sediaan uji, kemudian setelah 24 jam diamati dan dihitung jumlah hewan uji yang
mati disetiap kelompoknya, penimbangan bobot badan hewan uji selama 14 hari. Pada hari ke- 15 hewan uji yang
masih hidup dikorbankan dan dibedah, kemudian dilakukan penimbangan bobot organ, yang terdiri dari organ
jantung, paru–paru, hati, ginjal, adrenal, limfa, lambung dan organ reproduksi testis, vesika seminalis (jantan) dan
uterus, ovarium (betina). Hasil penelitian menunjukkan bahwa ekstrak etanol sirih merah tidak menyebabkan gejala
toksik terhadap mencit percobaan. Meskipun terdapat kematian mencit betina pada dosis 5000 mg/kg bb dan dosis
300 mg/kg bb serta dosis 5000 mg/kg bb pada mencit jantan, tetapi persentase kematian mencit tidak mencapai 50%
sehingga kesimpulannya adalah ekstrak etanol sirih merah aman digunakan sampai dosis 5000 mg/kg bb pada
penelitian ini.

Kata kunci : ekstrak etanol, sirih merah, toksisitas akut, OECD

kombinasi ekstrak etanol daun mimba 100 mg/kg BB

I. PENDAHULUAN
Indonesia merupakan negara yang kaya akan
keanekaragaman hayatinya. Beragam tanaman tumbuh
subur di tanah air ini. Beberapa diantaranya telah
digunakan masyarakat sebagai obat tradisional. Salah
satunya adalah tanaman sirih merah. Secara empiris,
tanaman sirih merah telah digunakan untuk mengobati
diabetes, asam urat, menurunkan kadar kolesterol,
mencegah strouke, radang prostat, maag, kelelahan dan
nyeri sendi.
Berbagai penelitian yang menggunakan tanaman sirih
merah telah banyak dilakukan. Penelitian yang
dilakukan oleh Florencia Irena (2012) menyebutkan
bahwa hasil rebusan daun sirih merah dosis 13 mg/hari
dapat menurunkan kadar gula darah dengan efek segera.
Penelitian lain menyebutkan hasil bahwa pemberian
dan daun sirih merah 105 mg/kg BB memberikan efek
yang sinergis sebesar 44,63% dalam menurunkan kadar
gula darah (Sarnilla, 2012). Penelitian yang dilakukan
oleh Puspa Sari dan Ita Nur Anisa (2013) menunjukkan
bahwa ekstrak etanol sirih merah memiliki efek
antidislipidemia dibandingkan dengan kelompok
kontrol. Kelompok terbaik yang mampu menekan
peningkatan kadar kolesterol, trigliserida, LDL-
kolesterol dan meningkatkan kadar HDL-kolesterol
adalah ekstrak etanol sirih merah dosis 200 mg/kg bb.
Penelitian Hafida Mariyatin (2012) menyebutkan
bahwa ekstrak etanol daun sirih merah dan daun sirih
hijau memiliki efek antibakteri terhadap S. viridans.
Beragamnya khasiat yang dimiliki oleh tanaman sirih
merah mendorong peneliti untuk menguji keamanan
tanaman tersebut. Oleh karena itu, pada penelitian ini
telah dilakukan pengujian toksisitas akut ekstrak etanol
sirih merah untuk melihat keamanan ekstrak tanaman
sirih merah yang dipaparkan terhadap mencit percobaan
kurang dari 24 jam.
II. METODE
Penelitian uji toksisitas akut ekstrak etanol sirih
merah meliputi tahap-tahap pengumpulan bahan uji,
determinasi bahan uji dan penyiapan simplisia,
pembuatan ekstrak etanol sirih merah dan uji toksisitas
akut ekstrak etanol daun sirih merah.
Penyiapan simplisia meliputi pengambilan bahan,
determinasi tumbuhan dan pengolahan menjadi
simplisia. Pembuatan ekstrak etanol sirih merah
dilakukan dengan menggunakan seperangkat alat
Soxhlet menggunakan etanol 70%, dan diuapkan
menggunakan penguap putar (rotavapor), selanjutnya
diuapkan di atas penangas air sampai diperoleh ekstrak
kental.
Pengujian toksisitas akut ekstrak etanol sirih merah
dilakukan terhadap mencit Swiss Webster jantan dan
betina. Dilakukan pengelompokaan hewan uji menjadi 6
kelompok perlakuan, yang terdiri dari 1 kelompok
kontrol dan 5 kelompok uji. Masing–masing kelompok
terdiri dari 7 ekor mencit jantan dan 7 ekor mencit
betina. Dosis yang diberikan terhadap hewan uji
merupakan dosis tunggal yang diberikan secara peroral.
Dosis yang digunakan merujuk pada OECD
(Organization of Economic Cooperation and
Development) 420 yaitu 5, 50, 300, 2000 dan 5000
mg/Kg BB. Pengamatan yang dilakukan meliputi
pengamatan perilaku hewan uji terhadap gejala toksik
selama 4 jam setelah pemberian sediaan uji, kemudian
setelah 24 jam diamati dan dihitung jumlah hewan uji
yang mati disetiap kelompoknya, penimbangan bobot
badan hewan uji selama 14 hari kemudian pada hari ke-
15 hewan uji yang masih hidup dikorbankan dan
dibedah, kemudian dilakukan penimbangan bobot organ,
yang terdiri dari organ jantung, paru–paru, hati, ginjal,
adrenal, limfa, lambung dan organ reproduksi testis,
vesika seminalis (jantan) dan uterus, ovarium (betina).
III. HASIL DAN DISKUSI
Sirih merah diperoleh dari daerah Cimahi, Jawa
Barat. Determinasi tanaman sirih merah dilakukan di
Herbarium Bogoriense. Hasil determinasi menunjukkan
bahwa tanaman yang digunakan adalah sirih merah.
Pemeriksaan organoleptik simplisia daun sirih merah
meliputi pemeriksaan bentuk, warna, bau dan rasa.
Batang tanaman sirih merah berbentuk bulat, berwarna
hijau keunguan. Permukaanya kasar dan bila terkena
cahaya batangnya cepat mengering. Batang tanaman
berbuku-buku dan disetiap buku tumbuh bakal akar.
Daun sirih merah bertangkai berbentuk jantung dengan
bagian atas meruncing, bertepi rata, dan permukaannya
mengilap serta tidak berbulu. Warna daun bagian atas
hijau bercorak warna putih keabu-abuan. Bagian bawah
daun berwarna merah hati cerah. Daunnya berlendir dan
berasa sangat pahit.
Pengujian keamanan penggunaan ekstrak etanol sirih
merah dianalisa melalui pengujian toksisitas akut yang
dilakukan pada mencit jantan dan betina Swiss Webster.
Uji toksisitas akut adalah pengujian untuk mendeteksi
efek toksik yang muncul dalam waktu singkat setelah
pemberian zat uji secara oral (dosis tunggal), atau
pemberian dosis berulang dalam waktu 24 jam. Prinsip
uji toksisitas akut adalah zat uji dalam beberapa tingkat
dosis diberikan pada beberapa kelompok hewan uji, satu
dosis per kelompok. Diamati gejala-gejala toksik, jumlah
kematian dalam interval waktu tertentu. Hewan yang
mati selama percobaan dan yang hidup sampai akhir
percobaan dibedah untuk dievaluasi. Tujuan uji
toksisitas akut adalah untuk mendeteksi toksisitas
intrinsik suatu zat, menemukan organ sasaran dan
kepekaan spesies, memperoleh informasi bahaya setelah
pemaparan suatu senyawa secara akut dan memperoleh
informasi awal yang dapat digunakan menetapkan
tingkat dosis dan merancang uji toksisitas selanjutnya
serta dapat digunakan untuk menetapkan harga LD50.
Hewan uji yang digunakan adalah mencit jantan dan
betina Swiss Webster berumur 5-6 minggu. Penggunaan
kedua jenis kelamin hewan uji dilakukan karena menurut
panduan OECD, terdapat perbedaan sensitivitas antara
hewan jantan dengan betina, yaitu betina lebih sensitif
karena dipengaruhi oleh faktor hormonal.
Pengamatan klinis terhadap tanda-tanda toksik
dilakukan secara berkala yaitu pada menit ke-30, 60, 120
dan 240 setelah pemberian sediaan uji. Pengamatan
dilakukan untuk mengamati fungsi sistem organ yang
mungkin dipengaruhi oleh zat uji. Berdasarkan hasil
pengamatan dapat diketahui bahwa terjadi penurunan
aktivitas motorik mencit baik itu pada mencit jantan
maupun mencit betina yang berbanding terbalik dengan
peningkatan dosis uji yang diberikan. Reflek pineal juga
menurun pada mencit yang mendapatkan ekstrak etanol
sirih merah dosis 2000 mg/kg bb dan 5000 mg/kg bb.
Pada menit ke-240 hanya 42,9% mencit betina yang
masih memberikan reflek pineal setelah pemberian
sediaan uji dosis 5000 mg/kg bb. Sedangkan pada
mencit jantan jumlah mencit yang memberikan respon
reflek pineal pada menit ke-240 hanya 14,3%.
Fenomena grooming juga teramati pada mencit uji.
Grooming adalah reaksi umum mencit bila mengalami
alergi terhadap benda asing dan penurunan persentase
reaksi tersebut menunjukkan bahwa mencit mampu
segera menyesuaikan diri. Tingginya fenomena ini
diperkirakan karena rasa ekstrak etanol sirih merah
sangat pahit sehingga tidak nyaman di mulut mencit.
Kemampuan mencit jantan untuk gelantung ataupun
retablishment juga teramati menurun setelah mencit
diberi sediaan uji 5000 mg/kg bb mulai menit ke-30
sampai 240. Hal yang sama teramati pada mencit betina.
Mencit juga teramati mengeluarkan urin yang pekat serta
defekasi dengan konsistensi keras lembek. Hal ini
menunjukkan bahwa kemungkinan ekstrak etanol sirih
merah memiliki efek antidiare dan kemungkinan
berpotensi untuk meningkatkan pengeluaran urin.
Parameter selanjutnya adalah pengamatan bobot
badan. Pemeriksaan bobot badan pada uji toksisitas akut
dilakukan karena merupakan indikator yang paling
sensitif terhadap kondisi hewan uji. Penurunan berat
badan yang drastis dan memiliki perbedaan bermakna
bila dibandingkan dengan kontrol biasanya merupakan
pertanda kesehatan yang buruk. Keadaan ini dapat
disebabkan oleh adanya tanda toksik spesifik, penyakit
atau kurangnya asupan makanan dan minuman.
Berdasarkan data yang diperoleh, hasil pengamatan
menunjukkan bahwa bobot badan rata-rata mencit betina
cenderung konstan. Kalaupun terjadi peningkatan bobot
badan, perubahannya tidak menunjukkan perbedaan
yang berarti. Penurunan bobot badan teramati terjadi
pada mencit betina hari ke-7 yang mendapatkan ekstrak
etanol sirih merah dosis 5 mg/kg bb. Perubahan bobot
badan mencit betina dapat diamati pada Gambar 1.

Gambar 1. Diagram rata-rata bobot badan mencit betina selama pengamatan gejala toksik

Keterangan :
Kontrol : Kelompok mencit betina yang mendapat suspensi CMC Na 0,5%
D1 : Kelompok mencit betina yang mendapat ekstrak etanol sirih merah 5 mg/kg bb
D2 : Kelompok mencit betina yang mendapat ekstrak etanol sirih merah 50 mg/kg bb
D3 : Kelompok mencit betina yang mendapat ekstrak etanol sirih merah 300 mg/kg bb
D4 : Kelompok mencit betina yang mendapat ekstrak etanol sirih merah 2000 mg/kg bb
D5 : Kelompok mencit betina yang mendapat ekstrak etanol sirih merah 5000 mg/kg bb
Sedangkan pada mencit jantan, bobot badan mencit
mengalami perubahan yang fluktuatif. Pada awal-awal
pengujian, bobot badan mencit jantan mengalami
peningkatan, namun selanjutnya turun kembali pada
hari ke-7 dan hari ke-12. Penurunan bobot badan ini
menunjukkan efek bahwa kemungkinan ekstrak etanol
sirih merah mampu menyetabilkan bobot badan atau
mungkin mampu menurunkan bobot badan sehingga
tanaman sirih merah juga berpotensi untuk mencegah
obesitas.
Perubahan bobot badan mencit jantan dapat diamati
pada Gambar 2.

Gambar 2. Diagram rata-rata bobot badan mencit jantan selama pengamatan gejala toksik

Keterangan :
Kontrol : Kelompok mencit jantan yang mendapat suspensi CMC Na 0,5%
D1 : Kelompok mencit jantan yang mendapat ekstrak etanol sirih merah 5 mg/kg bb
D2 : Kelompok mencit jantan yang mendapat ekstrak etanol sirih merah 50 mg/kg bb
D3 : Kelompok mencit jantan yang mendapat ekstrak etanol sirih merah 300 mg/kg bb
D4 : Kelompok mencit jantan yang mendapat ekstrak etanol sirih merah 2000 mg/kg bb
D5 : Kelompok mencit jantan yang mendapat ekstrak etanol sirih merah 5000 mg/kg bb

Pada akhir penelitian dilakukan pembedahan dan
penimbangan organ hewan untuk mengetahui adanya
pengaruh pemberian ekstrak etanol sirih merah terhadap
organ. Secara visual seluruh organ yang diamati tampak
normal dan seragam, kecuali ada beberapa organ yang
terlihat lebih besar atau kecil jika dibandingkan dengan
kontrol. Berdasarkan hasil analisis statistik, pada mencit
betina diketahui bahwa terdapat perbedaan yang
bermakna pada organ hati yang mendapatkan ekstrak
etanol sirih merah dosis 50 mg/kg bb dan dosis 2000
mg/kg bb dibandingkan dengan kelompok kontrol
(p<0,05). Sedangkan pada mencit jantan, terjadi
perbedaan yang bermakna pada organ vesika seminalis
dibandingkan dengan kelompok kontrol pada kelompok
mencit yang mendapatkan ekstrak etanol sirih merah
dosis 50 mg/kg bb dan 5000 mg/kg bb. Perlu pengujian
lebih lanjut untuk melihat apakah ekstrak etanol sirih
merah mempengaruhi sistem reproduksi hewan jantan
atau tidak. Profil indeks organ dalam mencit betina dan
jantan setelah pemberian sediaan suspensi ekstrak etanol
sirih merah secara oral dapat dilihat pada tabel 1 dan 2.
Parameter pengamatan selanjutnya adalah
persentase kematian kumulatif yang terjadi selama
pengamatan. Pada hari ke-3 terdapat kematian mencit
betina sebanyak 3 ekor pada kelompok mencit yang
mendapat ekstrak etanol dosis 5000 mg/kg bb.
Persentase kematian kumulatif terhitung sejumlah
42,86%. Sedangkan pada mencit jantan, kematian
hewan percobaan teramati pada kelompok mencit jantan
yang mendapatkan ekstrak etanol sirih merah dosis 300
mg/kg bb (14,29%) dan dosis 2000 mg/kg bb (28,57%).
Meskipun terdapat kematian, tetapi persentase
 kematiannya tidak mencapai 50% sehingga ekstrak aman digunakan sampai dosis 5000 mg/kg bb pada
etanol sirih merah memiliki LD50 > 5000 mg/kg bb dan penelitian ini.

Tabel 1 Profil Indeks Organ Dalam Mencit Betina Setelah Pemberian Sediaan Suspensi Ekstrak Etanol Sirih Merah Secara Oral
Kelompok Jantung Paru Hati Ginjal Limpa Adrenal Ovarium Uterus
0,402 ± 0,622 ± 6,338 ± 0,995 ± 0,747 ± 0,020 ± 0,058 ± 0,219 ±
Kontrol
0,046 0,113 0,952 0,162 0,205 0,011 0,025 0,264
Sirih Merah 0,360 ± 0,707 ± 5,481 ± 0,906 ± 0,664 ± 0,023 ± 0,043 ± 0,109 ±
5 mg/kg bb 0,053 0,335 0,960 0,128 0,162 0,016 0,012 0,057
Sirih Merah 0,369 ± 0,658 ± (5,064 ± 0,905 ± 0,632 ± 0,018 ± 0,041 ± 0,127 ±
50 mg/kg bb 0,033 0,392 0,506)* 0,110 0,328 0,008 0,016 0,083
Sirih Merah 0,388 ± 0,584 ± 5,490 ± 0,997 ± 0,694 ± 0,019 ± 0,046 ± 0,178 ±
300 mg/kg bb 0,035 0,120 0,874 0,151 0,255 0,007 0,017 0,116
Sirih Merah 0,378 ± 0,624 ± (4,849 ± 0,893 ± 0,596 ± 0,023 ± 0,064 ± 0,169 ±
2000 mg/kg bb 0,040 0,166 0,605)* 0,123 0,298 0,010 0,060 0,069
Sirih Merah 0,404 ± 0,644 ± 6,167 ± 0,961 ± 0,640 ± 0,020 ± 0,058 ± 0,185 ±
5000 mg/kg bb 0,026 0,093 0,385 0,039 0,128 0,006 0,025 0,074
Keterangan :
(...........)* : Berbeda bermakna dibandingkan kelompok kontrol pada p < 0,05

Tabel 2. Profil Indeks Organ Dalam Mencit Jantan Setelah Pemberian Sediaan Suspensi Ekstrak Etanol Sirih Merah Secara Oral
Kelompok Jantung Paru Hati Ginjal Limpa Adrenal Testis Vesika
0,357 ± 0,514 ± 5,588 ± 1,138 ± 0,700 ± 0,009 ± 0,471 ± 0,196 ±
Kontrol
0,065 0,084 0,404 0,129 0,164 0,004 0,124 0,057
Sirih Merah 0,387 ± 0,587 ± 5,810 ± 1,149 ± 0,822 ± 0,009 ± 0,454 ± 0,187 ±
5 mg/kg bb 0,057 0,104 0,644 0,157 0,252 0,002 0,070 0,057
Sirih Merah 0,387 ± 0,558 ± 5,585 ± 1,246 ± 0,632 ± 0,011 ± 0,456 ± (0,264 ±
50 mg/kg bb 0,024 0,093 0,687 0,179 0,073 0,005 0,056 0,050)*
Sirih Merah 0,370 ± 0,556 ± 5,297 ± 1,153 ± 0,713 ± 0,009 ± 0,449 ± 0,568 ±
300 mg/kg bb 0,081 0,195 0,583 0,156 0,099 0,005 0,107 0,755
Sirih Merah 0,379 ± 0,562 ± 5,439 ± 2,355 ± 0,692 ± 0,010 ± 0,486 ± 0,236 ±
2000 mg/kg bb 0,032 0,076 0,551 3,219 0,112 0,004 0,057 0,096
Sirih Merah 0,394 ± 0,583 ± 6,109 ± 1,296 ± 0,680 ± 0,009 ± 0,401 ± (0,352 ±
5000 mg/kg bb 0,055 0,174 1,423 0,207 0,256 0,004 0,061 0,165)*

Keterangan :
(...........)* : Berbeda bermakna dibandingkan kelompok kontrol pada p < 0,05

IV. Kesimpulan
DAFTAR PUSTAKA
Hasil penelitian uji toksisitas akut menunjukan
bahwa ekstrak etanol sirih merah sampai dosis 5000 1. Departemen Kesehatan Republik Indonesia, 1985,
mg/Kg bb tidak menimbulkan efek toksik dan aman Cara pembuatan simplisia, Depkes RI, Jakarta, 4-
untuk digunakan. 20.
2. Direktorat Jendral Pengawasan Obat dan Makanan,
2003, Prosedur Operasional Baku Uji Toksisitas,
Ucapan Terimakasih
Depkes RI, Jakarta.
Ucapan terimakasih disampaikan kepada LPPM 3. Ditjen POM, Direktorat Pengawasan Obat
UNJANI yang telah mendanai penelitian ini Tradisional, Depkes RI, 2000, Parameter Standar
 Umum Ekstrak Tanaman Obat, Bakti Husada,
Jakarta, 9-12, 13-18.
4. Florencia Irena, 2012, Pengaruh Rebusan Daun
Sirih Merah (Piper crocatum Ruiz & Pav.)
terhadap Penurunan Kadar Glukosa Darah dan
Histopatologi Mencit Diabetes, Abstrak, Fakultas
Farmasi UP, Jakarta
5. Hafida Mariyatin, Ekiyantini Widyowati, Sri
Lestari. 2012. Efektivitas Antibakteri Ekstrak
Daun Sirih Merah (Piper crocatum) dan Sirih
Hijau (Piper betle L)sebagai Bahan Alternatif
Irigasi Saluran Akar. FKG UNEJ.
http//repository.unej.ac.id
6. Organization of Economic Cooperation and
Development (OECD) 423. OECD Guideline for
Testing of Chemicals: Acute Oral Toxicity – Acute
Toxic Class Method.
http://www.oecd.org/chemicalsafety/risk-
assessment/ 1948370.pdf. Diakses tanggal: 17 Juli
2014.
7. Puspa Sari, Ita Nur Anisa. 2013. Efek
Antidislipidemia Ekstrak Etanol Sirih Merah (Piper
Crocatum Ruiz Dan Pav ) Pada Tikus Wistar
View publication stats
Jantan Dengan Metode Proteksi. Laporan
Penelitian Unggulan LPPM Unjani
8. Sarnila, Aktivitas Antidiabetes Kombinasi Ekstrak
Etanol Daun Mimba (Azadirachta indica Adr. Juss)
dan Daun Sirih Merah (Piper crocatum Ruiz&Pav.)
pada Tikus Putih Jantan dengan Metode Toleransi
Glukosa, Abstrak, Universitas Padjadjaran
9. Sudewo, Bambang. 2010, Basmi Penyakit Dengan
Sirih Merah, Jakarta, Agromedia Pustaka.
10. Wilson Nelson, Hardistry Jerry F, Hayes Johnnie R.
Short-term, Subchronic and Chronic Toxicology
Studies. Dalam: Taylor dan Francis, penyunting.
Principles and Methods of Toxicology, Edisi ke-4.
Philadelphia: Lippincot Williams and Wilkins,
2001. Hlm. 917-956.