RINGKASAN / RESUME HASIL STUDI

Parameter : Emetic toxin (cereulide)

Matriks : Makanan
Acuan/Referensi :
1. ISO 18465:2017 Microbiology of the food chain—Quantitative
determination of emetic toxin (cereulide) using LC-MS/MS

Hari, Tanggal : Selasa, 14 Mei 2019

Latar Belakang : Studi ini dilakukan terkait permintaan BPOM perihal pengujian
cereulide dalam matriks makanan.
Penyusun : 1. Muhammad Ashari Yusuf _ [MAY]

Hasil Studi

Prinsip
Cereulide diekstraksi dari matriks makanan dengan mengocok sampel dengan acetonitrile. 13C6-
Cereulide digunakan sebagai standar internal. Senyawa dalam larutan dipisahkan dengan
menggunakan sistem HPLC atau UHPLC dan kemudian dideteksi menggunakan mass
spectrometry (LC-MS/MS). Metode MS menggunakan teknik ionisasi elctro spray ionization
(ESI) dengan mode positif. Kadar cereulide diekspresikan sebagai µg cereulide/kg produk.

Pereaksi
1. Aquabidest_7732-18-5
2. Acetonitrile_75-05-8
3. Methanol_67-56-1
4. Formic acid_64-18-6
5. Ammonium formate_
6. Aquabidest_7732-18-5

Standard
1. 13C6-Cereulide sintetik_
2. Cereulide sintetik_

Bahan Habis Pakai

Alat
1. Neraca analitik
2. Mikropipet
3. Labu takar 10 mL dan 100 mL (amber) serta 1 L
4. Tabung Falcon 50 mL
5. Vorteks
6. Sentrifus

Instrumen
1. LC-MS/MS

PROSEDUR PENGUJIAN

Preparasi Pereaksi

Preparasi Standard

Peparasi Sampel
Simpan sampel sebelum dan saat pengujian di dalam freezer untuk mencegah pertumbuhan
mikroba.
Homogenasi Sampel
1. Pindahkan 100±25 g sampel yang mewakili ke dalam wadah sampel;

Kondisi Instrumen
Kondisi HPLC
Kolom : Agilent Poroshell 120 EC-C18
(150 mm x 2.1 mm, 2.7 µm)
Guard column : Agilent Poroshell 120 EC-C18 UHPLC Guard,
(2.1 mm x 5 mm, 2.7 µm)
Fase gerak : A) 0.1% formic acid dalam air
B) 0.1% formic acid dalam ACN
Flow rate : 0.3 mL/menit
Suhu kolom : 40 °C
Suhu autosampler : 4 °C
V. Injeksi : 3 µL
Needle wash : ACN:MeOH:IPA:H2O dengan 0.2% Formic acid
(1:1:1:1)
Gradien :
 Waktu
%A %B
(Menit)
0 90 10
0.5 90 10
8.0 0 100
Stop time : 12 menit
Posttime : 3 menit

Transfer Method  UPLC

Kolom : Waters ACQUITY UPLC BEH C18
(50 mm x 2.1 mm, 1.7 µm)
Guard column : Waters ACQUITY UPLC BEH C18 VanGuard Pre-column
(5 mm x 2.1 mm, 1.7 µm)
Fase gerak : A) 0.1% formic acid dalam air
B) 0.1% formic acid dalam ACN
Flow rate : 0.4 mL/menit
Suhu kolom : 40 °C
Suhu autosampler : 4 °C
V. Injeksi : 1 µL
Needle wash : ACN:MeOH:IPA:H2O dengan 0.2% (1:1:1:1)
Gradien :
Waktu
%A %B
(Menit)
0.00 90 10
0.13 90 10
2.00 0 100
Stop time : 3 menit

Kondisi MS
Suhu gas : 120 °C
Gas flow : 14 L/menit
Nebulizer : 40 psi
Sheath gas heater : 400 °C
Sheath gas flow : 12 L/menit
Capillary : 3000 V
Funnel parameters :
Positi
f Negatif
High-pressure
RF 90 V 90 V
Low-pressure RF 70 V 60 V