FOTOSINTESIS DAN PIGMEN FOTOSINTETIK

DINDA ZAHRA SASKIA

(1710423024)
KELOMPOK 4B
ABSTRAK
Praktikum Fotosintesis dan Pigmen Fotosintetik ini dilakukan dengan bahan daun
Rhodomyrthus tomenthosa dan Hydrilla verticillata yang dilaksanakan pada hari Selasa, 2
November 2018 di Laboratorium Pendidikan IV Jurusan Biologi, Fakultas Matematika dan
Ilmu Pengetahuan Alam, Universitas Andalas, Padang.. Hasil dari praktikum ini yaitu, pada
percobaan Efek Panjang Gelombang Terhadap Efektifitas Fotosintesis Hydrilla verticilata
yaitu bernilai 0 atau tidak terjadi aktivitas, percobaan Penentuan Kadar Klorofil dengan
Spektrofotometer yaitu klorofil a sebesar 0,73372 mg/l, dan klorofil b sebesar 0,26026 mg/l.
Klorofil totalnya adalah 0,26026mg/l. Pada percobaan Pemisahan Pigmen Fotosintesis
Metode Kromatografi Kertas didapatkan hasil pigmen β-karoten memiliki nilai RF paling
tinggi yakni 1,008 dan terendah adalah pigmen klorofil b dengan nilai 0,20.
Kata kunci : fotosintesis, pigmen fotosintetik, klorofil, sentrifuge, kromatorafi kertas,
spektrofotometer.

PENDAHULUAN
Fotosintesis adalah proses pembentukan Menurut Moore (1998), fotosintesis
zat makanan (glukosa) pada tumbuhan merupakan proses yang dilakukan oleh
yang menggunakan zat hara, air dan organisme autotrof, dengan menggunakan
karbon dioksida dengan bantuan sinar energi dari cahaya matahari yang diserap
matahari. Fotosintesis sangat penting bagi oleh klorofil untuk membuat bahan
kehidupan. Selain menghasilkan zat makanan dari molekul sederhana menjadi
makanan pada tumbuhan, proses ini juga molkul yang lebih kompleks. Reaksi
menghasilkan oksigen yang dibutuhkan Fotosintesis: 6CO2 + 6H2O C6H12O6 +
bagi pernapasan manusia. Proses 6O2 Dari reaksi tersebut, maka bahan
fotosintesis terjadi pada daun tumbuhan yang digunakan untuk melakukan
dan tidak berlangsung pada semua sel fotosintesis yaitu karbondioksida dan air
tetapi hanya pada sel yang mengandung yang kemudian diubah menjadi
pigmen fotosintetik. Disamping itu karbohidrat dan oksigen dengan bantuan
fotosintesis juga dipengaruhi oleh foton yang diserap oleh klorofil. Jadi
kemampuan daun menyerap spektrum fotosintesis merupakan suatu proses
cahaya, perbedaan ini disebabkan oleh pembentukan atau penyusunan senyawa
adanya perbedaan pigmen pada jaringan kompleks dari senyawa sederhana.
daun (Kimball, 2000).
Klorofil merupakan pigmen hijau hanya pada periode pendek. Klorofil bias
tumbuhan dan merupakan pigmen yang kehilangan energy atau panas yang hilang
penting dalam proses fotosintesis. dan flouresen. Flouresensi klorofil hanya
Sekarang ini klorofil dapat dibedakan menghasilkan sinar merah dan panjang
dalam sembilan tipe yaitu klorofil a,b,c,d,e, gelombang yang mudah dilihat ketika
bakteriklorofil a dan b dan klorofil konsentrasi larutan yang cukup dari
klorobium 650 dan 660. Klorofil a biasanya klorofil a dan klorofil b atau campuran
pada sinar hijau biru, sementara klorofil b pigmen kloroplas baik khususnya
adalah kuning hijau. Klorofil lain (c,d,e) ultraviolet atau radiasi biru (Sallisbury dan
ditemukan hanya pada alga dan Ross,1995)
dikombinasikan dengan klorofil a. bakteri Menurut Campbell, Reece, dan
klorofil a dan b dan klorobium ditemukan Mitchell (2002), fotosintesis dipengaruhi
pada bakteri fotosintesis (Devlin,1975). oleh banyak faktor, baik faktor dari dalam
Suatu tumbuhan melakukan proses maupun faktor dari luar. Faktor dalam
fotosintesis untuk kelangsungan hidupnya. antara lain adalah umur daun ; keadaan
Proses fotosintesis berlangsung bila ada stomata, jika stomata menutup, maka laju
cahaya yang cukup serta adanya fotosintesis berkurang; dan jenis
karbodioksida dan air. Fotosintesis hanya tumbuhan. Faktor luar antara lain adalah
terjadi pada tumbuhan yang memiliki CO2, dengan semakin banyak
klorofil.Tumbuhan memiliki sifat fisiologi karbondioksida di udara, makin banyak
yang khusus. Suatu sifat fisiologis yang jumlah bahan yang dapat digunakan
hanya dimiliki oleh tumbuhan, yaitu tumbuhan untuk melangsungkan
kemampuannya untuk menggunakan zat fotosintesis; Ketersediaan air, kekeringan
karbon dari udara untuk diubah menjadi menyebabkan stomata menutup,
bahan organic serta diasimilasikan di menghambat penyerapan karbon dioksida
dalam tubuh tanaman. Peristiwa ini hanya sehingga mengurangi laju fotosintesis;
berlangsung pada cahaya yang cukup, Kelembaban dan suhu udara,
oleh sebab itu asimilasi zat karbon berpengaruh pada enzimenzim yang
merupakan suatu proses fotosintesis. bekerja dalam proses fotosintesis. Sebab
Fotosintesis atau asimilasi zat karbon enzim tersebut hanya dapat bekerja pada
merupakan suatu proses zat – zat organic suhu optimalnya. Umumnya laju
H2O dan CO2 oleh klorofil diubah menjadi fotosintensis meningkat seiring dengan
zat organic karbohidrat dengan bantuan meningkatnya suhu hingga batas toleransi
sinar matahari (Darmawan,1983). enzim; Keadaan cahaya, keadaan cahaya
Pigmen yang terdapat pada pigmen yang dimaksud yaitu intensitas
tilakoid terdiri dari dua bagian besar (banyaknya cahaya matahari yang
klorofil hijau yaitu klorofil a dan klorofil b, diterima) dan kualitas cahaya (panjang
gelombang cahaya yang efektif). Adapun C. Cara Kerja
tujuan dari praktikum ini adalah untuk Percobaan A. Pengaruh panjang
melihat pengaruh panjang gelombang gelombang pada Fotosintesis Hydrilla
(kertas berwarna) terhadap aktifitas verticillata.
fotosintesis, mempelajari dan memberikan Hydrilla verticillata dimasukkan ke dalam
latihan cara penggunaan tabung sebanyak satu tangkai dengan
spektrofotometer, penentuan kadar klorofil pucuk kea rah bawah tabung. Tabung diisi
daun, dan untuk melihat komponen dengan 0,5% NaHCO3 sampai penuh, lalu
pigmen fotosintetik yang ada pada daun letakkan terbalik di dalam botol
serta membandingkan ukuran molekul sedemikian rupa, sehingga tak terbentuk
komponen berdasarkan pergerakannya ruang udara. Botol dibungkus dengan
selama proses kromatografi berlangsung. plastic berwarna dan diletakkan pada
METODA PRAKTIKUM sinar matahari selama 2-3 jam.Dinding
Waktu dan Tempat tabung dipukul-pukul agar gelembung
Praktikum ini dilakukan pada hari Selasa, terlepas dari tanaman, berdirikan tabung
13 Oktober 2015, pukul 14.00-18.00 WIB lalu ruang udara yang terbentuk ditandai
di Laboratorium Teaching IV Jurusan dengan spidol.Isi tabung dikeluarkan, lalu
Biologi, Fakultas Matematika dan Ilmu dikeringkan dan diisi air dengan
Pengetahuan Alam, Universitas Andalas, menggunakan pipet tetes sampai batas
Padang. yang telah ditandai.Setelah itu volume air
Alat dan Bahan yang ada diukur dengan gelas ukur.
Adapun alat yang digunakan pada Volume air ini sama dengan volume
praktikum ini adalah timbangan, oven, oksigen yang terbentuk selama
kertas saring, tabung reaksi, gelas beker, fotosintesis. Bandingkan pengaruh warna
spidol, pipet, gelas ukur 5ml, plastik terhadap reaksi ini.
transparan warna (merah, hijau, biru, Percobaan B. Penentuan Kadar Klorofil
kuning, dan bening), spektronic 20 bausch dengan Spektrofotometer
and lomb, lumpang porselin, sentrifuge, Ditimbang daun segar sebanyak 0,5 g.
gelas ukur 100ml, kuvet, aluminium foil, daun kemudian dirajang kecil lalu
tabung sentrifuge, botol, seperangkat alat diekstrak dengan aseton 80% sebanyak
kromatografi, pisau, dan koin. Sedangkan 50 ml dengan menggerus dalam lumping.
bahan yang digunakan adalah daun Penggunaan aseton sedikit demi sedikit
Rhodomyrthus tomenthosa dan Hydrilla agar jaringan habis menguap karena zat
verticillata ini mudah menguap.Penggerusan
dilkakukan sampai seluruh klorofil larut
dalam aseton 80% dengan ciri ampas
telah menjadi putih. Ekstrak disaring
dengan saringan Buchner dan menggunakan kuvet, diukur optical density
dimasukkan ke gelas ukur 50 ml. (OD) dari ekstrak memakai Spektronik 20
penambahan aseton 80% hanya Bausch and Lomb pada panjang
diperlukan apabila volume ekstrak belum gelombang 645 dan 663 nm. Kandungan
sampai 50 ml setelah diekstrak. Kemudian klorofil dapat dihitung dengan
larutan disentrifuge selama 15 menit membandingkan OD pada panjang
dengan kecepatan 2500 rpm. Dengan gelombang 645 dan 663 nm.
Klorofil total=[20,2(D 645)+8,02( D 663)]x

Klorofil a=[12,7(D 645)+2,69( D 645)]x

Klorofil b=[22,9(D 645)+4,68(D 663)] x

Percobaan C. Pemisahan Pigmen klorofil.Tempatkan kertas saring pada

Fotosintesis Metoda Kromatografi Kertas
Siapkan kertas saring ukuran 2x17 cm
dengan 1 cm dibagian bawah dibuat
meruncing dan ujung atasnya diberi
benang sebagai penggantung di alat
kromatografi dan beri garis batas pelarut
naik maksimal 15 cm dari batas ujung
bawah yang runcing. Gosokkan
permukaan daun ke permukaan kertas
saring dengan menggunakan uang logam
sehingga pigmen warnadaun pindah ke
kertas saring tersebut sebanyak 15 kali
untuk memastikan berpindahnya
Hasil dan Pembahasan
Tabel 1. Pengaruh panjang gelombang pada fotosintesis
No Kertas Warna
1 Kontrol
2 Merah
3 Kuning
4 Biru
5 Hijau
Pada tabel 1. menjelaskan bahwa volume
oksigen tertinggi dihasilkan pada tabung
yang dibungkus dengan plastik transparan
berwarna kuning dan biru yaitu 0.1 dan
tabung yang tidak dibungkus oleh plastik
yaitu 0,005, sedangkan yang paling sedikit
kadar oksigennya adalah pada tabung
yang ditutup oleh plastik transparan warna
merah dan hijau. Hal ini disebabkan
karena cahaya yang paling bagus diserap
oleh klorofil daun adalah warnakuning.
Dari semua radiasi matahari yang
dipancarkan, hanya panjang gelombang
kertas kromatografi yang telah diisi larutan
kromatografi, usahakan agar bagian yang
mengandung pigmen warna dari daung
tidak tenggelam dalam larutan tersebut
dan tutup mulut alat kromatografi dengan
rapat sehingga penguapan larutan tidak
menyebar keluar.Biarkan larutan naik
sampai mencapai batas atas
kertas.Kemudian angkat kertas saring dan
keringanginkan.Amati warna yang
terbentuk setelah kertas saring tersebut
benar-benar kering.
Oksigen yang dihasilkan
0,005
0,05
0,1
0,1
0,05
tertentu yang dimanfaatkan tumbuhan
untuk proses fotosintesis, yaitu panjang
gelombang yang berada pada kisaran
cahaya tampak (380-700 nm). Cahaya
tampak terbagi atas cahaya merah (610 -
700 nm), hijau kuning (510 - 600 nm), biru
(410 - 500 nm) dan violet (< 400
nm).Masing-masing jenis cahaya berbeda
pengaruhnya terhadap fotosintesis.Hal ini
terkait pada sifat pigmen penangkap
cahaya yang bekerja dalam
fotosintesis.Pigmen yang terdapat pada
membran grana menyerap cahaya yang
memiliki panjang gelombang
tertentu.Pigmen yang berbeda menyerap
cahaya pada panjang gelombang yang
berbeda (Dwidjosputro, 1978).
Pada proses fotosintesis jika
semakin banyak CO2 yang dihasilkan
maka akan semakin besar fotosintesisnya,
dimana dilihat dari percobaan yang
memakai kertas transparan, dimana yang
paling banyak menyerap sinar biru dan
merah adalah kertas transparan warna
kuning dan control karena tumbuhan akan
memntulkan warna kuning dan menyerap
warna selain kuning yaitu biru dan merah
yang sangat berguna untuk fotosintesis
(Prawirohartono, 2005).
Kloroplast mengandung beberapa
pigmen.Sebagai contoh, klorofil a
terutama menyerap cahaya biru-violet dan
Tabel 2. Pigmen fotosintetik daun tanaman Swietinia mahagoni
No Pigmen Jarak Tempuh
Pekrut
1 Klorofil a
2 Klorofil b
3 Xantrofil
Pada tabel 2. dapat dilihat bahwa jarak
tempuh pigmen klorofil aDari tabel
didapatkan hasil bahwa perlakuan yang
digunakan adalah daun. Panjang kertas
kromatografi yang digunakan yaitu 16 cm.
Jarak tempuh klorofil hanya sampai pada
klorofil a yaitu 0,75 cm. hal ini diduga
disebabkan oleh karena objek daun yang
merupakan daun ternaungi dan proses
penggoresan dangan logan. Selain itu,
kekasatan logam juga diduga
berpengaruh pada proses ini
Dari hasil yang didapatkan maka
dapat dilihat terjadinya perbedaan warna
pada kertas kromatografi disebabkan oleh
adanya campuran petroleum eter dan
aseton yang menyebabkan warna terpisah
berdasarkan berat dan ukuran
molekul.Kloroplas terdapat pada hampir
seluruh tumbuhan, tetapi tidak umum
dalam semua sel. Bila ada, maka tiap sel
dapat memiliki satu sampai banyak
plastid. Pada tumbuhan tingkat tinggi
umumnya berbentuk cakram (kira-kira 2x5
mm, kadang-kadang lebih besar),
tersusun dalam lapisan tunggal dalam
sitoplasma tetapi bentuk dan posisinya
merah.Klorofil b menyerap cahaya biru
dan oranye dan memantulkan cahaya
kuning-hijau.Klorofil a berperan langsung
dalam reaksi terang, sedangkan klorofil b
tidak secara langsung berperan dalam
reaksi terang. Dalam praktikum ini, anda
akan mempelajari peranan jenis cahaya
tersebut terhadap fotosintesis, dengan
cara mengamati terbentuknya pati pada
daun tanaman yang telah disinari dengan
jenis cahaya yang berbeda-beda. Daun
tanaman yang dapat melakukan proses
fotosintesis akan membentuk pati yang
dapat dideteksi dengan menggunakan
larutan Kalium Iodida (KI) (Gardner,
1991).
Jarak tempuh Rf
pigmen
16 12 0,75
16 10 0,625
16 16 1
berubah-ubah sesuai dengan intensitas
cahaya.Pada ganggang, bentuknya dapat
seperti mangkuk, spiral, bintang
menyerupai jaring, seringkali disertai
pirenoid (Noggle dan Fritz, 1979).
Adanya perbedaan warna pada
daun yang banyak mendapat cahaya
ataupun daun yang ternaungi ini
disebabkan oleh ditempat yang lebih
gelap banyak klorofil untuk
mengefisiensikan cahaya sehingga proses
fotosintesis dapat berlangsung. Pada
tempat yang ternaungi lebih banyak
klorofil karena sel penutup memiliki klorofil
dalam selnya sehingga dengan bantuan
cahaya matahari dapat melakukan
fotosintesis, terlalu banyak sinar
berpengaruh buruk terhadap klorofil yang
dihadapkan pada sinar kuat akan
berkurang hijaunya dan yang kena sinar
matahari langsung akan hijau kekuningan
(Santoso,2004).
Menurut Nurdin (1997) bahwa
pada daun muda terjadi fotosintesis yang
aktif sehingga membutuhkan klorofil yang
banyak. Klorofil yang banyak tersebut
akan menyerap energi cahaya yang
banyak sehingga fotosintesis menjadi
lebih aktif. Klorofil dibentuk dari
kondensasi suksinil Co-A dan asam amino
glisin menjadi senyawa yang tidak stabil
yaitu asam amino glisin menjadi senyawa
asam amino ketoda di dapat, kemudian
melalui dekarboksilasi dan diubah menjadi
asam amino lovalenat di katalis oleh
enzim amino lovulenat sintetase dengan
adanya pridoksal pospat dan cahaya.
Klorofil a (C55H12O5N4Mg)
menyerap cahaya dengan panjang
gelombang 470 nm dan 660 nm, berwarna
hijau kebiruan (hijau tua). Klorofil b
(C55H70N4Mg) menyerap cahaya dengan
panjang gelombang 470 nm dan 640 nm,
berwarna hijau kekuningan. Klorofil a dan
b ini efektif menyerap cahaya ungu, biru,
dan jingga. Sedangkan xantofil efektif
menyerap biru dan ungu (Devlin,1975).
Menurut Lakitan (1993),
menyatakan bahwa pada daun atau pucuk
terjadi proses fotosintesis yang aktif,
sehingga klorofil yang dibutuhkan juga
banyak. Klorofil yang banyak tersebut
akan menyerap energy cahaya yang
banyak sehingga fotosintesis lebih aktif.
Adanya perbedaan kandungan klorofil
pada setiap tanaman disebabkan oleh
spesiesnya yang berbeda dan hal ini
berhubungan dengan sifat pembawaan
keturunan pengaruh cahaya, mungkin
karena habitatnya pada tempat yang kena
cahaya atau tidak, dan masing-masing
spesies dalam fotosintesis yang berbeda-
beda.

Tabel 3. Kandugan klorofil daun tanaman Switenia mahagoni

Kandungan klorofil
No Nama tanaman
645(a) 663 (b) Total
1 Switenia mahagoni 1,456 -0,062 0,845
Menurut Nurdin (1997) bahwa pada daun Pada kloroplast terdapat klorofil,
muda terjadi fotosintesis yang aktif diantaranya klorofil a. Klorofil tersebut
sehingga membutuhkan klorofil yang berfungsi untuk : a) panen cahaya, b)
mengubah energi cahaya menjadi energi
banyak. Klorofil yang banyak tersebut
kimia, c) penyumbang elektron utama
akan menyerap energi cahaya yang (P680 dan P700), d) penerima elektron
banyak sehingga fotosintesis menjadi utama dan e-flouresensinya dapat
lebih aktif. Klorofil dibentuk dari digunakan sebagai alat pemeriksa
kondensasi suksinil Co-A dan asam amino (Gardner, 1991).
glisin menjadi senyawa yang tidak stabil
yaitu asam amino glisin menjadi senyawa KESIMPULAN DAN SARAN
Kesimpulan
asam amino ketoda di dapat, kemudian
Dari hasil percobaan yang didapatkan,
melalui dekarboksilasi dan diubah menjadi dapat disimpulkan bahwa :
asam amino lovalenat di katalis oleh 1. Panjang gelombang cahaya yang
enzim amino lovulenat sintetase dengan paling bagus diserap oleh klorofil
adanya pridoksal pospat dan cahaya. adalah gelombang berwarna
Pada tumbuhan C4 ada 2 macam merah, sedangkan yang paling
kloroplast.Kloroplast pada sel mesofil, rendah adalah warna kuning, hijau,
grananya melimpah dan pati tidak dan biru.
ada.Kloroplast pada seludang berkas 2. Kadar klorofil yang terdapat pada
tanpa grana dan ada beberapa butiran daun Rhodomertus adalah 0,33
kecil pati.Pada tumbuhanC3, seludang pada gelombang 663 nm, dan 028
berkas menyebar sedangkan pada C4 pada panjang gelombang 645 nm.
mengumpul dan membentuk Kranz.Pada 3. Pigmen yang terdapat pada daun
tumbuhan C3, fiksasi CO2terjadi pada sik- Rhodomertus adalah klorofil a,
lus calvin dengan enzim utama yang klorofil b, santofil, dan β-karoten.
berperan adalah Rubisco atau Ribulose Saran
bifosfat karboksilase/karbok-sidismutase Diharapkan kepada praktikan untuk lebih
disamping masih ada 12 enzim yang lain. serius dalam menjalani praktikum agar
tujuan dari praktikum ini dapat terlaksana Suwarman. 2004. Sains Biologi. Erlangga.
dengan baik dan praktikan dapat Jakarta
Santoso. 2004. Fisiologi Tumbuhan.
mengetahui dan memahami prosedur Universitas Muhammadiyah
kerja sehingga dapat membuat laporan Bengkulu. Bengkulu.
Wijaya, A, dkk. 2008. Ipa Terpadu VIIIA.
dengan baik dan benar. Jakarta: Grafindo

DAFTAR PUSTAKA

Dwidjoseputro, D. 1978. Pengantar

Fisiologi Tumbuhan. PT. Gramedia.
Jakarta
Dwijoseputro.1996. Pengantar Fisiologi
Tumbuhan. PT.Gramedia:Jakarta.
Devlin,R.M. 1975. Plant Physiology Third
Edition. D. Van Nostrand, Company.
New York.
Fitter. A. H. dan Hay, R. K. M. 1991.
Fisiologi Lingkungan Tanaman.
Gadjah MadaUniversity
Press. Yogyakarta
Gardner, F. P. R., Pearce B. dan Goger L.
M. 1991. Fisiologi Tanaman
Budidaya. Universitas Indonesia
Press. Jakarta
Lakitan, B. 2004.Dasar-Dasar Fisiologi
Tumbuhan.Raja Grafindo
Persada. Jakarta
Loveless, A.R. 1991.Prinsip-Prinsip
Biologi Tumbuhan Untuk Daerah
Tropik 1.Gramedia. Jakarta
Kimball, J.W. 2000.Biologi Umum.
Erlangga. Jakarta
Kimball, J.W. 2002.Biologi Jilid 2.
Erlangga. Jakarta.
Noggle, G.R and Fritz, G.J. 1979.
Introduction Plant
Physiology.Prectice Hall of India.
India
Nurdin, H. 1997. Buku Ajar Fisiologi
Tumbuhan.Departement
Pendidikan
danKebudayaanUniversitas
Andalas. Padang
Prawirohartono, S. 2005. Sains Biologi.
Erlangga. Jakarta
Salisbury, F.B and C.W Ross.1996.
Fisiologi Tumbuhan Jilid III. ITB.
Bandung