Table of Contents! Prosedur kualitatif dan Pengertian CRP semi kuantitatif
Prinsip Uji CRP
Intrepretasi hasil Tujuan Uji CRP Kualitatif dan semi kuantitatif C-Reactive Protein
C- Reaktif protein adalah salah
satu dari protein fase akut yang didapatkan dalam serum normal walaupun dalam jumlah yang kecil. Pada keadaan-keadaan tertentu dimana didapatkan adanya reaksi radang atau kerusakan jaringan (nekrosis), yaitu baik yang infektif maupun yang tidak infektif. Prinsip
Metode yang digunakan pada kit
HumaTex CRP adalah aglutinasi latex, CRP didasarkan pada reaksi serologi antara protein C-reaktif manusia dari spesimen pasien /serum kontrol dengan antibodi CRP anti-human yang terikat pada partikel lateks yang sesuai. Reaksi positif ditunjukkan dengan aglutinasi jelas terlihat dari partikel lateks dalam lingkaran slide. Tujuan
Tujuan dari pemeriksaan CRP
adalah untuk mendeteksi keberadaan CRP dalam serum darah dan mengetahui kadar CRP dalam serum darah, yang berguna sebagai penanda dini terjadinya radang, infeksi, atau kerusakan jaringan dan untuk memantau keberhasilan terapi. Pengumpulan Spesimen
1. Dilakukan pengambilan darah vena
pada pasien, lalu dimasukkan sampel ke dalam tabung berwarna merah.
2. Diamkan sampel selama 30 menit,
kemudian dilakukan sentrifugasi dengan kecepatan 3000 rpm selama 15 menit
3. Pisahkan serum dari bagian padat
darah. Book Title. P52 Reagen Alat ● Kontrol serum positif ● Slide latar belakang (PC) : Tutup merah gelap
● Kontrol serum negatif ● Mikropipet
(NC) : Tutup Hijau ● Batang pengaduk ● CRP Lateks Reagen (LR): Tutup Putih ● Rotator
● Glycine buffer NaCl
(GBS) Sensitivitas dan kontrol kualitas ● Sensitivitas analitik tes CRP ini adalah 6 mg/L.
● Kontrol kualitas dilakukan
dengan mengerjakan pemeriksaan terhadap kontrol positif dan kontrol negatif, dan sedapat mungkin digunakan pada setiap seri pemeriksaan. Stabilitas Reagen Stabilitas Sampel Stabilitas reagen LR, Stabilitas Sampel PC, dan NC : (Serum) :
● Stabil sampai dengan ● Lebih dari 24 Jam di
tanggal kadaluarsa simpan pada suhu 2-8°C bila disimpan pada 2- ● Lebih dari 4 minggu di 8°C. simpan pada suhu -20°C ● Reagensia tidak boleh dibekukan atau diletakkan di freezer. 01 Prosedur Kualitatif Siapkan alat dan bahan yang diperlukan Step 1
Step 2 Siapkan slide yang bersih dan kering
Step 3 Pipet atau teteskan PC (kontrol positif) ke dalam
lingkaran. (1 tetes: 40/50 µl) Step 3 Pipet atau teteskan NC (kontrol negatif) ke dalam lingkaran berbeda. (1 tetes: 40/50 µl)
Step 4 Pipet 40 µl serum ke dalam lingkaran yang sudah ada PC (kontrol positif) dan NC (kontrol negatif). Step 5 Pipet 1 tetes LR (Reagen Lateks) ke dalam semua lingkaran. (1 tetes: 40/50 µl)
Step 6 Homogenkan dengan batang pengaduk.
Step 7 Goyangkan slide dengan perlahan untuk membantu homogenisasi, bisa menggunakan rotator selama 2 menit 100 rpm.
Step 8 Amati aglutinasi yang terjadi.
02 Prosedur Semi Kuantitatif Siapkan alat dan reagen yang diperlukan Step 1
Step 5 Campur/homogenkan GBS dan serum dengan cara
resuspensi menggunakan mikropipet. Ambil 50 µl larutan dari pengencer ½ kemudian Step 6 campurkan dengan pengenceran ¼. Dan lakukan prosedur yang sama hingga lingkaran pengenceran terakhir.
Step 7 Teteskan 1 tetes LR (Reagen Lateks) pada masing-
masing lingkaran yang sudah diencerkan. Step 6 Homogenkan dengan batang pengaduk.
Step 7 Goyangkan pelan untuk membantu proses
homogenisasi, bisa menggunakan rotator selama 2 menit 100 rpm. Step 7 Amati terjadinya aglutinasi. Interpretasi Hasil Kualitatif
• Adanya aglutinasi menunjukkan
kandungan CRP lebih dari 6 mg/L (Sensitivitas 6 mg/L) dalam Positif Negatif spesimen. • Serum dengan hasil positif dalam tes skrining harus di uji • Hasil Negatif: tidak terbentuk ulang dalam tes aglutinasi (kadar CRP < 6 mg/L) semikuantitatif. • Hasil Positif: terbentuk aglutinasi (kadar CRP > 6 mg/L) Interpretasi Hasil Semi Kuantitatif Pengenceran CRP (mg/L) 1 + 1 (1 : 2) 12 • Titer CRP adalah pengenceran 1 + 3 (1 : 4) 24 tertinggi yang masih terjadi 1 + 7 (1 : 8) 48 aglutinasi. 1 + 15 (1 : 16) 96 • Baca titer pada pengenceran 1 + 31 (1 : 32) 192 terakhir dengan aglutinasi yang terlihat dan kalikan dengan Misalnya diperoleh aglutinasi faktor konversi (dilihat pada pada pengenceran pertama di pengenceran 1:2, maka titer nilai sensitivitas reagen) CRP adalah 2 X 6 [mg/L] = 12 [mg/L] Maka didapatkan hasil dalam (mg/L). Thanks! Any questions?