ISOLASI DAN IDENTIFIKASI BAKTERI SALMONELLA SP
PADA TELUR AYAM
Pendahuluan :
Badan Kesehatan Dunia
(WHO, 2014) menyatakan bakteri
Salmonella merupakan genus bakteri
penyebab utama dari penyakit bawaan
pada makanan di seluruh dunia.
Makanan dan minuman yang di
konsumsi pada dasarnya berfungsi
untuk mempertahankan kehidupan
manusia, yaitu sebagai sumber energi
dan pertumbuhan serta mengganti
jaringan atau sel tubuh yang rusak.
Yang merupakan sumber semua zat
gizi, mengatur proses di dalam tubuh
dan menghasilkan energi untuk
kepentingan berbagai kegiatan
(Supardi Imam dkk, 1999 ).
Sampai saat ini studi di
laboratorium masih terbatas dan
kurangnya penyelidikan tentang
Salmonellosis di negara berkembang
yang membuat resiko penyakit akibat
infeksi Salmonella semakin besar.
Salmonella sp adalah salah satu
spesies bakteri yang termasuk dalam
anggota family Enterobacteriaceae.
Habitat utamanya ada di dalam saluran
pencernaan hewan dan manusia
(Portillo, 2000). Bakteri Salmonella sp
biasanya ditemukan pada bahan
pangan yang mengandung protein
cukup tinggi sebagai media yang baik
bagi pertumbuhan mikroorganisme
tersebut. Contohnya telur ayam.
Dalam kondisi lemah bakteri
Salmonella Sp dengan mudah masuk
melalui berbagai cara salah satunya
melalui makanan dan kebersihannya
kurang dijaga atau tercemar oleh
konsumen dengan bakteri Salmonella,
maka perbaikan sanitasi harus
dilakukan dan untuk pencegahan
kontaminasi makanan dengan hewan
pengerat atau binatang lainnya yang
mengeluarkan Salmonella Sp.
Keamanan pangan merupakan
persyaratan utama yang semakin
penting di era perdagangan bebas.
Pangan yang aman, bermutu, bergizi,
berada dan tersedia cukup merupakan
prasyarat utama yang harus dipenuhi.
Hal ini agar tercipta suatu sistem
jaminan mutu pangan yang
memberikan perlindungan bagi
kepentingan kesehatan serta berperan
dalam meningkatkan kemakmuran dan
kesejahteraan rakyat (Khoiriyah et al.,
2013).
Berdasarkan latar belakang di
atas, maka rumusan masalah dalam
penelitian ini adalah adalah “Apakah
terdapat bakteri Salmonella Sp pada
terasi kiloan dan telur?” Adapun
tujuan dari penelitian ini adalah untuk
mengidentifikasi ada atau tidaknya
bakteri Salmonella Sp
Metode Pemeriksaan
*) Pra Analitik :
 Mempersiapkan alat : Autoclave,
Oven, Cawan Petri, Inkubator,
Erlenmeyer, Ose, Bunsen, Pipet
tetes, Indikator pH, Tabung reaksi,
Rak tabung, Stomacher, cotton
swab sucihama.
 Sterilisasi alat penelitian yang
terbuat dari kaca atau logam
dengan skala dan keakuratan
rendah dengan menggunakan oven
dengan suhu 180°C selama 24 jam.
Sedangkan alat-alat yang terbuat
dari kaca yang memiliki tingkat
skala dan keakuratan tinggi atau
plastik disterilkan dengan
autoclave dengan suhu 121°C
selama 15 menit.
 Mempersiapkan bahan : Sampel
telur utuh, Media pengayaan
(Kerabang telur, Putih telur, dan
Kuning telur), Buffered Peptone
Water (BPW) 0,1%, media RV,
Brain Heart Infusion Broth
(BHIB), Salmonella Shigella Agar
(SSA), Hectoen enteric agar
(HEA). Triple Sugar Iron Agar
(TSIA), Lysine Iron Agar (LIA) ,
Aquadest.
 Media pengayaan sampel kerabang
telur :
1) Dilakukan swab pada sampel
telur menggunakan cotton
swab sucihama yang
sebelumnya telah dibasahi
dengan 5 mL BPW 0,1%.
2) Swab dipindahkan ke dalam
erlenmeyer atau wadah steril
berisi 45 mL BPW 0,1%
3) Kemudian diinkubasi pada
suhu 35°C selama 16-20 jam.
 Sampel putih telur, dan kuning
telur :
1) Memisahkan antara putih dan
kuningnya secara aseptis,
masing-masing ditempatkan
dalam kantong plastik steril
dan dihomogenkan dengan
stomacher selama 1-2 menit.
2) Masing-masing parameter
diambil 25 mL dimasukkan ke
dalam erlenmeyer steril dan
ditambahkan 225 mL larutan
BPW 0.1%
3) Kemudian diinkubasi pada
suhu 35 °C selama 16-20 jam.
4) Biakan prapengayaan dari tiga
parameter setelah inkubasi
diaduk perlahan
5) Kemudian dilanjutkan tahap
pengayaan dengan
memindahkan 0.1 ml ke dalam
10 mL media RV dalam tabung
reaksi.
6) Selanjutnya diinkubasi pada
suhu 42 °C selama 24 jam.
*) Analitik :
a. Tes pada media Brain Heart
Infusion Broth (BHIB)
Pembuatan Media Brain Heart
Infusion Broth (BHIB) (Andrianto,
2012).
1) Media BHIB ditimbang
sebanyak 11,322 gram.
2) Kemudian dimasukkan ke
dalam erlenmeyer 306 mL dan
dilarutkan dengan aquadest
sebanyak 60 mL, pH diukur
dengan indikator pH 7,4 ± 0,2.
3) Kemudian dipanaskan sampai
larut dengan baik dan
disterilisasi dengan autoclave
pada suhu 121°C selama 15
menit.
Penanaman Bakteri Pada Media
BHIB.
1) Sampel telur ayam
dihomogenkan dan diisolasi
pada media BHIB dengan
perbandingan 9:1. 9 ml untuk
media BHIB dan 1 ml untuk
sampel telur.
2) Media BHIB diinkubasi selama
1x24 jam pada suhu 37°C di
inkubator. Observasi hasil
dilakukan dengan melihat
kekeruhan pada media BHIB
dan media selektif yaitu media
SSA.
b. Tes pada media Salmonella
Shigella Agar (SSA)
Pembuatan SSA :
1) Media SSA ditimbang 10,2
gram dan dimasukkan ke
dalam erlenmeyer 170 mL
2) Kemudian dilarutkan dengan
akuades sebanyak 120 mL, pH
diukur dengan indikator pH 7,4
± 0,2.
3) Media dipanaskan sampai larut
dengan baik, dan disterilisasi
dengan autoclave pada suhu
121°C selama 15 menit.
 diinokulasikan pada media
Penanaman Bakteri Pada Media TSIA dan LIA.
SSA. 2) Inokulasi dilakukan dengan
1) Bakteri yang terdapat di media menusukkan jarum inokulasi
BHIB diambil dengan ke dasar media agar
menggunakan ose yang sudah 3) Selanjutnya digores pada
difiksasi bagian miring agar.
2) Kemudian diinokulasi pada 4) Kedua media diinkubasi pada
media SSA dengan cara suhu 35 °C selama 24 ± 2 jam.
digoreskan. 5) Setelah inkubasi dilakukan
3) Media SSA diinkubasi selama pengamatan koloni yang
1x24 jam pada suhu 37°C di mengarah Salmonella dengan
inkubator. terjadinya perubahan media
4) Observasi hasil dilakukan yang khas.
dengan melihat pertumbuhan
koloni bakteri Salmonella sp.
yang ditandai dengan adanya *) Post analitik :
pertumbuhan koloni berwarna Membuat laporan berdasarkan
merah dengan titik hitam di hasil praktikum dan jangan lupa untuk
tengah. Jika terdapat membersihkan tempat serta alat yang
pertumbuhan, maka dilanjutkan telah digunakan.
dengan pewarnaan gram.
Hasil
c. Tes pada media Triple Sugar Iron Berdasarkan pemeriksaan
Agar (TSIA) dan Lysine Iron Agar laboratorium yang dilaksanakan,
(LIA) diperoleh hasil sebagai berikut :
1) Mengambil koloni bakteri dari
media pengayaan dan

Tabel 1. Pertumbuhan salmonella pada media BHIP

 Gambar 1. Interpretasi hasil pada media BHIP positif keruh
Tabel 2. Pertumbuhan salmonella pada media SSA

Gambar 2. Interpretasi hasil pertumbuhan salmonella pada media SSA tidak ada
pertumbuhan koloni berwarna merah dengan titik hitam di tengah

Tabel 3. Interpretasi hasil positif salmonella pada media TSIA dan LIA

Tabel 4. Hasil positif salmonella

Pembahasan
Jenis penelitian yang dilakukan
dalam penelitian ini adalah penelitian
yang bersifat observasi laboratorik
yang bertujuan untuk mengidentifikasi
keberadaan Salmonella Sp. Proses
identifikasi terhadap sampel penelitian
diawali dengan pengambilan sampel.
Dari hasil inokulasi pada media
Brain Heart Infusion Broth (BHIB),
semua sampel positif keruh.
Selanjutnya diinokulasi pada media
Salmonella Shigella Agar (SSA).
Media Salmonella Shigella Agar
(SSA) merupakan media spesifik yang
digunakan pada identifikasi bakteri
Salmonella dan Shigella, sehingga
bakteri lain tidak dapat tumbuh pada
media tersebut. Untuk mengetahui
adanya pertumbuhan koloni
Salmonella sp. pada media SSA
ditandai dengan adanya pertumbuhan
koloni berwarna merah dengan titik
hitam di tengah.
Penanganan yang baik dan
benar terhadap telur bermanfaat untuk
mencegah terjadinya kontaminasi
Salmonella sp. Penyimpanan telur
dalam suhu rendah sangat penting
untuk mencegah pertumbuhan
kontaminan Salmonella sp dalam telur
(Novitasari, 2008). Sistem
penyimpanan telur yang dilakukan
oleh pedagang umumnya diletakkan
pada tempat terbuka dan pada suhu
ruangan karena lebih praktis, hal ini
dapat memicu terjadinya kontaminasi
Salmonella sp pada telur tersebut.
Badan Standarisasi Nasional
(2008) mengatur tentang standar telur
ayam konsumsi melalui SNI No. 01-
3926-2008 bahwa persyaratan utama
telur aman dikonsumsi adalah harus
dalam keadaan bersih, jika telur dalam
keadaan kotor, dapat dibersihkan
dengan berbagai cara, antara lain
dengan menggunakan lap yang bersih
dan kering serta pencucian
menggunakan air hangat dengan suhu
35°C, atau menggunakan senyawa
Clorine Compound dan setelah
pencucian telur harus segera
dikeringkan. Ditemukanya bakteri
Salmonella sp dalam telur merupakan
salah satu indikasi bahwa perlakuan
telur oleh produsen tidak sesuai
dengan standar yang ada. Hal ini
berakibat pada penurunan kualitas
telur, karena lapisan kutikula pada
kulit telur sebagai pertahanan terhadap
bakteri hilang, sehingga bakteri
dengan mudah akan langsung masuk
ke dalam telur.
Pada media TSIA dan LIA
hasil positif Salmonella pada kerabang
telur berkaitan dengan kemampuan
transmisi vertikal maupun horizontal.
Permukaan kerabang telur dapat
terinfeksi Salmonella pada saat
oviposisi dimana saluran reproduksi
bagian bawah ayam telah terinfeksi
Salmonella. Infeksi pada kerabang
juga dapat berasal dari luar baik
kontaminasi dari feses maupun dari
lingkungan (Howard et al., 2005).
Kontaminasi pada putih telur
berkaitan dengan kemampuan
Salmonella dalam melakukan penetrasi
dari kerabang ke dalam isi telur dan
kemampuanya bertahan dalam putih
telur. Kontaminasi dalam kuning telur
dapat diperoleh dari transmisi vertikal
Salmonella yang melakukan kolonisasi
pada ovarium dan menginfeksi folikel
preovulasi (Buck et al., 2004).
Beberapa studi melaporkan
bahwa Salmonella mudah melakukan
penetrasi melalui kerabang dan
bereplikasi di dalam telur. Faktor yang
mempengaruhi diantaranya waktu
yang dibutuhkan untuk penetrasi,
kualitas kerabang, putih dan kuning
telur, umur ayam, bentuk fisik, waktu
penyimpanan, genetik dan periode
penyinaran (Raghiante et al., 2010).
Simpulan
Berdasakan hasil yang
didapatkan, diperoleh hasil bahwa
salmonella sp banyak ditemukan pada
bahan makanan yang memiliki
kandungan protein cukup tinggi seperti
telur. Terjadinya kontaminasi bakteri
pada telur biasanya terjadi karena
pengelolaan yang kurang tepat, seperti
penyimpanan ataupun pengolahan
yang tidak sesuai dengan standar yang
sudah ditetapkan.
Untuk memenuhi persyaratan
telur yang baik kondisi telur yang akan
dimakan harus dalam keadaan bersih.
Jika telur dalam keadaan kotor, dapat
dibersihkan dengan berbagai cara,
antara lain dengan menggunakan lap
yang bersih dan kering serta pencucian
menggunakan air hangat dengan suhu
35°C, atau menggunakan senyawa
Clorine Compound dan setelah
pencucian telur harus segera
dikeringkan. Selain itu, telur sebaiknya
disimpan di dalam tempat dengan suhu
yang rendah.

Daftar Pustaka
Rosanty Anita, Satya Darmayani, dan
Vina Vanduwinata. 2017. Identifikasi
Bakteri Salmonella sp. Pada Telur
yang dijual di Pasar Kota Kendari
Provinsi Sulawesi Tenggara. Jurnal
Politeknik Kesehatan Kementerian
Kesehatan Kendari. Diakses dari
http://journal.uin-
alauddin.ac.id/index.php/biogenesis/art
icle/download/3429/3225 pada 11
November 2020.

Indrawati Agustin, Susanto Nugroho,

dan Trioso Purnawarman. 2015.
Deteksi Salmonella spp. pada Telur
Ayam Konsumsi yang Dilalulintaskan
melalui Pelabuhan Tenau Kupang.
Jurnal Fakultas Kedokteran Hewan
IPB. Diakses dari
https://journal.ipb.ac.id/index.php/acta
vetindones/article/view/11189 pada 11
November 2020.