Anisa Istiqomah
P1337434319052
S.Tr. Teknologi Laboratorium Medis
IDENTIFIKASI BAKTERI Escherichia coli PADA SAMPEL
AIR MINUM
PENDAHULUAN
Air yang harus diminum adalah air
yang sehat yang memenuhi persyaratan
Bakteriologi, Kimia, Radioaktif, dan Fisik
berdasarkan Permenkes RI No:
492/MENKES/PER/IV/2010 tentang
syarat-syarat dan pengawasan kualitas air
bersih yang meliputi persyaratan fisik
yaitu tidak berbau, tidak bewarna dan tidak
berasa, dimana untuk nilai Most Probable
Number (MPN) Coliform yaitu 0/100 mL
contoh air yang dianalisis.
Air minum adalah salah satu
kebutuhan pokok manusia yang harus di
penuhi setiap hari. Jumlah penduduk yang
semakin bertambah, akan berpengaruh
terhadap peningkatan jumlah konsumsi air
oleh manusia. Tingginya tingkat
kebutuhan manusia terhadap air sebagai
minuman, membuat produsen berlomba-
lomba menciptakan produk inovatif yang
berkualitas untuk memenuhi kebutuhan
tersebut. Persaingan pasar yang semakin
menuntun produsen terus meningkatkan
kualitas produk pangan yang dihasilkan.
Dalam memproduksi suatu produk
makanan ada 4 faktor yang mempengaruhi
kualitas produk, yaitu penampilan
(apperence), rasa (flavor), kandungan gizi,
dan tekstur.
Secara mikrobiologis, bakteri yang
sering ditemukan pada sumber air minum
adalah bakteri Escherichia coli (E.coli).
E.coli adalah bakteri yang pada umumnya
hidup di dalam usus besar manusia,
kebanyakan dari bakteri E.coli tidak
berbahaya bahkan keberadaannya bisa
dibilang menguntungkan. Bakteri E.coli
yang berada di dalam usus besar manusia
berfungi untuk menekan pertumbuhan
bakteri jahat, dia juga membantu dalam
proses pencernaan termasuk pembusukan
sisa-sisa makanan dalam usus besar.
Fungsi utama yang lain dari E.coli
berperan dalam memproduksi vitamin K
melalui proses pembusukan sisa makan.
Vitamin K berfungsi untuk pembekuan
darah misalkan saat terjadi perdarahan
seperti pada luka/mimisan Vitamin K bisa
membantu menghentikannya.
E.coli adalah kuman oportunis
yang banyak ditemukan di dalam usus
besar manusia sebagai flora normal.
Sifatnya unik karena merupakan flora
normal namun dapat menyebabkan infeksi
primer pada usus misalnya diare pada
anak, seperti juga kemampuannya
menimbulkan infeksi pada jaringan tubuh
lain di luar usus. Genus E.coli dan
E.hermanii. Bakteri E.coli yang berada di
dalam usus besar manusia berfungi untuk
menekan pertumbuhan bakteri jahat, dia
juga membantu dalam proses pencernaan
termasuk pembusukan sisa-sisa makanan
dalam usus besar. Fungsi utama yang lain
dari E.coli adalah membantu memproduksi
vitamin K melalui proses pembusukan sisa
makan. Vitamin K berfungsi untuk
pembekuan darah misalkan saat terjadi
perdarahan seperti pada luka/mimisan
vitamin K bisa membantu
menghentikannya.
Metode yang sering dilakukan
untuk mengidentifikasi bakteri E.coli pada
air adalah metode MPN. Dalam metode
MPN uji kualitas mikrobiologi digunakan
kelompok E.coli sebagai indikator.
Kelompok E.coli mencangkup bakteri
yang bersifat aerobik, anaerobik fakultatif,
batang gram negatif, dan tidak membentuk
spora. Colifecal memfermentasikan laktosa
dengan pembentukan asam dan gas dalam
waktu 24 jam pada suhu 44°C. Metode
MPN menunjukkan besarnya angka
konsentrasi yang secara statistik paling
memungkinkan.
Salah satu teknik pengolahan air
yang sering dilakukan sekarang ini adalah
dengan metode Reverse Osmosis (RO)
yang merupakan suatu metode
penyaringan yang dapat menyaring
berbagai molekul besar dan ion-ion dari
suatu larutan dengan cara memberi
tekanan pada larutan ketika larutan itu
berada di salah satu sisi membran seleksi
(lapisan penyaring). Proses tersebut
menjadikan zat terlarut terendap di lapisan
yang dialiri tekanan sehingga zat pelarut
murni bisa mengalir ke lapisan berikutnya.
Membran seleksi itu harus bersifat selektif
atau bisa memilah yang artinya bisa
dilewati zat pelarutnya (atau bagian lebih
kecil dari larutan) tapi tidak bisa dilewati
zat terlarut seperti molekul berukuran
besar dan ion-ion. Proses ini telah
digunakan untuk mengolah air laut untuk
mendapatkan air tawar, sejak awal 1970-
an.
Air Non Reverse Osmosis (Non
RO) dilakukan dalam tangki penampungan
terakhir dari storage tank yang ada.
Prosess ini bertujuan untuk menyaring air
sekaligus memasak sehingga layak
diminum. Namun berbeda dengan RO
proses ini tidak terdapat proses osmosis
yaitu dengan menggunakan molekul besar
dan ion-ion. Untuk itu perlu diidentifikasi
apakah terdapat bakteri E.coli pada air RO
dan Non RO mengingat banyaknya
masyarakat yang menggunakan air tersebut
sebagai kebutuhan sehari-hari.
METODE
Metode pemeriksaan dilakukan
menggunakan Uji Most Probable Number
(MPN) dan dilanjutkan dengan Mac
Conkey Agar. Metode MPN merupakan
metode  perhitungan sel terutama untuk
perhitungan bakteri coliform berdasarkan
jumlah perkiraan terdekat. Perkiraan
terdekat yaitu perhitungan dalam range
tertentu.
Wadah yang digunakan adalah
botol steril dibungkus dengan kertas coklat
atau kertas timah lalu ikat. Sebelum
digunakan harus di sterilisasi terlebih
dahulu dengan cara dibungkus dengan
kertas coklat atau kertas timah dan diikat
dengan benang sterilisasi dalam autoclave
selama 30 menit pada suhu 121°C dengan
tekanan 1 atm.
Sampel air yang akan diperiksa
diambil secara representatif, dengan
menggunakan botol sampel yang sudah
disterilkan. Menyiapkan semua peralatan
kerja, sterilisasi semua tempat/lokasi kerja
dengan disenfektan. Dibuka ikatan dan
pembungkus botol sampel. Dengan posisi
tertutup, kocok botol minimal 25 kali
putaran. Dilakukan proses pemeriksaan
tabung ganda, yang terdiri dari
Presumptive Test (Tes Pendugaan) dan
Confirmative Test (Tes Penegasan).
1. Tes Pendugaan (Presumptive Test)
Masing-masing tabung di
isi Lactose Broth Triple Strengh
sebanyak 10 mL. Dengan pipet
steril ke dalam tabung
 diinokulasikan masing-masing 10 3. Isolasi pada Mac Conkey Agar
mL sampel air minum, ke dalam
tabung pertama di inokulasikan Diambil 1 ose sampel dan
masing-masing 1 mL sampel air inokulasi ke media Mac Conkey
dan tabung kedua di inokulasikan Agar. Diinkubasi pada suhu 37ºC
0,1 mL sampel air. Kemudian selama 24 jam dengan posisi
tabung-tabung dikocok perlahan lempeng dibalik. Diamati koloni
agar sampel air merata menyebar spesifik yang terbentuk. Koloni
ke seluruh bagian media, lalu berbentuk bulat dan berwarna
inkubasi pada suhu 37°C selama merah bata diduga bakteri
2x24 jam, dan diamati masing- Escherichia coli.
masing tabung untuk melihat ada
atau tidaknya gas. Tes pendugaan
yang positif di tandai dengan HASIL
terbentuknya gas, tetapi hal ini
1. Hasil Pemeriksaan Air Minum
belum memastikan adanya
dengan Uji MPN Test
Colifecal di dalam air karena
lactose broth dapat juga di
fermentasikan oleh bakteri lain,
selain Colifecal. Oleh sebab itu, tes
pendugaan yang positif dilanjutkan
dengan tes penegasan
(Comfirmative test).
2. Tes Penegasan (Comfirmative
Test)

Dari setiap tabung

Gambar 1. Tes Pendugaan (Presumptive
pendugaan yang positif, pindahkan
Test)
1–2 ose ke dalam tabung
penegasan yang berisi 10 mL
BGLB kemudian diinkubasi pada
suhu 44°C selama 1x24 jam (untuk
memastikan adanya E.coli).
Pembacaan dilakukan 24 jam
dengan melihat jumlah tabung
BGLB yang menunjukkan positif
gas pada tabung durhamnya atau
positif ber gas pada masing-masing
tabung. Gambar 2. Tes Penegasan (Comfirmative
Test) pada media BGLB
Catatan jumlah tabung
penegasan (tabung BGLB) yang Ada 13 sampel (81.25%) dari 16
menunjukkan positif gas. Angka sampel yang menunujukkan indeks
yang diperoleh di cocokkan dengan MPN yang positif. Terdapat 3
tabel MPN 511 Formula Thomas sampel dengan indeks MPN
untuk mendapatkan indeks MPN tertinggi yaitu 115/100 ml sampel
per mL sampel air. sebanyak 2 sampel dan 96/100 ml
 sampel sebanyak 1 sampel. Indeks
MPN terendah yaitu 2.2/100 ml
sampel. Sebanyak 3 sampel air
minum dengan nilai indeks MPN
0/100 ml sampel. Indeks MPN
didapatkan (62.5%) dikategorikan
air minum yang kurang bagus,
(12.5%) dikategori amat buruk,
(6.25%) buruk, dan (18.75)
dikategorikan sebagai air minum
yang bagus.
2. Identifikasi bakteri Escherichia
coli dalam Air Minum dengan
Mac Conkey Agar
Gambar 3. Escherichia coli pada media
Mac Conkey Agar
Didapatkan 13 (100%) dari 13
sampel yang menunjukkan
pertumbuhan koloni bakteri merah
muda. Dari isolasi pertumbuhan
Mac Conkey Agar koloni yang
tumbuh adalah Escherichia coli.
No. Escherichia Jumlah
coli Sampel
1 Positif 13
2 Negative 0 menyebabkan penyakit saluran cerna. Pada
Tota 13
l yang dapat bersifat patogen jika melebihi
PEMBAHASAN
Adanya bakteri Coliform di dalam
air minum mengidentifikasikan air minum
tersebut telah terkontaminasi dengan
polusi kotoran. Kontaminasi bakteri
Coliform pada air minum dapat berasal
dari berbagai sumber yaitu bahan baku
yang digunakan dari air yang sudah
tercemar, pendistribusian yang kurang baik
serta tempat air yang tidak higienis.
Kontaminasi air minum juga dapat
bersumber dari juru masak tidak higienis,
seperti tangan tidak higienis karena tidak
dicuci, wadah penyimpanan yang tidak
steril serta cara penyajian yang kurang
higienis akan mempengaruhi higienitas
dari air minum.
Berdasarkan pemeriksaan dengan
menggunakan Mac Conkey Agar
didapatkan hasil bahwa sampel air minum
tersebut menunjukkan terkontaminasi oleh
bakteri Escherichia coli. Hasil negatif pada
0 sampel. Escherichia coli yang terdapat
pada air minum dapat disebabkan karena
tidak higienis proses pembuatan air minum
seperti sumber air minum yang tercemar,
wadah yang digunakan tidak steril bahkan
pekerja pemasak air minum ataupun air
dari distributor perusahaan air minum yang
tidak memerhatikan kebersihan.
Lingkungan atau tepat pembuatan air
minum, serta rendahnya pengetahuan serta
kurangnya kesadaran tentang kebersihan
akan menyebabkan air minum
terkontaminasi oleh bakteri tersebut.
Air minum yang telah
terkontaminasi oleh bakteri Escherichia
coli dapat membahayakan manusia karena
Escherichia coli merupakan bakteri
patogen bagi manusia yang dapat
usus besar ditemukan Escherichia coli
jumlah normal. Diare atau muntaber dapat
menyebabkan wabah pada anak-anak.
Strain tertentu juga dapat menyebabkan
gastroenteritis. Jenis Coliform lain seperti Sunarti, Riri Novita. 2016. Uji Kualitas
Salmonella typhi juga dapat menyebabkan Air Minum Isi Ulang Disekitar
penyakit yaitu demam typoid. Bakteri ini Kampus UIN Raden Fatah
masuk melalui mulut dan menyebar ke Palembang. Jurnal Bioilmi Vol. 2 No.
saluran pencernaan yang akan 1.
menimbulkan gejala seperti demam,
lemah, sakit kepala, sakit perut, penurunan
nafsu makan dan lain-lain. Membersihkan
dan mengeringkan tangki air yang telah
digunakan untuk pembuatan air minum
secara berkala juga merupakan langkah
yang baik dalam mencegah adanya
akumulasi mikroorganisme.

KESIMPULAN

Berdasarkan pemeriksaan, maka

didapatkan hasil bahwa sampel air minum
terkontaminasi oleh bakteri coliform,
sehingga tidak memenuhi syarat
bakteriologis dan tercemar oleh
Escherichia coli.

DAFTAR PUSTAKA

Zikra Wahyu, Arni Amir, dan Andani Eka

Putra. 2018. Identifikasi Bakteri
Escherichia coli (E.coli) pada Air
Minum di Rumah Makan dan Cafe di
Kelurahan Jati serta Jati Baru Kota
Padang. Jurnal Kesehatan Andalas.
Vol. 7 No. 2. Diakses dari
http://jurnal.fk.unand.ac.id pada 11
November 2020.
Denis, Rica. 2013. Identifikasi Bakteri
Escherichia coli (E.coli) Pada Air
Galon Reverse Osmosis (RO) dan
Non Reverse Osmosis (Non RO).
Jurnal Gradien. Vol. 10 No. 1. Diakses
dari
https://ejournal.unib.ac.id/index.php/g
radien/article/view/136/110 pada 11
November 2020.