Laporan Total Koasistensi

LAPORAN KOASISTENSI DIAGNOSA LABORATORIK
Infeksi Clostridium perfringens dan Clostridium colinum disertai Penyakit

Ascariasis, Koksidiosis, dan Infestasi Tungau Pada Ayam Broiler
(Gallus domesticus)
Oleh :
Dominica Alma Dewanti, S.K.H.
20/458151/KH/10521
FAKULTAS KEDOKTERAN HEWAN

UNIVERSITAS GADJAH MADA
YOGYAKARTA
2020
KATA PENGANTAR
Puji syukur kepada Tuhan Yesus Kristus atas segala berkat dan kasih-Nya
sehingga penulis dapat menyelesaikan penulisan makalah mandiri Koasistensi
Diagnosa Laboratorik yang berjudul “Infeksi Clostridium perfringens dan
Clostridium colinum disertai Penyakit Ascariasis, Koksidiosis, dan Infestasi
Tungau Pada Ayam Broiler (Gallus domesticus)”. Penulisan makalah bertujuan
untuk memenuhi persyaratan memperoleh gelar Dokter Hewan di Fakultas
Kedokteran Hewan, Universitas Gadjah Mada, Yogyakarta.
Penulisan makalah ini dapat diselesaikan karena adanya bantuan dari
berbagai pihak. Penulis mengucapkan terima kasih kepada:
1. drh. Christin Marganingsih Santosa, M.Si., selaku Koordinator Koasistensi
Diagnosa Laboratorik Fakultas Kedokteran Hewan Universitas Gadjah Mada.
2. Prof. drh. R. Wasito, M. Sc., Ph. D., selaku dosen pembimbing Laboratorium
Patologi Anatomi.
3. Dr. drh. R. Wisnu Nurcahyo, selaku dosen pembimbing Laboratorium
Parasitologi.
4. Prof. drh. Widya Asmara, SU., Ph. D., selaku dosen pembimbing Laboratorium
Mikrobiologi.
5. Prof. Dr. drh. Siti Isrina Oktavia Salasia dan drh. Dorothea V. Megarani,
MPH., selaku dosen pembimbing Laboratorium Patologi Klinik.
6. Teman-teman kelompok Koasistensi A.2020.12 yang telah memberikan
dukungan dalam proses koasistensi.
Penulis menyadari bahwa laporan ini masih memiliki banyak kekurangan,
sehingga kritik dan saran sangat diharapkan dari pembaca. Semoga laporan ini
dapat bermanfaat bagi semua pihak yang membacanya.
Yogyakarta, 1 Desember 2020
Penulis
ii
DAFTAR ISI
KATA PENGANTAR ............................................................................................ ii

DAFTAR ISI .......................................................................................................... iii
DAFTAR TABEL .................................................................................................. vi
DAFTAR GAMBAR ............................................................................................ vii
ABSTRAK ...............................................................................................................x
PENDAHULUAN .................................................................................................11
KAJIAN PATOLOGI ANATOMI ........................................................................13
Nekrotik Enteritis (NE) ......................................................................................13
Perubahan Makroskopik.................................................................................13
Perubahan Mikroskopik .................................................................................15
Ulseratif Enteritis (UE) ......................................................................................17
Lesi Mikroskopik ...........................................................................................19
Ascariasis ...........................................................................................................20
Koksidiosis .........................................................................................................23
Infestasi Tungau .................................................................................................25
KAJIAN PARASITOLOGI ...................................................................................28
Ascariasis ...........................................................................................................28
Etiologi ...........................................................................................................28
Siklus Hidup ...................................................................................................30
Gejala Klinis...................................................................................................31
Patogenesis .....................................................................................................32
Diagnosis ........................................................................................................32
Koksidiosis .........................................................................................................34
Etiologi ...........................................................................................................34
Siklus Hidup ...................................................................................................36
Gejala Klinis...................................................................................................38
iii
Patogenesis .....................................................................................................39
Diagnosis ........................................................................................................40
Infestasi Tungau .................................................................................................42
Knemidocoptes mutans ......................................................................................43
Etiologi ...........................................................................................................43
Siklus Hidup ...................................................................................................44
Gejala Klinis...................................................................................................44
Patogenesis .....................................................................................................45
Diagnosis ........................................................................................................45
Knemidocoptes gallinae .....................................................................................46
Etiologi ...........................................................................................................46
Siklus Hidup ...................................................................................................47
Gejala Klinis...................................................................................................47
Patogenesis .....................................................................................................47
Diagnosis ........................................................................................................48
Knemidocoptes pillae .........................................................................................48
Etiologi ...........................................................................................................48
Siklus Hidup ...................................................................................................49
Gejala Klinis...................................................................................................49
Patogenesis .....................................................................................................49
Diagnosis ........................................................................................................50
KAJIAN MIKROBIOLOGI ..................................................................................51
Clostridium perfringens .....................................................................................51
Etiologi ...........................................................................................................51
Patogenesis .....................................................................................................52
Gejala Klinis...................................................................................................54
Diagnosa.........................................................................................................55
Polymerase Chain Reaction (PCR)................................................................65
Diferensial Diagnosa ......................................................................................66
Clostridium colinum ...........................................................................................67
Etiologi ...........................................................................................................67
Patogenesis .....................................................................................................67
Gejala Klinis...................................................................................................68
Diagnosa.........................................................................................................69
iv
Polymerase Chain Reaction (PCR)................................................................76
Diferensial Diagnosa ......................................................................................78
KAJIAN PATOLOGI KLINIK..............................................................................79
Clostridium sp. ...................................................................................................79
Analisis Interpretasi .......................................................................................79
Ascariasis ...........................................................................................................83
Koksidiosis .........................................................................................................85
PEMBAHASAN ....................................................................................................88
KESIMPULAN DAN SARAN ..............................................................................93
Kesimpulan ........................................................................................................93
Saran ...................................................................................................................93
PATOGENESIS .....................................................................................................94
DAFTAR PUSTAKA ............................................................................................95
LAMPIRAN .........................................................................................................100
Laporan Pemerikasan Patologi Anatomi ..........................................................100
Laporan Pemeriksaan Parasitologi ...................................................................107
Laporan Pemeriksaan Mikrobiologi .................................................................111
Laporan Pemeriksaan Patologi Klinik .............................................................122
v
DAFTAR TABEL
Tabel 1. Tempat predileksi Eimeria spp. pada hospes (Foreyt, 2011). ..................36
Tabel 2. Hasil isolasi dan identifikasi bakteri Clostridium perfringens (Leboffe
dan Pierce, 2011; Miah et al., 2011; Markey et al., 2013). .....................64
Tabel 3. Hasil isolasi dan identifikasi bakteri Clostridium colinum (Markey et al.,
2013; Swayne et al., 2020). .....................................................................76
Tabel 4. Gambaran darah dan perubahan kimia klinik akibat infeksi Clostridium
sp. pada ayam broiler (Gallus domesticus) (El-Deen et al., 2019; Ibrahim
et al., 2017). .............................................................................................79
Tabel 5. Gambaran darah akibat infeksi Ascaridia galli pada ayam broiler (Gallus
domesticus) (Prastowo dan Ariyadi, 2015). .............................................83
Tabel 6. Gambaran darah akibat infeksi Eimeria sp. pada ayam broiler (Gallus
domesticus) (Akhtar et al., 2014). ............................................................85
vi
DAFTAR GAMBAR
Gambar 1. Ciri khas "Turkish towel" pada mukosa usus (Swayne et al., 2020). ..13
Gambar 2. Jejunum; terdapat nekrosis mukosa usus yang menyebar sepenuhnya
ditutupi oleh pseudomembran, membentuk gips tebal di lumen usus.
Dinding usus menebal (Cooper et al., 2013). ..........................................13
Gambar 3. Jejunum; lumen usus terisi eksudat kental berwarna coklat tua (Cooper
et al., 2013). .............................................................................................14
Gambar 4. Jejunum; dinding usus sangat menebal oleh eksudat inflamasi dan
jaringan fibrosa, sehingga mengurangi lumen usus secara signifikan
(Cooper et al., 2013). ...............................................................................14
Gambar 5. Hepar; mengandung banyak foki nekrotik kuning yang tersebar
(Cooper et al., 2013). ...............................................................................15
Gambar 6. Jejunum; terdapat nekrosis parah yang menyebar pada mukosa usus
superfisial dengan garis batas yang jelas dari mukosa yang lebih dalam
yang terawetkan. Bakteri dalam jumlah besar juga terlihat (Cooper et al.,
2013). .......................................................................................................16
superfisial dengan garis batas yang jelas dari mukosa yang lebih dalam
(Cooper et al., 2013). ...............................................................................16
Gambar 8. Jejunum; mukosa nekrotik dan ditutupi oleh pseudomembran fibrinosa
yang tebal. Kriptus dilatasi dan diisi dengan puing-puing nekrotik
(Cooper et al., 2013). ...............................................................................16
Gambar 9. Hepar; terdapat area nekrosis yang besar, tidak teratur, dan lebih atau
kurang berbatas jelas di tengah gambar (Cooper et al., 2013).................17
Gambar 10. Duodenum dan jejunum; banyak foki transmural multifokal
(perforasi) dari nekrosis dapat dilihat dari serosa (Cooper et al., 2013)..18
Gambar 11. Jejunum; banyak ulkus hemoragik multifokal yang ditutupi oleh
pseudomembran berwarna hijau dan dikelilingi oleh halo pucat dapat
dilihat pada mukosa (Cooper et al., 2013). ..............................................18
Gambar 12. Jejunum; terdapat ulser hemoragik multifokal yang dikelilingi oleh
halo pucat dapat dilihat pada mukosa (Cooper et al., 2013). ...................18
Gambar 13. Area nekrosis pada hepar ayam (Swayne et al., 2020). .....................19
Gambar 14. Jejunum; nekrosis mukosa yang luas secara fokal. Amati eksudat
inflamasi dan kripta yang terisi oleh koloni bakteri biru besar (Cooper et
al., 2013). .................................................................................................19
Gambar 15. Jejunum; ulserasi multifokal hingga penggabungan ulserasi pada
mukosa (Cooper et al., 2013)...................................................................20
Gambar 16. Hati; nekrosis hati multifokal dengan koloni bakteri intralesi (Cooper
et al., 2013). .............................................................................................20
vii
Gambar 17. Cacing Ascaridia galli dewasa ditemukan dalam intestinum (Taylor et
al., 2016). .................................................................................................21
Gambar 18. Fokal hemoragi pada duodenum akibat infeksi Ascaridia galli
(Hambal et al., 2019). ..............................................................................21
Gambar 19. Duodenum ayam; (a) deskuamasi epitel vili; (b) hemoragi; (c)
infiltrasi sel radang (limfosit); dan (d) proliferasi sel-sel kripta (Hambal
et al., 2019). .............................................................................................23
Gambar 20. (a) menunjukkan adanya pembengkakan pada sekum; (b) perdarahan
mukosa sekum (Djara et al., 2020). .........................................................24
Gambar 21. Ditemukan adanya oosit (panah abu), mikrogametosit (panah kuning),
makrogametosit (panah merah), infitrasi sel makrofag (panah biru),
nekrosis (panah hijau), dan perdarahan (panah hitam) (Djara et al., 2020).
..................................................................................................................25
Gambar 22. Hiperkeratosis yang terjadi pada kaki ayam karena infeksi
Knemidocoptes mutans (Swayne et al., 2020). ........................................26
Gambar 23. Hiperkeratosis dan akantosis pada kulit kaki yang terkena
menunjukkan penampang tungau, Knemidocoptes mutans (Shanta et al.,
2006). .......................................................................................................27
Gambar 24. Cacing Ascaridia galli dewasa di dalam intestinum (Taylor et al.,
2016). .......................................................................................................28
Gambar 25. Telur Ascaridia galli berbentuk elips dengan lapisan luar tebal
(Taylor et al., 2016) .................................................................................29
Gambar 26. Bagian anterior cacing Ascaridia galli betina, terlihat 3 buah bibir
menonjol (kiri); bagian posterior cacing betina terlihat anus subterminal
dan spina diujung ekor (kanan) (Gomes et al., 2015). .............................29
Gambar 27. (2C) Buccal apparatus tampak lateral dari cacing Ascaridia galli
jantan; (2D) Buccal apparatus tampak frontal terlihat 3 buah bibir; (2E)
Organ reproduksi cacing jantan tampak ventral; (2F) Bagian caudal dari
cacing betina tampak lateral, terlihat adanya anus (Poult, 2019). ...........30
Gambar 28. Siklus hidup Ascaridia galli (Sarjono, 2020). ....................................31
Gambar 29. Ookista dari tujuh Eimeria spp. pada ayam........................................35
Gambar 30. Siklus hidup Eimeria spp....................................................................37
Gambar 31. Siklus hidup Eimeria spp....................................................................38
Gambar 32. Area lesion scoring (Conway and McKenzie, 2007). ........................41
Gambar 33. Morfologi Knemidocoptes mutans .....................................................44
Knemidocoptes mutans (Swayne et al., 2020). ........................................45
Gambar 35. Morfologi Knemidocoptes gallinae tampak dorsal dengan pola garis
dorsal tidak terputus (Baker, 2007). .........................................................47
Gambar 36. Morfologi Knemidocoptes pillae betina dengan perisai dorsolateral 49
viii
Gambar 37. Morfologi bakteri Clostridium perfringens ........................................52
Gambar 38. Ayam muda yang menderita NE dengan gejala klinis enggan
bergerak, bulu acak-acakan, dan diare (Swayne et al., 2020)..................55
Gambar 40. Koloni Clostridium perfringens pada media RCA.............................57
Gambar 41. Koloni Clostridium perfringens pada media PAD .............................57
Gambar 42. Koloni Clostridium perfringens dalam pengecatan Gram .................58
Gambar 43. Uji katalase .........................................................................................59
Gambar 44. Uji urease............................................................................................59
Gambar 45. Uji indol..............................................................................................60
Gambar 46. Uji Methyl Red ...................................................................................60
Gambar 47. Uji Voges-Proskauer ..........................................................................61
Gambar 48. .............................................................................................................61
Gambar 49. Uji Litmus ..........................................................................................62
Gambar 50. Uji fermentasi karbohidrat .................................................................63
Gsmbar 51. Clostridium perfringens pada Egg Yolk Agar (Zimbro et al., 2009). 64
Gambar 52. PCR menunjukkan hasil CPE.............................................................66
Gambar 53. Gel hasil elektroforesis dari pengetikan toksin Clostridium
perfringens oleh Multipleks PCR ............................................................66
Gambar 54. Media Plat Agar Darah (PAD) (Leboffe and Pierce, 2011). ..............70
Gambar 55. Media Reinforced Clostridial Agar (RCA) (Osman et al., 2012). .....70
Gambar 56. Hasil pengecatan Gram pada Clostridium sp .....................................70
Gambar 57. Uji katalase .........................................................................................71
Gambar 58. .............................................................................................................71
Gambar 59. .............................................................................................................72
Gambar 60. Uji Methyl Red ...................................................................................72
Gambar 61. .............................................................................................................73
Gambar 62. .............................................................................................................73
Gambar 63. Uji litmus ............................................................................................74
Gambar 64. Uji fermentasi karbohidrat .................................................................75
Gsmbar 65. Media Egg Yolk Agar (Zimbro et al., 2009). ......................................75
Gambar 66. PCR Clostridium colinum. .................................................................77
Gambar 67. Hemogram unggas yang mengalami anemia, terlihat adanya bentukan
sel darah merah yang lebih kecil (mikrositik) (Samour, 2016). ..............80
ix
ABSTRAK
Infeksi Clostridium perfringens dan Clostridium colinum disertai Penyakit

Ascariasis, Koksidiosis, dan Infestasi Tungau Pada Ayam Broiler
(Gallus domesticus)
Dominica Alma Dewanti, S.K.H.

20/458151/KH/10521
Ayam berumur empat minggu mengalami penurunan nafsu makan, berat

badan menurun, lesu, diare, bulu yang acak-acakan, gelisah, dan berkerumun.
Feses terlihat encer dan berwarna putih-kehijauan. Ayam terlihat pincang saat
berjalan, sering mematuk tubuhnya, terlihat menggaruk beberapa bagian tubuh,
dan terdapat bentukan kering keras di kaki. Berdasarkan pemeriksaan patologi
anatomi pemeriksaan makroskopik dan mikroskopik, diketahui ayam mengalami
hepatitis dengan lesi multifokal, enteritis disertai nekrosis mukosa dan ulserasi
mukosa. Berdasarkan hasil pemeriksaan mikrobiologi dari sampel jejunum ayam,
terisolasi dan teridentifikasi bakteri Clostridium perfringens dan Clostridium
colinum. Hasil pemeriksaan parasit pada ayam ditemukan adanya cacing
Ascaridia galli, protozoa Eimeria sp., dan tungau. Pemeriksaan patologi klinik
menunjukkan ayam mengalami anemia mikrositik-hipokromik dan leukositosis
yang disertai dengan neutrofilia, monositosis, limfositosis, eosinofilia, dan
heterofilia. Perubahan kimia klinik yang terjadi adalah hipoproteinemia,
hipoalbuminemia, dan peningkatan enzim ALT dan AST. Berdasaran
pemeriksaan laboratorik, ayam terinfeksi Clostridium perfringens dan Clostridium
colinum disertai penyakit ascariasis, koksidiosis, dan infestasi tungau.
Kata kunci : Clostridium sp., Ascaridia galli, Eimeria sp., tungau ayam
x
PENDAHULUAN
Latar Belakang
Dunia perunggasan merupakan salah satu sektor ekonomi yang memegang
peranan penting dalam pemenuhan gizi masyarakat di berbagai negara, termasuk
di Indonesia. Kebutuhan daging di Indonesia setiap tahunnya meningkat.
Berdasarkan Kementerian Pertanian RI (2017), tahun 2015 dalam satu tahun rata-
rata setiap orang mengkonsumsi daging ayam ras sebanyak 4,797 kg dan pada
tahun 2016 meningkat menjadi 5,110 kg. Dengan meningkatnya konsumsi daging
ayam, diperlukan juga peningkatan peternakan ayam guna memenuhi kebutuhan
konsumsi daging ayam Indonesia. Perkembangan usaha peternakan ayam
mempunyai prospek yang sangat baik untuk dikembangkan, baik dalam skala
peternakan besar maupun skala peternakan rakyat. Produk ayam berupa telur dan
daging, merupakan produk yang mudah didapatkan oleh masyarakat di pedesaan
karena pemeliharaannya mudah dan harganya relatif murah dibandingkan dengan
produk ternak lainnya.
Nekrotik Enteritis (NE) dan Ulceratif Enteritis (UE) adalah penyakit
enterik terpenting pada unggas yang menghancurkan sel-sel lapisan usus saluran
pencernaan yang terjadi wabah pada ayam broiler dari usia 2-5 minggu. Memang,
bakteri hidup secara seimbang di usus dalam kondisi normal, tetapi ketika
mikroekologi usus berubah secara drastis, bakteri ini dapat berkembang biak.
Dalam bentuk akut, NE dan UE menyebabkan kematian mendadak pada banyak
unggas dalam beberapa jam tanpa menunjukkan tanda-tanda klinis penyakit
(Ibrahim et al., 2017; Roussan et al., 2009). Beberapa jenis penyakit lain yang
secara ekonomi dapat merugikan peternakan ayam dalam skala kecil maupun
skala besar antara lain Newcastle Disease (ND), Avian Influenza, Gumboro (IBD),
Infectious Bronchitis, Pullorum, Chronic Respiratory Disease, Colibacillosis,
Snot, Cholera, Coccidiosis, dan berbagai jenis parasit baik endoparasit maupun
ektoparasit. Oleh karena itu, pencegahan penyakit memegang peranan penting
guna menanggulangi kerugian ekonomis (Sukmawan, 2018). Menurut Zulfikar
(2013), untuk menjaga ayam yang diternakkan perlu dilakukan upaya dari segi
sanitasi dan tatalaksana pemeliharaan seperti air minum yang bersih, serta
11
12
melaksanakan vaksinasi rutin. Faktor lingkungan juga menyebabkan

berkembangnya penyakit bakteri (Wiedosari dan Wahyuwardani, 2015).
Tujuan Pemeriksaan
Tujuan dari penyusunan Laporan Koasistensi Diagnosa Laboratorik ini
adalah untuk mengetahui etiologi, patogenesis, teknik isolasi dan identifikasi,
serta perubahan yang ditimbulkan oleh penyakit Nekrotik Enteritis (NE), Ulceratif
Enteritis (UE), Ascariasis, Koksidiosis, dan infestasi tungau pada ayam melalui
kajian patologi anatomi, parasitologi, mikrobiologi dan patologi klinik.
Manfaat Pemeriksaan
Manfaat dari penyusunan Laporan Koasistensi Diagnosa Laboratorik ini
adalah menjadi bahan pembelajaran serta dapat memberikan informasi pada
pembaca terutama peternak ayam mengenai agen penyakit, patogenesis penyakit,
gejala klinis, serta dampak yang ditimbulkan, sehingga dapat dilakukan tindakan
penanganan dan pengobatan serta pencegahan dari serangan penyakit tersebut.
KAJIAN PATOLOGI ANATOMI
Nekrotik Enteritis (NE)
Perubahan Makroskopik
Pemeriksaan hasil nekropsi secara makroskopis menunjukkan perubahan
pada organ hepar dan saluran intestinum. Pada kasus NE akut biasanya memiliki
lesi nekrotik pada permukaan mukosa jejunum dan ileum. Namun, lesi juga dapat
terjadi pada duodenum dan sekum (Tabbu, 2002). Pemeriksaan makroskopik pada
intestinum bagian jejunum mengalami penebalan dinding usus, hemoragi
multifokal, terdapat lesi nekrotik berwarna kekuningan yang ditutupi
pseudomembran pada lapisan mukosa, bagian duodenum mengalami lesi nekrosis
pada mukosa, bagian ileum mengalami lesi nekrotik berwarna kekuningan, dan
bagian sekum mengalami penebalan sekum dan terjadi hemoragi. Menurut Acton
(2013), kasus nekrotik enteritis menunjukan perubahan patologi anatomi pada
usus halus membesar berisi gas, cairan berbau busuk, dinding usus tipis dan
sangat gembur, dan permukaan mukosa biasanya ditutupi oleh multifokal
pseudomembran berwarna kuning yang dapat meluas ke seluruh usus halus atau
terlokalisasi sering disebut sebagai "Turkish towel".
Gambar 1. Ciri khas "Turkish towel" pada mukosa usus (Swayne et al., 2020).
Gambar 2. Jejunum; terdapat nekrosis mukosa usus yang menyebar sepenuhnya

ditutupi oleh pseudomembran, membentuk gips tebal di lumen usus. Dinding usus
menebal (Cooper et al., 2013).
13
14
Gambar 3. Jejunum; lumen usus terisi eksudat kental berwarna coklat tua
(Cooper et al., 2013).
Gambar 4. Jejunum; dinding usus sangat menebal oleh eksudat inflamasi dan
jaringan fibrosa, sehingga mengurangi lumen usus secara signifikan (Cooper et
al., 2013).
Pemeriksaan makroskopik pada hepar menunjukkan adanya lesi nekrotik

multifokal pada permukaan hepar. Selama infeksi subklinis, kerusakan usus dapat
memungkinkan bakteri untuk mencapai saluran empedu dan aliran darah portal
hepatik. Kolonisasi hepar dengan jumlah Clostridium perfringens yang tinggi
menyebabkan kolangiohepatitis. Hepar membesar dan memiliki penampilan pucat
dengan fokus merah atau putih. Lesi hepar ditemukan selama inspeksi hepar saat
nekropsi (Cooper et al., 2013).
15
Gambar 5. Hepar; mengandung banyak foki nekrotik kuning yang tersebar

Perubahan Mikroskopik
Lesi mikroskopis pada kasus lapangan NE biasanya ditandai oleh nekrosis
mukosa yang luas meskipun dalam beberapa kasus perubahan nekrotik mencapai
submukosa dan dalam kasus yang paling parah nekrosis meluas ke mukosa
muskularis. Lesi biasanya berkembang di ujung villus dengan nekrosis koagulasi
dan pengelupasan sel epitel. Saat lesi berkembang, ada garis demarkasi yang
tajam antara jaringan nekrotik dan jaringan yang hidup karena akumulasi sel-sel
inflamasi di area luar jaringan yang layak. Heterofil adalah sel inflamasi dominan
yang menginfiltrasi mukosa pada tahap awal penyakit, tetapi sel mononuklear
juga terdapat pada lesi yang lebih kronis. Di dalam lumen, terdapat bahan
fibrinonekrotik, yang seringkali membentuk pseudomembran yang terdiri dari
puing-puing sel, basil, dan sel inflamasi yang terperangkap dalam fibrin. Batang
Gram positif dengan ujung persegi biasanya berhubungan dengan area nekrosis.
Leukosit heterofilik membuat garis pembatas yang tajam antara jaringan nekrotik
dan jaringan sehat (Cooper et al., 2013).
Regenerasi saluran usus pada kasus lapangan NE ditandai dengan
proliferasi sel epitel, dimulai dari kriptus, produksi jaringan granulasi, penurunan
jumlah sel epitel goblet dan kolumnar, dan peningkatan jumlah sel kuboid. Secara
keseluruhan, proses regenerasi meninggalkan saluran usus dengan vili pendek
yang memiliki permukaan absorpsi yang berkurang; Namun, sepengetahuan
penulis, durasi kondisi ini belum diselidiki. Kadang-kadang, nekrosis koagulatif
multifokal hepar dan saluran empedu diamati. Eksudat fibrinosa dan basil Gram
16
positif ditemukan di daerah nekrotik. Dalam kasus seperti itu, kantung empedu
dan saluran empedu ekstrahepatik menebal dan membengkak dengan bahan
kuning yang mengendap, dan ada hiperplasia di saluran empedu dan kadang-
kadang terjadi peradangan granulomatosa (Cooper et al., 2013).
superfisial dengan garis batas yang jelas dari mukosa yang lebih dalam yang
terawetkan. Bakteri dalam jumlah besar juga terlihat (Cooper et al., 2013).
superfisial dengan garis batas yang jelas dari mukosa yang lebih dalam (Cooper et
al., 2013).
Gambar 8. Jejunum; mukosa nekrotik dan ditutupi oleh pseudomembran

fibrinosa yang tebal. Kriptus dilatasi dan diisi dengan puing-puing nekrotik
17
Gambar 9. Hepar; terdapat area nekrosis yang besar, tidak teratur, dan lebih atau
kurang berbatas jelas di tengah gambar (Cooper et al., 2013).
Ulseratif Enteritis (UE)

Ayam dengan UE akut memiliki enteritis hemoragik yang mempengaruhi
terutama duodenum. Pada tahap ini, perdarahan belang-belang dapat terlihat dari
serosa. Seiring perkembangan penyakit, ulser kuning yang lebih besar, bulat,
dikelilingi oleh perdarahan berkembang di bagian mana pun dari usus kecil atau
besar dan seka. Ulser ini kemudian bergabung membentuk ulser yang lebih besar,
kadang-kadang berlubang, tanpa pembatas terpisah dan dikelilingi oleh lingkaran
pucat, menyebabkan peritonitis lokal atau difus dan perlekatan usus. Ulser dapat
berbentuk lentikular atau melingkar kasar dan dapat ditutupi oleh
pseudomembran. Bentuk lentikular lebih sering terjadi di bagian atas usus. Darah
biasanya ditemukan di usus. Lesi hepar bervariasi dari bintik kuning muda hingga
area kuning besar, multifokal, dan tidak teratur. Foki berbatas multifokal abu-abu
atau kuning, terkadang dikelilingi oleh lingkaran kuning pucat, juga dapat diamati.
Dapat ditemukan pembesaran limpa dan perdarahan dengan area nekrotik
multifokal. Lesi kasar biasanya tidak ada di organ lain (Cooper et al., 2013).
18
Gambar 10. Duodenum dan jejunum; banyak foki transmural multifokal

(perforasi) dari nekrosis dapat dilihat dari serosa (Cooper et al., 2013).
Gambar 11. Jejunum; banyak ulkus hemoragik multifokal yang ditutupi oleh
pseudomembran berwarna hijau dan dikelilingi oleh halo pucat dapat dilihat pada
mukosa (Cooper et al., 2013).
Gambar 12. Jejunum; terdapat ulser hemoragik multifokal yang dikelilingi oleh
halo pucat dapat dilihat pada mukosa (Cooper et al., 2013).
19
Gambar 13. Area nekrosis pada hepar ayam (Swayne et al., 2020).
Lesi Mikroskopik
Lesi mikroskopis pada kasus akut termasuk nekrosis difus dan deskuamasi
epitel usus, edema mukosa, kongesti vaskular, dan infiltrasi heterofil. Pada tahap
selanjutnya, ulserasi mukosa diamati. Ulser awal terdiri dari daerah hemoragik
dan nekrotik kecil yang melibatkan vili dan meluas ke submukosa. Area nekrosis
koagulasi dan tepi heterofil, limfosit, sel plasma, dan makrofag mengelilingi
ulkus. Gumpalan batang Gram positif biasanya terdapat di daerah nekrosis. Saat
lesi berkembang, ulser ditutupi oleh pseudomembran tebal yang terdiri dari fibrin,
puing-puing sel, infiltrat inflamasi campuran, dan basil. Pada tahap selanjutnya,
nekrosis transmural dan peradangan dapat diamati. Trombosis vaskular pada
mukosa hampir selalu ditemukan pada lesi akut dan kronis. Lesi hati terdiri dari
nekrosis koagulasi multifokal, foki acak, dengan infiltrat inflamasi campuran
ringan dan, kadang-kadang, koloni kecil basil Gram positif (Cooper et al., 2013).
Gambar 14. Jejunum; nekrosis mukosa yang luas secara fokal. Amati eksudat
inflamasi dan kripta yang terisi oleh koloni bakteri biru besar (Cooper et al.,
2013).
20
Gambar 15. Jejunum; ulserasi multifokal hingga penggabungan ulserasi pada

mukosa (Cooper et al., 2013).
Gambar 16. Hati; nekrosis hati multifokal dengan koloni bakteri intralesi (Cooper
et al., 2013).
Ascariasis
Hasil pemeriksaan secara patologi anatomi pada organ ayam setelah
dilakukan nekropsi, ditemukan adanya cacing Ascaridia galli pada lumen
duodenum, jejunum, dan ileum. Panjang tubuh cacing berkisar antara 5-7,3 cm.
Pada mukosa usus terlihat adanya daerah fokal hemoragi. Hal ini menandakan
cacing telah melewati fase histotropik, dimana larva L3 cacing telah menanamkan
diri pada lapisan mukosa duodenum untuk berkembang menjadi L4 (Hambal et
al., 2019).
21
Gambar 17. Cacing Ascaridia galli dewasa ditemukan dalam intestinum (Taylor
et al., 2016).
Gambar 18. Fokal hemoragi pada duodenum akibat infeksi Ascaridia galli
(Hambal et al., 2019).
Hasil pemeriksaan secara histopatologi pada preparat usus ditemukan
adanya deskuamasi epitel vili, hemoragi, infiltrasi sel radang, dan proliferasi sel-
sel kripta yang diakibatkan oleh infeksi cacing Ascaridia galli. Sel radang yang
ditemukan adalah jenis sel limfosit menandakan infeksi penyakit berlangsung
dalam waktu yang lama (kronis). Larva yang infektif dalam beberapa kasus dapat
menyebabkan kerusakan/deskuamasi pada epitel vili. Deskuamasi epitel
merupakan kejadian lepasnya sel epitel dari permukaan jaringan. Deskuamasi
epitel mukosa usus merupakan respon pertahanan jaringan terhadap suatu
rangsangan. Kerusakan dan erosi pada epitel vili dapat merangsang proliferasi sel-
sel sekretori yang mengeluarkan lendir sehingga menyebabkan adhesi vili. Tidak
hanya larva saja, cacing dewasa juga dapat menyebabkan kerusakan epitel dalam
bentuk atrofi pada vili yang mengganggu integritas mukosa usus dan pemanfaatan
22
nutrisi sehingga dapat mempengaruhi penurunan berat badan pada ayam. Infeksi
cacing Ascaridia galli juga dapat menyebabkan penebalan pada tunika muskularis
usus ayam (Hambal et al., 2019).
Balqis et al. (2013) menyebutkan bahwa deskuamasi pada epitel vili
merupakan usaha yang dilakukan oleh tubuh ayam agar larva stadium L3 tidak
dapat masuk ke dalam mukosa usus. Setelah terjadi deskuamasi, vili akan
mengalami hiperplasia untuk menyeimbangkan kehilangan sejumlah sel, terutama
sel goblet yang berfungsi melindungi vili dari larva cacing Ascaridia galli. Pada
daerah vili yang mengalami hiperplasia mengandung sel radang, sel mast, dan sel
goblet. Hal ini bertujuan mencegah berpenetrasinya larva Ascaridia galli ke dalam
mukosa. Hemoragi terjadi akibat cacing Ascaridia galli berintegrasi dengan
jaringan mukosa inang, sedangkan hiperemi terjadi akibat larva Ascaridia galli
yang menginvasi jaringan sehingga mempengaruhi fisiologis pembuluh darah.
Hiperemi membawa sel radang dari darah ke mukosa jaringan sehingga terjadinya
infiltrasi sel radang. Infiltrasi sel radang disebabkan oleh usaha tubuh yang
berusaha mengeluarkan antigen. Infiltrasi sel radang akibat infeksi cacing
Ascaridia galli terdiri atas sel limfosit, eosinofil, dan makrofag. Sel eosinofil
adalah salah satu sel leukosit polimorfonuklear yang terlibat dalam patogenesis
berbagai penyakit seperti infestasi cacing, alergi, dan kerusakan jaringan (Hambal
et al., 2019).
23
Gambar 19. Duodenum ayam; (a) deskuamasi epitel vili; (b) hemoragi; (c)
infiltrasi sel radang (limfosit); dan (d) proliferasi sel-sel kripta (Hambal et al.,
2019).
Koksidiosis
Pemeriksaan sampel diawali dengan melihat perubahan yang terjadi pada
sekum secara patologi anatomi. Perubahan yang dapat diamati, yaitu adanya
pembengkakan dan perdarahan pada mukosa sekum. Proses yang terjadi adalah
sekum membengkak dan menebal akibat perkembangan fase skizongoni Eimeria
sp. Perubahan jaringan juga sangat dipengaruhi oleh spesies Eimeria sp. yang
menginfeksi dan jumlah ookista infektif yang tertelan. Dilihat dari lesi patologi
anatomi yang ditemukan pada sekum ayam, spesies khusus yang menginfeksi
adalah Eimeria tenella. Perubahan yang terjadi pada sekum disebabkan oleh
ookista infektif (mengandung sporozoit) termakan oleh ayam dan masuk ke dalam
saluran pencernaan. Satu ookista yang infektif mengandung delapan sporozoit.
Dinding ookista akan pecah setelah masuk ke dalam lambung otot (gizzard)
dengan bantuan enzim tripsin, sehingga sporokista-sporokista yang mengandung
sporozoit keluar dari ookista (Djara et al., 2020).
Tingkat keparahan dengan stadium ringan ditandai dengan ditemukan
ookista pada villi sekum dan nekrosis pada epitelium. Tingkat keparahan dengan
stadium sedang ditandai dengan ditemukan ookista, mikro dan makrogamet,
nekrosis, makrofag, dan peradangan. Sedangkan tingkat keparahan dengan
stadium berat ditandai dengan ditemukan adanya ookista, mikro dan
makrogemaet, nekrosis, makrofag, peradangan sampai pendarahan. Tingkat
keparahan penyakit tergantung pada faktor lingkungan, imunitas ayam, dan
besarnya jumlah ookista Eimeria sp. yang tertelan. Faktor lingkungan yang
mempengaruhi diantaranya yaitu kelembaban tinggi pada kandang dengan sanitasi
yang buruk. Jika suhu di dalam kandang rendah dan kelembabannya tinggi, atau
kondisi litter sangat lembab, maka pada ookista yang telah bersporulasi kemudian
dapat bertahan di lingkungan luar hingga berbulan-bulan. Faktor lainnya, yaitu
sistem pakan yang tidak mengandung koksidiostat dan ventilasi yang buruk serta
24
manajemen kandang yang tidak baik dimana sekam sebagai alas kandang yang
lembab (Djara et al., 2020).
Gambar 20. (a) menunjukkan adanya pembengkakan pada sekum; (b) perdarahan
mukosa sekum (Djara et al., 2020).
Pemeriksaan histopatologi ditemukan adanya kumpulan oosit didalam
epitel sekum, vili nekrosis, makrogametosit, mikrogametosit, skizon, perdarahan
dan infiltrasi makrofag. Pengamatan histopatologi organ sekum ayam ditemukan
juga adanya sejumlah sel radang. Sel radang yang ditemukan pada organ sekum,
yaitu makrofag. Makrofag merupakan bagian dari sistem fagosit mononuklear
yang berasal dari monosit darah dan telah bermigrasi keluar dari pembuluh darah
serta mengalami aktivasi di dalam jaringan. Karena itu makrofag merupakan sel
radang yang berfungsi memfagositosis mikroorganisme dalam hal ini Eimeria sp.
sebagai protozoa. Pada radang kronis, makrofag dapat berakumulasi dan
berproliferasi di tempat peradangan. Sebagian besar merozoit generasi II masuk
ke dalam sel-sel epitelium baru untuk memulai fase seksual yang disebut
gametogoni membentuk gametosit. Gametosit yang terbentuk berdiferensiasi
menjadi mikrogametosit (jantan) dan makrogametosit (betina). Sehinga terlihat
keberadaan mikrogamet dan makrogamet secara histopatologi. Sejumlah
mikrogamet yang kecil dan motil akan mencari dan bersatu dengan makrogamet
menghasilkan zigot. Zigot yang dihasilkan akan menjadi dewasa dan membentuk
ookista yang akan dibebaskan dari mukosa usus dan bercampur dengan feses
(Djara et al., 2020).
25
Gambar 21. Ditemukan adanya oosit (panah abu), mikrogametosit (panah

kuning), makrogametosit (panah merah), infitrasi sel makrofag (panah biru),
nekrosis (panah hijau), dan perdarahan (panah hitam) (Djara et al., 2020).
Infestasi Tungau
Infestasi Knemidocoptes mutans menyebabkan lesi pada sisik epidermis
dari sendi tibiotarsal ke bawah hingga sendi jari kaki. Knemidocoptes mutans
paling banyak ditemukan pada unggas dewasa yang berumur di atas dua tahun.
Kaki unggas yang terkena menjadi kasar, terdapat material berkerak putih besar
dan kekuningan menutupi seluruh dahan hingga jari kaki. Pengangkatan kerak
menyebabkan permukaan anggota tubuh yang meradang dan lembab dengan
penampilan putih berkilau. Beberapa unggas yang terkena dampak parah
menunjukkan ketimpangan, tetapi tidak ada kelainan bentuk yang diamati.
Knemidocoptes mutans adalah tungau penggali yang masuk ke dalam liang kulit
kaki dan dengan demikian menyebabkan reaksi inflamasi. Eksudasi terjadi yang
pada gilirannya menjadi berkerak dan menggantikan sisik halus normal kaki.
(Shanta et al., 2006).
26
Knemidocoptes mutans (Swayne et al., 2020).
Kerokan yang dalam dari kaki yang dicurigai menunjukkan sejumlah besar
tungau bundar di bawah permukaan kerak. Parasit menembus kulit di bawah
kerak, menyebabkan peradangan dengan eksudat yang mengeras permukaan dan
menggeser sisik. Pada bagian jaringan, tungau diamati sebagai potongan
melintang atau melintang di bagian yang lebih dalam dari stratum korneum atau
lapisan superfisial dari stratum malpighii kulit dan jarang masuk lebih dalam. Lesi
khas diamati sebagai hiperkeratosis dan akantosis. Di beberapa area kulit, terjadi
kehilangan epitel. Dalam kasus lanjut, ada infeksi piogenik sekunder ditandai
dengan infiltrasi sel nanah yang parah di dermis. Karena Knemidocoptes mutans
adalah tungau penggali, mereka menimbulkan reaksi inflamasi selama penggalian.
Karakterisasi lesi kaki bersisik dengan hiperkeratosis, parakeratosis, dan
akantosis, seperti yang terlihat pada histopatologi menjelaskan proses perubahan
inflamasi berikut infestasi. Kehadiran tungau di lapisan epidermis yang lebih
dalam juga membenarkan adanya hubungan infestasi tungau dengan perubahan
patologis. (Shanta et al., 2006).
27
Gambar 23. Hiperkeratosis dan akantosis pada kulit kaki yang terkena
menunjukkan penampang tungau, Knemidocoptes mutans (Shanta et al., 2006).
KAJIAN PARASITOLOGI
Ascariasis
Etiologi
Ascariasis merupakan penyakit cacing yang dapat menyerang unggas dan
disebabkan oleh cacing Ascaridia galli. Nama lain dari spesies ini adalah
Ascaridia lineata, Ascaridia perspicillum. Ayam muda lebih peka terhadap cacing
Ascaridia galli daripada ayam dewasa. White Leghorn lebih peka daripada ayam
ras yang lain. Lewat umur tiga bulan ayam akan lebih tahan, hal ini berkaitan
dengan meningkatnya sel-sel goblet dalam usus. Cacing muda lebih banyak
menimbulkan kerusakan pada mukosa usus karena larva cacing cenderung
membenamkan diri pada mukosa sehingga sering menyebabkan perdarahan dan
enteritis. Cacing ini memiliki taksonomi sebagai berikut:
Phylum : Nemathelminthes
Class : Nematode
Ordo : Ascaridia
Famili : Heterakidae
Genus : Ascaridia
Spesies : Ascaridia galli
(Taylor et al., 2016)
Gambar 24. Cacing Ascaridia galli dewasa di dalam intestinum (Taylor et al.,
2016).
28
29
Ascaridia galli adalah cacing nematoda yang ukurannya paling besar

diantara jenis cacing pada unggas, berbentuk bulat, berwarna putih, tidak
berpigmen, dan dilengkapi dengan kutikula yang halus (Anonim, 2014). Cacing
ini merupakan parasit pada ternak unggas yang termasuk dalam soil transmitted
helminthes dan biasa ditemukan pada usus ayam dan unggas lain di seluruh dunia
(Levine, 1981). Cacing jantan berukuran panjang 50-76 mm dan lebar 490-1210
µm. Cacing betina berukuran panjang 60-116 mm dan lebar 900-1800 µm (Taylor
et al., 2016). Ujung anterior mempunyai 3 buah bibir, di ujung posterior cacing
jantan terdapat pre-anal sucker dan dua spikula berukuran panjang 1-2,4 mm.
Cacing betina memiliki vulva yang terletak di pertengahan tubuh. Telur Ascaridia
galli berbentuk oval, berkulit lembut, tidak bersegmen, ukuran 73-92 x 45-57 μm
(Sarjono, 2020).
Gambar 25. Telur Ascaridia galli berbentuk elips dengan lapisan luar tebal
Gambar 26. Bagian anterior cacing Ascaridia galli betina, terlihat 3 buah bibir
menonjol (kiri); bagian posterior cacing betina terlihat anus subterminal dan spina
diujung ekor (kanan) (Gomes et al., 2015).
30
Gambar 27. (2C) Buccal apparatus tampak lateral dari cacing Ascaridia galli
jantan; (2D) Buccal apparatus tampak frontal terlihat 3 buah bibir; (2E) Organ
reproduksi cacing jantan tampak ventral; (2F) Bagian caudal dari cacing betina
tampak lateral, terlihat adanya anus (Poult, 2019).
Siklus Hidup
Siklus hidup Ascaridia galli pada ayam berlangsung 35 hari. Telur cacing
akan keluar lewat tinja ayam dan menjadi infektif dalam waktu 5 hari pada suhu
optimum, yaitu 32-34oC. Siklus hidup Ascaridia galli secara langsung, telur
dikeluarkan bersama dengan feses dari inang dan berkembang di lingkungan
eksternal inang. Untuk mencapai tahap infektif (L2) membutuhkan waktu 10
sampai 20 hari atau lebih, tergantung pada suhu dan kelembaban (Zulmi et al.,
2020). Telur kemudian mengandung larva 2 yang sudah berkembang penuh dan
larva ini sangat resisten terhadap kondisi lingkungan yang jelek. Telur tersebut
dapat tetap hidup selama 3 bulan di dalam tempat yang terlindung, tetapi dapat
mati segera terhadap kekeringan, air panas, juga di dalam tanah yang
kedalamannya sampai 15 cm yang kena sinar matahari. Infeksi terjadi bila unggas
menelan telur tersebut bersama makanan atau minuman. Cacing tanah dapat juga
bertindak sebagai vektor mekanis dengan cara menelan telur tersebut dan
kemudian cacing tanah tersebut dimakan oleh unggas. Telur yang mengandung
larva 2 kemudian menetas di proventrikulus atau duodenum unggas. Setelah
31
menetas, larva 3 hidup bebas di dalam lumen duodenum bagian posterior selama 8
hari. Kemudian larva 3 mengalami ekdisis menjadi larva 4, masuk ke dalam
mukosa dan menyebabkan hemoragi. Larva 4 akan mengalami ekdisis menjadi
larva 5. Larva 5 atau disebut cacing muda tersebut memasuki lumen duodenum
pada hari ke-17, menetap sampai menjadi dewasa pada waktu kurang lebih 28-30
hari setelah unggas menelan telur berembrio. Larva 4 dapat menetap di dalam
jaringan mukosa usus rata-rata selama 8 hari, akan tetapi dapat sampai 17 hari
(Anonim, 2014).
Pada hari ke ± 100 telur Ascaridia galli sudah dapat ditemukan dalam
feses inang. Pada kasus infeksi yang berat, insidental dapat terjadi larva
menembus mukosa usus terlalu dalam dan ikut aliran darah menuju hepar
kemudian ke paru-paru, namun kejadian ini jarang sekali (Kusnoto et al., 2015).
Periode prepaten berkisar dari 4-6 minggu pada ayam muda dan sampai 8 minggu
atau lebih pada ayam tua. Cacing hidup sekitar 1 tahun (Taylor et al., 2016).
Gambar 28. Siklus hidup Ascaridia galli (Sarjono, 2020).
Gejala Klinis
Ayam yang terinfeksi cacing Ascaridia galli dapat menunjukkan gejala
kelesuan pada sayap, pemutihan pada kepala, hilangnya nafsu makan, penurunan
aktivitas, kekurusan, dan diare. Diare dapat menyebabkan perubahan pada ayam
seperti anemia, bulu kusam dan acak-acakan, serta daerah kloaka yang kotor.
Penurunan berat badan dapat terjadi dikarenakan infeksi cacing Ascaridia galli
32
dapat mengurangi efisiensi penyerapan nutrisi (Shaibu, 2015; Zada et al., 2015).
Cacing dewasa juga dapat bermigrasi ke oviduk melalui kloaka atau penetrasi
usus sehingga mengakibatkan cangkang telur menjadi tipis dan lunak. Hal ini
dapat berefek pada penurunan produksi telur (Rehman et al., 2014; Bharat et al.,
2017).
Enteritis hemoragi, anemia, nafsu makan turun, bulu rontok, kusam, pucat,
sayap terkulai, lemah, dan emasiasi. Pada ayam layer yang sedang berproduksi
dapat mengakibatkan penurunan produksi telur atau sampai terhenti sama sekali.
Pada ayam broiler pertumbuhan akan terganggu dan berat badan menurun
(Kusnoto et al., 2015).
Patogenesis
Telur yang termakan inang akan menetas dan berkembang menjadi larva
stadium 3. Selanjutnya larva menembus mukosa intestinum, penetrasi larva ini
dapat mengakibatkan enteritis hemoragi dan kerusakan dinding usus, sedang pada
ayam muda dapat mengakibatkan anemia, diare, nafsu makan turun serta haus
yang berlebihan. Ayam muda lebih peka daripada ayam tua, karena ayam tua
mukus intestinumnya lebih banyak dibanding ayam muda dan pada mukus itulah
dibentuk antibodi parasit, sehingga dengan adanya peningkatan jumlah mukus
pada intestinum ayam lebih tua akan menjadi faktor penghambat perkembangan
larva cacing Ascaridia galli (Kusnoto et al., 2015).
Perkembangan larva stadium 3 menjadi larva stadium 4 berada di dalam
mukosa intestinum, kemudian larva stadium 4 akan menjadi cacing muda dan
keluar dari mukosa menuju lumen berkembang menjadi dewasa. Infeksi yang
hebat dari cacing dewasa Ascaridia galli ini dapat mengakibatkan obstruksi,
perforasi usus, dan kematian (Kusnoto et al., 2015). Patogenisitas umumnya
rendah, meskipun pada infeksi berat terjadi penurunan berat badan. Tidak jarang
ditemukan timbunan cacing yang sangat banyak sehingga usus tersumbat (Swayne
et al., 2020).
Diagnosis
Diagnosis terhadap kemungkinan ascariasis dilakukan dengan melihat
gejala klinis yang muncul, pemeriksaan natif dan sentrifus terhadap telur cacing di
33
dalam feses, dan pemeriksaan darah (Anonim, 2014). Pemeriksaan feses untuk
menemukan telur cacing Ascaridia galli, hanya saja pada ayam muda (0-8
minggu) dengan metode ini belum bisa dilakukan karena periode prepaten cacing
ini kurang lebih 100 hari. Menemukan cacing dalam usus pada saat bedah bangkai
(Kusnoto et al., 2015).
Koleksi Feses
Feses yang dikoleksi untuk diperiksa parasitologi harus dikumpulkan dari
rektum menggunakan sarung tangan plastik sekali pakai. Sampel dikumpulkan di
tangan kemudian sarung tangan dibalik dan diberi udara kemudian diikat. Feses
yang baru dikeluarkan juga dapat digunakan untuk pemeriksaan yang tidak
terkontaminasi oleh tanah atau kotoran. Hal ini penting karena banyak larva
nematoda yang hidup bebas di lingkungan, sehingga dapat membuat diagnosa
yang kurang tepat. Telur dapat berkembang dengan cepat ke arah mana mereka
sulit untuk diperbaiki (Kauffman, 1996). Cepatnya telur ini berembrio, maka feses
harus disimpan dalam lemari es kecuali harus dilakukan dalam sehari. Jika sampel
akan dikirim, sistem penyimpanan anaerob di dalam wadah kedap udara yang
berisi udara akan membutuhkan pengembangan dan menetasnya telur (Taylor et
al., 2016).
Metode Identifikasi Telur Cacing dan Cacing
Metode sederhana (natif)
Pemeriksaan natif dilakukan dengan mengambil sedikit sampel feses
kemudian diletakkan di atas gelas obyek. Feses ditetesi air dan dicampur,
kemudian diamati di bawah mikroskop dengan perbesaran 10x10 untuk mencari
ada tidaknya telur cacing (Griffiths, 1978). Metode ini memungkinkan untuk
menunjukkan parasit (telur atau larva cacing, ookista coccidia). Metode ini
memiliki kekurangan, yaitu hanya kerumitan yang efektif, parasit tinggi, sulit
untuk dilakukan karena tertutup oleh puing, dan hasil kuantitatif tidak dapat
diperoleh (Kauffman, 1996).
Metode pengapungan
Memisahkan telur dari puing-puing feses dengan cara mengapungkan telur
dengan berbagai macam suplemen. Saat feses di cairan yang berat jenisnya tinggi
34
dan disentrifugasi, telur cacing dan protozoa akan melayang ke atas sedangkan
debris feses akan tenggelam. Telur nematoda dan cestoda akan mengapung dalam
cairan dengan berat jenis antara 1,10-1,20. Telur trematoda yang jauh lebih
membutuhkan dari 1,30-1,35 (Kauffman, 1996). Pemeriksaan sentrifus dilakukan
dengan cara mengambil feses sebanyak 2 gram dan dimasukkan ke dalam cawan
mortar. Feses kemudian ditambah dengan air secukupnya dan diaduk. Campuran
kemudian dimasukkan ke dalam tabung sentrifus sebanyak 3⁄4 tabung lalu
dilakukan sentrifugasi selama lima menit. Supernatan hasil sentrifus dibuang
sampai tersisa endapan di dasar tabung. NaCl jenuh dimasukkan ke dalam tabung
tersebut sampai 3⁄4 tabung lalu diaduk sampai rata dan disentrifuse kembali
selama lima menit. Hasil sentrifus kemudian ditambah lagi NaCl jenuh sampai
permukaannya cembung dan ditunggu selama tiga menit. Gelas objek ditempelkan
pada permukaan cembung tersebut dan dibalik dengancepat kemudian ditutup
dengan deck glass dan dilakukan pengamatan di bawah mikroskop dengan
perbesaran 10x10 (Griffiths, 1978). Parasit yang dapat ditemukan dengan metode
pengapungan adalah telur cestoda dan nematoda, larva lungworms, dan oosista
coccidia (kecuali Eimeria leuckarti). Telur trematoda sulit ditemukan dengan
metode ini (Kauffman, 1996).
Koksidiosis
Etiologi
Koksidiosis atau sering disebut berak darah adalah penyakit parasiter yang
menimbulkan gangguan terutama pada saluran pencernaan bagian aboral.
Koksidiosis pada ayam disebabkan oleh parasit protozoa intraseluler Eimeria spp.
yang memiliki taksonomi:
Kingdom : Protozoa
Filum : Apicomplexa
Kelas : Coccidia
Ordo : Eucoccidiorida
Famili : Eimeridae
Genus : Eimeria
35

Sembilan spesies Eimeria spp. diidentifikasi sebagai agen penyebab
koksidiosis pada ayam tetapi hanya tujuh diantaranya telah dilaporkan bersifat
patogen (Kahn, 2008). Eimeria necatrix dan Eimeria tenella adalah spesies
Eimeria yang paling patogen. Eimeria arcevulina, Emeria maxima, dan Eimeria
mivati umum terjadi dengan tingkat patogen rendah sampai sedang, sementara
Eimeria brunetti jarang terjadi, tetapi patogen jika terjadi. Eimeria mitis, Eimeria
praecox, dan Eimeria hagani adalah spesies yang relatif non-patogen (Soulsby,
2002). Morfologi ookista berbentuk elipsoidal atau lingkaran dengan dinding sel
yang tebal dan mengandung sporokista. Mayoritas ookista Eimeria spp. memiliki
bentuk ovoid. Ookista Eimeria maxima (30,5 x 20,7 μm) adalah yang terbesar,
sedangkan Eimeria mivati (15,6 x 13,4 μm) dan Eimeria mitis (15,6 x 14.2 μm)
adalah yang terkecil dibandingkan dengan spesies Eimeria yang lain. Ookista
Eimeria tenella, Eimeria maxima, Eimeria acervulina, Eimeria hagani, dan
Eimeria brunetti berbentuk bulat telur sedangkan Eimeria necatrix berbentuk
bujur sangkar (Clark and Blake, 2012).
Gambar 29. Ookista dari tujuh Eimeria spp. pada ayam: (a) Eimeria maxima, (b)
Eimeria brunetti, (c) Eimeria tenella, (d) Eimeria necatrix, (e) Eimeria praecox,
(f) Eimeria acervulina, dan (g) Eimeria mitis (Dubey, 2020).
Masing-masing dari spesies Eimeria memiliki tempat predileksi yang

spesifik dengan tempat perkembangannya adalah di usus (sel epitel dari vili usus
atau sel kriptus) (Conway and McKenzie, 2007; Varghese, 2004). Masing-masing
spesies menyebabkan patogenisitas berbeda-beda, bergantung pada jenis inang
36
yang terjangkit. Ayam pedaging paling sering terkena Eimeria acervulina,

Eimeria maxima, dan Eimeria tenella. Unggas berumur panjang seperti breeder
dan layer menghadapi tantangan dari ketiga spesies Eimeria tersebut ditambah
Eimeria necatrix dan Eimeria brunetti (Dubey, 2020).
Tabel 1. Tempat predileksi Eimeria spp. pada hospes (Foreyt, 2011).
Eimeria spp. Tempat predileksi
Eimeria acervulina Jejunum bagian depan
Eimeria brunetti Jejunum bagian belakang dan rectum
Eimeria maxima Jejunum bagian tengah hingga belakang
Eimeria necatrix Jejunum bagian tengah atau keseluruhan
Eimeria tenella Sekum
Eimeria mivati Jejunum bagian depan
Eimeria mitis Duodenum
Eimeria hagani Duodenum
Eimeria praecox Duodenum
Siklus Hidup
Siklus hidup Eimeria spp. terbagi dalam 3 stadium perkembangan, yaitu
stadium skizogoni dan gametogoni yang terjadi di dalam tubuh hospes (ayam)
serta stadium sporogoni yang terjadi di luar tubuh hospes (lingkungan) (Prastowo
dan Priyowidodo 2015). Pada stadium sporogoni, ookista yang berada di
lingkungan bersporulasi setelah sekitar 24 jam berisi empat sporokista (Conway
and McKenzie, 2007). Setiap sporokista mengandung dua sporozoit. Sporozoit
dilepaskan secara mekanis dan biokimia di saluran pencernaan ayam (Reid 1978).
Sporozoit yang dibebaskan menyerang sel epitel di zona tertentu usus atau di
sekum tergantung spesies yang terlibat (Conway and McKenzie, 2007). Stadium
ini disebut stadium infektif karena terjadi infeksi ketika ayam yang rentan
menelan ookista dari lingkungan (Prastowo dan Priyowidodo 2015).
37
Gambar 30. Siklus hidup Eimeria spp. pada stadium sporogoni dan skizogoni: (1)
ookista yang matang; (2) ookista mengalami sporulasi; (3) spokista yang
mengandung sporozoite; (4) Sporozoit melakukan penetrasi pada sel inang; (5)
terbentuk tropozoit; (6) tropozoit membentuk skizon generasi I yang belum
matang; (7) skizon generasi I yang belum matang terus mengalami
perkembangan; (8) skizon generasi I yang telah matang; (9) skizon generasi I
yang matang melepaskan merozoite generasi I; (10) terbentuk skizon generasi II
yang belum matang Conway and McKenzie, 2007).
Perkembangan parasit dalam sel inang melibatkan tahap

perkembangbiakan aseksual dan seksual. Setelah memasuki sel inang, sporozoit
berubah dalam 12 hingga 48 jam menuju feeding stage yang disebut tropozoit.
Tropozoit mulai membesar dan inti parasit membelah dengan proses pembelahan
ganda aseksual yang dikenal sebagai skizogoni (merogoni) (Conway and
McKenzie, 2007). Selanjutnya tropozoit berkembang menjadi skizon generasi I,
II, dan seterusnya yang mengandung banyak merozoit (Prastowo dan Priyowidodo
2015).
38
Gambar 31. Siklus hidup Eimeria spp. pada stadium gametogoni: (11)
penampakan skizon generasi II yang matang; (12) skizon generasi II melepaskan
merozoit generasi II; terbentuknya gamet jantan (13) dan gamet betina (14); (15)
makrogametosit menjadi matang; (16) makrogametosit pecah, melepaskan
sejumlah besar mikrogamet biflagellate yang sangat kecil; (17) fertilisasi
makrogamet oleh mikrogamet; (18) perkembangan ookista; (19) ookista
dilepaskan dari sel epitel inang (Conway and McKenzie, 2007).
Pada stadium gametogoni skizon pecah saat matang (hari ke-3),

melepaskan merozoit (Conway and McKenzie, 2007). Skizon generasi II yang
pecah akan membebaskan merozoit generasi II. Merozoit selanjutnya menginfeksi
sel epitel lain dan berkembang menjadi makrogamet dan mikrogamet (Prastowo
dan Priyowidodo 2015). Gametosit jantan menjadi matang dan pecah, melepaskan
sejumlah besar mikrogamet biflagellate yang sangat kecil. Makrogametosit
tumbuh membentuk makrogamet. Bentuk dinding yang menebal di sekitar
makrogamet, membentuk zigot ketika makrogamet dibuahi oleh mikrogamet.
Pada tahap ini terbentuk ookista yang masih muda atau belum matang. Periode
prepaten bervariasi pada tiap spesies tergantung pada waktu yang dibutuhkan
untuk setiap siklus skizogoni dan banyaknya siklus yang terjadi. Ookista
kemudian merusak sel inang saat dewasa dan keluar melalui feses (Conway and
McKenzie, 2007).
Gejala Klinis
Koksidiosis pada unggas memiliki dua bentuk gejala, yaitu bentuk klinis
dan bentuk subklinis. Unggas yang terinfeksi penyakit koksidiosis menunjukkan
39
gejala klinis berupa anoreksia, depresi, bulu berdiri, kepucatan pada pial dan
jengger, kekurusan, dan kematian. Perkembangbiakan Eimeria sp. di sel epitel
mukosa usus halus menyebabkan terjadinya kerusakan sel epitel dan terjadi reaksi
peradangan. Sel-sel radang yang berkumpul di sekitar lesi akan meningkatkan
permeabilitis pembuluh darah usus halus sehingga terjadi hemoragi perdiapedesis.
Hemoragi pada usus halus tersebut menyebabkan terjadinya diare berdarah
(Anonim, 2014).
Ayam yang terkena koksidiosis menjadi lelah dan lemah, pada unggas
muda sering terdapat darah pada feses setelah 4-5 hari pasca infeksi, kemudian
mata tertutup dan sayap menggantung dan banyak unggas mengalami kematian
(Abebe and Gugsa, 2018). Beberapa spesies Eimeria membentuk koloni di usus
halus yang berisi ratusan merozoit. Merozoit tersebut akan berkembang dan
menginvasi lebih ke dalam hingga ke lapisan lamina propria sehingga saat
merozoit dilepaskan dari koloni akan terjadi erosi yang parah pada mukosa usus
halus. Erosi mukosa usus halus tersebut menyebabkan penyerapan nutrisi menjadi
tidak optimal dan terjadi dehidrasi. Kematian terjadi setelah 4 sampai 6 hari post
infeksi (Anonim, 2014). Koksidiosis subklinis ditandai dengan penambahan berat
badan yang buruk dan efisiensi konversi pakan yang menurun sehingga
memberikan dampak tertinggi dari total kerugian ekonomi (Taylor et al., 2016).
Patogenesis
Infeksi terjadi melalui ookista tersporulasi melalui jalur oral dengan
mengonsumsi pakan dan/atau air yang terkontaminasi. Setelah tertelan, ookista
membebaskan bentuk infektif yang disebut sporozoit. Sporozoit menginfeksi sel
epitel usus. Perpindahan sporozoit ke lokus tempat terbentuknya lesi primer
terjadi dengan bantuan limfosit intraepitel (Daszak, 1999). Kerusakan jaringan
dapat membuat unggas terkena infeksi bakteri, seperti Clostridium dan Salmonella
(Abebe and Gugsa 2018).
Infeksi pada setiap spesies juga menyebabkan lesi atau ciri yang spesifik:
Eimeria acervulina menghasilkan lesi bulat berwarna keputih-putihan, kadang
berbentuk guratan seperti tangga pada infeksi ringan dan plak yang menyatu dan
menyebabkan usus mengalami penebalan dinding pada infeksi berat; Eimeria
40
brunetti menyebabkan nekrosis dan enteritis mukoid berdarah; Eimeria maxima

menyebabkan diare, dinding usus yang menebal, eksudat mukoid, dan petechiae;
Eimeria mitis menyebabkan lesi yang mirip dengan Eimeria acervulina meskipun
pola lesinya kurang terorganisir (tidak berbentuk seperti tangga); Eimeria necatrix
menyebabkan pembengkakan usus, petechiae, dan eksudat berisi darah berlendir;
Eimeria praecox menyebabkan peningkatan eksudat mukoid tetapi tidak ada lesi
yang menciri; dan Eimeria tenella menyebabkan penebalan dinding sekal,
perdarahan, dan cecal cores (Dubey, 2020).
Diagnosis
Diagnosis terhadap koksidiosis dapat didasarkan atas gejala klinis,
perubahan patologik yang berhubungan dengan lokasi, dan riwayat kasus.
Diagnosa definitif dapat didasarkan atas pemeriksaan mikroskopik dan
identifikasi spesies Eimeria sp. (Tabbu, 2002). Untuk mendiagnosis koksidiosis,
setelah dipastikan adanya gejala klinis pada unggas, tiga prosedur biasanya
digunakan: macroscopic lesion scores, perhitungan jumlah ookista, dan
microscopic lesion scores (Dubey, 2020). Metode diagnosis yang lebih akurat dan
cepat telah dikembangkan dengan teknik Enzyme Linkedimmunosorbent Assay
(ELISA) maupun Polymerase Chain Reaction (PCR), menggunakan spesifik
primer (Ekawasti dan Martindah, 2019).
Pemeriksaan Lesi Makroskopis
Metode yang paling umum digunakan untuk mendiagnosis koksidiosis
klinis adalah dengan memeriksa keberadaan lesi makroskopis selama nekropsi.
Setiap spesies memiliki kecenderungan untuk menginfeksi pada lokasi tertentu di
saluran usus dan kebanyakan menyebabkan lesi yang spesifik seperti yang
dijelaskan sebelumnya. Keterbatasan metode ini termasuk kurangnya lesi yang
parah pada infeksi ringan atau dengan strain non-patogenik. Ayam sering
terinfeksi dengan beberapa spesies dalam kasus lapangan, skor lesi makroskopis
dapat bias untuk mengetahui spesies yang diinginkan (Dubey, 2020)
41
Gambar 32. Area lesion scoring (Conway and McKenzie, 2007).

Pemeriksaan Lesi Mikroskopis
Standar emas untuk mendeteksi dan mendiagnosis infeksi koksidiosis aktif
adalah melalui histopatologi dan skor lesi mikroskopis. Sampel dikumpulkan,
difiksasi dalam formalin, dipotong, dan diwarnai untuk pemeriksaan keberadaan
spesies Eimeria, respon inflamasi, dan gangguan jaringan normal menggunakan
pewarnaan hematoksilin dan eosin (Dubey, 2020).
Koleksi ookista
Metode lain untuk mendiagnosis infeksi koksidiosis bergantung pada litter
atau feses segar dibandingkan melakukan nekropsi pada unggas yang mati atau
melakukan proses euthanasia pada unggas yang sakit. Jumlah ookista feses dan
litter digunakan untuk menghitung jumlah ookista yang dikeluarkan unggas atau
yang ditemukan di litter flock yang terinfeksi. Perbedaan morfologi ookista dapat
diamati untuk menentukan jumlah spesies yang diekskresikan. Pada kebanyakan
flok, jumlah ookista meningkat pada minggu ke-3, dan meningkat tajam pada
minggu ke-4, lalu mengalami penurunan tajam pada minggu ke-5 dan ke-6
(Dubey, 2020).
Metode yang digunakan untuk mengumpulkan ookista tergantung pada
tujuan pengumpulan. Dalam kebanyakan kasus, peralatan dasar yang diperlukan
seperti sentrifus, blender, saringan, kain katun tipis, gelas kimia, spatula atau
sendok berlubang, selotip atau karet gelang, larutan kalium dikromat 2,5%, dan
tabung atau botol sentrifus. Ookista untuk perhitungan ookista litter harus
dikumpulkan dari beberapa lokasi representatif dari kandang. Litter yang
dikumpulkan merupakan lapisan teratas sebanyak "segenggam" (sekitar 3 × 3 ×
42
0,5 inci). Sampel dicampur dan ditimbang sebanyak 5 gram lalu direndam
semalaman dalam 2,5% kalium dikromat. Keesokan harinya, larutan dituangkan
melalui saringan kecil atau saringan teh ke dalam gelas beker. Padatan litter
dibilas dengan air melalui saringan ke dalam gelas beker yang sama. Sisa padatan
yang tersisa bisa dibuang. Sampel larutan disentrifugasi dengan kecepatan sedang
(misalnya, 1500 rpm) untuk mengendapkan ookista. Supernatan dibuang dan
pellet disuspensi kembali dalam kalium dikromat untuk disimpan atau ditambah
beberapa volume larutan NaCl larutan untuk dilakukan perhitungan (Conway and
McKenzie, 2007).
Infestasi Tungau
Ektoparasit tungau dari mamalia dan burung menghuni kulit, dimana
mereka memakan darah, getah bening, puing-puing kulit atau sekresi sebasea
yang mereka telan dengan menusuk kulit, mengais dari permukaan kulit atau
menyerap dari lesi epidermis. Kebanyakan tungau menghabiskan seluruh
hidupnya dalam kontak intim dengan inangnya, sehingga perpindahan dari inang
ke inang terutama melalui kontak fisik. Infestasi tungau disebut akariasis dan
dapat menyebabkan dermatitis parah yang disebut kudis (Wall and Shearer, 2001).
Ektoparasit biasanya menyebabkan ketidaknyamanan, iritasi, dan gatal, sehingga
burung mungkin menunjukkan kegelisahan, garukan, dan perawatan yang
berlebihan (Swayne et al., 2020). Secara umum bagian tubuh dari tungau terbagi
menjadi dua, yaitu gnathosoma (anterior) atau kapitulum, dan idiosoma
(posterior). Gnathosoma hanya terdiri atas mulut berbentuk bulat dan lebar,
sedangkan beberapa organ lainnya seperti otak ada pada bagian idiosoma. Bagian
idiosoma terbagi menjadi dua, bagian tubuh yang memiliki kaki disebut podosoma
dan bagian belakang tubuh yang tidak berkaki disebut opisthosoma. Pada tungau
dewasa, dua pasang kaki depan berbentuk lebih ramping dan termodifikasi
menjadi organ sensoris yang dapat membantu pergerakan dan makan (Wall and
Shearer, 2001).
Spesies dari genus Knemidocoptes adalah satu-satunya tungau penggali
astigmatid yang ditemukan pada unggas dan burung peliharaan. Dua belas spesies
43
telah dideskripsikan, tiga di antaranya penting bagi kedokteran hewan. Ciri utama
tubuh mereka mirip dengan Sarcoptes, tetapi permukaan punggung tidak memiliki
duri dan hanya sisik samar dan tidak beraturan. (Taylor et al., 2016).
Knemidocoptes mutans
Etiologi
Knemidocoptes mutans merupakan tungau penyebab kaki bersisik yang
menyerang unggas, terutama ayam dan kalkun. Berpredileksi di bawah sisik kaki
dan tungkai serta mempunyai nama umum Scaly Leg Mite (Taylor et al., 2016).
Morfologi Knemidocoptes mutans cukup mirip dengan Sarcoptes. Betina
berbentuk bulat dan panjangnya sekitar 400 µm, kakinya pendek dan gemuk,
dengan pengisap terminal hanya ditemukan pada jantan. Anus adalah terminal.
Pada fase larva tungau ini memiliki 3 pasang kaki, setelah melewati dua fase
nimpa tungau mencapai dewasa dan memiliki empat pasang kaki. Permukaan
punggung ditutupi oleh garis-garis samar. Namun, pada bagian punggung bagian
tengah lurik patah dalam pola seperti lempengan atau sisik. Tubuh tidak memiliki
duri atau sisik. Pulvili yang mengintai ada di semua kaki larva dan jantan, tetapi
tidak ada pada tahap nimfa dan betina. Pengisap kopulasi tidak ada pada tungau
jantan (Wall and Shearer, 2001). Tungau ini memiliki taksonomi sebagai berikut:
Phylum : Arthropoda
Class : Arachnida
Subclass : Acari
Ordo : Astigmata (Sarcoptiformes)
Famili : Knemidocoptidae
Genus : Knemidocoptes
Spesies : Knemidocoptes mutans
44
Gambar 33. Morfologi Knemidocoptes mutans tampak dorsal (kiri) dan tampak
ventral (kanan) dengan kaki 4 yang pendek dan gemuk serta punggung berlurik
(Baker, 2007; Swayne et al., 2020).
Siklus Hidup
Spesies tungau Knemidocoptes menghabiskan seluruh siklus hidupnya
yang berkisar selama 3 minggu pada tubuh host mereka. Siklus hidup tungau
mulai dari telur sampai menjadi dewasa membutuhkan waktu 10-14 hari. Tungau
jenis betina mampu hidup pada hospes selama 30 hari dan tungau Knemidocoptes
sp. betina ini mampu masuk ke dalam kulit dengan membentuk lorong dan
bertelur. Telur menetas menjadi larva kemudian berkembang menjadi protonimfa
(3-5 hari) dan tritonimfa (2-3 hari), kemudian menjadi tungau dewasa (3-6 hari)
(Wall and Shearer, 2001). Tungau jantan sering keluar untuk mencari betina
dewasa yang belum kopulasi. Seekor betina dapat bertelur dan menghasilkan 2-4
telur sehari selama dua bulan hidupnya dengan interval bertelur selama 2-3 hari
(Taylor et al., 2016).
Gejala Klinis
Knemidocoptes mutans akan menggali terowongan dibawah sisik kaki,
menyebabkan peradangan disertai eksudasi dan kegatalan. Eksudat yang keluar
lama-kelamaan akan mengering dan mengeras berbentuk seperti kapur,
mengakibatkan sisik kaki terangkat, permukaannya tidak rata, dan tidak teratur.
Sisik yang meninggi di kaki dan tungkai. Infestasi dapat menyebabkan kaki
lumpuh dan cacat. Kadang-kadang leher dan sisir mungkin terpengaruh. Saat
penyakit berkembang selama beberapa bulan, burung berhenti makan dan
45
akhirnya mati. Gejala klinis lainnya terjadi kepincangan, terlihat jari kuku kaki
bengkok (Taylor et al., 2016).
Knemidocoptes mutans (Swayne et al., 2020).
Patogenesis
Infestasi Knemidocoptes mutans dapat terjadi dengan dua cara, yaitu
secara langsung dan tidak langsung. Infestasi secara langsung terjadi apabila
melakukan kontak dengan inang lain yang terinfestasi, sedangkan infestasi tidak
langsung berasal dari tanah atau kandang. Knemidocoptes mutans masuk ke dalam
liang kulit kaki dan tungkai unggas menyebabkan penampakan putih bersisik.
Iritasi terjadi bersamaan dengan eksudat yang mengeras membentuk massa yang
berkerak dan berkembang biak. Populasi yang besar dapat menyebabkan
ketimpangan dan kelainan bentuk pada kaki, tungkai, dan cakar karena hipertrofi
yang luas pada stratum korneum. Ini adalah kondisi yang dikenal sebagai ‘scaly
leg’. Sisik dan leher terkadang juga terpengaruh. Saat penyakit berkembang
selama beberapa bulan, unggas berhenti makan dan akhirnya terbuang percuma.
Tungau dewasa dewasa dapat ditemukan di bawah kerak (Wall and Shearer,
2001).
Diagnosis
Sisik yang terangkat pada tungkai dan kaki menunjukkan keberadaan
parasit. Konfirmasi dicapai dengan menemukan tungau pada kerokan kulit yang
diambil dari lesi. Tungau dewasa sering ditemukan di bawah kerak (Taylor et al.,
2016). Menemukan tungau dalam pemeriksaan kerokan kulit secara mikroskopis
dihubungkan dengan rontoknya bulu pada tempat predileksi tungau. Diagnosa dan
46
identifikasi tungau kudis dapat dilakukan dengan cara memeriksa kerokan kulit.
Bahan yang akan dipergunakan adalah kerokan kulit, minyak mineral, larutan
KOH 10%, dan entelan. Alat yang dipergunakan adalah mikroskop, telapa petri,
jarum, gelas obyek, dan gelas penutup. Pengerokan kulit dilakukan tepat pada
perbatasan antara kulit yang normal dengan yang mengalami perubahan (lesi).
Sebelum dikerok kulit ditetesi dengan minyak mineral agar kerokan kulit tidak
berhamburan dan tungau yang ada gerakannya dihambat. Kerokan kulit ditaruh
didalam telapa petri, tambahkan sedikit KOH 10%, biarkan beberapa saat dan
periksa di bawah mikroskop. Jika terlihat adanya tungau, dipindahkan ke atas
gelas obyek menggunakan jarum, tetesi dengan canada balsem dan akhirnya tutup
dengan gelas penutup. Periksa dengan mikroskop untuk identifikasi berdasarkan
ciri-ciri morfologinya (Wall and Shearer, 2001).
Knemidocoptes gallinae
Etiologi
Tungau ini adalah satu-satunya genus tungau yang menggali pada unggas
dan dalam banyak hal menyerupai Sarcoptes. Tubuh melingkar dan kaki pendek
yang pendek serta inang unggas biasanya cukup untuk diagnosis umum. Meskipun
mirip dengan Knemidocoptes mutans, individunya cenderung lebih kecil dan pola
garis dorsal tidak terputus (Wall and Shearer, 2001). Menyerang ayam, kalkun,
burung pegar, dan angsa. Berpredileksi di area yang berbulu dan mempunyai
nama umum Depluming Itch Mite. Tungau ini memiliki taksonomi sebagai
berikut:
Phylum : Arthropoda
Class : Arachnida
Subclass : Acari
Spesies : Knemidocoptes gallinae
47
Gambar 35. Morfologi Knemidocoptes gallinae tampak dorsal dengan pola garis
dorsal tidak terputus (Baker, 2007).
Siklus Hidup
Siklus hidup tungau ini sama dengan Knemidocoptes mutans. Infeksi
tungau ini lazim terjadi pada musim semi dan musim panas serta dapat
menghilang pada musim gugur (Wall and Shearer, 2001).
Gejala Klinis
Knemidocoptes gallinae masuk ke dalam liang bulu dan rasa sakit serta
iritasi yang hebat menyebabkan burung mencabut bulu tubuhnya, biasa dikenal
dengan istilah ‘ depluming itch ’ . Kondisi ini ditandai dengan garukan yang
intens dan bulu rontok di area tubuh yang meluas. Bulu rontok, patah atau dicabut
oleh burung. Tungau dapat ditemukan tertanam di jaringan di pangkal bulu duri,
menyebabkan kerak, papula, dan penebalan kulit (Taylor et al., 2016).
Patogenesis
Bagian tubuh yang paling sering terinfeksi adalah kepala, leher, punggung,
perut, dan kaki bagian atas. Kasus yang parah bisa mengakibatkan kekurusan dan
kematian (Taylor et al., 2016). Knemidocoptes gallinae menyerang unggas,
burung pegar, dan angsa, dimana ia bersembunyi di pangkal batang bulu, terutama
di punggung, kepala dan leher, bagian atas sayap, dan di sekitar lubang angin,
menyebabkan kondisi yang dikenal sebagai ‘ gatal yang menyesakkan ’ .
Kondisi ini ditandai dengan garukan yang intens dan bulu rontok di area tubuh
yang luas. Bulu bisa rontok, putus atau dicabut oleh burung. Tungau dapat
ditemukan tertanam di jaringan di pangkal bulu duri, menyebabkan kerak, papula,
48
dan penebalan kulit. Infestasi sangat umum terjadi pada bulan-bulan musim panas
(Wall and Shearer, 2001).
Diagnosis
Bulu rontok dan garukan yang progresif menunjukkan adanya parasit.
Identifikasi spesies tungau dapat dilakukan melalui pemeriksaan tungau yang
terdapat pada bulu burung atau kerokan kulit diambil dari tepi lesi (Taylor et al.,
2016). Pengerokan kulit dilakukan tepat pada perbatasan antara kulit yang normal
dengan yang mengalami perubahan (lesi). Sebelum dikerok kulit ditetesi dengan
minyak mineral agar kerokan kulit tidak berhamburan dan tungau yang ada
gerakannya dihambat. Kerokan kulit ditaruh didalam telapa petri, tambahkan
sedikit KOH 10%, biarkan beberapa saat dan periksa di bawah mikroskop. Jika
terlihat adanya tungau, dipindahkan ke atas gelas obyek menggunakan jarum,
tetesi dengan canada balsem dan akhirnya tutup dengan gelas penutup. Periksa
dengan mikroskop untuk identifikasi berdasarkan ciri-ciri morfologinya (Wall and
Shearer, 2001).
Knemidocoptes pillae
Etiologi
Knemidocoptes pillae sangat mirip dengan Knemidocoptes mutans dan
Sarcoptes scabei. Betina biasanya memiliki panjang 315-428 µm dan lebar 250-
380 µm. Jantan sedikit lebih kecil, umumnya panjang 200 µm dan lebar 150 µm
(Wall and Shearer, 2001). Menyerang ayam dan burung yang disangkarkan.
Berpredileksi di telapak kaki, pangkal paruh, kulit wajah, dan seluruh tubuh.
Morfologi umum dan lokasi inang biasanya cukup untuk diagnosis. Tungau betina
dari Knemidocoptes pillae memiliki perisai dorsolateral dan basis yang menyatu
dari seta lateral ke dorsal anterior. Knemidocoptes pillae jantan dicirikan oleh
bilobed pulvilusnya. Tungau ini memiliki taksonomi sebagai berikut:
Phylum : Arthropoda
Class : Arachnida
Subclass : Acari
49
Spesies : Knemidocoptes pillae
Siklus Hidup
Siklus hidup sama dengan Knemidocoptes mutans. Diperkirakan bahwa
semua tahapan siklus hidup selesai dalam lesi yang dihasilkan (Wall and Shearer,
2001).
Gambar 36. Morfologi Knemidocoptes pillae betina dengan perisai dorsolateral

(kiri) tampak dorsal (kanan) tampak ventral (Baker, 2007).
Gejala Klinis
Tungau dapat terlihat di lapisan yang lebih dalam dari stratum korneum, di
mana mereka menyebabkan hiperkeratosis dan pengelupasan keratin. Ayam yang
terkena dampak awalnya memiliki serpihan berwarna kuning keputihan di atas
area yang terkena di dasar cere dan sudut mulut. Lesi ini meluas hingga menutupi
mata, dahi, dan cere. Paruhnya juga menjadi menyimpang dan rapuh (Baker,
2007). Gejala klinisnya terjadi kegatalan, sehingga burung akan mematuk,
mencakar tempat gigitan, tetapi kelainan kulit berlangsung lambat (Taylor et al.,
2016).
Patogenesis
Knemidocoptes pillae ditemukan pada budgerigars, beo, dan parkit. Itu
menyerang area telanjang atau berbulu tipis, terutama di sekitar kaki, paruh, area
ventilasi, dan punggung. Infestasi di sekitar kepala menyebabkan kondisi yang
50
dikenal sebagai ‘ scaly face ’ . Aktivitas menggali betina pada prinsipnya

bertanggungjawab atas deratitis yang dihasilkan. Infeksi Knemidocoptes pillae
pada budgerigars memanifestasikan dirinya dengan pertumbuhan paruh berlebih
dan kelainan bentuk akibat infestasi di dasar cere, disertai dengan kegelisahan dan
perilaku perawatan yang tidak biasa. Tanda pertama adalah kerak bubuk putih
keabu-abuan yang menutupi area yang terkena diadu pada pemeriksaan lebih
dekat. Hiperkeratosis sering terjadi (Wall and Shearer, 2001).
Diagnosis
Identifikasi spesies tungau dapat dilakukan melalui pemeriksaan tungau
yang terdapat pada bulu burung atau kerokan kulit diambil dari tepi lesi (Taylor et
al., 2016). Pengerokan kulit dilakukan tepat pada perbatasan antara kulit yang
normal dengan yang mengalami perubahan (lesi). Sebelum dikerok kulit ditetesi
dengan minyak mineral agar kerokan kulit tidak berhamburan dan tungau yang
ada gerakannya dihambat. Kerokan kulit ditaruh didalam telapa petri, tambahkan
sedikit KOH 10%, biarkan beberapa saat dan periksa di bawah mikroskop. Jika
terlihat adanya tungau, dipindahkan ke atas gelas obyek menggunakan jarum,
tetesi dengan canada balsem dan akhirnya tutup dengan gelas penutup. Periksa
dengan mikroskop untuk identifikasi berdasarkan ciri-ciri morfologinya (Wall and
Shearer, 2001).
KAJIAN MIKROBIOLOGI
Clostridium perfringens
Etiologi
NE (Nekrotik Enteritis) dapat didefinisikan sebagai penyakit terutama
pada ayam muda, yang disebabkan adanya infeksi dan produksi toksin oleh
Clostridium perfringens tipe A dan, lebih jarang, oleh strain tipe C. Penyakit ini
juga dikenal dengan nama clostridial enteritis, enterotoksemia, dan usus busuk
(Swayne et al., 2020). Nekrotik enteritis paling sering terjadi pada ayam broiler,
ayam broiler muda, dan kalkun muda. Ayam pedaging berusia 2-5 minggu paling
sering terkena. Penyakit ini juga sering ditemukan pada ayam petelur, sebagian
besar pada ayam dara dan burung muda yang bertelur (Pattison et al., 2008).
Clostridium perfringens (Phylum Firmicutes) adalah organisme tanah pembentuk
spora yang sangat umum yang biasanya ditemukan hidup secara komensal di
saluran pencernaan. Spesies ini telah dibagi menjadi lima tipe (A-E) berdasarkan
jenis (atau kombinasi) racun yang mereka hasilkan (Leboffe and Pierce, 2011).
Clostridium perfringens merupakan bakteri non-motil, anaerobik,
memiliki kapsul polisakarida dalam jaringan, berbentuk batang, bakteri Gram
positif yang pendek dan gemuk (0,6-0,8 × 2-4 μm), dan pembentuk endospora.
Meskipun spora diproduksi oleh organisme ini, mereka jarang terlihat pada
preparat perwarnaan. Spora berbentuk oval, subterminal, dan menonjol pada sel
induk. Reaksi karakteristik bakteri adalah zona ganda hemolisis pada Plat Agar
Darah (PAD), stormy clot pada media litmus milk, dan reaksi Nagler (Leboffe and
Pierce, 2011; Markey et al., 2013). Clostridium perfringens memiliki koloni bulat,
lembut, sirkular, berwarna putih keabu-abuan, dan dikelilingi oleh tipikal zona
hemolisis (β-haemolysis) (Miah et al., 2011). Kebanyakan Clostridium
perfringens tumbuh baik pada pH sekitar netral, dan 4,6-7,0 merupakan kondisi
optimum untuk pertumbuhan bakteri. Bakteri Clostridium perfringens merupakan
mikroba mesofil, yaitu mikroba yang dapat hidup secara maksimum pada suhu
yang sedang, mempunyai suhu optimum diantara 20-50oC (Feliatra et al., 2013).
51
52
Gambar 37. Morfologi bakteri Clostridium perfringens berbentuk batang dan

berwarna ungu pada pengecatan Gram (bakteri Gram positif) (Leboffe and Pierce,
2011).
Patogenesis
Sumber strain Clostridium perfringens penghasil NE adalah ayam itu
sendiri (Swayne et al., 2020). Nekrotik enteritik tidak menular secara langsung
dari ayam ke ayam, tetapi penyakit tersebut dapat ditularkan secara tidak langsung
melalui pakan, alat, perlengkapan peternakan, atau bahan yang tercemar
Clostridium perfringens. Infeksi terbanyak ditemukan pada kelompok ayam
dengan kepadatan tinggi, penyakit dapat menyebar dengan cepat karena adanya
jumlah bakteri yang tinggi di dalam feses ayam yang terinfeksi (Tabbu, 2002). NE
kadangkala diperburuk oleh koinfeksi dengan coccidia. Kerusakan mukosa oleh
sporozoit dan merozoit, penurunan pH usus, obstruksi usus, dan peningkatan
waktu transit memungkinkan pembentukan dan proliferasi Clostridium
perfringens. Kematian pada unggas yang terinfeksi secara bersamaan dengan
spesies Eimeria adalah 25% lebih tinggi daripada mereka yang terkena enteritis
nekrotik saja (Swayne et al., 2020). Clostridium perfringens tipe A sampai E
menghasilkan sejumlah eksotoksin yang kuat dan berbeda secara imunologis yang
menyebabkan efek lokal dan sistemik yang ditemui pada enterotoksemia. Ada
empat racun utama yang diproduksi, yaitu alfa, beta, epsilon, dan iota; pola
produksinya bervariasi dalam setiap jenis Clostridium perfringens dan
menentukan sindrom klinis yang diamati. Berbagai racun minor, beberapa
diantaranya dapat meningkatkan virulensi, juga dikenali. Ini termasuk hemolisin,
kolagenase, perfringolysin O, toksin B2, dan hyaluronidase. Selain itu,
53
enterotoksin, yang memiliki sifat sitotoksik, diproduksi oleh semua strain dan
penting dalam penyakit usus yang disebabkan oleh Clostridium perfringens pada
hewan (Quinn et al., 2002). Berikut adalah empat racun utama pada bakteri ini:
1) Toksin alfa ini adalah lesitinase (fosfolipase) yang menyerang
membran sel yang menyebabkan kematian dan kerusakan sel. Toksin
alfa diproduksi oleh semua jenis dan memberikan zona hemolisis
parsial pada agar darah. (Markey et al., 2013).
2) Toksin beta, toksin pembentuk pori, bersifat mematikan dan
menyebabkan nekrosis. Ini mengikat sel endotel vaskular yang
menyebabkan degenerasi, trombosis, dan nekrosis berikutnya
(Markey et al., 2013).
3) Toksin epsilon disekresikan sebagai protoxin (prototoxin) dan
diaktifkan di usus oleh protease seperti tripsin. Kerjanya dengan
mengganggu jalur penghasil energi sel, mengakibatkan penipisan
ATP dan nekrosis sel terprogram. Permeabilitas usus meningkat,
memastikan penyerapan toksin ke dalam aliran darah. Ini merusak
endotel vaskular (termasuk pembuluh darah di otak) yang
menyebabkan kehilangan cairan dan edema. Toksin epsilon dapat
dianggap sebagai enterotoksin dan neurotoksin (Markey et al., 2013).
4) Toksin iota adalah toksin biner dengan enzim dan komponen
pengikat. ADP-ribosylates aktin seluler dari toksin ini yang
menghalangi polimerisasi dan akhirnya menyebabkan kematian sel
Toksin baru pembentuk pori, NetB, telah diidentifikasi dalam strain
Clostridium perfringens unggas yang ganas ini. Sebuah penelitian menggunakan
mutan knockout gen, telah menunjukkan bahwa NetB merupakan faktor virulensi
kritis dalam patogenesis enteritis nekrotik pada ayam pedaging. Parasit Eimeria
sp. menyebabkan kebocoran protein plasma dengan membunuh sel epitel sebagai
konsekuensi dari tahapan intraseluler dari siklus hidupnya. Infeksi coccidial
meningkatkan produksi lendir di usus. Kedua efek tersebut memberikan
peningkatan nutrisi yang tersedia dan menciptakan lingkungan yang mendukung
54
perkembangbiakan bakteri. Clostridium perfringens mampu memanfaatkan lendir

sebagai substrat. Secara keseluruhan, infeksi Eimeria sp. merupakan faktor
predisposisi penting karena dapat mengakibatkan perkembangbiakan Clostridium
perfringens secara masif di usus. Clostridium perfringens tidak hanya
menghasilkan racun tetapi juga bakteriosin. Proporsi yang signifikan lebih tinggi
dari strain Clostridium perfringens mematikan menghasilkan bakteriosin
dibandingkan dengan mikrobiota Clostridium perfringens strain normal, maka
dengan menghambat strain Clostridium perfringens lainnya, strain virulen tersebut
dapat memperoleh manfaat yang maksimal berupa peningkatan ketersediaan
nutrien akibat infeksi Eimeria sp. Strain virulen dengan demikian mampu
berkembang biak secara masif dan mengeluarkan faktor virulensi yang berperan
dalam induksi lesi nekrotik (Timbermont et al., 2011).
Keberadaan Clostridium perfringens saja di usus tidak cukup untuk
menyebabkan enteritis nekrotik. Dua persyaratan berikut untuk induksi enteritis
nekrotik telah diusulkan: (1) adanya beberapa faktor yang menyebabkan
kerusakan pada mukosa usus, dan (2) adanya organisme Clostridium perfringens
intesinal yang lebih tinggi dari jumlah normal. Jika kedua persyaratan ini
terpenuhi, lesi dapat berkembang, seringkali dimulai dari ujung vili. Sel bakteri
menempel pada epitel yang rusak dan lamina propria yang gundul di mana mereka
berkembang biak dan menyebabkan nekrosis koagulatif. Tarik dan lisis granulosit
heterofil serta nekrosis jaringan lebih lanjut dan proliferasi bakteri berlangsung
dengan cepat. toksin alfa, toksin nekrotikans yang diproduksi oleh semua jenis
toksin, dianggap sebagai faktor virulensi penting yang terlibat dalam proses ini.
Toksin ini menghancurkan membran sel dengan mengenali dan menghidrolisis
fosfolipid membran. Racun juga bisa masuk ke aliran darah, menyebabkan efek
sistemik dan kematian. Telah diusulkan bahwa Clostridium perfringens atau
toksinnya dapat mencapai hati melalui portal darah atau melalui empedu (Pattison
et al., 2008).
Gejala Klinis
Ada dua bentuk Necrotic Enteritis (NE), bentuk klinis akut dan bentuk
subklinis. Meskipun dapat dilihat pada semua usia, bentuk klinis akut terutama
55
penyakit pada ayam muda, menunjukkan depresi berat, keengganan untuk

bergerak, diare, anoreksia, dehidrasi, bulu kusut, dan kematian mendadak serta
peningkatan mortalitas. Bentuk subklinis tidak menghasilkan tanda-tanda luar,
tetapi berdampak besar pada kinerja (penurunan berat badan, penurunan berat
badan dan gangguan Food Conversion Rate (FCR)) (Swayne et al., 2020).
Gambar 38. Ayam muda yang menderita NE dengan gejala klinis enggan
bergerak, bulu acak-acakan, dan diare (Swayne et al., 2020).
Diagnosa
Ayam dengan tanda klinis yang sesuai dan lesi kasar pada nekropsi harus
diperiksa lebih lanjut untuk lesi mikroskopis dan untuk temuan bakteriologis yang
sesuai. Spesimen harus diambil dari hewan yang baru mati, seperti bakteri
Clostridium perfringens adalah penyerang postmortem yang cepat. Pada beberapa
penyakit clostridial, seperti enterotoksemia, pemeriksaan toksin diperlukan untuk
diagnosis. Isi usus kecil diambil dari hewan yang baru mati dan dikirim ke
laboratorium secepat mungkin karena toksinnya labil (Markey et al., 2013).
Clostridium perfringens secara genetik beragam, tetapi isolat dari ayam dalam
wabah NE biasanya identik secara genetik pada tingkat diskriminatif Pulsed-Field
Gel Electrophoresis (PFGE). Ketika diperiksa oleh PFGE, isolat ini cenderung
identik. Tes PCR untuk toksin NetB kemungkinan besar akan positif (Swayne et
al., 2020).
Pengambilan Sampel
Isolasi bakteri menggunakan koleksi sampel organ jejunum yang
mengalamai lesi pada ayam menderita diare serta menunjukkan lesi enteritis tipikal
pascamortem (Thomas et al., 2014). Menurut Swayne et al. (2020), sampel dapat
berasal dari isi usus, kerokan mukosa usus, dan swab lesi. Sampel jejunum
56
diambil dari intestinum ayam dan dimasukkan ke dalam tabung konikel steril.
Sampel disimpan di dalam freezer (-20°C).
Isolasi dan Identifikasi
Isolasi bakteri dapat menggunakan media Kaldu Hati Tarozzi (KHT) yang
merupakan media enrichment untuk memperbanyak jumlah bakteri yang akan
diisolasi khususnya Clostridia patogen. Clostridia tertentu bersifat proteolitik,
sedangkan yang lainnya bersifat sakarolitik. KHT merupakan media yang kaya
nutrisi dengan hati sapi, pepton, dan dekstrosa yang bertindak sebagai sumber
karbon dan nitrogen. Inkubasi KHT dilakukan pada suhu 37°C selama 48 jam.
Partikel daging yang menghitam dan hancur menunjukkan pertumbuhan
proteolitik. Produksi asam (tidak diindikasikan secara langsung) dan gas
menunjukkan pertumbuhan sakarolitik (Leboffe dan Pierce, 2011).
Gambar 39. Pertumbuhan bakteri pada media KHT menunjukkan adanya

kekeruhan (Leboffe and Pierce, 2011).
Bakteri diisolasi pada media Reinforced Clostridial Agar (RCA) dilakukan

dengan inkubasi anaerobik suhu 37°C selama 48 jam. Pertumbuhan pada RCA
menunjukan adanya koloni spesifik. Medium RCA diketahui adalah medium
enrichment untuk mikroorganisme anaerob seperti Clostridia. Pepton, ekstrak daging
sapi, ekstrak ragi, pati, dan L-sistein menyediakan nutrisi dan faktor pendamping yang
dibutuhkan untuk pertumbuhan clostridia yang baik. Dekstrosa termasuk dalam media sebagai
sumber energi. Menghitamnya media merupakan bukti dugaan adanya Clostridia pereduksi
sulfit (Zimbro et al., 2009). Morfologi koloni diamati setelah diinkubasi selama
24 jam. Selanjutnya dilakukan isolasi dengan mengkultur sampel intestinum pada
Plat Agar Darah (PAD) yang diinkubasi secara anaerob. PAD digunakan untuk
57
membedakan bakteri berdasarkan karakteristik hemolitiknya. Beberapa spesies

kokus Gram positif menghasilkan eksotoksin yang disebut hemolisin, yang
mampu menghancurkan sel darah merah dan hemoglobin (Leboffe dan Pierce,
2011). Inkubasi PAD pada suhu 37°C selama 48 jam didalam kondisi anaerob,
koloni Clostridium perfrigens akan menunjukkan zona hemolisis ganda (Osman et
al., 2012).
Gambar 40. Koloni Clostridium perfringens pada media RCA dengan koloni
sirkular, diameter 2-4 mm, permukaan halus, berkilau, dan memiliki tepi ireguler
atau entire (Osman et al., 2012).
Gambar 41. Koloni Clostridium perfringens pada media PAD menunjukkan zona
ganda hemolisis (Markey et al., 2013).
Koloni yang diduga Clostridium perfringens kemudian dilakukan

pengecatan Gram untuk melihat morfologi selnya. Pengecatan Gram dilakukan
untuk isolat bakteri yang ditemukan. Pengecatan Gram adalah pewarnaan
diferensial dimana terjadi langkah penghilangan warna diantara penerapan dua
pewarnaan dasar. Pengecatan Gram memiliki banyak variasi, tetapi semuanya
bekerja dengan cara yang pada dasarnya sama. Primary stain yang digunakan
58
adalah kristal violet. Iodin ditambahkan sebagai mordan untuk meningkatkan

pewarnaan kristal violet dengan membentuk kompleks kristal violet-iodine. Lalu
diikuti dengan dekolorasi dan merupakan langkah paling penting dalam prosedur
ini. Sel Gram negatif dihilangkan warnanya oleh larutan (dengan komposisi
variabel umumnya alkohol atau asonon) sedangkan sel Gram positif tidak. Sel
Gram negatif dengan demikian dapat diwarnai dengan counter stain, safranin.
Setelah pewarnaan Gram berhasil, sel Gram positif tampak ungu dan sel Gram
negatif tampak merah muda kemerahan (Leboffe and Pierce, 2011). Clostridium
perfringens terlihat berwarna ungu, besar, dan berbentuk batang (Miah et al.,
2011).
Gambar 42. Koloni Clostridium perfringens dalam pengecatan Gram berbentuk

batang dan berwarna ungu (Gram positif). Sporanya jarang terlihat, tetapi
biasanya subterminal, besar, oval, dan sel induk membengkak (Markey et al.,
2013).
Uji Biokemis
Identifikasi bakteri dilakukan dengan uji biokemis, yaitu uji katalase, uji
urease, uji indol, uji Methyl Red (MR)-Voges Proskauer (VP), uji motilitas, uji
litmus milk, uji fermentasi karbohidrat (glukosa, sukrosa, manitol, maltosa, dan
laktosa), dan uji lesitinase dan lipase pada media Egg Yolk Agar (Miah et al.,
2011).
Uji katalase dilakukan dengan 3 ml larutan hidrogen peroksida 3%
dituangkan ke dalam tabung reaksi yang berisi 2 ml kaldu kultur. Organisme uji
yang tumbuh secara bersamaan dicelupkan ke dalam larutan dengan
mencampurkannya dengan batang kaca steril. Hasil pada Clostridium perfringens
59
adalah negatif dan tidak terbentuk gelembung (Miah et al., 2011). Ketika hidrogen
peroksida ditambahkan ke kultur katalase positif, gelembung gas oksigen segera
terbentuk. Jika tidak ada gelembung yang muncul, organisme tersebut negatif
katalase (Leboffe and Pierce, 2011).
Gambar 43. Uji katalase; dimana jika terbentuk gelembung menandakan bakteri
yang diuji adalah katalase positif (Leboffe and Pierce, 2011).
Uji urease dilakukan untuk mendeteksi bakteri yang mampu

menghidrolisis urea dengan enzim urease. Bakteri yang mampu menghidrolisis
urea dengan enzim urease akan mengubah warna media menjadi merah muda,
sedangkan bakteri yang tidak mampu mengubah urea dengan enzim urease akan
menyebabkan media tetap berwarna kuning (Leboffe dan Pierce, 2011). Hasil
pada Clostridium perfringens adalah negatif sehingga media tetap berwarna
kuning (Miah et al., 2011).
Gambar 44. Uji urease; bakteri positif urease akan mengubah warna media
menjadi warna merah muda (Leboffe and Pierce, 2011).
Uji indol digunakan untuk mengetahui kemampuan bakteri menghasilkan

molekul indol akibat adanya enzim tryptophanase. Reagen Kovacs yang berisi
dimethylaminobenzaldehide (DMABA), HCl, dan amil alkhohol selanjutnya akan
berikatan dengan molekul indole dan menghasilkan rose indole berbentuk cincin
merah. Hasil positif ditandai dengan adanya cincin berwarna merah di permukaan
60
media (Leboffe dan Pierce, 2011). Media tidak membentuk cincin merah setelah
penambahan reagen karena tidak memiliki enzim tryptophanase, maka Clostridium
perfringens memberi hasil negatif pada uji indol (Miah et al., 2011).
Gambar 45. Uji indol; hasil positif pada uji indol akan menunjukkan
terbentuknya cincin merah (Leboffe and Pierce, 2011).
Uji Methyl Red (MR) bertujuan mendeteksi organisme yang mampu

melakukan fermentasi asam campuran menggunakan buffer fosfat dalam media
dan menurunkan pH. Indikator methyl red akan berubah menjadi warna merah
pada pH 4,4 dan menjadi kuning pada pH 6,2. Hasil positif berwarna merah
setelah diinkubasi dan ditetesi dengan reagen MR, sedangkan hasil negatif akan
mengubah warna media menjadi kuning (Leboffe dan Pierce, 2011). Hasil pada
Clostridium perfringens adalah negatif sehingga media tetap berwarna kuning
(Miah et al., 2011).
Gambar 46. Uji Methyl Red dengan hasil positif media akan berwarna merah
(Leboffe and Pierce, 2011)
61
Uji Voges-Proskauer (VP) bertujuan mengetahui kemampuan bakteri yang

dapat memproduksi asetoin dari degradasi glukosa selama fermentasi α-2,3-
butanediol merubah larutan merah ketika penambahan VP reagents (α-Napthol
and KOH) dan reaksi oksidase asetoin pada diacetyl merubah nuklei guanidin dari
peptone. Reaksi positif akan menunjukkan warna merah, sedangkan reaksi negatif
tidak menunjukkan adanya perubahan warna (Leboffe dan Pierce, 2011). Hasil
pada Clostridium perfringens adalah negatif sehingga media tidak berubah warna
(Miah et al., 2011).
Gambar 47. Uji Voges-Proskauer; tidak adanya perubahan warna pada uji Voges-
Proskauer menandakan hasil negatif (Leboffe and Pierce, 2011).
Uji motilitas bertujuan untuk mengetahui kemampuan motilitas bakteri.

Pada uji motilitas menggunakan agar semisolid. Bakteri motil akan tumbuh
menyebar dari tusukan, sedangkan bakteri non motil tumbuh hanya pada bekas
tusukan (Leboffe and Pierce, 2011). Clostridium perfringens merupakan bakteri
non motil dan pertumbuhan bakteri hanya pada bekas tusukan. (Miah et al., 2011).
Gambar 48. Clostridium perfringens adalah bakteri non motil sehingga dalam uji
motilitas pertumbuhannya hanya pada bekas tusukan (Markey et al., 2013).
62
Litmus milk merupakan media yang terdiri dari susu skim dan indikator
pH azolitmin. Susu skim memberikan nutrisi untuk pertumbuhan, laktosa untuk
fermentasi, dan protein dalam bentuk kasein. Azolitmin (lakmus) berwarna merah
muda pada pH 4,5 dan biru pada pH 8,3. Di antara kedua ekstrem ini berwarna
ungu. Empat reaksi dasar terjadi dalam media ini, yaitu fermentasi laktosa,
reduksi lakmus, koagulasi kasein, dan hidrolisis kasein. Kombinasi reaksi ini
menghasilkan berbagai hasil, yang masing-masing dapat digunakan untuk
membedakan bakteri. Fermentasi laktosa mengasamkan media dan mengubah
lakmus menjadi merah muda. Akumulasi asam dapat menyebabkan kasein
mengendap dan membentuk acid clot. Acid clot memadatkan media dan dapat
tampak merah muda atau putih dengan pita merah muda di bagian atas tergantung
pada status oksidasi-reduksi lakmus. Litmus yang direduksi berwarna putih dan
litmus teroksidasi berwarna ungu. Celah atau retakan pada bekuan adalah bukti
produksi gas. Produksi gas berat yang memecah clot disebut stormy fermentation
(Leboffe dan Pierce, 2011). Clostridium perfringens pada uji litmus milk
menunjukkan hasil media berubah warna menjadi merah muda, litmus berwarna putih, dan
terbentuk clot yang merusak sebagian media (stormy-clot) (Markey et al., 2013).
Gambar 49. Uji Litmus :Hasil uji litmus milk untuk Clostridium perfringens
adalah media berwarna pink, litmus putih, dan terbentuk stormy-clot (Markey et
al., 2013).
Uji fermentasi karbohidrat bertujuan untuk mengetahui kemampuan

63
bakteri dalam memfermentasikan suatu jenis karbohidrat atau gula spesifik. Uji
fermentasi karbohidrat menggunakan satu jenis karbohidrat dalam media cair
dengan indikator warna phenol red. Produksi asam dari fermentasi gula akan
menurunkan pH dibawah netral sehingga media berubah warna menjadi kuning
dan akan berubah warna menjadi merah akibat hidrolisis pepton (Leboffe dan
Pierce, 2011). Hasil pemeriksaan Clostridium perfringens mampu memfermentasi
glukosa, laktosa, sukrosa, dan maltosa sehingga pada media tersebut warna
berubah menjadi kuning (Miah et al., 2011).
Gambar 50. Uji fermentasi karbohidrat menggunakan berbagai macam jenis

karbohidrat (Leboffe and Pierce, 2011).
Egg Yolk Agar bertujuan untuk mendeteksi produksi lesitinase, aktivitas

lipase, dan proteolitik. Lesitinase mendegradasi lesitin yang ada di kuning telur,
menghasilkan endapan buram yang tidak larut dalam media pertumbuhan di
sekitarnya. Lipase memecah lemak bebas yang ada dalam kuning telur,
menyebabkan terbentuknya kemilau “minyak di atas air” yang berwarna-warni di
permukaan koloni. Proteolisis diindikasikan oleh zona bening di media sekitar
pertumbuhan (Zimbro et al., 2009). Koloni Clostridium perfringens yang tumbuh
pada media disekitarnya menampilkan endapan putih yang membesar yang
distimulasi oleh produksi enzim lesitinase, namun tidak memproduksi enzim
lipase (Markey et al., 2013).
64
Gsmbar 51. Clostridium perfringens pada Egg Yolk Agar (Zimbro et al., 2009).
Tabel 2. Hasil isolasi dan identifikasi bakteri Clostridium perfringens (Leboffe

dan Pierce, 2011; Miah et al., 2011; Markey et al., 2013).
Uji Hasil Interpretasi
KHT + Pertumbuhan bakteri ditunjukkan dengan
adanya kekeruhan media, gelembung gas,
dan menghancurkan partikel hati.
RCA + Bakteri tumbuh dan media menghitam.
PAD + Bakteri tumbuh dan terbentuk zona
hemolisis ganda.
Pengecatan + Bakteri tumbuh berwarna ungu dan
Gram berbentuk batang.
Uji katalase - Bakteri tidak menghasilkan enzim
katalase.
Uji urease - Bakteri tidak mampu menghidrolisis urea
dengan enzim urease.
Uji indol - Bakteri tidak memiliki enzim
tryptophanase.
Uji MR - Bakteri tidak mampu melakukan
fermentasi asam campuran.
Uji VP - Bakteri tidak mampu memproduksi asetoin
dari degradasi glukosa selama fermentasi
α-2,3-butanediol.
Uji motilitas + Bakteri tumbuh hanya pada bekas tusukan
menandakan bakteri non motil.
Uji litmus milk + Bakteri memfermentasi laktosa, mereduksi
litmus, dan memproduksi gas.
Uji fermentasi + Bakteri mampu memfermentasikan
karbohidrat glukosa, laktosa, sukrosa, dan maltosa.
Egg Yolk Agar + Bakteri memproduksi enzim lesitinase,
namun tidak memproduksi enzim lipase.
65
Polymerase Chain Reaction (PCR)

Peneguhan diagnosa laboratoris yang lebih sensitif dan spesifik dapat
dilakukan dengan uji Polymerase Chain Reaction (PCR). Multipleks PCR
digunakan untuk mendeteksi keberadaan gen yang mengkode alfa-toksin (cpa),
beta-toksin (cpb), epsilon-toksin (etx), iotatoxin (iap) dan CPE (cpe). Setiap PCR
memiliki total volume 25 μl, yang mengandung 5 μl DNA sebagai template 10
picomole (pmol) dari masing-masing primer dan campuran master 1 × PCR,
dibuat hingga 25 μl dengan air bebas DNAse-RNAse. Kondisi amplifikasi adalah:
denaturasi awal pada 94°C selama 5 menit, diikuti oleh 35 siklus 94° C selama 1
menit, 55°C untuk 1 menit dan 72°C selama 1 menit. Perpanjangan akhir langkah
pada 72°C selama 10 menit diikuti. Produk amplifikasi adalah dielektroforesis
dalam gel agarosa 1,5% yang mengandung 0,5 x TBE (Trisborat 35
etylenediamine tetraacetic acid) pada 70 V selama 60 menit dan divisualisasikan
di bawah sinar ultraviolet (Ghoneim and Hamza, 2017). Secara singkat, PCR
dilakukan dalam campuran reaksi 25 μL yang mengandung 10x Dream Taq buffer
PCR (MBI Fermentas), 0,2 mM dNTP, 1,25 unit Dream Taq DNA Polymerase
(MBI Fermentas), 10 pmol dari masing-masing primer universal. Elektroforesis
gel agarosa dilakukan untuk melihat hasil dan ekstraksi gel menggunakan kit
ekstraksi Gel cepat QIA dilakukan dengan menggunakan instruksi pabrik
(Thomas et al., 2014).
Multipleks PCR telah banyak dikembangkan untuk mendeteksi gen yang
mengkode empat racun utama yang diproduksi oleh Clostridium perfringens tipe
A hingga E. Selain itu, deteksi gen yang mengkode enterotoksin (cpe) dan beta2-
toksin (cpb2) memungkinkan subtipe bakteri (Osman et al., 2012). Penyelidikan
hibridisasi fluoresensi berlabel ganda (TaqMan®) berdasarkan uji PCR multipleks
real-time dikembangkan untuk mendeteksi gen toksin alfa (cpa), beta (cpb), iota
(ia), epsilon (etx), beta2 (cpb2) dan enterotoksin (cpe) langsung dari kotoran
ternak. NetB pembentuk pori-pori telah dilaporkan sebagai faktor virulensi pada
strain yang dapat menyebabkan enteritis nekrotik (Keyburn et al., 2008). Gen
NetB dapat diidentifikasi oleh PCR. Polimorfisme panjang fragmen teramplifikasi
(AFLP) dan elektroforesis gel lapangan berdenyut (PFGE) ditemukan sama-sama
66
cocok untuk subtipe isolat Clostridium perfringens yang berasal dari unggas.
Multiple-locus variable-number tandem repeat analysis (MLVA) juga telah
dideskripsikan sebagai alat yang efisien untuk mengetik strain Clostridium
perfringens dan dapat digunakan dalam studi epidemiologi (Osman et al., 2012).
Gambar 52. PCR menunjukkan hasil CPE. Kehadiran band 2,1 kb

menggambarkan kehadiran gen cpe kromosomal sementara kehadiran dari pita 3,3
kb akan mengindikasikan plasmid-borne gen cpe pada Clostridium perfringens
(Loh et al., 2008).
Gambar 53. Gel hasil elektroforesis dari pengetikan toksin Clostridium

perfringens oleh Multipleks PCR: Jalur 1 = 50 bp tangga (BR biochem life
sciences), 2 dan 5 = kontrol negatif (replikasi), 3 dan 4 = sampel positif
(replikasi), 6 = kontrol positif (Thomas et al., 2014).
Diferensial Diagnosa
Nekrotik enteritis (NE) yang disebabkan oleh Clostridium perfringens
adalah salah satu penyakit enterik yang paling umum pada ayam dan kalkun.
Namun, beberapa agen bakteri, parasit dan virus lainnya dapat menyebabkan
tanda-tanda klinis, lesi kasar, dan mikroskopis pada unggas yang sangat mirip
67
dengan NE. Diagnosis banding utama untuk Clostridium perfringens meliputi

bakteri (Clostridium colinum, Clostridium sordellii, Clostridium difficile,
Pasteurella multocida, Brachyspira spp.), parasit (Eimeria spp., Histomonas
meleagridis), dan virus (Duck Herpesvirus tipe 1, Avian Paramyxovirus tipe 1).
Konfirmasi diagnosis penyakit ini membutuhkan identifikasi agen etiologi dengan
metode morfologi, kultural, dan atau molekuler (Uzal et al., 2016).
Clostridium colinum
Etiologi
Ulseratif enteritis (UE) adalah penyakit yang disebabkan oleh Clostridium
colinum, bakteri Gram positif berbentuk batang, bersporulasi, dan anaerobik.
Penyakit ini paling sering dikenali pada burung puyuh muda, meskipun kasus juga
terjadi pada ayam, kalkun, dan beberapa spesies unggas lainnya. Ditularkan
melalui rute fekal-oral dan menghasilkan UE akut, sub-akut atau kronis, dan
cukup jarang colitis. UE paling sering terjadi pada individu muda dari semua
spesies (ayam 4-12 minggu; kalkun 3-8 minggu; puyuh 4-12 minggu) dan kasus
puyuh dewasa jarang diamati (Swayne et al., 2020).
Clostridium colinum adalah bakteri Gram-positif, berbentuk batang,
muncul secara tunggal sebagai batang lurus atau sedikit melengkung, 3-4μm x
1μm dengan ujung membulat, dan merupakan bakteri motil. Sporulasi jarang
terjadi pada media buatan, tetapi jika ada spora berbentuk oval dan sub terminal.
Sel sporogenik jauh lebih panjang dan lebih tebal daripada sel yang tidak
berspora. Jika diinokulasi pada pre-reduced plat dengan bahan dari lesi dan
diinkubasi secara anaerob selama 24-48 jam pada suhu 35°C-42°C, maka koloni
yang dihasilkan berdiameter 1-2 mm, berwarna putih, melingkar, cembung, dan
semi transparan dengan tepi filamentous (Swayne et al., 2020).
Patogenesis
Clostridium colinum ditularkan melalui konsumsi pakan, air, litter atau
bahan lain yang terkontaminasi feses. Ketika kasus UE terjadi, spora Clostridium
colinum mencemari tempat yang, setelah wabah penyakit, diasumsikan tetap
terkontaminasi selama berbulan-bulan. Baik unggas dengan infeksi aktif maupun
68
unggas yang sembuh dari penyakit menjadi carrier dan mengeluarkan organisme
tersebut melalui kotorannya. Bukti anekdotal menunjukkan bahwa hal tersebut
adalah salah satu faktor terpenting dalam penularan penyakit ini. Telah
dikemukakan bahwa lalat yang memakan kotoran yang terkontaminasi dapat
menyebabkan infeksi di tempat (Swayne et al., 2020).
Setelah infeksi oral, Clostridium colinum menempel pada epitel usus,
menghasilkan lesi peradangan dan borok di usus halus dan, kadang-kadang, kolon
proksimal. Organisme kemudian dapat bermigrasi ke hati melalui sirkulasi portal
dna menghasilkan foki nekrosis hati yang sering terlihat pada kasus UE. Setelah
inokulasi eksperimental, penyakit akut berkembang dan disertai kematian unggas
dalam 1-3 hari. Perjalanan penyakit dalam kelompok umumnya sekitar 3 minggu,
dengan kematian puncak terjadi 5-14 hari setelah kasus awal. Sangat sedikit yang
diketahui tentang dasar virulensi Clostridium colinum. Peran toksin dalam
patogenesis UE telah disarankan, tetapi tidak dibuktikan. Genom Clostridium
colinum belum dikarakterisasi (Swayne et al., 2020).
Clostridium colinum ada dimana-mana dan diekskresikan dalam jumlah
besar melalui kotoran ternak yang terkena, yang merupakan sumber infeksi
penting. Spora tersebut menghasilkan kontaminasi yang terus-menerus pada
tempat setelah wabah. Faktor yang mempengaruhi tampaknya memainkan peran
penting dalam produksi penyakit. termasuk koksidiosis, faktor imunosupresif
seperti penyakit infeksi bursal, virus anemia pada ayam, kepadatan kandang yang
berlebihan, dan kebersihan kandang yang tidak memadai. Memelihara ayam pada
lantai kawat telah dilaporkan sebagai tindakan pencegahan (Pattison et al., 2008).
Gejala Klinis
Gejala dari UE adalah diare yang awalnya berair, tetapi bisa menjadi
hemoragik. Saat UE berkembang, unggas yang terinfeksi menjadi lesu, bungkuk
dengan mata sebagian tertutup, dan bulu kusam dan kusut. Kekurusan yang
mencolok dengan atrofi otot dada terlihat pada burung yang terkena dampak
selama seminggu atau lebih. Pada penyakit akut dapat terjadi peningkatan
mortalitas tanpa tanda-tanda yang jelas. Puyuh muda bisa mati 100% dalam
beberapa hari. Tingkat kematian pada ayam biasanya berkisar antara 2% hingga
69
10% (Pattison et al., 2008; Swayne et al., 2020).

Diagnosa
Diagnosis dugaan dapat didasarkan pada tanda-tanda klinis (peningkatan
mortalitas, biasanya dengan diare hemoragik), lesi mikroskopis dan kasar,
termasuk ulserasi usus dan nekrosis, serta nekrosis hati multifokal. Pengamatan
adanya bakteri Gram positif berbentuk batang yang besar biasanya dengan spora
subterminal dan beberapa spora bebas pada apusan hati yang diwarnai dengan
pengecatan Gram mampu menambah kepastian diagnosis dugaan ini. Diagnosis
akhir, bagaimanapun, harus didasarkan pada deteksi Clostridium colinum melalui
kultur atau PCR dari organ usus, hati, atau limpa (Cooper et al., Swayne et al.,
2020).
Pengambilan Sampel
Isolasi bakteri menggunakan koleksi sampel organ hati yang mengalami
nekrosis pada ayam menderita diare serta menunjukkan lesi tipikal ulseratif
enteritis pascamortem. Sampel dapat berasal dari organ usus, hati, atau limpa.
Organisme ini sering hadir di hati dalam bentuk yang kurang lebih murni, maka
isolasi dari hati lebih disukai daripada dari usus. Sampel organ diambil dan
dimasukkan ke dalam tabung konikel steril dan disimpan di dalam freezer (-20oC)
(Swayne et al., 2020).
Isolasi dan Identifikasi
Isolasi Clostridium colinum membutuhkan media yang diperkaya dan
lingkungan anaerobik. Koloni yang akan dihasilkan berdiameter 1-2 mm,
berwarna putih, melingkar, cembung, mengkilap, halus, dan semi-translusen
dengan tepi berserabut. Organisme ini juga dapat tumbuh pada agar darah yang
telah direduksi sebelumnya diinkubasi secara anaerob dan hasilnya adalah alfa-
hemolisis (Swayne et al., 2020). Selain itu, bakteri juga dapat diisolasi pada media
Reinforced Clostridial Agar (RCA) dilakukan dengan inkubasi anaerobik suhu
37°C selama 48 jam. Pertumbuhan pada RCA menunjukan adanya koloni spesifik
(Zimbro et al., 2009).
70
Gambar 54. Media Plat Agar Darah (PAD) (Leboffe and Pierce, 2011).
Gambar 55. Media Reinforced Clostridial Agar (RCA) (Osman et al., 2012).
Kemudian dapat dilakukan pula pengecatan Gram. Jaringan hati nekrotik

dapat dihancurkan antara 2 slide, difiksasi dengan panas, dan diwarnai dengan
metode Gram. Setelah metode pengecatan selesai, lalu diamati di bawah
mikroskop. Bakteri berbentuk batang, besar, tercat ungu (Gram positif) memiliki
spora subterminal dan spora bebas dapat dilihat, walaupun terkadang sporanya
tidak terlihat (Swayne et al., 2020).
Gambar 56. Hasil pengecatan Gram pada Clostridium sp. terlihat bakteri
berbentuk batang dan tercat ungu (Gram positif) (Leboffe and Pierce, 2011).
Uji Biokemis
Uji katalase dilakukan untuk mengetahui aktivitas enzim katalase yang
71
dimiliki oleh bakteri yang mampu memecah H2O2. Ketika hidrogen peroksida
ditambahkan ke kultur katalase-positif, gelembung gas oksigen segera terbentuk.
Jika tidak ada gelembung yang muncul, organisme tersebut negatif katalase
(Leboffe and Pierce, 2011). Hasil pada Clostridium colinum adalah negatif yang
berarti bakteri tidak memproduksi enzim katalase dan tidak terbentuk gelembung
Gambar 57. Uji katalase dimana jika terbentuk gelembung menandakan bakteri
yang diuji adalah katalase positif (Leboffe and Pierce, 2011).
Uji urease dilakukan untuk mendeteksi bakteri yang mampu

menghidrolisis urea dengan enzim urease. Bakteri yang mampu menghidrolisis
urea dengan enzim urease akan mengubah warna media menjadi merah muda,
sedangkan bakteri yang tidak mampu mengubah urea dengan enzim urease akan
menyebabkan media tetap berwarna kuning (Leboffe dan Pierce, 2011).
Clostridium colinum tidak memproduksi enzim urease sehingga media tetap
berwarna kuning (Swayne et al., 2020).
Gambar 58. Bakteri positif urease akan mengubah warna media menjadi warna
merah muda (Leboffe and Pierce, 2011).
Uji indol digunakan untuk mengetahui kemampuan bakteri menghasilkan

molekul indol akibat adanya enzim tryptophanase. Reagen Kovacs yang berisi
dimethylaminobenzaldehide (DMABA), HCl, dan amil alkhohol selanjutnya akan
72
berikatan dengan molekul indole dan menghasilkan rose indole berbentuk cincin
merah. Hasil positif ditandai dengan adanya cincin berwarna merah di permukaan
media (Leboffe dan Pierce, 2011). Hasil pada Clostridium colinum adalah negatif
dan pada media tidak terbentuk cincin merah (Swayne et al., 2020).
Gambar 59. Hasil positif pada uji indol akan menunjukkan terbentuknya cincin
merah (Leboffe and Pierce, 2011).
Uji Methyl Red (MR) bertujuan mendeteksi organisme yang mampu

melakukan fermentasi asam campuran menggunakan buffer fosfat dalam media
dan menurunkan pH. Indikator methyl red akan berubah menjadi warna merah
pada pH 4,4 dan menjadi kuning pada pH 6,2. Hasil positif berwarna merah
setelah diinkubasi dan ditetesi dengan reagen MR, sedangkan hasil negatif akan
mengubah warna media menjadi kuning (Leboffe dan Pierce, 2011). Hasil pada
Clostridium colinum adalah negatif sehingga media tetap berwarna kuning
Gambar 60. Uji Methyl Red dengan hasil positif media akan berwarna merah
(Leboffe and Pierce, 2011).
73
Uji Voges-Proskauer (VP) bertujuan mengetahui kemampuan bakteri yang

dapat memproduksi asetoin dari degradasi glukosa selama fermentasi α-2,3-
butanediol merubah larutan merah ketika penambahan VP reagents (α-Napthol
and KOH) dan reaksi oksidase asetoin pada diacetyl merubah nuklei guanidin dari
peptone. Reaksi positif akan menunjukkan warna merah, sedangkan reaksi negatif
tidak menunjukkan adanya perubahan warna (Leboffe dan Pierce, 2011). Hasil
pada Clostridium colinum adalah negatif sehingga media tidak berubah warna
Gambar 61. Tidak adanya perubahan warna pada uji Voges-Proskauer

menandakan hasil negatif (Leboffe and Pierce, 2011).
Uji motilitas bertujuan untuk mengetahui kemampuan motilitas bakteri.

Bakteri motil akan tumbuh menyebar dari tusukan, sedangkan bakteri non motil
tumbuh hanya pada bekas tusukan (Leboffe and Pierce, 2011). Clostridium
colinum merupakan bakteri motil sehingga pertumbuhan bakteri menyebar dari
bekas tusukan (Swayne et al., 2020).
Gambar 62. Clostridium colinum adalah bakteri motil sehingga dalam uji
motilitas pertumbuhannya menyebar dari area bekas tusukan (Swayne et al.,
2020).
74
Litmus milk merupakan media yang terdiri dari susu skim dan indikator
pH azolitmin. Susu skim memberikan nutrisi untuk pertumbuhan, laktosa untuk
fermentasi, dan protein dalam bentuk kasein. Azolitmin (litmus) berwarna merah
muda pada pH 4,5 dan biru pada pH 8,3. Di antara kedua ekstrem ini berwarna
ungu. Empat reaksi dasar terjadi dalam media ini, yaitu fermentasi laktosa,
reduksi litmus, koagulasi kasein, dan hidrolisis kasein. Kombinasi reaksi ini
menghasilkan berbagai hasil, yang masing-masing dapat digunakan untuk
membedakan bakteri. Fermentasi laktosa mengasamkan media dan mengubah
litmus menjadi merah muda. Akumulasi asam dapat menyebabkan kasein
mengendap dan membentuk acid clot. Acid clot memadatkan media dan dapat
tampak merah muda atau putih dengan pita merah muda di bagian atas tergantung
pada status oksidasi-reduksi litmus. Litmus yang direduksi berwarna putih dan
litmus teroksidasi berwarna ungu. Celah atau retakan pada bekuan adalah bukti
produksi gas. Produksi gas berat yang memecah clot disebut stormy fermentation
(Leboffe dan Pierce, 2011). Clostridium colinum pada uji litmus milk
menunjukkan hasil media tidak berubah dan kasein tidak dicerna, tetapi bakteri ini
memproduksi gas sehingga ada retakan pada media (Swayne et al., 2020).
Gambar 63. Uji litmus milk dengan berbagai macam hasil dan interpretasi
(Leboffe dan Pierce, 2011).
Uji fermentasi karbohidrat bertujuan untuk mengetahui kemampuan

bakteri dalam memfermentasikan suatu jenis karbohidrat atau gula spesifik. Uji
fermentasi karbohidrat menggunakan satu jenis karbohidrat dalam media cair
dengan indikator warna phenol red. Produksi asam dari fermentasi gula akan
menurunkan pH dibawah netral sehingga media berubah warna menjadi kuning
dan akan berubah warna menjadi merah akibat hidrolisis pepton (Leboffe dan
75
Pierce, 2011). Hasil pemeriksaan Clostridium colinum mampu memfermentasi

glukosa, sukrosa, dan maltosa sehingga pada media tersebut warna berubah
menjadi kuning (Markey et al., 2013; Swayne et al., 2020).
Gambar 64. Uji fermentasi karbohidrat menggunakan berbagai macam jenis

karbohidrat (Leboffe and Pierce, 2011).
Egg Yolk Agar bertujuan untuk mendeteksi produksi lesitinase, aktivitas

lipase, dan proteolitik. Lesitinase mendegradasi lesitin yang ada di kuning telur,
menghasilkan endapan buram yang tidak larut dalam media pertumbuhan di
sekitarnya. Lipase memecah lemak bebas yang ada dalam kuning telur,
menyebabkan terbentuknya kemilau “minyak di atas air” yang berwarna-warni di
permukaan koloni. Proteolisis diindikasikan oleh zona bening di media sekitar
pertumbuhan (Zimbro et al., 2009). Clostridium colinum diketahui tidak
memproduksi enzim lesitinase dan enzim lipase, maka pada media ini tidak terjadi
perubahan apapun (Swayne et al., 2020).
Gsmbar 65. Media Egg Yolk Agar (Zimbro et al., 2009).

76
Tabel 3. Hasil isolasi dan identifikasi bakteri Clostridium colinum (Markey et al.,
2013; Swayne et al., 2020).
Uji Hasil Interpretasi
PAD + Bakteri tumbuh dan terbentuk zona
hemolisis alfa.
RCA + Bakteri tumbuh dan media menghitam.
Pengecatan + Bakteri tercat ungu dan berbentuk batang,
Gram memiliki spora subterminal, tetapi jarang
terlihat.
Uji katalase - Bakteri tidak menghasilkan enzim
katalase.
Uji urease - Bakteri tidak mampu menghidrolisis urea
dengan enzim urease.
Uji indol - Bakteri tidak memiliki enzim
tryptophanase.
Uji MR - Bakteri tidak mampu melakukan
fermentasi asam campuran.
Uji VP - Bakteri tidak mampu memproduksi asetoin
dari degradasi glukosa selama fermentasi
α-2,3-butanediol.
Uji motilitas + Bakteri tumbuh menyebar menandakan
bakteri motil.
Uji litmus milk + Adanya retakan menandakan bakteri
memproduksi gas.
Uji fermentasi + Bakteri hanya dapat memfermentasi
karbohidrat glukosa, sukrosa, dan maltose.
Egg Yolk Agar - Bakteri tidak memproduksi enzim
lesitinase dan enzim lipase.
Polymerase Chain Reaction (PCR)

Campuran PCR untuk Clostridium colinum disiapkan dalam volume total
50 μL yang mengandung 25 μL campuran utama (5 unit / μL Taq polimerase, 400
mM deoksinukleotida campuran 5P-trifosfat, dan 3 mM MgCl2), 18 μL air bebas
nuklease (Promega Corp., Madison, WI), 1 μL (50 pmol / μL) dari masing-masing
primer hilir dan hulu (DNA Alfa; Tabel 1), dan 5 μL template DNA. Amplifikasi
reaksi berantai polimerase dilakukan di thermal cycler DNA Engine (Bio-Rad
Laboratories Ltd., Hercules, CA) (Roussan et al., 2009). Temperatur untuk siklus
adalah 94o C selama 4 menit untuk mendenaturasi DNA diikuti oleh 25 siklus
94oC selama 1 menit, 60oC selama 1 menit, dan 72oC selama 1 menit.
Perpanjangan akhir dilakukan pada 72oC selama 4 menit (Bano et al., 2008).
77
Strain Clostridium colinum (ATCC 27770) digunakan sebagai kontrol positif

untuk ekstraksi DNA dan PCR. Kontrol negatif (air bebas nuklease) juga
digunakan dalam setiap proses. Produk PCR dielektroforesis pada gel agarosa
1,5% dalam buffer Tris-asetat-EDTA (40 mM Tris dan 2 mM EDTA, dengan nilai
pH 8,0) yang mengandung etidium bromida (Pro-mega Corp.) untuk 45 menit
pada 100 V dan divisualisasikan di bawah sinar UV (AlphaImager,
AlphaInnotech, San Leandro, CA) (Roussan et al., 2009). Amplikon PCR
dibersihkan dengan Minielute PCR Purification Kit (Qiagen) sesuai dengan
instruksi pabrik dan diurutkan menggunakan ABI Genetic Analyzer (Applied
Biosystems). Urutan kemudian dikonfirmasi dengan melakukan analisis BLAST
(Bano et al., 2008).
Batas deteksi PCR untuk Clostridium colinum adalah 10 cfu/mL tanpa
adanya feses, sedangkan keberadaan feses (isi usus) menurunkan sensitivitas PCR
terhadap batas deteksi 1,6 × 104 cfu/g feses. Kehadiran inhibitor PCR dalam tinja
secara tradisional dikaitkan dengan sensitivitas PCR yang lebih rendah untuk
deteksi langsung. Oleh karena itu, tingkat deteksi yang rendah dapat ditingkatkan
secara signifikan dengan penerapan metode ini untuk sampel yang diperkaya
daripada deteksi langsung dari sampel tinja (Bano et al., 2008).
Gambar 66. PCR Clostridium colinum. Jalur M = 100 bp sampai 1,5 kbp ladder
marker DNA; jalur 1 = kontrol positif Clostridium colinum (positif; pita pada 905
bp); jalur 2 = kontrol negatif; jalur 3 sampai 4 = sampel positif (positif; pita pada
905 bp); jalur 5 dan 6 = sampel negatif (Roussan et al., 2009).
78
Diferensial Diagnosa
Penyakit serupa yang harus dibedakan dari UE termasuk koksidiosis,
enteritis nekrotik oleh Clostridium perfringens, dan histomoniasis. Seringkali,
koksidiosis pada ayam, kalkun, dan burung mendahului atau terjadi bersamaan
dengan UE. Kedua penyakit tersebut mungkin hadir dalam spesimen yang sama
atau berbeda yang diajukan untuk diagnosis. Diagnosis banding antara koksidiosis
dan UE harus dibuat karena obat untuk setiap penyakit berbeda. Lebih lanjut,
penyakit ini dapat terjadi secara bersamaan, memerlukan penggunaan dua obat
yang berbeda (Swayne et al., 2020).
Histomoniasis juga berhubungan dengan lesi di seka dan hati, tetapi tidak
menyebabkan lesi usus halus. Pemeriksaan histologis dari seka dan hati akan
menunjukkan histomonad. Coccidiosis dapat mendahului enteritis ulseratif, atau
kedua kondisi dapat terjadi secara bersamaan. Koksidiosis dan enteritis ulseratif
memerlukan pengobatan yang berbeda. Clostridium perfringens dan Clostridium
colinum dapat muncul bersamaan pada unggas yang sakit. Enteritis nekrotik dan
ulseratif memiliki beberapa lesi usus serupa yang dapat mempersulit diagnosis,
dan kemungkinan bahwa kedua organisme penting dalam wabah tidak dapat
dikesampingkan (Pattison et al., 2008).
KAJIAN PATOLOGI KLINIK
Clostridium sp.
Tabel 4. Gambaran darah dan perubahan kimia klinik akibat infeksi Clostridium
sp. pada ayam broiler (Gallus domesticus) (El-Deen et al., 2019; Ibrahim et al.,
2017).
Parameter Nilai Normal Hasil Keterangan
Pemeriksaan
6 2.5-4.3 2.0 ± 0.5 Menurun
Eritrosit (10 /mL)
Hb (g/dL) 7.0-13 6.3 ± 0.9 Menurun
PCV (%) 22-35 19.14 ± 0.7 Menurun
MCV (fl) 100-140 83.26 ± 3.4 Menurun
MCH (pg) 33-47 28.49 ± 1.6 Menurun
MCHC (g/dL) 26-34 23.81 ± 18 Menurun
Leukosit (103/mL) 12-13 14.4 ± 0.9 Meningkat
Limfosit (103/mL) 7-17.5 2.0 ± 0.6 Menurun
Neutrofil (103/mL) 1.5-3.5 3.90 ± 0.3 Meningkat
Monosit (103/mL) 0.15-2 2.4 ± 0.4 Meningkat
Eosinofil (103/mL) 0.1 1.2 ± 0.3 Meningkat
TPP (g/dL) 3.3-5.5 3.02 Menurun
Albumin (g/dL) 1.44 1.01 ± 0.01 Menurun
Fibrinogen (g/dL) 0.1-0.41 0.3 Normal
AST (U/L) 48.60 85.00 ± 2.00 Meningkat
ALT (U/L) 9.22 20.16 ± 0.46 Meningkat
Analisis Interpretasi
Hasil pemeriksaan darah menunjukkan ayam tersebut memiliki jumlah
eritrosit dan hemoglobin dibawah normal sehingga mengalami anemia. Anemia
adalah kondisi penurunan jumlah eritrosit, hemoglobin atau keduanya dalam
sirkulasi darah. Anemia dapat disebabkan karena hewan mengalami perdarahan
baik akibat infeksi mikroorganisme ataupun karena trauma, terjadi peningkatan
destruksi eritrosit atau penurunan lifespan eritrosit, depresi sumsum tulang,
defisiensi nutrisi, dan juga keracunan agen kimia (Salasia dan Hariono, 2010).
Pada kasus ini dapat diamati anemia tipe hemolitik dan dapat dikaitkan dengan
aksi toksin α yang menyebabkan pemecahan fosfolipid membran eritrosit dan
menyebabkan hemolisis dengan merusak eritrosit yang beredar. Anemia hemolitik
yang dikaitkan dengan kerusakan eritrosit yang berlebihan mungkin disebabkan
oleh berbagai penyakit, seperti infeksi bakteri Clostridium sp. Selain itu,
bakteremia Clostridium sp. umumnya berhubungan dengan hemolisis
79
80
intravaskuler. Anoreksia yang terjadi bisa disebabkan karena stress atau depresi
yang dapat mengakibatkan ayam mengalami defisiensi nutrisi sehingga memicu
anemia. Selain itu, adanya hemoragi multifokal pada mukosa usus dan sekum
ayam juga menjadi faktor pemicu terjadinya anemia. Penurunan PCV dipengaruhi
oleh jumlah dan ukuran eritrosit, serta perubahan volume plasma yang tidak
mempengaruhi massa sel total. Nilai PCV normal rata-rata pada ayam berkisar
22%-35%. Nilai PCV kurang dari 22% mengindikasikan anemia (Campbell,
2015). Hasil tersebut dapat dikaitkan dengan sekuestrasi zat besi dalam makrofag
sumsum tulang dan hepatosit selama infeksi, sehingga tidak tersedia untuk
digunakan dalam sintesis hemoglobin, yang mengakibatkan penghambatan
eritropoiesis.
Anemia disertai dengan nilai MCV dan MCHC yang menurun
menunjukkan bahwa ayam mengalami anemia mikrositik-hipokromik yang
termasuk dalam anemia regeneratif. Anemia ini dapat terjadi akibat defisiensi Fe,
termasuk seperti kurang diet Fe, adanya perdarahan kronis, dan defek-defek dalam
kebutuhan dan penyimpanan Fe. Mekanisme anemianya belum tegas dapat
dijelaskan, tetapi ada hipotesa mengatakan bahwa akibat proses inflamasi banyak
zat besi (Fe) beralih ke jaringan sehingga tidak dapat dipakai dalam sintesa Hb
(Salasia dan Hariono, 2010). Pada kasus ini dapat terjadi karena banyaknya
inflamasi dan peradangan pada mukosa usus, lumen usus, dan organ hati. Hal ini
juga berhubungan secara proporsional dengan derajat keparahan infeksi.
Gambar 67. Hemogram unggas yang mengalami anemia, terlihat adanya

bentukan sel darah merah yang lebih kecil (mikrositik) (Samour, 2016).
Berdasarkan hasil pemeriksaan, ayam mengalami leukositosis yang

81
disertai dengan limfopenia, neutrofilia, monositosis, dan eosinofilia. Leukositosis

merupakan keadaan dimana terjadi peningkatan jumlah sel darah putih di atas
batas normal, baik itu semua jenis sel darah putih atau hanya sebagian jenis.
Peningkatan ini dapat terjadi karena adanya respon inflamasi atau infeksi, selain
itu perubahan suhu, anestesi, obat, perubahan hormon, dan toxin juga dapat
menyebabkan leukositosis (McCan et al., 2010). Dalam hal ini, ayam tersebut
mengalami leukosistosis karena infeksi bakteri Clostridium sp. menyebabkan
peradangan yang memicu produksi sel leukosit, heterofil dan monosit untuk
fagositosis mikroorganisme infektif dan sel-sel yang rusak. Regulasi produksi sel
neutrofil diatur oleh granulopoietin sebagai Colony Stimulating Factor (CSF).
CSF ini diproduksi oleh makrofag sunsum tulang. Sintesis ini distimulai oleh
adanya produksi bakterial (Salasia dan Hariono, 2010). Neutrofilia yang terjadi
pada kasus ini berhubungan dengan proses fagositosis bakteri dan respon
inflamasi akut karena mediator inflamasi merangsang pergerakan neutrofil selama
inflamasi akut. Peningkatan monosit atau monositosis merupakan peningkatan
jumlah sel monosit di dalam sirkulasi darah. Monositosis dikaitkan dengan proses
inflamasi kronis, menunjukkan aktivitas fagosit dan bermigrasi ke dalam jaringan
untuk menjadi makrofag. Monositosis terjadi akibat dari keradangan yang
berlangsung secara kronis dan nekrosis pada jaringan membuat sel darah ini
bekerja membersihkan debris sel mati (Salasia dan Hariono, 2010). Pada kasus
ini, nekrosis pada limpa dan hati dapat memicu terjadinya monositosis.
Peningkatan eosinofil atau eosinofilia merupakan peningkatan jumlah sel
eosinofil di dalam sirkulasi darah. Kejadian eosinofilia dimungkinkan karena
adanya interaksi antigen-antibody (IgE atau yang ekuivalen) dalam jaringan yang
banyak mengandung mast cell seperti kulit dan traktus gastrointestinal. Sel
eosinofil akan tertarik pada peristiwa hipersensitivitas, misalnya kasus alergik dan
reaksi anafilaksis. Mediator kimiawi (histamin) dibebaskan oleh mast cell yang
telah sensitif terhadap IgE (antibodi ekuivalen) selama kontak dengan antigen
spesifik. Eosinofil (antihistamin) mempunyai peranan dalam mengatasi respon
hipersensitif proses netralisasi histamin (Salasia dan Hariono, 2010). Pada kasus
ini, meningkatnya sel eosinofil karena sel ini berperan dalam fungsi fagositosis
82
seperti heterofil. Eosinofil di sini mempunyai kemampuan fagositik dan

bakteriosidal.
Limfopenia merupakan penurunan jumlah sel limfosit di dalam sirkulasi
darah. Sel ini memiliki peranan dalam respon imunitas. Penyebab limfopenia
diantaranya adalah pembebasan endogenous corticosteroid. Pemicu pembebasan
endogenous corticosteroid adalah infeksi penyakit pencernaan, penyakit hati,
ginjal, pankreas, adanya obstruksi saluran pencernaan, saluran respirasi, saluran
urinasi, dan saluran empedu (Salasia dan Hariono, 2010). Pada kasus ini ayam
memiliki gejala klinis stress atau depresi didukung dengan adanya gambaran
limfopenia, selain itu dapat disebabkan oleh adanya lesi nekrosis dan peradangan
pada hati dan limpa. Nekrosis pada seluruh mukosa usus, baik duodenum,
jejunum, dan ileum juga dapat menjadi faktor dari limfopenia ini. Mediator
inflamasi merangsang pergerakan limfosit dari darah ke jaringan yang meradang
dan jaringan limfoid. Tingkat keparahan limfopenia mencerminkan keparahan
respon inflamasi sistemik.
Hipoproteinemia adalah kondisi terjadinya penurunan kadar total protein.
Beberapa penyebab dari hipoproteinemia antara lain adalah anemia, malnutrisi,
malabsorbsi pada saluran gastrointestinal, glomerulonefritis, trauma, stress, dan
infeksi kronis (Coles, 2007). Menurut (Salasia dan Hariono, 2010),
hipoproteinemia lebih sering akibat hipoalbuminemia. Pada kasus ini, terjadi pula
hipoalbuminemia yang dapat dipicu oleh adanya malabsorbsi pada saluran
gastrointesninal yang telah mengalami nekrosis akibat infeksi bakteri Clostridium
sp. Kerusakan intestinal dapat memungkinkan bakteri untuk mencapai saluran
empedu dan aliran darah portal hepatik, sehingga menyebabkan infeksi pada hati.
Nekrosis dan hemoragi multifokal pada hati kemudian memicu terjadinya
hipoalbuminemia dan berkurangnya produksi protein oleh hati. Hipoproteinemia
dan hipoalbuminemia pada ayam yang terinfeksi juga dapat disebabkan oleh
penurunan nafsu makan dan diare. Studi serupa menyebutkan bahwa racun
Clostridium sp. meningkatkan permeabilitas kapiler dan memungkinkan
keluarnya protein plasma ke dalam jaringan yang mengakibatkan
hipoproteinemia. Hasil uji biokimia lainnya menunjukkan bahwa enzim
83
transaminase ALT dan AST mengalami peningkatan yang signifikan. Peningkatan

ini telah dikaitkan dengan kerusakan hepatoseluler pada ayam, serta efek yang
lebih buruk dari mikroorganisme atau toksinnya di hati dan ginjal. Hasil ini sesuai
dengan penelitian yang melaporkan bahwa, peningkatan yang signifikan pada
aktivitas AST dan ALT akibat invasi bakteri patogen ke hati yang menyebabkan
kerusakan sel hati.
Ascariasis
Tabel 5. Gambaran darah akibat infeksi Ascaridia galli pada ayam broiler (Gallus
domesticus) (Prastowo dan Ariyadi, 2015).
Pemeriksaan
6 2.5-3.5 2.2 ± 0.58 Menurun
Eritrosit (10 /mL)
Hb (g/L) 70-130 84 ± 10.7 Normal
PCV (%) 22-35 31.6 ± 3.32 Normal
Heterofil (103/mL) 5.5-9.0 9.5 ± 2.4 Meningkat
Eosinofil (103/mL) 1.8-5.0 42 ± 10.9 Meningkat
Limfosit (103/mL) 0.6-1.2 1.5 ± 2.5 Meningkat
Monosit (103/mL) 0.05-0.25 0.85 ± 0.72 Meningkat
Hasil pemeriksaan darah menunjukkan ayam memiliki jumlah eritrosit
yang menurun. Infeksi cacing menyebabkan terjadinya perdarahan kronis, karena
larva yang bermigrasi menimbulkan kerusakan gastrointestinal diantaranya
gastritis, enteritis, dan ulserasi traktus digestivus yang akhirnya menyebabkan
suatu keadaan yang disebut kehilangan darah kronis. Menurut Urquhart et al.
(1987), ayam yang terinfeksi cacing dalam jumlah yang sangat banyak dapat
menyebabkan kehilangan darah, penurunan kadar gula darah, atrofi timus,
obstruksi usus, gangguan pertumbuhan, dan peningkatan mortalitas. Nilai Hb dan
PCV yang berada dalam kisaran normal sesuai dengan Urquhart et al. (1987),
yang menyatakan bahwa tidak ada pengaruh infeksi cacing Ascaridia galli
terhadap protein darah, PCV, dan kadar hemoglobin. Protein darah tidak berubah
karena cacing ini berpredileksi di intestinum dan tidak menginfeksi hati, sehingga
fungsi organ hati masih berjalan normal. Normalnya kadar PCV dengan
menurunnya eritrosit ini dapat disebabkan karena proporsi eritrosit yang hilang
84
akibat perdarahan adalah sama dengan proporsi hilangnya cairan plasma (dalam
bentuk hemoragi atau hilangnya cairan tubuh melalui diare akibat infeksi cacing).
Kadar Hb yang masih normal dalam kasus ini bergantung pada infestasi cacing
dalam tubuh yang mungkin belum banyak sehingga Fe masih tercukupi untuk
sintesis Hb.
Nilai total leukosit, monosit, dan limfosit ayam setelah infeksi mengalami
sedikit peningkatan. Peningkatan leukosit dapat terjadi karena adanya respon
inflamasi atau infeksi, selain itu perubahan suhu, anestesi, obat, perubahan
hormon, dan toxin juga dapat menyebabkan leukositosis (McCan et al., 2010).
Pada kasus ini, leukositosis dapat terjadi akibat adanya infeksi Ascaridia galli
yang menyebabkan lesi intestinal sehingga menimbulkan respon inflamasi pada
tubuh ayam. Jumlah limfosit akan meningkat pada keadaan respon fisiologis,
infeksi virus, bakteri, fungi, dan parasit yang kronis, serta tumor pada organ
limfoid (limfosarkoma dan limfositik leukimia) (Weiss and Wardrop, 2010). Pada
kasus ini, infeksi Ascaridia galli dapat mengakibatkan peningkatan limfosit
karena infeksi tersebut menyebabkan respon imunitas terhadap infeksi parasit.
Monositosis terjadi akibat dari keradangan yang berlangsung secara kronis dan
nekrosis pada jaringan membuat sel darah ini bekerja membersihkan debris sel
mati (Salasia dan Hariono, 2010).
Nilai absolut sel eosinofil ayam setelah infeksi mengalami peningkatan
yang signifikan. Eosinofilia merupakan peningkatan jumlah sel eosinofil di dalam
sirkulasi darah. Eosinofilia terjadi karena adanya faktor-faktor di dalam reaksi
antigen-antibodi dan dalam kondisi alergi karena parasit, selain itu dapat pula
terjadi karena adanya mastitis eosinofilik dan dermatitis kronis. Eosinofilia
merupakan fenomena karakteristik lain pada kebanyakan infestasi parasit, tetapi
tidak semuanya. Biasanya eosinofilia tidak bersangkutan dengan stadium-stadium
peradangan akut permulaan infestasi, melainkan stadium peradangan yang lanjut.
Penyebab terjadinya eosinofilia masih belum jelas, kebanyakan teori melibatkan
histamin, tetapi antigen-antibodi kompleks barangkali ikut terlibat (Prastowo dan
Ariyadi, 2015). Nilai total sel heterofil mengalami kenaikan secara signifikan
mengindikasikan bahwa infeksi cacing Ascaridia galli akan meningkatkan
85
respons sel heterofil. Heterofil memiliki peran penting dalam mengendalikan

invasi bakteri dan patogenesis infeksi bakteri pada unggas, dan heterofil juga telah
berpartisipasi dalam infeksi virus dan parasit (Campbell, 2015).
Koksidiosis
Tabel 6. Gambaran darah akibat infeksi Eimeria sp. pada ayam broiler (Gallus
domesticus) (Akhtar et al., 2014).
Pemeriksaan
6 2.5-3.5 1.23 ± 0.35 Menurun
Eritrosit (10 /mL)
Hb (g/L) 70-130 65 ± 66.7 Menurun
PCV (%) 22-35 17 ± 2.10 Menurun
MCV (fl) 90-140 88 ± 22.10 Menurun
MCH (pg) 33-47 32 ± 9.70 Menurun
MCHC (g/dL) 21-34 16.7 ± 13 Menurun
Limfosit (103/mL) 5.5-9.0 12.18 ± 1.89 Meningkat
Heterofil (103/mL) 1.8-5.0 6.72 ± 1.00 Meningkat
Monosit (103/mL) 0.6-1.2 1.26 ± 0.42 Normal
Eosinofil (103/mL) 0.05-0.25 0.8 ± 0.02 Normal
Hasil pemeriksaan darah menunjukkan ayam tersebut memiliki jumlah
eritrosit dan hemoglobin dibawah normal sehingga mengalami anemia. Anemia
adalah kondisi penurunan jumlah eritrosit, hemoglobin atau keduanya dalam
sirkulasi darah. Anemia dapat disebabkan karena hewan mengalami perdarahan
baik akibat infeksi mikroorganisme ataupun karena trauma, terjadi peningkatan
destruksi eritrosit atau penurunan lifespan eritrosit, depresi sumsum tulang,
defisiensi nutrisi, dan juga keracunan agen kimia (Salasia dan Hariono, 2010).
Penurunan kadar Hb dan jumlah eritrosit total mungkin berkorelasi dengan
peradangan di sekum dan usus. Selain itu dapat juga akibat defisiensi Fe,
termasuk seperti kurang diet Fe, adanya perdarahan kronis, dan defek-defek dalam
kebutuhan dan penyimpanan Fe. Apabila Fe rendah di dalam darah (akibat
defisiensi nutrisi atau pun beralih ke jaringan), Hb menurun karena Fe sebagai
salah satu komponen penyusun Hb.
Munculnya sel-sel radang yang berkumpul di sekitar lesi akan
meningkatkan permeabilitis pembuluh darah usus halus sehingga terjadi
86
hemoragi. Histamin dapat dilepaskan selama cedera jaringan untuk meningkatkan

permeabilitas kapiler darah dan vena, memungkinkan eksudasi cairan dalam
jumlah besar. Anoreksia yang terjadi bisa disebabkan karena stress atau depresi
yang dapat mengakibatkan ayam mengalami defisiensi nutrisi sehingga memicu
anemia. Penurunan PCV dipengaruhi oleh jumlah dan ukuran eritrosit, serta
perubahan volume plasma yang tidak mempengaruhi massa sel total. Nilai PCV
normal rata-rata pada ayam berkisar 22%-35%. Nilai PCV kurang dari 22%
mengindikasikan anemia (Campbell, 2015).
Anemia disertai dengan nilai MCV dan MCHC yang menurun
menunjukkan bahwa ayam mengalami anemia mikrositik-hipokromik. Anemia ini
dapat disebabkan oleh masa kesembuhan dari perdarahan besar, perdarahan
karena trauma atau defek-defek koagulasi, destruksi secara masif dengan immune
mediated anaemia, infeksi hemoprotozoa, toksisitas obat, dan anemia kongenital
pada anjing basenji (Salasia dan Hariono, 2010). Pada kasus ini, anemia
mikrositik hipokromik dapat terjadi akibat infeksi kronis dari Eimeria sp. yang
mengakibatkan terjadinya nekrosis, peradangan, dan hemoragi. Nekrosis,
peradangan, dan hemoragi pada sekum dengan lesi-lesi pada mukosa usus akan
memicu penurunan total eritrosit dan kadar Hb. Terjadinya perdarahan kronis
dalam kasus ini dapat mengakibatkan defisiensi Fe yang juga menjadi salah satu
faktor menurunnya kadar Hb.
Leukosit, limfosit, dan heterofil menunjukkan peningkatan. Leukositosis
merupakan keadaan dimana terjadi peningkatan jumlah sel darah putih di atas
batas normal, baik itu semua jenis sel darah putih atau hanya sebagian jenis.
Peningkatan ini dapat terjadi karena adanya respon inflamasi atau infeksi, selain
itu perubahan suhu, anestesi, obat, perubahan hormon, dan toxin juga dapat
menyebabkan leukositosis (McCan et al., 2010). Pada kasus ini, leukositosis dapat
terjadi akibat adanya infeksi Eimeria sp. sehingga menimbulkan respon inflamasi
pada tubuh ayam. Peningkatan limfosit atau limfositosis merupakan peningkatan
jumlah sel limfosit di dalam sirkulasi darah. Sel ini memiliki peranan dalam
respon imunitas (Salasia dan Hariono, 2010). Jumlah limfosit akan meningkat
pada keadaan respon fisiologis, infeksi virus, bakteri, fungi, dan parasit yang
87
kronis, serta tumor pada organ limfoid (limfosarkoma dan limfositik leukimia)
(Weiss and Wardrop, 2010). Pada kasus ini, dengan infeksi Eimeria sp. kronis
dapat mengakibatkan peningkatan limfosit karena infeksi tersebut menyebabkan
respon imunitas terhadap infeksi parasit.
Peningkatan heterofil, dapat disebut juga heterofilia, yang merupakan
peningkatan jumlah sel heterofil di dalam sirkulasi darah. Heterofil memiliki
peran penting dalam mengendalikan invasi bakteri dan patogenesis infeksi bakteri
pada unggas, dan heterofil juga telah berpartisipasi dalam infeksi virus dan parasit
(Campbell, 2015). Heterofilia dapat disebabkan oleh peningkatan kebutuhan
jaringan untuk fungsi fagositik pada daerah radang yang disebabkan oleh agen
infeksi. Salah satu penyebab heterofilia berhubungan dengan adanya kerusakan
jaringan yang diinduksi oleh infeksi agen patogen seperti bakteri, virus, jamur,
dan parasit (Salasia dan Hariono, 2010).
Jika ayam terinfeksi 3 penyakit ini, gambaran darah yang dapat terjadi
adalah ayam mengalami anemia mikrositik-hipokromik. Kemudian leukositosis
hipoalbuminemia, dan peningkatan enzim ALT dan AST.
PEMBAHASAN
Ayam berumur empat minggu mengalami gejala penurunan nafsu makan,

berat badan menurun (anoreksia), lesu, diare, bulu yang acak-acakan, gelisah, dan
berkerumun. Feses terlihat encer dan berwarna putih-kehijauan. Ayam terlihat
pincang saat berjalan, sering mematuk tubuhnya, terlihat menggaruk beberapa
bagian tubuh, dan terdapat bentukan kering keras di kaki. Berdasarkan gejala
tersebut, dilakukan studi kasus patologi anatomi, parasitologi, mikrobiologi, dan
patologi klinik yang selanjutnya diduga bahwa ayam terinfeksi Clostridium
perfringens, Clostridium colinum, dan penyakit ascariasis, koksidiosis, serta
infestasi tungau. Pemberian pakan yang di bawah standar, kondisi kandang yang
buruk, dan sanitasi yang kurang baik menyebabkan imunitas tubuh ayam menurun
dan mudah terserang penyakit. Faktor-faktor lain yang menyebabkan ayam mudah
terinfeksi penyakit bakteri, virus, parasit, dan jamur adalah penyakit yang dibawa
oleh hewan lain, berkontak dengan inang antara, dan kontaminasi agen penyakit
pada pakan (Sahara et al., 2013).
Berdasarkan studi kasus patologi anatomi hasil pemeriksaan makroskopik
dan mikroskopik, ayam mengalami enteritis, hepatitis, dan peritonitis.
Pemeriksaan makroskopik pada intestinum bagian jejunum mengalami penebalan
dinding usus, hemoragi multifokal, terdapat lesi nekrotik berwarna kekuningan
yang ditutupi pseudomembran pada lapisan mukosa sering disebut sebagai
"Turkish towel", bagian duodenum mengalami lesi nekrosis pada mukosa,
terdapat daerah fokal hemoragi, dan ditemukan adanya cacing Ascaridia galli,
bagian ileum mengalami lesi nekrotik berwarna kekuningan, dan bagian sekum
mengalami penebalan sekum dan terjadi hemoragi. Selain itu terdapat pula ulser
berwarna kuning besar yang ditutupi oleh pseudomembran berwarna hijau, bulat,
dikelilingi oleh perdarahan dan berkembang di bagian mana pun dari usus kecil
atau besar dan seka. Ulser ini kemudian bergabung membentuk ulser yang lebih
besar, kadang-kadang berlubang, tanpa pembatas terpisah dan dikelilingi oleh
lingkaran pucat, menyebabkan peritonitis lokal atau difus dan perlekatan usus.
Pemeriksaan makroskopik pada hepar menunjukkan adanya lesi nekrotik
multifokal pada permukaan hepar. Kolonisasi hepar dengan jumlah Clostridium
88
89
perfringens yang tinggi menyebabkan kolangiohepatitis. Hepar membesar dan

memiliki penampilan pucat dengan foki merah atau putih (Cooper et al., 2013).
Pemeriksaan secara histopatologi pada preparat usus ditemukan adanya edema
mukosa, kongesti vaskular, mukosa nekrotik dan ditutupi oleh pseudomembran
fibrinosa yang tebal, dan ulserasi multifokal hingga penggabungan ulserasi pada
mukosa. Eksudat fibrinosa dan basil Gram positif ditemukan di daerah nekrotik.
Kemudian diamati deskuamasi epitel vili, hemoragi, infiltrasi sel radang, dan
proliferasi sel-sel kripta yang diakibatkan oleh infeksi cacing Ascaridia galli.
Pada organ sekum ditemukan adanya kumpulan oosit didalam epitel sekum, vili
nekrosis, makrogametosit, mikrogametosit, skizon, perdarahan dan infiltrasi sel
radang. Pemeriksaaan mikroskopik organ hepar menunjukkan area pucat yang
luas, tidak teratur, nekrosis multifokal, foki acak, dan infiltrasi sel radang (Cooper
et al., 2013). Infestasi tungau ayam Knemidocoptes mutans menyebabkan lesi
makroskopis bersisik pada kaki hingga jari kaki. Kaki unggas yang terkena
menjadi kasar, terdapat material berkerak putih besar dan kekuningan menutupi
seluruh dahan hingga jari kaki. Karakterisasi lesi mikroskopis kaki bersisik adalah
adanya hiperkeratosis, parakeratosis, dan akantosis (Shanta et al., 2006).
Nekrotik enteritis terjadi ketika Clostridium perfringens berkembang
dengan sangat baik dan melebihi jumlah normal di saluran usus ayam, kemudian
akan menghasilkan racun yang mengarah pada nekrosis. Satu-satunya yang
disebut toksin utama yang diproduksi oleh Clostridium perfringens tipe A adalah
alfa toksin (CPA) yang dianggap sebagai faktor virulensi utama. CPA
menginduksi kerusakan mukosa pada saluran usus ayam (Keyburn et al., 2006).
Pada umumnya predisposisi bagi terjadinya penyakit ini antara lain adalah faktor
yang menyebabkan adanya perlukaan pada mukosa usus, seperti koksidiosis atau
penggunaan vaksin hidup koksidia dan infeksi cacing Ascaridia galli. Secara
keseluruhan, infeksi Eimeria sp. merupakan faktor predisposisi penting karena
dapat mengakibatkan perkembangbiakan Clostridium perfringens secara masif di
usus. Parasit Eimeria sp. menyebabkan kebocoran protein plasma dengan
membunuh sel epitel sebagai konsekuensi dari tahapan intraseluler dari siklus
hidupnya. Infeksi koksidial meningkatkan produksi lendir di usus. Kedua efek
90
tersebut memberikan peningkatan nutrisi yang tersedia dan menciptakan

lingkungan yang mendukung perkembangbiakan bakteri Clostridium perfringens
yang mampu memanfaatkan lendir sebagai substrat (Timbermont et al., 2011).
Menurut Cooper et al. (2013), ayam yang sebelumnya terinfeksi parasit Eimeria
sp. mempunyai kemungkinan yang besar untuk terinfeksi pula oleh bakteri
Clostridium colinum karena infeksi bakteri ini saja hanya dapat dihasilkan pada
burung puyuh. Faktor lain yang mendukung penularan Clostridium colinum
adalah melalui konsumsi pakan, air, litter atau bahan lain yang terkontaminasi
feses (Swayne et al., 2020).
Pada pemeriksaan feses dengan metode natif ditemukan telur cacing
Ascaridia galli dan protozoa Eimeria sp. Kemudian pada metode sentrifus
ditemukan larva nematoda, pemeriksaan kerokan mukosa usus ditemukan adanya
infestasi cacing Ascaridia galli dan protozoa Eimeria sp., dan pada kerokan kulit
ditemukan infestasi tungau Knemidocoptes mutans. Isolasi dan identifikasi bakteri
menggunakan koleksi sampel organ jejunum dan hepar yang mengalamai lesi
pada ayam menderita diare serta menunjukkan lesi enteritis tipikal pascamortem
(Thomas et al., 2014). Isolasi Clostridium sp. membutuhkan media yang
diperkaya dan lingkungan anaerobik. Bakteri diisolasi pada media Reinforced
Clostridial Agar (RCA) dan Plat Agar Darah (PAD) yang dilakukan dengan
inkubasi anaerobik suhu 37°C selama 48 jam. Koloni yang diduga kemudian
dilakukan pengecatan Gram untuk melihat morfologi selnya. Identifikasi bakteri
dilakukan dengan uji biokemis, yaitu uji katalase, uji urease, uji indol, uji Methyl
Red (MR)-Voges Proskauer (VP), uji Triple Sugar Iron Agar (TSIA), uji motilitas,
uji litmus milk, uji fermentasi karbohidrat (glukosa, sukrosa, manitol, maltosa,
dan laktosa), dan uji lesitinase dan lipase pada media Egg Yolk Agar (Miah et al.,
2011). Berdasarkan hasil pemeriksaan mikrobiologi dari organ jejunum dan hepar
ayam broiler terisolasi dan teridentifikasi Clostridium perfringens dan
Clostridium colinum. Maka dapat dipastikan bahwa ayam tersebut terinfeksi
bakteri Clostridium perfringens dan Clostridium colinum.
Berdasarkan hasil pemeriksaan darah rutin, ayam mengalami anemia
mikrositik-hipokromik. Kemudian mengalami leukositosis yang disertai dengan
91
neutrofilia, monositosis, limfositosis, eosinofilia, dan heterofilia. Pada kasus ini

anemia dapat terjadi karena banyaknya inflamasi dan peradangan pada mukosa
usus, lumen usus, dan organ hati. Hal ini juga berhubungan secara proporsional
dengan derajat keparahan infeksi. Ayam mengalami leukosistosis diduga karena
infeksi bakteri Clostridium sp. menyebabkan peradangan yang memicu produksi
sel leukosit, heterofil, dan monosit untuk fagositosis mikroorganisme infektif dan
sel-sel yang rusak. Selain itu juga dapat terjadi karena adanya infeksi Ascaridia
galli yang menyebabkan lesi intestinal sehingga menimbulkan respon inflamasi
pada tubuh ayam. Neutrofilia yang terjadi pada kasus ini berhubungan dengan
proses fagositosis bakteri dan respon inflamasi akut karena mediator inflamasi
merangsang pergerakan neutrofil selama inflamasi akut. Monositosis dikaitkan
dengan proses inflamasi kronis, menunjukkan aktivitas fagosit dan bermigrasi ke
dalam jaringan untuk menjadi makrofag. Monositosis terjadi akibat dari
keradangan yang berlangsung secara kronis dan nekrosis pada jaringan membuat
sel darah ini bekerja membersihkan debris sel mati (Salasia dan Hariono, 2010).
Jumlah limfosit akan meningkat pada keadaan respon fisiologis, infeksi virus,
bakteri, fungi, dan parasit yang kronis, serta tumor pada organ limfoid
(limfosarkoma dan limfositik leukimia) (Weiss and Wardrop, 2010). Pada kasus
ini, infeksi Ascaridia galli dapat mengakibatkan peningkatan limfosit karena
infeksi tersebut menyebabkan respon imunitas terhadap infeksi parasit.
Meningkatnya sel eosinofil karena sel ini berperan dalam fungsi fagositosis
seperti heterofil. Eosinofil di sini mempunyai kemampuan fagositik dan
bakteriosidal. Nilai total sel heterofil mengalami kenaikan secara signifikan
mengindikasikan bahwa infeksi cacing Ascaridia galli akan meningkatkan
respons sel heterofil. Heterofil memiliki peran penting dalam mengendalikan
invasi bakteri dan patogenesis infeksi bakteri pada unggas, dan heterofil juga telah
berpartisipasi dalam infeksi virus dan parasit (Campbell, 2015).
Perubahan kimia klinik yang terjadi adalah hipoproteinemia,
hipoalbuminemia, dan peningkatan enzim ALT dan AST. Menurut (Salasia dan
Hariono, 2010), hipoproteinemia lebih sering akibat hipoalbuminemia. Pada kasus
ini, terjadi pula hipoalbuminemia yang dapat dipicu oleh adanya malabsorbsi pada
92
saluran gastrointesninal yang telah mengalami nekrosis akibat infeksi bakteri

Clostridium sp. Kerusakan intestinal dapat memungkinkan bakteri untuk
mencapai saluran empedu dan aliran darah portal hepatik, sehingga menyebabkan
infeksi pada hati. Nekrosis dan hemoragi multifokal pada hati kemudian memicu
terjadinya hipoalbuminemia dan berkurangnya produksi protein oleh hati.
Hipoproteinemia dan hipoalbuminemia pada ayam yang terinfeksi juga dapat
disebabkan oleh penurunan nafsu makan dan diare. Studi serupa menyebutkan
bahwa racun Clostridium sp. meningkatkan permeabilitas kapiler dan
memungkinkan keluarnya protein plasma ke dalam jaringan yang mengakibatkan
hipoproteinemia. Hasil uji biokimia lainnya menunjukkan bahwa enzim
transaminase ALT dan AST mengalami peningkatan yang signifikan. Peningkatan
ini telah dikaitkan dengan kerusakan hepatoseluler pada ayam, serta efek yang
lebih buruk dari mikroorganisme atau toksinnya di hati dan ginjal. Hasil ini sesuai
dengan penelitian yang melaporkan bahwa, peningkatan yang signifikan pada
aktivitas AST dan ALT akibat invasi bakteri patogen ke hati yang menyebabkan
kerusakan sel hati.
KESIMPULAN DAN SARAN
Kesimpulan
Berdasarkan studi kasus Laboratorium Patologi Anatomi, Parasitologi,
Mikrobiologi, dan Patologi Klinik dapat disimpulkan bahwa ayam terinfeksi
Clostridium perfringens agen penyakit Nekrotik Enteritis (NE), Clostridium
colinum agen penyakit Ulseratif Enteritis (UE), disertai penyakit ascariasis,
koksidiosis, dan infestasi tungau.
Saran
Perlu dilakukan peningkatan manajemen pemeliharaan pada peternakan
meliputi manajemen kesehatan, kebersihan, pakan, lingkungan, dan kandang.
Pengobatan dilakukan dengan cara pemberian antibiotik dan antikoksidiasis.
Pencegahan dapat dilakukan dengan perbaikan kualitas pakan, peningkatan
sanitasi, kebersihan, dan biosecurity lingkungan kandang dan peralatan kandang
untuk mencegah penyebaran agen penyakit infeksius maupun non-infesksius pada
ayam.
93
PATOGENESIS
94
DAFTAR PUSTAKA
Abebe, E. and Gugsa, G. 2018. A Review of Poultry Coccidiosis. Abyss. J. Sci.

Technol, 3(1).
Acton, A. Q. 2013. Advances In Saccharomycetaceae Research And Application.
Scholarly Editions.
Akhtar, M., Awais, M. M., Anwar, M. I., Ehtisham-ul-Haque, S., Nasir, A.,
Saleemi, M. K., Ashraf, K. 2014. The Effect of Infection with Mixed
Eimeria Species on Hematology and Immune Responses Following
Newcastle Disease and Infectious Bursal Disease Booster Vaccination in
Broilers. Veterinary Quaterly.
Anonim. 2014. Manual Penyakit Unggas. Jakarta: Subdit Pengamatan Penyakit
Hewan, Direktorat Kesehatan Hewan, Direktorat Jenderal Peternakan
dan Kesehatan Hewan, Kementerian Pertanian.
Baker, D. G. 2007. Flynn’s Parasites of Laboratory Animals Second Edition.
USA: Blackwell Publishing.
Balqis, U., Hambal, M., Darmawi, Utami, C. S. 2013. Histopathological Changes
in Intestine of Chicken (Gallus domesticus) Infected Naturally by
Ascaridia galli. Proceedings of The 3rd Annual International
Coference Syiah Kuala University: 343-348.
Bano, L., Ilenia, D., Kenneth, M., Omar, O., Sacit, B. 2008. Development of A
Polymerase Chain Reaction Assay for Specific Identification of
Clostridium colinum. Avian Pathology.
Bharat, G. A., Kumar, N.P., Subhasish, B., Ria, B. 2017. A Report of Ascaridia
galli in Commercial Poultry Egg from India. Journal of World’s Poultry
Research, 7(1): 23-26.
Campbell, T. W. 2015. Exotic Animal Hematology and Cytology. UK: Wiley
Blackwell.
Clark, E. L. and Blake, D. P. 2012. Genetic Mapping and Coccidial Parasites: Past
Achievements and Future Prospects. Journal of Biosciences, 37, 879-
886.
Coles, E. H. 2007. Veterinary Clinical Pathology 4th Edition. Philadelphia:
Saunders Company.
Conway, D. P., and Mckenzie, M. E. 2007. Poultry Coccidiosis, Diagnostic and
Testing Procedures 3rd Ed. Ames, Iowa: Blackwell Publishing.
Cooper, K. K., Songer, J. G., Uzal, F. A. 2013. Diagnosing Clostridial Enteric
Disease in Poultry. Journal of Veterinary Diagnostic Investigation,
25(3): 314-327.
95
96
Daszak, P. 1999. Zoite Migration During Eimeria tenella Infection: Parasite

Adaption to Host Defences. Parasitology Today, 2: 67-72.
Djara, D. V. S., Ardana, I. B. K., Winaya, I. B. O. 2020. Perubahan Patologis
Sekum Ayam Pedaging (Gallus gallus) yang Terinfeksi Koksidiosis di
Kabupaten Tabanan, Bali. Indonesia Medicus Veterinus, 9(2): 187-196.
Dubey, J.P. 2020. Coccidiosis in Livestock, Poultry, Companion Animals, and
Humans. Boca Raton: CRC Press Taylor and Francis Group.
Ekawasti, F., dan Martindah, E. 2019. Pengendalian Koksidiosis Pada Ayam
Melalui Pengobatan Herbal. Wartazoa Vol. 29 No. 1.
El-Deen, N. A. M., El-Din, I. M. G., Khodary, M. R. 2019. Effect of
Experimental Clostridium perfringens Infection on Some Immunological
Hematological and Biochemical Values in Broiler Chickens. Zag Vet J.,
47(2): 222-233.
Feliatra, Syahrul, Yoswaty, D. 2013. Dasar-Dasar Mikrobiologi. Pekanbaru:
Faperika Press.
Foreyt, W. J. 2001. Veterinary Parasitology Reference Manual 5th Ed. Ames,
USA: Iowa State University Press.
Ghoneim, N. H., and Hamza, D. A. 2017. Epidemiological Studies on Clostridium
perfringens Food Poisoning in Retail Foods. Rev. Sci. Tech. Off. Int.
Epiz., 2017, 36(3): 1025-1032.
Gomes, A. P. N., Olifiers, N., Santos, M. M. D., Simoes, R. D. O., Junior, A. M.

2015. New Records of Thress Species of Nematodes in Cerdocyon thous
from the Brazilian Pantanal Wetlands. Braz. J. Vet. Parasitol
Jaboticabal, 24(3): 324-330.
Griffiths, H. J. A. 1978. Handbook of Veterinary Parasitology Domestic Animals
of North America. USA: University of Minnesota Press.
Hambal, M., Efriyendi, R., Vanda, H., Rusli. 2019. Anantomical Pathology and
Histopathological Changes of Ascaridia galli in Layer Chicken. Jurnal
Medika Veterinaria, 13(2): 239-247.
Ibrahim, G. A., Mahmoud, B. S., Ammar, A. M., Youssef, F. M. 2017. Toxin
Genotyping of C. perfringens Isolated from Broiler Cases of Necrotic
Enteritis. Animal and Veterinary Sciences, 5(6): 108-120.
Kahn, C. M. 2008. The Merck Veterinary Manual 9th ed.. USA: Merck and CO.,
INC.
Kauffman, J. 1996. Parasitic Infection of Domestic Animals. Berlin: Berkauser.
Keyburn, A. L., Boyce, J. D., Vaz, P., Bannam, T. L., Ford, M. E., Parker, D.,
Rubbo, A. D., Rood, J. I., Moore, R. J. 2008. NetB, A New Toxin that is
Associated with Avian Necrotic Enteritis Caused by Clostridium
97
perfringens. Plos Pathogens, 4(2): 1-11.
Kusnoto, Bendryman, S. S., Koesdarto, S., Sosiawati, S. M. 2015. Ilmu Penyakit

Helmin Kedokteran Hewan. Sidoarjo: Zifatama Publisher.
Leboffe, M. J. and Pierce, B. E. 2011. A Photographic Atlas for Microbiology
Laboratory. USA: Morton Publishing Company. 
Loh, J. P., Liu, Y. C., Chew, S. W., Ong, E. S., Fam, J. M., Ng, Y. Y., Taylor, M.
B., Ooi, E. E. 2008. The Rapid Identification of Clostridium perfringens
As The Possible Aetiology of A Diarrhoeal Outbreak Using PCR.
Epidemiol. Infect., 136, 1142–1146.
Levine, N. D. 1981. Textbook of Parasitology. USA: Burgess Publisher.

Markey, B., Leonard, F., Archambault, M., Cullinane, A., Maguire, D. 2013.
Clinical Veterinary Microbiology 2nd Edition. UK: Mosby Elsevier.
McCan, J. A., Robbinson, J. M., Kasmer, E., Labus, D., Eckman, M. 2010.
Professional Guide to Pathophysiology 3rd Edition. USA: Lippincott
Williams and Wilkin.
Miah, M. S., Asaduzzaman, M., Sufian, M. A. and Hossain, M. M. 2011. Isolation
of Clostridium perfringens, Causal Agents of Necrotic Enteritis in
Chickens. Journal Bangladesh Agril. Univ. 9(1): 97–102.
Osman, K., Soliman, Y., Amin, Z. M. S., Aly, M. 2012. Prevalensi Clostridium
perfringens Isolat Tipe A Pada Ayam Broiler Komersial dan Induk Ayam
Broiler Induk di Mesir. Sci. Teknologi. Mati. Int. Epiz., 31(3): 931-941.
Pattison, M., McMullin, P. F., Bradbury, J. M., Alexander, D. J. 2008. Poultry
Diseases 6th Edition. USA: Saunders Elsevier.
Poult, B. J. 2019. An Outbreak of Intestinal Obstruction by Ascaridia galli in
Broilers in Minas Gerais. Brazilian Journal of Poultry Science, 21(4).
Prastowo, J. dan Ariyadi, B. 2015. Pengaruh Infeksi Cacing Ascaridia galli
Terhadapa Gambaran Darah dan Elektrolit Ayam Kampung (Gallus
domesticus). Jurnal Medika Veterinaria, 9(1): 12-17.
Prastowo, J. dan Priyowidodo, D. 2015. Penyakit Parasit pada Ayam.
Yogyakarta: Gadjah Mada University Press.
Quinn, P. J., Markey, B. K., Leonard, F. C., FitzPatrick, E. S., Fanning, S.,
Hartigan, P. J. 2002. Veterinary Microbiology and Microbial Disease 2nd
Edition. USA: Wiley-Blackwell.
Reid, W. M. 1978. Coccidiosis. In Diseases of Poultry, 7th ed., ed. M. S. Hofstad,
B.W. Calnek, C. F. Helmboldt, W. M. Reid, and H. W. Yoder, Jr. Ames,
IA: Iowa State Univ. Press.
98
Rehman, Z. U., Mahfooz, A., Ahmad, T., Mahmood, S., Abbas, G., Saleem, M. I.,
Iqbal, A., Siddique, F., Fiaz, M. 2014. Comparative Therapeutic Efficacy
of Ivermectin and Piperazine Citrate Against Ascaridia galli in
Commercial and Rural Poultry. Scholar’s Advances in Animal and
Veterinary Research, 1(1): 20-24.
Roussan, D. A., Rifai, R. H. Al., Khawaldeh, G. Y., Totanji, W. S. 2009. Flock-
Level Prevalence of Clostridium colinum in Broiler Flocks with
Digestive Disease in Jordan by Polymerase Chain Reaction. Poultry
Science, 88: 1639-1642.
Salasia, S. I. O., dan Hariono, B. 2010. Patologi Klinik Veteriner: Kasus Patologi
Klinis. Yogyakarta: Penerbit Samudra Baru.
Samour, J. 2016. Avian Medicine. UK: Elsevier.
Sarjono, T. W. 2020. Helmintologi Kedokteran dan Veteriner Edisi Revisi.
Malang: UB Press.
Shaibu, I. E. 2015. Phytochemical Composition and Anthelminthic Effects of
Essential Oils from Three Nigerian Citrus Varieties on Ascaridia galli
(Thesis). Zaria: Faculty Of Science Ahmadu Bello University.
Shanta, I. S., Begum, N., Anisuzzaman, Bari, A. S. M., Karim, M. J. 2006.
Prevalence and Clinico-Pathological Effects of Ectoparasites in Backyard
Poultry. Bangl. J. Vet. Med., 4(1): 19-26.
Soulsby, E. J. L. 2002. Helminths, Arthropods and Protozoan’s of Domesticated
Animals 7th ed. London: Bailliere Tindall.
Swayne, D. E., Boulianne, M., Logue, C. M., McDougald, L. R., Nair, V., Suarez,
D. L. 2020. Diseases of Poultry 14th Edition. USA: Wiley Blackwell.
Tabbu, C. R. 2002. Penyakit Ayam dan Penanggulangannya: Penyakit Asal
Parasit, Noninfeksius, dan Etiologi Kompleks Vol 2. Yogyakarta:
Penerbit Kanisius.
Taylor, M. A., Coop, R. L., Wall, R. L. 2016. Veterinary Parasitology 4th Edition.
UK: Wiley-Blackwell.
Thomas, P., Arun, T. R., Karthik, K., Berin, P. V., Kumar, M. A., Neetu S.,
Usharani, J., Palanivelu, M., Gupta, S. K., Dhama, K., Viswas, K. N.
2014. Molecular Characterization and Toxinotyping of a Clostridium
perfringens Isolate from a Case of Necrotic Enteritis in Indian Kadaknath
Fowl. Asian Journal of Animal and Veterinary Advances, 9(7): 385-394.
Timbermont, L., Haesebrouck, F., Ducatelle, R., Immerseel, F. V. 2011. Necrotic

Enteric in Broilers: An Update Review on The Pathogenesis. Avian
Pathology, 40(4): 341-347.
99
Urquhart, G. M., Armour, J., Duncan, J. L., Dunn, A. M., and Jennings, F. W.
1987. Veterinary Parasitology 1st Edition. UK: The Bath Press.
Uzal, F. A., Senties-Cue, C. G., Rimoldi, G., Shivaprasad, H. L. 2016. Non-
Clostridium perfringens Infectious Agents Producing Necrotic Enteritis-
like Lesions in Poultry. Avian Pathology, 45(3): 326-333.
Varghese, T. 2004. Eimeria Paradise Species and Isospora ragglara Species from
the Ragyiana Birds of Paradise (Paradisaea raggina sciates) from Papua
New Guinea. Journal of Parasitology, 63, 887-889.
Wall, R. and Shearer, D. 2001. Veterinary Ectoparasites Biology, Pathology, and
Control Second Edition. UK: Blackwell Science.
Weiss, D. J, dan Wardrop, K. J. 2010. Schalm’s Veterinary Hematology 6th
Edition. Iowa: Wiley Blackwell.
Zada, L., Rehman, T., Niazl, S., Zeb, M. A., Ruqia, B., Salma, Khan, M. A.,
Khan, A. 2015. Prevalence of Ascaridia galli in Some Poultry Farms of
District Mardan. The Journal of Advances in Parasitology, 2(4): 75- 79.
Zimbro, M. J., Power, D. A., Miller, S. M., Wilson, G. E., Johnson, J. A. 2009.
Difco and BBL Manual: Manual of Microbiological Culture Media 2nd
Edition. USA: BD Company.
Zulmi, M. D., Ferasyi, T. R., Farida, Winarudin, Eliawardani, Zahrawaty. 2020.
Identification and Prevalence of Endoparasites in Lovebird (Agapornis
fisceri) Sold in Banda Aceh. Jurnal Medika Veterinaria 14 (1): 19-26.
LAMPIRAN
Laporan Pemerikasan Patologi Anatomi
Jenis Hewan : Ayam broiler strain Cobb
Anamnesa : Ayam diberi pakan crumble dan air minum berasal dari
sumur, belum pernah diberi vaksin dan obat cacing.
Kandang beralaskan tanah dengan populasi 2000 ekor,
kondisi kandang kotor, terjadi penurunan nafsu makan,
diare encer, dan bulu kusam. Belum ada riwayat
pengobatan pada kasus sebelumnya.
Gejala Klinis : Ayam mengalami penurunan nafsu makan, berat badan
menurun, lesu, diare, bulu yang acak-acakan, gelisah,
dan berkerumun. Feses terlihat encer dan berwarna
putih-kehijauan. Ayam terlihat pincang saat berjalan,
sering mematuk tubuhnya, terlihat menggaruk beberapa
bagian tubuh, dan terdapat bentukan kering keras di kaki.
Sampel pemeriksaan : hepar, duodenum, jejunum, ileum, sekum, kulit

Hasil pemeriksaan makroskopis
1. Hepar : lesi nekrotik multifokal
2. Duodenum : hemoragi, lesi multifokal mukosa, ditemukan cacing
3. Jejunum : dinding menebal, hemoragi multifokal, lesi nekrotik
multifokal yang ditutupi oleh pseudomembran berwarna
kuning
4. Ileum : lesi nekrotik berwarna kekuningan pada mukosa
5. Sekum : hemoragi, dinding menebal, mukosa keputihan, darah
menggumpal
6. Kulit : hiperkeratosis dan ditemukan ektoparasit
Hasil pemeriksaan mikroskopis
1. Hepar : pucat, ireguler, hiperplasi epitel, terdapat nekrosis
2. Duodenum : ditemukan cacing pada lamina propia
3. Jejunum : mengalami nekrosis ke muskularis mukosa, hemoragi
100
101
pada lapisan serosa, penebalan jaringan granulasi, adanya

jaringan fibrin pseudomembran tebal, lesi koagulasi difus
pada lapisan submukosa
4. Sekum : infiltrasi heterofil, hemoragi, ditemukan Eimeria sp. pada
lamina propia dan lamina muskularis
5. Kulit : hiperkeratosis dan akantosis
Sampel
Hasil Pemeriksaan Interpretasi
Organ
Hepar Pemeriksaan makroskopik
pada hepar menunjukkan
adanya lesi nekrotik
multifokal pada permukaan
hepar (Cooper et al., 2013).
Lesi hati terdiri dari nekrosis

koagulasi multifokal, foki
acak, dengan infiltrat
inflamasi campuran ringan
dan, kadang-kadang, koloni
kecil basil Gram positif
Duodenum Cacing Ascaridia galli

dewasa ditemukan dalam
intestinum (Taylor et al.,
2016).
Ayam dengan UE akut

memiliki enteritis hemoragik
yang mempengaruhi
terutama duodenum. Banyak
foki transmural multifokal
(perforasi) dari nekrosis
dapat dilihat dari serosa
102
Ditemukan adanya
deskuamasi epitel vili,
hemoragi, infiltrasi sel
radang, dan proliferasi sel-
sel kripta yang diakibatkan
oleh infeksi cacing
Ascaridia galli. Deskuamasi
epitel merupakan kejadian
lepasnya sel epitel dari
permukaan jaringan
(Hambal et al., 2019).
103
Jejunum Nekrosis mukosa usus yang

menyebar, yang sepenuhnya
ditutupi oleh
pseudomembran, yang
membentuk gips tebal di
lumen usus sering disebut
sebagai "Turkish towel".
Dinding usus menebal
Mukosa nekrotik dan

ditutupi oleh
pseudomembran fibrinosa
yang tebal. Kriptus dilatasi
dan diisi dengan puing-
puing nekrotik (Cooper et
al., 2013).
Terdapat nekrosis parah

yang menyebar pada
mukosa usus superfisial
dengan garis batas yang
jelas dari mukosa yang lebih
dalam yang terawetkan
Ulserasi multifokal hingga

penggabungan ulserasi pada
mukosa (Cooper et al.,
2013).
104
Sekum Perubahan yang dapat

diamati, yaitu adanya
pembengkakan dan
perdarahan pada mukosa
sekum. Proses yang terjadi
adalah sekum membengkak
dan menebal akibat
perkembangan fase
skizongoni Eimeria sp.
Perubahan jaringan juga
sangat dipengaruhi oleh
spesies Eimeria sp. yang
menginfeksi dan jumlah
ookista infektif yang tertelan
Pemeriksaan histopatologi
ditemukan adanya kumpulan
oosit didalam epitel sekum,
vili nekrosis,
makrogametosit,
mikrogametosit, skizon,
perdarahan dan infiltrasi
makrofag. Pengamatan
histopatologi organ sekum
ayam ditemukan juga
adanya sejumlah sel radang.
Sel radang yang ditemukan
pada organ sekum, yaitu
makrofag (Djara et al.,
2020).
105
Ditemukan adanya oosit

(panah abu), mikrogametosit
(panah kuning),
makrogametosit (panah
merah), infitrasi sel
makrofag (panah biru),
nekrosis (panah hijau), dan
perdarahan (panah hitam)
Kulit Hiperkeratosis yang terjadi

pada kaki ayam karena
infeksi Knemidocoptes
mutans (Taylor et al., 2016).
Knemidocoptes mutans
adalah tungau penggali,
mereka menimbulkan reaksi
inflamasi selama
penggalian. Karakterisasi
lesi kaki bersisik dengan
hiperkeratosis, parakeratosis
dan akantosis (Shanta et al.,
2006).
Kesimpulan
Berdasarkan hasil pemeriksaan tersebut, ayam mengalami hepar nekrotik,
enteritis hemoragik nekrotikan, typhlitis nekrotik parasitika, dan hiperkeratosis
106
dermis parasitika.
Daftar Pustaka
Adamu, M., Boonkaewwan, C., Gongruttananun, N., Vongpakorn, M. 2013.
Hematological, Biochemical and Histopathological Changes Caused by
Coccidiosis in Chickens. Kasetsart J. (Nat. Sci.) 47: 238-246.
Balqis, U., Hambal, M., Darmawi, Utami, C. S. 2013. Histopathological Changes
in Intestine of Chicken (Gallus domesticus) Infected Naturally by
Ascaridia galli. Proceedings of The 3rd Annual International
Coference Syiah Kuala University: 343-348.
Cooper, K. K., Songer, J. G., Uzal, F. A. 2013. Diagnosing Clostridial Enteric
Disease in Poultry. Journal of Veterinary Diagnostic Investigation,
25(3): 314-327.
Shanta, I. S., Begum, N., Anisuzzaman, Bari, A. S. M., Karim, M. J. 2006.
Prevalence and Clinico-Pathological Effects of Ectoparasites in Backyard
Poultry. Bangl. J. Vet. Med., 4(1): 19-26.
D. L. 2020. Diseases of Poultry 14th Edition. USA: Wiley Blackwell.
Yogyakarta, 11 November 2020
Mengetahui,
Dosen Pembimbing Mahasiswa
Koasistensi Diagnosa Laboratorik Koasistensi Diagnosa Laboratorik
Prof. drh. R. Wasito, M. Sc., Ph. D. Dominica Alma D., S.K.H.

107
Laporan Pemeriksaan Parasitologi

Sampel pemeriksaan : Feses, apus darah, kerokan mukosa usus, dan kerokan
kulit untuk identifikasi ektoparasit.
Hasil pemeriksaan :
1. Pemeriksaan feses
 Metode natif : (+) telur cacing Ascaridia galli
(+) Eimeria sp.
 Metode sentrifus : (+) larva nematoda
2. Pemeriksaan kerokan mukosa usus : (+) cacing Ascaridia galli
(+) Eimeria sp.
3. Pemeriksaan kerokan kulit : (+) Knemidocoptes mutans
4. Pemeriksaan apus darah : (–)
108
Sampel
Hasil Pemeriksaan Interpretasi
Organ
Feses Telur Ascaridia galli berbentuk
(natif) oval, berkulit lembut, tidak
bersegmen, ukuran 73-92 x 45-
57 μm (Sarjono, 2020).
Telur Ascaridia galli, (A) telur

fertil, berbentuk oval dan
memiliki dinding yang tebal
(Mubarokah et al., 2019).
Ookista Eimeria sp. umumnya

berbentuk oval atau ellips yang
berukuran antara 15-50 μm
(Urquhart et al., 2002).
Ditemukan ookista non-sporula

Eimeria sp. pada feses segar
(Samour, 2016).
Feses Larva infektif nematoda terdiri
(sentrifus) atas kepala (ektremitas
anterior), badan dan ekor
(ektremitas posterior). Bagian
ektremitas posterior terdiri atas
filamen, selubung ekor dan
ujung ekor (Mubarokah et al.,
2019).
Larva 2 Ascaridia galli, (a)

filamen, (b) perpanjangan
selubung ekor, (c) ujung ekor
(Mubarokah et al., 2019).
109
Kerokan Cacing jantan berukuran

mukosa panjang 50-76 mm dan lebar
usus 490-1210 µm. Cacing betina
berukuran panjang 60-116 mm
dan lebar 900-1800 µm Ujung
anterior mempunyai 3 buah
bibir, di ujung posterior cacing
jantan terdapat pre-anal sucker
Ditemukan adanya cacing dan dua spikula berukuran
Ascaridia galli pada lumen panjang 1-2,4 mm. Cacing
usus dengan panjang tubuh betina memiliki vulva yang
cacing berkisar antara 5-7,3 cm terletak di pertengahan tubuh
(Hambal et al., 2019). (Taylor et al., 2016).
Ookista terdiri atas suatu sel

tunggal yang dilindungi oleh
suatu dinding tebal dan
mengandung 4 sporokista
dengan masing-masing
mengandung 2 sporozoit
(Tabbu, 2002).
Sampel kerokan mukosa usus

kekuningan, tampak ookista
bersporula Eimeria sp.
(Samour, 2016).
Kerokan Knemidocoptes mutans
kulit merupakan tungau penyebab
kaki bersisik. Berpredileksi di
bawah sisik kaki. Betina
berbentuk bulat, kakinya
pendek dan gemuk. Pada fase
larva memiliki 3 pasang kaki,
setelah mencapai dewasa
memiliki 4 pasang kaki.
Permukaan punggung ditutupi
oleh garis-garis samar (Wall
Morfologi Knemidocoptes and Shearer, 2001).
mutans (Baker, 2007).
Kesimpulan
Berdasarkan hasil pemeriksaan tersebut, ayam mengalami Ascariasis,
110
Koksidiosis, dan Infestasi Tungau.
Daftar Pustaka
Baker, D. G. 2007. Flynn’s Parasites of Laboratory Animals Second Edition.
USA: Blackwell Publishing.
Hambal, M., Efriyendi, R., Vanda, H., Rusli. 2019. Anantomical Pathology and
Histopathological Changes of Ascaridia galli in Layer Chicken. Jurnal
Medika Veterinaria, 13(2): 239-247.
Mubarokah, W. W., Daryatmo, J., Widiarso, B. P., Sambodo, P. 2019. Morfologi
Telur dan Larva 2 Ascaridia galli Pada Ayam Kampung. Jurnal Ilmu
Peternakan dan Veteriner Tropis, 9(2): 50-54.
Sarjono, T. W. 2020. Helmintologi Kedokteran dan Veteriner Edisi Revisi.
Malang: UB Press.
Tabbu, C. R. 2002. Penyakit Ayam dan Penanggulangannya : Penyakit Asal
Parasit, Noninfeksius, dan Etiologi Kompleks Volume 2.
Yogyakarta: Penerbit Kanisius.
Urquhart, M. G., Jarmour, Ducan, J. L., Dunn, A. M., Jennings, S. W. 2002.
Veterinary Parasitology. UK: Blackwell Publishing.
Wall, R. and Shearer, D. 2001. Veterinary Ectoparasites Biology, Pathology, and
Control Second Edition. UK: Blackwell Science.
Mengetahui,
Dr. drh. R. Wisnu Nurcahyo Dominica Alma D., S.K.H.

111
Laporan Pemeriksaan Mikrobiologi

Perubahan Organ : Intestinum mengalami penebalan dinding, terjadi
hemoragi multifokal, terdapat lesi nekrotik berwarna
kekuningan yang ditutupi pseudomembran pada lapisan
mukosa, pada organ hati terlihat pucat dengan foki
nekrotik merah atau putih.
Sampel pemeriksaan : intestinum dan hepar

Tujuan pemeriksaan : isolasi dan identifikasi Clostridium perfringens dan
Clostridium colinum
Hasil pemeriksaan :
Tabel 1. Hasil pemeriksaan Clostridium perfringens
Media Hasil Pemeriksaan Interpretasi
Kaldu Hati Koloni bakteri tumbuh pada
Tarozzi media KHT setelah inkubasi
(KHT) anaerob selama 24 jam.
Pertumbuhan bakteri
ditunjukkan dengan adanya
kekeruhan dalam media,
munculnya gelembung gas,
dan penguraian partikel hati.
Hal ini sesuai dengan sifat
bakteri Clostridium
perfringens (Leboffe dan
Pierce, 2011; Miah et al.,
Gambar 1. Media menunjukkan
2011).
kekeruhan dan hancurnya partikel
hati.
112
Plat Agar Morfologi koloni dikelilingi

Darah (PAD) oleh zona hemolisis ganda
berdiameter 5 mm, sirkular,
dan datar, sesuai dengan
morfologi Clostridium
perfringens (Quinn et al.,
2002).
Gambar 4. Media PAD

menunjukkan terbentuknya zona
hemolisis ganda.
Reinforced Pertumbuhan bakteri

Clostridial ditunjukkan dengan
Agar (RCA) menghitamnya media sebagai
pereduksi sulfit dengan
koloni sirkular, diameter 2-4
mm, permukaan halus,
berkilau, dan memiliki tepi
ireguler atau entire. Hasil
sesuai dengan morfologi
(Osman et al., 2012).
Gambar 2. Pertumbuhan bakteri

pada media RCA ditunjukkan
dengan menghitamnya media.
Pengecatan Koloni bakteri dalam

Gram pengecatan Gram
berbentuk batang dan
berwarna ungu (Gram
positif). Sporanya jarang
terlihat, tetapi biasanya
subterminal, besar, oval,
dan sel induk membengkak,
Gambar 3. Pada pengecatan Gram sesuai dengan bakteri
menunjukkan bakteri berwarna Clostridium perfringens
ungu dan berbentuk batang. (Markey et al., 2013).
113
Uji Katalase Tidak terbentuknya

gelembung gas menunjukkan
bahwa bakteri tidak memiliki
enzim katalase yang
mengubah H2O2 menjadi H2O
dan O2 sesuai dengan sifat
Gambar 5. Tidak terbentuk
(Leboffe and Pierce, 2011;
gelembung pada uji katalase.
Miah et al., 2011).
Uji Urease Bakteri tidak mampu

menghidrolisis urea dengan
enzim urease menyebabkan
media tetap berwarna kuning,
hal ini sesuai dengan sifat
bakteri Clostridium
perfringens (Leboffe dan
Pierce, 2011; Miah et al.,
2011).
Gambar 6. Media tidak mengalami

perubahan warna dan tetap
berwarna kuning.
Uji Indol Bakteri tidak mampu

menghasilkan molekul indol
karena tidak adanya enzim
tryptophanase, hal ini sesuai
dengan sifat bakteri
(Leboffe dan Pierce, 2011;
Miah et al., 2011).
Gambar 7. Media tidak membentuk

cincin merah setelah penambahan
reagen indol.
114
Uji Methyl Bakteri tidak dapat

Red (MR memfermentasi asam
campuran sehingga media
akan berwana kuning, hal ini
sesuai dengan sifat
Miah et al., 2011).
Gambar 8. Media tetap berwarna
kuning setelah penambahan reagen.
Uji Voges- Bakteri tidak dapat

Preskauer memproduksi asetoin dari
(VP) degradasi glukosa selama
fermentasi α-2,3-butanediol
karena media tidak berubah
warna setelah penambahan
reagen. Hal ini sesuai dengan
sifat Clostridium perfringens
Miah et al., 2011).
Gambar 9. Tidak terjadi perubahan

warna pada media menunjukkan
reaksi negatif.
Uji Motilitas Bakteri tersebut merupakan

bakteri non motil karena
tumbuh hanya pada bekas
tusukan, sesuai dengan sifat
Miah et al., 2011).

hanya di area bekas tusukan saja.
115
Uji Litmus Fermentasi laktosa

Milk mengasamkan media dan
mengubah media menjadi
merah muda, litmus yang
direduksi berwarna putih, dan
produksi gas berat yang
memecah clot disebut stormy
fermentation. Hal ini sesuai
Markey et al., 2013).
Gambar 12. Media berwarna pink,
putih, dan terbentuk stormy-clot.
Uji Produksi asam dari
Fermentasi fermentasi gula akan
Karbohidrat menurunkan pH dibawah
netral sehingga media
berubah warna menjadi
kuning, maka bakteri tersebut
mampu memfermentasikan
glukosa, laktosa, sukrosa, dan
maltose. Sesuai dengan sifat
bakteri Clostridium
perfringens (Miah et al.,
Gambar 13. Pada media glukosa, 2011).
laktosa, sukrosa, dan maltose
mengalami perubahan warna
menjadi kuning.
Egg Yolk Agar Terbentuknya endapan putih

yang membesar distimulasi
oleh produksi enzim
lesitinase, namun tidak
memproduksi enzim lipase.
Hal tersebut sesuai dengan
sifat bakteri Clostridium
perfringens (Markey et al.,
2013).
Gambar 14. Bakteri tumbuh pada

media menampilkan endapan putih
yang membesar.
116
Polymerase Band yang muncul pada 324

Chain bp merupakan Clostridium
Reaction perfringens berdasarkan
(PCR) control positif pada jalur ke-6
(Thomas et al., 2014).
Gambar 15. Terbentuk band dengan

berat molekul 324 bp.
Tabel 2. Hasil pemeriksaan Clostridium colinum

Media Hasil Pemeriksaan Interpretasi
Plat Agar Morfologi koloni dikelilingi
Darah (PAD) oleh zona hemolisis sebagian
(α-hemolisis), sirkular,
berdiameter 1-2 mm, dan
cembung sesuai dengan
morfologi Clostridium
colinum (Swayne et al.,
2020).
Gambar 1. Terbentuknya zona

hemolisis sebagian (α-hemolisis).
Reinforced Pertumbuhan bakteri

Clostridial ditunjukkan dengan
Agar (RCA) menghitamnya media sebagai
pereduksi sulfit dengan
koloni berdiameter 1–2 mm,
berwarna putih, melingkar,
cembung, mengkilap, halus,
dan semi-translusen dengan
tepi berserabut. Hasil sesuai
dengan morfologi
Clostridium colinum (Swayne
et al., 2020).
pada media RCA ditunjukkan
dengan menghitamnya media.
117
Pengecatan Koloni bakteri dalam

Gram pengecatan Gram berbentuk
batang dan berwarna ungu
(Gram positif), sesuai dengan
bakteri Clostridium colinum
Gambar 3. Pada pengecatan Gram

menunjukkan bakteri berwarna
ungu dan berbentuk batang.
Uji Katalase Tidak terbentuknya

gelembung gas menunjukkan
bahwa bakteri tidak memiliki
enzim katalase yang
mengubah H2O2 menjadi H2O
dan O2 sesuai dengan sifat
Clostridium colinum (Leboffe
Gambar 4. Tidak terbentuk
and Pierce, 2011; Swayne et
gelembung pada uji katalase.
al., 2020).
Uji Urease Bakteri tidak mampu

menghidrolisis urea dengan
enzim urease menyebabkan
media tetap berwarna kuning,
hal ini sesuai dengan sifat
Swayne et al., 2020).
Gambar 5. Media tidak mengalami

perubahan warna dan tetap
berwarna kuning.
118
Uji Indol Bakteri tidak mampu

menghasilkan molekul indol
karena tidak adanya enzim
tryptophanase, hal ini sesuai
dan Pierce, 2011; Swayne et
al., 2020).
Gambar 6. Media tidak membentuk

cincin merah setelah penambahan
reagen indol.
Uji Methyl Bakteri tidak dapat

Red (MR memfermentasi asam
campuran sehingga media
akan berwana kuning, hal ini
sesuai dengan sifat
dan Pierce, 2011; Swayne et
al., 2020).
Gambar 7. Media tetap berwarna
kuning setelah penambahan reagen.
Uji Voges- Bakteri tidak dapat

Preskauer memproduksi asetoin dari
(VP) degradasi glukosa selama
fermentasi α-2,3-butanediol
karena media tidak berubah
warna setelah penambahan
reagen. Hal ini sesuai dengan
sifat Clostridium colinum
Swayne et al., 2020).
Gambar 8. Tidak terjadi perubahan

warna pada media menunjukkan
reaksi negatif.
119
Uji Motilitas Bakteri tersebut merupakan

bakteri motil karena tumbuh
menyebar tidak hanya pada
bekas tusukan, hal ini sesuai
dengan sifat Clostridium
colinum (Leboffe dan Pierce,
2011; Swayne et al., 2020).

hanya di area bekas tusukan saja.
Uji Litmus Celah atau retakan pada

Milk bekuan adalah bukti produksi
gas.. Hal ini sesuai dengan
sifat bakteri Clostridium
colinum (Leboffe dan Pierce,
2011; Swayne et al., 2020).
Gambar 10. Media tidak berubah

warna dan terdapat retakan.
Uji Fermentasi Produksi asam dari
Karbohidrat fermentasi gula akan
menurunkan pH dibawah
netral sehingga media
berubah warna menjadi
kuning, maka bakteri tersebut
mampu memfermentasikan
glukosa, sukrosa, dan
maltosa. Sesuai dengan sifat
Gambar 11. Pada media glukosa,
sukrosa, dan maltosa mengalami
perubahan warna menjadi kuning.
120
Egg Yolk Agar Clostridium colinum

diketahui tidak memproduksi
enzim lesitinase dan enzim
lipase, maka hasil uji sesuai
Clostridium colinum (Swayne
et al., 2020).
Gambar 12. Bakteri tumbuh, tetapi

tidak terjadi perubahan pada media.
Polymerase Band yang muncul pada 905

Chain bp merupakan Clostridium
Reaction colinum berdasarkan kontrol
(PCR) positif pada jalur 3 dan 4
(Roussan et al., 2009).
Gambar 13. Terbentuk band dengan

berat molekul 905 bp.
Kesimpulan
Berdasarkan hasil pemeriksaan mikrobiologi, maka dapat disimpulkan
bahwa pada ayam terisolasi dan teridentifikasi bakteri Clostridium perfringens
dan Clostridium colinum.
Daftar Pustaka
Leboffe, M. J. and Pierce, B. E. 2011. A Photographic Atlas for Microbiology
Laboratory. USA: Morton Publishing Company. 
Markey, B., Leonard, F., Archambault, M., Cullinane, A., Maguire, D. 2013.
Clinical Veterinary Microbiology 2nd Edition. UK: Mosby Elsevier.
Miah, M. S., Asaduzzaman, M., Sufian, M. A. and Hossain, M. M. 2011. Isolation

121
of Clostridium perfringens, Causal Agents of Necrotic Enteritis in

Chickens. Journal Bangladesh Agril. Univ. 9(1): 97–102.
Osman, K., Soliman, Y., Amin, Z. M. S., Aly, M. 2012. Prevalensi Clostridium
perfringens Isolat Tipe A Pada Ayam Broiler Komersial dan Induk Ayam
Broiler Induk di Mesir. Sci. Teknologi. Mati. Int. Epiz., 31(3): 931-941.
Quinn, P. J., Markey, B. K., Leonard, F. C., FitzPatrick, E. S., Fanning, S.,
Hartigan, P. J. 2002. Veterinary Microbiology and Microbial Disease 2nd
Edition. USA: Wiley-Blackwell.
Roussan, D. A., Rifai, R. H. Al., Khawaldeh, G. Y., Totanji, W. S. 2009. Flock-
Level Prevalence of Clostridium colinum in Broiler Flocks with
Digestive Disease in Jordan by Polymerase Chain Reaction. Poultry
Science, 88: 1639-1642.
D. L. 2020. Diseases of Poultry 14th Edition. USA: Wiley-Blackwell.
Thomas, P., Arun, T. R., Karthik, K., Berin, P. V., Kumar, M. A., Neetu S.,
Usharani, J., Palanivelu, M., Gupta, S. K., Dhama, K., Viswas, K. N.
2014. Molecular Characterization and Toxinotyping of a Clostridium
perfringens Isolate from a Case of Necrotic Enteritis in Indian Kadaknath
Fowl. Asian Journal of Animal and Veterinary Advances, 9(7): 385-394.
Mengetahui,
Prof. drh. Widya Asmara, SU., Ph.D Dominica Alma D., S.K.H.
122
Laporan Pemeriksaan Patologi Klinik

Perubahan Makros : penebalan dinding usus, hemoragi multifokal, terdapat
lesi nekrotik berwarna kekuningan yang ditutupi
pseudomembran, ditemukan cacing Ascaridia galli pada
usus, dinding sekum menebal karena edema dan
infiltrasi, hepar terdapat area nekrosis tertekan melingkar
multifokal.
Perubahan Mikros : nekrosis koagulasi dan pengelupasan sel epitel usus, vili
hiperplasi, hemoragi dan nekrosis pada sekum.
Diagnosa : infeksi Clostridium sp., Ascariasis, dan Koksidiosis
Bahan pemeriksaan : Darah dengan antikoagulan EDTA dan preparat apus

darah dengan pengecatan Giemsa.
123
Tabel 1. Gambaran darah dan perubahan kimia klinik (Akhtar et al., 2014; El-
Deen et al., 2019; Ibrahim et al., 2017; (Prastowo dan Ariyadi, 2015).
Pemeriksaan
6
Eritrosit (10 sel/mm3) 2.5-3.5 1.23 ± 0.35 Menurun
Hb (g/dL) 7.0-13 6.3 ± 0.9 Menurun
PCV (%) 22-35 17 ± 2.10 Menurun
MCV (fL) 90-140 83.26 ± 3.4 Menurun
MCH (pg) 33-47 28.49 ± 1.6 Menurun
MCHC (g/dL) 26-34 16.7 ± 13 Menurun
Leukosit (103 12.000-13.000 20.96 ± 2.6 Meningkat
sel/mm3)
Limfosit (103 sel/mm3) 5.5-9.0 12.18 ± 1.89 Meningkat
Neutrofil (103 1.5-3.5 3.90 ± 0.3 Meningkat
sel/mm3)
Monosit (103 sel/mm3) 0.15-2 2.4 ± 0.4 Meningkat
Eosinofil (103 0-1 1.2 ± 0.3 Meningkat
sel/mm3)
Heterofil (103 3-6 9.5 ± 2.4 Meningkat
sel/mm3)
TPP (g/dL) 3.3-5.5 3.02 Menurun
Albumin (g/dL) 1.44 1.01 ± 0.01 Menurun
Fibrinogen (g/dL) 0.1-0.41 0.3 Normal
AST (U/L) 48.60 85.00 ± 2.00 Meningkat
ALT (U/L) 9.22 20.16 ± 0.46 Meningkat
Gambar 1. Hemogram unggas yang mengalami anemia, terlihat adanya bentukan

sel darah merah yang lebih kecil (mikrositik) (Samour, 2016).
Kesimpulan
Berdasarkan hasil pemeriksaan studi Laboratorium Patologi Klinik
menunjukkan ayam broiler yang terinfeksi Clostridium sp., Ascaridia galli, dan
124
Eimeria sp. mengalami anemia mikrositik-hipokromik. Kemudian leukositosis

hipoalbuminemia, dan peningkatan enzim ALT dan AST.
Daftar Pustaka
Akhtar, M., Awais, M. M., Anwar, M. I., Ehtisham-ul-Haque, S., Nasir, A.,
Saleemi, M. K., Ashraf, K. 2014. The Effect of Infection with Mixed
Eimeria Species on Hematology and Immune Responses Following
Newcastle Disease and Infectious Bursal Disease Booster Vaccination in
Broilers. Veterinary Quaterly.
El-Deen, N. A. M., El-Din, I. M. G., Khodary, M. R. 2019. Effect of
Experimental Clostridium perfringens Infection on Some Immunological
Hematological and Biochemical Values in Broiler Chickens. Zag Vet J.,
47(2): 222-233.
Ibrahim, G. A., Mahmoud, B. S., Ammar, A. M., Youssef, F. M. 2017. Toxin
Genotyping of C. perfringens Isolated from Broiler Cases of Necrotic
Enteritis. Animal and Veterinary Sciences, 5(6): 108-120.
Prastowo, J. dan Ariyadi, B. 2015. Pengaruh Infeksi Cacing Ascaridia galli
Terhadapa Gambaran Darah dan Elektrolit Ayam Kampung (Gallus
domesticus). Jurnal Medika Veterinaria, 9(1): 12-17.
Mengetahui,
Prof. Dr. drh. Siti Isrina Oktavia Dominica Alma D., S.K.H.
Salasia/drh. Dorothea Vera Megarani
MPH.

Laporan Total Koasistensi

Diunggah oleh

Informasi Dokumen

Hak Cipta

Format Tersedia

Bagikan dokumen Ini

Bagikan atau Tanam Dokumen

Opsi Berbagi

Apakah menurut Anda dokumen ini bermanfaat?

Apakah konten ini tidak pantas?

Hak Cipta:

Format Tersedia

Laporan Total Koasistensi

Diunggah oleh

Hak Cipta:

Format Tersedia

LAPORAN KOASISTENSI DIAGNOSA LABORATORIK

Infeksi Clostridium perfringens dan Clostridium colinum disertai Penyakit

FAKULTAS KEDOKTERAN HEWAN

Yogyakarta, 1 Desember 2020

KATA PENGANTAR ............................................................................................ ii

Infeksi Clostridium perfringens dan Clostridium colinum disertai Penyakit

Dominica Alma Dewanti, S.K.H.

Ayam berumur empat minggu mengalami penurunan nafsu makan, berat

melaksanakan vaksinasi rutin. Faktor lingkungan juga menyebabkan

Gambar 2. Jejunum; terdapat nekrosis mukosa usus yang menyebar sepenuhnya

Pemeriksaan makroskopik pada hepar menunjukkan adanya lesi nekrotik

Gambar 5. Hepar; mengandung banyak foki nekrotik kuning yang tersebar

Gambar 8. Jejunum; mukosa nekrotik dan ditutupi oleh pseudomembran

Ulseratif Enteritis (UE)

Gambar 10. Duodenum dan jejunum; banyak foki transmural multifokal

Gambar 15. Jejunum; ulserasi multifokal hingga penggabungan ulserasi pada

Gambar 21. Ditemukan adanya oosit (panah abu), mikrogametosit (panah

(Taylor et al., 2016)

Ascaridia galli adalah cacing nematoda yang ukurannya paling besar

Gambar 28. Siklus hidup Ascaridia galli (Sarjono, 2020).

(Taylor et al., 2016)

Masing-masing dari spesies Eimeria memiliki tempat predileksi yang

yang terjangkit. Ayam pedaging paling sering terkena Eimeria acervulina,

Perkembangan parasit dalam sel inang melibatkan tahap

Pada stadium gametogoni skizon pecah saat matang (hari ke-3),

brunetti menyebabkan nekrosis dan enteritis mukoid berdarah; Eimeria maxima

Gambar 32. Area lesion scoring (Conway and McKenzie, 2007).

Gambar 36. Morfologi Knemidocoptes pillae betina dengan perisai dorsolateral

dikenal sebagai ‘ scaly face ’ . Aktivitas menggali betina pada prinsipnya

Gambar 37. Morfologi bakteri Clostridium perfringens berbentuk batang dan

perkembangbiakan bakteri. Clostridium perfringens mampu memanfaatkan lendir

penyakit pada ayam muda, menunjukkan depresi berat, keengganan untuk

Gambar 39. Pertumbuhan bakteri pada media KHT menunjukkan adanya

Bakteri diisolasi pada media Reinforced Clostridial Agar (RCA) dilakukan

membedakan bakteri berdasarkan karakteristik hemolitiknya. Beberapa spesies

Koloni yang diduga Clostridium perfringens kemudian dilakukan

adalah kristal violet. Iodin ditambahkan sebagai mordan untuk meningkatkan

Gambar 42. Koloni Clostridium perfringens dalam pengecatan Gram berbentuk

Uji urease dilakukan untuk mendeteksi bakteri yang mampu

Uji indol digunakan untuk mengetahui kemampuan bakteri menghasilkan

Uji Methyl Red (MR) bertujuan mendeteksi organisme yang mampu

Uji Voges-Proskauer (VP) bertujuan mengetahui kemampuan bakteri yang

Uji motilitas bertujuan untuk mengetahui kemampuan motilitas bakteri.

Uji fermentasi karbohidrat bertujuan untuk mengetahui kemampuan

Gambar 50. Uji fermentasi karbohidrat menggunakan berbagai macam jenis

Egg Yolk Agar bertujuan untuk mendeteksi produksi lesitinase, aktivitas

Tabel 2. Hasil isolasi dan identifikasi bakteri Clostridium perfringens (Leboffe

Polymerase Chain Reaction (PCR)

Gambar 52. PCR menunjukkan hasil CPE. Kehadiran band 2,1 kb

Gambar 53. Gel hasil elektroforesis dari pengetikan toksin Clostridium

dengan NE. Diagnosis banding utama untuk Clostridium perfringens meliputi

10% (Pattison et al., 2008; Swayne et al., 2020).

Kemudian dapat dilakukan pula pengecatan Gram. Jaringan hati nekrotik

Uji urease dilakukan untuk mendeteksi bakteri yang mampu

Uji indol digunakan untuk mengetahui kemampuan bakteri menghasilkan

Uji Methyl Red (MR) bertujuan mendeteksi organisme yang mampu

Uji Voges-Proskauer (VP) bertujuan mengetahui kemampuan bakteri yang

Gambar 61. Tidak adanya perubahan warna pada uji Voges-Proskauer

Uji motilitas bertujuan untuk mengetahui kemampuan motilitas bakteri.

Uji fermentasi karbohidrat bertujuan untuk mengetahui kemampuan

Pierce, 2011). Hasil pemeriksaan Clostridium colinum mampu memfermentasi

Gambar 64. Uji fermentasi karbohidrat menggunakan berbagai macam jenis

Egg Yolk Agar bertujuan untuk mendeteksi produksi lesitinase, aktivitas

Gsmbar 65. Media Egg Yolk Agar (Zimbro et al., 2009).