diajukan untuk memenuhi salah satu tugas mata kuliah Praktikum Kimia Anorganik,
dosen pengampu Drs. Ali Kusrijadi, M.Si.
Disusun oleh:
Iim Ismaya NIM1805930
Kimia D 2018
Spektrofotometer adalah alat yang akan berinteraksi dengan sampel yang tersedia untuk analisis
kimia. Spektrofotometer mengukur seberapa banyak cahaya yang diserap oleh sampel pada
frekuensi cahaya tertentu. Analis dapat menganalisis sifat sampel yang dapat diukur dengan
cepat dan terpercaya oleh alat. Instrumen Spectroenic 20 beroperasi pada satu panjang
gelombang cahaya dan waktu yang dapat diatur oleh operator. Alat ini juga berfungsi untuk
menganalisis sampel yang dapat diolah secara kimiawi. Kemudian spektrofotometri ini adalah
cara yang cepat dan sensitif untuk menentukan berapa banyak zat yang terkandung dalam
sampel.
Hukum Lambert-Beer
A=ϵBC
A adalah absorbansi sampel yaitu berapa banyak cahaya yang diserap; ϵ adalah koefisien
ekstingsi; B adalah jarak tempuh sinar; C adalah konsentrasi.
Ketika mengukur zat berwarna konstan dan jarak tempuh sinar sama, maka semakin tinggi
konsentrasi semkin tinggi juga cahaya yang diabsorb (diserap).
Untuk mengukur absorbansi larutan, kita dapat memplot grafik absorbansi terhadap konsentrasi
kemudian kita akan mendapatkan kurva. Setelah mendapatkan kurva kalibrasi, kita bias
mendapatkan harga konsentrasi dari kurva kalibrasi terhadap konsentrasinya. Pengukuran harus
dilakukan pada panjang gelombang optimal yaitu panjang gelombang di mana absorbansi
tertinggi (lambda maksimal).
Cara kerja spektronik 20. Ada sumber cahaya dan untuk sebagian besar yang akan digunakan itu
adalah bohlam filamen tungsten memancarkan cahaya putih yang merupakan cahaya dengan
banyak panjang gelombang, kemudian ada tabung pelepasan deuterium. Berikutnya adalah
monokromator untuk mengatur panjang gelombang. Kemudian melewati sampel yang bisa
menyerap cahaya atau tidak mnyerap cahaya dan cahaya yang didapatkan akan masuk ke
detektor. Pertama-tama letakkan larutan kosong yang tidak akan menyerap cahaya sama sekali
sehingga semua cahaya melewatinya dan detektor menyatakan 100% cahaya yang datang
melalui absorbansi nol. Kemudian masukkan sampel yang akan menyerap beberapa cahaya dan
sedikit demi sedikit cahaya yang masuk ke dalam detector dan detektor akan menghasilkan
angka berapa banyak cahaya itu telah diserap.
Prosedur
Tombol power atau knob berfungsi untuk menyalakan atau mematikan instrument,
pastikan instrument telah tersambung ke listrik. Knob sebelah kanan power digunakan untuk
setting 100 persen transmitan artinya 0% absorbansi . Ada filter di sini yang berubah yang satu
ini berjalan dari 340 hingga 599 nanometer dan kemudian dari 600 hingga 950 jadi jika kita ubah
panjang gelombang di seberang itu batas Anda perlu memastikan itu.
Terdapat beberapa larutan kalibrasi berwarna biru dengan konsentrasi berbeda dan beberapa
larutan sampel dalam kuvet. Cara menggunakan spektronik 20 ;
1. Sambungkan spektronik 20 ke listrik. Tunggu sekitar 5 menit
2. Kemudian menentukan lamda maksimum dengan cara mengatur knob bagian pengatur
panjang gelombang (seperti pada gambar diatas) di putar ke 400 nanometer.
3. Lalu atuur tombol mode ke bentuk transmisi. Dan atur knob sebelah kiri bawah hingaa nol.
jika tidak ada sampel yang dimasukkan, akibatnya jalur cahaya menjadi terang karena tidak
ada cahaya yang melewatinya.
4. Kemudian, masukkan sel berisi larutan tak berwarnaa. Tanda putih pada kuvet harus sejajar
dengan garis pada tempat memasukkan sampel di spektronik 20, kemudian ditutup.
5. Setelah pengukuran larutan tersebut, kita akan mendapatkan 100% cahaya yang melalui
larutan , maka atur knob sebelah kanan menjadi 100% transmittan
4. Masukkan sampel ke dalam ruang sampel, panjang gelombang diatur sebesar 400 atau 399
nanometer. Nilai absorbansi dari sampel tersebut adalah 0,218
5. Kemudian uji sampel pada panjang gelombang 410 dan catat nilai absorbansinya sehingga
dapat dibuat kurva kalibrasi. Gunakan hanya satu kuvet saat mengukur banyak larutan pada
panjang gelombang tertentu, karena untuk meminimalisasi ketidakkonsistenan.
6. Kuvet diisi dengan larutan blanko, kemudian masukkan ke dalam ruang sampel.
9. Masukkan larutan sampel pertama dengan konsentrasi 1×10-5 M yang akan diuji. Nilai
absorbansi larutan tersebut adalah 0.009.
10. Buang larutan sampel pertama, kemudian bilas kuvet menggunakan larutan sampel kedua.
11. Masukkan larutan sampel kedua dengan konsentrasi 2×10-5 M yang akan diuji. Nilai
absorbansi larutan tersebut adalah 0.03.
12. Buang larutan sampel kedua, kemudian bilas kuvet menggunakan larutan sampel ketiga.
13. Masukkan larutan sampel ketiga dengan konsentrasi yang tidak diketahui. Nilai absorbansi
larutan tersebut adalah 0.16. Dari kurva kalibrasi maka konsentrasi senyawa ini akan
diketahui.
14. Setelah mengetahui berbagai nilai absorbansi dari masing-masing sampel, maka dibuat plot
kurva kalibrasi antara konsentrasi dengan nilai absorbansi.
Ketika pengukuran gagal, maka baca intruksi yang ada untuk memperbaikinya. Pembacaan
absorbansi dengan nilai 1,999 (berkedip) berarti tidak ada cahaya yang mencapai detektor.
Aturlah transmisi sehingga menampilkan nilai absorbansi yang stabil (tidak berkedip).
kesimpulan: Spektrofotometri adalah alat ampuh yang dapat digunakan untuk menentukan
konsentrasi sampel berwarna.
Video kedua : The Spectrophotometer. A demo and practice experiment
Spektrofotometer adalah alat yang digunakan untuk mengukur pengaruh suatu sampel pada suatu
berkas cahaya. Kita dapat belajar banyak tentang suatu zat dengan mempelajari cara zat itu
berinteraksi dengan cahaya.
Sebuah lampu menyediakan sumber cahaya. Pancaran cahaya mengenai kisi difraksi, yang
bekerja seperti prisma dan memisahkan cahaya menjadi panjang gelombang komponennya. Kisi
diputar sehingga hanya panjang gelombang cahaya tertentu yang mencapai celah keluar.
Kemudian cahaya berinteraksi dengan sampel. Dari titik ini, detektor mengukur transmisi dan
absorbansi sampel.Transmisi mengacu pada jumlah cahaya yang melewati sampel sepenuhnya
dan menyerang detektor. Absorbansi adalah pengukuran cahaya yang diserap oleh sampel.
Detektor mendeteksi cahaya yang ditransmisikan melalui sampel dan mengubah informasi ini
menjadi tampilan digital.
Dalam percobaan ini, kita akan menentukan spektrum absorbansi pewarna merah makanan.