ISOLASI DAN IDENTIFIKASI BAKTERI Haemophillus influenzae dan Yersinia pestis
Haemophillus influenzae Yersinia pestis
Menyebabkan penyakit meningitis,
bronchitis, pharyngitis, pneumonia,
Patogenitas
conjunctivitis, carditis dan infeksi
pada alat kelamin
Darah, sputum, CSF, Pharyng swab,
Spesimen uretra secret, vagina secret, secret
mata
Hari ke-1
Penanaman pada media kaya, Specimen ditanam pada:
diperkaya,dan differential 1. BAP yg ditempeli disk factor V dan
factor X
2. CAP yang diperkaya dengan yeast
extract
3. BAP yg digores dengan S. aureus
hemolitikus
Inkubasi Masukkan anaerobic jar + CO2 5-10% →
inkubasi pada 350C, 24-48 jam
Hari ke-2
Pengamatan, Pengecatan, Pengamatan pertumbuhan koloni:
subkultur 1. BAP + disk factor V dan X: koloni
Sangat kecil sekali, jernih tidak
berwarna, smooth, cembung, tepi
halus
2. CAP + yeast extract: koloni bulat
kecil-kecil , jernih, mucoid,
sedikit cembung, tepi halus
3. BAP + S. aureus: koloninya sama
seperti koloni yang tumbuh pada BAP
+ factor V dan X serta bersifat
“satelitisme”
Pengecatan Gram:
Koloni tersangka yang tumbuh pada
media di atas → di cat Gram → jika
Patogen terhadap manusia dan hewan
dan menyebabkan penyakit pest
Darah, sputum, pus, jaringan tubuh
Sebelum ditanam di media, specimen
di cat Wayson → dicari bakteri
bentuk batang bipolair
Selanjutnya sepesimen ditanam pada
BAP, MC, DCA plate, HIA plate
Inkubasi 370C, 48 jam, suasana
aerob/fakultatif aerob
Pengamatan pertumbuhan koloni:
1. BAP: koloni kecil-kecil, abu-abu
putih, smooth, tepi
bergelombang, sedikit cembung,
anhaemolitik
2. MC:koloni kecil-kecil, jernih
tidak berwarna atau sedikit
rose, smooth
3. DCA: koloni kecil sekali,
kemerah-merahan, pusat / tengah
koloni lebih merah, smooth
4. HIA: koloni kecil-kecil, jernih
tidak berwarna, smooth, tepi ada
yg bergelombang, sedikit cembung
Subkultur pada media Phage test:
 ditemukan kokobasil/batang kurus,
Panjang, polimorf Gram negatif →
lanjut di sub kultur
Sub kultur:
Diambil koloni tersangka dari salah
satu media di atas → subkultur ke
media CAP / CAT
Masukkan anaerobic jar + CO2 5-10% →
inkubasi pada 350C, 24-48 jam
Inkubasi
Hari ke-3
Pengamatan, dan Subkultur pada Subkultur :
media BR Koloni yang tumbuh pada CAP / CAT →
disubkultur ke media BR
Uji-uji kimia yang diperlukan:
Uji oksidase, katalase
Media BR masukkan anaerobic jar + CO2
5-10% → inkubasi pada 350C, 24-48
Inkubasi jam
Hari ke-4
Pembacaan hasil uji BR, Pembacaan hasil uji BR dan di catat
melakukan uji-uji tambahan,
dan penarikan kesimpulan Uji-uji kimia yang diperlukan:
Uji oksidase, katalase
Semua hasil yang telah dicatat →
disamakan dengan tabel sifat-sifat
Hamophillus → penarikan kesimpulan
diagnosa
Koloni tersangka yang tumbuh pada
media di atas diambil → diuji phage
test
Inkubasi 370C, 48 jam, suasana
aerob/fakultatif aerob
Pengamatan media phage test:
Bila phage tes positif →
dilanjutkan di subkultur
Bila phage test negatiif → tidak
perlu dilanjut, bererti bukan Y.
pestis
Subkultur:
Koloni yang tumbuh pada media phage
tes → disubkultur ke media BR
Inkubasi 370C, 48 jam, suasana
aerob/fakultatif aerob
Pembacaan hasil uji BR dan di catat
Uji-uji kimia yang diperlukan:
Uji oksidase, katalase
Semua hasil yang telah dicatat →
disamakan dengan tabel sifat-sifat
Yersinia → penarikan kesimpulan
diagnosa