Nama : Eva Hikmatul Maula

NIM : P1337434319053
S,Tr TLM Tk. 3

Resume Pembuatan suspensi sel dan tes sel

Pembuatan suspensi sel ada 3 tahap yaitu : Pemisahan serum/plasma, Pencucian
sel darah merah, dan Pembuatan suspensi sel darah merah A,B,O.

A. Pemisahan serum/plasma dari sel darah merah

 Prinsip : Darah dengan pemutaran akan terjadi pemisahan antara plasma dan sel-
sel darah. dengan dicentrifuge sehingga membentuk 3 lapisan yaitu plasma, buffy
coat, dan eritrosit.
 Tujuan : Memisahkan Plasma dari sel-sel darah
 Kegunaan : Persiapan pembuatan suspensi sel darah merah
Persiapan penentuan antigen golongan darah
 Cara kerja
1. Darah dimasukkan ke dalam tabung centrifuge
2. Putar 3000 – 3300 rpm selama 2-3 menit
3. Supernatan diambil dengan pipet tetes dan pindahkan ke dalam tabung lain dan
sel darah merah terdapat bagian di bawah tabung
4. Sel darah merah dan plasma diberi label kemudian di simpan
 Cara kerja Pemisahan sel darah merah
1. Contoh darah anti koagulan dan tanpa koagulan
2. Putar/centrifuge 3000 – 3300 rpm selama 2-3 menit
3. Pisahkan serum/plasma dari sel darah merah
4. Kemudian ada 2 pemisahan yaitu sel darah merah (sel grouping, DCT) dan
serum/plasma (serum grouping, screening Ab, identifikasi antibody)
B. Pencucian sel darah merah
 Prinsip : sel darah merah dengan penambahan larutan saline dan pemutaran maka
antibody (protein/globulin) di sekitar sel darah merah akan hilang.
 Tujuan : menghilangkan antibody yang ada disekitar sel darah
 Kegunaan : Persiapan pembuatan susupensi sel darah merah
Persiapan penentuan antigen golongan darah
 Cara Kerja
1. Masukkan 8 tetes sel darah yang telah dipisahkan ke dalam tabung
3
2. Ditambahkan larutan saline/NaCl sebanyak plasma tabung, dan homogenkan
4
3. Putar 3000 – 3300 rpm selama 2-3 menit
4. Supernatan dibuang dengan pipet Pasteur
 5. Lakukan pencucian sebanyak 3x
6. Endapan sel darah merah yang telah dicuci merupakan suspense 100%

C. Pembuatan suspensi sel darah merah A,B,O

 Prinsip : Membuat ketepatan sel darah merah menjadi enceran guna
mengoptimalkan reaksi antigen pada sel darah terhadap antibody.
 Cara Kerja
1. Suspensi sel 100% dicek ulang golongan darah dengan anti A dan anti B
2. Buat suspensi 10%, 5%
3. Berikan label
Pembuatan suspensi 5%
 Cara Kerja
1. Disiapkan satu tabung reaksi terlebih dahulu
2. Diteteskan NaCl 0,9% di teteskan ke dalam tabung sebanyak 19 tetes.
3. Diteteskan sel darah merah pekat yang telah dicuci (100%) sebanyak 1 tetes
4. Dikocok atau dihomogenkan dengan pipet Pasteur
Pembuatan suspensi 10%
1. Disiapkan satu tabung reaksi terlebih dahulu
2. Diteteskan NaCl 0,9% di teteskan ke dalam tabung sebanyak 9 tetes.
3. Diteteskan sel darah merah pekat yang telah dicuci (100%) sebanyak 1 tetes
4. Dikocok atau dihomogenkan dengan pipet Pasteur
Pembuatan suspensi 40%
1. Disiapkan satu tabung reaksi terlebih dahulu
2. Diteteskan NaCl 0,9% di teteskan ke dalam tabung sebanyak 3 tetes.
3. Diteteskan sel darah merah pekat yang telah dicuci (100%) sebanyak 2 tetes
4. Dikocok atau dihomogenkan dengan pipet Pasteur

Catatan : 5% Pemeriksaan golongan darah, pemeriksaan silang reaksi

10% Pemeriksaan golongan darah (Slide test)
40% Pemeriksaan golongan darah rhesus

Persiapan Reagensia dan pembuatan test Sel Standar

A. Membuat test sel Astandar, test sel B standar, test sel O standar
 Teknik pembuatan
Test sel A Standar
Test sel B Standar
Test sel O Standar
 Bahan
 3 jenis darah lengkap golongan A
Darah lengkap golongan B
3 jenis darah lengkap golongan O
 Cara Kerja
1. Siapkan 3 buah tabung beri label : Tabung I – A, Tabung II – B, Tabung III –
O
2. Isi tabung dengan pool 3 jenis darah lengkap golongan A ( jumlah sesuai
kebutuhan )
3. Isi tabung II dengan darah lengkap golongan B ( jumlah sesuai kebutuhan )
4. Isi tabung III dengan pool 3 jenis darh lengkap golongan O ( jumlah sesuai
kebutuhan )
5. Pasdarah yang akan dibuat test sel standar sudah benar golongan darahnya.
6. Cuci sel sebanyak 3 kali dengan salin
7. Buang supernatant terakhir sebanyak-banyaknya ( PRC 100% )
8. Buat suspensi sel darah merah sesuai kebutuhan ( 5% atau 100% )
9. Masukkan dalam wadah ( botol ) beri label dan tanggal pembuatan sesuai isi
test sel
10. Validasi ketiga test sel dengan reagensia anti-A, anti-B
11. Simpan pada suhu 2-8°C
12. Test sel standar hanya dapat digunakan pada hari dibuat ( 1 hari )
 Membuat BA 6%
Rumus
V1XN1= V2XN2
V1= Volume awal BA 22%
N1= Konsentrasi BA 22%
V2= Volume akhie BA 6% ( Yang dicari)
N2= Konsentrasi BA 6%
Contoh : V1XN1= V2XN2
3x22%= V2X6%
3 X 22
V2= = V2 = 11
6
Ambil 3 tetes BA 22% kedalam tabung, tambahkan 8 tetes NaCl