PENGARUH PENYIMPANAN TERHADAP KADAR

SIRUP KERING SEFADROKSIL GENERIK

YANG TELAH DIREKONSTITUSI

Karya Tulis Ilmiah

Diajukan Untuk Menyelesaikan Pendidikan Program Studi

Diploma III Farmasi Klinis Dan Komunitas

Disusun Oleh:
ARIS ALIFUDIN, NIM : 1948301005
DEFI FADJRINA, NIM : 1948301006
DEVINA PUTERI UTAMI, NIM : 1948301007

PROGRAM STUDI DIPLOMA III FARMASI KLINIS DAN KOMUNITAS

POLITEKNIK KESEHATAN GENESIS MEDICARE
DEPOK
2019
 Halaman Pernyataan Orisinalitas

Peneliti menyatakan dengan sebenarnya bahwa KTI yang berjudul Pengaruh Penyimpanan
Terhadap Kadar Sirup Kering Sefadroksil Generik Yang telah direkonstitusi adalah karya
penelitian saya sendiri dan tidak terdapat karya ilmiah yang pernah diajukan oleh orang lain untuk
memperoleh gelar akademik serta tidak terdapat karya atau pendapat yang pernah ditulis atau
diterbitkan oleh orang lain, kecuali yang tertulis dengan acuan yang disebutkan sumbernya, baik
dalam naskah karangan dan daftar pustaka. Apabila ternyata di dalam naskah KTI ini dapat
dibuktikan terdapat unsur-unsur plagiasi, maka saya bersedia menerima sanksi sesuai ketentuan
peraturan perundang-undangan.

Depok, 30 September 2021

Peneliti

( Defi Fadjrina )
NIM. 1948301006
 Halaman Persetujuan

Karya Tulis Ilmiah ini telah disetujui dan diperiksa untuk dipertahankan dihadapan Penguji KTI
Program Studi D-III Farmasi Klinis Dan Komunitas
Politeknik Kesehatan Genesis Medicare

Depok, 30 September 2021

Menyetujui,

Pembimbing I Pembimbing II

Mengetahui,
Direktur Politeknik
Kesehatan Genesis Medicare
 Halaman Pengesahan

Pengaruh Penyimpanan Terhadap Kadar Sirup Kering Sefadroksil Generik

Yang Telah Direkonstitusi

Disusun Oleh:
Nama : Defi Fadjrina
NIM : 1948301006

Telah dipertahankan di hadapan tim penguji

Depok, 30 September 2021

Menyetujui,

Penguji I Penguji II Penguji III

Mengetahui,

Direktur Politeknik
Kesehatan Genesis Medicare
 KATA PENGANTAR

Puji syukur alhamdulillah saya panjatkan kehadirat Allah SWT karena hanya dengan segala
rahmat dan hidayah-Nya lah yang telah memberikan kekuatan dan kemampuan sehingga Karya
Tulis Ilmiah yang berjudul “Pengaruh Penyimpanan Terhadap Kadar Sirup Kering
Sefadroksil Generik Yang Telah Direkonstitusi” ini bisa selesai tepat pada waktunya.
Akhirnya dengan segala kerendahan hati izinkanlah penulis untuk menyampaikan terima kasih dan
kepada pihak yang telah memberikan motivasi dalam rangka menyelesaikan Karya Tulis Ilmiah
ini.
Penulis menyadari bahwa terdapat banyak kekurangan dalam Proposal Karya Tulis Ilmiah ini yang
membutuhkan berbagai perbaikan, sehingga penulis sangat mengharapkan masukan serta kritikan
dan saran yang membangun.

Depok, September 2021

Penulis
 ABSTRAK

Latar Belakang : Antibiotika β-laktam merupakan kelompok antibiotika yang paling sering
digunakan untuk pengobatan anti-infeksi. Termasuk dalam kelompok antibiotik beta-laktam yaitu
golongan penisilin dan sefalosforin. Sefadroksil merupakan antibiotika golongan sefalosporin
generasi pertama. Namun, sefadroksil juga halnya antibiotika lain tidak stabil dalam larutan karena
adanya penguraian reaksi kimia selama masa penyimpanan yaitu reaksi hidrolisis. Hidrolisis
memungkinkan terganggunya reaksi kesetimbangan karena cincin beta-laktam menjadi terbuka
yang mengakibatkan produk menjadi tidak aktif sebagai antibiotika. Selain pengaruh air, suhu
penyimpanan juga merupakan salah satu faktor luar yang dapat menyebabkan ketidakstabilan obat
terutama antibiotik. Oleh karena itu, penulis ingin melakukan penetapan kadar pada sediaan sirup
kering sefadroksil generik yang telah direkonstitusi dengan membandingkan perbedaan kadar
penyimpanan pada suhu ruang dan suhu dingin.
Metode : Jenis penelitian ini adalah penelitian non eksperimental dengan rancangan deskriptif.
Hasil : Hasil pengujian sampel suspense sefadroksil yang telah direkonstitusi dalam waktu
penggunaan 4 hari yang disimpan pada suhu ruang dan suhu dingin masih memenuhi standar
Farmakope Indonesia edisi V.
Kesimpulan : Suhu penyimpanan memberikan pengaruh terhadap kadar sefadroksil di dalam
sediaan suspense. Pada suhu dingin kadar sefadroksil lebih stabil dibandingkan pada suhu kamar.
 ABSTRACT
Background : -lactam antibiotics are the most commonly used group of antibiotics for anti-
infective treatment. Included in the group of beta-lactam antibiotics are penicillins and
cephalosporins. Cefadroxil is a first generation cephalosporin antibiotic. However, cefadroxil as
well as other antibiotics is unstable in solution because of the decomposition of chemical reactions
during storage, namely the hydrolysis reaction. Hydrolysis allows the equilibrium reaction to be
disturbed because the beta-lactam ring opens which causes the product to become inactive as an
antibiotic. In addition to the influence of water, storage temperature is also one of the external
factors that can cause drug instability, especially antibiotics. Therefore, the authors wanted to
determine the content of the reconstituted generic cefadroxil dry syrup preparation by comparing
the difference in storage levels at room temperature and cold temperature.
Methods: This type of research is a non-experimental research with a descriptive design.
Results: The test results of the reconstituted cefadroxil suspension samples within 4 days of use
which were stored at room temperature and cold temperatures still met the standards of the
Indonesian Pharmacopoeia edition V.
Conclusion : Storage temperature has an effect on the levels of cefadroxil in suspension
preparations. At cold temperatures, the levels of cefadroxil are more stable than at room
temperature.
 DAFTAR ISI

Halaman

HALAMAN JUDUL
HALAMAN PERNYATAAN ORISINALITAS
HALAMAN PERSETUJUAN
HALAMAN PENGESAHAN
KATA PENGANTAR..................................................................................5
ABSTRAK....................................................................................................6
ABSTRACT..................................................................................................7
DAFTAR ISI.................................................................................................8
DAFTAR TABEL......................................................................................10
DAFTAR GAMBAR..................................................................................11
DAFTAR LAMPIRAN..............................................................................12
BAB I...........................................................................................................13
PENDAHULUAN.......................................................................................13
A. Latar Belakang.................................................................................13
B. Rumusan Masalah............................................................................14
C. Tujuan Penelitian.............................................................................15
D. Manfaat Penelitian............................................................................15
BAB II.........................................................................................................16
TINJAUAN PUSTAKA.............................................................................16
A. Cefadroxil.........................................................................................16
1. Pengertian Umum.........................................................................17
B. Sediaan Sirup...................................................................................17
1. Dry Sirup......................................................................................17
2. Suspensi........................................................................................17
C. Stabilitas Obat..................................................................................19
1. Degradasi Kimia...........................................................................20
D. Hidrolisis..........................................................................................21
E. Spektrofotometri UV-Vis.................................................................21
1. Definisi.........................................................................................21
2. Hukum Lambert Beer...................................................................22
3. Analisa Spektrofotometri Ultraviolet...........................................23
F. Kerangka Teori.................................................................................25
BAB III........................................................................................................26
METODE PENELITIAN..........................................................................26
A. Jenis Penelitian.................................................................................26
B. Waktu dan Tempat Penelitian..........................................................26
C. Populasi dan Sampel........................................................................26
D. Alat dan Bahan.................................................................................26
E. Cara Pengumpulan Data...................................................................27
1. Preparasi Sampel..........................................................................27
2. Prosedur Kerja..............................................................................28
1. Pembuatan Larutan Uji.................................................................28
2. Optimasi Penetapan Kadar Sefadroxil.........................................29
3. Pembuatan Kurva Kalibrasi.........................................................30
 4. Penetapan Kadar Sefadroksil Dalam Suspensi.............................31
F. Variabel Penelitian...........................................................................31
G. Definisi Operasional.........................................................................31
H. Kerangka Operasional......................................................................33
I. Cara Pengolahan dan Analisis Data.................................................34
 DAFTAR TABEL

Tabel Halaman

1. Data penentuan operating time reaksi antara sefadroksil

dengan asetilaseton dan formalin...........................................................28
2. Data penentuan pH optimum larutan pereaksi.......................................30
3. Data penentuan volume optimum larutan pereaksi................................31
4. Data kurva baku dengan satuan konsentrasi mg/ml...............................35
5. Data persentase kadar sirup kering sefadroksil yang
disimpan pada suhu ruang dan suhu dingin...........................................37
6. Data rata-rata AUC0-4 penyimpanan suhu ruang dan suhu
dingin.....................................................................................................38
7. Perbandingan antara kadar sefadroksil pada penyimpanan
suhu ruang dan suhu dingin...................................................................39
 DAFTAR GAMBAR

1. Struktur molekul Cefadroxil..........................................................5

2. Spektrum rentang waktu pengukuran serapan senyawa hasil
reaksi antara sefadroksil dengan asetilaseton dan formalin
pada replikasi II.............................................................................29
3. Spektrum hasil penentuan panjang gelombang maksimum
senyawa hasil reaksi antara sefadroksil pada konsentasi
0,0915 mg/ml dengan asetilaseton dan formalin...........................33
4. Spektrum hasil penentuan panjang gelombang maksimum
senyawa hasil reaksi antara sefadroksil pada konsentasi
0,1281 mg/ml dengan asetilaseton dan formalin...........................33
5. Spektrum hasil penentuan panjang gelombang maksimum
senyawa hasil reaksi antara sefadroksil pada konsentasi
0,1647 mg/ml dengan asetilaseton dan formalin...........................34
6. Hubungan antara konsentrasi sefadroksil (mg/ml) dengan
serapan senyawa hasil reaksi antara sefadroksil dengan
asetilasetondan formalin pada replikasi III....................................35
7. Grafik Rata-rata Persentase Kadar Sirup Kering Sefadroksil
Pada Penyimpanan Suhu Ruang dan Suhu Dingin........................38
 DAFTAR LAMPIRAN

1. Data penimbangan baku sefadroksil.....................................................48

2. Prosedur penggunaan Alat Spektrofotometer.......................................49
3. Spektrum rentang waktu pengukuran serapan setelah
operating time.......................................................................................50
4. Spektrum hasil scanning larutan baku sefadroksil
konsentrasi 0,006 M..............................................................................51
5. Spektrum hasil penentuan panjang gelombang maksimum
senyawa hasil reaksi antara larutan baku sefadroksil dengan
asetilaseton dan formalin......................................................................52
6. Cara perhitungan konsentrasi baku sefadroksil....................................54
7. Cara perhitungan konsentarsi seri kurva baku sefadroksil...................55
8. Data kurva baku....................................................................................56
9. Hubungan antara konsentrasi baku sefadroksil dengan
serapan Senyawa hasil reaksi antara sefadroksil dengan
asetilaseton dan formalin......................................................................58
10. Cara perhitungan kadar sampel sefadroksil..........................................59
11. Data absorban sampel sefadroksil dalam sediaan sirup
kering dengan pereaksi asetilaseton dan formalin................................60
12. Data kadar sampel sefadroksil dalam sediaan sirup kering
dengan pereaksi asetilaseton dan formalin...........................................62
 BAB I
PENDAHULUAN

A. Latar Belakang
Antibiotika β-laktam merupakan kelompok antibiotika yang paling sering digunakan untuk
pengobatan anti-infeksi khususnya proses infeksi oleh bakteri yang mempunyai efek menekan
atau menghentikan proses biokimia di dalam organisme. Antibiotika ini mempunyai cincin β-
laktam yang bertanggungjawab
pada aktivitas anti bakterinya, serta berbagai jenis rantai samping yang bertanggung jawab pada
perbedaan sifat fisika-kimia dan farmakologisnya. Termasuk dalam kelompok antibiotik beta-
laktam adalah antibotik golongan penisilin dan sefalosforin (Perez-Fernandez, 2012).
Antibiotika golongan sefalosforin telah digunakan sejak tahun 1948. Cefadroxil merupakan
generasi pertama antibiotik golongan sefalosforin, yang
cara kerjanya hampir sama dengan amoxicillin. Penggunaannya juga sama luas, mulai untuk
mengobati dari infeksi kulit hingga saluran kemih. Sediaan cefadroxil yang beredar di pasaran
berupa tablet, kapsul dan suspensi atau sirup kering, dimana sediaan dibuat menjadi suspensi
ketika akan digunakan. Sirup kering adalah suatu campuran padat dari bahan obat dan gula,
sediaan tersebut dibuat pada umumnya untuk bahan obat yang tidak stabil dan tidak larut
dalam pembawa air. Keuntungan sirup kering dari sirup cairan, biasanya sirup dapat tahan
disimpan lebih lama. Hal ini bertujuan untuk menjaga stabilitas zat aktif pada masa
penyimpanan dan penggunaan (Ansel, 2011).
Cefadroxil seperti juga halnya antibiotika yang lain tidak stabil dalam larutan karena adanya
penguraian reaksi kimia selama masa penyimpanan yaitu
reaksi hidrolisis. Hidrolisis yang terjadi memungkinkan terganggunya reaksi kesetimbangan karena
cincin β-laktam menjadi terbuka. Cincin beta-laktam dapat mengalami kerusakan karena rantai
siklik amida atau laktam mengalami
pembukaan cincin cepat karena hidrolisis yang mengakibatkan produk cincinterbuka menjadi tidak
aktif sebagai antibiotika (Yoshioka, 2002) .
Menurut Carstensen, bahwa penambahan air pada sediaan suspensicefadroksil dapat
mempercepat terjadinya hidrolisis. Setelah bereaksi dengan cefadroksil, air akan mengikat
gugus H+ dan OH- dari gugus amida yang terkandung didalamnya dengan membentuk H2O
(Carstensen, 2000). Kestabilan suatu zat merupakan faktor yang harus diperhatikan terutama
obat golongan antibiotika, hal ini disebabkan karena pemakaian antibiotika dengan kadar atau
dosis yang tidak tepat dapat menyebabkan bakteri atau mikroba menjadi resisten terhadap
antibiotika tersebut. Selain pengaruh air, suhu penyimpanan juga merupakan salah satu faktor
luar yang dapat menyebabkan ketidakstabilan obat terutama antibiotik.
Temperatur sangat mempengaruhi degradasi kimiawi, fisik, dan mikrobiologi. Degradasi
kimia, seperti oksidasi atau hidrolisis dapat terjadi dengan meningkatnya temperatur.
 Keterangan bahwa sediaan disimpan dalam lemari es atau suhu kamar pada etiket
menunjukkan bahwa temperatur penyimpanan sediaan juga mempengaruhi stabilitas zat aktif.
Berpedoman pada penelitian (Bernadeta, 2007) dan mengingat bahwa sediaan sirup kering
yang telah direkonstitusi seringkali mengalami penurunan kadar akibat dari penyimpanan yang
tidak sesuai dengan petunjuk yang tertera pada kemasan obat , maka peneliti tertarik untuk
melakukan penetapan kadar pada sediaan sirup kering sefadroksil generik yang telah di
rekonstitusi dengan
membandingkan perbedaan kadar penyimpanan pada suhu ruang dan suhu dingin.

B. Rumusan Masalah
1. Berapa kadar awal sirup kering sefadroksil setelah di rekonstitusi sebelum dilakukan
penyimpanan ?
2. Berapa kadar sirup kering sefadroksil yang telah di rekonstitusi pada penyimpanan suhu
ruang dan dingin hari 1-4 ?
3. Apakah penurunan kadarnya masih memenuhi persyaratan Farmakope Indonesia ?

C. Tujuan Penelitian
Tujuan Umum
1. Untuk menilai stabilitas sediaan sirup kering sefadroksil yang telah di rekonstitusi pada
penyimpanan suhu ruang dan suhu dingin hari 1-4 melalui penetapan kadar secara
spektrofotometri.

Tujuan Khusus
1. Menetapkan kadar awal sirup kering sefadroksil.
2. Menetapkan kadar sirup kering sefadroksil yang telah di rekonstitusi pada penyimpanan
suhu ruang dan suhu dingin hari 1-4.
3. Menilai kadar kadar sirup kering sefadroksil yang telah di rekonstitusi dengan
membandingkan dengan persyaratan pada Farmakope Indonesia.

D. Manfaat Penelitian
1. Untuk masyarakat, sebagai pedoman dalam menyimpan sediaan sirup kering sefadroksil
yang telah di rekonstitusi agar stabilitasnya selalu terjaga.
2. Hasil penelitian ini diharapkan dapat menjadi sumber informasi, khususnya untuk instansi
kesehatan demi meningkatkan mutu kesehatan.
 BAB II
TINJAUAN PUSTAKA

A. Cefadroxil

Gambar 1. Struktur Molekul Cefadroxil

Nama Senyawa : Sefadroksil

Nama IUPAC : Asam (6R,7R)-7 [(R)-2-amino-2-(p-hidroksi fenil)
asetamido] -3-metil) -8-okso-5-tia-1-azabisiklo
[4.2.0]ok2en-2-karboksilat mono-hidrat [66592
87-8]
Berat Molekul : 363,40 g/mol.
Pemerian : Serbuk hablur, putih atau hampir putih
Kelarutan : Sukar larut dalam air; praktis tidak larut dalam
etanol,dalam kloroform dan dalam eter.
Baku pembanding : Sefadroksil BFFI; merupakan bentuk monohidrat.
Tidak boleh dikeringkan sebelum digunakan.
Simpan dalam wadah tertutup rapat dan di tempat
dingin.
Penyimpanan : Dalam wadah tertutup rapat (Farmakope Indonesia
Edisi V, 2015. Hal : 1124)

1. Pengertian Umum
Cefadroxil adalah sebuah antibiotik spektrum luas jenis cephalosporin generasi
pertama digunakan untuk penanganan infeksi ringan
hingga sedangseperti bakteri Streptococcus pyogenes, yang menyebabkan radang
tenggorokan atau Streptococcal tonsillitis, infeksi saluran kemih, infeksi saluran
reproduksi dan infeksi kulit.
Cara kerjanya dengan cara merintangi atau menghambat pembentukan dinding sel
bakteri sehingga bila sel bakteri tumbuh dengan dinding sel yang tidak sempurna
maka bertambahnya plasma yang terserap dengan jalan osmosis akan menyebabkan
dinding sel pecah sehingga bakteri menjadi musnah sehingga cefadroxil adalah obat
antibiotik pilihan utama yang sering digunakan karena memiliki daya kerja yang luas
dan harga yang relatif murah (Marthindale, 2009)
B. Sediaan Sirup
1. Dry Sirup
Dry sirup atau sirup kering adalah suatu campuran padat yang ditambahkan air pada
saat digunakan, sediaan tersebut dibuat pada umumnya untuk bahan obat yang tidak
stabil dan tidak larut dalam pembawa air, seperti ampisilin, amoksisilin,dan lain-
lainnya. Agar campuran setelah ditambah air membentuk disperse yang homogen,
maka dalam formulanya digunakan bahan pensuspensi.
Komposisi suspensi sirup kering biasanya terdiri dari bahan pensuspensi, pembasah,
pemanis, pengawet, penambah rasa/aroma buffer dan zat warna. Sediaan dalam
bentuk suspensi untuk oral biasanya lebih efektif dibandingkan dengan bentuk tablet
atau kapsul, karena lebih mudah diterima terutama untuk anak-anak atau bayi
(Ofner, et al., 1989).
2. Suspensi
Suspensi adalah sediaan cair yang mengandung partikel padat tidak larut yang
terdispersi dalam fase cair. Sediaan yang digolongkan sebagai suspensi adalah
sediaan seperti diatas, dan tidak termasuk kelompok suspensi yang lebih spesifik,
seperti suspensi oral, suspensi topical, dan lain-lain (Farmakope Indonesia IV, 1995)
Suspensi merupakan sistem heterogen yang terdiri dari dua fase, fase kontinu atau
fase luar umumnya merupakan cairan atau semipadat, dan fase terdispersi atau fase
dalam terbuat dari partikel-partikel kecil yang pada dasarnya tidak larut, tapi
terdispersi seluruhnya dalam fase kontinu; zat yang tidak larut bisa dimasukkan
untuk absorpsi fisiologis atau untuk fungsi pelapisan dalam dan luar (Lachman dkk,
2012).
Dalam preparat ini bahan yang didistribusikan disebut sebagai dispers atau fase
terdispersi dan pembawanya disebut fase pendispersi atau medium dispersi. Preparat
oral dengan tipe ini, paling banyak medium dispersinya adalah air. Partikel dari fase
terdispersi ukurannya sangat berbeda-beda, dari partakel besar yang dapat dilhat
dengan mata telanjang sampai ke partikel dari ukuran koloid; jatuh antara 1
milimikron dan kira – kira 500 milimikron atau 0,5 mikron. Dispersi yang berisi
partikel-partikel kasar, biasanya dengan ukuran 1 sampai 100 mikron, disebut
sebagai dispersi kasar dan mencakup suspensi serta emulsi.
Suspensi dapat dibagi menjadi dua jenis, yaitu suspensi yang siap digunakan atau
yang dinonstitusikan dengan sejumlah air untuk injeksi atau pelarut lain yang sesuai
sebelum digunakan. Suspensi tidak boleh diinjeksikan secara intavena dan intratekal.
Sesuai sifatnya, partikel yang terdapat dalam suspensi dapat mengendap pada dasar
wadah bila didiamkan. Pengendapan seperti ini dapat mempermudah pengerasan dan
pemadatan sehingga sulit terdispersi kembali, walaupun dengan pengocokan. Untuk
 mengatasi masalah tersebut, dapat ditambahkan zat yang sesuai untuk meningkatkan
kekentalan dan bentuk gel suspensi seperti tanah liat, surfaktan, poliol, polimer atau
gula. Yang sangat penting adalah bahwa suspensi harus dikocok baik sebelum
digunakan untuk menjamin distribusi bahan padat yang merata dalam pembawa,
hingga menjamin keseragaman dan dosis yang tepat. Suspensi harus disimpan dalam
wadah tertutup rapat (Farmakope Indonesia IV, 1995).

C. Stabilitas Obat
Stabilitas obat adalah kemampuan suatu produk untuk mempertahankan sifat dan
karakteristiknya agar sama dengan yang dimilikinya saat dibuat (identitas, kekuatan, kualitas,
dan kemurnian) dalam batasan yang ditetapkan sepanjang periode penyimpanan dan
penggunaan (Joshita, 2008). Pemeriksaan kestabilan obat mutlak diperlukan agar obat dapat
sampai pada titik tangkapnya dengan kadar yang tepat, sehingga dapat memberikan efek terapi
yang dikehendaki, penetapan kadar obat dilakukan untuk menjaga mutu obat sesuai dengan
ketetapan dalam Farmakope Indonesia. Stabilitas obat dapat dipengaruhi oleh Faktor luar yang
mempengaruhi antara lain suhu, kelembapan, udara dan cahaya. Suhu merupakan salah satu
faktor luar yang menyebabkan ketidakstabilan obat.
Kestabilan dari suatu zat merupakan faktor yang harus diperhatikan dalam formulai suatu
sediaan farmasi. Hal itu penting mengingat sediaannya biasanya diproduksi dalam jumlah yang
besar dan juga memerlukan waktu yang lama sampai ke tangan pasien yang membutuhkannya.
Obat yang disimpan dalam jangka waktu yang lama dapat mengalami penguraian dan
mengakibatkan hasil urai dari zat tersebut bersifat toksik sehingga dapat membahayakan jiwa
pasien.
Beberapa efek tidak diinginkan yang potensial dari ketidakstabilan produk farmasi, yaitu:
(Carstensen and Rhodes, 2000)
1. Hilangnya zat
2. Konsentrasi zat aktif meningkat
3. Bioavailability aktif berubah
4. Hilangnya keseragaman kandungan
5. Menurunnya status mikrobiologis
6. Hilangnya elegansi produk dan “patient acceptability”
7. Pembentukan hasil urai yang toksik
8. Hilangnya kekedapan kemasan
9. Menurunnya kualitas label
10. Modifikasi faktor hubungan fungsional

Dalam Farmakope Indonesia Edisi V dijelaskan bahwa sefadroksil untuk suspensi oral
 mengandung tidak kurang dari 90,0% dan tidak lebih dari 120,0%
𝐶16𝐻17𝑁3𝑂5𝑆 dari jumlah yang tertera pada etiket. Stabilitas obat perlu diperhatikan untuk
mengurangi terjadinya penguraian pada zat yang terkandung dalam obat, sehingga tidak
mencapai efek terapi atau memberikan efek lainnya. Terdapat beberapa jenis degradasi, yaitu
degradasi kimia, fiska, biologi, dan kombinasi.
1. Degradasi Kimia
Degradasi kimia adalah suatu reaksi perubahan kimia atau peruraian komponen suatu
polimer karena reaksi dengan polimer sekitarnya berupa tindakan atau proses
penyederhanaan sebuah molekul menjadi lebih sederhana (kecil) baik secara alami
maupun buatan. Degradasi atau penguraian kimia kerangka polimerpolimer vinil
yang tersusun dari rantai-rantai karbon yang tidak mengandung gugus-gugus
fungsional selain ikatan rangkap dua polimer-polimer diena pada prinsipnya terbatas
pada reaksi oksidasi.
Zat aktif yang digunakan sebagai obat-obatan memiliki struktur molekul yang
beragam, oleh karena itu rentan terhadap banyak variabel dan jalur degradasi
meliputi hidrolisis, dehidrasi, isomerisasi, eliminasi, oksidasi, fotodegradasi, dan
interaksi yang kompleks dengan eksipien dan obat-obatan lainnya. Hal ini akan
sangat berguna jika dapat memprediksi ketidakstabilan kimia obat berdasarkan
struktur molekul (Yoshioka dan Valentino, 2002).
Suhu penyimpanan sangat mempengaruhi stabilitas kimiawi dan fisik. Degradasi
kimia, seperti oksidasi atau hidrolisis dapat terjadi dengan
meningkatnya temperatur. Keterangan pada kemasan agar sediaan disimpan dalam lemari
es atau suhu kamar pada etiket menunjukkan bahwa temperatur penyimpanan
sediaan juga mempengaruhi stabilitas zat aktif (Talogo, 2014).

D. Hidrolisis
Hidrolisis adalah pemecahan ikatan kimia akibat reaksi air. Ini berlawanan dengan hidrasi,
yang merupakan penambahan elemen-elemen air pada ikatan ganda, tetapi tidak terkait dengan
fragmentasi molekul. Sejumlah besar gugus fungsi yang ditemukan di dalam obat-obatan
mudah mengalami hidrolisis pada penyimpanannya, tetapi yang paling umum di temui adalah
ester dan amida. (Cairns, Donald. 2008. Hal. 189).
Cefadroksil seperti juga halnya antibiotika yang lain tidak stabil dalam larutan karena adanya
penguraian reaksi kimia selama masa penyimpanan yaitu reaksi hidrolisis. Hidrolisis yang
terjadi memungkinkan terganggunya reaksi kesetimbangan karena cincin β-laktam menjadi
terbuka. Cincin beta-laktam dapat mengalami kerusakan karena rantai siklik amida atau laktam
mengalami
pembukaan cincin cepat karena hidrolisis (Yoshioka, 2002) .
E. Spektrofotometri UV-Vis
1. Definisi
Spektrofotometri merupakan salah satu metode dalam kimia analisis yang digunakan
untuk menentukan komposisi suatu sampel baik secara kuantitatif dan kualitatif yang
didasarkan pada interaksi antara materi dengan cahaya. Sedangkan peralatan yang
digunakan dalam spektrofotometri disebut spektrofotometer.
Menurut Depkes RI (1995), analisa secara spektrofotometri dapat dipakai untuk
analisa kualitatif dan kuantitatif, terutama sangat cocok untuk penetapan kuantitatif
dan beberapa zat berguna untuk membantu identifikasi. Pengukuran serapan dapat
dilakukan pada daerah:
a. Ultraviolet (UV) pada panjang gelombang 190-380 nm.
b. Cahaya tampak atau visible pada panjang gelombang 380-780 nm.
c. Inframerah pada panjang gelombang 780-3000 nm.
d. Spektrofotometri UV-Vis pada panjang gelombang 200-800 nm (Farmakope Indonesi
IV, 1995)

Hal–hal yang harus diperhatikan dalam analisis spektofotometri ultraviolet:

a. Pemilihan Panjang gelombang maksimum

Panjang gelombang yang digunakan untuk analisis kuantitatif adalah panjang

gelombang dimana terjadi serapan maksimum. Untuk memperoleh panjang gelombang
serapan maksimum, dilakukan dengan membuat kurva hubungan antara absorbansi
dengan panjang gelombang dari suatu larutan bakupada konsentrasi tertentu.
b. Pembuatan Kurva Kalibrasi

Dibuat seri larutan baku dari zat yang akan dianalisis dengan berbagai konsentrasi.
Masing–masing absorbansi larutan dengan berbagai konsentrasi diukur, kemudian
dibuat kurva yang merupakan hubungan antara absorbansi dengan konsentrasi. Bila
hukum Lambert-Beer terpenuhi maka kurva kalibrasi berupa garis lurus.
c. Pembacaan absorbansi sampel atau cuplikan

Absorbansi yang terbaca pada spektrofotometer hendaknya antara 0,2 sampai 0,6.
Anjuran ini berdasarkan anggapan bahwa pada kisaran nilai absorbansi tersebut
kesalahan fotometrik yang terjadi adalah paling minimal (Gandjar dan Rohman, 2007).
2. Hukum Lambert Beer
Penggunaan untuk analisa kualitatif didasarkan pada hukum Lambert-Beers yang
menyatakan hubungan empiric antara intensitas cahaya yang ditransmisikan dengan
tebalnya larutan (Hukum Lambert/Bouguer), dan hubungan antara intensitas tadi
 dengan konsentrasi zat (Hukum Beers)
Hukum Lambert Beers :
Jumlah radiasi cahaya tampak (ultraviolet, inframerah dan sebagainya) yang diserap atau
ditransmisikan oleh suatu larutan merupakan suatu fungsi eksponen dari konsentrasi
zat dan tebal larutan

A = log Io/It.ℇ. b . c = a . b
atau
A = 2 - log%T

Dengan
A : serapan
Io : Intensitas sinar yang datang
It : Intensitas sinar yang diteruskan (ditransmisikan)
ℇ : absorbtivitas molekuler/konstanta ekstingsi (L.mol-1.cm-1)
a : dayaserap (L.g-1.cm-1)
b : teballarutan/kuvet (cm)
c : konsentrasi (g.L-1,mg.mL-1)
T : transmisi
Panjang gelombang yang digunakan utuk melakukan analisa kuantitatif suatu zat
biasanya merupakan panjang gelombang dimana zat yang bersangkutan memberikan
serapan yang maksimum (ℷ maks ), sebab kekuratan pengukurannya akan lebih
besar. Hal tersebut dapat terjadi karena pada panjang gelombang maksimum ( ℷ maks
) bentuk serapan umumnya landai sehingga perubahan yang tidak terlalu besar pada
kurva serapan tidak akan menyebabkan kesalahan pembacaan yang terlalu besar pula
(dapat diabaikan).
3. Analisa Spektrofotometri Ultraviolet
Pada Farmakope Indonesia Edisi III (1979), dijelaskan bahwa analisa
spektrofotometri terbagi atas:
A. Analisis Kualitatif

Analisa kualitatif spektrofotometri adalah analisa yang bertujuan untuk

mengidentifikasi suatu zat. Umumnya dilakukan dengan menggambarkan spectrum
serapan larutan dalam pelarut dan dengan kadar tertentu untuk menetapkan letak
serapan maksimum dan minimum. Dalam daerah ultraviolet identifikasi dapat
dilakukan dengan menghitung perbandingan dan serapan maksimum. Sehingga
kesalahan yang disebabkan untuk alat dapat dihindari dan larutan pembanding tidak
diperlukan.
B. Analisis Kuantitatif
Analisa kuantitatif spektrofotometri adalah penetapan kuantitatif yang dilakukan
dengan mengukur serapan larutan zat dalam pelarut pada panjang gelombang tertentu.
Pengukuran serapan biasa dilakukan pada panjang gelombang maksimum masing-
masing zat. Penetapan kadar juga dapat dilakukan dengan membandingkan serapan
larutan zat terhadap larutan zat pembanding klinis. Mula-mula pengukuran serapan
dilakukan terhadap larutan pembanding kemudian terhadap larutan zat yang diperiksa.
Sebagai pengganti zat pembanding kimia, dapat digunakan kurva baku yang dibuat dari
zat pembanding kurva.
Pada umumnya spektrofotometri ultraviolet dalam analisis senyawa organik digunakan
untuk:
a. Menentukan jenis khromofor, ikatan rangkap yang terkonjugasi dan auksokhrom
dari suatu senyawa organik
b. Menjelaskan informasi dari struktur berdasarkan panjang gelombang serapan
maksimum suatu senyawa
c. Mampu menganalisis senyawa organik secara kuantitatif dengan menggunakan
hukum Lambert-Beer (Dachriyanus, 2004).

Berpedoman pada penelitian (Bernadeta, 2007) kadar sefadroksil dapat ditetapkan

secara spektrofotometri UV-Vis memiliki akurasi, presisi, spesifisitas, dan linearitas
yang baik, berdasarkan pada terbentuknya gugus kromofor baru berwarna kuning yang
menyerap pada 367 nm dari reaksi antara sefadroksil dengan hasil kondensasi 2 mol
etil aseoasetat dan 1 mol formaldehid.
 F. Kerangka Teori

Dry Sirup
Sefadroksil

Rekonstitusi
Hidrolisis yang terjadi
memungkinkan
terganggunya reaksi
Suspensi Sefadroksil
kesetimbangan, karena
cincin β-laktam
terbuka (Yoshioka,
2002)
Hidrolisis

Cincin β-laktam terbuka

Spektrofotometri UV-Vis

Suhu ruang Suhu dingin

Cincin β-laktam terbuka Cincin β-laktam terbuka lebih

lambat

Sumber : Carstensen,2000. Drug stability principles and practies, Third edition.

 BAB III

METODE PENELITIAN

A. Jenis Penelitian

Jenis penelitian ini adalah penelitian non eksperimental dengan rancangan

deskriptif.

B. Waktu dan Tempat Penelitian

Penelitian ini dilaksanakan pada bulan Maret – Juni 2019 di Laboratorium

Biokimia Fakultas Kedokteran, Universitas Sriwijaya.

C. Populasi dan Sampel

1. Populasi

Sediaan sirup kering sefadroksil generik produksi Indofarma, Bernofarm,

Pharma Lab, Hexpharm Jaya dan Holi Pharma yang tersedia di Apotek Kota

Palembang.

2. Sampel

Diambil 6 botol sirup dari masing-masing produsen sirup kering sefadroksil

generik yaitu Indofarma, Bernofarm, Pharma Lab, Hexpharm Jaya dan Holi

Pharma yang tersedia di Apotek Kota Palembang.

17
 18

D. Alat dan Bahan

1. Alat

Alat-alat yang digunakan, yaitu :

a. Termometer ruangan g. pH meter

b. Kertas dan alat tulis h. Pipet tetes

c. Corong (pyrex) i. Pipet volume 1,0 ml (pyrex)

d. Erlenmeyer (pyrex) j. Labu Takar (pyrex)

e. Gelas ukur (pyrex) k. Kuvet

f. Spektrofotometer Simadzu l.Neraca analitik balance

UV-1800 (sartorius)

2. Bahan

Bahan-bahan yang digunakan, yaitu:

a. Baku standar sefadroksil

b. Sirup kering sefadroksil generik (sampel)

c. Asetilaseton

d. Formalin

e. Asam asetat glasial (asam asetat 96%)

f. Natrium asetat

g. NaOH

h. HCl pekat (37%)

i. Akuadest
E. Cara Pengumpulan Data

1. Preparasi Sampel

a. Sediaan dry sirup generik yang mengandung antibiotik sefadroksil

digunakan sebagai sampel.

b. Sediaan sirup kering sefadroksil generik produksi Indofarma, Bernofarm,

Pharma Lab, Hexpharm Jaya dan Holi Pharma yang tersedia di Apotek Kota

Palembang. yang diperoleh dari Apotek yang ada di Kota Palembang

kemudian dicatat nomor batch dari masing-masing sediaan dry sirup.

c. Kemudian dry sirup generik di suspensikan terlebih dahulu dengan aquadest

sesuai dengan cara pembuatan suspensi yang terdapat pada brosur obat

masing-masing.

d. Kemudian dilakukan pengukuran kadar awal pada setiap sediaan dry sirup.

e. Setelah itu sediaan dry sirup yang telah di rekonstitusi disimpan pada suhu

ruang dan suhu dingin dan diukur kadarnya pada hari pertama sampai hari

keempat.

f. Setelah itu hitung rata-rata kadar dari masing-masing sediaan dry sirup.

2. Prosedur Kerja

1. Pembuatan larutan uji

a. Pembuatan larutan natrium asetat 0,2 M.

Sebanyak 16,4 g natrium asetat ditimbang seksama, dimasukkan ke dalam

labu ukur 1 L kemudian dilarutkan dengan akuades sampai tanda.

b. Pembuatan larutan asam asetat 0,2 M.

Sebanyak 12,5 mL asam asetat 96 % dipipet, kemudian diencerkan dengan

 akuades sampai volume 1,0 L.

c. Pembuatan larutan NaOH 1 M.

Ditimbang 0,4 g NaOH kemudian dilarutkan dalam akuades bebas

CO2 sampai volume 10,0 mL.

d. Pembuatan larutan HCl encer P mengandung HCl 7,3 % b/v

Larutkan 20 g atau 17 mL HCl pekat pada 100 mL akuades.

e. Pembuatan larutan pereaksi campuran asetilaseton dan formalin .

Sebanyak 16,0 mL natrium asetat 0,2 M dan 34,0 mL asam asetat 0,2 M

dicampur dengan 7,8 mL asetilaseton dan 15,0 mL formalin. Panaskan 5

menit dengan suhu 80°C, dinginkan, pH diatur dengan menggunakan pH

meter sampai pH yang dikehendaki yaitu pH 3, 4, 5, 6, dan 7, kemudian

diencerkan dengan akuadessampai 100,0 mL

f. Pembuatan larutan baku sefadroksil.

Ditimbang 228,8 mg baku murni sefadroksil (BM 381,40) kemudian

dilarutkan dengan akuades dan diencerkan dalam labu ukur 100 mL,

konsentrasi yang diperoleh adalah 0,006 M.

g. Pembuatan larutan blangko

Sebanyak 2,0 mL akuades dimasukkan ke dalam labu ukur 25 mL,

ditambahkan larutan pereaksi dengan volume dan pH yang sama dengan

volume dan pH yang digunakan untuk penetapan kadar sefadroksil.

Diencerkan dengan akuades sampai tanda.

 2. Optimasi penetapan kadar sefadroksil

Suatu metode analisis apabila diaplikasikan pada dua senyawa atau lebih

yang memiliki gugus penanggung jawab reaksi yang sama belum tentu

memberikan hasil yang serupa, apalagi jika kondisi percobaan yang digunakan

berbeda. Oleh karena itu untuk memperoleh hasil percobaan yang optimal, maka

perlu dilakukan suatu proses optimasi.

Pada penelitian ini dilakukan optimasi berbagai kondisi percobaan meliputi

operating time, pH pereaksi, volume pereaksi, dan panjang gelombang serapan

maksimum hasil reaksi antara sefadroksil dengan asetilaseton dan formalin.

a. Penentuan panjang gelombang serapan maksimum.

Sebanyak 1,0; 1,4; dan 1,8 mL larutan baku sefadroksil 0,006 M masing masing

dimasukkan ke dalam labu ukur 25 mL, ditambahkan larutan pereaksi dengan

volume dan pH hasil optimasi. Diamkan selama operating time. Diencerkan

dengan akuades sampai tanda. Serapan kemudian dibaca pada panjang gelombang

300-500 nm, dilakukan juga penetapan blangko. Panjang gelombang serapan

maksimum adalah panjang gelombang yang memberikan serapan maksimum.

b. Penentuan operating time.

Sebanyak 2,0 mL larutan baku sefadroksil 0,006 M dimasukkan ke dalamlabu

ukur 25 mL, ditambahkan larutan pereaksi pH 4 dengan volume 4 mL.Didiamkan

selama rentang waktu tertentu pada suhu 35°C. Diencerkan dengan akuades

sampai tanda. Diukur serapan larutan pada panjang gelombang 400 nm, sampai

diperoleh serapan yang stabil pada rentang waktu tertentu (operating time),

dilakukan juga penetapan blangko.

c. Penentuan nilai pH yang menghasilkan serapan maksimum.

Nilai pH larutan pereaksi campuran asetilaseton dan formalin dibuat bervariasi,

yaitu pH 3, 4, 5, 6, dan 7.Untuk masing-masing nilai pH dipipet sebanyak 4 mL,

dimasukkan ke dalam labu ukur 25 mL, ditambahkan 2,0 mL larutan baku

sefadroksil 0,006 M, didiamkan selama operating time pada suhu 35°C kemudian

diencerkan dengan akuades sampai tanda. Diukur serapan larutan pada panjang

gelombang 400 nm, dilakukan juga penetapan blangko. Nilai pH optimum adalah

pH larutan pereaksi yang menghasilkan serapan maksimum dan stabil.

d. Penentuan volume larutan pereaksi yang menghasilkan serapan

maksimum.

Dari larutan pereaksi dengan pH optimum dipipet masing-masing 1; 2; 3;

4; 5; 6; dan 7 mL, dimasukkan ke dalam labu ukur 25 mL, ditambahkan 2,0 mL

larutan baku sefadroksil 0,006 M, didiamkan selama operating time pada suhu

35°C, dan diencerkan dengan akuades sampai tanda. Diukur serapan larutan pada

panjang gelombang 400 nm, dilakukan juga penetapan blangko. Volume optimum

adalah volume larutan pereaksi yang menghasilkan serapan maksimum dan stabil.

3. Pembuatan kurva kalibrasi

Larutan baku sefadroksil 0,006 M dipipet sebanyak 0,8; 1,0; 1,2; 1,4; dan

1,6 mL, masing- masing dimasukkan ke dalam labu ukur 25 mL, ditambahkan

pereaksi dengan pH dan volume hasil optimasi. Didiamkan selama operating time

pada suhu 35°C, diencerkan dengan akuades sampai tanda. Diukur serapannya

pada panjang gelombang serapan maksimum, dilakukan juga penetapan blangko.

Dibuat kurva hubungan konsentrasi baku sefadroksil vs serapan yang dihasilkan

dan ditentukan persamaan regresi linier (y = bx + a) serta nilai koefisien

korelasinya (r).

4. Penetapan kadar sefadroksil dalam suspensi

Pipet kuantitatif sebanyak 4,6 ml suspensi sefadroksil yang setara dengan

114,4 mg sefadroksil, masukkan ke dalam labu ukur 50 ml. Kemudian dilarutkan

dan diencerkan dengan akuades sampai tanda. Dipipet 1,0 ml dimasukkan ke

dalam labu ukur 25 ml, ditambahkan pereaksi dengan pH dan volume hasil

optimasi. Didiamkan selama operating time pada suhu 35° C, diencerkan dengan

akuades sampai tanda. Diukur serapannya pada panjang gelombang serapan

maksimum, dilakukan juga penetapan blangko. Ditentukan besar kadar sampel

sefadroksil dengan memasukkan nilai serapan yang dihasilkan pada persamaan

regresi linier kurva kalibrasi (y = bx + a) serta nilai koefisien korelasinya (r).

F. Variabel Penelitian

1. Kadar awal sirup kering sefadroksil sebelum disimpan.

2. Kadar sirup kering sefadroksil yang telah di rekonstitusi pada penyimpanan

pada suhu ruang selama hari pertama sampai hari keempat.

3. Kadar sirup kering sefadroksil yang telah di rekonstitusi pada penyimpanan

didalam suhu dingin selama hari pertama sampai hari keempat.

G. Definisi Operasional

1. Kadar awal sefadroksil

Definisi : Kadar awal sefadroksil yang terkandung dalam sediaan

sirup kering sefadroksil yang ditetapkan kandungannya

sebelum disimpan.

Alat Ukur : Spektrofotometri UV-VIS

Cara Ukur : Membandingkan dengan standar Farmakope Indonesia

Edisi V, 2015.

Hasil ukur : Memenuhi syarat jika ≥ 90% dan ≤ 120% (MS)

Tidak memenuhi syarat jika < 90% atau > 120% (TMS)

2. Kadar sefadroksil pada penyimpanan suhu ruang

Definisi : Kadar sefadroksil yang terkandung dalam sediaan sirup

kering sefadroksil yang telah direkonstitusi dan disimpan

pada suhu ruang selama hari pertama sampai hari keempat.

Alat Ukur : Spektrofotometri UV-VIS

Cara Ukur : Membandingkan hasil pengukuran serapan larutan baku

dengan serapan larutan uji

Hasil ukur : Memenuhi syarat jika ≥ 90% dan ≤ 120% (MS)

Tidak memenuhi syarat jika < 90% atau > 120% (TMS)

3. Kadar sefadroksil pada penyimpanan suhu dingin

Definisi : Kadar sefadroksil yang terkandung dalam sediaan sirup

kering sefadroksil yang telah direkonstitusi dan disimpan

pada suhu dingin selama hari pertama sampai hari keempat.

Alat Ukur : Spektrofotometri UV-VIS

Cara Ukur : Membandingkan hasil pengukuran serapan larutan baku

dengan serapan larutan uji

Hasil ukur : Memenuhi syarat jika ≥ 90% dan ≤ 120% (MS)

Tidak memenuhi syarat jika < 90% atau > 120% (TMS)
 Hari 0 Hari 1 Hari 2 Hari 3 Hari 4
H. Kerangka Operasional

Dry sirup Sefadroksil

Suspensi Sefadroksil

Hari 0 Hari 1 Hari 2 Hari 3 Hari 4

Di simpan pada Suhu Di simpan pada Suhu

ruang ± 25-30˚C Dingin ± 4-8°C

Preparasi Sampel

Pengukuran
serapan

Perhitungan
kadar

Stabil Tidak Stabil

I. Cara pengolahan dan Analisis Data

Pengumpulan data dilakukan dengan cara melakukan pengamatan dan

pengukuran terhadap hasil penetapan kadar sefadroksil.Data yang diperoleh

disajikan dalam bentuk tabel dan grafik berdasarkan perbedaan kadar suspensi

sefadroksil generik yang disimpan pada suhu ruang dan suhu dingin. Pengukuran

kadar sefadroksil ditentukan berdasarkan penentuan absorbansi sampel dengan

menggunakan nilai sefadroksil murni yang didapatkan dari persamaan linier kurva

baku pembanding. Kemudian dilakukan perhitungan untuk mendapatkan kadar

sefadroksil pada masing-masing sampel.

Kadar yang diperoleh dari hasil percobaan disajikan dalam bentuk tabel

kemudian dihitung luas daerah dibawah kurva/ Area Under the Curva (AUC)

untuk mengetahui adakah pengaruh suhu penyimpanan terhadap kadar sirup

kering sefadroksil generik yang telah di rekonstitusi dari hari ke-1 sampai ke-4

(AUC1-4) dengan rumus trapesium untuk masing-masing perlakuan yaitu :

𝑡1−𝑡0 𝑡2−𝑡1
AUCo-n = X (P1+P0) + X (P2+P1) + . . . .
2 2

Selanjutnya akan dilakukan analisis data dengan uji beda menggunakan

independent sample t-test untuk menguji adakah perbedaan kadar suspensi

sefadroksil generik yang disimpan pada suhu ruang dan suhu dingin.
 BAB IV

HASIL DAN PEMBAHASAN

A. Hasil

1. Penentuan operating time

Penentuan operating time dilakukan untuk mengetahui rentang waktu

ketika senyawa yang dianalisis memberikan serapan yang stabil. Pada penelitian

ini, pengukuran operating time dilakukan mulai menit ke-20 setelah sefadroksil

direaksikan dengan asetilaseton dan formalin.

Tabel 1. Data penentuan operating time reaksi antara sefadroksil dengan

asetilaseton dan formalin

Waktu (menit) Serapan pada panjang gelombang 400 nm

Absorban I Absorban II Absorban III
20 0,422 0,462 0,444
25 0,430 0,472 0,461
30 0,461 0,481 0,471
35 0,471 0,503 0,491
40 0,491 0,513 0,500
45 0,500 0,527 0,513
50 0,511 0,535 0,526
55 0,525 0,545 0,535
60 0,537 0,552 0,544
65 0,547 0,562 0,553
70 0,553 0,568 0,559
75 0,568 0,575 0,569
80 0,576 0,583 0,579
85 0,586 0,591 0,584
90 0,592 0,597 0,590
95 0,597 0,605 0,596
100 0,605 0,608 0,603
105 0,612 0,607 0,601
110 0,617 0,607 0,608
115 0,617 0,609 0,608
120 0,618 0,615 0,609
125 0,620 0,618 0,614
130 0,622 0,620 0,614
135 0,622 0,622 0,618
140 0,625 0,624 0,622

28
 29

Dari tabel di atas dapat dilihat bahwa serapan yang stabil dimulai dari menit

ke-100 , dan pada rentang waktu menit ke-100 hingga 110. Dengan demikian

dapat dikatakan bahwa operating time reaksi sefadroksil dengan pereaksi

asetilaseton dan formalin berada pada menit ke-100.

Lerutan pereaksi tersebut diukur serapannya selama 30 menit setelah

operating time, untuk melihat apakah larutan yang telah didamkan selama

operating time masih memberikan serapan yang stabil.

Replikasi II
0.7
0.6
Absorban

0.5
0.4
0.3
0.2
0.1
0
0 20 40 60 80 100 120
Waktu (menit)
Gambar 2. Spektrum rentang waktu pengukuran serapan senyawa hasil

reaksi antara sefadroksil dengan asetilaseton dan formalin

pada replikasi II.

Dari spektrum diatas dapat dilihat bahwa dalam rentang waktu pengukuran

selama 30 menit setelah operating time masih didapatkan serapan yang stabil .

Dengan demikian, pengukuran senyawa hasil reaksi antara sefadroksil dengan

asetilaseton dan formalin dapat dilakukan selama rentang waktu tersebut. Untuk

spektrum rentang waktu pengukuran senyawa hasil reaksi antara sefadroksil

dengan asetilaseton dan formalin pada replikasi I dan III dapat dilihat pada

lampiran.

2. Penentuan pH optimum larutan pereaksi

Dalam penelitian ini, yang dimaksud dengan pH optimum pereaksi adalah pH

larutan pereaksi yang dapat menghasilkan serapan yang maksimum yang

bertujuan untuk mengoptimalkan kondisi reaksi agar sefadroksil dapat bereaksi

secara optimum dengan asetilaseton dan formalin.

Penentuan pH optimum larutan pereaksi dilakukan dengan membuat variasi

pH larutan perekasi yaitu pH 3, 4, 5, 6, dan 7. Hasil pengukuran serapan pada

berbagai pH larutan pereaksi dapat dilihat pada tabel II.

Tabel 2. Data penentuan pH optimum larutan pereaksi

Serapan* pada λ 400 nm

pH pereaksi
I II III
3 0,476 0,471 0,474
4 0,709 0,710 0,717
5 0,261 0,289 0,293
6 0,047 0,049 0,046
7 0,033 0320, 0,030
*= serapan senyawa hasil rekasi antara sefadroksil dengan asetilaseton dan formalin

Dalam penelitian ini, serapan maksimum diperoleh ketika baku sefadroksil

direaksikan dengan larutan pH 4. Dengan demikian dapat disimpulkan bahwa

larutan pereaksi yang dapat memberikan serapan maksimum adalah larutan

pereaksi dengan pH 4 (Mirmayanti, Bernadeta, 2007)

3. Penentuan volume optimum larutan pereaksi

Volume optimum larutan pereaksi adalah volume larutan pereaksi yang

menghasilakn serapan maksimum dan stabil. Penentuan volume pereaksi optimum

dalam penelitian ini bertujuan untuk mengoptimalkan kondisi reaksi agar

sefadroksil dapat bereaksi secara optimum dengan asetilaseton dan formalin,

sehingga pengukuran serapan larutan akan menggambarkan kadar sefadroksil

yang sesungguhnya.

Penentuan volume optimum larutan pereaksi dilakukan dengan

mereaksikan baku sefadroksil pada konsentrasi tertentu dengan larutan pereaksi

pH optimum (pH 4) yang divariasi volumenya. Variasi volume pereaksi yang

ditambahkan adalah 1, 2, 3, 4, 5, 6, dan 7 ml. Dari hasil penelitian, volume

larutan pereaksi optimum adalah 6 ml. (Mirmayanti, Bernadeta, 2007)

Tabel 3. Data penentuan volume optimum larutan pereaksi

Serapan* pada λ 400 nm

Volume pereaksi
I II III
1 0,512 0,524 0,523
2 0,767 0,764 0,761
3 0,832 0,838 0,834
4 0,893 0,890 0,892
5 0,939 0,931 0,936
6 0,954 0,950 0,953
7 0,953 0,954 0,951
*= serapan senyawa hasil rekasi antara sefadroksil dengan asetilaseton dan formalin
4. Penentuan panjang gelombang serapan maksimum

Panjang gelombang serapan maksimum adalah panjang gelombang saat

suatu senyawa memberikan serapan yang maksimum. Penentuang panjang

gelombang serapan masimum pada penelitian ini bertujuan untuk melihat pada

panjang gelombang berapa reaksi antara sefadroksil dengan asetilaseton dan

formalin memberikan serapan yang maksimum.

Dalam penelitian ini, penentuan panjang gelombang serapan maksimum

dilakukan pada tiga seri konsentrasi larutan baku sefadroksil yang berbeda untuk

melihat apakah pada konsentrasi yang berbeda terjadi perubahan panjang

gelombang serapan maksimum. Konsentrasi yang digunakan adalah 0,0915;

0,1281; dan 0,1647 mg/ml. Penentuan panjang gelombang serapan maksimum

dilakukan pada rentang panjang gelombang 300-500 nm.

Pada larutan baku induk peneliti menimbang sefadroksil murni sebanyak

228,8 mg dan dilarutkan dengan akuades hingga 100 ml. Lalu larutan baku

sefadroksil 0,006 M dipipet sebanyak 1,0; 1,4; dan 1,8 ml dan diukur

menggunakan spektrofotometri UV-VIS sehingga akan didapat panjang

gelombang maksimum untuk sampel sefadroksil sebesar 340 nm.

Gambar 3. Spektrum hasil penentuan panjang gelombang maksimum

senyawa hasil reaksi antara sefadroksil pada konsentasi

0,0915 mg/ml dengan asetilaseton dan formalin

Gambar 4. Spektrum hasil penentuan panjang gelombang maksimum

senyawa hasil reaksi antara sefadroksil pada konsentasi

0,1281 mg/ml dengan asetilaseton dan formalin

 Gambar 5. Spektrum hasil penentuan panjang gelombang maksimum

senyawa hasil reaksi antara sefadroksil pada konsentasi

0,1647 mg/ml dengan asetilaseton dan formalin

5. Penentuan kurva baku

Setelah menentukan panjang gelombang dilakukan pembuatan kurva

kalibrasi, pembuatan kurva baku diperlukan untuk memperoleh persamaan kurva

baku yang berguna dalam perhitungan kadar sampel sefadroksil. Persamaan kurva

baku pada penelitian ini diperoleh melalui pengukuran serapan seri konsentrasi

larutan baku sefadroksil pada panjang gelombang 340 nm dan selanjutnya dibuat

persamaan garis regresi antara konsentrasi dengan serapan.

Kurva baku yang digunakan dalam penelitian ini memiliki 5 seri

konsentarsi sefadroksil yaitu 0,07296; 0,0912; 0,10944; 0,12768; dan 0,14592

mg/ml dengan tiga kali replikasi. Masing-masing seri konsentrasi sefadroksil

tersebut diukur serapan pada panjang gelombang 340 nm. Hasil pengukuran

serapan senyawa hasil reaksi antara sefadroksil antara asetilaseton dan formalin,
persamaan regresi linear (y = bx + a) dan nilai koefisien relasi (r) untuk masing-

masing replikasi dapat dilihat pada tabel 4.

Tabel 4. Data kurva baku dengan satuan konsentrasi mg/ml

Konsentrasi Serapan * pada λ 340 nm

Sefadroksil
(mg/ml) Absorban I Absorban II Absorban III

0,07296 0,532 0,534 0,506

0,0912 0,568 0,569 0,566

0,10944 0,728 0,733 0,733

0,12768 0,816 0,810 0,811

0,14592 0,980 0,940 0,929

y = 6,271x + 0,038 y = 5,733x + 0,085 y = 5,981x + 0,054

r = 0,9838 r = 0,98611 r = 0,99166

Kurva baku replikasi III

1
Absorban

0.8
0.6
0.4
0.2
0
0 0.020.040.060.08 0.1 0.120.140.16
Konsentrasi Sefadroksil (mg/ml)

*= serapan senyawa hasil rekasi antara sefadroksil dengan asetilaseton dan formalin

Gambar 6. Hubungan antara konsentrasi sefadroksil (mg/ml) dengan

serapan senyawa hasil reaksi antara sefadroksil dengan

asetilasetondan formalin pada replikasi III

 Persamaan kurva baku yang digunakan adalah y = 5,981x + 0,054 dengan

r = 0,99166, karena nilai r yang diperoleh dari persamaan ini paling besar dan

mendekati satu bila dibandingkan dengan r dari persamaan lain. Nilai r persamaan

kurva baku yang semakin mendekati satu menggambarkan adanya suatu korelasi

yang semakin baik antara variabel bebas dan variabel tergantung.

6. Penetapan kadar sefadroksil dalam sediaan sirup kering

Data serapan penetapan kadar sefadroksil diperoleh dari pembacaan

serapan senyawa hasil reaksi antara larutan sampel sefadroksil dengan asetilaseton

dan formalin pada panjang gelombang 340 nm. Data serapan tersebut kemudian

diolah dengan menggunakan persamaan kurva baku y = 5,981x + 0,054 sehingga

diperoleh kadar sefadroksil dalam larutan sampel. Menurut Farmakope Indonesia

Edisi V tahun 2015, Sirup kering sefadroksil yang memenuhi persyaratan ≥ 90%

dan ≤ 110%. Hasil pengujian sampel selama 4 hari, sampel yang disimpan pada

suhu ruang ataupun suhu dingin masih memenuhu kadar tetapi kadar sefadroksil

pada sediaan suspense mengalami penurunan dari waktu ke waktu. Data kadar

sefadroksil dapat dilihat pada lampiran 11.

7. Rata-Rata Persentase Kadar Sirup Kering Sefadroksil Yang

Disimpan Pada Suhu Ruang Dan Suhu Dingin

Tabel 5. Data persentase kadar sirup kering sefadroksil yang disimpan pada

suhu ruang dan suhu dingin

HARI SUHU RUANG (%) SUHU DINGIN (%)

HARI KE0 100 100

HARI KE-1 95,91624 98,53828

HARI KE-2 93,43773 96,08595

HARI KE-3 90,88015 93,57427

HARI KE-4 90,43715 91,27453

Persentase kadar sirup kering sefadroksil pada waktu tertentu digunakan

untuk menghitung luas daerah dibawah kurva (AUC). Nilai AUC 0-4 tiap

penyimpanan menunjukkan jumlah kadar sirup sefadroksil selama 4 hari dan

disajikan dalam bentuk grafik, semakin sempit luas jangkauan dibawah kurva

maka semakin kecil kadar sirup kering sefadroksil nilai AUC0-4 setiap suhu

penyimpanan
 Grafik Persentase Rata-rata Kadar
Sefadroksil Tiap Kelompok
102
100
Persentase Kadar Sirup

98
96
94
92
90
88
86
84 HARI KE0HARI KE-1HARI KE-2HARI KE-3HARI KE-4

SUHU RUANG SUHU DINGIN

Gambar 7. Grafik Rata-rata Persentase Kadar Sirup Kering Sefadroksil

Pada Penyimpanan Suhu Ruang dan Suhu Dingin

Tabel 6. Data rata-rata AUC0-4 penyimpanan suhu ruang dan suhu dingin

Suhu Penyimpanan Rerata AUC0-4 ± SD

Suhu Ruang 375.1277 ± 8.61424

Suhu Dingin 383.8358 ± 4.72663

8. Perbedaan Kadar Sirup Kering Sefadroksil Pada Penyimpanan Suhu

Ruang Dan Suhu Dingin

Tabel 7. Perbandingan antara kadar sefadroksil pada penyimpanan suhu

ruang dan suhu dingin

Kadar
No Variabel Sig
Jumlah Rata-rata

1 Suhu Ruang 15 375.1277

0,066
2 Suhu Dingin 15 383.8358

Kadar

No Varians diasumsikan Varians diasumsikan

sama tidak sama

1 T -3.432 -3.432

2 Df 28 21.730

3 Sig 0,002 0,002

Berdasarkan hasil uji statistic dengan menggunakan uji Independent

Sample t test didapatkan sig 0,066 untuk menentukan hipotesis berdasarkan

asumsi varians. Sig 0,066 > 0,05 artinya varians diasumsikan sama. Sehingga nilai

t yang digunakan ialah -3,432; nilai df = 28; dan sig = 0,002. Sig 0,002 < 0,005

artinya ada perbedaan yang signifikan antara kadar sefadroksil yang disimpan

pada suhu ruang dan suhu dingin.

B. Pembahasan

Pada penelitian ini diambil sampel sirup kering sefadroksil generik

sebanyak 6 botol dari masing-masing pabrik. Penelitian ini bertujuan untuk

mengetahui adakah pengaruh rekonstitusi dan penyimpanan terhadap kadar sirup

kering sefadroksil generik. Setelah sirup kering tersebut di rekonstitusi, lalu

diukur kadar awal masing-masing sirup dengan tiga kali replikasi, Selanjutnya

dilakukan penyimpanan pada suhu ruang (25-30⁰C) dan suhu dingin (4-8⁰C).

Penentuan operating time merupakan tahap pertama yang harus dilakukan

dalam optimasi metode spektrofotometri visibel. Penentuan operating time

dilakukan untuk mengetahui rentang waktu ketika senyawa yang dianalisis

memberikan serapan yang stabil. Pengukuran operating time dilakukan mulai

menit ke-20 setelah sefadroksil direaksikan dengan asetilaseton dan formalin.

Pengukuran operating time dilakukan pada panjang gelombang 400 nm selama

110 menit. Pada penelitian ini didapatkan serapan yang stabil dimulai dari menit

ke-100 , dan pada rentang waktu menit ke-100 hingga 110 Dengan demikian

dapat dikatakan bahwa operating time reaksi sefadroksil dengan pereaksi

asetilaseton dan formalin berada pada menit ke-100 hingga 110.

Dalam penelitian Mirmayanti, Bernadeta (2007) , serapan maksimum

diperoleh ketika baku sefadroksil direaksikan dengan larutan pH 4 dan volume

larutan pereaksi optimum 6 ml. Penentuan panjang gelombang optimum sangat

berpengaruh dalam analisis kuantitatif menggunakan spektrofotometer karena

perubahan konsentrasi yang kecil dapat menyebabkan perubahan absorbansi yang

besar. Panjang gelombang yang didapatkan peneliti yaitu sebesar 340 nm.
 Hasil pengukuran panjang gelombang maksimum ini berbeda dengan hasil

yang diperoleh (Mirmayanti, Bernadeta, 2007) yang menyatakan bahwa panjang

gelombang maksimum sefadroksil 401 nm. Hal ini terjadi karena perbedaan alat

spektrotometer dan perbedaan asal baku murni sefadroksil serta kemungkinan

kesalahan yang dilakukan peneliti sehingga panjang gelombang yang dihasilkan

berbeda. Namun panjang gelombang yang didapatkan peneliti masih digunakan

karena panjang gelombang serapan maksimum sefadroksil yaitu 300-500 nm.

Setelah menentukan panjang gelombang dilakukan pembuatan kurva

kalibrasi, pembuatan kurva baku diperlukan untuk memperoleh persamaan kurva

baku yang berguna dalam perhitungan kadar sampel sefadroksil. Kurva baku yang

digunakan dalam penelitian ini memiliki 5 seri konsentarsi sefadroksil yaitu

0,07296; 0,0912; 0,10944; 0,12768; dan 0,14592 mg/ml dengan tiga kali replikasi.

Masing-masing seri konsentrasi sefadroksil tersebut diukur serapan pada panjang

gelombang 340 nm.

Persamaan kurva baku yang digunakan adalah y = 5,981x + 0,054 dengan r

= 0,99166, karena nilai r yang diperoleh dari persamaan ini paling besar dan

mendekati satu bila dibandingkan dengan r dari persamaan lain. Nilai r persamaan

kurva baku yang semakin mendekati satu menggambarkan adanya suatu korelasi

yang semakin baik antara variabel bebas dan variabel terikat.

Pengujian kadar sefadroksil dalam sediaan dry sirup dilakukan selama 4

hari, alasan dilakukan pengujian selama 4 hari yaitu jika dry sirup sefadroksil

dalam sediaan 60 ml digunakan dalam dosis dewasa maka sirup akan habis selama

4 hari dengan aturan pakai 3 x sehari. Tetapi jika digunakan dalam dosis anak-
anak dengan aturan pakai 2 x sehari maka sirup akan habis dalam 6 hari. Jika

dilihat cara penyimpanan pada etiket, sirup hanya dapat dipakai selama 7 hari

dalam keadaan tertutup. Hasil pengujian sampel selama 4 hari penyimpanan ,

seluruh sampel yang diukur masih memenuhi standar Farmakope yaitu ≥ 90% dan

≤ 120% tetapi kadar sefadroksil mengalami penurunan setiap harinya. Hal ini

menunjukkan bahwa adanya pengaruh waktu penyimpanan terhadap sediaan

suspensi yang telah direkonstitusi. Penurunan kadar sefadroksil dalam sediaan

yang telah direkonstitusi disebabkan terjadi penguraian sefadroksil di dalamnya.

Hal ini disebabkan adanya reaksi kimia selama masa penyimpanan yaitu reaksi

hidrolisis. Setelah sefadroksil mengalami hidrolisis, memungkinkan terjadinya

reaksi kesetimbangan karena cincin β-laktam terbuka. Cincin β-laktam dapat

mengalami kerusakan karena memiliki rantai siklik amida atau laktam mengalami

pembukaan cincin cepat karena hidrolisis (Yoshioka, 2002).

Sebelum mengetahui adakah perbedaan kadar yang signifikan antara kadar

sefadroksil yang disimpan pada suhu ruang dan suhu dingin, peneliti melakukan

uji independent sample t test terlebih dahulu untuk mengetahui adakah perbedaan

yang signifikan antara kadar sefadroksil pada penyimpanan suhu ruang dan suhu

dingin. Pada saat uji statistik ini terlebih dahulu menentukan hipotesis

berdasarkan sig yang didapatkan yaitu sig = 0,066, sig = 0,066 > 0,05. Sehingga

uji t yang digunakan ialah varians diasumsikan sama. Setelahnya digunakan uji

menentukan tingkat signifikan dengan melihat sig pada kolom varians

diasumsikan sama, yaitu sig 0,002 < 0,05. Artinya ada perbedaan yang signifikan

antara kadar sefadroksil pada penyimpanan suhu ruang dan suhu dingin.
 Penurunan kadar ini dikarenakan suspensi sefadroksil akan mengalami

hidrolisis jika terpengaruh oleh suhu. Hidrolisis adalah pemecahan ikatan kimia

akibat reaksi air. Karena setelah bereaksi dengan sefadroksil, air akan mengikat

gugus H+ dan OH- dari gugus amida yang terkandung untuk membentuk H 2O

(Carstensen, 2000). Secara reaksi kimia zat aktif dapat terurai karena beberapa

faktor diantaranya oksigen (oksidasi), air (hidrolisis), suhu (oksidasi), cahaya

(fotolisis), karbondioksida (turunnya pH larutan). Pada pengujian kadar dalam

masa penggunaan 4 hari, suspensi sefadroksil masih dalam batas spesifikasi

menurut Farmakope Edisi V, yaitu tidak kurang dari 90% dan tidak lebih dari

120%.

Penurunan kadar obat sangat berpengaruh pada kesehatan pasien, dengan

turunnya kadar obat tujuan pengobatan tidak tercapai, sehingga pasien

mengkonsumsi obat dengan kadar turun terus-menerus, hal ini disebabkan karena

adanya reaksi kimia selama masa penyimpanan dan penggunaan yaitu reaksi

hidrolisis pada ikatan amida yang terkandung dalam sefadroksil. Mutu obat harus

dipertahankan agar dapat memberikan efek terpeutik yang baik. Hal ini menjadi

perhatian agar dapat menyimpanan obat yang stabilitasnya sangat dipengaruhi

oleh suhu seperti sirup kering sefadroksil yang telah direkonstitsi pada suhu yang

optimal.
 BAB V

KESIMPULAN DAN SARAN

A. Kesimpulan

Berdasarkan hasil penelitian dan pembahasan yang telah diuraikan

mengenai pengaruh rekonstitusi dan penyimpanan terhadap kadar sirup kering

sefadroksil generik, dapat disimpulkan bahwa :

1. Suhu penyimpanan memberi pengaruh terhadap stabilitas kadar sirup kering

sefadroksil yang telah direkonstitusi

2. Dalam keadaan suhu dingin (4-8⁰C) kadar sefadroksil lebih stabil

dibandingkan dalam suhu ruang (25-30⁰C)

3. Sirup kering sefadroksil yang telah direkonstitusi dan disimpan selama 4 hari

pada suhu ruang dan suhu dingin masih memenuhi standar Farmakope

Indonesia

B. Saran

1. Untuk masyarakat, sebagai pedoman dalam menyimpan obat dry sirup yang

telah direkonstitusi pada suhu dingin (2-8 ⁰C ), karena terbukti dari hasil

penelitian kadar pada suhu dingin lebih stabil dibandingkan suhu ruang.

2. Perlu dilakukan pengujian terhadap kadar suspensi sefadroksil dalam waktu

penyimpanan yang lebih lama.

44
 45

3. Dapat dilakukan pengujian obat lain yang stabilitasnya sangat dipengaruhi

suhu
 DAFTAR PUSTAKA

Ansel, H.C., 2008. Pengantar Bentuk Sediaan Farmasi. Edisi Ke-4. UI Press.
Jakarta, hal. 353 dan 373.

Ansel, Howard C., 2011. Pengantar Bentuk Sediaan Farmasi. Edisi ke-4 Farida;
Ibrahim, penerjemah. Jakarta, Universitas Indonesia Press.

Mirmayanti, Bernadeta, 2007. Validasi Metode Spektrofotometri Visibel Untuk

Penetapan Kadar Sefadroksil Menggunakan Pereaksi Asetilaseton dan
Formalin. (https://repository.usd.ac.id/2547/ ,Diakses pada 11 Januari 2019)

Cairns, D., 2008. Intisari Kimia Farmasi (edisi ke-2). Terjemahan Oleh: Rini, M.
P., Penerbit Buku Kedokteran, Jakarta, Indonesia, Hal. 175-190.

Carstensen, J.T., dan Rhodes, C.T., 2000. Drug Stability Principles and Practies,
Third Edition. New York.

Dachriyanus., 2004. Analisis Struktur Senyawa Organik Secara Spektrofotometri,

Cetakan pertama, Padang, CV. Trianda Anugrah Pratama, hal. 1-2.

Departemen Kesehatan, 2015. Farmakope Indonesia Edisi V. Jakarta: Departemen

Kesehatan Republik Indonesia.

Departemen Kesehatan, 1995. Farmakope Indonesia Edisi IV. Jakarta:

Departemen Kesehatan Republik Indonesia.

Gandjar, I. G, dan Rohman, A., 2007. Kimia Farmasi Analisis, 323-346, Pustaka
Pelajar, Yogyakarta.

Joshita, D.M.S., 2008. Kestabilan Obat, Departemen Farmasi FMIPA, Universitas

Indonesia.

Lachman, L., H.A. Lieberman, dan J.L. Kanig, 2012. Teori dan Praktek Farmasi
Industri Edisi Ketiga diterjemahkan oleh : Siti Suyatmi.
UniversitasIndonesia Press, Jakarta,Indonesia, hal. 986.

Mulja, M. dan Hanwar, D., 2003. Prinsip-prisip Cara Berlaboratorium yang Baik
(Good Laborary Practice),Majalah Farmasi Airlangga, III (2), 71-76.

Sudjadi dan Rohman, A., 2015.Analis Farmasi, Pustaka Pelajar, Yogyakarta,

Hal.146.

46
 47

Sutiadarma., 2004. Analisis Struktur Organik secara Spektroskopi. Yogyakarta,

UGM Press.

Sweetman, S.C., 2009. Martindale The Complete Drug Reference. Thirty Sixth
Edition, Pharmaceutical Press, New York.

Talogo, 2014. Pengaruh Suhu dan Temperatur Penyimpanan Terhadap Tingkat

Degradasi Kadar Amoksisilin dalam Sediaan Suspensi Amoksisilin-Asam
Klavulanat. Skripsi, Program Studi Farmasi UIN Syarif
HidayatullahJakarta, hal. 2.
(http://repository.uinjkt.ac.id/dspace/bitstream/123456789/25479/1/ADINA%20
SITI%20MARYAM%20TALOGO%20-%20fkik.pdf, diakses pada 20
januari 2019)

Yoshioka, Sumie, dan Valentino J. Stella, 2002. Stability of Drug and Dosage
Forms. Kluwer Academic Publishers. Hal. 4-12.

Yuwono, M., dan Indrayanto, G., 2005. Validation of Chromatographic Methods

of Analysis, Journal, 32, 252.
 LAMPIRAN

Lampiran 1. Data penimbangan bahan

1. Penimbangan baku sefadroksil (zat)

Bobot Bobot
Bobot kertas + zat Bobot kertas + sisa
kertas (g) zat (g)

0,3697 0,5986 0,3699 0,2287

0,3366 0,5655 0,3367 0,2288
0,3204 0,5493 0,3209 0,2287

2. Perhitungan bahan larutan pereaksi

𝑵 𝒙 𝑩𝑬 𝒙 𝑴𝒓 𝒙 𝑴𝒍
Massa = 𝟏𝟎𝟎𝟎

a. Natrium Asetat 0,2 M

0,2 𝑥 1 𝑥 72 𝑥 1000
Massa = 1000

= 14,4 g

b. Asam Asetat 0,2 M

0,2 𝑥 1 𝑥 60 𝑥 1000
Massa = 1000

= 12 mL

c. NaOH 1 M

1 𝑥 1 𝑥 40 𝑥 10
Massa = 1000

= 0,4 g

48
 49

Lampiran 2. Prosedur penggunaan Alat Spektrofotometer

Cara pengukuran serapan :

1. Hubungkan dengan sumber listrik

2. Tempat kuvet harus dalam sediaan kosong, nyalakan alat/ power ON

3. Biarkan alat melakukan kalibrasi secara otomatis sampai seluruh

pengecekan OK

4. Pada layar akan tampil ABS dan 200 nm. Tentukan panjang gelombang

yang sesuai dengan menekan tombol GO TO λ lalu ketik panjang

gelombang yang diinginkan, misalnya 300-500 nm, kemudian tekan enter

5. Letakkan kuvet blanko pada tempatnya, serapan (Abs) blanko harus

ditekan dengan cara menekan tombol AUTO ZERO

6. Letakkan kuvet sampel, kemudian akan tampak nilai Abs dari sampel,

misalnya 0,600.
Lampiran 3. Spektrum rentang waktu pengukuran serapan setelah operating

time

1. Spektrum rentang waktu pengukuran serapan senyawa hasil reaksi antara

sefadroksil dengan asetilaseton dan formalin pada replikasi I

Replikasi I
0.7
0.6
Absorban

0.5
0.4
0.3
0.2
0.1
0
0 20 40 60 80 100 120
Waktu (menit)

2. Spektrum rentang waktu pengukuran serapan senyawa hasil reaksi antara

sefadroksil dengan asetilaseton dan formalin pada replikasi II

Replikasi II
0.7
0.6
Absorban

0.5
0.4
0.3
0.2
0.1
0
0 20 40 60 80 100 120
Waktu (menit)
3. Spektrum rentang waktu pengukuran serapan senyawa hasil reaksi antara

sefadroksil dengan asetilaseton dan formalin pada replikasi III

Replikasi III
0.7
0.6
Absorban

0.5
0.4
0.3
0.2
0.1
0
0 20 40 60 80 100 120
Waktu (menit)

Lampiran 4. Spektrum hasil scanning larutan baku sefadroksil konsentrasi

0,006 M
Lampiran 5. Spektrum hasil penentuan panjang gelombang maksimum

senyawa hasil reaksi antara larutan baku sefadroksil dengan

asetilaseton dan formalin

I. Spektrum hasil penentuan panjang gelombang maksimum senyawa hasil

reaksi antara sefadroksil pada konsentasi 0,0915 mg/ml dengan

asetilaseton dan formalin

 II. Spektrum hasil penentuan panjang gelombang maksimum senyawa hasil

reaksi antara sefadroksil pada konsentasi 0,1281 mg/ml dengan

asetilaseton dan formalin

III. Spektrum hasil penentuan panjang gelombang maksimum senyawa hasil

reaksi antara sefadroksil pada konsentasi 0,1647 mg/ml dengan

asetilaseton dan formalin

Lampiran 6. Cara perhitungan konsentrasi baku sefadroksil

Penimbangan baku sefadroksil

Bobot kertas = 0,3306 g

Bobot kertas + zat = 0,5593 g

Bobot kertas + sisa = 0,3306 g

Bobot zat = 0,2287 g

Sebanyak 0,2287 baku sefadroksil dilarutkan dalam 100,0 ml akuades

Konsentrasi baku sefadroksil = 0,2287 𝑔

100 𝑚𝑙

= 2,287 x 10-3g/ml

= 2,287 mg/ml
Lampiran 7. Cara perhitungan konsentarsi seri kurva baku sefadroksil

Contoh perhitungan konsentasi seri kurva baku sefadroksil

Dari larutan baku dengan konsentarsi 2,287 mg/ml dipipet sebanyak 0,8 ml

kemudian dimasukkan ke dalam labu ukur 25 ml

Konsentrasi seri larutan baku 1 :

V1 . C1 = V2 . C2

0,8 ml x 2,287 mg/ml = 25 ml x C2

C2 = 0,0732 mg/ml

Konsentrasi seri larutan baku 2 :

V1 . C1 = V2 . C2

1,0 ml x 2,287 mg/ml = 25 ml x C2

C2 = 0,09148 mg/ml

Konsentrasi seri larutan baku 3 :

V1 . C1 = V2 . C2

1,2 ml x 2,287 mg/ml = 25 ml x C2

C2 = 0,109776 mg/ml

Konsentrasi seri larutan baku 4 :

V1 . C1 = V2 . C2

1,4 ml x 2,287 mg/ml = 25 ml x C2

C2 = 0,128072 mg/ml
 Konsentrasi seri larutan baku 5 :

V1 . C1 = V2 . C2

1,6 ml x 2,287 mg/ml = 25 ml x C2

C2 = 0,146368 mg/ml

Keterangan :

V1 = volume pemipetan

V2 = volume total seri kurva baku

C1 = konsentrasi baku sefadroksil

C2 = konsentrasi seri kurva baku

Lampiran 8. Data kurva baku

Konsentrasi Serapan * pada λ 340 nm

Sefadroksil
Absorban I Absorban II Absorban III
(mg/ml)

0,07296 0,532 0,534 0,506

0,0912 0,568 0,569 0,566

0,10944 0,728 0,733 0,733

0,12768 0,816 0,810 0,811

0,14592 0,980 0,940 0,929

y = 6,271x + 0,038 y = 5,733x + 0,085 y = 5,981x + 0,054

r = 0,9838 r = 0,98611 r = 0,99166

*= Serapan senyawa hasil reaksi antara sefadroksil dengan asetilaseton dan formalin
Persamaan garis regresi menggunakan analisis statistic secara manual :

a = (∑Y)( ∑X2)-( ∑X)( ∑XY)

n (∑X2) - ∑(X)2
= (3,545)(0,063213) – (0,5472)(0,407865)
5(0,063213) –(0,29942)
= (0,224090) – (0,223183) = 0,0544
0,016645
b = n(∑XY) – (∑X)( ∑Y)
n(∑X2) – (∑X)2
= 5 (0,402865) – (0,5472)(3,545) = (2,039325) – (1,939824)
5 (0,0063213) – (0,29942) 0,016645
= 5,981
Maka persamaan regresinya adalah Y = 5,981x + 0,054
r = n (∑XY) – (∑X)( ∑Y)

√[(∑𝑋2) − (∑𝑋)2] [𝑛(∑𝑌2) − (∑𝑌)2]

= 5 (0,407865) – (0,5472) (3,545)

√[5 (0,063213) − (0,29942)][5(2,634443) − (12,567)]

r = 0,99166
Lampiran 9. Hubungan antara konsentrasi baku sefadroksil dengan serapan

Senyawa hasil reaksi antara sefadroksil dengan asetilaseton

dan formalin

Kurva baku replikasi I

1.5
Absorban

0.5

0
0 0.02 0.04 0.06 0.08 0.1 0.12 0.14 0.16
Konsentrasi Sefadroksil (mg/ml)
Absorban

Kurva baku replikasi II

1
0.8
0.6
0.4
0.2 0 0.02 0.04 0.06 0.08 0.1 0.12 0.14 0.16
0 Konsentrasi Sefadroksil (mg/ml)

Kurva baku replikasi III

1
Absorban

0.8
0.6
0.4
0.2
0
0 0.02 0.04 0.06 0.08 0.1 0.12 0.14 0.16
Konsentrasi Sefadroksil (mg/ml)

*= Serapan senyawa hasil reaksi antara sefadroksil dengan asetilaseton dan formalin
Lampiran 10. Cara perhitungan kadar sampel sefadroksil

Sejumlah sampel yang telah direkonstitusi, kemudian diambil 4,6 ml dan di ad 50

ml dengan akuades. Diukur absorbansinya pada panjang gelombang 340 nm

Contoh perhitungan

Persamaan kurva baku yang digunakan adalah y = 5,981x + 0,054

Serapan sampel = 0,668

50
Faktor pengenceran (fp) = 25 x
1 4,6

= 271,7

Konsentrasi sefadroksil =

y = 5,981x + 0,054

0,668 = 5,981x + 0,054

𝑚𝑔
x = 0,1026
⁄
𝑚𝑙
Kadar sefadroksil dalam sampel = Konsentrasi sefadroksil x fp
𝑚𝑔
= 0,1026 x 271,7
⁄
𝑚𝑙
= 27,892 mg

% kadar sefadroksil Kadar sampe l x 100 %

=
5 ml
125 mg

125 mg

27,892
= x 100 %
5 ml

= 111,6 %
Lampiran 11. Data absorban sampel sefadroksil dalam sediaan sirup kering

dengan pereaksi asetilaseton dan formalin

SUHU RUANG SUHU DINGIN

SAMPEL HARI HARI HARI HARI HARI HARI HARI HARI HARI HARI

KE-0 KE-1 KE-2 KE-3 KE-4 KE-0 KE-1 KE-2 KE-3 KE-4

0,668 0,642 0,619 0,595 0,596 0,66 0,64 0,627 0,624 0,615
Sirup 1 0,663 0,64 0,617 0,599 0,593 0,663 0,647 0,632 0,629 0,619
0,663 0,641 0,62 0,597 0,596 0,664 0,646 0,629 0,624 0,619
0,659 0,641 0,624 0,6 0,589 0,66 0,654 0,631 0,619 0,61
Sirup 2 0,659 0,641 0,629 0,6 0,592 0,66 0,654 0,632 0,622 0,611
0,66 0,639 0,624 0,597 0,594 0,661 0,657 0,634 0,619 0,613
0,659 0,642 0,62 0,596 0,594 0,663 0,656 0,62 0,619 0,608
Sirup 3 0,662 0,638 0,622 0,598 0,594 0,668 0,658 0,624 0,619 0,61
0,66 0,638 0,624 0,595 0,594 0,665 0,654 0,624 0,618 0,609
0,669 0,629 0,601 0,59 0,58 0,664 0,651 0,627 0,608 0,589
Sirup 4 0,67 0,624 0,595 0,595 0,582 0,672 0,652 0,628 0,609 0,592
0,673 0,629 0,597 0,587 0,581 0,663 0,652 0,627 0,61 0,594
0,668 0,624 0,598 0,57 0,587 0,668 0,66 0,642 0,619 0,596
Sirup 5 0,664 0,622 0,604 0,589 0,58 0,667 0,66 0,644 0,615 0,594
0,664 0,619 0,604 0,591 0,585 0,667 0,662 0,642 0,619 0,596
0,674 0,619 0,6 0,594 0,579 0,674 0,66 0,628 0,62 0,587
Sirup 6 0,672 0,617 0,609 0,594 0,58 0,677 0,657 0,63 0,609 0,593
0,674 0,621 0,607 0,591 0,58 0,672 0,657 0,628 0,617 0,589
0,609 0,596 0,583 0,575 0,564 0,612 0,602 0,598 0,585 0,574
Sirup 7 0,613 0,594 0,592 0,585 0,568 0,611 0,603 0,597 0,58 0,578
0,613 0,596 0,592 0,583 0,564 0,614 0,603 0,597 0,581 0,578
0,62 0,59 0,59 0,58 0,58 0,608 0,605 0,602 0,582 0,57
Sirup 8 0,62 0,591 0,594 0,578 0,58 0,607 0,604 0,607 0,58 0,578
0,615 0,59 0,592 0,58 0,58 0,607 0,604 0,608 0,574 0,57
0,595 0,596 0,582 0,57 0,566 0,614 0,604 0,601 0,579 0,56
Sirup 9 0,601 0,598 0,583 0,574 0,568 0,61 0,605 0,602 0,581 0,562
0,604 0,594 0,583 0,575 0,574 0,609 0,605 0,6 0,578 0,562
0,62 0,595 0,57 0,565 0,562 0,619 0,611 0,602 0,582 0,56
Sirup 10 0,624 0,598 0,581 0,568 0,56 0,61 0,608 0,604 0,579 0,572
0,622 0,593 0,58 0,566 0,562 0,61 0,611 0,602 0,584 0,568
0,617 0,587 0,582 0,57 0,564 0,609 0,608 0,598 0,58 0,577
Sirup 11 0,62 0,592 0,587 0,574 0,56 0,615 0,608 0,597 0,584 0,575
0,619 0,587 0,579 0,574 0,562 0,62 0,611 0,596 0,579 0,581
 0,617 0,58 0,581 0,568 0,567 0,613 0,608 0,59 0,574 0,57
Sirup 12 0,61 0,58 0,58 0,568 0,562 0,609 0,605 0,592 0,579 0,568
0,608 0,594 0,57 0,57 0,56 0,615 0,604 0,594 0,574 0,562
0,612 0,597 0,589 0,562 0,56 0,62 0,61 0,602 0,59 0,567
Sirup 13 0,608 0,59 0,589 0,564 0,56 0,617 0,608 0,601 0,592 0,568
0,609 0,595 0,59 0,57 0,564 0,612 0,607 0,601 0,592 0,562
0,608 0,598 0,599 0,578 0,56 0,624 0,615 0,598 0,587 0,58
Sirup 14 0,617 0,61 0,579 0,57 0,564 0,619 0,615 0,598 0,58 0,579
0,612 0,615 0,579 0,578 0,56 0,615 0,611 0,597 0,584 0,58
0,609 0,612 0,581 0,56 0,562 0,617 0,605 0,599 0,593 0,568
Sirup 15 0,612 0,6 0,584 0,564 0,56 0,62 0,611 0,592 0,597 0,574
0,609 0,605 0,581 0,568 0,562 0,617 0,605 0,595 0,597 0,576
Lampiran 12. Data kadar sefadroksil dalam sediaan sirup kering dengan

pereaksi asetilaseton dan formalin (%)

SUHU RUANG SUHU DINGIN

SAMPEL HARI HARI HARI HARI HARI HARI HARI HARI HARI HARI
KE-0 KE-1 KE-2 KE-3 KE-4 KE-0 KE-1 KE-2 KE-3 KE-4
111,6 106,8 102,7 98,3 98,49 110,1 106,5 104,1 103,6 101,9
Sirup 1 110,7 106,5 102,3 99,03 97,94 110,7 107,8 105 104,5 102,7
110,7 106,7 102,8 98,67 98,49 110,8 107,6 104,5 103,6 102,7
109,9 106,7 103,6 99,21 97,21 110,1 109 104,8 102,7 101
Sirup 2 109,9 106,7 104,5 99,21 97,76 110,1 109 105 103,2 101,2
110,1 106,3 103,6 98,67 98,12 110,3 109,6 105,4 102,7 101,6
109,9 106,8 102,8 98,49 98,12 110,7 109,4 102,8 102,7 100,7
Sirup 3 110,5 106,1 103,2 98,85 98,12 111,6 109,8 103,6 102,7 101
110,1 106,1 103,6 98,3 98,12 111 109 103,6 102,5 100,8
111,8 104,5 99,39 97,4 95,58 110,8 108,5 104,1 100,7 97,21
Sirup 4 111,9 103,6 98,3 98,3 95,94 112,3 108,7 104,3 100,8 97,76
112,5 104,5 98,67 96,85 95,76 110,7 108,7 104,1 101 98,12
111,6 103,6 98,85 93,76 96,85 111,6 110,1 106,8 102,7 98,49
Sirup 5 110,8 103,2 99,94 97,21 95,58 111,4 110,1 107,2 101,9 98,12
110,8 102,7 99,94 97,58 96,49 111,4 110,5 106,8 102,7 98,49
112,7 102,7 99,21 98,12 95,4 112,7 110,1 104,3 102,8 96,85
Sirup 6 112,3 102,3 100,8 98,12 95,58 113,2 109,6 104,7 100,8 97,94
112,7 103 100,5 97,58 95,58 112,3 109,6 104,3 102,3 97,21
100,8 98,49 96,12 94,67 92,67 101,4 99,58 98,85 96,49 94,49
Sirup 7 101,6 98,12 97,76 96,49 93,4 101,2 99,76 98,67 95,58 95,22
101,6 98,49 97,76 96,12 92,67 101,8 99,76 98,67 95,76 95,22
102,8 97,4 97,4 95,58 95,58 100,7 100,1 99,58 95,94 93,76
Sirup 8 102,8 97,58 98,12 95,22 95,58 100,5 99,94 100,5 95,58 95,22
101,9 97,4 97,76 95,58 95,58 100,5 99,94 100,7 94,49 93,76
98,3 98,49 95,94 93,76 93,03 101,8 99,94 99,39 95,4 91,94
Sirup 9 99,39 98,85 96,12 94,49 93,4 101 100,1 99,58 95,76 92,31
99,94 98,12 96,12 94,67 94,49 100,8 100,1 99,21 95,22 92,31
102,8 98,3 93,76 92,85 92,31 102,7 101,2 99,58 95,94 91,94
Sirup 10 103,6 98,85 95,76 93,4 91,94 101 100,7 99,94 95,4 94,13
103,2 97,94 95,58 93,03 92,31 101 101,2 99,58 96,31 93,4
102,3 96,85 95,94 93,76 92,67 100,8 100,7 98,85 95,58 95,03
Sirup 11 102,8 97,76 96,85 94,49 91,94 101,9 100,7 98,67 96,31 94,67
102,7 96,85 95,4 94,49 92,31 102,8 101,2 98,49 95,4 95,76
 102,3 95,58 95,76 93,4 93,22 101,6 100,7 97,4 94,49 93,76
Sirup 12 101 95,58 95,58 93,4 92,31 100,8 100,1 97,76 95,4 93,4
100,7 98,12 93,76 93,76 91,94 101,9 99,94 98,12 94,49 92,31
101,4 98,67 97,21 92,31 91,94 102,8 101 99,58 97,4 93,22
Sirup 13 100,7 97,4 97,21 92,67 91,94 102,3 100,7 99,39 97,76 93,4
100,8 98,3 97,4 93,76 92,67 101,4 100,5 99,39 97,76 92,31
100,7 98,85 99,03 95,22 91,94 103,6 101,9 98,85 96,85 95,58
Sirup 14 102,3 101 95,4 93,76 92,67 102,7 101,9 98,85 95,58 95,4
101,4 101,9 95,4 95,22 91,94 101,9 101,2 98,67 96,31 95,58
100,8 101,4 95,76 91,94 92,31 102,3 100,1 99,03 97,94 93,4
Sirup 15 101,4 99,21 96,31 92,67 91,94 102,8 101,2 97,76 98,67 94,49
100,8 100,1 95,76 93,4 92,31 102,3 100,1 98,3 98,67 94,85
Lampiran 13. Perhitungan statistik independent sample t test

Group Statistics
KADAR
SUHU
SUHU RUANG SUHU DINGIN
N 15 15
Mean 375.1277 383.8358

Std. Deviation 8.61424 4.72683

Std. Error Mean 2.22419 1.22046

Independent Samples Test

KADAR
Equal Equal
Variances variances not
assumed assumed
Levene's Test F 3.652
for Equality
Sig. .066
of Variances
t-test for Equality t -3.432 -3.432
of Means
df 28 21.730

Sig. (2-tailed) .002 .002

Mean Difference -8.70807 -8.70807

Std. Error 2.53703 2.53703

Difference
95% Confidence Lower -13.90494 -13.97335
Interval of the
Difference Upper -3.51119 -3.44279