Evaluasi Kekebalan Tubuh dan Vaksin

Kompetensi dalam Sensitif-Steroid

Pediatri Sindrom Nefrotik
Pasien
Sindrom nefrotik idiopatik adalah penyakit ginjal masa kanak-kanak yang ditandai dengan kerusakan dari penghalang filtrasi
glomerulus yang menyebabkan kebocoran protein ke dalam urin. Proteinuria yang parah ini menyebabkan penurunan
sementara IgG serum yang kuat. Karena itu, evaluasi kompetensi vaksin dengan mengukur kadar serum antibodi pelindung
dapat menyesatkan pada sindrom nefrotik, terutama selama fase aktif penyakit. Untuk mengatasi masalah ini, kami
mengukur secara paralel antigen-spesifik IgG dengan ELISPOT jumlah sel B memori antigen spesifik yang diinduksi
sebelumnya imunisasi dengan tetanus dan virus hepatitis B (HBV) pada 11 nefrotik sensitif steroid Sindroma (SSNS) pasien
anak-anak saat onset sebelum pengobatan imunosupresif (usia rata-rata 5,1 ± 0,9 tahun). Lima anak dengan usia yang sama
dengan non-imunomediasi gangguan nefro-urologi juga terdaftar sebagai kontrol (usia rata-rata 6,9 ± 2,3 tahun). Kadar IgG
serum total yang rendah (<520 mg / dl) ditemukan pada semua pasien SSNS yang dianalisis. Secara paralel, tingkat median
anti-tetanus dan anti-HBV IgG berkurang secara signifikan dibandingkan dengan kontrol [0,05 (0,03–0,16) vs 0,45 (0,29–
3,10) IU / ml dan 0,0 (0,0–0,5) vs. 30,3 (5,5–400,8) mIU / ml, masing-masing; p = 0,02 untuk keduanya], dengan titer serum
IgG di bawah ambang batas perlindungan pada 7/11 pasien SSNS untuk tetanus dan pada SSNS 9/11 pasien untuk
HBV. Sebaliknya, semua pasien SSNS memiliki respons sel B yang kompeten, menunjukkan jumlah total sel B IgG-
mensekresi> 1000 jumlah / 10 6 dirangsang sel. Jumlah sel B yang mensekresi anti-tetanus dan anti-HBV IgG juga
sebanding dengan kontrol (p = 0,24, p = 0,32, masing-masing), dengan frekuensi memori anti-tetanus dan anti-HBV IgG
yang mensekresi sel B> 0,1% dari total sel B yang mensekresi IgG. Kesimpulannya, SSNS anak pada onset penyakit
menunjukkan terapi pra-imunosupresif respon imun dan vaksin yang kompeten melawan tetanus dan HBV, yang bisa jadi
dievaluasi dengan benar dengan kuantifikasi sel B memori spesifik antigen daripada oleh mengukur kadar IgG
serum. Pendekatan ini memungkinkan identifikasi awal dari gangguan tersebut kompetensi kekebalan dan vaksin, yang
mungkin berasal dari penggunaan yang berlarut-larut obat imunosupresif selama perjalanan penyakit.

PENGANTAR
Sindrom nefrotik idiopatik (INS) adalah yang paling sering penyakit glomerulus di masa kanak-kanak. Namun, itu jarang
terjadi insidensi (1–17 kasus per 100.000 anak per tahun) (1). INS ditandai dengan kerusakan permeabilitas glomerulus
penghalang, yang menyebabkan kebocoran protein yang parah ke dalam urin, terkait dengan hipoalbuminemia dan edema
(1). Kuat penurunan IgG serum terkait dengan peningkatan IgM sérum tingkat juga sering selama fase aktif penyakit dan
terkadang berlanjut juga selama remisi (2 , 3). Apakah itu tergantung pada gangguan homeostasis kekebalan atau hanya pada
proteinuria yang intens diperdebatkan (2- 6). Beberapa T- disregulasi sel memang telah dijelaskan baik saat kambuh dan
dalam remisi (7 , 8) dan tingkat memori yang berubah B sel telah diamati pada permulaan penyakit, sebelum ada terapi
imunosupresif (9). Pengurangan pelindung antibodi yang diamati pada pasien INS juga dapat menjadi ketergantungan
imunosupresi yang berkepanjangan dan intens diberikan dalam bentuk penyakit yang parah, meningkatkan risiko ini pasien
untuk mengembangkan infeksi parah (10 , 11). Saat penyakit onset, pasien dirawat dengan protokol oral standar terapi
prednison, di mana sebagian besar pasien merespons 4-6 minggu (didefinisikan sebagai "sindrom nefrotik sensitif
steroid"pasien, SSNS). Di sebagian besar pasien anak yang terkena oleh SSNS, evolusi klinis bisa sangat heterogen, mulai
dari tidak kambuh hingga sangat tergantung pada steroid bentuk, yang membutuhkan siklus berulang terapi steroid dan
imunosupresi lebih lanjut dengan satu atau lebih hemat steroid obat-obatan, termasuk agen anti-proliferatif, penghambat
kalsineurin dan obat perusak sel B (1). Ini intens dan berkepanjangan imunosupresi dapat sangat memengaruhi kekebalan
dan vaksin kompetensi dalam bentuk SSNS yang parah (10 , 11). Apakah ini kompetensi pasien anak SSNS hanya terganggu
oleh imunosupresi yang intens dan berkepanjangan yang dibutuhkan untuk mempertahankan remisi penyakit atau apakah
secara intrinsic Disregulasi imun dapat berkontribusi pada gangguan ini tidak jelas.  Apapun mekanisme dibalik penurunan
tersebut titer serum IgG, penurunan ini menghambat evaluasi yang benar kompetensi kekebalan dan vaksin yang biasanya
berdasarkan dosis serum total dan antigen-spesifik Titer IgG. Tujuan dari studi observasi percontohan ini adalah untuk
mengevaluasi kompetensi imun dan vaksin pasien anak SSNS di onset penyakit, sebelum pengobatan imunosupresif apa
pun. Untuk ini tujuan, kami mengukur sel B memori antigen-spesifik secara paralel dengan dosis IgG pelindung serum.

BAHAN DAN METODE

Studi Pasien
Studi observasi monosentris ini dilakukan di kalangan INS pasien anak diikuti dari Juli 2018 hingga Juni 2020 di Rumah
Sakit Anak Bambino Gesù, IRCCS di Roma, Italia. Itu studi disetujui oleh Komite Etik kami dan dilakukan sesuai dengan
deklarasi Helsinki. Informasi tertulis persetujuan atas nama anak di bawah umur / anak-anak yang terdaftar diperoleh dari
orang tua. Semua pasien saat penyakit mulai mengakses klinik kami dalam masa studi dan setuju untuk berpartisipasi dalam
studi terdaftar sebelum memulai terapi prednison oral di a protokol standar 60 mg / m 2 / hari selama 6 minggu diikuti oleh
40 mg / m 2 / setiap hari selama 6 minggu. Pasien kemudian dipantau untuk respon terhadap terapi prednison dan ditentukan
“Sensitif steroid” (SSNS) jika mereka merespons dalam waktu 4 minggu menunjukkan proteinuria negatif pada dipstik urin
selama ≥ 3 hari (12). Pasien yang tidak menanggapi prednison standar
terapi dalam 4 minggu [didefinisikan sebagai "tahan steroid" (12)] kemudian dikeluarkan. Kriteria pengecualian juga kronis
infeksi, pengobatan sebelumnya dengan obat imunosupresif (tidak termasuk steroid dosis rendah untuk periode <3 bulan),
usia> 18 tahun. Biopsi ginjal dipertimbangkan hanya untuk pasien ≤1 atau ≥12 tahun, peningkatan kreatinin serum atau
temuan yang berkelanjutan indikasi gangguan yang dimediasi kekebalan lainnya (1). Usia-cocok dengan gangguan nefro-
urologi non-imun juga dievaluasi sebagai kontrol (CTRL). Klinis dan demografis karakteristik terdaftar.

Koleksi Sel
Sampel darah tambahan untuk melakukan evaluasi kompetensi imun dan vaksin diperoleh pada awalnya masuk rumah sakit
untuk pasien SSNS dan selama kunjungan rutin untuk CTRL. Sel mononuklear darah perifer (PBMC) adalah diisolasi oleh
kepadatan Ficoll-Paque Plus (Amersham Biosciences )- sentrifugasi gradien dan kriopreservasi dalam nitrogen cair untuk
menganalisis.

Stimulasi CpG dan ELISPOT

Pengujian ini dilakukan pada sampel yang sebelumnya dianonimkan di cara membutakan untuk meminimalkan potensi bias
data analisis. Kompetensi imun dan vaksin ditentukan oleh mengevaluasi kemampuan sel B terstimulasi untuk menghasilkan
total dan imunoglobulin spesifik antigen, masing-masing. PBMC dikultur dalam medium lengkap pada suatu konsentrasi
dari 1 × 10 6 sel / ml. Media lengkap disiapkan sebagai berikut: RPMI-1640 (Euroclone), 10% janin sapi yang tidak aktif
dengan panas
serum (FBS, Laboratorium Hyclone), 1% L-Glutammine (GIBCO
BRL); 1% Penisilin / Streptomisin 100 × (Euroclone), 1% natrium
piruvat (GIBCO BRL).
Sel dirangsang selama 5 hari dengan 0,35µM TLR9 agonis
CpG-B ODN2006 (Hycult Biotech) ditambah 20ng / ml rhIL-21
(Milteny) dan 20 ng / ml rhIL-4 (Milteny).
Untuk deteksi IgM dan IgG secara simultan kami menggunakan
Kit ELISpot Sel B Dual-Color IgG / IgM Manusia (Sistem R&D).
Kit ini dirancang untuk pendeteksian total dan
antigen spesifik IgM dan IgG.
Untuk deteksi antibodi poliklonal IgG dan IgM total
spesifik untuk IgG manusia dan IgM, masing-masing dilapisi
di atas lempengan mikro yang didukung polivinilidena difluorida (PVDF)
mengikuti instruksi pabrik. Untuk mendeteksi
Microplate sel B memori spesifik antigen dilapisi semalaman
dengan rekombinan hepatitis B permukaan Ag (HbsAg adw), (Prospec)
dan dengan peptida toksin tetanus sintetis (istilah C), (OriGene).
PBMC dirangsang selama 5 hari, seperti yang dijelaskan sebelumnya
dikumpulkan, dihitung dan diunggulkan di piring yang dilapisi. Piring dulu
meninggalkan pada 37 ◦ C, 2% CO 2 untuk bermalam untuk memungkinkan sekresi antibodi.
Sebanyak tiga pengenceran serial 1: 2 dilakukan mulai dari yang pertama
baik dengan 2 × 10 4 sel untuk mendeteksi IgG dan IgM. Total dari
2 × 10 5 sel unggulan di pengenceran pertama juga (tiga 1: 2 seri
pengenceran) untuk mendeteksi sel B yang mengeluarkan antibodi spesifik.
Setelah dicuci, lobak dikonjugasi peroksidase
antibodi poliklonal spesifik untuk IgG dan biotinilasi
antibodi poliklonal khusus untuk IgM manusia ditambahkan ke
sumur. Setelah pencucian, alkalin-fosfatase terkonjugasi
ke streptavidin ditambahkan dan larutan substrat (BCIP / NBT)
telah ditambahkan. Setelah pencucian BCIP / NBT dari sumur dengan
air deionisasi, larutan kromogen AEC ditambahkan ke
sumur. Endapan merah dan endapan berwarna biru kehitaman
terbentuk dan muncul sebagai bintik-bintik, dengan masing-masing titik merah mewakili
sel sekresi IgG individu dan setiap titik biru mewakili
sel sekresi IgM individu. Piring dibiarkan kering sebelumnya
menghitung dengan ELISCAN (A-EL-VIS).
Analit Laboratorium
Hematologi (protein serum, albumin serum, kreatinin serum,
C protein reaktif) dan urin (rasio protein-ke-kreatinin)
parameter dan serum IgG, IgA, IgM, anti-tetanus IgG
dan IgG anti-virus hepatitis B (HBV) diukur sebagai
analisis rutin. Rentang normal untuk IgG serum (520-1.500
mg / dl), IgA (36–320 mg / dl) dan IgM (35–155 mg / dl) sebagai
serta titer antibodi yang cukup menentukan (protektif)
imunisasi terhadap HBV (> 10 mIU / ml) dan tetanus
(> 0,6 IU / ml) diindikasikan di laboratorium diagnostik
Rumah Sakit Anak Bambino Gesù - IRCCS. Rentang untuk
titer antibodi mewakili yang ada (tapi tidak cukup)
imunisasi terhadap tetanus (0,1-0,6 IU / ml) juga
dilaporkan (13).
Analisis Statistik
Ini adalah pusat tunggal, studi percontohan. Karena tidak ada hipotesis nol
untuk menguji, tidak ada perhitungan ukuran sampel formal yang dilakukan.
Data kontinyu dinyatakan sebagai mean ± standard error
mean (SEM) jika lulus uji normalitas (Shapiro-Wilk
test), atau median dan rentang interkuartil sebaliknya; kategoris
data direpresentasikan sebagai angka dan persentase. Perbedaan
antar kelompok dibandingkan dengan uji-t tidak berpasangan untuk normal
data terdistribusi atau dengan uji Mann-Whitney U untuk non-parametrik
data; Uji pasti Fisher digunakan untuk membandingkan proporsi
pasien dalam variabel kategori yang berbeda. Nilai P <0,05
dianggap signifikan. Analisis dilakukan melalui
perangkat lunak GraphPad Prism 6.
HASIL
Karakteristik Pasien
Dua belas pasien INS (lima laki-laki dan tujuh perempuan) pada penyakit
onset terdaftar untuk penelitian ini. Satu pasien yang
tidak menanggapi pengobatan steroid dalam waktu 4 minggu itu
kemudian dikeluarkan dari analisis, yang dilakukan
pada 11 pasien SSNS yang tersisa. Lima kontrol dengan usia yang sama
(tiga pria dan dua wanita) dengan mediator non-imun
gangguan nefro-urologi (satu penyakit ginjal kronis, satu
batu ginjal, satu hipodisplasia ginjal, dua nefrokalsinosis
dengan hiperkalsemia) juga terdaftar. Waktu rata-rata untuk remisi
pasien SSNS adalah 8,0 ± 0,6 hari sejak memulai prednison
pengobatan. Tabel 1 merangkum demografis dan klinis
karakteristik. Usia rata-rata adalah 5,1 ± 0,9 tahun untuk pasien SSNS
dan 6,9 ± 2,3 tahun untuk CTRL. Hanya satu pasien SSNS yang menjalani
biopsi ginjal sejak dia berusia ≥12 tahun saat onset dan
menyajikan pola histologis sugestif perubahan minimal
penyakit. Seperti yang diharapkan, protein serum dan albumin serum
secara signifikan lebih rendah dan proteinuria secara signifikan
lebih tinggi pada pasien SSNS dibandingkan dengan CTRL (Tabel 1). Serum
TABEL 1 | Karakteristik pasien studi.
Parameter
Satuan
SSNS di
serangan
(n = 11)
CTRL (n = 5)
Nilai-P
Demografi
Usia
Bertahun-tahun
5,1 ± 0,9
6.9 ± 2.3
0.38
Jenis kelamin laki-laki
N (%)
5 (45)
3 (60)
1.0
Karakteristik klinis
Protein Serum
g / dl
4,1 ± 0,1 *
6.9 ± 0.2
<0,001
Serum albumin
g / dl
2,2 ± 0,1 *
4,7 ± 0,1
<0,001
Kreatinin Serum
mg / dl
0,3 [0,2–0–4]
0,4 [0,3–1,8]
0.11
C protein reaktif> 0,5
mg / dl
N (%)
0 (0)
0 (0)
-
Kencing
protein-ke-kreatinin
perbandingan
mg / mg
18.3 ± 4.1
0,2 ± 0,1
0,01
Saatnya remisi
Hari
8.0 ± 0.6
-
-
Data kontinu dinyatakan sebagai mean ± standard error dari mean atau median
[kisaran interkuartil] dan dibandingkan dengan uji t tidak berpasangan atau uji U Mann-Whitney.
Nilai kategoris ditunjukkan sebagai jumlah dan persentase absolut, dibandingkan dengan a
Tes pasti Fisher. SSNS, sindrom nefrotik sensitif steroid; CTRL, kelompok kontrol.
* Semua pasien SSNS telah menerima infus albumin pada saat pengambilan sampel. Yang berani
angka-angka menyoroti perbedaan yang signifikan.
Frontiers dalam Imunologi | www.frontiersin.org
3
Maret 2021 | Volume 12 | Pasal 602826

Halaman 4
Colucci dkk.
Kompetensi Kekebalan Tubuh di SSNS
GAMBAR 1 | Kadar imunoglobulin serum pada pasien pediatrik sindrom nefrotik sensitif steroid saat onset. (A) Kadar IgG serum total, IgA dan IgM adalah
diukur pada pasien anak dengan sindrom nefrotik sensitif steroid saat onset penyakit (SSNS, n = 10/11) dan dinyatakan sebagai mg / dl. Dalam satu serum imunoglobulin pasien
tingkat tidak ditentukan. Setiap plot mewakili pasien yang berbeda. Area abu-abu menunjukkan kisaran normal terkait usia seperti yang ditunjukkan oleh laboratorium diagnostik
Rumah Sakit Anak Bambino Gesù, IRCCS. (B, C) Titer IgG spesifik antigen terhadap (B) tetanus dan (C) virus hepatitis B (HBV) diukur di SSNS pediatrik.
pasien saat onset (n = 11) dan dalam kontrol yang sesuai dengan usia (CTRL, n = 5) dan dinyatakan masing-masing sebagai IU / ml dan mIU / ml.  Tingkat perlindungan diidentifikasi
dengan garis abu-abu putus-putus
diindikasikan di laboratorium diagnostik Rumah Sakit Anak Bambino Gesù, IRCCS. Garis horizontal menunjukkan median dan perbedaan antar kelompok
dibandingkan menggunakan uji Mann-Whitney U.
kadar protein C-reaktif normal (<0,5 mg / dl)
semua pasien.
Kadar Imunoglobulin Serum dan
Kompetensi Kekebalan Tubuh dan Vaksin
Semua pasien sebelumnya divaksinasi tetanus dan
HBV sesuai persyaratan nasional (14): di tahun pertama
usia, semua anak menerima tiga dosis tetanus dan
Vaksin HBV; dosis penguat keempat dari vaksin tetanus adalah
diberikan pada 4 pasien SSNS dan pada 2 pasien CTRL
lebih tua dari 6 tahun. Waktu rata-rata telah berlalu sejak imunisasi terakhir
tidak ada perbedaan signifikan antara kedua kelompok
untuk tetanus (2,5 ± 0,5 tahun untuk pasien SSNS vs. 4,2 ± 1,2 tahun
untuk CTRL, p = 0,13) dan HBV (4,1 ± 0,9 tahun untuk SSNS
pasien vs. 6.0 ± 2.3 untuk CTRL, p = 0.38). Serum IgG dulu
di bawah kisaran normal terkait usia (520-1.500 mg / dl) di 10/10
menganalisis pasien SSNS (tingkat rata-rata = 164,3 ± 35,0 mg / dl) dan
IgM serum lebih tinggi dari kisaran normal terkait usia (35-
155 mg / dl) pada 6/10 pasien SSNS (tingkat rata-rata = 157,8 ± 18,8
mg / dl) (Gambar 1A). Sebaliknya, tidak ada perubahan yang diamati
dalam kadar IgA serum (tingkat rata-rata = 101,1 ± 11,2 mg / dl)
(Gambar 1A).
Titer serum anti-tetanus IgG berada di bawah level
perlindungan yang cukup (0,6 IU / ml) pada pasien 9/11 SSNS dan
di bawah perlindungan yang ada (0,1 IU / ml) pada 7/11 pasien SSNS,
masing-masing (Gambar 1B) dan tingkat median secara signifikan
berkurang pada pasien SSNS dibandingkan dengan CTRL (0,05 [0,03-0,16] vs.
0,45 [0,29–3,10] IU / ml, p = 0,02; Gambar 1B). Secara paralel, serum
titer anti-HBV IgG tidak terdeteksi pada pasien SSNS 9/11
(Gambar 1C) dan secara signifikan lebih rendah pada pasien SSNS
dibandingkan dengan CTRL [0,0 (0,0-0,5) vs. 30,3 (5,5-400,8) mIU / ml,
p = 0,02, Gambar 1C].
Berbeda dengan penurunan kadar IgG serum, SSNS
pasien menunjukkan kumpulan memori sel B utuh seperti yang ditunjukkan
oleh respon imun yang kompeten terhadap stimulasi poliklonal
(Gambar 2A). Jumlah total sel B yang mensekresi IgG adalah
> 1.000 hitungan / 10
6 sel terstimulasi pada semua pasien SSNS dan,
meskipun ada variabilitas interpersonal, tidak ada perbedaan yang signifikan
diamati dibandingkan dengan CTRL (p = 0,78, Gambar 2A). Di
paralel, juga respons sel B memori yang kompeten terhadap
tetanus dan HBV diamati pada pasien SSNS dibandingkan
untuk CTRL (p = 0,24, Gambar 2B dan p = 0,32, Gambar 2D,
masing-masing), dengan frekuensi memori anti-tetanus dan
Anti-HBV IgG yang mensekresi sel B> 0,1% dari total sekresi IgG
Sel B (p = 0,14 dan p = 0,17, masing-masing, dibandingkan dengan
CTRL, Angka 2C, E). Tanggapan yang kompeten diamati
juga untuk sel B yang mensekresi IgM (> 10.000 hitungan / 10 6 terstimulasi
sel dari total sel B yang mensekresi IgM pada kedua kelompok; p = 0,99,
Frontiers dalam Imunologi | www.frontiersin.org
4
Maret 2021 | Volume 12 | Pasal 602826

Halaman 5
Colucci dkk.
Kompetensi Kekebalan Tubuh di SSNS
GAMBAR 2 | Sel B yang mensekresi IgG total dan antigen spesifik pada pasien anak dengan sindrom nefrotik sensitif steroid saat onset. (A – E) PBMC terisolasi dulu
distimulasi selama 5 hari dengan CpG plus rhIL-21 dan rhIL-4. Setelah stimulasi, sel B yang mensekresi (A) total, (B, C) anti-tetanus dan (D, E) anti-HBV IgG
oleh ELISPOT pada pasien pediatrik sindrom nefrotik sensitif steroid saat onset penyakit (SSNS, n = 11) dan pada kontrol yang disesuaikan dengan usia (CTRL, n = 5). Khusus antigen
sel memori B diwakili sebagai (B, D) mutlak hitungan / 10 6 sel dan sebagai (C, E) persentase dari total sel B IgG-mensekresi. Setiap plot mewakili pasien yang berbeda.
Garis horizontal menunjukkan mean dan perbedaan antara kelompok dibandingkan menggunakan uji t tidak berpasangan.
Frontiers dalam Imunologi | www.frontiersin.org
5
Maret 2021 | Volume 12 | Pasal 602826

Halaman 6
Colucci dkk.
Kompetensi Kekebalan Tubuh di SSNS
SSNS vs. CTRL), dengan frekuensi memori anti-tetanus
dan anti-HBV IgM yang mensekresi sel B> 4% dari total IgM
mengeluarkan sel B (p = 0.83, SSNS vs. CTRL untuk kedua vaksin-
tanggapan spesifik).
DISKUSI
Studi saat ini berfokus pada pasien anak SSNS di
onset penyakit, sebelum pengobatan imunosupresif, di
untuk menyelidiki kekebalan dan kompetensi vaksin
pasien SSNS tanpa efek perancu yang diberikan oleh
steroid imunosupresi intens, agen anti-proliferatif,
penghambat kalsineurin dan / atau obat perusak sel B, biasanya
diberikan dalam bentuk SSNS yang parah untuk menghindari kekambuhan
penyakit (1). Banyak laporan sudah menyelidiki tanggapannya
vaksinasi sebelumnya dan selanjutnya pada anak-anak INS dan ditemukan
pengurangan seroproteksi yang disebabkan oleh imunisasi sebelumnya
dan imunogenisitas yang terganggu dari vaksin yang diberikan
setelah timbulnya penyakit (15- 19). Namun, sebagian besar
studi mengevaluasi tingkat antibodi khusus vaksin dari INS
pasien yang berada di bawah imunosupresi intens, yang
dapat sangat memengaruhi respons imun (10). Sebagaimana dilaporkan,
prednison dosis tinggi atau agen hemat steroid yang diberikan di
waktu vaksinasi HBV mengganggu respon antibodi (16 ,
17). Sebaliknya, pasien yang divaksinasi sebelum memulai
imunosupresi sebagian mempertahankan titer pelindung anti-
HBV IgG (16). Namun antibodi anti HBV dan anti tetanus
disebabkan oleh imunisasi sebelumnya sangat berkurang
imunosupresi yang berkepanjangan dan intens dan oleh sel B.
penipisan pada anak-anak INS (11 , 20). Agen perusak sel-B adalah
memang mampu secara efisien menghilangkan sel B memori yang bersirkulasi
subset, terutama pada pasien INS yang menerima perawatan ini
pada usia dini (11). Sebagai catatan, imunisasi ulang setelah B-
penipisan sel (setelah kemunculan kembali sel B) dapat efektif pada
memulihkan kompetensi vaksin pada pasien yang dirawat (11). Lain
faktor yang mengacaukan evaluasi antibodi pelindung
di INS adalah penurunan IgG serum yang dapat bergantung
tentang kebocoran imunoglobulin ke dalam urin selama
fase aktif penyakit atau disregulasi imun intrinsik
spesifik pasien INS (2- 7 , 9). Oleh karena itu, kami mengamati
mengurangi titer total dan anti-tetanus dan anti-HBV IgG. Untuk
mengatasi bias yang relevan ini, secara paralel dengan penentuan
dari titer serum IgG spesifik-vaksin, kami menghitung jumlahnya
sel B memori spesifik vaksin dengan uji ELISPOT.
Dengan pendekatan ini, kami menemukan bahwa sel B yang bersirkulasi masuk
kelompok kami sangat efektif dalam menanggapi poliklonal
stimulasi dengan menghasilkan sejumlah besar IgG dan
IgM. Kami juga mengamati memori khusus vaksin yang kompeten B-
respon sel terhadap tetanus sebelumnya dan imunisasi HBV.
Penelitian kami menunjukkan bahwa pasien SSNS memiliki kompetensi
respon imun dan memori imun yang diawetkan sebelumnya
vaksinasi terhadap tetanus dan HBV saat onset penyakit, sebelum ada
terapi imunosupresif.
Batasan utama penelitian ini adalah jumlah yang terbatas
dari pasien yang terdaftar saat onset penyakit, karena kelangkaannya
gangguan dan sifat monosentris ini
studi percontohan. Namun, pemilihan pasien SSNS di PT
onset, sebelum imunosupresi, diperlukan
hindari efek perancu dari terapi imunosupresif.
Lebih penting lagi, pendekatan eksperimental untuk mengukur
jumlah sel B memori yang mensekresi IgG yang diizinkan
mengatasi bias serum IgG yang bocor ke dalam urin dan ke
mengevaluasi dengan benar kompetensi imun dan vaksin dari
kelompok belajar.
Kesimpulannya, penelitian kami menunjukkan bahwa SSNS pediatrik
pasien menunjukkan kompetensi kekebalan dan vaksin yang diawetkan
pada awal penyakit, yang dapat dievaluasi secara efisien
mengkuantifikasi respons sel B memori spesifik antigen
selain dengan mengukur titer serum IgG. Pendekatan ini memungkinkan
identifikasi awal kerusakan kekebalan
dan kompetensi vaksin yang penggunaan berlarut-larut berbeda
obat imunosupresif dapat menentukan selama penyakit
tentu saja. Selain itu, ini mengatasi bias yang berasal dari
kebocoran protein serum urin, mengingat jumlahnya
memori sel B tidak dipengaruhi oleh proteinuria. Lebih lanjut
investigasi diperlukan untuk memvalidasi hasil kami dalam skala yang lebih besar
kohort pasien SSNS saat onset penyakit dan untuk mengidentifikasi yang mana
obat imunosupresif mempengaruhi memori khusus vaksin
Respons sel B.
PERNYATAAN KETERSEDIAAN DATA
Data mentah yang mendukung kesimpulan artikel ini adalah
disediakan oleh penulis, tanpa reservasi yang tidak semestinya.
PERNYATAAN ETIKA
Studi yang melibatkan peserta manusia ditinjau dan
disetujui oleh Rumah Sakit Anak Bambino Gesù, IRCCS, Etika
Komite. Persetujuan tertulis untuk berpartisipasi dalam penelitian ini
disediakan oleh wali sah / kerabat terdekat peserta.
KONTRIBUSI PENULIS
MC merancang penelitian, melakukan analisis data, dan naskah
persiapan. EP melakukan eksperimen data, analisis data, dan
membantu persiapan naskah. FZ membantu dengan koleksi
sampel studi, informasi klinis, dan persiapan naskah.
FC dan CC membantu eksperimen dan interpretasi data. RC,
FE, dan MV membantu desain studi, interpretasi data, dan
persiapan naskah. Semua penulis menyetujui versi final
dari naskah.
PENDANAAN
Pekerjaan ini didukung oleh European Society of
Program Hibah Penelitian Nefrologi Pediatrik (Nomor hibah
ESPN # 4.2018) dan oleh Ricerca Corrente dari Italia
Menteri Kesehatan.
Frontiers dalam Imunologi | www.frontiersin.org
6
Maret 2021 | Volume 12 | Pasal 602826

Halaman 7
Colucci dkk.
Kompetensi Kekebalan Tubuh di SSNS

REFERENSI
1. Noone DG, Iijima K, Parekh R. Sindrom nefrotik idiopatik pada anak-anak.
Lanset. (2018) 392: 61–74. doi : 10.1016 / S0140-6736 (18) 30536-1
2. Giangiacomo J, TG Cleary, Cole BR, Hoffsten P, Robson AM. Serum
imunoglobulin pada sindrom nefrotik. Kemungkinan penyebab
sindrom nefrotik perubahan minimal. N Engl J Med. (1975) 293: 8-12.
doi : 10.1056 / NEJM197507032930103
3. Beale MG, Nash GS, Bertovich MJ, MacDermott RP. Imunoglobulin
sintesis oleh sel mononuklear darah tepi di nefrotik perubahan minimal
sindroma. Ginjal Int. (1983) 23: 380–6. doi: 10.1038 / ki.1983.30
4. Heslan JM, Lautie JP, Intrator L, Blanc C, Lagrue G, Sobel AT. Terganggu
Sintesis IgG pada pasien dengan sindrom nefrotik. Clin Nephrol.
(1982) 18: 144–7.
5. Schnaper HW. Sistem imun dalam perubahan minimal nefrotik
sindroma. Pediatr Nephrol. (1989) 3: 101–10. doi: 10.1007 / BF00
859637
6. Kemper MJ, Altrogge H, Ganschow R, Müller-Wiefel DE. Tingkat serum
imunoglobulin dan IgG subclass di nefrotik sensitif steroid
sindroma. Pediatr Nephrol. (2002) 17: 413–7. doi: 10.1007 / s00467-001-
0817-7
7. Lama G, Luongo I, Tirino G, Borriello A, Carangio C, Esposito Salsano
M. populasi limfosit T dan sitokin di nefrotik masa kanak-kanak
sindroma. Am J Kidney Dis. (2002) 39: 958–65. doi: 10.1053 / ajkd.2002.
32769
8. Kemper MJ, Meyer-Jark T, Lilova M, Müller-Wiefel DE. Gabungan T- dan
Aktivasi sel B pada sindrom nefrotik sensitif steroid masa kanak-kanak. Clin
Nephrol. (2003) 60: 242–7. doi : 10.5414 / cnp60242
9. Colucci M, Carsetti R, Cascioli S, Serafinelli J, Emma F, Vivarelli M.B
fenotipe sel pada sindrom nefrotik idiopatik pediatrik. Pediatr Nephrol.
(2019) 34: 177–181. doi: 10.1007 / s00467-018-4095-z
10. Banerjee S, Dissanayake PV, Abeyagunawardena AS. Vaksinasi pada anak-anak
tentang pengobatan imunosupresif untuk penyakit ginjal. Pediatr Nephrol. (2016)
31: 1437–48. doi: 10.1007 / s00467-015-3219-y
11. Colucci M, Carsetti R, Serafinelli J, Rocca S, Massella L, Gargiulo A, dkk.
Kerusakan memori imunologis yang berkepanjangan setelah pengobatan anti-CD20
pada sindrom nefrotik idiopatik pediatrik. Immunol depan. (2019) 10: 1653.
doi: 10.3389 / fimmu.2019.01653
12. Vivarelli M, Massella L, Ruggiero B, Emma F. Penyakit perubahan minimal. Clin J
Apakah Soc Nephrol. (2017) 12: 332–45. doi : 10.2215 / CJN.05000516
13. Matousková I, Matlerová S, Janoutová G, Janout V. Persistensi antibodi
melawan tetanus setelah vaksinasi ulang. Kesehatan Masyarakat Cent Eur J. (2005) 13: 99–
102.
14. Giovanni Gabutti, Parvanè Kuhndari, Armando Stefanati. Italia
kalender imunisasi: alasan dan jadwal. Ital J Pediatr. (2015)
41 (Suppl 1): A12. doi : 10.1186 / 1824-7288-41-S1-A12
15. La Manna A, Polito C, Foglia AC, Di Toro A, Cafaro MR, Del Gado
R. Mengurangi tanggapan terhadap vaksinasi virus hepatitis B pada anak laki-laki dengan
sindrom nefrotik sensitif steroid. Pediatr Nephrol. (1992) 6: 251–3.
doi: 10.1007 / BF00878360
16. Mantan M, Pandharikar N, Yadav S, Chakravarti A, Sethi RG. Perlindungan seroproteksi
untuk hepatitis B pada anak-anak dengan sindrom nefrotik. Pediatr Nephrol. (2013)
28: 2125–30. doi: 10.1007 / s00467-013-2538-0
17. Yildiz N, Sever L, Kasapçopur Ö, Çullu F, Arisoy N, Çaliskan S.
Vaksinasi virus hepatitis B pada anak dengan nefrotik sensitif steroid
sindrom: imunogenisitas dan keamanan? Vaksin. (2013) 31: 3309–12.
doi: 10.1016 / j.vaccine.2013.05.004
18. CD Liakou, Askiti V, Mitsioni A, Stefanidis CJ, Theodoridou MC, Spoulou
VI. Keamanan, imunogenisitas dan kinetik respon imun terhadap 7-valent
vaksin konjugasi pneumokokus pada anak-anak dengan nefrotik idiopatik
sindroma. Vaksin. (2011) 29: 6834–7. doi: 10.1016 / j.vaccine.2011.07.053
19. Goonewardene ST, Tang C, Tan LT, Chan KG, Lingham P, Lee LH, dkk. Keamanan
dan kemanjuran vaksinasi pneumokokus pada sindrom nefrotik pediatrik.
Pediatr Depan. (2019) 7: 339. doi : 10.3389 / fped. 2019.00339
20. Bonanni A, Calatroni M, D'Alessandro M, Signa S, Bertelli E, Cioni M, dkk
Al. Peristiwa buruk terkait dengan penggunaan chimeric dan anti-
Antibodi CD20 pada anak dengan sindrom nefrotik idiopatik. Br J Clin
Pharmacol. (2018) 84: 1238–49. doi: 10.1111 / bcp.13548
Benturan Kepentingan: Penulis menyatakan bahwa penelitian dilakukan di
tidak adanya hubungan komersial atau keuangan yang dapat ditafsirkan sebagai a
potensi konflik kepentingan.
Hak Cipta © 2021 Colucci, Piano Mortari, Zotta, Corrente, Concato, Carsetti,
Emma dan Vivarelli. Ini adalah artikel akses terbuka yang didistribusikan di bawah persyaratan
dari Lisensi Atribusi Creative Commons (CC BY). Penggunaan, distribusi atau
reproduksi di forum lain diizinkan, asalkan penulis asli dan
pemilik hak cipta dikreditkan dan bahwa publikasi asli dalam jurnal ini
dikutip, sesuai dengan praktik akademik yang diterima. Tidak ada gunanya, distribusi atau
reproduksi diizinkan yang tidak sesuai dengan persyaratan ini.
Frontiers dalam Imunologi | www.frontiersin.org
7
Maret 2021 | Volume 12 | Pasal 602826