Diterjemahkan dari bahasa Inggris ke bahasa Indonesia - www.onlinedoctranslator.

com

Ekologi Mikrobiologi FEMS, 93, 2017, perbaiki084

doi: 10.1093/femsec/fix084
Tanggal Publikasi Akses Lanjutan: Perspektif 22 Juni
2017

PERSEKTIVE

Untuk membela Bacillus thuringiensis, insektisida mikroba

Diunduh dari https://academic.oup.com/femsec/article/93/7/fix084/3883769 oleh tamu pada 10 November 2021

paling aman dan paling sukses yang tersedia bagi umat manusia
—respons terhadap EFSA
Ben Raymond1,*,kan dan Brian A. Federici2
1Institut Keberlanjutan Lingkungan dan Departemen Biosains, Universitas Exeter, Kampus Penryn, Penryn TR10 9FE,
Inggris dan 2Departemen Entomologi dan Institut Biologi Genom Integratif, Universitas California, Riverside, Riverside, CA
92521, AS
*Penulis yang sesuai: Institut Keberlanjutan Lingkungan dan Departemen Biosains, Universitas Exeter, Kampus Penryn, Penryn TR10 9FE, Inggris. Telp +44 01326259085;
Surel:b.raymond@exeter.ac.uk
Ringkasan satu kalimat: Artikel ini secara kritis memeriksa bukti yang tersedia tentang apakah Bacillus thuringiesis, spesies yang secara komersial penting dalam
biokontrol, mampu menginfeksi vertebrata.
Editor: Marcus Horn
kanBen Raymond, http://orcid.org/0000-0002-3730-0985

ABSTRAK
NS Bacillus cereus kelompok mengandung patogen vertebrata seperti: B. antraks dan B. cereus dan patogen invertebrata B. thuringiensis
(Bt). Biopestisida mikroba berdasarkanBt secara luas diakui sebagai salah satu produk insektisida yang paling aman dan paling tidak
merusak lingkungan yang tersedia. Namun demikian, insiden keracunan makanan baru-baru ini mendorong tinjauan Otoritas Keamanan
Makanan Eropa yang berpendapat bahwaBt menimbulkan risiko kesehatan yang setara dengan B.cereus, agen penyebab diare. Namun,
pemeriksaan kritis terhadap data yang tersedia, dan insiden terbaru ini, tidak memberikan bukti kuat bahwaBtmenyebabkan diare.
Meskipun tingkat yang relatif tinggiB. cereus-spora mirip dapat terjadi pada makanan, genotip menunjukkan bahwa ini adalah strain
yang terjadi secara alami daripada biopestisida. Selain itu, genotipe MLST dari>2000 isolat menunjukkan bahwa genotipe biopestisida
tidak pernah diisolasi dari infeksi klinis. Data MLST menunjukkan bahwaB. cereuskelompok heterogen dan terbentuk dari clades yang
berbeda dengan perbedaan substansial dalam biologi, ekologi dan asosiasi inang. Kelompok yang memiliki risiko terbesar (theantraks
clade) berhubungan jauh dengan clade yang mengandung semua biopestisida. Data terbaru ini mendukung pandangan lama bahwaBt
dan terutama strain yang digunakan dalam biopestisida Bt sangat aman bagi manusia.

Kata kunci: Bacillus cereus kelompok; biokontrol; biopestisida; keamanan makanan; filogeni

PENGANTAR bahwa mikroba ini tidak dapat menginfeksi vertebrata secara oral,
inhalasi, atau injeksi. Kami lebih suka bahwa mikroba pilihan kami tidak
Mari kita mulai dengan eksperimen pikiran. Apa yang ingin kita, sebagai
berasosiasi dengan manusia, bahkan secara komensal, dan akan lebih
ilmuwan dan regulator, ingin ketahui agar dapat dengan yakin
baik jika ceruk biologi dan ekologinya dijelaskan dengan baik. Jika kita
merekomendasikan bahwa agen pengontrol mikroba aman untuk
sangat berhati-hati, kita mungkin ingin menunda memberikan
diterapkan pada tanaman yang tumbuh? Kita perlu yakin bahwa komponen
pendapat ilmiah yang kuat sampai produk semacam itu digunakan di
aktif utama dari biopestisida kita tidak memiliki kesempatan untuk
lapangan selama beberapa tahun, mungkin selama beberapa dekade.
berinteraksi dengan reseptor pada sel manusia. Kami ingin tahu

Diterima: 23 Februari 2017; Diterima: 21 Juni 2017

©
C FEMS 2017. Ini adalah artikel Akses Terbuka yang didistribusikan di bawah ketentuan Lisensi Atribusi Creative Commons (http://creativecommons.org/licens/by/4.0/), yang

memungkinkan penggunaan kembali, distribusi, dan reproduksi tanpa batas dalam media apa pun, asalkan karya aslinya dikutip dengan benar.

1
 2 Ekologi Mikrobiologi FEMS, 2017, Jil. 93, No.7
Untuk pestisida mikroba terlaris di dunia, Bacillus thuringiensis (Bt),
kami memiliki semua informasi ini (Siegel 2001; Federici dan Siegel
2007). Tidak hanyaBt aman untuk vertebrata tetapi sejumlah ulasan,
termasuk kelompok kerja IOBC/WPRS, telah menyimpulkan bahwa Bt
juga merupakan salah satu produk teraman yang tersedia dalam hal
dampak pada serangga non-target (Hassan 1992; Glare dan
O'Callaghan2000). Bt oleh karena itu merupakan bagian penting yang
ramah lingkungan dari kit alat manajemen hama modern. Satu-
satunya kelompok pestisida lain yang mungkin lebih aman adalah
produk baculovirus, yang biasanya memiliki kisaran inang yang sangat
sempit seperti genus atau spesies serangga (Huber1988), dan
merupakan pasar kecil karena harus diproduksi di ulat. Terlepas dari
akumulasi data biologis, ekologi dan keamanan selama beberapa
dekade, penggunaanBt sekarang di bawah ancaman di Eropa. Secara
signifikan, perubahan hati di pihak regulator Eropa (Otoritas Makanan
dan Keamanan Eropa, EFSA) ini tidak didasarkan pada bukti ilmiah
baru, melainkan pada insiden keracunan makanan yang terisolasi dan
dipublikasikan di Jerman, di manaBt NSbukan diidentifikasi sebagai
agen etiologi dengan tingkat keandalan (EFSA .) 2016). Kasus yang
terisolasi ini menyebabkan kelompok kerja baru, yang mencapai
perdebatan, dan dalam pandangan kami kesimpulan yang salah
bahwaBt secara biologis dan ekologis setara dengan Bacillus cereus
(Bc), penyebab keracunan makanan manusia yang diketahui (Granum
dan Lund 1997; Stenfors Arnesen, Fagerlund dan Granum2008), karena
keduanya adalah kerabat dekat di SM kelompok. Saat ini,Bt dan SM
biasanya dibedakan menggunakan karakter fenotipik tunggal,
produksi badan inklusi yang terdiri dari protein kristal (Cry) yang
dikodekan oleh gen pada plasmid besar (Gonzalez, Dulmage dan
Carlton 1981). Banyak (tapi tidak semua)Bt galur secara kromosom
mirip dengan galur SM (Ara. 1) (Raymond dan Bonsall 2013).
Khususnya, kehadiran tidak adanya menangis gen bukanlah indikator
yang sangat andal tentang bagaimana galur telah diklasifikasikan (Liu
dkk. 2015), baik karena adanya pseudogen atau karena definisi
fenotipik belum diterapkan dengan cermat. Namun demikian,
kekhasan ekologisBt sebagai kelompok patogen invertebrata khusus
telah diterima secara luas oleh sebagian besar ahli dan badan
pengatur selama beberapa dekade (Raymond dkk. 2010a; Ruandkk.
2015) dan secara resmi diakui melalui tingkat bahaya yang berbeda
yang ditetapkan untuk setiap spesies: tingkat bahaya hayati 1 (untukBt)
dan biohazard level 2 (untuk SM sebagai patogen oportunistik).
Dengan demikian, argumen atas status taksonomiBt dan identitas
ekologis dan biologisnya telah menjadi penyebab utama kontroversi
terbaru ini.
Selain itu, pendapat EFSA baru-baru ini mencakup tinjauan luas,
tetapi tidak kritis tentang Bt dan SM literatur dan sampai pada
kesimpulan tentang kemampuan Bt menginfeksi manusia yang sangat
berbeda dari analisis sebelumnya (Glare dan O'Callaghan2000; Siegel
2001; Federici dan Siegel2007). Yang penting, mereka membuat klaim
yang tidak berdasar bahwa kita sebagian besar tidak mengetahui
kemampuanBt untuk menginfeksi vertebrata dan dengan demikian
harus memperlakukannya sebagai risiko yang setara dengan manusia
sebagai SM berdasarkan prinsip kehati-hatian. Di sini, kami menantang
kesimpulan yang tidak kami ketahuiBt'biologi; tunjukkan bukti baru
yang mendukung rekam jejak amannya yang telah muncul sejak
ulasan utama terakhir tentang topik ini; tunjukkan bagaimana artikel
Opini ESFA mendistorsi data diBt strain dalam makanan dan
biopestisida menyiratkan itu mungkin menjadi penyebab signifikan
keracunan makanan; dan membantah gagasan bahwaSM kelompok
secara biologis dan ekologis homogen.
Bagaimana masalah dimulai—dari sarang tikus ke gunung
Rincian kasus keracunan makanan yang mendorong penyelidikan EFSA
baru-baru ini layak untuk diulang. Pada Juli 2012, seorang Jerman
keluarga lima makan mie keju; tiga anggota keluarga juga makan salad
dan ketiga anggota ini jatuh sakit diare (EFSA2016). Sampel makanan
dianalisis untuk agen penyebab dugaan: salad mengandung 3× 104
CFU g1 dari Bt; mie keju mengandung 6.0× 103 CFU g1 dari SMNS Bt
diidentifikasi sebagai tidak dapat dibedakan dari Bt aizawa strain yang
merupakan bahan aktif biopestisida Xen-Tari yang dioleskan pada
tanaman rujak yang bersangkutan. Ulangi pengambilan sampel salad
dari supermarket tempat ditemukannya produk asli yang dibeliBt
konsentrasi 4 × 104 dan 1,5 × 105 CFU
G1.
Tingkat bukti ini tidak dapat dipercaya berimplikasi Bt sebagai
penyebab infeksi karena ada dua kemungkinan agen etiologi yang
terlibat. Namun, kita dapat menggunakan literatur ilmiah untuk
Diunduh dari https://academic.oup.com/femsec/article/93/7/fix084/3883769 oleh tamu pada 10 November 2021
menilai keseimbangan probabilitas yang mendukung satu agen atau
lainnya. Apakah fakta bahwa tiga dari lima orang menjadi sakit setelah
mengonsumsi mie keju yang terkontaminasi?SM konsisten denganSM
menjadi agen penyebab? Perkiraan dosis infektifSM diperlukan untuk
membuat infeksi sangat bervariasi tetapi biasanya mencakup 105−107
CFU g1 jangkauan (Stenfors Arnesen, Fagerlund dan Granum 2008).
Namun demikian, konsentrasi serendah 102–103
dalam makanan telah ditemukan terkait dengan penyakit (Stenfors
Arnesen, Fagerlund dan Granum 2008). Selain itu, prinsip epidemiologi
dasar menegaskan bahwa tidak ada satu 'dosis infektif' untuk patogen,
tetapi kurva dosis-respons di mana peningkatan dosis mengarah pada
kemungkinan infeksi yang lebih tinggi, yang dijelaskan dengan baik
untukBt (Cornforth dkk. 2015). Bahkan jika 103–104 CFU g1 merupakan
dosis rendah SM, tingkat infeksi 60% sepenuhnya konsisten dengan
apa yang kita ketahui tentang organisme ini dan epidemiologi secara
umum. Fakta bahwa tiga orang yang jatuh sakit juga kebetulan makan
salad bisa jadi merupakan suatu kebetulan. Dengan menggunakan
teori probabilitas sederhana, kita dapat menghitung dengan tepat
berapa banyak kebetulan ini. Ada 5!/(3!(5–3)! cara, yaitu hanya 10 cara,
untuk memilih tiga individu dari keluarga beranggotakan lima orang.
Hanya dalam satu dari 10 kombinasi ini ketiga individu yang terinfeksi
akan menjadi individu yang sama yang makan salad: memberi kita
probabilitas 0,1. Dalam skala kejadian yang tidak mungkin, probabilitas
10% adalah kebetulan yang agak biasa, yang tidak akan memenuhi
standar signifikansi statistik,Bt produk (Rosenquist dkk. 2005;
Frederiksendkk. 2006). Bukti langsung untuk berimplikasi Bt daripada
SM sebagai penyebab diare, misalnya, bukti Bt proliferasi dari sampel
tinja, tidak disediakan.
Pengujian keamanan Bt pada vertebrata
Di sisi lain, seberapa besar kemungkinan hipotesis alternatif itu benar, yaitu
Bt aizawa sebenarnya penyebab infeksi pada kasus di atas? Meninggalkan
perdebatan tentang apakahsetiapstrain dari Bt dapat menyebabkan infeksi
vertebrata sampai nanti, mari kita pertimbangkan dulu apakah 'strain
biopestisida dari Bt dapat menyebabkan infeksi pada manusia. Di sini, kami
sebagian besar akan merangkum poin-poin utama dari ulasan sebelumnya
tentang keamanan hayatiBt (Siegel 2001; Federici dan Siegel2007). Misalnya,
antara tahun 1961 dan 1995, Badan Perlindungan Lingkungan Amerika
Serikat melisensikan 177 produk yang menggunakanBt spora dan kristal Cry
sebagai bahan aktif; semuanya diuji untuk infektivitas pada mamalia
(McClintock, Schaffer dan Sjoblad1995; Siegel2001). Sementara produk
berlisensi dapat menyebabkan kematian pada vertebrata pada dosis yang
sangat tinggi, ada dosis ambang batas di mana patogen dianggap aman. Di
AS, ini adalah dosis 106 spora menjadi tikus. Namun, secara umum, dosisBt
diperlukan untuk membunuh mamalia kecil dengan
 Raymond dan Federici 3

Diunduh dari https://academic.oup.com/femsec/article/93/7/fix084/3883769 oleh tamu pada 10 November 2021

Gambar 1. Variasi dalam ekologi, inang dan asosiasi habitat di seluruh clades yang berbeda di B. cereus kelompok. Filogeni didasarkan pada Priestdkk. (2004) Skema MLST dan dibangun
menggunakan CLONALFRAME dan digambar ulang dari analisis dalam studi oleh Raymond dkk. (2010b). Diagram lingkaran menggambarkan proporsi isolat dengan sifat tertentu yang
terkait dengan inang (Toksin Cry, plasmid pXO1/XO2) atau habitat dan inang asalnya; teks berkode warna di bagian atas gambar menjelaskan afiliasi; busur dalam warna hitam tebal
menggambarkan tingkat clade atau subclade. Diagram lingkaran merangkum data untuk dua subkelompok utama dari kelas 1 dan tiga kelompok utama dari kelas 2. Vertebrata kunci dan
ST terkait invertebrata ditunjukkan di sekitar pohon; merah menunjukkan asosiasi vertebrata. ST berlabel emas dengan serovar dan julukancereus adalah genotipe yang telah
digambarkan sebagai keduanya B. cereus dan B. thuringiensis; ST14 juga merupakan B. cereus jenis regangan. Singkatan 'myc' mengacu pada genotipe yang telah digambarkan sebagai B.
mikoid. Clade 1 sesuai dengan cluster III di Guinebretière dkk. (2010) skema, clade 2 ke cluster IV dan clade 3 ke cluster II dan pseudomycoides menunjukkan posisi cluster I.

injeksi / gavage biasanya lebih besar dari 108 spora, yang bagi manusia
akan setara dengan dosis di wilayah 1011 spora (Siegel 2001). Untuk
menempatkan ini dalam perspektif, itu adalah dosis yang ditemukan
pada~10.000 kg salad dalam insiden keracunan makanan Jerman di
atas.
Khususnya, sulit untuk menemukan bukti dosis oral Bt biopestisida yang
cukup tinggi untuk menyebabkan infeksi atau gejala lain pada vertebrata.
Tikus diberi makan 109 spora per hari selama 730 hari berhasil tidak
mengalami efek buruk (Siegel 2001); dosis 1012 tidak memiliki efek pada
domba atau tikus (Siegel 2001). Studi tikus khususnya menilai enam strain
berbeda selama 3 minggu. Sebuah konsentrasi
dari 1010 CFU ml1 tidak mempengaruhi tikus (Berlitz dkk. 2012) dan selama 5
hari sukarelawan manusia dapat mengkonsumsi 1 g per hari (~ 1011
spora) dari produk yang diformulasikan (Thuricide) berdasarkan: Bt
tanpa efek buruk (Siegel 2001). Studi epidemiologis mengkonfirmasi
hasil tes toksisitas akut. Aplikasi seluruh kota dariBt ke Auckland di
Selandia Baru dan ke Victoria di British Columbia tidak menghasilkan
dampak yang dapat dideteksi pada masalah kesehatan dibandingkan
dengan daerah yang tidak disemprot di kota-kota tersebut, meskipun
peningkatan tingkat spora Bt kurstaki dapat dipulihkan dari usap
hidung penduduk, mengkonfirmasikan bahwa telah ada paparan
(Federici dan Siegel 2007).
 4 Ekologi Mikrobiologi FEMS, 2017, Jil. 93, No.7
Terjadinya Bt dan Bc dalam makanan dan
lingkungan
Mengingat studi eksperimental di atas tentang keamanan Bt untuk
vertebrata, adalah relevan untuk dicatat tingkat dan komposisi Bt
produk yang biasa digunakan untuk mengendalikan hama ulat di
pertanian organik dan program pengelolaan hama terpadu. Tidak
seperti kebanyakan insektisida kimia sintetik,Bt biopestisida dapat
diterapkan selambat-lambatnya sehari sebelum panen karena catatan
keamanannya. Produk seperti Biobit, Dipel, Foray dan Thuricide, serta
banyak lainnya yang digunakan di berbagai negara di seluruh dunia
didasarkan pada isolat HD-1 dariBt kurstaki. Selain spora yang hidup,
produk ini mengandung empat protein insektisida: Cry1Aa, Cry1Ab,
Cry1Ac dan Cry2Aa (Crickmoredkk.1998; Schnepfdkk. 1998). Demikian
pula, sebagian besar komersialBt aizawaproduk didasarkan pada
HD-133 atau isolat serupa, yang mengandung spora yang layak dan
empat protein Cry: Cry1Aa, Cry1Ac, Cry1C dan Cry1D (Kuo dan Chak
1996). Konsentrasi spora yang layak dalam produk berdasarkan hal di
atasBt kurstaki dan aizawastrain biasanya di wilayah 106 mg1.
Rekomendasi label biopestisida menyatakan bahwa ini dapat
disemprotkan pada tingkat cakupan 0,01 hingga 0,1 mg per cm2, atau
dengan kata lain, sekitar 10.000 hingga 100.000 spora per cm2 dari luas
permukaan tanaman. Selain bahan aktif, produk komersial
mengandung media fermentasi bekas kering, dan penambah khasiat
pelindung, biasa disebut sebagai pelindung UV, dan penyebar dan
stiker untuk meningkatkan kepatuhan spora dan kristal Cry ke
tanaman sehingga tidak tersapu oleh hujan. atau irigasi atas. Banyak
sayuran termasuk tomat, seledri dan mentimun dimakan mentah, dan
jika disemprot denganBt produk, penambah kepatuhan ini membuat
sulit untuk mencuci spora dan kristal Cry dari tanaman. Dengan
demikian, tidak mengherankan bahwa CFU dalam kisaran 103–106 gm1
ditemukan pada sayuran segar di supermarket. Bahkan mengingat
kemungkinan efek mencuci sayuran, jika dikonsumsi hingga 106
gm1 Bt spora yang menyebabkan diare kita akan mengharapkan setidaknya orang
yang mengkonsumsi tanaman organik untuk secara rutin melaporkan penyakit ini;
namun, tidak ada data yang mendukung hal ini.
Makalah Opini EFSA berusaha mengajukan pertanyaan tentang
keamanan Bt dan Bt biopestisida dengan berfokus pada data dalam dua
studi peer-review yang berhubungan dengan terjadinya Bt dalam makanan
(Rosenquist dkk. 2005; Frederiksendkk. 2006). Dua penelitian lain berurusan
dengan sejumlah peristiwa keracunan makanan di mana:Bt terlibat sebagai
agen penyebab dibahas di bawah ini (Jackson dkk. 1995; McIntyredkk. 2008).
Data yang ditinjau akurat. Namun, interpretasinya menyesatkan, jika tidak
salah, sehubungan dengan sumbernyaBt strain yang diidentifikasi terjadi
secara alami atau dari biopestisida Bt—dan apakah yang terakhir benar-
benar menyebabkan penyakit. Dalam hal ini, data yang diterbitkan oleh
Rosenquistdkk. (2005) dan Frederiksen dkk. (2006) pada makanan siap saji di
pasar Denmark adalah relevan. Di Rosenquistdkk. (2005) studi, 0,5% dari
sampel makanan memiliki jumlah Bt/Bc lebih tinggi dari 104 CFU/g, tingkat
yang dianggap tidak dapat diterima untuk konsumsi manusia di bawah
pedoman Denmark. Jumlah tinggi ini ditemukan dalam tomat segar,
mentimun dan makanan bertepung siap saji yang diolah dengan panas,
terutama makanan penutup yang mengandung nasi, kacang-kacangan dan
susu. Dari 40 galur yang diuji untuk kristal Cry paraspora danmenangisgen,
31 positif, memungkinkan ini diidentifikasi sebagai Bt, dan semua
mengandung gen untuk protein enterotoksin yang dapat menyebabkan
diare. Berdasarkan hasil ini, penulis menyimpulkan 'Pengamatan ini
menunjukkan bahwaB. thuringiensis sebenarnya bisa bertanggung jawab
atas banyak wabah yang ditularkan melalui makanan di sini yang
sebelumnya dikaitkan dengan B. cereus sensu stricto'. Kesimpulan ini
menyesatkan terutama karena tidak ada bukti keracunan makanan yang
diakibatkan oleh jumlah yang tinggiBt dalam makanan.
Juga keliru bagi regulator untuk menyimpulkan dari studi ini bahwa
membatasi residu semprotan pada tanaman akan secara substansial
mengurangi paparan terhadap Bt dalam makanan. Misalnya, hanya 5 dari 40
galur (12,5%) yang diuji memiliki karakteristik profilBtbiopestisida.
Kelemahan lain dalam penelitian ini adalah bahwa tes PCR hanya menyaring
dua gen cry (menangis1Aa dan menangis1Ab) yang terjadi secara luas di
banyak alam Bt isolat (Crickmore dkk. 1998) jadi tes ini tidak cukup sensitif
untuk secara andal mengidentifikasi strain apa pun yang memiliki asal
biopestisida. Dalam studi lanjutan, Frederiksendkk. (2006) menggunakan
plasmid dan menangis profil gen untuk menentukan apakah SM galur
kelompok memiliki genotipe yang identik dengan Bt biopestisida. Fredriksen
dkk. (2006) menemukan bahwa 18% dari 128 isolat memiliki profil plasmid
yang berkarakteristik Bt strain yang digunakan dalam produk komersial.
Ketika genotipe ini hadir dalam konsentrasi tinggi (CFU> 10.000 g1), strain ini
Diunduh dari https://academic.oup.com/femsec/article/93/7/fix084/3883769 oleh tamu pada 10 November 2021
berasal dari mentimun atau tomat ceri. Ini bukan makanan bertepung di
mana spora cenderung berkecambah atau di mana sel vegetatif cenderung
berkembang biak, dan dengan demikian sangat tidak mungkin
menyebabkan keracunan makanan. Lebih penting lagi sehubungan dengan
penggunaanBt biopestisida, data ini menunjukkan bahwa antara 80% dan
90% isolat berasal dari isolat alami Bt daripada strain biopestisida
(Rosenquist dkk. 2005; Frederiksendkk. 2006). Apa yang tidak disebutkan
dalam makalah Opini EFSA adalah kejadian umum dari beragamBt strain
dalam semua jenis biji-bijian dan kacang-kacangan yang disimpan (Burges
dan Hurst 1977; padang rumputdkk. 1992; Itova-Aoyolodkk. 1995) yang
sebagian besar tidak memiliki profil gen spesifik Bt biopestisida. Dengan
demikian, biji-bijian dan kacang-kacangan dan debu dari lumbung
penyimpanan adalah sumber yang mungkin terjadi secara alamiBt strain
yang biasa ditemukan dalam makanan siap saji yang dipelajari dari pasar
Denmark.
Infeksi Bt dan manusia: studi kasus dan data
epidemiologi baru
Lalu bagaimana jika kita menebarkan jaring kita secara lebih luas, apakah
ada bukti bahwa ketegangan apapun? Bt dapat menyebabkan infeksi
gastrointestinal atau jaringan pada vertebrata. Jumlah infeksi pada manusia
dimanaBt strain adalah agen penyebab yang jelas sangat sedikit, jika ada. Bt
telah pulih dari luka bakar yang terinfeksi (Damgaard dkk.1997), dan dalam
satu contoh dari seorang prajurit yang terluka parah oleh ranjau darat
(Hernandez, Ramisse dan Ducoureau 1998) dan dari infeksi paru (Ghelardi
dkk. 2007). Namun, tidak satupun dari ini adalah isolat biopestisida. NS
konkukian ketegangan yang diisolasi dari prajurit yang terluka dapat
ditempatkan dengan andal di antraksclade, seperti strain RM1 yang diisolasi
dari jaringan paru-paru (ST386) — kelompok yang dikenal karena
kemampuannya untuk menginfeksi vertebrata (Gbr. 1). 1) (Raymond dan
Bonsall 2013). Dalam satu laporan, seorang petani mengembangkan ulkus
kornea setelah disiram di wajah dengan Dipel, aBt kurstaki produk, dan Bt
pulih dari ulkus itu (Sampel dan Buettner 1983). Namun, dalam kejadian itu
petani mengoleskan losion kortikosteroid ke matanya sebelum borok
berkembang. Kortikosteroid dapat menekan sistem kekebalan tubuh dan
menunda penyembuhan luka, sehingga dalam hal iniBt spora mungkin
hanya bertahan di mata tanpa menjadi penyebab utama infeksi (Siegel 2001
). Pendapat EFSA juga mengutip Helgasondkk. (2000a), mengklaim itu
menunjukkan bahwa Bt ditemukan terkait dengan infeksi periodontal.
Faktanya, penelitian itu hanya mengidentifikasi satu isolat dariBt, yang pulih
dari peternakan sapi perah dan bukan infeksi manusia (Helgason dkk. 2000a
). Studi kedua yang dikutip menggambarkan bagaimana duaBt galur
ditemukan dari darah pasien dengan gangguan kekebalan, tetapi skema
genotipe yang digunakan tidak dapat memastikan bahwa mereka adalah
galur biopestisida (Kuroki dkk. 2009).
Pendapat EFSA mengambil interpretasi yang sangat tidak kritis dari data
kunci dalam Basil literatur. Dalam 39 wabah keracunan makanan
 Raymond dan Federici 5

Tabel 1. ST yang terkait dengan jurusan Bt serovar yang digunakan dalam pengendalian hama serangga semuanya diperoleh dari serangga dan sumber
lingkungan. Urutan nomor ST unik didefinisikan di sini sesuai dengan profil alel unik dalam skema MLST yang dikembangkan oleh Priestdkk. (2004) dan
dihosting oleh pub.mlst.org. Asal isolat yang cocok dengan profil alel dari galur biopestisida ini telah dieksplorasi: semua diperoleh dari atau bahan lingkungan
(tanaman, tanah), tidak ada yang ditemukan dari studi klinis pada manusia. Total strain dalam database pub.mlst: 2095: 18 dari diare; 42 dari kotoran; 47
darah; 5 muntah; 9 saluran pernapasan; 7 luka. ST ini dicocokkan dengan database SuperCAT yang lebih luas yang mengumpulkan informasi dari semua
skema MLST yang tersedia dariB. cereus kelompok serta seluruh data genom (http://mlstoslo.uio.no). Informasi tentang asal dan karakteristik isolat ditentukan
dari database di atas atau dari referensi yang terdaftar untuk isolat.

Isolat dengan profil alel

identik di database
Nama produk Bt serovar Pisahkan sinonim NS SuperCAT (dan pub.mlst)

DiPel BMP 123 Thuricide kurstaki HD-1 8 79 (74)

XenTari, Florbac, aizawa T07033/HD227 15A 8 (7)
Novodor morrisoni Biovar BGSC4AA1. tenebrionis 23 23 (21)

Diunduh dari https://academic.oup.com/femsec/article/93/7/fix084/3883769 oleh tamu pada 10 November 2021

Tekar, VectoBac, Aquabac israelensis BGSC4Q1,ONR60A, H-14, ATCC 35 646 16B 6
Tekar, VectoBac, israelensis BGSC4Q7 HD1002 16 21 (13)

ATidak dikonfirmasi: lainnya aizawa ST termasuk 53, 54, 833, 834.

BKecocokan terdekat berdasarkan profil alel yang tersedia: gmk 7; ilv7; PT 2; pur 6; gambar 8; tpi 13.

dipelajari oleh McIntyre dkk. (2008), Bt terjadi pada makanan yang
dikonsumsi di empat wabah ini (10%) berdasarkan deteksi menangis
gen dan kristal. MeskipunBt dapat diperoleh dari makanan, tidak
pernah ditemukan dalam spesimen tinja klinis, tidak seperti SM (
McIntyre, dkk.2008). Mengingat tingginya prevalensiBt pada tanaman
dan tanaman yang disemprot, dan harapan bahwa Bt harus bereplikasi
di usus untuk menyebabkan infeksi (Ceuppens dkk. 2012b), tidak dapat
disimpulkan bahwa Bt adalah agen penyebab dari data ini. Oleh karena
itu kami tidak akan setuju dengan interpretasi EFSA Opinion tentang
artikel ini yang menggambarkan 'B. thuringiensis keracunan makanan
terkait' (hal 22, paragraf 3.2.2). Dalam studi sebelumnya oleh Jackson
dkk.(1995), tinja dari 18 orang selama wabah keracunan makanan
diperiksa, dan pada 4 orang sampel tersebut memiliki kristal dan
karakteristik tipe fag dari Bt, tetapi juga adanya agen etiologi yang
lebih masuk akal, virus Norwalk. Tidak ada penelitian yang
memberikan data dan juga tidak mengklaim bahwaBt galur yang
diidentifikasi menyebabkan wabah atau berasal dari Bt biopestisida.
Singkatnya, semua kasus di manaBt sembuh dari infeksi berhubungan
dengan penekanan kekebalan, baik sebagai akibat dari pembakaran,
trauma besar atau perawatan medis dan tidak ada bukti yang
meyakinkan bahwa salah satu jenis yang diteliti adalah penyebab
diare.
Terlepas dari banyaknya penelitian dan data yang dihasilkan
selama 50 tahun terakhir yang mendukung keamanan Bt, pendapat
EFSA membuat klaim mengejutkan bahwa 'kontribusi sebenarnya dari
kedua spesies [B. cereus dan B. thuringiensis] untuk penyakit gastro-
intestinal dan non-gastrointestinal yang saat ini tidak diketahui'. Dasar
dari pernyataan ini adalah bahwa laboratorium klinis tidak secara rutin
menyaringSM isolat untuk badan inklusi Cry, dan oleh karena itu tidak
diketahui apakah infeksi ini disebabkan oleh Bt atau SM Klaim ini
mengabaikan kumpulan data substansial pada klinis SM infeksi
kelompok yang telah muncul sejak penerapan multilocus sequence
typing (MLST) (Maiden dkk. 1998; Pendetadkk. 2004). Skema MLST
untukSM bervariasi, tetapi skema asli menggunakan tujuh lokus,
mencakup 2838 bp gen rumah tangga yang didistribusikan secara luas
di seluruh genom (Priest dkk. 2004). Sementara teknik MLST sedang
digantikan oleh sekuensing seluruh genom, metode yang lebih tua
masih merupakan alat yang sensitif untuk membedakan genotipe
kromosom dan telah menghasilkan database substansial pada ribuan
isolat selama lebih dari 10 tahun.
Yang terpenting untuk diskusi ini, kuncinya Bt galur biopestisida
memiliki jenis urutan yang dapat dikenali (STs) yang tidak dibagi
dengan yang diketahui SM strain (Tabel 1). Mengingat tingkat spora
biopestisida dalam makanan dan lingkungan, jika biopestisida
pasang surut Bt strain menyebabkan infeksi yang kita harapkan untuk
melihat ST kromosom mereka dalam infeksi klinis. Pertanyaan dari
B. cereus situs web pubMLST (http://pubmlst.org/bcereus/), yang
mendefinisikan ST di atas (Jolley dan Maiden 2010), atau gabungan
SUPERCAT B. cereus basis data (Tourasse, Okstad dan Kolst.2010)
belum mengidentifikasi satu kasus pun, hingga saat ini, di mana infeksi
klinis atau kasus diare dikaitkan dengan salah satu dari:Bt biopestisida
ST. Meskipun masih ada beberapa ambiguitas tentang ST yang tepat
dariBt aizawa regangan dalam produk Xen-Tari, no aizawa strain
pernah dikaitkan dengan infeksi vertebrata. Basis data SUPERCAT
berisi data tentang 2341 isolat, 490 di antaranya telah pulih dari infeksi
vertebrata atau yang membawa pX01 atau pX02antraks plasmid
virulensi.
Sekali lagi, kita dapat menggunakan jaring kita secara lebih luas
untuk menentukan apakah ada ST yang digambarkan sebagai Bt
pernah dikaitkan dengan infeksi klinis. Di sini kita fokus pada isolat di
clade 2, seperti yang ada di 'antraks' clade atau clade 1 sudah dapat
dianggap lebih berbahaya bagi vertebrata (Gbr. 1). Di clade 2, hanya
ada beberapa genotipe yang telah ditemukan dari kedua sumber klinis
dan dijelaskan oleh orang lain sebagaiBt (pakistan ST18 dan
darmstadiensis ST56) serta a SM genotipe yang sesuai dengan Bt
HD-771 dijelaskan oleh Tourasse dkk. (2006). Genotipe lain awalnya
dilaporkan terdiri dari campuran produsen dan non-produsen Cry
(Raymonddkk. 2010b) kemudian terbukti merupakan campuran dari
genotipe yang berbeda (data B. Raymond tidak dipublikasikan).
Dengan demikian, hanya segelintir isolat yang memiliki genotipe yang
berpotensi terkait dengan inklusi Cry dalam satu konteks dan dalam
konteks lain dalam menginfeksi manusia. Sangat masuk akal bahwa
kepemilikan plasmid pembawa toksin Cry adalah kejadian sementara
atau baru-baru ini dalam genotipe ini dan bahwa infeksi pada manusia
dikaitkan dengan klon yang kekurangan sintesis toksin Cry. Entri basis
data juga dapat mengalami kesalahan. Genotipe dan klon ini tentu saja
tidak dipelajari dengan baik, dan laporan yang diterbitkan tentang
genotipe ini tidak berisi rincian tentang asal-usul mereka atau
bagaimana strain diketik sebagaiBt.
Singkatnya, kami memiliki banyak data tentang apakah atau tidak
Bt genotipe dikaitkan dengan infeksi klinis. Fakta bahwa tidak satu pun
dari banyak infeksi klinis yang terkait denganSM sensu lato yang
pernah ditemukan disebabkan oleh genotipe biopestisida menegaskan
hasil pengujian keamanan selama beberapa dekade dan studi
epidemiologi di seluruh kota. Fakta bahwa hanya sejumlah kecil isolat
klinis yang menjalani pengujian MLST yang pernah terbukti secara
genotip tidak dapat dibedakan.
 6 Ekologi Mikrobiologi FEMS, 2017, Jil. 93, No.7
dapat dibedakan dari klon juga digambarkan sebagai Bt juga harus memberi kita
kepercayaan diri.
Filogeni adalah indikator risiko infeksi yang lebih baik
untuk vertebrata daripada pembawa gen enterotoksin
Beberapa SM spesialis, serta pendapat EFSA, membuat argumen
bahwa Bt bisa berbahaya bagi vertebrata karena bakteri ini membawa
gen hemolitik enterotoksin yang dianggap bertanggung jawab atas
kemampuan SM menyebabkan diare (Granum dan Lund 1997; Stenfors
Arnesen, Fagerlund dan Granum2008; EFSA2016). Sangat penting
untuk dicatat bahwa itu adalah emetikSM strain yang menyebabkan
kasus keracunan makanan yang paling serius karena produksi toksin
cereulide yang berbeda, dan strain ini sebagian besar terbatas pada
satu set garis keturunan yang sempit dan tidak ada Bt strain yang
pernah ditemukan mampu menghasilkan cereulide (Agata, Ohta dan
Mori1996; Thorsendkk. 2006; Vassilevadkk. 2007) (Gbr. 1). Argumen
yangBt strain berbahaya karena mereka membawa enterotoksin tidak
tahan terhadap pengawasan. Pertama, sebagian besar jika tidak
semua jenis biopestisida seperti yang didasarkan padaBt kurstaki HD-1
membawa gen enterotoksin dan skor positif pada tes ELISA untuk
protein ini, tetapi ini tidak terkait dengan kemampuan untuk
menginfeksi vertebrata (Damgaard 1995; Uskup, Johnson dan Perani
1999). Bukti yang menghubungkan kepemilikan gen enterotoksin
dengan risiko klinis juga tidak langsung. Profil gen enterotoksin sangat
bervariasi di seluruhSM kelompok (Cardazzo dkk. 2008). Racun
hemolitik cenderung tidak ada dari garis keturunan yang mengandung
B. mycoides dan B. weihenstephanensis (Cardazzo dkk. 2008), yang
konsisten dengan pandangan bahwa ini adalah kelompok lingkungan
non-patogen (Raymond dkk. 2010b; Raymond dan Bonsall2013) (Gbr. 1
). Eksperimen simulasi gastrointestinal gagal menunjukkan produksi
enterotoksin selama kondisi pertumbuhan yang meniru di ileum
(Ceuppensdkk. 2012a), dan tidak satu pun dari empat kelas utama gen
enterotoksin yang penting untuk infeksi pada serangga (Klimowicz,
Benson dan Handelsman2010). Namun demikian, regulasi gen
enterotoksin adalah kompleks. Kehadiran satu gen enterotoksin
mungkin diperlukan untuk potensi keracunan makanan tetapi
kepemilikan bahkan beberapa gen tidak cukup untuk menunjukkan
kemampuan menyebabkan infeksi usus pada vertebrata (Cardazzodkk.
2008).
Faktanya, afiliasi filogenetik dalam SM adalah indikasi yang jauh
lebih baik dari ceruk ekologis atau risiko keracunan makanan
(Guinebretière dkk. 2010; Raymonddkk. 2010b; Raymond dan Bonsall
2013). Sementara beberapa literatur sebelumnya berpendapat bahwa
SMkelompoknya homogen (Helgason dkk. 2000b) atau itu Bc, Bt dan
B. antraks harus dianggap sebagai satu spesies tunggal (Tourassedkk.
2006), ini tentu saja tidak mewakili konsensus. Faktanya, penerapan
MLST telah menyebabkan pandangan konsensus yang berlawanan:
bahwa ada perbedaan genetik dan biologis yang substansial antara
clades diSM kelompok (Siegel 2001; Pendetadkk. 2004; sorokindkk.
2006; Vassilevadkk. 2006; Cardazzodkk. 2008; Didelotdkk. 2009;
Raymonddkk. 2010b; Raymond dan Bonsall2013), sementara juga
mengakui bahwa clades ini tidak sesuai dengan nama spesies yang
diberikan. Analisis pola transfer gen horizontal menunjukkan bahwa
setidaknya ada tiga clade utama dan sebagian besar rekombinasi
terjadi di dalam daripada di antara clade (Didelotdkk. 2009). Satu
analisis seluruh genom baru-baru ini menyarankan memecah
kelompok menjadi 19 atau 20 spesies mungkin dibenarkan (Liudkk.
2015), rekomendasi yang mungkin merupakan langkah yang terlalu
jauh. Yang penting, clades MLST utama memiliki pola asosiasi inang
yang berbeda atau kemampuan yang bervariasi untuk menyebabkan
keracunan makanan (Gbr. 2).1) (Guinebretièredkk. 2010; Raymonddkk.
2010b; Raymond dan Bonsall2013). SejakBt strain (menghasilkan racun
Cry) didistribusikan secara luas
di beberapa clades, tidak semua Bt strain diharapkan sama amannya,
seperti yang disarankan oleh diskusi di atas. Strain lebih dekat
hubungannya denganantraks lebih sering dikaitkan dengan infeksi
vertebrata, memberi kita harapan akan risiko yang lebih besar. Analisis
filogenetik ini mendukung data dari uji keamanan akut yang
menunjukkan bahwa:B. antraks setidaknya satu juta kali lebih
berbahaya bagi vertebrata daripada noda biopestisida Bt (Siegel 2001).
Secara kritis, garis keturunan yang mengandung strain biopestida dari
serovarisraelensis, morrisoni (strain tenebrionis), kurstaki dan aizawa
tidak mungkin terkait dengan infeksi pada manusia (Gbr. 1). Informasi
terbaru yang tersedia di database SuperCat mengkonfirmasi analisis
sebelumnya ini: 72% dari 548 isolat diantraks clade (clade 1 atau cluster
III) sangat mirip B. antraks itu sendiri atau telah dikaitkan dengan
infeksi vertebrata, sementara hanya 29% dari 866 isolat di kelas 2 yang
Diunduh dari https://academic.oup.com/femsec/article/93/7/fix084/3883769 oleh tamu pada 10 November 2021
terkait dengan infeksi vertebrata. Variasi dalam kisaran inang dan
ekologi antara clades yang berbeda dalamSM kelompok tidak cukup
dibahas dalam tinjauan EFSA.
Produksi racun Cry secara ekologis dan biologis
signifikan
Fakta bahwa racun Cry dikodekan plasmid (dan karena itu dapat berpindah
di antara garis keturunan yang terkait jauh) hampir pasti merupakan alasan
mengapa Bt dan SM tidak membentuk spesies yang rapi dan berbeda.
Namun demikian, nama yang berbeda masih dapat berguna karena
konsekuensi ekologis dan biologis dari produksi racun Cry sangat besar.
SejakSM enterotoksin dapat didegradasi oleh asam lambung dan enzim
pencernaan, diperkirakan keberadaannya pada infeksi vertebrata harus
merupakan hasil dari pertumbuhan vegetatif baru di usus bagian bawah
(Ceuppens dkk. 2012b). Penghalang kunci keberhasilan infeksi diSM adalah
kompetisi dengan mikroba usus yang ada (Ceuppens dkk. 2012b).
Pengangkutan plasmid toksin Cry secara substansial melemahkan
kemampuan kompetitifBt relatif terhadap SM in vivo (Raymond, Davis dan
Bonsall 2007; Raymonddkk.2012) dan di dalam tanah (Yara, Kunimi dan
Iwahana 1997). Kemampuan bersaing yang buruk kemungkinan akan
membuatBt secara substansial kurang cocok di usus vertebrata, di mana
produksi toksin Cry tidak adaptif. Sedangkan entomocidalBt strain
tampaknya memiliki adaptasi spesifik yang memungkinkan mereka untuk
bersaing secara efektif dengan mikroba usus aerobik di usus invertebrata
(Raymond dkk. 2008, 2009), produksi toksin Cry, atau pengangkutan plasmid
pembawa toksin Cry, dapat menjelaskan berkurangnya kemampuan untuk
menyebabkan infeksi pada usus vertebrata.
Kesimpulan
Ringkasnya, kasus kontroversial keracunan makanan baru-baru ini di Jerman
tidak memberikan bukti yang meyakinkan bahwa Bt adalah agen penyebab,
karena individu dengan keracunan makanan juga telah mengkonsumsi
dosis SM cukup untuk menyebabkan tingkat infeksi yang diamati. Secara
keseluruhan, database MLST, studi epidemiologi dan literatur pengujian
keamanan menyajikan pandangan yang terinformasi dan koheren tentang
biologi dan ekologi dariSM kelompok. Argumen dalam laporan EFSA, bahwa
kami tidak memahami risiko mengkonsumsiBt spora, karena itu tidak
berdasar dan terlalu berhati-hati. Analisis studi yang dikutip dalam pendapat
EFSA digunakan untuk mempertanyakanBt keamanan (Rosenquist dkk. 2005
, Frederiksen dkk. 2006) menunjukkan tidak hanya manusia secara rutin
memakan tingkat tinggi spesies ini, tetapi sebagian besar strain (>80%)
dikonsumsi secara alami, bukan dari biopestisida. Namun bahkan pada
tingkat yang tidak dapat diterima di bawah pedoman Denmark, tidak ada
bukti bahwa konsumsi pernah mengakibatkan keracunan makanan.
Selanjutnya, strain entomocidalBt tidak mampu menginfeksi vertebrata
pada dosis yang sangat tinggi dalam tes laboratorium terkontrol dan di sana

tidak ada data yang kuat untuk menunjukkan bahwa manusia mungkin
merupakan pengecualian. Analisis filogenetik diferensiasi ekologi di
seluruhSM kelompok menunjukkan bahwa ada sangat sedikit strain Bt
dengan risiko tinggi untuk vertebrata (Guinebretière dkk. 2010;
Raymonddkk. 2010b; Raymond dan Bonsall2013). Ini akan mencakup
subsp.konkukian, yang awalnya diisolasi dari seorang prajurit yang
terluka parah oleh ranjau darat (Hernandez, Ramisse dan Ducoureau
1998). Isolat itu memang menimbulkan risiko yang lebih besar bagi
tikus daripada galur biopestisidaBt (Hernandez dkk. 2000). Yang
terpenting,Bt konkukian dapat dengan kuat ditempatkan di antraks
clade dan jauh terkait dengan semua strain biopestisida (Han dkk.2006;
Raymonddkk. 2010b; Raymond dan Bonsall2013); itu juga tidak terbukti
patogen bagi serangga. Berdasarkan diferensiasi ekologi di seluruhSM
grup, kami tidak akan merekomendasikan lisensi apa pun Bt produk
yang menunjukkan afinitas biologis yang mirip dengan
B.antraks.
Regulator tidak memiliki pekerjaan yang sangat mudah. Untuk produk
perlindungan tanaman, baik itu kimia atau biologis, tidak mungkin untuk
menghilangkan risiko sepenuhnya. Oleh karena itu, membuat argumen
bahwa kita tidak cukup tahu untuk meyakinkan pemerintah tentang tingkat
keamanan yang wajar sangat menggoda. Rekomendasi untuk tingkat
kehati-hatian yang lebih besar selalu dapat dibenarkan. Namun, pendekatan
yang sangat hati-hati memiliki konsekuensi dalam hal semakin sempitnya
jangkauan produk yang tersedia bagi petani atau meningkatnya biaya yang
terkait dengan pengelolaan hama. Tanpa ragu, kita memang perlu
mengendalikan hama, tetapi tingkat pembatasan yang semakin besar
kemungkinan akan membuat ekonomi hortikultura dan pertanian Uni Eropa
semakin tidak kompetitif. Selain itu, pembatasan yang lebih ketat pada
penggunaanBt produk akan berarti bahwa petani akan kembali
menggunakan insektisida kimia sintetis spektrum luas yang terdaftar, yang
tidak diragukan lagi lebih berbahaya bagi lingkungan. Oleh karena itu,
regulator harus hati-hati menimbang keseimbangan bukti sebelum
mendesak pembatasan yang lebih besar. UntukBt, tidak ada alasan untuk
meningkatkan pembatasan pada insektisida biologis yang berharga dan
sangat aman ini.
PENDANAAN
BR telah menerima dukungan dari NERC, BBSRC, dan Leverhulme Trust
untuk mendanai penelitiannya tentang Bt. Terima kasih kepada Neil
Crickmore dan wasit anonim kami atas komentar mereka yang bermanfaat.
Konflik kepentingan. Tidak ada yang dinyatakan.
REFERENSI
Agata N, Ohta M, Mori M. Produksi racun muntah,
cereulide, dikaitkan dengan kelas tertentu dari Bacillus cereus.
Mikrobiol Curr 1996;33:67–9.
Berlitz DL, Giovenardi M, Charles JF dkk. Toksisitas intraperi-
rute tonus dan intragastrik Bacillus thuringiensis dan Melia
azedarach pada tikus. Arq Inst Biola 2012;79: 511–7.
Uskup AH, Johnson C, Perani M. Keamanan Bacillus thuringien-
kakak untuk mamalia diselidiki dengan dosis oral dan subkutan.
Biot Mikrob Dunia J 1999;15:375–80.
Burges HD, Hurst JA. EkologiBacillus thuringiensis dalam penyimpanan
ngengat. J Invert Pathol 1977;30:131–9.
Cardazzo B, Negrisolo E, Carraro L dkk. Urutan multi-lokus
pengetikan dan analisis gen toksin di Bacillus cereus isolat bawaan
makanan. Mikroba Lingkungan Appl 2008;74:850–60. Ceuppens S,
Uytendaele M, Drieskens Kdkk. Kelangsungan hidup dan ger-
penghentian Bacillus cereus spora tanpa hasil atau produksi
enterotoksin selama simulasi in vitro transit gastrointestinal.
Mikroba Lingkungan Appl 2012a;78:7698–705.
Raymond dan Federici 7
Ceuppens S, Van de Wiele T, Rajkovic A dkk. Dampak di-
mikrobiota testis dan kondisi gastrointestinal pada kelangsungan hidup
dan pertumbuhan in vitro Bacillus cereus. Mikrobiol Makanan Int J
2012b;155:241–6.
Cornforth DM, Matthews A, Brown SP dkk. Kerja sama bakteri
menyebabkan kesalahan sistematis dalam penilaian risiko patogen
karena kegagalan hipotesis tindakan independen. Patologi PLoS
2015;11:e1004775.
Crickmore N, Zeigler DR, Feitelson J dkk. Revisi nomen-
clature untuk Bacillus thuringiensis protein kristal pestisida.
Mikrobiol Mol Biol R 1998;62:807–13.
Damgar PH. Produksi enterotoksin diare oleh strain
dari Bacillus thuringiensis terisolasi dari komersial Bacillus
thuringiensisberbasis insektisida. FEMS Immunol Med Mic1995;12
Diunduh dari https://academic.oup.com/femsec/article/93/7/fix084/3883769 oleh tamu pada 10 November 2021
:245–50.
Damgaard PH, Granum PE, Bresciani J dkk. Karakterisasi dari
Bacillus thuringiensis diisolasi dari infeksi pada luka bakar.FEMS
Immunol Med Mic 1997;18:47–53.
Didelot X, Barker M, Falush D dkk. Evolusi patogenisitas di
NS Bacillus cereus kelompok. Syst Appl Microbiol 2009;32:81–90. Panel
Biohazard EFSA. Risiko bagi kesehatan masyarakat terkait dengan tekanan
dari Bacillus cereus dan lainnya Basil sp. termasukBacillus
thuringiensis dalam bahan makanan. EFSA J 2016;14:99.
Federici BA, Siegel JP. Penilaian keamananBacillus thuringien-
kakak dan Bt tanaman yang digunakan untuk pengendalian serangga. Dalam:
Hammond BG (ed.).Keamanan Protein Pangan pada Tanaman Pertanian. London:
Taylor dan Francis, 2007, 46-101.
Frederiksen K, Rosenquist H, Jorgensen K dkk. terjadinya
alami Bacillus thuringiensis kontaminan dan residu dariBacillus
thuringiensis- insektisida berbahan dasar buah dan sayuran segar.
Mikroba Lingkungan Appl 2006;72:3435–40. Ghelardi E, Celandroni
F, Salvetti Sdkk. Bacillus thuringiensis
infeksi paru: peran penting untuk membran bakteri yang merusak
toksin dan neutrofil pejamu. Infeksi Mikroba2007;9:591–8.
Silau T, O'Callaghan M. Bacillus thuringiensis: Biologi, Ekologi dan
Keamanan. Chichester, Inggris: John Wiley, 2000.
Gonzalez JM, Dulmage HT, Carlton BC. Korelasi antara
plasmid spesifik dan produksi delta-endotoxn dalam Bacillus
thuringiensis. Plasmid 1981;5:351–65.
Granum PE, Lund T. Bacillus cereus dan racun keracunan makanannya.
FEMS Mikrobiol Lett 1997;157:223–8.
Guinebretière MH, Velge P, Couvert O dkk. Kemampuan dari Basil
cereus Strain kelompok yang menyebabkan keracunan makanan
bervariasi menurut afiliasi filogenetik (Kelompok I hingga VII)
daripada afiliasi spesies. J Clin Mikrobiol 2010;48:3388–91.
Han CS, Xie G, Challacombe JF dkk. Urutan Patogenomik
analisis dari Bacillus cereus dan Bacillus thuringiensis isolat yang
berkaitan erat dengan Bacillus anthracis. J Bakteri 2006;188:3382–
90.
Hassan S. Metodologi pengujian dan konsep
kelompok kerja IOBC/WPRS. Dalam: Jepson P (ed.).Pestisida dan
Invertebrata Non-Target. Wimborne, Dorset: Intercept, 1992, 1–18.
Helgason E, Caugant DA, Olsen I dkk. Struktur genetik populasi
hubungan dari Bacillus cereus dan B. thuringiensis isolat yang
terkait dengan periodontitis dan infeksi manusia lainnya. J Clin
Mikrobiol 2000a;38:1615–22.
Helgason E, Okstad OA, Caugant DA dkk. Bacillus anthracis, Bacillus
lus cereus, dan Bacillus thuringiensis - satu spesies berdasarkan
bukti genetik. Mikroba Lingkungan Appl 2000b;66:2627–30.
Hernandez E, Ramise F, Ducoureau J.Bacillus thuringiensis subsp.
konkukian (serotipe H34) superinfeksi: laporan kasus dan bukti
eksperimental patogenisitas pada tikus imunosupresi. J Clin
Mikrobiol 1998;36:2138–9.
 8 Ekologi Mikrobiologi FEMS, 2017, Jil. 93, No.7
Hernandez E, Ramise Fo, Gros P dkk. Infeksi super oleh basil-
lus thuringiensis H34 atau 3a3b dapat menyebabkan kematian
pada tikus yang terinfeksi virus influenza A. FEMS Immunol Med
Mic2000;29:177–81.
Huber J. Keamanan Baculoviruses digunakan sebagai insektisida biologis.
Dalam: Penilaian Risiko untuk Rilis yang Disengaja. Berlin: Springer,
1988, 65–71.
Itova-Aoyolo C, Drif L, DeBarjac H dkk. Isolasi beberapa
spesies dari Bacillus thuringiensis dari populasi ngengat bunga
matahari Eropa, Homoeosoma nebuella. Mikroba Lingkungan Appl
1995;61:4343–7.
Jackson SG, Goodbrand RB, Ahmed R dkk. Bacillus cereusdan
Bacillus thuringiensis diisolasi dalam penyelidikan wabah
gastroenteritis. Lett Appl Microbiol 1995;21:103–5.
Jolley KA, Maiden MCJ. BIGSdb: Analisis scalable dari bakteri
variasi genom nyata pada tingkat populasi. BMC Bioinf2010;11:1–
11.
Klimowicz AK, Benson TA, Handelsman J. A quadruple-
mutan yang kekurangan enterotoksin Bacillus thuringiensis tetap
insektisida. Mikrobiologi- (Inggris Raya) 2010;156:3575–83.
Kuo WS, Chak KF. Identifikasi gen tipe menangis baru dari
Bacillus thuringiensis strain berdasarkan polimorfisme panjang
fragmen restriksi dari DNA yang diperkuat PCR. Mikroba
Lingkungan Appl 1996;62:1369–77.
Kuroki R, Kawakami K, Qin L dkk. Bakteremia Nosokomial
Disebabkan oleh Biofilm-Forming Bacillus cereus dan Bacillus
thuringiensis. Kedokteran Intern 2009;48:791–6.
Liu Y, Lai Q, Göker M dkk. Wawasan genom ke dalam taksonomi
statusnya Bacillus cereus kelompok. Rep Sci 2015;5: 14082.
McClintock JT, Schaffer CR, Sjoblad RD. Sebuah tinjauan komparatif
toksisitas mamalia dari Bacillus thuringiensis- pestisida berbasis Ilmu
Pengendalian Hama 1995;45:95–105.
McIntyre L, Bernard K, Beniac D dkk. Identifikasi basil-
lus cereus kelompok spesies yang terkait dengan wabah keracunan
makanan di British Columbia, Kanada. Mikroba Lingkungan Appl
2008;74:7451–3.
Maiden MC, Bygraves JA, Feil E dkk. Jenis urutan multilokus
ing: pendekatan portabel untuk identifikasi klon dalam populasi
mikroorganisme patogen. P Natl Acad Sci USA 1998;95:3140–5.
Meadows MP, Ellis DJ, Butt J dkk. Distribusi, frekuensi, dan
keragaman Bacillus thuringiensis di pabrik pakan ternak. Mikroba
Lingkungan Appl 1992;58:1344–50.
Imam FG, Barker M, Baillie LWJ dkk. Struktur populasi
masa depan dan evolusi Bacillus cereus kelompok. J Bakteri2004;
186:7959–70.
Raymond B, Bonsall MB. Kerjasama dan ekosistem evolusioner
ogy virulensi bakteri: the Bacillus cereus kelompok sebagai sistem
studi baru. Bioesai 2013;35:706–16.
Raymond B, Davis D, Bonsall MB. Kompetisi dan reproduksi
pada infeksi campuran patogen dan non-patogen Basil sp. J
Invertebr Pathol 2007;96:151–5.
Raymond B, Johnston PR, Nielsen-Leroux C dkk. basil-
lus thuringiensis: patogen impoten? Tren Mikrobiol2010a;18:189–
94.
Raymond B, Johnston PR, Wright DJ dkk. Mikrobiota usus tengah adalah
tidak diperlukan untuk patogenisitas Bacillus thuringiensis untuk
larva ngengat diamondback. Mikrobiol Lingkungan 2009;11:2556–
63. Raymond B, Lijek RS, Griffiths RIdkk. Konsekuensi ekologis
menelan Bacillus cereus pada Bacillus thuringiensis infeksi dan
pada flora usus dari host lepidopteran. J Invert Pathol2008;99:103–
11.
Raymond B, SA Barat, Griffin AS dkk. Dinamika kerjasama
virulensi bakteri di lapangan. Sains 2012;337:85–8. Raymond B,
Wyres KL, Sheppard SKdkk. Fakta lingkungan-
menentukan epidemiologi dan struktur genetik populasi dari
Bacillus cereus kelompok di lapangan. Patologi PLoS2010b;6
:e1000905.
Rosenquist H, Smidt L, Andersen SR dkk. Kejadian dan tanda-
Diunduh dari https://academic.oup.com/femsec/article/93/7/fix084/3883769 oleh tamu pada 10 November 2021
es dari Bacillus cereus dan Bacillus thuringiensis dalam makanan
siap saji. FEMS Mikrobiol Lett 2005;250:129–36.
Ruan L, Crickmore N, Peng D dkk. Apakah nematoda mata rantai yang hilang?
dalam ekologi bingung entomopatogen Bacillus thuringiensis?
Tren Mikrobiol 2015;23:341–6.
Sampel JR, Buettner H. Infeksi mata yang disebabkan oleh biologis
insektisida. J Menginfeksi Dis 1983;148:614.
Schnepf E, Crickmore N, Van Rie J dkk. Bacillus thuringiensisdan
protein kristal pestisidanya. Mikrobiol Mol Biol R 1998;62:775– 806.
Siegel JP. Keamanan mamalia dariBacillus thuringiensis berdasarkan
insektisida. J Invertebr Pathol 2001;77:13–21.
Sorokin A, Candelon B, Guilloux K dkk. Urutan multi-lokus
analisis mengetik Bacillus cereus dan Bacillus thuringiensis
mengungkapkan pengelompokan terpisah dan struktur populasi yang
berbeda dari strain psychrotrophic. Mikroba Lingkungan Appl 2006;72
:1569– 78.
Stenfors Arnesen LP, Fagerlund A, Granum PE. Dari tanah ke usus:
Bacillus cereus dan racun keracunan makanannya. FEMS Microbiol Rev
2008;32:579–606.
Thorsen LL, Hansen BMB, Nielsen KFK dkk. Karakterisasi-
efek emetik Bacillus weihenstephanensis, bakteri penghasil
sereulida baru. Mikroba Lingkungan Appl 2006;72:5118–21.
Tourasse NJ, Helgason E, kstad OAdkk. NS Bacillus cereus
kelompok: aspek baru dari struktur populasi dan dinamika genom.
J Appl Mikrobiol 2006;101:579–93.
Tourasse NJ, Okstad OA, Kolstø AB. HyperCAT: perpanjangan dari
database SuperCAT untuk analisis filogenetik multi-skema dan
multidatatype global dari Bacillus cereus populasi kelompok. Basis
data 2010;2010:baq017–baq.
Vassileva M, Torii K, Oshimoto M dkk. Analisis filogenetik dari
Bacillus cereus isolat dari infeksi sistemik berat menggunakan
skema pengurutan urutan multilokus. Mikrobiol Imun2006;50:743–
9.
VassilevaM, Torii K, OshimotoM dkk. Sebuah cluster filogenetik baru
penghasil cereulide Bacillus cereus ketegangan. J Clin Mikrobiol
2007;45:1274–7.
Yara K, Kunimi Y, Iwahana H. Studi Perbandingan Pertumbuhan
karakteristik dan kemampuan bersaing dalam Bacillus
thuringiensis dan Bacillus cereus di tanah. Appl Entomol Zool 1997;
32:625–34.