Elektroforesis

KELOMPOK I
 KELOMPOK I

A. IKAH PUSPITASARI A. WAHDANIAH AMALIAH KHOIRUNNISA ANDI KHADIJAH

PO714203191.001 PO714203191.002 RUSISAH PO714203191.004
PO714203191.003
 Definisi
Elektroforesis
Definisi Elektroforesis

Elektroforesis adalah suatu teknik

pemisahan molekul seluler berdasarkan
atas ukuran dengan menggunakan
medan listrik yang dialirkan pada suatu
medium yang mengandung sampel yang
akan dipisahkan. Teknik ini dapat
digunakan dengan memanfaatkan
muatan listrik yang ada pada
makromolekul misalnya DNA yang
bermuatan negatif.
 Prinsip
Elektroforesis
 Prinsip
elektroforesis
Jika suatu fase zat bermuatan,
diberi beda potensial, fase
tersebut akan berpindah
sepanjang medium yang kontinu
ke arah katoda atau anoda sesuai
dengan muatan partikel
Prinsip kerja dari
elektroforesis
Adanya pergerakan komponen bermuatan
positif (+) pada kutub negatif (-) serta
komponen bermuatan negatif (-) pada
kutub positif (+). Pergerakan yang terjadi
disebut "elektrokinetik"
 Jenis-jenis
Elektroforesis
Jenis-jenis Elektroforesis

Elektroforesis Gel Kanji

Elektroforesis Kertas Elektroforesis Kapiler

Bagian - bagian Elektroforesis
 Elektroforesis Kertas
Sejarah
Sejarah

Tahun
Tahun 1952
1952

Markham dan Smith mempublikasikan bahwa hidrolisis RNA terjadi

melalui mekanisme pembentukan zat antara (intermediate) posfat
siklik, yang kemudian menghasilkan nukleosida 2′-monoposfat dan
3′-monoposfat
Elektroforesis
Elektroforesis

Dibuat dari kertas saring Whatman nomor 3, sebuah tangki kecil dan
berbagai larutan penyangga (buffer). Elektroforesis ini digunakan
untuk pemisahan DNA/RNA
 Elektroforesis Kertas

Jenis elektroforesis yang terdiri dari kertas sebagai

fase diam dan partikel yang terlarut sebagai fase
gerak, terutama ion-ion kompleks

Pemisahan ini terjadi akibat adanya gradasi konsentrasi sepanjang system

pemisahan. Pergerakan partikel dalam kertas tergantung pada muatan atau
valensi zat terlarut, luas penampang, tegangan yang digunakan, konsentrasi
elektrolit, kekuatan ion, pH, viskositas, dan adsorbsivitas zat terlarut.
 1. Kertas saring
dibasahi dengan
6. Dibandingkan
larutan buffer
dengan suatu standar 2. Kertas saring
direntangkan diantara
dua elektroda
Prosedur Kerja
5. Setiap jenis molekul bermuatan Elektroforesis
pada campuran (mixtura) akan
berpindah pada jarak tertentu baik
Kertas
ke anoda maupun katoda
tergantung pada muatan dimensi 3. Satu tetes campuran yang
dan akan nampak sebagai titik akan dianalisis ditempatkan
pada kertas dengan posisi yang pada satu ujung kertas dan
baru 4. Kertas dipindahkan listrik dialirkan
dikeringkan dan diwarnai
dengan pewarna yang
mewarnai substansinya untuk
dianalisa (diperiksa)
 ELEKTROFORESIS GEL
Smithies mendemonstrasikan bahwa gel yang terbuat
Tahun 1995
dari larutan kanji dapat digunakan untuk memisahkan

protein-protein serum manusia

Menuangkan larutan kanji panas ke dalam cetakan plastik, setelah dibiarkan

mendingin kanji tersebut akan membentuk gel yang padat namun rapuh. Gel

kanji berperan sebagai fasa diam (stationary phase) menggantikan kertas

saring Whatman pada teknik terdahulu. Ternyata elektroforesis gel yang

diperkenalkan Smithies memicu para ilmuwan untuk menemukan bahan kimia

lain yang dapat digunakan sebagai bahan gel yang lebih baik, seperti agarosa

dan polimer akrilamida

Teknik elektroforesis gel makin berkembang dan disempurnakan,

hingga 12 tahun kemudian ditemukan gel poliakrilamida (PAGE =

Polyacrilamide Gel Electrophoresis) yang terbentuk melalui proses

polimerisasi akrilamida dan bis-akrilamida yang digunakan untuk

DNA.
Elektroforesis
Kapiler ELektroforesis kapiler adalah metode yang digunakan

untuk memisahakan asam amino, protein, lipid,

karbohidrat dan nukleotida, dengan resolusi tinggi yang

dilakukan pada pipa kapiler berusi buffer

Metode ini mulai dipergunakan secara luas pada akhir

tahun1940. Elektroforesif kapiler menggunakan listrik

tegangan tinggi yang menyebabkan semua komponen ion

atau molekul netral bergerak ke katoda. Deteksi dapat

dilakukan dengan telnik pendeteksian spektrometri atau

elektrokimia. Teknik pemisahan ini dipengaruhi oleh

tegangan listrik, koefisien difusi, panjang dan diameter

pipa kapiler serta konsentrasi sampel.

 Manfaat
Elektroforesis
Dalam Berbagai
Bidang
 Manfaat Elektroforesis Dalam Berbagai Bidang

Dalam kegiatan biologi Memudahkan

Dalam bidang kepolisian

molekuler Elektroforesis indentifikasi protein

digunakan untuk

merupakan salah satu cara yang terdapat pada

pemeriksaan DNA, setiap

untuk memvisualisasikan sebuah DNA

orang memiliki

keberadaan DNA, plasmid

karakteristik khusus,

dan produk PCR2

misalnya sidik jari
 Kelebihan Dan
Kekurangan
Dalam
Elektroforesis
 Kelebihan Dan Kekurangan Dalam Elektroforesis

Kelebihan Kekurangan
• Metode pemisahan elektroforesis • Waktu pemisahan yang relatif
lama
cukup dengan peralatan sederhana
• Keterbatasan dalam hal efisiensi
• Dapat digunakan untuk yang rendah
memisahkan suatu sampel molekul • Hanya berlaku untuk senyawa
besar (protein, asam nukleat, asam yang berwarna saja

amino dan karbohidrat

Thha
annk
k
T
y
yoou
u!!