Efek Sonokimia pada 14 Flavonoid Umum dalam Jeruk:

Kaitannya dengan Stabilitas

Liping Qiao 1, Yujing Sun 2, Rongrong Chen 1, Yu Fu 1, Wenjuan Zhang 1, Xin Li 1, Jianchu Chen 1, Yan Shen 1,
Xingqian Ye 1 *
1 Sekolah Tinggi Teknik Biosistem dan Ilmu Pangan; Laboratorium Utama Zhejiang untuk Pengolahan Makanan Agro; Institut Ilmu Pangan Fuli; Pusat Litbang Zhejiang untuk Teknologi dan
Peralatan Pangan; Universitas Zhejiang, Hangzhou, PR China, 2 Departemen Ilmu dan Teknologi Pangan, Universitas Teknologi Zhejiang, Hangzhou, PR China

Abstrak
Efek sonokimia pengobatan USG (US) pada 14 flavonoid yang mewakili flavonoid utama dalam buah jeruk diselidiki dalam campuran standar dengan evaluasi stabilitas sistem model. Produk
degradasi selanjutnya diidentifikasi sementara dengan spektroskopi inframerah transformasi Fourier dan kromatografi cair kinerja tinggi-deteksi ultraviolet- spektrometri massa tandem ionisasi
elektrospray. Tiga belas flavonoid (yaitu, eriocitrin, narirutin, neohesperidin, quercitrin, eridictyol, didymin, naringenin, luteolin, sinensetin, nobiletin, tangeretin, naringin, dan hesperidin) cukup stabil
sedangkan quercetin terdegradasi secara signifikan oleh pengobatan AS. Jenis pelarut dan suhu yang digunakan merupakan faktor penting yang menentukan reaksi degradasi yang dihasilkan. Laju
degradasi quercetin tertinggi pada larutan etanol 80% dan menurun seiring dengan peningkatan suhu. Durasi AS yang lebih lama menyebabkan peningkatan tingkat degradasi quercetin. Ketinggian
cairan, intensitas ultrasonik, panjang pulsa, dan siklus kerja US mempengaruhi laju degradasi tetapi tidak mengubah sifat degradasi flavonoid. Empat jenis reaksi terjadi secara bersamaan untuk
quercetin di bawah perlakuan AS: oksidasi, penambahan, polimerisasi, dan dekomposisi. Delapan produk degradasi untuk sementara diidentifikasi sebagai dimer, adisi alkohol, oksidasi, dan produk
dekomposisi. dan siklus kerja AS mempengaruhi tingkat degradasi tetapi tidak mengubah sifat degradasi flavonoid. Empat jenis reaksi terjadi secara bersamaan untuk quercetin di bawah perlakuan
AS: oksidasi, penambahan, polimerisasi, dan dekomposisi. Delapan produk degradasi untuk sementara diidentifikasi sebagai dimer, adisi alkohol, oksidasi, dan produk dekomposisi. dan siklus kerja
AS mempengaruhi tingkat degradasi tetapi tidak mengubah sifat degradasi flavonoid. Empat jenis reaksi terjadi secara bersamaan untuk quercetin di bawah perlakuan AS: oksidasi, penambahan,
polimerisasi, dan dekomposisi. Delapan produk degradasi untuk sementara diidentifikasi sebagai dimer, adisi alkohol, oksidasi, dan produk dekomposisi.

Kutipan: Qiao L, Sun Y, Chen R, Fu Y, Zhang W, dkk. (2014) Efek Sonokimia pada 14 Flavonoid Umum dalam Jeruk: Kaitannya dengan Stabilitas. PLoS ONE 9 (2): e87766. doi: 10.1371 /
journal.pone.0087766

Editor: Karl X. Chai, University of Central Florida, Amerika Serikat

Diterima 4 September 2013; Diterima 30 Desember 2013; Diterbitkan 6 Februari 2014

Hak cipta: 2014 Qiao dkk. Ini adalah artikel akses terbuka yang didistribusikan di bawah persyaratan Lisensi Atribusi Creative Commons, yang mengizinkan penggunaan, distribusi,
dan reproduksi tidak terbatas dalam media apa pun, dengan mencantumkan nama penulis dan sumber aslinya.

Pendanaan: Proyek ini didukung oleh National Natural Science Foundation of China (31071635), National Key Technology R&D Program (2012BAD31B06, 2012BAD31B02) dan
Postdoctoral Foundation of China (316000 - X91102; 316000-X91204). Pemberi dana tidak memiliki peran dalam desain studi, pengumpulan dan analisis data, keputusan untuk
menerbitkan, atau persiapan naskah.

Minat Bersaing: Para penulis telah menyatakan bahwa tidak ada kepentingan yang bersaing.

* Email: psu@zju.edu.cn

pengantar Ekstraksi dengan bantuan ultrasound telah banyak digunakan untuk

Flavonoid adalah golongan senyawa alami yang tersebar luas
pada tumbuhan dengan kerangka karbon C6-C3-C6. Lebih
6.000 senyawa telah diidentifikasi dari berbagai kombinasi
beberapa hidroksil, metoksil, C- glikosilasi, dan HAI- substituen
kelompok glikosida pada benzo- dasar c- pyrone [1]. Buah jeruk
memainkan peran penting dalam makanan manusia karena
manfaat kesehatan dan kandungan flavonoid dan nutrisinya yang
tinggi. Glikosida flavanon, yaitu narirutin, naringin, hesperidin, dan
neohesperidin, merupakan flavonoid utama dalam buah jeruk [2].
Studi terbaru menemukan bahwa sifat biologis flavonoid termasuk
aktivitas antioksidan, anti-inflamasi, dan antimikroba, serta
beberapa aktivitas lain yang terkait dengan aterosklerosis dan
pencegahan kanker [3,4,5].
Flavonoid sensitif terhadap degradasi karena gugus hidroksil dan
ketonnya serta ikatan rangkap tak jenuh. Penelitian sebelumnya telah
melaporkan efek perlakuan pemrosesan yang berbeda terhadap
stabilitas flavonoid [6,7]. Misalnya, memanggang soba menghasilkan
80% kehilangan rutin pada 160 u C selama 30 menit. Merebus,
menggoreng, memanggang, menumis, mengukus, dan menggunakan
microwave juga menghasilkan tingkat reduksi flavonoid yang berbeda
serupa dengan yang diamati pada proses mekanis (misalnya memotong
dan menekan).
ekstraksi senyawa bioaktif karena aksesibilitasnya, tingkat ekstraksi yang
tinggi, dan efisiensi [8]. Namun, USG (US) dapat memberikan efek
sonokimia pada ekstrak dan beberapa reaksi kimia dapat dipicu atau
dipercepat. Misalnya, pengobatan US menyebabkan degradasi
karotenoid [9] dan asam fenolik [10], serta agregasi dan dekomposisi
polisakarida [11]. Beberapa makalah telah melaporkan bahwa sonikasi
mendegradasi atau mengoksidasi flavonoid. Paniwnyk dkk. [12]
menemukan bahwa metode US aqueous menghasilkan hasil rutin yang
lebih rendah daripada ekstraksi konvensional ketika durasi US lebih lama
dari 20 menit. Robak dkk. [13] melaporkan oksidasi flavonoid yang
diinduksi AS pada tahun 1991. Meskipun sejumlah studi yang tersedia
tentang metode AS, bagaimanapun, beberapa penelitian terbaru telah
mempertimbangkan apakah USG sebagai alat ekstraksi mempengaruhi
stabilitas flavonoid atau tidak. Hanya Biesag yang telah memeriksa
stabilitas flavonoid yang dipilih dalam madu [14] dan jagung [15] selama
sonikasi.
Apakah efek merusak atau reaksi yang tidak diinginkan di bumi
akan terjadi selama proses ekstraksi flavonoid dari jeruk dengan
perawatan ultrasound? Masalah ini perlu diverifikasi. Namun, sistem
sampel yang rumit menyulitkan untuk menentukan dan
menganalisis kemungkinan reaksi kimia senyawa target dalam
kondisi realistis. Sifat reaksi kimia umumnya identik dalam sistem
model dan

PLOS ONE | www.plosone.org 1 Februari 2014 | Volume 9 | Edisi 2 | e87766


Gambar 1. Pengaruh pelarut terhadap stabilitas quercetin di bawah perawatan
ultrasound (US) dan berdiri (CK). Huruf yang berbeda pada bilah menunjukkan
perbedaan yang signifikan ( p, 0,05) menurut uji jarak berganda Duncan.
doi: 10.1371 / journal.pone.0087766.g001
kondisi realistis dan hanya beberapa perbedaan dalam tingkat
dekomposisi mereka [15]. Oleh karena itu, sistem model
dikembangkan untuk menyelidiki masalah ini. Tujuan dari penelitian
ini adalah untuk menentukan faktor perlakuan AS yang umum
(pelarut, suhu, intensitas ultrasonik, tinggi cairan, panjang denyut
nadi dan siklus kerja) terhadap stabilitas flavonoid utama yang biasa
ditemukan dalam jeruk dalam sistem model, dan degradasi yang
sesuai. produk dianalisis. Hasilnya mungkin diharapkan secara
singkat mencerminkan kemungkinan perubahan flavonoid di bawah
perawatan USG dan memberikan beberapa dasar teoritis untuk
aplikasi praktis USG untuk mengekstrak flavonoid dari jeruk.
Bahan dan metode
Bahan kimia
Metanol tingkat HPLC dan asam format dibeli dari Tedia
Company, Inc. (Fairfleld, OH, USA). Etanol dan metanol (tingkat
analitik) dibeli dari Sinopharm Chemical Reagent Co. (Shanghai,
Cina). Air dibeli dari Hangzhou Wahaha Group Co., Ltd. (Hangzhou,
Cina). Eriocitrin, narirutin, neohesperidin, quercitrin, eridictyol,
didymin, quercetin, naringenin, luteolin, sinensetin, nobiletin, dan
tangeretin dibeli dari Sigma (St. Louis, MO, USA). Naringin dan
hesperidin diperoleh dari Institut Nasional untuk Pengendalian
Produk Farmasi dan Biologi (Beijing, Cina). Kemurnian semua
standar melampaui 95%.
Pengobatan USG
Dalam studi ini, enam faktor yang diteliti adalah pelarut (metanol,
80% metanol, etanol, 80% etanol, air), suhu ( 2 5, 5, 25, 45, 65 u C),
intensitas ultrasound (10,19,
15.29, 15.80, 16.31, 20.89, 23.95 W / cm 2), tinggi cairan (2, 4, 6, 8,
10, 12 cm), panjang denyut (0,2, 0,5, 1, 2, 4, 8 dtk) dan siklus kerja
(33,3%, 40%, 50%, 66,7%, 100%). Perawatan AS dilakukan dengan
prosesor ultrasonik probe (JY92-IIDN, Ningbo Scientz Biotechnology
Co., Ningbo, China) dengan parameter berikut: output daya
maksimum AS, 900 W; frekuensi, 20-25 kHz; dan
PLOS ONE | www.plosone.org
Pengaruh US pada Stabilitas 14 Flavonoid
diameter tanduk mikrotip, 10 mm. Larutan flavonoid standar dari
8.0 m g / mL dicampur dalam labu ukur yang sama dan 30 ml
campuran disimpan dalam tabung kaca coklat (diameter 3 cm;
tinggi 10-20 cm). Tabung direndam dalam penangas air bersuhu
rendah (DC-1006, Safe Corporation, Ningbo, China) untuk
mempertahankan suhu yang konstan. Lima pelarut dipilih tidak
hanya karena sering dilaporkan untuk ekstraksi flavonoid, tetapi
juga dapat menyebabkan efek sonokimia yang berbeda. Selain itu,
kami ingin mengetahui apakah kestabilan flavonoid akan
terpengaruh ketika intensitas ultrasonik atau suhu berubah.
Larutan tersebut kemudian diolah oleh US dengan parameter
berikut (kecuali untuk faktor yang diuji): posisi probe, 1 cm dari atas
sel ekstraksi; tinggi cairan (jarak dari microtip tanduk ke dasar
tabung), 4 cm; suhu, 5 u C; mode pulsa: hidup, 2 detik dan mati, 2
detik; waktu perawatan, 20 menit; dan intensitas AS, 15,29 W / cm 2. Sampel
yang diperoleh dengan berdiri di bawah kondisi yang sama
digunakan sebagai kontrol (CK). Sampel yang dirawat dengan
ultrasound (US) dan larutan CK disaring
0.45 m m membran mikrofiltrasi polivinilidena fluorida (Shanghai
Xingya Purification Material Co., Shanghai, Cina) dan kemudian
disimpan pada –18 u C untuk analisis HPLC lebih lanjut.
Perhitungan Intensitas AS
Intensitas ultrasonik yang dipancarkan dari probe mikrotip
dihitung menggunakan rumus berikut [16]:
P.
Saya ~ ð1Þ
p r2
DT
P ~ mC ð2Þ
t
dimana saya adalah intensitas AS (Wcm 2 2), P. adalah daya ultrasonik
yang dikirim ke medium (W), r adalah jari-jari probe mikrotip (cm),
m adalah massa pelarut (Kg), C adalah kapasitas panas jenis (J Kg 2 1 K 2
1), T adalah suhu (K), dan t adalah waktu sonikasi.
Daya ultrasonik aktual yang dihamburkan ke media lebih rendah dari
daya keluaran nominal karena kerugian yang terjadi pada sistem AS.
Jadi, kami mengukur intensitas AS yang sebenarnya pada enam tingkat
yang berbeda dengan metode kalorimetri.
Durasi tertentu (180 detik) dipilih, dan tingkat keluaran daya AS
disesuaikan menjadi 5%, 15%, 25%, 35%, 45%, dan 65% dari total
keluaran daya AS (900 W) untuk mendapatkan intensitas AS yang
sesuai dari 10,19, 15,29, 15,80, 16,31, 20,89, dan
23,95 W / cm 2, masing-masing.
Metode Analisis Flavonoid
Analisis flavonoid ultra-fast liquid chromatography (UFLC)
dilakukan pada sistem LC-20 (Shimadzu) yang dihubungkan ke
instrumen SPD-M20A. A 10 m Larutan sampel diinjeksikan ke dalam
fase terbalik 250 mm 6 4,6 mm, ID 5 m m ZORBAX SB-C18 kolom
(Agilent Technologies, USA). Fase gerak terdiri dari (A) 0,1% asam
format berair dan (B) metanol. Elusi gradien dilakukan sebagai
berikut: 0-20 menit, 37% -50% B; 20–35 menit, 50% –80% B; dan
35-40 menit, 80% -100% B. Termostat kolom disetel ke 25 u C dan laju
aliran 0,7 mL / menit, mirip dengan kondisi yang ditentukan dalam
laporan kami sebelumnya [17]. Panjang gelombang deteksi
ditetapkan 283 nm untuk flavanon, 330 nm untuk flavon, dan 367
nm untuk flavonol.
Semua flavonoid diukur dengan standar eksternal dengan
analisis UFLC. Konsentrasi flavonoid dinyatakan sebagai
2 Februari 2014 | Volume 9 | Edisi 2 | e87766
 Pengaruh US pada Stabilitas 14 Flavonoid

Tabel 1. Pengaruh pelarut pada stabilitas flavonoid yang diolah dengan 14 standing (CK) dan USG (US).

Pelarut Metanol Etanol 80% metanol 80% etanol air

Eriocitrin (CK) 8.11 6 0.15 8.03 6 0,09 7.96 6 0.14 8.13 6 0.10 8.15 6 0.17

(KAMI) 8.07 6 0.18 7.89 6 0.28 7.80 6 0.26 7.81 6 0.25 8.04 6 0.26

Narirutin (CK) 8.09 6 0.17 8.12 6 0.10 8.01 6 0,09 8.10 6 0.14 8.14 6 0,08

(KAMI) 8.04 6 0.11 8.06 6 0.23 7.93 6 0.22 8.02 6 0.15 8.07 6 0.19

Naringin (CK) 8.07 6 0.12 8.03 6 0.16 8.00 6 0.15 8.12 6 0,09 8.16 6 0.16

(KAMI) 8.01 6 0.20 7.95 6 0.26 8.02 6 0.21 8.06 6 0.14 8.13 6 0.17

Hesperidin (CK) 8.13 6 0.17 8.10 6 0.25 7.94 6 0.18 8.07 6 0.10 8.17 6 0,09

(KAMI) 8.04 6 0.23 8.00 6 0.16 7.87 6 0.19 7.98 6 0.25 8.08 6 0.26

Neohesperidin (CK) 8.09 6 0.16 8.12 6 0.10 7.99 6 0,07 8.10 6 0.11 8.12 6 0,08

(KAMI) 8.01 6 0.15 8.05 6 0.18 7.91 6 0.14 8.00 6 0.24 8.05 6 0.16

Quercitrin (CK) 8.00 6 0.18 8.10 6 0.13 7.98 6 0.20 8.06 6 0.19 8.18 6 0.26

(KAMI) 7.89 6 0.24 7.91 6 0.20 7.75 6 0.21 7.91 6 0.26 8.04 6 0.17

Eridictyol (CK) 8.08 6 0,09 8.02 6 0.13 7.95 6 0.17 8.05 6 0.20 8.14 6 0.14

(KAMI) 7.86 6 0.28 7.90 6 0.19 7.64 6 0.23 7.30 6 0.24 8.05 6 0.20

Didymin (CK) 7.96 6 0.10 8.06 6 0.18 7.97 6 0.11 8.11 6 0.17 8.13 6 0.11

(KAMI) 7.81 6 0.24 7.95 6 0.20 7.84 6 0.18 8.02 6 0.28 8.04 6 0.21

Quercetin (CK) 8.08 6 0.17 8.07 6 0.24 8.08 6 0.24 8.12 6 0.16 8.10 6 0.17

(KAMI) 6.46 6 0.21 6.81 6 0.13 7.11 6 0.15 3.54 6 0.30 6.39 6 0.19

Naringenin (CK) 8.03 6 0.18 8.12 6 0.13 8.01 6 0.10 8.08 6 0.16 8.18 6 0.17

(KAMI) 8.00 6 0.16 8.05 6 0.26 7.87 6 0.19 7.97 6 0.21 8.09 6 0.19

Luteolin (CK) 8.05 6 0.17 8.09 6 0.12 8.02 6 0.16 8.10 6 0.18 8.14 6 0.14

(KAMI) 7.94 6 0.22 8.00 6 0.20 7.88 6 0.19 7.65 6 0.18 8.02 6 0.15

Sinensetin (CK) 8.07 6 0.11 8.05 6 0.15 8.03 6 0.14 8.09 6 0.16 8.17 6 0.17

(KAMI) 8.04 6 0.26 8.03 6 0.31 7.92 6 0.18 7.99 6 0.29 8.14 6 0.23

Nobiletin (CK) 8.09 6 0.14 8.07 6 0.17 8.02 6 0.10 8.10 6 0.12 8.13 6 0.19

(KAMI) 8.01 6 0.27 7.98 6 0.31 7.85 6 0.22 8.04 6 0.28 8.05 6 0.15

Tangeretin (CK) 8.13 6 0.11 8.08 6 0.17 8.07 6 0.13 8.16 6 0.10 8.17 6 0.16

(KAMI) 8.02 6 0.18 7.98 6 0.25 7.95 6 0.19 8.05 6 0.27 8.03 6 0.20

doi: 10.1371 / journal.pone.0087766.t001

mikrogram per mililiter volume larutan ( m g / mL). Empat belas
larutan stok standar yang berbeda dengan konsentrasi yang
berbeda-beda telah disiapkan. Persamaan regresi linier diperoleh
dalam rentang 2.0 m g / mL sampai 20 m g / mL menunjukkan R 2 $ 0,996
untuk semua flavonoid yang diukur. Pengulangan analisis intraday
menunjukkan deviasi standar relatif (RSD) # 3% (n = 3). Di antara
flavonoid, hesperidin menunjukkan batas deteksi maksimum pada
0,04 m g / mL, dan narirutin menunjukkan batas minimum kuantitasi
0,05 m g / mL.
Penentuan Produk Degradasi dengan Spektroskopi
FTIR
Kelompok fungsional produk degradasi diperoleh pada 5-25 u C
dianalisis dengan spektroskopi FTIR. Spektrum FTIR produk
degradasi diperoleh dengan instrumen Nicolet Avatar370 (Thermo
Fisher Scientific, USA) pada bilangan gelombang mulai dari 400 cm 2 1
sampai 4000 cm 2 1. Resolusi spektral adalah 1 cm 2 1 dan waktu
pengumpulan kira-kira 1 menit. Analisis puncak dari spektrum FTIR
yang diperoleh dilakukan dengan menggunakan OriginLab 7.5.
Penentuan Produk Degradasi oleh HPLC-UV-ESIMS / MS
Analisis kromatografi cair kinerja tinggi-deteksi
ultraviolet-elektrospray ionisasi tandem spektrometri massa (HPLC-
UV-ESI-MS) dilakukan pada Agilent-6460 Triple Quad LC-MS
dilengkapi dengan sumber ESI. Aliquots dari 10 m L diambil dari
larutan CK dan AS dan disuntikkan langsung ke 100 6 Kolom CAPCELL
PAK C18 MG S3 2.0 mm dengan ukuran partikel 2.9 m m (Shiseido
Co., Jepang). Elusi dilakukan dalam mode gradien menggunakan
dua komponen: A, asam format 0,1% dalam air; dan B, asam format
0,1% dalam asetonitril. Untuk analisis quercetin, gradien adalah 5%
-65% B selama 60 menit. Termostat kolom disetel ke 40 u C dan laju
alir 0,2 mL / menit. Akuisisi dan pemrosesan data dilakukan dengan
menggunakan perangkat lunak Mass Hunter. Spektrum massa ion
negatif dari eluas kolom dicatat dalam kisaran m / z 50–1000. Energi
tumbukan yang berbeda (5, 15, 25, dan 35V) ditetapkan untuk
menentukan ion produk perwakilan dari puncak 1 hingga 8 dalam
mode ESI-MS / MS. Parameter lain ditetapkan sebagai berikut:
fragmentor, 135 V; suhu gas, 325 u C; dan aliran gas, 5 L / menit.
Suhu gas selubung adalah 350 u C, dan aliran gas selubung 11 L /
menit. Tegangan kapiler diatur ke 3500 V untuk mode ion negatif.

PLOS ONE | www.plosone.org 3 Februari 2014 | Volume 9 | Edisi 2 | e87766

 Pengaruh US pada Stabilitas 14 Flavonoid

Gambar 3. Pengaruh intensitas ultrasound pada stabilitas quercetin di bawah

US dan CK. Huruf yang berbeda pada bilah menunjukkan perbedaan yang
Gambar 2. Pengaruh suhu terhadap stabilitas quercetin di bawah US dan CK. Huruf signifikan ( p, 0,05) menurut uji jarak berganda Duncan.
yang berbeda pada bilah menunjukkan perbedaan yang signifikan ( p, 0,05)
menurut uji jarak berganda Duncan. doi: 10.1371 / journal.pone.0087766.g002 doi: 10.1371 / journal.pone.0087766.g003

Sebaliknya, flavonol 3-glikosida, flavon, dan flavanon tetap stabil selama

Analisis statistik sonikasi [13]. Hasil serupa diamati oleh Biesaga et al. [14], yang
Setiap perlakuan diulang tiga kali dan nilai rata-rata dilaporkan melaporkan bahwa jumlah yang lebih tinggi dari gugus hidroksil
sebagai sarana 6 SD. Semua data menjadi sasaran analisis statistik mendorong degradasi flavonoid sedangkan gugus gula dan gugus
menggunakan SPSS 16.0 (SPSS Inc., Chicago, Illinois, USA). metoksil melindungi flavonoid dari degradasi di bawah kondisi AS. Hasil
Pengaruh masing-masing faktor US terhadap stabilitas flavonoid analisis ini menawarkan penjelasan yang mungkin untuk data saat ini,
diuji dengan uji jarak berganda satu arah ANOVA dan Duncan. yang menunjukkan bahwa quercetin terdegradasi menjadi sekitar
Perbedaan rata-rata pada p, 0,05 dianggap signifikan. setengah dari konsentrasi aslinya dalam 80% etanol sedangkan
konsentrasi flavonoid lain, misalnya, hesperidin dan nobiletin, hanya
berubah sedikit dalam pelarut yang sama setelahnya. Perawatan AS.
Hasil dan Diskusi
Hesperidin adalah glikosida flavanon paling melimpah dalam
Pengaruh Pelarut terhadap Stabilitas Flavonoid jeruk. Buah jeruk juga mengandung flavonoid penting lainnya,
Standar flavonoid yang mewakili flavonoid dalam buah jeruk seperti naringin, narirutin, dan eriocitrin. Bioaktivitas jeruk memiliki
dicampur dengan pelarut ekstraksi yang berbeda di bawah AS. Pengaruh flavon polimetoksilasi, seperti nobiletin dan tangeretin
pelarut yang berbeda pada 5 u C, dengan kedalaman probe / tinggi cairan
1 cm / 4 cm, nyala / mati 2/2 s, intensitas AS 15,29 W / cm 2 di bawah
sonikasi dan berdiri selama 20 menit pada stabilitas 14 flavonoid
disajikan pada Tabel 1. Di antara flavonoid, hanya quercetin yang
terdegradasi secara signifikan ( p, 0,05); sisanya tampak cukup stabil
dalam pelarut. Tingkat degradasi quercetin yang diperoleh dari lima
pelarut sangat berbeda (Gbr. 1). Perawatan AS menyebabkan efek
kimiawi yang kuat pada quercetin dalam etanol 80% dan menghasilkan
konsentrasi quercetin terendah di antara semua pelarut yang diperiksa.
Dibandingkan dengan sampel yang tidak diberi perlakuan, konsentrasi
quercetin dalam etanol 80% di bawah AS menurun sebesar 56%.
Konsentrasi kuersetin tertinggi ditemukan di 80% metanol, di mana
hanya 12% kuersetin yang terdegradasi di bawah perlakuan AS.
Stabilitas standar flavonoid dalam sistem model bergantung pada sifat flavonoid
dan pelarut ekstraksi yang digunakan untuk US. Efek sonokimia dapat bervariasi
dalam pelarut yang berbeda. Paniwnyk [12] menemukan bahwa US dalam pelarut air
menghasilkan sejumlah besar radikal hidroksil yang sangat reaktif yang berinteraksi
dengan ekstrak dan menyebabkan degradasi rutin; namun reaksi ini tidak ditemukan
ketika metanol murni digunakan dengan sonikasi selama 60 menit. Flavonoid
memiliki substituen kelompok dan struktur kimia berbeda yang mempengaruhi
stabilitasnya. Seperti yang ditunjukkan dalam publikasi sebelumnya, ketidakstabilan
Gambar 4. Pengaruh ketinggian cairan terhadap stabilitas quercetin di bawah
kelompok 3-hidroksil dalam flavonoid menghasilkan oksidasi aglikon flavonol dan US dan CK. Huruf yang berbeda pada bilah menunjukkan perbedaan yang
7-glikosida mereka; oleh signifikan ( p, 0,05) menurut uji jarak berganda Duncan. doi: 10.1371 /
journal.pone.0087766.g004

PLOS ONE | www.plosone.org 4 Februari 2014 | Volume 9 | Edisi 2 | e87766

 Pengaruh US pada Stabilitas 14 Flavonoid

Gambar 5. Pengaruh panjang pulsa pada stabilitas quercetin di bawah US dan
CK. Huruf yang berbeda pada bilah menunjukkan perbedaan yang signifikan ( p,
0,05) menurut uji jarak berganda Duncan. doi: 10.1371 /
journal.pone.0087766.g005
Gambar 6. Pengaruh duty cycle pada stabilitas quercetin di bawah US dan CK. Huruf
yang berbeda pada bilah menunjukkan perbedaan yang signifikan ( p, 0,05)
menurut uji jarak berganda Duncan. doi: 10.1371 / journal.pone.0087766.g006
bahwa menggunakan suhu yang lebih rendah dengan hasil pengobatan AS

telah sering dilaporkan [2]. Jadi, stabilitas 14 flavonoid ditentukan dalam tingkat degradasi yang lebih tinggi dari standar asam caffeic [25] dan

dalam kondisi AS yang berbeda. Sistem model standar flavonoid oksidasi kalium iodida encer [26].

dikembangkan untuk menyederhanakan studi karena sifat reaksi

kimia dalam kedua sistem ini secara kasar bisa seragam. Kondisi Pengaruh Intensitas AS pada Stabilitas Flavonoid
yang diuji dipilih sesuai dengan kondisi realistis di mana flavonoid Gambar. 3 menunjukkan pengaruh intensitas US pada konsentrasi
umumnya diekstraksi dari jeruk yang dilaporkan oleh publikasi kami quercetin dalam etanol 80%. Pengobatan AS pada 10,19 W / cm2 2 menghasilkan
sebelumnya [18,19] dan penelitian lain [15,20,21]. Lima pelarut konsentrasi tinggi ( p, 0,05) dari quercetin; jumlah flavonoid yang lebih
polar (yaitu, metanol, metanol 80%, etanol, etanol 80%, dan air) rendah diperoleh pada intensitas yang lebih tinggi. Tidak ada perbedaan
yang digunakan dalam penelitian ini adalah umum dalam ekstraksi signifikan dalam konsentrasi quercetin yang diamati pada intensitas US
flavonoid. Namun, quercetin menunjukkan stabilitas terendah di mulai dari 15,29 W / cm2 2 hingga 23,95 W / cm 2. Sementara peningkatan
antara 14 flavonoid selama US dalam etanol 80% dalam percobaan intensitas umumnya menghasilkan peningkatan efek sonokimia [23].
ini. Untuk menyelidiki fenomena khusus ini, Penjelasan yang mungkin untuk ketidaksepakatan ini mungkin terletak
pada kisaran intensitas AS yang diterapkan. Pada intensitas AS yang
rendah, gelembung kavitasi dengan mudah terbentuk, dan gelembung
ini runtuh lebih energik dengan peningkatan daya ultrasonik [27]. Jadi,
meningkatkan intensitas AS membantu promosi
Pengaruh Suhu terhadap Stabilitas Flavonoid
14 flavonoid menjadi sasaran US dalam etanol 80% pada -5,
5, 25, 45, dan 65 u C. Semua standar flavonoid dalam 80% etanol
benar-benar larut pada setiap suhu, dan mereka stabil terhadap
panas pada suhu yang diuji [22]. Suhu tampaknya menjadi faktor
penting ( p, 0,05) yang mempengaruhi stabilitas flavonoid quercetin
dalam etanol 80% (Gbr. 2). Dibandingkan dengan sampel yang tidak
diobati, konsentrasi quercetin di bawah AS berada pada -5 u C, 5 u C,
25 u C, 45 u C dan 65 u C menurun masing-masing 59%, 51%, 16%, 1%
dan 3%. 13 flavonoid lainnya tidak secara dramatis dipengaruhi oleh
suhu dan tetap stabil di bawah kondisi penelitian berikut (data tidak
termasuk). Sementara penurunan yang signifikan dalam jumlah
quercetin diamati karena suhu ekstraksi menurun dari 45 u C sampai
–5 u C. Tidak ada degradasi signifikan dari quercetin yang ditemukan
pada 45 atau 65 u C. Peningkatan suhu memungkinkan kavitasi
dicapai pada intensitas akustik yang lebih rendah [23] sebagai
konsekuensi langsung dari peningkatan tekanan uap yang terjadi
ketika suhu cairan meningkat. Di antara sifat fisik pelarut yang
berbeda (misalnya, tegangan permukaan, viskositas, dan tekanan
uap), tekanan uap menunjukkan pengaruh yang paling signifikan
(korelasi negatif) pada intensitas kavitasi [24]. Dengan demikian,
intensitas kavitasi US menurun dengan meningkatnya suhu. Hasil
Gambar 7. Alur waktu degradasi quercetin di bawah US dan CK pada -5, 5, 15,
yang diperoleh sesuai dengan hasil penelitian sebelumnya, yang dan 25 u C.
diindikasikan doi: 10.1371 / journal.pone.0087766.g007

PLOS ONE | www.plosone.org 5 Februari 2014 | Volume 9 | Edisi 2 | e87766


Gambar 8. Spektrum FT-IR dari kuersetin AS dan CK yang diolah diperoleh
pada bilangan gelombang yang berbeda (cm 2 1) di bawah pada 5 u C. doi:
10.1371 / journal.pone.0087766.g008
efek sonokimia. Ketika daya yang diberikan relatif tinggi, gelembung kavitasi
dapat tumbuh sangat besar dan runtuh dengan lemah. Kehadiran jumlah
gelembung yang berlebihan juga dapat menghambat penyebaran gelombang
AS dan mengurangi efek kavitasi [28]. Dengan demikian, konsentrasi quercetin
dipertahankan lebih baik pada 10,19 W / cm2 2 dibandingkan dengan intensitas
AS yang lebih tinggi.
Pengaruh Tinggi Cairan terhadap Stabilitas Flavonoid
Pengaruh tinggi cairan (jarak dari tanduk mikrotip ke dasar tabung)
terhadap konsentrasi quercetin dalam etanol 80% ditunjukkan pada
Gambar. 4. Degradasi quercetin menurun seiring dengan bertambahnya
ketinggian cairan dari 2 cm menjadi 12 cm ( p, 0,05). Misalnya, hampir
setengah dari quercetin yang tersedia terdegradasi saat ketinggian
cairan 2 cm, sedangkan hanya tiga per delapan quercetin yang
terdegradasi saat ketinggian 12 cm. Hasil ini dikaitkan dengan
penurunan intensitas kavitasi dengan bertambahnya ketinggian karena
redaman gelombang akibat absorpsi dan hamburan.
Gambar 9. Mode ion negatif HPLC-ESI-MS total ion chromatograms AS dan CK yang diberi perlakuan quercetin pada 5 u C. doi: 10.1371 /
journal.pone.0087766.g009
PLOS ONE | www.plosone.org
Pengaruh US pada Stabilitas 14 Flavonoid
Peneliti lain [29] telah melaporkan bahwa kekuatan maksimum ada
di sekitar permukaan tanduk AS yang memancar dan bahwa
intensitas AS menurun agak tiba-tiba seiring dengan meningkatnya
jarak dari permukaan yang memancar. Qiao [10] juga mengamati
penurunan kecil dalam asam caffeic dan asam sinapic karena tinggi
cairan meningkat selama perawatan AS dalam etanol 80%. Namun,
berbeda dengan temuan Qiao, studi lain [9] menemukan bahwa
konsentrasi b- karoten yang diberi AS dalam dikorometana menurun
tajam pada ketinggian mulai dari 2 cm hingga 6 cm dan kemudian
meningkat sedikit pada ketinggian mulai dari 6 cm hingga 12 cm.
Ketidaksepakatan yang diamati antara studi ini mungkin berasal
dari perbedaan koefisien atenuasi dari dua solusi.
Pengaruh Panjang Pulsa terhadap Stabilitas Flavonoid
Stabilitas flavonoid dalam campuran standar selama pengobatan AS
dipelajari pada panjang denyut yang berbeda (semua siklus kerja tetap
pada 50%). Panjang pulsa yang berbeda menyebabkan konsentrasi
quercetin menurun secara signifikan ( p, 0,05). Gambar 5 menunjukkan
bahwa konsentrasi quercetin yang diperoleh pada denyut 0,2 detik
serupa dengan yang diperoleh dalam mode kontinyu. Degradasi
quercetin yang lebih serius terdeteksi ketika larutan dikenai US dengan
pulsa 0,5, 1, 2, 4, dan 8 detik daripada ketika larutan dikenai US terus
menerus. Peningkatan panjang pulsa dari 0,5 detik menjadi 8 detik
dalam mode US berdenyut tidak menghasilkan perbedaan yang
signifikan dalam konsentrasi quercetin.
Dalam penelitian ini, US berdenyut menunjukkan tingkat kemanjuran yang
berbeda dengan panjang denyut dan interval denyut yang bervariasi; dengan
kata lain, aktivitas sonokimia terkadang lebih tinggi dan terkadang serupa
dengan yang diamati di bawah AS yang berkelanjutan. Hasil ini berbeda dari
yang ditemukan dalam studi Gutiérrez [30], yang melaporkan bahwa
keefektifan US berdenyut lebih lemah dibandingkan dengan US yang terus
menerus pada intensitas yang lebih tinggi dan serupa dengan US yang terus
menerus pada intensitas yang lebih rendah. Namun, menurut laporan Sun
[31], efek sonokimia dari US berdenyut lebih ringan daripada US terus
menerus karena panjang denyut meningkat dari
0,1 detik hingga 1 detik dan lebih parah daripada AS kontinu karena panjang
pulsa meningkat dari 1 detik menjadi 9 detik (siklus kerja sampel tetap pada
50%). Variasi dalam durasi dan interval denyut nadi yang diterapkan dapat
menjelaskan pengamatan kami. Pulsa tidak dapat menghasilkan reaksi kimia
segera setelah kontak dan sebagai gantinya membutuhkan beberapa
waktu, dilambangkan sebagai '' waktu aktivasi '' t 1, untuk membentuk gelembung gas a
6 Februari 2014 | Volume 9 | Edisi 2 | e87766
 Pengaruh US pada Stabilitas 14 Flavonoid

Gambar 10. Spektrum ESI-MS / MS dari HPLC puncak 1 sampai 8 diperoleh dari quercetin yang diolah dengan ultrasound dan struktur yang diusulkan dari produk
yang sesuai.
doi: 10.1371 / journal.pone.0087766.g010

ukuran yang cocok. Gelembung-gelembung ini menghilang dalam waktu yang khas,
dilambangkan sebagai '' waktu penonaktifan '' t 2. Jika interval antara
pulsa T mati. t 2, pulsa berikut harus mengaktifkan kembali larutan.
Namun, jika T mati, t 2, denyut berikutnya dapat bekerja pada gelembung yang
dibentuk oleh denyut sebelumnya dan dengan cara ini menjadi lebih kimiawi
efisien. Jika pulsa panjang T di, t 1, tidak ada efek kimiawi yang terjadi [31].
Pengaruh Siklus Tugas terhadap Stabilitas Flavonoid
Pengaruh siklus kerja pada konsentrasi quercetin dalam etanol 80% diselidiki
pada panjang pulsa 2 detik. Siklus kerja menunjukkan persentase waktu denyut
relatif terhadap jumlah waktu denyut mati dan denyut nadi. Gbr. 6 menunjukkan
bahwa duty cycle berbeda di AS menurunkan konsentrasi quercetin secara signifikan
dan quercetin itu terdegradasi lebih sedikit pada duty cycle yang lebih tinggi
daripada duty cycle yang lebih rendah. Pengaruh siklus kerja pada efek kavitasi yang
dilaporkan dalam studi yang berbeda tidak konsisten dengan yang diamati dalam
penelitian ini. Sun dkk. [9] menemukan itu b- karoten menunjukkan a

Meja 2. Identifikasi puncak kromatografi baru (HPLC-UV-254 nm) dari quercetin yang diolah dengan ultrasound.

Puncak HPLC Molekuler

Tidak. Rt (mnt) bobot HPLC-ESI - [MS] -MS 2 ( m / z) Identifikasi tentatif

1 6.5 170 [169.0]: 151.0, 124.9, 107.0 C 7 H 6 HAI 5 Asam 2,4,6-trihydroxybenzoic

2 13.3 318 [316.9]: 298.9, 255.0, 162.9 C 15 H 10 HAI 8 2- (3,4-dihydroxybezoyl) -2,4,6-trihydroxy-3 (2 H) - benzofuranone

3 16.4 196 [195.0]: 136.0, 107.9 C 9 H 8 HAI 5 methyl 3,4-dihydroxyphenylglyoxylate

4 19.5 306 [304.8]: 169.0, 150.9, 124.9 C 14 H 10 HAI 8 2- (3,4-dihydroxybezoyloxy) -4,6-dihydroxy-benzoic acid

5 20.4 364 [363.1]: 345.0, 298.9, 270.9 C 17 H 16 HAI 9 aduk dimethanol dari quercetin

6 25.7 378 [377.1]: 344.8, 331.1, 298.7 C 18 H 18 HAI 9 metanol dan etanol aduk dari quercetin diethanol

7 29.0 392 [391.0]: 345.0, 299.1 C 19 H 20 HAI 9 aduk quercetin

8 38.6 602 [601.1]: 298.9.270.8 C 30 H 18 HAI 14 quercetin dimer

doi: 10.1371 / journal.pone.0087766.t002

PLOS ONE | www.plosone.org 7 Februari 2014 | Volume 9 | Edisi 2 | e87766


Gambar 11. Mekanisme degradasi yang diusulkan dari quercetin dengan perawatan ultrasound.
doi: 10.1371 / journal.pone.0087766.g011
tingkat degradasi maksimum pada siklus kerja 66,7%. Namun, Luque-Garcı́
[32] melaporkan bahwa siklus kerja bukanlah faktor yang signifikan untuk
ekstraksi lemak total dari biji oleaginous. Kami percaya bahwa efek sonokimia
yang buruk dihasilkan dari siklus tugas yang lebih tinggi. Pada siklus tugas
yang lebih tinggi, tersedia waktu terbatas untuk interval denyut guna
melepaskan panas yang terkumpul dalam transduser di bawah AS berdenyut.
Dengan demikian, efek sonokimia terlemah dapat diperoleh di bawah US
kontinyu karena kurangnya waktu di mana panas yang terakumulasi dalam
transduser dapat dilepaskan [31].
Kursus Waktu untuk Degradasi Quercetin di Bawah
Perawatan AS
Eksperimen jalur waktu pada konsentrasi quercetin ( m g /
mL) dilakukan di bawah pengobatan AS pada -5, 5, 15, dan 25 u C (Gbr. 7)
selama 60 menit berdasarkan informasi yang ditunjukkan pada Gbr. 2.
Konsentrasi quercetin umumnya menurun seiring waktu selama
sonikasi. Penurunan tajam quercetin diamati dalam 10 menit pertama
pengobatan AS, setelah itu konsentrasi quercetin menurun perlahan.
Hasil ini dapat dijelaskan oleh fakta bahwa waktu perawatan yang lama
dapat dengan mudah menyebabkan kelelahan instrumen dan
menurunkan efek perawatan AS.
Analisis Produk Degradasi
Spektrum FT-IR quercetin diperlakukan oleh US dari -5 u C sampai
25 u C serupa; dengan demikian, kami hanya menyajikan produk
degradasi quercetin di 5 u C sebagai contoh. Perbedaan spektrum
sampel CK dan US dapat diamati (Gbr. 8). Puncak baru di
2923,58 cm 2 1, sesuai dengan ikatan hidrogen intramolekul, diamati
setelah sonikasi dalam sampel AS. Absorbansi pada
1652,94 (C = O stretching) dan 1614,80 (C = C stretching) cm 2 1
PLOS ONE | www.plosone.org
Pengaruh US pada Stabilitas 14 Flavonoid
menghilang, yang menunjukkan reaksi gugus keton dan ikatan
rangkap tak jenuh. B-ring mungkin telah berubah karena tidak ada
sinyal yang sesuai dapat diamati pada 1557,60 cm 2 1. Hilangnya
puncak pada 1318,04 cm 2 1 dalam spektrum AS juga menunjukkan
reaksi kelompok dihidroksil yang berdekatan di cincin-B setelah
sonikasi [33]. Dari hilangnya getaran CO pada
1244,46 cm 2 1, C-ring heterosiklik quercetin yang menyatu diduga
dihancurkan oleh pengobatan AS.
Beberapa puncak kromatografi baru dalam spektrum HPLC-UV
(254 nm) muncul setelah quercetin dikenakan US. Untuk
mengidentifikasi puncak ini, HPLC-UV-ESI-MS (Gbr. 9) dan ESI-MS /
MS diterapkan (Gbr. 10). Data spektral ESI-MS dan ESI-MS / MS yang
sesuai dari produk degradasi quercetin ditunjukkan pada Tabel 2.
Semua produk telah dilaporkan sebelumnya, dan beberapa berbagi
informasi data massa yang identik. Puncak
1, dielusi pada 6,5 menit, menunjukkan ion kuasi-molekul [MH] 2 di m / z
169.0 dan empat ion produk utama (151.0, 124.9, 107.0, dan 83.1) dari
perwakilan spektrum ESI-MS / MS, yang konsisten dengan standar 2,4, asam
6-trihydroxybenzoic [35]. Dari ion molekul semu [MH] 2 di m / z 316,9, berat
molekul puncak 2 dengan mudah diidentifikasi sebagai 318; puncak ini
diyakini sebagai produk teroksidasi dari quercetin, 2- (3,4-dihydroxybezoyl)
-2,4,6trihydroxy-3 (2 H) - benzofuranon. Turunan benzofuranon ini telah diamati
sebelumnya pada radikal [34] dan oksidasi elektrokimia quercetin [36]. Puncak
3 menghasilkan ion molekuler [MH] 2 di m / z 195.0 dan ion produk utama
(136.0, 107.9). Perbandingan ion-ion ini dengan [M + H] + at m / z 197 diperoleh
oleh CI-MS menunjukkan bahwa puncak 3 mungkin metil
3,4-dihidroksienilglioksilat [34,36]. Produk 4 (Rt 19,5 menit) dengan mudah
diidentifikasi sebagai 2- (3,4-dihydroxybezoyl) -4,6-dihydroxy-benzoic acid
karena menunjukkan ion molekul semu dan fragmen utama
8 Februari 2014 | Volume 9 | Edisi 2 | e87766

ion (304,8, 169,0) identik dengan yang dilaporkan untuk standar sintetis
dalam literatur [36,37]. Kami mengonfirmasi bahwa produk 1
{2,4,6-trihydroxybenzoic acid ([MH] 2 di m / z 169.0)} dihasilkan dari
produk 4 karena spektrum ESI-MS / MS yang serupa dan perubahan
kelimpahan (data tidak ditampilkan) dengan energi tabrakan yang
berbeda. Puncak 5 menghasilkan ion kuasi-molekul [MH] 2 di m / z 363.1
(363 2 301 = 2 * 31), yang dilaporkan sebelumnya sebagai aduk
dimethanol dari quercetin [34]. Ion produk utama di 345.0 secara tak
terduga diamati dalam spektrum MS / MS. Kami mengkonfirmasi bahwa
berat molekul puncak 5 adalah 364 dan percaya itu mungkin merupakan
aduk dimetanol dari quercetin. Berdasarkan ion molekul semu [MH] 2 di m
/ z 377.1 dan dua ion fragmen pada m / z 344.8 dan 331.0, yang
menunjukkan hilangnya satu metanol (377 2 345 = 32) dan satu etanol
(377 2 331 = 46), kami mengidentifikasi produk 6 sebagai produk
tambahan metanol dan etanol dari quercetin [34]. Gambar. 10
menunjukkan bahwa produk 7, dielusi pada 29,0 menit, harus segera
diidentifikasi sebagai aduk diethanol dari quercetin karena
menghasilkan ion kuasi-molekul [MH] 2 di m / z 391.0 (391 2 301 = 2 * 45)
dan ion fragmen pada m / z 345.0 (345 2
301 = 44) dengan membandingkan dengan data dari referensi [34]. Puncak 8 yang
terakhir diamati menunjukkan ion molekuler [MH] 2 di m / z
601.1 dan ion produk kunci pada m / z 298.9. Ion-ion ini menunjukkan
pembentukan dimer yang dihasilkan selama oksidasi quercetin. Namun,
struktur dimer tidak dapat diidentifikasi di antara kemungkinan struktur
produk quercetin yang dilaporkan sebelumnya [34,38,39,40]. Beberapa
puncak tidak teridentifikasi dalam pekerjaan ini. Misalnya, beberapa
puncak (puncak a) tidak dapat diidentifikasi karena respons yang sangat
rendah dalam spektrum ESI-MS. Puncak lainnya (puncak b - g) tidak
teridentifikasi karena merupakan pengotor (, 5%) dibuktikan dengan
kehadirannya di kedua spektrum CK dan US (Gbr. 9).
Dari spektra ESI-MS, ESI-MS / MS, dan FT-IR quercetin dengan dan
tanpa perlakuan AS, reaksi oksidasi, penambahan, polimerisasi, dan
dekomposisi quercetin dapat disimpulkan terjadi secara bersamaan.
Mekanisme degradasi quercetin yang diusulkan di bawah AS
ditunjukkan pada Gambar. 11. Cincin heterosiklik yang menyatu
dari quercetin berfungsi sebagai pusat reaktif untuk semua produk
yang terdeteksi dengan kehilangan atau perolehan substituen yang
menyertai di unit C-ring asli selama sonikasi [13 , 34]. Dalam reaksi
oksidasi, cincin C pyranone dari quercetin diubah menjadi turunan
furanon-karbonil (produk 2). Pertama
Referensi
1. Grotewold E (2006) Ilmu tentang flavonoid. New York: Springer. 1 hal.
2. Xu GH, Ye XQ, Chen JC, Liu DH (2007) Pengaruh perlakuan panas pada senyawa fenolik
dan kapasitas antioksidan ekstrak kulit jeruk. J. Agric. Kimia Makanan 55: 330 2 335.
3. Tripoli E, Guardia ML, Giammanco S, Majo DD, Giammanco M (2007) Flavonoid jeruk:
struktur molekul, aktivitas biologis dan sifat nutrisi: tinjauan. Kimia Makanan 104:
466–479.
4. Zhou J, Zheng XX, Yang Q, Liang ZY, Li DH, dkk. (2013) Optimalisasi ekstraksi dengan
bantuan ultrasonik dan kapasitas pembersihan radikal fenol dan flavonoid dari Clerodendrum
cyrtophyllum Daun Turcz. PloS one 8: e68392. Cao DD, Li H, Yi JY, Zhang JJ, Che HL, dkk.
5. (2011) Sifat antioksidan flavonoid kacang hijau dalam meredakan stres panas. PloS one
6: e21071. Ioannou I, Hafsa I, Hamdi S, Charbonnel C, Ghoul M (2012) Review efek
6. pengolahan makanan dan formulasi pada flavonol dan perilaku antosianin. J Food Eng
111: 208–217.
7. Buchner N, Krumbein A, Rohn S, Kroh LW (2006) Pengaruh pemrosesan termal pada
flavonol rutin dan quercetin. Rapid Commun Mass Sp 20: 3229–3235. Vilkhu K, Mawson
8. R, Simons L, Bates D (2008) Aplikasi dan peluang untuk ekstraksi dengan bantuan
ultrasound dalam tinjauan industri makanan-A. Innov Food Sci Emergency 9: 161–169.
9. Sun YJ, Ma GP, Ye XQ, Kakuda Y, Meng RF (2010) Stabilitas semua- trans- b-
karoten di bawah perlakuan ultrasound dalam sistem model: efek berbagai faktor,
kinetika dan senyawa yang baru terbentuk. Ultrason Sonochem 17: 654–
661.
10. Qiao LP, Ye XQ, Sun YJ, Ying JQ, Shen Y, dkk. (2013) Efek sonokimia pada asam fenolik
bebas di bawah perawatan ultrasound dalam sistem model. Ultrason Sonochem 20:
1017–1025.
PLOS ONE | www.plosone.org
Pengaruh US pada Stabilitas 14 Flavonoid
Hipotesis tentang dekomposisi quercetin pada struktur C-ring yang
dibelah didasarkan pada identifikasi produk 1 dan 3. Munculnya
produk 4 memperkuat gagasan ini, gugus C-ring juga dapat
menjadi tempat reaksi untuk polimerisasi dan penambahan. Dalam
penelitian ini, kami telah menganalisis berat molekul dan kelompok
fungsional produk degradasi quercetin, mendasarkan tugas kami
pada perbandingan spektrum massa dengan laporan literatur.
Karakterisasi independen dengan teknik lain, seperti spektroskopi
NMR, sulit dilakukan karena hasil yang sangat rendah dari beberapa
produk degradasi. Konfirmasi struktur rinci produk ini
direkomendasikan.
Kesimpulan
Untuk menyelidiki efek sonokimia pada flavonoid yang umum
pada buah jeruk dengan perawatan ultrasound, kami menganalisis
stabilitas 14 flavonoid dalam sistem model. Secara khusus, kami
menganalisis efek parameter AS yang berbeda pada degradasi 14
flavonoid, memeriksa waktu reaksi analit, dan mengidentifikasi
produk degradasi quercetin. Hasil penelitian menunjukkan bahwa
13 dari 14 flavonoid (yaitu, eriocitrin, narirutin, neohesperidin,
quercitrin, eridictyol, didymin, naringenin, luteolin, sinensetin,
nobiletin, tangeretin, naringin, dan hesperidin) tetap stabil di bawah
pengobatan AS dan hanya quercetin yang terdegradasi dengan
prosedur. Jenis pelarut dan suhu yang digunakan merupakan faktor
penting dalam menentukan reaksi degradasi flavonoid. Faktor lain,
seperti ketinggian cairan, intensitas AS, panjang denyut nadi, dan
siklus kerja mempengaruhi laju degradasi tetapi bukan sifat
reaksinya. Tingkat degradasi quercetin menurun dengan
meningkatnya suhu. Selama pengobatan quercetin di AS, reaksi
oksidasi, penambahan, polimerisasi, dan dekomposisi tampaknya
terjadi secara bersamaan. Penelitian ini diharapkan dapat
memberikan beberapa informasi yang berguna tentang penerapan
teknik US untuk ekstraksi flavonoid.
Kontribusi Penulis
Merancang dan merancang percobaan: LQ YS XY. Melakukan percobaan: LQ
RC WZ XL. Menganalisis data: LQ YS YF YSH. Reagen / bahan / alat analisis yang
disumbangkan: RC JC XY. Menulis makalah: LQ XY.
11. Iida Y, Tuziuti T, Yasui K, Towata A, Kozuka T (2008) Kontrol viskositas dalam larutan pati
dan polisakarida dengan ultrasound setelah gelatinisasi. Innov Food Sci Emergency 9:
140–146.
12. Paniwnyk L, Beaufoy E, Lorimer JP, Mason TJ (2001) Ekstraksi rutin dari kuncup bunga Sophora
japonica. Ultrason Sonochem 8: 299–301. Robak J, Kisiel W, Wolbi ' M (1991) Oksidasi
13. flavonoid yang diinduksi ultrasound. Jurnal farmakologi dan farmasi Polandia 43:
145–152. Biesaga M, Pyrzynska K (2013) Stabilitas polifenol bioaktif dari madu selama
14. metode ekstraksi yang berbeda. Kimia Makanan 136: 46–54.
15. Biesaga M (2011) Pengaruh metode ekstraksi terhadap stabilitas flavonoid. J Kromatogr
A 1218: 2505–2512.
16. Kiani H, Sun DW, Zhang ZH (2012) Pengaruh iradiasi ultrasound pada laju perpindahan
panas konvektif selama pendinginan perendaman bola stasioner. Ultrason Sonochem
19: 1238–1245.
17. Zhang YM, Zhou ZQ, Sun YJ, Shen Y, Zhong LZ, dkk. (2012) Penentuan simultan 18
flavonoid dalam buah jeruk dengan kromatografi cair kinerja tinggi. Scientia
Agricultura Sinica 45: 3558–3565. (Dalam bahasa Cina).
18. Ma YQ, Ye XQ, Hao YB, Xu GN, Xu GH, dkk. (2008) Ultrasonografi - ekstraksi hesperidin
dari penggan ( Citrus reticulata) kulit. Ultrason Sonochem 15: 227–232.
19. Ma YQ, Ye XQ, Fang ZX, Chen JC, Xu GH, dkk. (2008) Senyawa fenolik dan aktivitas
antioksidan ekstrak dari perlakuan ultrasonik satsuma mandarin ( Jeruk unshiu Marc.)
Kupas. J Agr Food Chem 56: 5682–5690.
20. Khan MK, Abert-Vian M, Fabiano-Tixier AS, Dangles O, Chemat F (2010) Ultrasonografi -
ekstraksi dengan bantuan polifenol (glikosida flavanon) dari jeruk ( Jeruk sinensis L.)
kupas. Food Chem 119: 851–858.
9 Februari 2014 | Volume 9 | Edisi 2 | e87766

21. Londoño-Londoño J, Lima VR, Lara O, Gil A, Pasa TBC, dkk. (2010) Pemulihan bersih
flavonoid antioksidan dari kulit jeruk: mengoptimalkan metode ekstraksi dengan
bantuan ultrasound berair. Kimia Makanan 119: 81–87.
22. Elhamirad AH, Zamanipoor MH (2012) Stabilitas termal beberapa flavonoid dan asam
fenolik dalam olein lemak domba. Eur J Lipid Sci Tech 114: 602–606. Mason TJ, Lorimer
23. JP (2002) Sonokimia Terapan. Weinheim: Wiley-VCH. 57–59.
24. Hemwimol S, Pavasant P, Shotipruk A (2006) Ekstraksi antrakuinon dengan bantuan
USG dari akar Morinda citrifolia. Ultrason Sonochem 13: 543–548. Sun YJ, Qiao LP, Ye
25. XQ, Liu DH, Zhang XZ, dkk. (2013) Sonodegradasi asam caffeic di bawah perawatan
ultrasound: hubungannya dengan stabilitas. Molekul 18: 561–573.
26. Romdhane M, Gourdon C, Casamatta G (1995) Investigasi lokal beberapa perangkat
ultrasonik dengan menggunakan sensor termal. Ultrasonics 33: 221–227. Entezari MH,
27. Nazary SH, Khodaparast MHH (2004) Pengaruh langsung USG pada ekstraksi sirup
kurma dan mikroorganisme nya. Ultrason Sonochem 11: 379–384.
28. Raso J, Manas P, Pagan R, Sala FJ (1999) Pengaruh faktor yang berbeda pada daya
keluaran yang ditransfer ke media oleh USG. Ultrason Sonochem 5: 157–162.
29. Kanthale PM, Gogate PR, Pandit AB, Wilhelm AM (2003) Pemetaan tanduk ultrasonik:
hubungkan efek primer dan sekunder dari USG. Ultrason Sonochem 10: 331–335.
30. Gutiérrez M, Henglein A (1990) Tindakan kimiawi ultrasound berdenyut: Pengamatan
efek intensitas yang belum pernah terjadi sebelumnya. J Phys Chem 94: 3625–3628. Sun
31. YJ, Ye XQ (2013) Peningkatan atau pengurangan aktivitas sonokimia dari pulsed
ultrasound dibandingkan dengan ultrasound kontinyu pada 20 kHz? Molekul 18:
4858–4867.
PLOS ONE | www.plosone.org
Pengaruh US pada Stabilitas 14 Flavonoid
32. Luque-Garcı́a JL, Luque de Castro MD (2004) Ekstraksi soxhlet dengan bantuan
ultrasound: pendekatan ekspeditif untuk pengolahan sampel padat: aplikasi untuk
ekstraksi lemak total dari biji oleaginous. J Kromatogr A 1034: 237–242.
33. Mendoza-Wilson AM, Glossman-Mitnik D (2004) CHIH-DFT penentuan struktur molekul,
spektrum inframerah dan ultraviolet dari kuersetin flavonoid. J Mol Struc-Theochem
681: 71–76.
34. Krishnamachari V, Levine LH, Pare PW (2002) Oksidasi flavonoid oleh generator radikal
AIBN: mekanisme terpadu untuk pembersihan radikal quercetin. J Agr Food Chem 50:
4357–4363.
35. Maini S, Hodgson HL, Krol ES (2012) UVA dan stabilitas flavonoid berair bergantung
pada substitusi cincin-B. J Agr Food Chem 60: 6966–
6976.
36. Zhou A, Sadik OA (2008) Analisis perbandingan oksidasi quercetin dengan teknik
elektrokimia, enzimatik, autoksidasi, dan generasi bebas adikal: studi mekanistik. J
Agric Food Chem 56: 12081–12091.
37. Fahlman BM, Krol ES (2009) Produk oksidasi yang diinduksi radiasi UVA dan UVB dari
quercetin. J Photoch Photobio B 97: 123–131.
38. Ramos FA, Takaishi Y, Shirotori M, Kawaguchi Y, Tsuchiya K, dkk. (2006) Aktivitas
antibakteri dan antioksidan produk oksidasi kuersetin dari bawang kuning ( Allium cepa)
kulit. J Agric Food Chem 54: 3551 2 3557.
39. Gülşen A, Makris DP, Kefalas P (2007) Oksidasi biomimetik quercetin: isolasi
heterodimer quercetin yang terjadi secara alami dan evaluasi sifat antioksidan in vitro.
Food Res Int 40: 7–14.
40. Cherviakovsky EM, Bolibrukh DA, Baranovsky AV, Vlasova TM, Kurchenko VP, dkk. (2006)
Modifikasi oksidatif quercetin oleh hemeprotein. Biochem Bioph Res Co 342: 459–464.
10 Februari 2014 | Volume 9 | Edisi 2 | e87766