Inda Aristika

PERBANDINGAN EFEKTIVITAS ANTIDIABETES EKSTRAK
NON POLAR DAN POLAR DAUN KELAPA SAWIT (Elaeis

Guineensis Jacq.)TERHADAP TIKUS YANG DIINDUKSI
ALOKSAN.
PROPOSAL
OLEH:
INDA ARISTIKA SRI RETNO WULANDARI
NPM 174301080
PROGRAM STUDI SARJANA FARMASI

FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS TJUT NYAK DHIEN
MEDAN
2020
ALOKSAN.
PROPOSAL
Diajukan sebagai salah satu syarat untuk memperoleh gelar Sarjana
Farmasi pada Fakultas Farmasi Universitas Tjut Nyak Dhien
OLEH:
NPM 174301080
PROGRAM STUDI SARJANA FARMASI

FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS TJUT NYAK DHIEN
MEDAN
2020
ii
LEMBAR PENGESAHAN
PROPOSAL

ALOKSAN.
OLEH:
NPM 174301080
Dipertahankan di Hadapan Penguji Proposal Fakultas Farmasi Universitas

Tjut Nyak Dhien pada Tanggal 15 April 2020
Disetujui oleh : Panitia Penguji :

Pembimbing,
Prof. Dr. Nasruddin Noer, M.Eng.Sc Dra. Hj. Juwairiah, M. Si
Ketua Program Studi Sarjana Farmasi,
Apt. Desy Natalia Siahaan, S.Farm., M.Farm.
Medan, 15 April 2020
Disahkan Oleh :
Dekan,
Apt. Yessi Febriani S.Farm., M.Si.
iii
KATA PENGANTAR
Puji dan syukur kehadirat Allah SWT yang Maha Pengasih dan Maha
Penyayang yang telah melimpahkan rahmat, karunia, dan ridhoNya, sehingga
penulis dapat menyelesaikan penulisan proposal yang berjudul “Perbandingan
Efektivitas Antidiabetes Ekstrak Non Polar Dan Polar Daun Kelapa
Sawit (Elaeis Guineensis Jacq.)Terhadap Tikus Yang Diinduksi
Aloksan.”. Proposal ini diajukan sebagai salah satu syarat untuk melaksanakan
tugas akhir Sarjana Farmasi pada Fakultas Farmasi Universitas Tjut Nyak Dhien.
Penulis menyampaikan terima kasih kepada kepada Dekan Fakultas
Farmasi Universitas Tjut Nyak Dhien Apt. Yessi Febriani S.Farm., M.Si. , yang
telah memberikan bantuan dan fasilitas selama masa pendidikan. Bapak Prof. Dr.
Nasruddin Noer, M.Eng.Sc, yang telah membimbing dengan penuh kesabaran,
tulus dan ikhlas selama penulisan proposal ini berlangsung. Ibu Dra. Hj.
Juwairiah, M. Si., selaku dosen penguji yang telah memberikan kritik, saran, dan
arahan kepada penulis dalam menyelesaikan proposal ini. Bapak dan Ibu staf
pengajar Fakultas Farmasi Universitas Tjut Nyak Dhien yang telah mendidik
selama perkuliahan dan Ibu Dr. Nilsya Febrika Zebua, S.Farm., M.Si., Apt.,
selaku penasehat akademik yang memberikan bimbingan dan motivasi kepada
penulis selama masa perkuliahan.
Penulis juga mengucapkan terima kasih dan penghargaan yang tulus
kepada Ibunda tersayang, keluarga tercinta dan teman-teman seperjuangan atas
doa, dukungan, semangat, dan pengorbanan baik moril maupun materil dalam
penyelesaian proposal ini.
iv
Penulis menyadari sepenuhnya bahwa dalam penulisan proposal ini
masih jauh dari kesempurnaan, oleh karena itu dengan segala kerendahan hati,
penulis menerima kritik dan saran demi kesempurnaan proposal ini. Akhir kata
penulis berharap semoga proposal ini bermanfaat bagi ilmu pengetahuan
khususnya dibidang farmasi.
Medan, 15 April 2020

Penulis,
Inda Aristika
NPM. 174301080
PERBANDINGAN EFEKTIVITAS ANTIDIABETES EKSTRAK NON
POLAR DAN POLAR DAUN KELAPA SAWIT (Elaeis guineensis Jacq.)
TERHADAP TIKUS YANG DIINDUKSI ALOKSAN
ABSTRAK
Latar Belakang. Daun kelapa sawit memiliki kandungan metabolit sekunder

yaitu triterpenoid/steroid, alkaloid, flavonoid, saponin, tanin, glikosida serta
karotenoid dan vitamin E yang berpotensi sebagai sumber pengobatan pada
beberapa penyakit degeneratif seperti diabetes, hipertensi dan kardiovaskular.
Tujuan Penelitian. Untuk melakukan karakterisasi metabolit sekunder pada
ekstrak non polar (ENPDKS) dan polar (EPDKS) daun kelapa sawit serta
mengetahui perbandingan efektivitas antidiabetes tiap ekstrak terhadap tikus
hiperglikemia dengan metode induksi aloksan
Metode Penelitian. Simplisia daun kelapa sawit dimaserasi dengan pelarut
heksana untuk menarik senyawa non polar dan pelarut etanol 80% untuk menarik
senyawa polar. Masing–masing ekstrak dilakukan skrinning fitokimia serta
penetapan kadar total karoten dan vitamin E untuk ekstrak heksana (non polar)
dan kadar fenol, flavonoid dan tanin untuk eksrak etanol (polar). Selanjutnya
dilakukan pengujian efektivitas antidiabetes menggunakan metode uji toleransi
glukosa dan metode induksi aloksan dengan variasi dosis 100, 150 dan 200 mg/kg
bb. Kontrol negatif untuk ekstrak non polar digunakan minyak inti sawit, dan
untuk ekstrak polar digunakan Na CMC.
Kata kunci: Elaeis guineensis (Jacq.), daun kelapa sawit, ekstrak non polar,
ekstrak polar, antidiabetes.
vii
ANTIDIABETIC EFFECTIVITY OF NON POLAR AND POLAR
EXTRACTS OF OIL PALM LEAVES (Elaeis guineensis Jacq.) IN
ALLOXAN-INDUCED DIABETIC RATS
ABSTRACT
Background. Oil palm leaves have been known to contain secondary metabolites
such as terpenoids/steroids, alkaloids, flavonoids, saponins, tanins, glycosides,
carotenoids and vitamin E. The active compounds of oil palm leaves has the
potential for the treatment of several degenerative diseases such as diabetes,
hypertension and cardiovascular.
Research purposes. This research was conducted to see the antidiabetic
effectivity of non polar (OPLNPE) and polar (OPLPE) extracts of oil palm leaves
in alloxan-induced diabetic rats.
Research methods. Simplisia of oil palm leaves was macerated by hexane to
obtain non-polar compounds and ethanol 80% solvent to obtain polar compounds.
The oil palm leaves extracts were subject to phytochemical screening and
determination of consentration of bioactive components such as carotenoids and
vitamin E for non polar extract and flavonoids, phenols, tannins for polar extract.
Each of extracts was evaluated for its antidiabetic by glucose tolerance test and
induced by alloxan with varied doses of 100, 150 and 200 mg/kg bw. Palm kernel
oil is used as negative control for non polar extract and Na CMC is used as
negative control for polar extract
Keywords: oil palm leaves, non-polar extract, polar extract, diabetes.
viii
DAFTAR ISI
JUDUL ................................................................................................................... i
LEMBAR PENGESAHAN................................................................................... ii
KATA PENGANTAR.......................................................................................... iv
SURAT PERNYATAAN ORISINALITAS ......................................................... vi
ABSTRAK .......................................................................................................... vii
ABSTRACT ......................................................................................................... viii
DAFTAR ISI ........................................................................................................ ix
DAFTAR TABEL ............................................................................................... xii
DAFTAR GAMBAR ......................................................................................... xiii
DAFTAR LAMPIRAN ...................................................................................... xiv
BAB I. PENDAHULUAN .................................................................................... 1

1.1 Latar Belakang ............................................................................................... 1
1.2 Perumusan Masalah ....................................................................................... 4
1.3 Hipotesis ......................................................................................................... 4
1.4 Tujuan ............................................................................................................ 4
1.5 Manfaat Penelitian ......................................................................................... 5
1.6 Kerangka Penelitian ....................................................................................... 6
BAB II. TINJAUAN PUSTAKA .......................................................................... 7

2.1 Uraian Tumbuhan Kelapa Sawit .................................................................... 7
2.1.1 Sistematika Tumbuhan ................................................................................ 7
2.1.2 Nama Daerah ............................................................................................... 7
2.1.3 Morfologi Tumbuhan................................................................................... 7
2.2 Daun Kelapa Sawit ......................................................................................... 8
2.2.1 Kandungan Kimia ........................................................................................ 8
2.2.2 Khasiat Tumbuhan ....................................................................................... 8
2.3 Ekstraksi ......................................................................................................... 8
2.3.1 Metode dingin .............................................................................................. 9
2.3.2 Metode panas ............................................................................................... 9
2.4 Metabolit Sekunder ...................................................................................... 10
2.4.1 Karotenoid ................................................................................................. 11
2.4.2 Vitamin E ................................................................................................... 11
2.4.3 Alkaloid ..................................................................................................... 12
2.4.4 Flavonoid ................................................................................................... 13
2.4.5 Tanin .......................................................................................................... 14
2.4.6 Fenol .......................................................................................................... 14
2.5 Mekanisme Regulasi Glukosa Darah ........................................................... 15
2.6 Diabetes Melitus........................................................................................... 16
2.6.1 Definisi ...................................................................................................... 16
2.6.2 Klasifikasi .................................................................................................. 16
2.6.3 Komplikasi ................................................................................................. 17
2.7 Manajemen Terapi Diabetes Miletus ........................................................... 18
2.8 Peran Antioksidan Terhadap Diabetes ......................................................... 21
2.9 Metode Induksi Diabetes.............................................................................. 22
ix
BAB III. METODE PENELITIAN..................................................................... 24
3.1 Alat dan Bahan ............................................................................................. 24
3.1.1 Alat ............................................................................................................ 24
3.1.2 Bahan ......................................................................................................... 24
3.2 Pengumpulan dan Pengolahan sampel ......................................................... 25
3.2.1 Pengumpulan sampel ................................................................................. 25
3.2.2 Identifikasi tumbuhan ................................................................................ 25
3.2.3 Pengolahan sampel .................................................................................... 25
3.3 Karakterisasi Simplisia................................................................................. 26
3.3.1 Penetapan kadar air simplisia .................................................................... 26
3.3.2 Penetapan kadar abu total .......................................................................... 27
3.3.3 Penetapan kadar abu yang tidak larut asam ............................................... 27
3.3.4 Penetapan kadar sari yang larut dalam air ................................................. 27
3.3.5 Penetapan kadar sari yang larut dalam etanol ............................................ 28
3.4 Pembuatan Ekstrak Non Polar dan Polar Daun Kelapa Sawit ..................... 28
3.5 Pembuatan Larutan Pereaksi ........................................................................ 29
3.5.1 Pereaksi Asam Nitrat 0,5 N ....................................................................... 29
3.5.2 Pereaksi Asam Sulfat 2 N .......................................................................... 29
3.5.3 Pereaksi Besi (III) Klorida 10% ................................................................ 29
3.5.4 Pereaksi Dragendorff ................................................................................. 29
3.5.5 Pereaksi Bouchardat .................................................................................. 30
3.5.6 Pereaksi Liebermann-bourchard ............................................................... 30
3.5.7 Pereaksi Mayer .......................................................................................... 30
3.5.8 Pereaksi Molisch ........................................................................................ 30
3.5.9 Pereaksi Natrium Hidroksida 2N ............................................................... 30
3.5.10 Pereaksi timbal (II) asetat 0,4 M .............................................................. 31
3.5.11 Pereaksi Asam klorida 2N........................................................................ 31
3.6 Skrining Fitokimia ....................................................................................... 31
3.6.1 Pemeriksaan triterpenoid/steroid ............................................................... 31
3.6.2 Pemeriksaan alkaloid ................................................................................. 32
3.6.3 Pemeriksaan glikosida ............................................................................... 32
3.6.4 Pemeriksaan flavonoid............................................................................... 33
3.6.5 Pemeriksaan saponin ................................................................................. 33
3.6.6 Pemeriksaan tanin ...................................................................................... 33
3.7 Penetapan Kadar........................................................................................... 33
3.7.1 Penetapan kadar senyawa non polar .......................................................... 33
3.7.1.1 Penetapan kadar total karoten ................................................................. 34
3.7.1.2 Penetapan kadar α-tocoferol dan δ-tocoferol .......................................... 34
3.7.2 Penetapan kadar senyawa polar ................................................................. 34
3.7.2.1 Penetapan kadar total fenol ..................................................................... 34
3.7.2.2 Penetapan kadar total flavonoid .............................................................. 35
3.7.2.3 Penetapan kadar total tanin ..................................................................... 35
3.8 Pembuatan Larutan Pengujian Antidiabetes ................................................ 35
3.8.1 Pembuatan larutan aloksan ........................................................................ 36
3.8.2 Pembuatan larutan glukosa 50% ................................................................ 36
3.8.3 Pembuatan larutan Na-CMC 0,5% ............................................................. 36
3.8.4 Pembuatan larutan suspensi glibenklamid 0,45 mg.kg-1BB....................... 36
3.8.5 Pembuatan larutan suspensi metformin 45 mg.kg-1BB ............................. 36
3.8.6 Pembuatan larutan suspensi ekstrak non polar .......................................... 37
x
3.8.7 Pembuatan larutan suspensi ekstrak polar ................................................ 37
3.9 Persiapan Hewan Percobaan ........................................................................ 37
3.10 Pengujian Efek Antidiabetes ....................................................................... 37
3.10.1 Penggunaan blood glucose test meter ...................................................... 37
3.10.2Pengukuran kadar glukosa darah (KGD) .................................................. 38
3.10.3Pengujian toleransi glukosa harian ........................................................... 38
3.10.4Pengujian antidiabetes metode induksi aloksan ........................................ 39
3.11 Analisis data............................................................................................... 40
DAFTAR PUSTAKA ......................................................................................... 51

LAMPIRAN ........................................................................................................ 45
xi
DAFTAR TABEL
3.1 Variasi perlakuan uji toleransi glukosa ........................................................ 38

3.2 Variasi perlakuan pengujian antidiabetes metode induksi aloksa ................ 39
xii
DAFTAR GAMBAR
1.1 Kerangka pikir penelitian ................................................................................ 6

2.1 Struktur senyawa β-karoten........................................................................... 11
2.2 Struktur senyawa α-tokoferol ........................................................................ 12
2.3 Struktur senyawa nikotinamid....................................................................... 12
2.4 Struktur senyawa flavonoid........................................................................... 13
2.5 Struktur senyawa tanin terhidrolisis .............................................................. 14
2.6 Struktur senyawa fenol .................................................................................. 14
xiii
DAFTAR LAMPIRAN
1. Bagan kerja penelitian .................................................................................... 46
2. Bagan Alir Pembuatan Ekstrak Non Polar dan Polar
Daun Kelapa Sawit (Elaeis guineensis Jacq.) ................................................ 47
3. Gambar tumbuhan kelapa sawit (Elaeis guineensis Jacq) .............................. 49
4. Bagan pengerjaan uji toleransi glukosa ......................................................... 50
5. Bagan Pengerjaan uji efek antidiabetes dengan induksi aloksan .................. 51
xiv
BAB I
PENDAHULUAN
1.1 Latar Belakang
Kelapa sawit merupakan salah satu jenis tanaman perkebunan di Indonesia
yang memiliki luas lahan perkebunan sekitar 9,26 juta ha. Pada tahun 2017,
Sumatera Utara merupakan salah satu provinsi yang memiliki luasan hektar
kelapa sawit terbesar kedua yaitu 1,4 juta ha dengan total produksi kelapa sawit
sekitar 5,7 juta ton per tahun (Kementerian Pertanian, 2018). Selama ini kelapa
sawit termasuk penghasil minyak nabati utama di Indonesia. Proses panen buah
kelapa sawit selalu menghasilkan pelepah sawit yang selama ini hanya digunakan
sebagai mulsa di lahan kelapa sawit (Moelyohadi, 2017). Daun kelapa sawit
selama ini digunakan oleh masyarakat sebagai bahan untuk membuat anyaman tas
dan pakan ternak (Tafsin, dkk., 2018). Pemanfaatan daun kelapa sawit baik
sebagai obat secara tradisional maupun pengobatan modern masih belum banyak
berkembang, sehingga pemanfaatannya sangat perlu ditingkatkan mengingat
Indonesia merupakan sumber penghasil kelapa sawit.
Umumnya kandungan kimia tanaman terdiri atas senyawa yang bersifat
non polar dan polar. Pada prosesnya, senyawa-senyawa tersebut perlu dipisahkan
berdasarkan tingkat kepolaran untuk mengetahui secara kualitatif maupun
kuantitatif keberadaanya pada tanaman tersebut. Metode ekstraksi untuk
pemisahan metabolit sekunder menggunakan prinsip kelarutan like dissolve like,
yaitu pelarut polar melarutkan senyawa polar dan pelarut non polar melarutkan
senyawa non polar pemisahan pertama terhadap sampel menggunakan pelarut
heksana dengan tujuan untuk memisahkan senyawa-senyawa non polar termasuk
1
lemak yang terkandung pada sampel, sedangkan senyawa polar akan larut dengan
pelarut polar seperti etanol (Widyawati dkk, 2014).
Berdasarkan pengujian fitokimia secara kualitatif oleh Sasidharan dkk
(2010), ekstrak metanol daun kelapa sawit mengandung senyawa metabolit
sekunder seperti tanin, alkaloid, flavonoid, steroid, saponin, terpenoid.
Kandungan kimia yang begitu kompleks membuat daun kelapa sawit sangat
potensial digunakan sebagai sumber bahan aktif yang dapat berfungsi mengatasi
beberapa penyakit. Beberapa penelitian menyebutkan daun kelapa sawit memiliki
aktivitas antioksidan (Vijayarathna, dkk., 2012), antihipertensi (Jaffri, dkk.,
2011), antibakteri (Chong, dkk., 2008), antidiabetes (Rajavel, dkk., 2012;
Vijayarathna, dkk., 2012) dan stimulan untuk penyembuhan luka (Sasidharan,
dkk., 2010; Hasibuan, 2015).
Penyakit diabetes telah memiliki banyak alternatif pengobatan secara
tradisional, namun terkadang memiliki kendala pada skala produksi atau
ketersediaan tanaman yang kurang. Berdasarkan penelitian Gulfraz dkk (2007),
penderita hiperglikemia memiliki kadar glukosa darah normal puasa pada manusia
80-110 mg/dL dan pada tikus memiliki kadar glukosa darah normal 95-125
mg/dL, sedangkan hipoglikemia bila kadarnya lebih rendah dari 70 mg/dL.
Peningkatan glukosa darah yang tidak normal dapat menyebabkan oksidasi
glukosa yang menghasilkan reactive oxygen species (ROS). Radikal bebas yang
terbentuk tersebut dapat berakibat kerusakan pankreas. Dalam upaya untuk
memperkuat pertahanan jaringan tersebut dari oksidasi, beberapa strategi
termasuk pemberian antioksidan alami (Jain dkk, 2000).
Daun kelapa sawit memiliki kandungan metabolit sekunder yang
kompleks, dimana senyawa-senyawa tersebut bertindak sebagai antioksidan.
2
Penelitian sebelumnya oleh Rosalina dkk (2011), menggunakan ekstrak etanol
daun kelapa sawit yang kaya akan polifenol dengan konsentrasi 100 mg./kg bb
sangat optimum untuk menurunkan tingkat kerusakan hati dan ginjal yang
disebabkan oleh penyakit diabetes, dan menunjukkan efek protektif pada jaringan
yang di induksi oleh streptozotosin (STZ).
Penelitian sebelumnya juga dilakukan oleh Rajavel dkk (2012), dimana
ekstrak polar daun kelapa sawit optimum pada dosis 200 mg/kg bb untuk
mengatasi kerusakan pada ginjal dan hati yang disebabkan oleh oksidasi glukosa.
Berdasarkan penelitian sebelumnya dilakukan oleh Haro (2015), dimana ekstrak
etanol daun kelapa sawit mempunyai efektivitas sebagai antidiabetes dan dosis
200 mg/kg bb memiliki efek yang signifikan dengan metformin, namun pada
penelitian ini tidak secara detail menjelaskan kandungan aktif pada ekstrak non
polar dan polar daun kelapa sawit serta melihat pengaruhnya terhadap kondisi
diabetes.
Berdasarkan hal tersebut, sangat menarik untuk dilakukan penelitian yang
bertujuan untuk melakukan identifikasi dan penetapan kadar kandungan metabolit
sekunder seperti senyawa flavonoid, fenol, tanin, karotenoid, dan vitamin E pada
ekstrak non polar dan polar daun kelapa sawit serta melihat pengaruh variasi dosis
terhadap tikus yang mengalami diabetes.
3
1.2 Rumusan masalah
Berdasarkan latar belakang, maka perumusan masalah pada penelitian ini
adalah:
a. Bagaimanakah karakteristik senyawa metabolit sekunder dari ekstrak daun
kelapa sawit dengan menggunakan pelarut heksana dan etanol?
b. Apakah ekstrak non polar dan polar daun kelapa sawit memiliki efektivitas
sebagai antidiabetes terhadap tikus yang diinduksi aloksan?
c. Berapakah dosis yang efektif dari ekstrak non polar dan polar daun kelapa
sawit dalam menurunkan kadar glukosa darah tikus?
1.3 Hipotesis
Berdasarkan perumusan masalah, maka hipotesis pada penelitian ini adalah:
a. Karakteristik senyawa metabolit sekunder ekstrak heksana menghasilkan
senyawa non polar dan ekstrak etanol menghasilkan senyawa polar.
b. Ekstrak non polar daun kelapa sawit memiliki efektivitas sebagai antidiabetes
terhadap tikus yang diinduksi aloksan.
c. Terdapat pengaruh perbedaan dosis ekstrak non polar dan polar daun kelapa
sawit terhadap penurunan kadar glukosa darah tikus.
1.4 Tujuan penelitian

Berdasarkan hipotesis, maka tujuan penelitian ini adalah:
a. Untuk mengetahui karakteristik kandungan senyawa aktif ekstrak daun kelapa
sawit dengan pelarut heksana dan etanol.
b. Untuk mengetahui efektivitas antidiabetes ekstrak non polar dan polar daun
kelapa aswit terhadap tikus yang diinduksi aloksan.
4
c. Untuk mengetahui pengaruh variasi dosis ekstrak non polar dan polar daun
kelapa sawit terhadap penurunan kadar glukosa darah tikus..
1.5 Manfaat Penelitian
Penelitian ini bermanfaat untuk mengembangkan produk hilir kelapa sawit
dari biomasa daun kelapa sawit yang saat ini hanya dijadikan sebagai mulsa di
kebun kelapa sawit. Daun kelapa sawit dimanfaatkan sebagi sumber bahan aktif
dengan senyawa metabolit sekunder yang beragam yang berfungsi untuk
meningkatkan kesehatan.
5
1.6 Kerangka Penelitian
Variabel Bebas Variabel Terikat Parameter
Daun Kelapa • Kadar air

Sawit Karakteristik • Kadar sari larut air
Simplisia • Kadar sari larut
etanol
Simplisia Daun • Kadar abu total
Kelapa Sawit • Kadar abu tidak
Golongan senyawa larut asam
metabolit sekunder
• Steroid/Triterpenoi
Ekstrak Daun Kelapa d
Sawit; • Alkaloid
i. Non Polar Golongan senyawa • Flavonoid
ii. Polar metabolit sekunder • Glikosida
• Tanin
Kadar senyawa i. Ekstrak non polar

ENPDKS dan
EPDKS dosis metabolit sekunder
• Vitamin E
100, 150 dan
200 mg/kg bb, ii. Ekstrak polar
Na CMC 0,5%, • Total

Glukosa
Minyak Inti Flavonoid
50%
Penurunan KGD tikus

Tikus diukur pada menit ke-
Normal 30, 60, 90, dan 120
Kadar
Induksi Aloksan Glukosa
Darah
Penurunan KGD tikus
Tikus
ENPDKS dan diukur pada hari ke-
4,8,12,16, 20, 24, dan 28
EPDKS dosis
100, 150 dan
200 mg/kg bb,
Na CMC 0,5%,
Minyak Inti
6
BAB II
TINJAUAN PUSTAKA
2.1 Uraian Tumbuhan Kelapa Sawit
2.1.1 Sistematika Tumbuhan
Berdasarkan Corley and Tinker (2016), sistematika tumbuhan adalah
sebagai berikut :
Kingdom : Plantae
Divisi : Spermatophyta
Sub divisi : Angiospermae
Kelas : Monocotyledoneae
Ordo : Arecales
Famili : Arecaceae
Genus : Elaeis
Spesies : Elaeis guineensis Jacq.
Nama lokal : Kelapa sawit
2.1.2 Nama Daerah
Kelapa sawit memiliki nama lain seperti Afrikaanse oliepalm (Belanda),
oelpalame (Jerman), oil palm (Inggris), kelapa bali (Melayu), salak minyak
(Sunda), dan kelapa sawit (Jawa) (Duke, 2008).
2.1.3 Morfologi Tumbuhan
Kelapa sawit merupakan tanaman monokotil, yaitu batangnya tidak
mempunyai kambium dan tidak bercabang, batang berfungsi sebagai penyangga,
menyimpan dan mengangkut makanan, tingginya mencapai 30. Tanaman kelapa
sawit berakar serabut. Akarnya sangat kuat karena tumbuh ke bawah dan ke
7
samping. Akar tanaman kelapa sawit berfungsi sebagai penyerap unsur hara
dalam tanah dan respirasi tanaman. (Corley dan Tinker, 2016).
2.2 Daun Kelapa Sawit

Daun kelapa sawit mirip dengan daun kelapa yaitu membentuk susunan
daun majemuk, bersirip genap dan bertulang sejajar. Daun-daun membentuk satu
pelepah yang panjangnya mencapai lebih dari 7,5-9 m. Jumlah anak daun di setiap
pelepah berkisar antara 250-400 helai. Daun kelapa sawit yang sehat dan segar
berwarna hijau tua (Fauzi, dkk, 2008).
2.2.1 Kandungan kimia

Daun kelapa sawit mengandung senyawa alkaloid, flavonoid, glikosida,
saponin, steroid/triterpenoid dan tanin (Bate’e, 2013; Yin, dkk., 2013)
2.2.2 Khasiat tumbuhan
Kelapa sawit mempunyai khasiat sebagai penyembuhan luka sayat
(Sasidharan, dkk., 2010; Hasibuan, 2015), antiinflamasi (Anyanji, dkk., 2013),
antihipertensi (Jaffri, dkk., 2011), antibakteri (Chong, dkk., 2008; Yin, dkk.,
2013), antikanker (Owoyele dan Gbenga, 2014), antioksidan (Mohamed, 2014)
dan hepatoprotektor (Sasidharan, dkk., 2012).
2.3 Ekstraksi
Ekstraksi adalah proses pemisahan kandungan senyawa kimia dari
jaringan tumbuhan maupun hewan. Sebelum ekstraksi dilakukan bahan
dikeringkan dahulu dengan tingkat kadar air < 10% untuk menjaga simplisia tidak
mudah terkontaminasi jamur, lalu dihaluskan pada derajat kehalusan tertentu
(Harborne, 1987). Beberapa cara metode ekstraksi yaitu metode dingin dan
metode panas.
8
2.3.1 Metode dingin
1. Maserasi
Maserasi merupakan cara penyarian yang sederhana dengan cara
merendam serbuk simplisia dalam cairan penyari pada wadah yang terlindung dari
cahaya. Cairan penyari akan menembus dinding sel dan masuk ke rongga sel yang
dapat melarutkan bahan aktif.. Bejana ditutup rapat kemudian dikocok sehingga
memungkinkan pelarut masuk ke seluruh permukaan simplisia (Ansel, 1989).
Rendaman tersebut disimpan terlindung dari cahaya langsung (mencegah
reaksi yang dikatalisis oleh cahaya atau perubahan warna). Waktu maserasi
umumnya 5 hari, setelah waktu tersebut keseimbangan antara bahan yang
diekstraksi pada bagian dalam sel dengan luar sel telah tercapai. Proses
pengadukan menyebabkan keseimbangan konsentrasi bahan ekstraksi lebih cepat
dalam cairan. Keuntungan dari proses maserasi adalah cara pengerjaan yang
mudah dan dapat dilakukan dengan peralatan yang sederhana (Depkes RI, 1986).
2. Perkolasi
Perkolasi adalah cara penyarian yang dilakukan dengan mengalirkan
cairan penyari melalui serbuk simplisia yang telah dibasahi. Alat yang digunakan
untuk perkolasi disebut perkolator dengan menggunakan cairan penyari sehingga
larutan zat aktif dapat keluar dari perkolator, sedangkan sisa setelah dilakukannya
penyarian disebut ampas atau sisa perkolasi. Keuntungan dari proses perkolasi
dalah tidak membutuhkan cairan penyari yang banyak (Depkes RI, 1986).
2.3.2 Metode panas
1. Refluks
Refluks adalah ekstraksi dengan pelarut pada titik didih pelarut yang telah
ditetapkan dengan waktu tertentu dan jumlah yang terbatas. Umumnya dilakukan
9
pengulangan proses pada residu pertama 3-5 kali sehingga ekstraksi dapat
berlangsung sempurna (Depkes RI, 1986).
2. Soxhletasi
Soxhletasi adalah ekstraksi menggunakan pelarut yang mengalir sehingga
dapat dinyatakan sebagai jenis ekstraksi yang menggunakan pelarut baru dengan
menggunakan alat soxhlet yang sampelnya dibungkus dengan kertas saring
sehingga terjadi proses ekstraksi kontinu dengan jumlah pelarut relatif konstan
dengan adanya pendingin balik (Depkes RI, 1986).
3. Digesti
Digesti adalah cara maserasi dengan menggunakan pemanasan lemah,
yaitu pada suhu 40 - 50°C. Cara maserasi ini hanya dapat dilakukan untuk
simplisia yang zat aktifnya tahan terhadap pemanasan (Depkes RI, 1986).
4. Infundasi
Infundasi adalah proses penyarian yang umumnya digunakan untuk
menyari zat kandungan aktif yang larut dalam air dari bahan nabati. Infus adalah
sediaan cair yang dibuat dengan menyari simplisia dengan air pada suhu 90°C
selama 15 menit (Depkes RI, 1986).
a. Dekoktasi
Dekoktasi adalah infundasi pada waktu yang lebih lama (> 30 menit) dan
temperatur sampai titik didih air (Depkes RI, 1986).
2.4 Metabolit Sekunder
Metabolit sekunder adalah senyawa yang disintesis oleh tumbuhan,
mikroba atau hewan melewati proses biosintesis yang digunakan untuk
menunjang kehidupan namun tidak vital (jika tidak ada tidak mati) sebagaimana
gula, asam amino dan asam lemak. Metabolit ini memiliki aktifitas farmakologi
10
dan biologi (Saifudin,2014). Beberapa metabolit sekunder yang sangat sering
ditemukan dalam tanaman seperti karoten, tokoferol, alkaloid, tannin, dan
flavonoid. (Hussein, and El-Anssary, 2018).
2.4.1 Karoten
Karoten adalah kelas tetraterpenoid yang terjadi secara alami pada
tanaman, ganggang dan bakteri. Buah-buahan dan sayuran adalah sumber utama
karoten dalam makanan manusia. Karoten berwarna merah, oranye dan kuning
dan merupakan sumber warna-warna cerah seperti pada labu, ubi jalar, blewah,
pepaya dan tomat. Sayuran hijau seperti bayam juga merupakan sumber utama
karoten dalam tubuh. Mereka tidak tampak merah, oranye, atau kuning karena
pigmen karoten ditutupi oleh kandungan klorofil yang tinggi. Asupan karoten
yang tinggi dapat bertindak sebagai agen pencegahan kanker karena mengandung
antioksidan yang menghambat spesies oksigen dan nitrogen reaktif untuk merusak
tubuh (Rao and Rao, 2007).
Gambar 2.1 Struktur senyawa β-Karoten (Singab and Eldahshan, 2013)
2.4.2 Vitamin E
Vitamin E adalah salah satu dari 13 vitamin yang penting bagi tubuh.
Hingga saat ini, enam senyawa organik alami yang termasuk dalam keluarga
kimia dari tocochromanol adalah empat senyawa merupakan turunan tokoferol
dan dua senyawa merupakan turunan tokotrienol. Sumber dari alam yang dapat
dimakan, terutama minyak dan biji, merupakan sumber utama vitamin E dalam
11
makanan manusia. Meskipun sudah terdapat banyak pada makanan, namun telah
diketahui populasi manusia tidak mengkonsumsi vitamin E, bahkan menderita
defisiensi vitamin E ringan hingga berat. Tocochromanol sebagian besar
diproduksi oleh tanaman, ganggang, dan beberapa cyanobacteria. Metabolisme
tocochromanol telah banyak dipelajari pada tanaman tingkat tinggi yang
menghasilkan tokoferol, tokotrienol, plastochromanol-8, dan tocomonoenols
(Mène-Saffrané, 2017). Bentuk vitamin E paling aktif α-tokoferol adalah suatu
antioksidan yang melindungi sel-sel tubuh terhadap kerusakan oleh senyawa
kimia reaktif yang dikenal sebagai radikal bebas ( Garrow dan James, 1993).
Vitamin E atau α tokoferol merupakan antioksidan yang larut dalam lemak.
Sebagai antioksidan vitamin E berfungsi sebagai donor ion hidrogen yang mampu
merubah radikal peroksil (hasil peroksida lipid), menjadi radikal tokoferol yang
kurang reaktif, sehingga tidak mampu merusak rantai asam lemak (Winarsi,
2011).
Gambar 2.2 Struktur senyawa α-tokoferol
2.4.3 Alkaloid
Alkaloid pada umumnya mencangkup senyawa bersifat basa yang
mengandung satu atau lebih atom nitrogen, biasanya dalam gabungan, sebagai
bagian dari sistem siklik (Harborne, 1987). Alkaloid biasanya tanpa warna,
seringkali bersifat optis aktif, kebanyakan berbentuk kristal tetapi hanya sedikit
yang berupa cairan pada suhu kamar (Funayama and Cordell, 2015). Alkaloid
merupakan turunan yang paling umum dari asam amino. Secara kimia, alkaloid
12
merupakan suatu golongan heterogen. Secara fisik, alkaloid dipisahkan dari
kandungan tumbuhan lainnya sebagai garamnya dan sering diisolasi sebagai
kristal hidroklorida atau pikrat (Harborne, 1987).
2.4.4 Flavonoid
Flavonoid adalah senyawa kimia yang tersebar luas di seluruh bagian
tumbuhan seperti pada korteks, akar, daun, bunga dan buah-buahan. Selain
berperan sebagai fotoproteksi dan juga berperan sebagai kontribusi warna pada
tanaman. Flavonoid juga telah banyak digunakan dalam pengobatan tradisional
selama beberapa abad dan sudah diakui sebagai polifenol tanaman yang dapat
bersifat sebagai antioksidan yang sangat kuat. Mengingat struktur polifenol yang
pada flavonoid, kemampuan menyumbang elektron dan hidrogen terhadap radikal
bebas adalah fitur utama dari sifat antioksidan (Weber., dkk, 2009). Salah satu
contoh dari dari senyawa flavonoid adalah katekin yang juga terdapat di daun
kelapa sawit (Jaffri dkk., 2011).
Gambar 2.3 Struktur senyawa katekin (Weber., dkk, 2009).
Efek flavonoid terhadap macam-macam organisme sangat banyak
macamnya dan dapat menjelaskan mengapa tumbuhan yang mengandung
flavonoid dipakai dalam pengobatan tradisional. Aktivitas antioksidan flavonoid
tertentu merupakan komponen aktif tumbuhan yang digunakan secara tradisional
untuk mengatasi gangguan fungsi hati. Flavonoid tertentu dalam makanan
13
tampaknya menurunkan agregasi platelet dan dengan demikian mengurangi
pembekuan darah, tetapi jika dipakai pada kulit, flavonoid menghambat
pendarahan (Robinson, 1995).
2.4.5 Tanin
Tanin adalah senyawa metabolit sekunder yang terdapat pada beberapa
tanaman. Tanin mampu mengikat protein, sehingga protein pada tanaman dapat
resisten terhadap degradasi oleh enzim protease di dalam silo ataupun rumen
(Kondo, dkk., 2014). Tanin merupakan senyawa kimia yang tergolong dalam
senyawa polifenol (Givens, dkk., 2010).
Gambar 2.4 Struktur asam tanat.
2.4.6 Fenol
Senyawa fenolik merupakan salah satu kelompok metabolit sekunder
terbesar pada tanaman yang disintesis pada buah, sayur-sayuran, tanaman teh,
coklat, dan tanaman lainnya. Senyawa tersebut dapat digolongkan sebagai
senyawa antioksidan, antiinflamasi, dan sifat biologis lainnya, dan dapat bertindak
sebagai penghambat stress oksidatif (Dai dan Mumper, 2010). Fenol sederhana
memiliki sifat bakterisidal, antiseptik, dan antelmintik. Pada beberapa penelitian
fenol digunakan sebagai pembanding agen mikroba (Park, dkk., 2001).
14
Gambar 2.5 Struktur asam galat.
2.5 Mekanisme Regulasi Glukosa Darah
Pelepasan insulin dirangsang oleh zat eksogen dan endogen. Glukosa
merupakan zat eksogen yang menentukan fungsi utama sel beta dalam mensintesis
dan melepaskan insulin. Glukosa yang berada di aliran darah memasuki sel beta
oleh GLUT2, mengalami fosforilasi oleh glukokinase menjadi glukosa-6-fosfat
menghasilkan ATP. Jumlah ATP yang meningkat menghambat aktivitas kanal
ATP-sensitif K+, sehingga K+ yang masuk kedalam sel berkurang. Penurunan ini
mendepolarisasi membran plasma sel beta sehingga kanal kalsium terbuka dan
masuk menstimulasi pelepasan insulin oleh sel beta pankreas (Soares, dkk., 2017).
Insulin berikatan dengan reseptornya di permukaan sel, untuk pengaturan
homeostasis glukosa. Reseptor insulin merupakan glikoprotein transmembran
terdiri dari dua subunit α dan β. Interaksi insulin dan reseptor menghasilkan sinyal
untuk mengaktifasi jalur anabolik dan menghambat proses katabolik. Transport
glukosa kedalam sel otot rangka dan jaringan adiposa diperantai GLUT4. Insulin
juga meningkatkan pemasukan glukosa ke dalam hati dengan memicu
glukokinase, sehingga kadar glukosa tetap rendah dan mempermudah masuknya
glukosa ke dalam sel (Ganong, 2005). Sejumlah besar glukosa diproduksi oleh
hati, sebagian untuk metabolisme glukosa di otak, sisanya diambil beberapa
15
jaringan terutama otot dan sebagian kecil untuk jaringan adiposa pada keadaan
puasa (Ganong, 2005).
2.6 Diabetes Melitus

2.6.1 Definisi
Diabetes melitus adalah suatu gangguan kesehatan berupa kumpulan
gejala yang timbul pada seseorang yang disebabkan oleh peningkatan kadar gula
dalam darah akibat kekurangan insulin ataupun resistensi insulin dan gangguan
metabolik pada umumnya. Penyakit diabetes akan menimbulkan berbagai
komplikasi baik yang akut maupun yang kronis atau menahun apabila tidak
dikendalikan dengan baik. Diabetes merupakan salah satu penyakit degeneratif
yang tidak dapat disembuhkan tetapi dapat dikendalikan (Isniati, 2007).
2.6.2 Klasifikasi
Klasifikasi DM berdasarkan patologi meliputi:
A. Diabetes tipe 1
DM tipe 1 disebut sebagai Insulin Dependent Diabetes Melitus (IDDM). Pada
diabetes melitus tipe 1 terdapat destruksi sel-sel beta pankreas, sehingga tidak
memproduksi insulin lagi dengan akibat sel-sel tidak bisa menyerap glukosa dan
glukosa akan tetap berada di dalam pembuluh darah. Penderita tipe ini umumnya
timbul pada masa kanak-kanak (Katzung, 1995).
B. Diabetes tipe 2
DM tipe 2 atau disebut juga sebagai Non-Insulin Dependent Diabetes
Melitus (NIDDM) atau adult-onset diabetes, umumnya terjadi pada orang dewasa
dengan umur lebih 40 tahun, namun terkadang ditemukan pada remaja. Secara
patofisiologi, DM tipe II disebabkan karena dua hal yaitu (1) penurunan respon
16
jaringan perider terhadap insulin atau yang sering disebut dengan resistensi
insulin dan (2) penurunan kemampuan sel beta pankreas untuk menseksresi
insulin sebagai respon terhadap beban glukosa (Nugroho, 2006).
DM tipe II sebagian besar diawali dengan kegemukan karena kelebihan
makan. Sebagai konpensasi sel beta pankreas memberikan respon dengan cara
mensekresi insulin lebih banyak lagi sehingga kadar insulin menjadi meningkat
(hiperinsulinemia). Konsentrasi insulin yang tinggi dapat mengakibatkan reseptor
insulin berupaya untuk melakukan pengaturan sendiri dengan menurunkan jumlah
reseptor. Hal ini dapat membawa dampak pada penurunan respon pada
reseptornya dan lebih lanjut mengakibatkan terjadinya resistensi insulin. Pada
resistensi insulin terjadi penurunan penggunaan glukosa sehingga mengakibatkan
peningkatan kadar glukosa darah (hiperglikemik). (Nugroho, 2006).
C. Diabetes gestasional
Diabetes gestasional merupakan diabetes dengan intoleransi glukosa yang
terjadi selama masa kehamilan menyebabkan kacacatan dan kematian prenatal.
DM ini dapat disembuhkan tetapi membutuhkan pengawasan medis selama
kehamilan (Talaviya, dkk., 2014).
D. Diabetes tipe lain
Diabetes tipe lain dapat terjadi akibat adanya kelainan-kelainan genetik
pada fungsi sel beta pankreas, kelainan pada insulin, terjadinya infeksi,
pankreatitis, pankreatomi, obat-obat dan juga kelainan genetik lainnya (Ndraha,
2014).
2.6.3 Komplikasi
Komplikasi DM terbagi atas komplikasi akut dan komplikasi kronik.
A. Komplikasi Diabetes Melitus Akut
17
Komplikasi diabetes melitus dapat muncul secara akut (mendadak).
Komplikasi akut yang sering terjadi adalah:
i. Reaksi hipoglikemik, gejala yang timbul akibat tubuh kekurangan
glukosa yaitu kurang dari 50 mg/dl.
ii. Diabetes ketoasidosis (DKA), pasien biasanya mengalami gejala mual,
muntah, rasa nyeri yang hebat pada bagian perut, dan bahkan terjadi panKreatitis
(Ndraha, 2014).
B. Komplikasi Diabetes Melitus Kronik
Komplikasi diabetes melitus secara kronik (menahun), yaitu timbul
beberapa bulan atau beberapa tahun sesudah mengidap penyakit diabetes melitus.
Komplikasi kronik pada dasarnya terjadi pada semua pembuluh darah di seluruh
bagian tubuh, dibagi menjadi dua yaitu makrovaskuler dan mikrovaskuler.
Mikrovaskuler yaitu pada ginjal dan mata. Makrovaskuler yaitu pada jantung
koroner, pembuluh darah kaki dan pembuluh darah otak (Ndraha, 2014).
2.7 Manajemen Terapi Diabetes Melitus
Penatalaksanaan pasien diabetes melitus dikenal 4 pilar penting dalam
mengontrol perjalanan penyakit dan komplikasi. Empat pilar tersebut adalah
edukasi, terapi nutrisi, aktifitas fisik dan farmakologi. Edukasi yang diberikan
adalah pemahaman tentang perjalanan penyakit, pentingnya pengendalian
penyakit, komplikasi yang timbul dan resikonya, pentingnya intervensi obat dan
pemantauan glukosa darah, cara mengatasi hipoglikemia, perlunya latihan fisik
yang teratur, dan cara mempergunakan fasilitas kesehatan. Mendidik pasien
bertujuan agar pasien dapat mengontrol gula darah, mengurangi komplikasi dan
meningkatkan kemampuan merawat diri sendiri. Intervensi gizi yang bertujuan
18
untuk menurunkan berat badan, perbaikan kadar glukosa dan lemak darah pada
pasien yang gemuk dengan DM tipe 2 mempunyai pengaruh positif pada
morbiditas. Kegiatan jasmani sehari hari dan latihan jasmani secara teratur (3 - 4
kali seminggu selama kurang lebih 30 menit), merupakan salah satu pilar dalam
pengelolaan DM tipe 2 (Soares, dkk., 2017).
Secara farmakologi yaitu dengan cara pemberian obat-obatan dan
pemberian insulin.
A. Terapi Insulin
Insulin adalah hormon yang mengubah glukosa menjadi glikogen, dan
berfungsi mengatur kadar glukosa darah bersama hormon glukagon. Kekurangan
insulin karena kelainan genetik pada pankreas, menyebabkan seseorang menderita
diabetes melitus atau disebut dengan kencing manis baik tipe 1 (DMT1) di mana
pankreas tidak memproduksi insulin maupun tipe 2 (DMT2) di mana terjadi
gangguan sekresi maupun resistensi insulin, yang berdampak sangat luas terhadap
kesehatan, mulai kelainan jantung, ginjal, mata (kebutaan) hingga impotensi.
Terapi insulin wajib diberikan pada penderita DM I dan penderita DM II,
sekitar 40 persenya juga menjalani terapi insulin. Mekanisme kerja insulin dalam
menurunkan kadar glukosa darah dengan merangsang pengambilan glukosa
perifer dan menghambat produksi glukosa hepatik. Insulin dimetabolisme di hati,
ginjal dan otot (Soares, dkk., 2017).
Prinsip terapi insulin:
i. Pasien DM tipe 1 memerlukan insulin eksogen karena produksi insulin
endogen oleh sel-sel beta tidak ada.
ii. Pasien DM tipe 2, bila terapi lain tidak dapat mengendalikan kadar glukosa
darah.
19
iii. Keadaan stress berat, yaitu infeksi, pembedahan atau sroke.
iv. Diabetes melitus gestasional.
v. Ketoasidosis diabetik.
vi. Gangguan fungsi ginjal atau hati yang berat.
vii. Kontra indikasi atau alergi terdapat obat hipoglikemik oral.
B. Obat Antidiabetik Oral (ADO)
1. Golongan Sulfonilurea dikenal 2 generasi sulfonilurea, generasi 1 terdiri
dari tolbutamid, tolazamid, asetoheksimid dan klorpropamid, generasi 2
yang potensi hipoglikemik lebih besar adalah gliburid (glibenklamid),
glipizid, gliklazid dan glimepirid. Mekanisme kerjanya merangsang sekresi
insulin dari granul sel-sel β Langerhans pankreas (Soares, dkk., 2017).
2. Biguanida memiliki mekanisme kerja obat dengan aktifasi kinase pada otot
skelet dan adiposit merangsang translokasi GLUT4 sehingga menyebabkan
peningkatan transport glukosa ke dalam sel. Metformin sering menjadi
pilihan utama dalam penanganan pasien diabetes tipe 2 obesitas, karena
tidak menyebabkan peningkatan berat badan (Soares, dkk., 2017).
3. Tiazolidinedion (misalnya: rosiglitazon dan pioglitazon) Golongan obat
yang baru, menurunkan kadar glukosa darah dengan meningkatkan
sensitifitas insulin (insulin sensitizers) (Soares, dkk., 2017).
4. Penghambat α-Glukosidase (misalnya: akarbose dan miglitol). Obat -
obatan golongan ini bekerja dengan menghambat kerja enzim alfa-
glukosidase di saluran pencernaan, sehingga reaksi penguraian
polisakarida menjadi monosakarida terhambat dan memperkecil
peningkatan konsentrasi glukosa darah setelah makan (Soares, dkk., 2017).
20
5. Mimetik inkretin: Mekanisme kerja obat menyerupai efek hormon
inkretin endogen, yang mampu merangsang sekresi insulin dan
menghambat pelepasan glukagon sehingga terjadi penurunan kadar
glukosa darah. Obat golongan ini bekerja sebagai analog GLP-1 (glucagon
like peptide) dan dalam bentuk suntikan (Soares, dkk., 2017).
6. Penghambat DPP-4 (dipeptidylpeptidase-4 blockers). Obat ini
meningkatkan konsentrasi GLP-1 dalam darah dengan menghambat
degradasinya oleh DPP-4. Misalnya: sitagliptin, vitagliptin, saxagliptin
(Soares, dkk., 2017).
2.8 Peran Antioksidan Terhadap Diabetes
Dalam tubuh, peningkatan asam lemak bebas dan glukosa berlebih di
dalam darah juga dapat menyebabkan peningkatan produksi reactive species
oxidative (ROS). Meskipun mekanisme pertahanan sel intraseluler tubuh mencoba
mengatasi peningkatan kadar ROS, namun kelebihan ROS merusak fungsi
fisiologis biomolekul serta mempengaruhi viabilitas dan funsgsional sel. Pulau
Langerhans memiliki pertahanan yang buruk dan juga tidak mampu memperbaiki
DNA yang rusak akibat ROS secara efisien dibandingkan dengan jaringan
lainnya. Kerusakan jaringan tersebut berdampak pada penurunan sekresi insulin
yang secara fisiologi dapat menyebabkan peningkatan kadar glukosa darah yang
tidak terkendali dan menyebabkan terjadinya diabetes (Acharya and Ghaskadbi,
2014).
Berbagai organ tubuh, termasuk jaringan pankreas memiliki mekanisme
sistem pertahanan alami berupa enzim antioksidan intrasel atau endogen, yaitu
superoksida dismutase (SOD), catalase (Cat), dan glutathione peroxidase (GPx)
21
yang berperan sebagai lini pertahanan terdepan untuk menetralkan dan
mempercepat degradasi senyawa radikal bebas serta mencegah kerusakan
komponen makromolekul sel (Valko dkk., 2007). Kadar antioksidan enzim
intrasel atau endogen jaringan pankreas dapat dipengaruhi oleh radikal bebas dan
asupan antioksidan eksogen, seperti vitamin A, vitamin C, vitamin E, dan
senyawa antioksidan eksogen lainnya. Tubuh terus terkena radikal bebas yang
berasal dari sumber endogen sebagai akibat dari jalur metabolisme normal,
sedangkan sumber eksogen timbul dari polusi lingkungan seperti asap, kabut asap,
radiasi ultraviolet (UV) dan diet (Weber dkk., 2009).
2.9 Metode Induksi Diabetes Dengan Aloksan
Metode induksi diabetes pada hewan percobaan telah banyak dilakukan
dengan agen kimia yaitu aloksan (2,4,5,6-tetraoksipirimidin; 5,6-dioksiurasil)
yang merupakan senyawa hidrofilik dan tidak stabil yang secara luas digunakan
untuk menginduksi diabetes pada hewan coba. Aloksan memiliki waktu paruh
pada suhu 37°C dan pH netral adalah 1,5 menit (Szkudelski, 2001). Dosis
intravena yang digunakan biasanya 65 mg/kg BB, sedangkan intraperitoneal dan
subkutan adalah 2-3 kalinya (Nugroho, 2006).
Penyerapan aloksan dengan cepat oleh sel beta pankreas merupakan faktor
penyebab diabetes. Selain itu, aloksan dapat mereduksi dan mengurangi kerja
gluthathione (GSH) dan protein bound sulfhydryl (-SH) grup. Aloksan tereduksi
menjadi asam dialurik dan kemudian teroksidasi membentuk reactive oxygen
species (ROS) dan superoxide radicals dan dengan adanya H2O2 yang berasal dari
superoxide dismutase (SOD) dan besi menghasilkan radikal hidroksil yang
reaktif. ROS merusak DNA pankreas dan menginaktivasi kerja enzim antioksidan
22
seperti superoxide dismutase catalase. Aloksan meningkatkan konsentrasi ion
Ca2+ bebas. Masuknya kalsium ke dalam sel beta dikarenakan oleh aloksan untuk
mendepolarisasi sel beta pankreas yang lebih terbuka tergantung saluran kalsium
dan meningkatkan kalsium di dalam sel pankreas. Peningkatan ion Ca2+ disertai
ROS menyebabkan kerusakan sel beta pulau pankreas (Rohilla dan Ali, 2012).
23
BAB III
METODE PENELITIAN
Penelitian ini bersifat eksperimental, meliputi pengumpulan dan
pengolahan sampel, karakterisasi, pembuatan ekstrak non polar dan polar daun
kelapa sawit, skrining fitokimia, penetapan kadar karotenoid vitamin E, flavonoid,
fenol, tanin, penyiapan hewan percobaan, uji efek antidiabetes pada tikus. Data
yang diperoleh dianalisis dengan SPSS metode one way ANOVA kemudian
dilanjutkan uji untuk melihat perbedaan nyata antar perlakuan pada pengujian
dengan post hoct tukey.
3.1 Alat dan Bahan
3.1.1 Alat
Alat - alat yang digunakan pada penelitian ini meliputi alat-alat gelas
laboratorium, blender (Miyako®), lemari pengering, penangas air, mortir dan
stamper, neraca hewan (Quarto®), kotak kandang tikus, glukometer (Accu-
check®) dan strip glukotes (Accu-check®), High Performance Liquid
Chromatography (Perkin Elmer®), Gas Chromatography (Shimadzu®), neraca
analitik (Sartorius®), oral sonde, oven (Memmert®), rotary evaporator (Buchi®),
sentrifugator (Labconco®), spektrofotometer UV-Visibel (Shimadzu®), spuit
(Onemed®) dan stopwatch.
3.1.2 Bahan
Bahan penelitian yang digunakan adalah daun kelapa sawit (Elaeis
guineensis Jacq.). Bahan kimia yang digunakan yaitu aluminium klorida, amil
alkohol, asam asetat anhidrida, asam klorida, α-naftol, asam nitrat, asam sulfat,
24
besi (III) klorida, bismut (III) nitrat, etanol, iodium, kalium iodida, kloroform,
metanol, heksana, natrium asetat, natrium karbonat, raksa (II) klorida,
serbuk magnesium, timbal (II) asetat dan toluen. Bahan lain yang digunakan
adalah akuades, alloxan monohydrate (Sigma-aldrich, CAS Number 2244-11-3),
glukosa, minyak inti sawit, NaCl 0,9% (Widharta®), dan tikus putih galur wistar
(Rattus norvegicus), tablet glibenklamid (Indofarma), dan tablet metformin
(Hexpharm).
3.2 Pengumpulan dan Pengolahan sampel
3.2.1 Pengumpulan sampel tumbuhan
Pengambilan sampel dilakukan secara purposif, tanpa membandingkan
dengan tumbuhan yang sama dari daerah lain. Sampel daun diambil bagian
pelepah bawah dengan varietas DxP Yangambi dari pohon kelapa sawit produktif
dengan umur tanaman lebih dari 20 tahun. Sampel berasal dari perkebunan milik
Pusat Penelitian Kelapa Sawit (PPKS) di kebun percobaan Aek Pancur di Tanjung
Morawa, Kabupaten Deli Serdang.
3.2.2 Identifikasi tumbuhan
Identifikaasi tumbuhan dilakukan di Laboratorium Herbarium Medanense,
Departemen Biologi, Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam,
Universitas tjut nyak dhien Medan. Identifikasi tumbuhan tersebut bertujuan
untuk menentukan taksonomi dari sampel daun segar.
3.2.3 Pengolahan sampel
Daun kelapa sawit (Elaeis guineensis Jacq.) dipisahkan dari tulang daunnya
sehingga yang dipakai adalah helai daunnya. Daun dicuci bersih kemudian
ditiriskan, dirajang dan ditimbang, lalu dikeringkan dalam lemari pengering
25
dengan temperatur 40 – 50°C sampai daun kering yang ditandai bila diremas
rapuh dan di timbang berat kering sampel, selanjutnya di serbukkan menggunakan
blender.
3.3 Karakterisasi Simplisia
Karakterisasi simplisia meliputi penetapan kadar air (WHO, 1998),,
penetapan kadar abu, penetapan kadar abu tidak larut dalam asam, penetapan
kadar sari yang larut dalam air dan penetapan kadar sari yang larut dalam etanol
(Ditjen POM, 1995).
3.3.1 Penetapan kadar air simplisia
Penetapan kadar air dilakukan dengan metode azeotropi (destilasi toluen).
Alat yang digunakan terdiri dari labu alas bulat 500 ml, alat penampung dan alat
pendingin, tabung penyambung, dan tabung penerima 10 ml (WHO 1998).
a. Penjenuhan toluen
Sebanyak 200 ml toluen dan 2 ml akuades dimasukkan kedalam labu alas
bulat, dipasang alat penampung dan pendingin, kemudian didestilasi selama 2
jam. Destilasi dihentikan dan dibiarkan dingin selama 30 menit, kemudian volume
air dalam tabung penerima dibaca dengan ketelitian 0,05 ml (Ditjen POM, 1995).
b. Penetapan kadar air
Sebanyak 5 g simplisia yang telah ditimbang seksama dimasukkan
kedalam labu alas bulat. Kemudian labu dipanaskan selama 15 menit. Setelah
toluen mulai mendidih, kecepatan tetesan diatur 2 tetes untuk tiap detik sampai
sebagian besar air terdestilasi, kemudian kecepatan tetesan dinaikkan sampai 4
tetes untuk tiap detik. Setelah semua air terdestilasi, bagian dalam pendingin
dibilas dengan toluen. Destilasi dilanjutkan selama 5 menit, kemudian tabung
26
penerima dibiarkan mendingin sampai suhu kamar. Setelah air dan toluena
memisah sempurna, volume air dibaca dengan ketelitian 0,05 ml. Selisih kedua
volume air yang dibaca sesuai dengan kandungan air yang terdapat di dalam
bahan yang diperiksa. Kadar air dihitung dalam persen terhadap berat sampel
yang telah dikeringkan.
3.3.2 Penetapan kadar abu total
Ditimbang sebanyak 2 g serbuk simplisia yang telah digerus dan
dimasukkan ke dalam krus porselen yang telah terlebih dahulu dipijar dan ditara,
kemudian diratakan. Kurs dipijarkan sampai bobot tetap. Kadar abu dihitung
terhadap bahan yang telah dikeringkan (Ditjen POM, 1995).
3.3.3 Penetapan kadar abu yang tidak larut asam
Abu yang diperoleh pada penetapan kadar abu dididihkan dengan 25 ml
asam klorida encer selama 5 menit, bagian yang tidak larut dalam asam, disaring
melalui kertas saring bebas abu, dicuci dengan air panas. Residu dan kertas saring
dipijar sampai bobot tetap. Kadar abu yang tidak larut dalam asam dihitung
terhadap bahan yang telah dikeringkan (Ditjen POM, 1995).
3.3.4 Penetapan kadar sari yang larut dalam air
Ditimbang sebanyak 5 g serbuk simplisia dan dimaserasi selama 24 jam
dengan 100 ml air-kloroform (2,5 ml kloroform dalam air sampai 1 liter)
menggunakan labu bersumbat. Campuran berkali-kali dikocok selama 6 jam
pertama, kemudian dibiarkan selama 18 jam dan disaring. Sejumlah 20 ml filtrat
diuapkan sampai kering dalam cawan dangkal berdasarkan rata yang telah ditara.
Sisa lalu dipanaskan sampai benar-benar kering pada suhu 105°C hingga bobot
tetap. Kadar sari yang larut dalam air dihitung dalam persen terhadap bahan yang
telah dikeringkan (Ditjen POM, 1995).
27
3.3.5 Penetapan kadar sari yang larut dalam etanol
Ditimbang sebanyak 5 g serbuk simplisia dan dimaserasi selama 24 jam
dengan 100 ml etanol (95%) menggunakan labu bersumbat sambil berkali-kali
dikocok selama 6 jam pertama, kemudian dibiarkan selama 18 jam. Disaring
dengan cepat untuk menghindarkan penguapan dari etanol, 20 ml filtrat diuapkan
sampai kering dalam cawan berdasar rata yang telah ditara. Sisa dipanaskan
sampai kering pada suhu 105°C hingga bobot tetap (Ditjen POM, 1995).
3.4 Pembuatan Ekstrak Non Polar dan Polar Daun Kelapa Sawit
Pembuatan ekstrak non polar dan polar dilakukan dengan cara maserasi
menggunakan pelarut yang sesuai. Senyawa non polar diekstraksi dengan pelarut
heksana dan senyawa polar dengan pelarut etanol 80% menggunakan metode
maserasi bertingkat. Sebanyak 1000 g serbuk simplisia daun kelapa sawit
dimasukkan ke dalam bejana, kemudian dituangi dengan pelarut heksana
sebanyak 75 bagian, kemudian ditutup dan dibiarkan selama 5 hari,
terlindung dari cahaya sambil diaduk sekali-kali setiap hari. Setelah 5 hari,
kemudian disaring, ampas diperas. Ampas dicuci dengan pelarut yang sama
secukupnya, diaduk dan disaring sehingga diperoleh 100 bagian. Tampung
maserat ke dalam bejana tertutup, dan terlindung dari cahaya selama 2 hari
kemudian dienap tuangkan, selanjutnya pelarut diuapkan dengan rotary
evaporator, kemudian dipekatkan lagi diatas penangas air sampai diperoleh
ekstrak kental (Ditjen POM RI, 1979). Selanjutnya ampas yang diperoleh pada
ekstraksi non polar dikering anginkan, ditambahkan etanol 80% sebanyak 75
bagian, kemudian ditutup dan dibiarkan selama 5 hari, terlindung dari
cahaya sambil diaduk sekali-kali, kemudian disaring, ampas diperas dan
28
dicuci dengan pelarut yang sama secukupnya, kemudian diaduk dan disaring
sehingga dapat 100 bagian. Kemudian tampung maserat ke dalam bejana
tertutup, dan terlindung dari cahaya selama 2 hari kemudian dienap tuangkan,
selanjutnya diuapkan dengan rotary evaporator, dipekatkan diatas penangas air
sampai diperoleh ekstrak kental (Ditjen POM , 1979).
3.5. Pembuatan Larutan Pereaksi
Pembuatan larutan pereaksi yang digunakan untuk penelitian ini meliputi
pereaksi Liebermann-Bouchard, asam sulfat 2 N, asam nitrat 0,5 N, Molisch,
Mayer, besi (III) klorida 10%, Dragendorff, natrium hidroksida 2 N, timbal (II)
asetat 0,4 M, asam klorida 2 N, (Ditjen POM, 1995).
3.5.1 Pereaksi Asam nitrat 0,5 N
Pembuatan pereaksi Asam nitrat 0,5 N dilakukan dengan cara
mengencerkan sebanyak 3,4 ml asam nitrat pekat dengan akuades hingga 100 ml
(Ditjen POM, 1995).
3.5.2 Pereaksi Asam sulfat 2 N
Diencerkan sebanyak 5,5 ml asam sulfat pekat dengan akuades
secukupnya hingga volume 100 ml (Ditjen POM, 1995).
3.5.3 Pereaksi Besi (III) klorida 10%
Ditimbang 10 g besi (III) klorida 10% lalu kemudian dilarutkan dalam
labu tentukur yang berisi akuades sehingga diperoleh larutan 100 ml (Ditjen
POM, 1995).
3.5.4 Pereaksi Dragendorff
Pembuatan pereaksi Dragendorff dilakukan dengan menimbang sebanyak
8 g bismuth (III) nitrat, dilarutkan dalam 20 ml asam nitrat pekat. Dilarutkan 27,2
29
g kalium iodida dalam 50 ml akuades pada wadah lain. Kedua larutan
dicampurkan dan didiamkan sampai memisah. Larutan yang jernih diambil dan
diencerkan dengan akuades hingga volume larutan 100 ml (Ditjen POM, 1995).
3.5.5 Pereaksi Bouchardat
Pembuatan pereaksi Bouchardat dilakukan dengan menimbang sebanyak 4
g kalium iodida dan dilarutkan dalam akuades, kemudian 2 g iodium dilarutkan
dalam larutan kalium iodida dan dicukupkan dengan akuades hingga 100 ml
(Ditjen POM, 1995).
3.5.6 Pereaksi Liebermann-Burchard
Pembuatan pereaksi Lieberman-Burchard dilakukan dengan
mencampurkan secara perlahan 5 ml asam asetat anhidrida dengan 5 ml asam
sulfat pekat tambahkan etanol hingga 50 ml (Ditjen POM, 1995).
3.5.7 Pereaksi Mayer
Pembuatan pereaksi Mayer dilakukan dengan melarutkan sebanyak 1,359
g raksa (II) klorida dalam akuades hingga 60 ml. Sebanyak 5 g kalium iodida pada
wadah lain dilarutkan dalam 10 ml akuades, kemudian keduanya campur
dan ditambahkan akuades hingga 100 ml (Ditjen POM, 1995).
3.5.8 Pereaksi Molisch
Pembuatan pereaksi Molisch dilakukan dengan menimbang 3 g α-naftol
dan dilarutkan dalam asam nitrat 0,5 N hingga diperoleh larutan 100 ml (Ditjen
POM, 1995).
3.5.9 Pereaksi natrium hidroksida 2 N
Pembuatan pereaksi Natrium hidroksida 2 N dilakukan dengan
menimbang sebanyak 8 g kristal natrium hidroksida, dilarutkan dalam akuades
sehingga diperoleh larutan 100 ml (Ditjen POM, 1995).
30
3.5.10 Pereaksi timbal (II) asetat 0,4 M
Pembuatan pereaksi timbal (II) asetat 0,4 M dilakukan dengan melarutkan
sebanyak 15,17 g timbal (II) asetat dalam akuades bebas CO2 hingga 100 ml
(Ditjen POM, 1995).
3.5.11 Pereaksi asam klorida 2 N
Sebanyak 6,18 ml asam klorida pekat ditambahkan dengan akuades hingga
diperoleh 100 ml (Ditjen POM, 1995).
3.6 Skrining Fitokimia
Skrining fitokimia yang dilakukan terhadap simplisia dan ekstrak daun
kelapa sawit (Elaeis guineensis Jacq.) meliputi pemeriksaan senyawa kimia
golongan alkaloid, glikosida, saponin (Ditjen POM, 1995). tanin, flavonoida,
triterpenoid dan steroid (Farnsworth, 1966). Skrining fitokimia bertujuan untuk
menentukan golongan senyawa metabolit sekunder yang terdapat pada simplisia
dan ekstrak yang dilakukan pengujian penentuan kadar secara kuatitatif
3.6.1 Pemeriksaan triterpenoid/steroid
Pemeriksaan triterpenoid/steroid dilakukan dengan menimbang sebanyak 1
g sampel, lalu direndam dengan 20 ml heksana selama 2 jam kemudian disaring,
lalu filtrat diuapkan dalam cawan penguap. Pada sisa penguapan ditambahkan
pereaksi Liebermann-Burchard (LB) (Farnsworth, 1966). Timbulnya warna
merah ungu atau hijau biru menunjukkan adanya triterpenoid/steroid.
3.6.2 Pemeriksaan alkaloid
Pemeriksaan alkaloid dilakukan dengan menimbang sebanyak 0,5 g
sampel simplisia dan ekstrak, kemudian ditambahkan 1 ml asam klorida 2 N dan 9
ml akuades, panaskan diatas penangas, dinginkan dan saring. Filtrat dipakai untuk
31
percobaan berikut:
a. diambil 3 tetes filtrat, lalu ditambahkan 2 tetes pereaksi Mayer
b. diambil 3 tetes filtrat, lalu ditambahkan 2 tetes pereaksi Bouchardat
c. diambil 3 tetes filtrat, lalu ditambahkan 2 tetes pereaksi Dragendorff
Alkaloida positif jika terjadi endapan atau kekeruhan paling sedikit dua dari
tiga percobaan di atas (Ditjen POM, 1995).
3.6.3 Pemeriksaan glikosida
Pemeriksaan glikosida dilakukan dengan menimbang sebanyak 3 g sampel
simplisia dan ekstrak, lalu disari dengan 30 ml campuran dari 7 bagian etanol
95% dan 3 bagian akuades, ditambahkan dengan asam klorida 2 N hingga pH
larutan 2, direfluks selama 10 menit, dinginkan dan disaring. Pada 20 ml filtrat
ditambahkan 25 ml akuades dan 25 ml timbal (II) asetat 0,4 M dikocok dan
didiamkam selama 5 menit, lalu disaring. Filtrat diekstraksi dengan 20 ml
campuran 3 bagian kloroform dan 2 bagian isopropanol, ini dilakukan sebanyak
tiga kali. Kumpulan sari air diuapkan pada temperatur tidak lebih dari 50°C.
Sisanya dilarutkan dalam 2 ml metanol. Larutan ini digunakan untuk percobaan
berikut: larutan sisa dimasukkan ke dalam tabung reaksi, diuapkan di atas
penangas air, sisanya ditambahkan 2 ml air dan 5 tetes pereaksi molisch,
kemudian ditambahkan hati-hati 2 ml asam sulfat pekat melalui dinding tabung
secara perlahan. Jika terbentuk cincin ungu pada batas kedua cairan menunjukkan
adanya gula (Ditjen POM, 1995).
3.6.4 Pemeriksaan flavonoid
Pemeriksaan flavonoid dilakukan dengan menimbang sebanyak 1 g
sampel simplisia dan sampel ekstrak kemudian ditambahkan 10 ml air panas, lalu
dididihkan selama 5 menit dan disaring dalam keadaan panas, lalu ke dalam 5 ml
32
filtrat ditambahkan 0,1 g serbuk magnesium dan 1 ml asam klorida pekat dan 2 ml
amil alkohol, kemudian dikocok dan dibiarkan memisah. Flavonoid positif jika
terjadi warna merah atau kuning atau jingga pada lapisan amil alkohol
(Farnsworth, 1966).
3.6.5 Pemeriksaan saponin
Pemeriksaan saponin dilakukan dengan menimbang sebanyak 0,5 g sampel
kemudian dimasukkan dalam tabung reaksi lalu ditambahkan dengan 10 ml air
panas, didinginkan kemudian dikocok kuat-kuat selama 10 detik, jika terbentuk
buih yang stabil selama tidak kurang dari 10 menit setinggi 1-10 cm dan dengan
penambahan 1 tetes asam klorida 2 N buih tidak hilang yang menunjukkan
adanya senyawa metabolit saponin (Ditjen POM, 1995).
3.6.6 Pemeriksaan tanin
Pemeriksaan tanin dilakukan dengan cara menimbang sebanyak 0,5 g
sampel kemudian disari dengan 10 ml akuades selama 15 menit lalu disaring.
Filtratnya diencerkan dengan akuades sampai tidak berwarna. Larutan diambil
larutan sebanyak 2 ml dan ditambahkan 1-2 tetes larutan pereaksi besi (III) klorida
1 %. Apabila terjadi warna biru atau hijau kehitaman menunjukkan adanya tanin.
(Farnsworth, 1966).
3.7 Penetapan Kadar
3.7.1 Penetapan kadar senyawa non polar
Penetapan kadar senyawa non polar dilakukan mengikuti prosedur yang
berlaku di Pusat Penelitian Kelapa Sawit (PPKS), Medan.
3.7.1.1 Penetapan kadar total karoten
Ekstrak non polar daun kelapa sawit ditimbang diatas kaca arloji sebanyak
33
0,04 g, kemudian dilarutkan dengan heksana sedikit demi sedikit hingga larut.
Larutan dimasukkan ke dalam labu tentukur 10 ml dan di tambahkan sampai garis
tanda. Kemudian sampel dianalisis dengan menggunakan alat spektrofotometer
dan dibaca absorbansi pada panjang gelombang 446 nm (Kuntom, dkk., 2005).
3.7.1.2 Penetapan kadar α-tokoferol dan δ-tokoferol
Ekstrak non polar daun kelapa sawit ditimbang diatas kaca arloji sebanyak
2 g, kemudian dilarutkan dengan heksana sedikit demi sedikit hingga larut.
Larutan dimasukkan ke dalam labu tentukur 10 ml dan di tambahkan heksana
sampai garis tanda. Kemudian diambil 2 ml dari labu tentukur, lalu dimasukan ke
dalam labu tentukur 10 ml dan ditambahkan dengan metanol p.a sampai garis
tanda, lalu dihomogenkan kembali. setelah itu dituang ke tabung sentrifuge
(sentrifuge selama 30 menit dengan 3000 rpm). Analisis sampel dengan
menggunakan kromatografi cair kinerja tinggi (KCKT) (AOCS, 2009).
3.7.2 Penetapan Kadar Senyawa Polar
Penetapan kadar senyawa polar dilakukan mengikuti prosedur yang

berlaku di Balai Besar Pasca Panen, Bogor.
3.7.2.1 Penetapan kadar total fenol
Penetapan kadar total fenol menggunakan metode Folin-Ciocalteu dengan
sedikit modifikasi. Ditimbang 10 mg ekstrak etanol daun kelapa sawit dan
dilarutkan dengan etanol hingga 10 ml, kemudian dipipet 1 ml larutan dan
ditambahkan 5 ml akuades dan 1 ml larutan Folin-Ciocalteu, kemudian divortex
selama ± 1 menit lalu didiamkan 4-8 menit, selanjutnya ditambahkan 1 ml larutan
natrium karbonat 20%. Campuran diletakkan di atas penagas air selama 30
menit dan diukur absorbansinya pada spektrofotometer UV-Visible dengan
panjang gelombang 775 nm (Rebaya dkk, 2015).
34
3.7.2.2 Penetapan kadar total flavonoid
Penetapan kadar total flavonoid menggunakan metode aluminium
triklorida dengan sedikit modifikasi. Ditimbang 100 mg ekstrak etanol daun
kelapa sawit dilarutkan dalam 10 ml metanol. Diambil 1 ml l tambahan 3 ml
metanol, ditambahkan 0,2 ml AlCl3 10%, tambahkan 0,2 ml kalium asetat, dan
dicukupkan dengan aquadestilata sampai 10 ml, simpan 30 menit pada tempat
gelap dengan suasana suhu kamar, absorbansinya diukur pada spektrofotometri
UV-Vis dengan panjang gelombang 510 nm. Kadar flavonoid yang diperoleh
sebagai ekuivalen katekin (Rebaya dkk, 2015).
3.7.2.3 Penetapan kadar total tanin
Penetapan kadar total tanin dilakukan dengan cara menimbang sebanyak
50 mg ekstrak etanol daun kelapa sawit dilarutkan dengan akuades sampai volume
50 ml. Larutan ekstrak yang diperoleh kemudian dipipet sejumlah tertentu dan
ditambah 1 ml reagen Folin-Ciocalteu, kemudian dikocok dan didiamkan selama
5 menit. Ke dalam larutan tersebut ditambah 2 ml larutan Na2CO3 15%,
dihomogen dan didiamkan selama 5 menit. Selanjutnya ditambahkan akuades
sampai volume 10 ml, diamkan pada range waktu stabil yang diperoleh.
Absorbansi diukur menggunakan spektrofotometer UV-Vis pada panjang
gelombang 747,5 nm (Mukhriani dkk.,2014).
3.8 Pembuatan Larutan Pengujian Antidiabetes
Pembuatan larutan pengujian antidiabetes mencakup pembuatan larutan
aloksan, larutan glukosa 50%, larutan Na-CMC 0,5%, suspensi glibenklamid,
suspensi metformin, suspensi ekstrak non polar dan suspensi ekstrak polar daun
kelapa sawit.
35
3.8.1 Pembuatan larutan aloksan
Pembuatan larutan aloksan dengan dosis 150 mg/kg bb dilakukan dengan
menimbang sebanyak 150 mg aloksan monohidrat dimasukkan ke labu tentukur
10 ml, lalu volume dicukupkan dengan larutan NaCl 0,9%, sampai garis tanda.
3.8.2 Pembuatan larutan glukosa 50%
Pembuatan larutan glukosa 50% dilakukan dengan cara melarutkan 50 g
glukosa dengan akuades, kemudian dimasukkan ke dalam labu ukur 100 ml lalu di
homogenkan, kemudian volume dicukupkan dengan akuades sampai garis tanda.
3.8.3 Pembuatan larutan Na-CMC 0,5%
Pembuatan larutan Na CMC dilakukan dengan menimbang sebanyak 0,5 g
Na CMC kemudian ditaburkan dalam lumpang yang berisi akuades panas,
didiamkan selama 15 menit hingga diperoleh massa yang transparan, lalu digerus
sampai homogen, kemudian diencerkan dengan akuades dan dimasukkan ke
dalamlabu tentukur 100 ml. Volume dicukupkan sampai garis tanda.
3.8.4 Pembuatan larutan suspensi Glibenklamid 0,45 mg/kg bb
Pembuatan suspensi glibenklamid dilakukan dengan menimbang sebanyak
18 mg serbuk tablet glibenklamid kemudian dimasukkan ke dalam lumpang,
digerus dan ditambahkan suspensi Na CMC 0,5% sedikit demi sedikit sambil
digerus sampai homogen. Volume suspensi dicukupkan sampai garis tanda.
3.8.5 Pembuatan larutan suspensi Metformin 45 mg/kg bb
Pembuatan larutan suspensi metformin dilakukan dengan cara menimbang
sebanyak 49 mg serbuk metformin kemudian dimasukkan ke dalam lumpang, di
tambahkan suspensi Na-CMC 0,5% sedikit demi sedikit sambil di gerus sampai
homogen, dimasukkan ke labu tentukur 10 ml. Volume di cukupkan sampai garis
tanda.
36
3.8.6 Pembuatan suspensi ekstrak non polar daun kelapa sawit (ENPDKS)
Suspensi ekstrak non polar daun kelapa sawit dibuat dengan 3 variasi dosis
yaitu 100, 150 dan 200 mg/kg bb. Sebanyak 1000 mg ekstrak non polar daun
kelapa sawit dimasukkan ke dalam lumpang di tambahkan minyak inti sawit
sedikit demi sedikit sambil digerus sampai homogen lalu dimasukkan ke labu
tentukur 10 ml. Volume dicukupkan sampai garis tanda.
3.8.7 Pembuatan suspensi ekstrak polar daun kelapa sawit (EPDKS)
Suspensi ekstrak polar daun kelapa sawit dibuat dengan 3 variasi dosis
yaitu 100, 150 dan 200 mg/kg bb. Sebanyak 1000 mg ekstrak polar daun kelapa
sawit dimasukkan ke dalam lumpang, di tambahkan larutan Na-CMC 0,5% sedikit
demi sedikit sambil digerus sampai homogen lalu dimasukkan ke labu tentukur 10
ml. Volume dicukupkan sampai garis tanda.
3.9 Persiapan Hewan Percobaan
Hewan yang digunakan pada percobaan ini adalah tikus galur wistar
(Rattus norvegicus) jantan dengan berat 180 - 200 g sebanyak 45 ekor,
dikelompokkan dalam 9 kelompok, setiap kelompok terdiri dari 5 ekor tikus.
Sebelum dilakukan pengujian, tikus dikondisikan selama 2 minggu untuk
menyesuaikan dengan lingkungannya dan diberi makan pakan pelet.
3.10 Pengujian Efek Antidiabetes
3.10.1 Penggunaan blood glucose test meter “ Accu Check”
Kadar glukosa darah diukur dengan alat glukometer menggunakan strip
glukotes yang bekerja secara enzimatis. Glukometer akan hidup secara otomatis
ketika strip di masukkan dan akan mati setelah strip dicabut dalam bebrapa menit.
37
Alat akan mulai mengukur kadar glukosa darah apabila wadah telah terisi penuh
oleh darah yang telah disentuhkan ke strip melalui aksi kapiler.
3.10.2 Pengukuran kadar glukosa darah (KGD)
Tikus dipuasakan selama 18 jam sebelum percobaan (tikus tidak diberi
makan tetapi tetap diberi minum), kemudian diukur KGD dengan cara mengambil
darah melalui pembuluh darah vena dan kemudian darah diteteskan ke strip
glukotes yang terpasang pada glukometer (Arifin, et al., 2011; Baroroh, et al.,
2011). Angka yang tampil pada layar dicatat sebagai KGD (mg/dl).
3.10.3 Pengujian efek antidiabetes ENPDKS dan EPDKS terhadap tikus

dengan metode toleransi glukosa
Sebanyak 45 ekor tikus jantan dengan berat badan berkisar 180 - 200 g
dipuasakan selama 18 jam sebelum percobaan. Setiap kelompok diberikan sediaan
uji, dan diberikan larutan glukosa 50% setelah 30 menit, kemudian dilakukan
pengukuran KGD pada menit ke 30, 60, 90, dan 120.. Tikus dibagi dalam 9
kelompok, masing-masing kelompok terdiri dari 5 ekor. Variasi perlakuan dan
dosis ekstrak daun kelapa sawit dapat dilihat pada Tabel 3.1.
Tabel 3.1 Variasi perlakuan uji toleransi glukosa

No Kelompok
1 Ekstrak Non-Polar Daun Sawit (ENPDKS) 100 mg/kg bb
4 Ekstrak Polar Daun Sawit (EPDKS) 100 mg/kg bb
7 Glibenklamid (Kontrol Positif)
8 Minyak Inti Sawit (Kontrol Negatif Ekstrak Non Polar)
9 Na-CMC 0,5% (Kontrol Negatif Ekstrak Polar)
38
Setiap kelompok yang telah diberikan sediaan uji, diberikan larutan glukosa
50% dengan dosis 1% bb setelah 30 menit, kemudian dilakukan pengukuran KGD
pada menit ke 30, 60, 90, dan 120 menit dengan menggunakan alat ukur
glukometer.
3.10.4 Pengujian efek antidiabetes ENPDKS dan EPDKS terhadap tikus

yang diinduksi aloksan
Sebanyak 45 ekor tikus jantan dengan berat badan 180 - 200 g diinduksi
aloksan dengan dosis 150 mg/kg bb secara interperitonial. Tikus dinyatakan telah
mengalami diabetes setelah hari ketiga setelah pemberian aloksan dan dilakukan
pengujian kadar glukosa darah puasa dengan nilai di atas 200 mg/dl (peningkatan
KGD setelah pemberian aloksan dianggap sebagai hari pertama perlakuan).
Kemudian tikus dibagi dalam 9 kelompok, yang dimana masing-masing
kelompok terdiri dari 5 ekor tikus dan kemudian diberikan perlakuan secara
peroral. Variasi perlakuan dan variasi dosis ekstrak daun kelapa sawit dapat
dilihat pada Tabel 3.2
Tabel 3.2 Variasi perlakuan pengujian antidiabetes

No Kelompok
7 Metformin (Kontrol Positif)
8 Minyak Inti Sawit (Kontrol Negatif Ekstrak Non Polar)
9 Na-CMC 0,5% (Kontrol Negatif Ekstrak Polar)
39
Setiap kelompok hewan uji diberi ekstrak non polar daun kelapa sawit,
ekstrak polar daun kelapa sawit , kontrol positif (metformin) dan kontrol negatif
(Na CMC & minyak inti sawit) secara per oral setiap harinya selama 28 hari, dan
kadar glukosa darah diukur pada hari ke-1, 4, 8, 12, 16, 20, 24, dan 28. Data yang
diperoleh dilakukan pengolahan data untuk menentukan persentase peningkatan
aktivitas antidiabetes antar perlakuan terhadap waktu pengamatan dengan rumus:
= x 100
3.11 Analisis data
Data hasil penelitian dianalisis dengan menggunakan SPSS, menggunakan
metode one way ANOVA dan dilanjutkan dengan uji Tukey HSD untuk melihat
perbedaan nyata antar perlakuan.
40
DAFTAR PUSTAKA
Acharya J., Ghaskadbi S. 2014. Free Radicals and Islet Function. In: Laher I.
(eds) Systems Biology of Free Radicals and Antioxidants. Springer,
Berlin, Heidelberg. ISBN: 978-3-642-30018-9. Pp 3339 – 3360.
Ansel, H. C., 1989, Pengantar Bentuk Sediaan Farmasi, Edisi Keempat, UI-Press,
Jakarta.
Anyanji, V.U., Mohamed,S., Zokti, J.A., Ado, M.A. 2013. AntiInflammatory
Properties of Oil Palm Leaf (Elaeis guineensis Jacq.) Extract inAged Rats.
International Journal of Pharmacy and Pharmaceutical Sciences. 5: 135-
137
Arifin, H., Ann, M.C., dan Asram, A. 2011. Pengaruh Air Perasan
Bengkuang(Pachrhizus erosus L. Urb.)Terhadap Kadar Gula Darah
Mencit PutihJantan Diabetes.Jurnal Sains dan Teknologi. 16(2):128-137.
AOCS. 2009. Official methods and recommended practices of the American Oil
Chemists’ Society. AOCS, Champaign.
Ayoola, G.A., Coker, H.A.B., Adesegun, S.A., Adepoju-Bello, A.A., Obaweya,
K., Ezennia, E.C., et al. 2008. Phytochemical Screening and Antioxidant
Activities of Some Selected Medicinal Plants Used for Malaria Therapy in
Southwestern Nigeria. Journal of Phamaceutical Research. 7(3): 1019
Baroroh,F., Nurfina, A., Hari, S. 2011. Uji Efek Antihiperglikemik Ekstrak Etanol
Daun Kacapiring (Gardenia augusta,Merr) pada Tikus PutihJantan Galur
Wistar. Jurnal Ilmiah Kefarmasian. 1(1): 43-53.
Bate’e, E. 2013. Karakterisasi dan Isolasi Senyawa Triterpenoid/Steroid Daun
Kelapa Sawit (Elaeis guineensis Jacq). Proposal. Medan: Fakultas
Farmasi Universitas tjut nyak dhien. Halaman 18.
Chong, K.H., Zuraini, Z., Sasidharan, S., Kalnisha, Devi, P.V., Yoga, L.,
Ramanathan, S. 2008. Antimicrobial Activity of Elaeis guineensis Leaf.
Journal of Pharmacology online. 3: 379-386.
Corley, R.H.V., Tinker, P.B. 2016. The Classification and Morphology of the Oil
Palm. The Oil Palm. Published by John Wiley & Sons, Ltd. Pages 30–52.
doi: 10.1002/9781118953297.ch2
Dai, J., Mumper, R.J. 2010. Plant Phenolics: Extraction, Analysis and Their
Antioxidant and Anticancer Properties. Molecules. 15 (10): 7313-52
Departemen Kesehatan Republik Indonesia, 1986, Sediaan Galenik, Departemen
Kesehatan Republik Indonesia, Jakarta.
Ditjen POM. 1979. Farmakope Indonesia. Edisi Ketiga. Cetakan Pertama.
Jakarta: Departemen Kesehatan RI. Halaman 33, 772.
Ditjen POM. 1995. Materia Medika Indonesia. Jilid VI. Jakarta: Departemen
Kesehatan RI. Halaman 297-307, 321, 325, 333-337.
DellaPenna, D., Pogson, B.J. 2006. Vitamin Synthesis in Plants: Tocopherols and
Carotenoids. Annu. Rev. Plant Biol. 57:711–38
Dheer, R., Bhatnagar, P. 2010. A study of the antidiabetic activity of Barleria
prionitis Linn. Indian J Pharmacol. 42:70-3
Direktorat Jenderal Perkebunan. 2018. Statistik Perkebunan Indonesia: Kelapa
Sawit 2015 – 2017.
Duke, J.A. 2008. Medicinal Plants Of Latin America. New York: CRC press.
Halaman 289.
41
Farnsworth, N. R., 1966. Biological and Phytochemical Screening of Plant.
Journal of Pharmaceutical Science. 55(3): 245-264.
Fauzi, Y., Yusnita, E. W., Iman, S., Rudi, H. 2008. Kelapa sawit: Budi Daya
Pemanfaatan Hasil & Limbah Analisis Usaha & Pemasaran. Jakarta:
Penebar Swadaya: Halaman 25-27
Fenercioglu, A.K., Saler, T., Genc, E., Sabuncu, H., Altuntas, Y. 2010. The
effects of polyphenol-containing antioxidants on oxidative stress and lipid
peroxidation in Type 2 diabetes mellitus without complications. Journal
of endocrinological investigation. 33: 118-124
Firdous, M., Koneri, R., Sarvaraidu, C. H., Harish, M., Shubhapriya, K. H. 2009.
NIDDM Antidiabetic Activity of Saponin of Momordica Cymbalaria in
Streptozotocin-Nicotinamide NIDDM Mice.Journal of Clinical and
Diagnostic Research.3:1460-1465
Funayama, S., Cordell, G.A. 2015. Alkaloids Derived from Nicotinic Acid.
Alkaloids. Academic Press. Pages 181-192. ISBN 9780124173026,.
Ganong, W. F. 2005. Fungsi Endotel Pankreas dan Pengaturan metabolisme
Karbihidrarat dalam Buku Ajaran Fisiologi Kedokteran. Jakarta: EGC
Garrow, J.S., W.P.T James. 1993. Human Nutrion and Diabetics. Halaman 230.
Ghorbani, A., Rashidi, R., Shafiee-Nick, R. 2019. Flavonoids for preserving
pancreatic beta cell survival and function: Amechanistic review.
Biomedicine & Pharmacotherapy. 111: 947 - 957
Ginjom, I.R.H., Musec, R., Noordin, M.M., Hamid, A.A. 2003. Antioxidant and
hypocholesterolemic effects of Elaeis guineensis frond extract on
hypercholesterolemic rabbits. Asean Food J. 12 (3): 137 - 148
Givens, D. I., Dtafeaville, E. R., Mueller-Harvey, I. 2010. Chestnut and mimosa
tannin silages: Effects in sheep differ for apparent digestibility, nitrogen
utilisation and losses. Animal Feed Science and Technology. 157 (3-4).
pp. 129-138. ISSN 0377-8401
Gulfraz, M., Qadir, G., Noshhen, F., Parveen, Z. 2007. Antihyperglycemic effects
of Berberis lyceum royle in alloxan induced diabetic rats. Diabetologia
Croatica. 36(3):49–54.
Harborne, J. B. 1987. Metode Fitokimia. Penerjemah: Kosasih Padmawinata dan
Iwang Soediro. Edisi II. Bandung: Penerbit ITB. Halaman 152.
Harianja, E. 2011. Uji Efek Ekstrak Etanol Biji Tumbuhan Alpukat (Persea
americana Mill) Segar Terhadap Penurunan Kadar Gula Darah Pada
Mencit Jantan. Proposal. Medan: Fakultas Farmasi, Universitas tjut nyak
dhien.
Haro, D. V. 2015. Uji efektifitas antidiabetes ekstrak etanol daun kelapa sawir
(Eelais guineensis Jacq) terhadap tikus yang diinduksi aloksan. Proposal.
Fakulltas Farmasi. Universitas tjut nyak dhien
Hasibuan, C.S. 2015. Skrinning Fitikimia dan Uji Efektivitas Sedian Geal Ekstrak
Etanol Daun Kelapa Sawit (Elaeis guineensis Jacq) Terhadap
Penyembuhan Luka Sayat.Proposal.Fakultas Farmasi. USU
Hussein, R.A., El-Anssary, A.A. 2018. Plants Secondary Metabolites: The Key
Drivers of the Pharmacological Actions of Medicinal Plants in Herbal
Medicine. http://dx.doi.org/10.5772/intechopen.76139
Isniati. 2007. Hubungan Tingkat Pengetahuan Penderita Diabetes Melitus Denga
Keterkendalian Gula Darah Di Poliklinik RS Perjan Dr. Djamil Padang
tahun 2003, Jurnal Kesehatan Masyarakat, September 2007, 1(2).
42
Jain, S.K., McVie, R. 2000. Vitamin E Supplementation Restores Glutathione and
Malondialdehyde to Normal Concentrations in Erythrocytes of Type 1
Diabetic Children. Diabetes Care. Vol 23, No 9. 1389 – 1394
Jaffri, M., Mohamed, S., Rohimi N., Ahmad, I.N, Noordin, M., Manap, Y.A.
2013. Antihypertensive and Cardiovascular Effects of Catechin-Rich Oil
Palm (Elaeis guineensis Jacq) Leaf Extract in Nitric Oxide–Deficient
Rats. Journal of Medicinal Food. 14(7/8): 775–783.
Jaffri, M.J., Mohamed, S., Ahmad, I.N., Mustapha, N.M., Manap, Y.A., Rohimi, N. 2011.
Effects Of Catechin-Rich Oil Palm Leaf Extract On Normal And Hypertensive
Rats Kidney And Liver. Elsevier.:433-441.
Katzung, B.G. 1995. Farmakologi Dasar and Klinik. Edisi VI. Jakarta: Penerbit
Buku Kedokteran EGC.
Kavit, M., Patel, B.N., Jain, B.K. 2013. Phytochemical Analysis of Leaf Extract
of Phyllantus fraternus. Res. J. Recent. Sci. 2(ISC-2012): 12-15
Kementrian Pertanian. 2018. Pemerintah Remajakan Sawit Rakyat. Url:
http://www.pertanian.go.id/home/?show=news&act=view&id=3185
Kondo, M., Hirano, Y., Kita, K., Jayanegara, A., Yokota, H.O. 2014.
Fermentation Characteristics, Tannin Contents and In vitro Ruminal
Degradation of Green Tea and Black Tea By-products Ensiled at Different
Temperatures. Asian-Australas J Anim Sci. 27(7):937-45
Kumar, R.S., Venkateshwar, C., Samuel, G., Rao, S.G. Phtochemical Screening of
Some Compounds from Plat Leaf Extract of Holoptelea integrifolia
(Planch) and Celestrus emarginata (Grah.) Used by Gondu tribes at
Adilabad District, Andhrapdesh, India. International Journal of
Enginering Science Invention. 2(81): 65-70
Kuntom, A., Lin, S.W., Ai, T.Y., Idris, N.A., Yusof, M., Sue, T.T., et al. 2005.
MPOB TEST METHOD: A compendium of test on palm oil products,
palm kernel products, fatty acids, food related products and other. Kuala
Lumpur: Malaysian Palm Oil Board. MPOB p2.6 page 196
Moelyohadi, Y. 2017. Pemanfaatan limbah perkebunan kelapa sawit sebagai
kompos dan mulsa organik terhadap pertumbuhan dan produksi tanaman
jagung (Zea mays L.) pada lahan kering marginal.Klorofil.XII–2:111- 119
Moelyohadi, Yopie. 2017. Pemanfaatan limbah perkebunan kelapa sawit sebagai
kompos dan mulsa organik terhadap pertumbuhan dan produksi tanaman
jagung (Zea mays L.) pada lahan kering marginal. Vol 12. No 2.
Mohamed, S. 2014. Oil Palm Leaf: A New Functional Food Ingredient for Health
and Disease Prevention. J Food and Technol. 5(2): 1-6.
Mukhriani, Nonci, F.Y., Mumang. 2014. Penetapan Kadar Tanin Total Ekstrak Biji
Jintan Hitam (Nigella sativa) Secara Spektrofotometri UV-Vis. Jurusan
Farmasi Fakultas Ilmu Kesehatan. 2(4): 154-158.
Mène-Saffrané, L. 2018. Vitamin E Biosynthesis and Its Regulation in Plants.

Antioxidants. 7, 2; 1-17 doi:10.3390/antiox7010002
Ndraha, S. 2014. Diabetes Melitus Tipe 2 dan Tatalaksana Terkini.Medicinus.
27(2): 9-16.
Nugroho, E. O. 2006. Hewan Percobaan Diabetes Mellitus: Patologi dan
Mekanisme Aksi Diabetogenik. Review Article. Biodiversitas. ISSN:
1412-033X. 7(4): 378-382.
43
Novia, J. 2014. Karakterisasi Simplisia dan Skrinning Fitokimia serta Uji
Aktivitas Antioksidan Ekstrak n-Heksan etilasetat dan Metanol Selada Air
(Nasturtium officinale W.T. Aiton). Proposal. Medan: Fakultas Farmasi
Universitas tjut nyak dhien. Halaman 35.
Owoyele, B. V., Gbenga, O. O. 2014. Traditional Oil Palm (Elaeis guineensis
Jacq.) and Its Medicinal Uses: A Review.Association of Humanitas
Medicine. 4(3): 1-4.
Park, Y., Skelland, A.H.P., Forney, L.J., Kim, J.H. 2006. Removal of Phenol and
Substituted Phenols by Newly Developed Emulsion Liquid Membrane
Process,Water Res., 40, 1763–1772.
Rajavel, V., Abdul Sattar, M.Z, Abdulla, M.A., Kassim, N.M., Abdullah, N.A.
2012. Chronic Administration of Oil Palm (Elaeis guineensis) Leaves
Extract Attenuates Hyperglycaemic-Induced OxidativeStress and
Improves Renal Histopathology and Function in Experimental Diabetes.
Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine. Volume 2012,
doi:10.1155/2012/195367
Rao, A.V., Rao, L.G. 2007. Carotenoids and human health. Pharmacol Res.
55(3):207-16.
Rebaya, A., Belghith, S.I., Baghdikian, B., Leddet, V.M., Mabrouki, F., Olivier,
E., et al. 2015. Total Phenolic, Total Flavonoid, Tannin Content, and
Antioxidant Capacity of Halimium halimifolium (Castaceae).Journal of
Applied Pharmaceutical Science.Vol.5,pp. 052-057
Robinson, T. 1995. Kandungan Organik Tumbuhan Tinggi. Edisi VI.
Diterjemahkan oleh Kosasih Padmawinata.Bandung: Penerbit ITB.hal 192.
Rohilla, A., Ali, S. 2012. Alloxan Induced Diabetes : Mecanism and Effects.
International Journal of Research in Pharmaceutical Vol 3(2) : 819-820
Rosalina Tan, R.T., Mohammed, S., Samaneh, G.F., Noordin, M. Goh, Y.M.,
Manap, M.Y.A. 2011. Polyphenol rich oil palm leaves extract reduce
hyperglycaemia and lipid oxidation in STZ-rats. International Food
Research Journal. 18: 179-188
Sasidharan, S., Nilawatyi, R., Xavier, R., Latha, L.Y., Amala, R. 2010. Wound
Healing Potential of Elaeis guineensis Jacq Leaves in an Infected Albino
Rat Model. Molecules. 15(5): 3186-3199.
Sinaga, A.G.S., dan Siahaan, D. Pengaruh Kandungan Komponen Minor dari
Minyak Kelapa Sawit (Elaeis guineensis Jacq.) Terhadap Aktivitas
Antioksidan pada Proses Pemurnian Karotenoid. Pharm Sci Res. Vol 2 No
3. 135 - 142
Singab, A.N.B., Eldahshan, O.A. 2013. Carotenoids. Journal of Pharmacognosy
and Phytochemistry. Volume 2 Issue 1: 225 – 234
Soares, J.M.D., Leal, A.E.B.P., Silva, J.C., Almeida, J.R.G.S., de Oliveira, H.P.
2017. Influence of Flavonoids on Mechanism of Modulation of Insulin
Secretion. Pharmacogn Mag. 13(52): 639–646.
Song, Y., Cook, N.R., Albert, C.M., Van Denburgh, M., Manson, J.E. 2009.
Effects of vitamins C and E and β-carotene on the risk of type 2 diabetes
in women at high risk of cardiovascular disease: a randomized controlled
trial. The American Journal of Clinical Nutritio. Volume 90, Issue 2.
Pages 429–437, https://doi.org/10.3945/ajcn.2009.27491
Syah, M. I., Suwendar, Mulqie, L. 2015. Uji Aktivitas Ekstrak Etanol Daun
Mangga Arumanis (Mangifera indica L. “Arumanis”) pada Mencit Swiss
44
Webster Jantan dengan Metode Tes Toleransi Glukosa (TTGO). Prosiding
Penelitian SpeSIA Unisba. Halaman 2460-6472.
Szkudelski, T. 2001. The Mechanism of Alloxan and Streptozotocin Action in B
Cells of The Rats Pancreas.Department of Animal Physiology and
Biochemistry. Poznan. Poland: University of Agriculture. Halaman 537.
Tafsin, M., Khairani, Y., Hanafi, N.D., Yunilas. 2018. In vitro digestibility of oil
palm frond treated by local microorganism (MOL). IOP Conf. Ser.: Earth
Environ. Sci. 122/012134
Talaviya, P.A., Rao, S. K., Vyas, B. M., Indoria, S. P., Suman, R. K., Suvagiya,
V. P. 2014. A Review On: Potential Antidiabetic Herbal Medicines.
International Journal of Pharmaceutical Science and Research.IJPSR.E-
ISSN 0975-8232; P-ISSN 2320-5148.5(2): 302-319.
Tresnawati, A., Saputri, F.A. 2016. Review: Analisis Penentuan Glibenklamid
Dalam Pharmaceutical Dosage Forms. Farmaka. Suplemen Volume 14
Nomor 2: 232 - 245
Tiwari, P., Kumar, B., Kaur, M., Kaur, G., Kaur, H. 2011. Phytochemical
screening and Extraction: A Review. International Pharmaceutica
Sciencia. 1(1): 98-106
Valko, M., Leibfritz, D., Moncol, J., Cronin, M.T.D., Mazur, M., Telser, J. 2007.
Review: free radicals and antioxidants in normal physiological functions
and human disease. Inter J Biochem Cell Biol.39:44–84
Vijayarathna, S., Jothy S.L., Ping, K.Y., Latha, L.Y., Othman, N., Sasidharan, S.
2012. In VitroAntioxidant Activity and Hepatoprotective Potential of
Elaeis Guineensis Leaf Against Paracetamol Induced Damage in Mice.
International Journal of Chemical Engineering and Applications. 3: 4
Weber, S.U., Lodge, J.K., Salion, C., dan Packer, L. 2009. Antioxidants. In
Handbook of Cosmetics Science and Technology. Edisi ke- 3. New York:
Informa Healtcare USA. Halaman 302 - 305.
World Health Organization. 1998. Quality control methods for medicinalplant
materials World Health Organization Geneva. Publisher: World Health
Organization. ISBN 92 4 154510 0 (NLM Classification: QV 766)
Widyawati, P.S., Budianta, T.D.W., Kusuma, F.a., Wijaya E.L. 2014. Difference
of Solvent Polarity to Phytochemical Content and Antioxidant Activity of
Pluchea indicia Less Leaves Extracts. International Journal of
Pharmacognosy and Phytochemical Research. 15; 6(4); 850-855
Winarsi Hery. 2011. Antioksidan Alami dan Radikal Bebas. Kanisius,
Yogyakarta.Halaman 147-153.
Yin, N. S., Abdullah, S., Phin, C. K. 2013.Phytocemical Constituents from Leaves
of Elaeis guineensis and Their Antioxidant and Antimicrobia Activities.
International Journal of Pharmacy and Pharmaceutical Sciences. 5(4) :
138.2
45
Lampiran 1. Bagan kerja penelitian
Daun Kelapa Sawit
Dipisahkan dari tulang daunnya, dicuci, ditiriskan

Dirajang dan ditimbang
Dikeringkan dalam lemari pengering dengan suhu ±40oC
Simplisia daun kelapa sawit

Ditimbang
Dihaluskan menggunakan blender
Serbuk simplisia daun kelapa Penetapan:

sawit
- Kadar air
- Kadar abu total
- Kadar abu yang tidak larut
Proses ekstraksi asam
i. Pelarut heksana Karakterisasi - Kadar sari yang larut air
(non polar) simplisia - Kadar sari yang larut etanol
ii. Pelarut etanol
80% (polar)
- Alkaloida
- Flavonoid
Ekstrak Non Ekstrak Polar - Glikosida
polar Daun Daun Kelapa Skrining - Saponin
Kelapa Sawit Sawit Fitokimia - Tanin
- Steroid/
Triterpenoid
Penetapan kadar Penetapan kadar

metabolit sekunder metabolit sekunder
- Total Karoten - Total Flavonoid

- δ-tocoferol - Total Fenol
Uji Toleransi Uji Antidiabetes diinduksi

Glukosa Aloksan
46
Lampiran 2. Bagan Alir Pembuatan Ekstrak Non Polar dan Polar Daun Kelapa Sawit
(Elaeis guineensis Jacq.)
a. Pembuatan Ekstrak Non Polar Daun Kelapa Sawit (Elaeis guineensis Jacq.)
1000 g Serbuk simplisia
Dimasukkan ke dalam bejana maserasi
Ditambahkan 7,5 liter pelarut heksana (75

bagian)
Dibiarkan selama 5 hari terlindung dari cahaya

matahari sambil sesekali di aduk
Disaring dan di peras
Maserat I Ampas
Dicuci dengan 2,5 liter pelarut

heksana hingga di peroleh 100
bagian
Digabungkan
Disaring
Maserat II Ampas heksana
Dibiarkan selama 2 hari terlinding dari

cahaya matahari
Dienap tuangkan dan di saring
Diuapkan pelarut dengan rotary evaporator
Dipekatkan diatas penangas air sampai

diperoleh ekstrak kental
Ekstrak kental heksana
Dimasukkan ke dalam Freezer
Ekstrak Kering Non Polar

Daun Kelapa Sawit
47
Lampiran 2. (Lanjutan)
b. Pembuatan Ekstrak Polar Daun Kelapa Sawit (Elaeis guineensis Jacq.)
Ampas heksana
Diangin-anginkan
Dimasukkan ke dalam bejana maserasi dan

ditambahkan 7,5 liter pelarut etanol 80% (75 bagian)
Dibiarkan selama 5 hari terlindung dari cahaya

matahari sambil sesekali di aduk
Disaring dan di peras
Ampas
Dicuci dengan 2,5 liter pelarut

Maserat I
etanol 8 0% hingga di peroleh 100
bagian
Disaring
Digabungkan
Maserat II Ampas Etanol

Dibiarkan selama 2 hari terlinding dari
cahaya matahari
Dienap tuangkan dan di saring
Diuapkan pelarut dengan rotary evaporator
Dipekatkan diatas penangas air sampai

diperoleh ekstrak kental
Ekstrak kental etanol
Dimasukkan ke dalam freezer
Ekstrak Kering Polar Daun

Kelapa Sawit
48
Lampiran 3.Gambar tumbuhan kelapa sawit (Elaeis guineensis Jacq)
Tumbuhan kelapa sawit
Helaian daun kelapa sawit
49
Lampiran 4. Bagan pengerjaan uji toleransi glukosa
45 ekor tikus
Tikus dipuasakan selama 18 jam
Diukur KGD puasa tikus
Kontrol Kontrol Kontrol Sedian Uji Sedian Uji

negatif negatif positif
(minyak (Na CMC EENPDKSDPKS EPDPKS dengan
inti sawit) 0,5%) (Glibenklam dengan dosis: dosis:
untuk untuk id 0,45
mg/kg bb) (K I) (K I)
ekstrak ekstrak
non polar polar) (5 ekor) - 100 mg/kg bb - 100 mg/kg bb
(K II) (K II)
(5 ekor) (5 ekor)
- 150 mg/kg bb - 150 mg/kg bb
(K III) (K III)
Setelah 30 menit diberikan larutan

glukosa 50% dengan dosis 1% BB
Diukur KGD tikus setiap 30 menit
Hasil KGD tikus
Keterangan : ENDPKS = Ekstrak non polar daun kelapa sawit, EPDKS

= Ekstrak polar daun kelapa sawit,
K1 K2 K3 = Kelompok 1, 2, 3.
50
Lampiran 5. Bagan Pengerjaan uji efek antidiabetes dengan induksi aloksan
45 ekor tikus
Tikus dipuasakan selama 18 jam

Diukur KGD puasa tikus
Diinjeksikan larutan aloksan 150
mg/kgbb secara i.p.
Diukur kadar glukosa darah puasa
tikus pada hari ketiga, (≥ 200
mg/dl dianggap telah diabetes)
Tiap kelompok diberi perlakuan
Kontrol Kontrol Kontrol Sedian Uji Sedian Uji

negatif negatif (Na positif
EENPDKSDPKS EPDPKS dengan
(minyak inti CMC 0,5%) (Metformin
dengan dosis: dosis:
sawit) untuk
45 mg/kg
untuk ekstrak (K I) (K I)
bb)
ekstrak non polar)
polar - 100 mg/kg bb - 100 mg/kg bb
(5 ekor)
(5 ekor) (K II) (K II)
- 150 mg/kg bb - 150 mg/kg bb
Diukur KGD pada hari ke-4, 8, 12,
Hasil KGD tikus
Keterangan : ENDPKS = Ekstrak non polar daun kelapa sawit, EPDKS

= Ekstrak polar daun kelapa sawit,
K1 K2 K3 = Kelompok 1, 2, 3.
51
13/04/2020
PROPOSAL PENELITIAN
“PERBANDINGAN EFEKTIVITAS ANTIDIABETES EKSTRAK
ALOKSAN.”
174301080
PENDAHULUAN
Mebhidrolin napadisilat adalah generasi pertama antihistamin yang berguna
untuk mengobati alergi, yang bekerja untuk menghambat sistem saraf pusat.
Mebhidrolin Napadisilat digunakan sebagai obat antihistamin dan antialergi
yang dimana suatu senyawa antihistamin sedatif telah diformulasi dalam bentuk
sediaan farmasi namun uji penetapan kadarnya belum tercantum dalam buku
acuan resmi atau belum memiliki metode penetapan kadar yang terpublikasi
(Criado dkk., 2010).
1
13/04/2020
PENDAHULUAN
Metode spektrofotomeri ultraviolet (UV), kemungkinan dapat digunakan untuk
penetapan kadar mebhidrolin napadisilat dalam sediaan tablet karena struktur
mebhidrolin napadisilat memiliki gugus kromofor dan gugus auksokrom.
Berdasarkan uraian diatas, maka dalam penelitian ini dilakukan uji validasi
metode dengan parameter akurasi, presisi, LOD, LOQ dan penetapan kadar
tablet yang beredar di pasaran dengan menggunakan campuran pelarut
methanol dan NH4OH secara spektrofotometri ultraviolet.
RUMUSAN MASALAH
◦ Apakah metode spektrofotometri ultraviolet dengan
menggunakan campuran pelarut metanol dan NH4OH pada
penetapan kadar mebhidrolin napadisilat dalam sediaan tablet
memenuhi persyaratan uji validasi ?
◦ Apakah kadar mebhidrolin napadisilat dalam sediaan tablet yang

dipasaran memenuhi persyaratan kadar umum menurut
Farmakope Indonesia edisi V?
2
13/04/2020
HIPOTESIS
◦ Metode spektrofotometri ultraviolet menggunakan campuran
pelarut metanol dan NH4OH dapat digunakan pada penetapan
kadar mebhidrolin napadisilat dalam sediaan tablet dan
memberikan uji validasi metode yang memenuhi persyaratan.
◦ Kadar mebhidrolin napadisilat dalam sediaan tablet yang

terdapat dipasaran memenuhi persyaratan kadar umum menurut
Farmakope Indonesia edisi V.
TUJUAN PENELITIAN
◦ Untuk menguji validasi dari metode spektrofotometri ultraviolet
pada penetapan kadar mebhidrolin napadisilat tablet dengan
menggunakan campuran pelarut metanol dan NH4OH.
◦ Untuk menguji kesesuaian kadar mebhidrolin napadisilat dalam

sediaan tablet yang terdapat dipasaran dengan persyaratan kadar
umum menurut Farmakope Indonesia edisi V.
3
13/04/2020
MANFAAT PENELITIAN
◦ Hasil penelitian ini diharapkan dapat diperoleh data yang objektif
dan memberikan informasi penting tentang validasi metode pada
penentuan kadar mebhidrolin napadisilat dalam sediaan tablet
secara spektrofotometri ultraviolet.
◦ Hasil penelitian diharapkan menjadi informasi bagi masyarakat

mengenai kadar zat aktif yang terkandung dalam sediaan obat
mebhidrolin napadisilat dalam sediaan tablet dari nama dagang.
TINJAUAN PUSTAKA
Mebhidrolin napadisilat adalah salah satu obat antihistamin generasi pertama.
Antihistamin dalam dosis terapi, efektif untuk mengobati edema, eritem dan
pruritus tetapi tidak dapat melawan efek hipersekresi asam lambung akibat
histamin. Antihistamin tersebut digolongkan dalam antihistamin penghambat
reseptor H1(AH1). Antihistamin yang dapat menghambat sekresi asam lambung
akibat histamin, antihistamin ini di golongkan sebagai antihismin penghambat
reseptor AH2 kedua jenis antihistamin ini bekerja secara kompetitif yaitu dengan
menghambat interaksi histamin dari reseptor histamin H1, H2, H3
4
13/04/2020
TINJAUAN PUSTAKA
Menurut MIMS (2018), efek samping yang paling sering terjadi yaitu :
 Sedasi
 Hipotensi
 Kelemahan otot
 Tinitus
 Euforia
 Stimulasi sistem saraf pusat
 Gangguan darah
METODE PENELITIAN
Waktu dan Tempat :
Penelitian ini dilakukan pada bulan Mei 2020 sampai dengan April 2020 di
Laboratorium Penelitian Fakultas Farmasi Universitas Tjut Nyak Dhien.
Sampel :
Pengambilan sampel dilakukan secara purposif, yaitu ditentukan atas dasar
pertimbangan bahwa sampel yang terambil mempunyai karakteristik yang sama
dengan yang diteliti. Sampel yang digunakan yaitu tablet mebhidrolin napadisilat
dengan berbagai nama dagang yang beredar di Wilayah Kota Medan
mengandung mebhidrolin napadisilat 50 mg.
5
METODE PENELITIAN
13/04/2020

Inda Aristika

Diunggah oleh

Informasi Dokumen

Judul Asli

Hak Cipta

Format Tersedia

Bagikan dokumen Ini

Bagikan atau Tanam Dokumen

Opsi Berbagi

Apakah menurut Anda dokumen ini bermanfaat?

Apakah konten ini tidak pantas?

Hak Cipta:

Format Tersedia

Inda Aristika

Diunggah oleh

Hak Cipta:

Format Tersedia

PERBANDINGAN EFEKTIVITAS ANTIDIABETES EKSTRAK

NON POLAR DAN POLAR DAUN KELAPA SAWIT (Elaeis

PROGRAM STUDI SARJANA FARMASI

PROGRAM STUDI SARJANA FARMASI

PERBANDINGAN EFEKTIVITAS ANTIDIABETES EKSTRAK

Dipertahankan di Hadapan Penguji Proposal Fakultas Farmasi Universitas

Disetujui oleh : Panitia Penguji :

Prof. Dr. Nasruddin Noer, M.Eng.Sc Dra. Hj. Juwairiah, M. Si

Ketua Program Studi Sarjana Farmasi,

Apt. Desy Natalia Siahaan, S.Farm., M.Farm.

Medan, 15 April 2020

Apt. Yessi Febriani S.Farm., M.Si.

Nasruddin Noer, M.Eng.Sc, yang telah membimbing dengan penuh kesabaran,

selaku penasehat akademik yang memberikan bimbingan dan motivasi kepada

penulis selama masa perkuliahan.

Penulis juga mengucapkan terima kasih dan penghargaan yang tulus

kepada Ibunda tersayang, keluarga tercinta dan teman-teman seperjuangan atas

penyelesaian proposal ini.

penulis berharap semoga proposal ini bermanfaat bagi ilmu pengetahuan

khususnya dibidang farmasi.

Medan, 15 April 2020

Latar Belakang. Daun kelapa sawit memiliki kandungan metabolit sekunder

Keywords: oil palm leaves, non-polar extract, polar extract, diabetes.

BAB I. PENDAHULUAN .................................................................................... 1

BAB II. TINJAUAN PUSTAKA .......................................................................... 7

DAFTAR PUSTAKA ......................................................................................... 51

3.1 Variasi perlakuan uji toleransi glukosa ........................................................ 38

1.1 Kerangka pikir penelitian ................................................................................ 6

1.1 Latar Belakang

Kelapa sawit merupakan salah satu jenis tanaman perkebunan di Indonesia

berkembang, sehingga pemanfaatannya sangat perlu ditingkatkan mengingat

Indonesia merupakan sumber penghasil kelapa sawit.

Umumnya kandungan kimia tanaman terdiri atas senyawa yang bersifat

berdasarkan tingkat kepolaran untuk mengetahui secara kualitatif maupun

kuantitatif keberadaanya pada tanaman tersebut. Metode ekstraksi untuk

pemisahan metabolit sekunder menggunakan prinsip kelarutan like dissolve like,

senyawa non polar pemisahan pertama terhadap sampel menggunakan pelarut

heksana dengan tujuan untuk memisahkan senyawa-senyawa non polar termasuk

pelarut polar seperti etanol (Widyawati dkk, 2014).

Berdasarkan pengujian fitokimia secara kualitatif oleh Sasidharan dkk

(2010), ekstrak metanol daun kelapa sawit mengandung senyawa metabolit

sekunder seperti tanin, alkaloid, flavonoid, steroid, saponin, terpenoid.

beberapa penyakit. Beberapa penelitian menyebutkan daun kelapa sawit memiliki

aktivitas antioksidan (Vijayarathna, dkk., 2012), antihipertensi (Jaffri, dkk.,

2011), antibakteri (Chong, dkk., 2008), antidiabetes (Rajavel, dkk., 2012;

Vijayarathna, dkk., 2012) dan stimulan untuk penyembuhan luka (Sasidharan,

dkk., 2010; Hasibuan, 2015).

Penyakit diabetes telah memiliki banyak alternatif pengobatan secara

tradisional, namun terkadang memiliki kendala pada skala produksi atau

ketersediaan tanaman yang kurang. Berdasarkan penelitian Gulfraz dkk (2007),

mg/dL, sedangkan hipoglikemia bila kadarnya lebih rendah dari 70 mg/dL.

Peningkatan glukosa darah yang tidak normal dapat menyebabkan oksidasi

terbentuk tersebut dapat berakibat kerusakan pankreas. Dalam upaya untuk

memperkuat pertahanan jaringan tersebut dari oksidasi, beberapa strategi

termasuk pemberian antioksidan alami (Jain dkk, 2000).

Daun kelapa sawit memiliki kandungan metabolit sekunder yang

kompleks, dimana senyawa-senyawa tersebut bertindak sebagai antioksidan.

yang di induksi oleh streptozotosin (STZ).

Penelitian sebelumnya juga dilakukan oleh Rajavel dkk (2012), dimana

Berdasarkan penelitian sebelumnya dilakukan oleh Haro (2015), dimana ekstrak

Berdasarkan hal tersebut, sangat menarik untuk dilakukan penelitian yang

bertujuan untuk melakukan identifikasi dan penetapan kadar kandungan metabolit

terhadap tikus yang mengalami diabetes.