Diterjemahkan dari bahasa Inggris ke bahasa Indonesia - www.onlinedoctranslator.

com

nutrisi
Artikel

Asupan Karbohidrat Tidak Melawan

Penurunan Sitotoksisitas Sel Pembunuh
Alami Pasca Latihan
Laurel M. Wentz 1, David C. Nieman 2,* , Jennifer E. McBride 2, Nicholas D. Gillitt 3,
Leonard L. Williams 4 dan Renaud F. Warin 3
1 Departemen Manajemen Nutrisi dan Perawatan Kesehatan, Appalachian State University,
Boone, NC 28608, AS; gozlm@appstate.edu
2 Laboratorium Kinerja Manusia, Universitas Negeri Appalachian, Kampus Penelitian Carolina Utara,
Kannapolis, NC 28081, AS; mcbrideje@appstate.edu
3 Laboratorium Penelitian Nutrisi Dole, Kampus Penelitian Carolina Utara, Kannapolis, NC 28081, AS;
nicholas.gillitt@dole.com (NDG); renaudwarin@gmail.com (RFW)
4 Pusat Keunggulan dalam Teknologi Pasca Panen, Kampus Penelitian Carolina Utara,
Kannapolis, NC 28081, AS; llw@ag.ncat.edu
* Korespondensi: niemandc@appstate.edu ; Telp.: +1-828-773-0056

---- -
Diterima: 16 Oktober 2018; Diterima: 31 Oktober 2018; Diterbitkan: 4 November 2018 ---

Abstrak: Dalam sebuah penelitian menggunakan pendekatan crossover acak, pengendara sepeda (n = 20,
puasa semalaman) terlibat dalam tiga percobaan waktu 75 km sambil menelan air (WAT) atau karbohidrat (0,2
g/kg setiap 15 menit) dari pisang (BAN) atau minuman gula 6% (SUG). Sampel darah dikumpulkan sebelum
latihan dan 0 jam, 1,5 jam, dan 21 jam setelah latihan dan dianalisis untuk aktivitas sitotoksisitas pembunuh
alami (NK) menggunakan populasi sel NK murni. Dua percobaan karbohidrat (BAN, SUG) dibandingkan
dengan WAT dikaitkan dengan glukosa pasca-latihan yang lebih tinggi dan kortisol yang lebih rendah, jumlah
leukosit darah, neutrofil, dan sel NK (efek interaksi,P < 0,001). Peningkatan jumlah sel NK segera setelah
latihan lebih tinggi pada WAT (78%) dibandingkan dengan uji coba BAN (32%) dan SUG (15%) (P ≤ 0,017).
Penurunan 1,5 jam pasca latihan dalam jumlah sel NK tidak berbeda setelah WAT (-46%), BAN (-46%), dan SUG
(-51%) percobaan. Pola perubahan NKCA pasca latihan berbeda antara percobaan (P < 0,001). Penurunan
NKCA 1,5 jam pasca latihan masing-masing adalah 23%, 29%, dan 33% pada uji WAT, BAN, dan SUG, tetapi
kontras uji coba tidak berbeda secara signifikan. Konsumsi karbohidrat dari BAN atau SUG melemahkan
peningkatan jumlah leukosit, neutrofil, dan sel NK segera setelah latihan, tetapi tidak melawan penurunan 1,5
jam dalam jumlah sel NK dan NKCA.

Kata kunci: Kekebalan; leukosit; limfosit; aliran sitometri; glukosa; olahraga

1. Perkenalan

Sel pembunuh alami (NK) adalah elemen penting dari sistem kekebalan bawaan dan memiliki kapasitas
untuk mengenali dan menghilangkan sel abnormal dengan cepat melalui kontak sel ke sel dan tanpa aktivasi
sebelumnya. Studi sebelumnya menunjukkan bahwa olahraga yang intens dan berkepanjangan secara
sementara menurunkan fungsi sel NK, menciptakan jendela penekanan kekebalan pasca-olahraga yang dapat
meningkatkan risiko infeksi.1]. Latihan intensif yang berlangsung lebih dari 90 menit menyebabkan penurunan
35-60% aktivitas sitotoksik sel NK (NKCA) hingga 6 jam setelah latihan.1,2]. Karbohidrat yang dikonsumsi
selama latihan melemahkan respon imun pasca latihan dengan meningkatkan glukosa plasma dan insulin
sambil mengurangi hormon stres (misalnya, epinefrin, kortisol) [3]. Dibandingkan dengan air, karbohidrat telah
terbukti menekan pelepasan total leukosit, neutrofil, monosit, dan limfosit pasca-olahraga, termasuk sel NK.1,4
]. Khususnya, pisang telah terbukti cocok dengan iklan

Nutrisi 2018, 10, 1658; doi:10.3390/nu10111658 www.mdpi.com/journal/nutrients

Nutrisi 2018, 10, 1658 2 dari 8

kemampuan larutan karbohidrat untuk melemahkan respons inflamasi pasca-latihan, dengan manfaat
tambahan meningkatkan dopamin sambil menurunkan ekspresi mRNA COX-2 [5,6]. Banyak metabolit pisang
lainnya meningkat dalam sirkulasi setelah konsumsi akut, dan ini mungkin memiliki pengaruh pada respon
imun pasca-olahraga.6]. Sementara karbohidrat telah terbukti mengurangi jumlah sel NK setelah berolahraga,
mereka belum ditemukan untuk melawan penurunan NKCA yang disebabkan oleh olahraga, dan buah-buahan
yang kaya polifenol (misalnya, pisang) belum diuji hingga saat ini.
Penafsiran data yang ada telah dipertanyakan, bagaimanapun, karena masalah metodologis. Kami baru-baru ini
mengembangkan uji yang sangat andal untuk NKCA dalam sampel darah manusia segar untuk mengurangi masalah analisis
yang terkait dengan penggunaan gradien Ficoll, viabilitas dan stabilitas, dan throughput yang tinggi [7]. Metode sel NK ini
menggunakan penyortir sel berbasis magnet untuk menghasilkan populasi sel NK murni dan pencitraan flow cytometer
dengan rasio target-to-effector (T:E) yang dioptimalkan yang meningkatkan deteksi efek yang disebabkan oleh olahraga pada
NKCA. Penelitian sebelumnya untuk mendeteksi NKCA mengandalkan persamaan matematika untuk menghitung
sitotoksisitas pada basis per-NK-sel.
Tujuan dari penelitian ini adalah untuk membandingkan respons NKCA terhadap bersepeda sejauh 75 km
pada individu aktif yang mengonsumsi karbohidrat dari pisang Cavendish atau minuman gula 6% dengan air
menggunakan uji NKCA target yang dioptimalkan. Studi ini memajukan keadaan literatur saat ini dengan
menggunakan populasi sel NK murni dan menunjukkan bahwa penurunan NKCA terjadi setelah latihan intensif
dan berkepanjangan, tetapi tidak sejauh yang dilaporkan sebelumnya. Suplementasi karbohidrat baik oleh
buah pisang atau minuman gula 6% tidak melawan pengurangan NKCA pasca-latihan, dan temuan ini
konsisten dengan publikasi sebelumnya meskipun penggunaan populasi sel NK murni.

2. Bahan-bahan dan metode-metode

2.1. Peserta
Data metabolomik dari penelitian ini telah dipublikasikan sebelumnya [6], dan data dalam makalah ini
merangkum respons NK terhadap stres olahraga dan asupan karbohidrat. Peserta termasuk 20 pengendara sepeda
pria dan wanita (usia 22-50 tahun) yang secara teratur berkompetisi di balapan jalan raya (kategori 1 hingga 5) dan
mampu bersepeda sejauh 75 km dengan kecepatan balapan di lingkungan laboratorium. Peserta mempertahankan
rejimen pelatihan khas mereka dan menghindari penggunaan suplemen vitamin dan mineral, herbal, dan obat-
obatan selama pengumpulan data. Peserta secara sukarela menandatangani informed consent, dengan prosedur
studi yang disetujui oleh Institutional Review Board universitas (Pendaftaran percobaan: ClinicalTrials.gov, Institut
Kesehatan Nasional AS, pengenal: NCT02994628).

2.2. Desain penelitian

Studi ini menggunakan pendekatan crossover acak, dan peserta terlibat dalam tiga kali uji
coba bersepeda 75 km sambil menelan air saja (WAT), pisang Cavendish (BAN), atau minuman
karbohidrat 6% (SUG), dipisahkan masing-masing 2 minggu (tidak menyilaukan). ). Sebelum uji
waktu bersepeda, daya maksimal, konsumsi oksigen, ventilasi, dan detak jantung diukur selama tes
latihan bertingkat (kenaikan 25 watt setiap 2 menit, mulai dari 150 watt) dengan keranjang
metabolisme Cosmed Quark CPET (Cosmed, Roma, Italia) dan ergometer siklus Lode (Lode
Excalibur Sport, Lode BV, Groningen, Belanda). Komposisi tubuh diukur dengan penganalisis
komposisi tubuh Bod Pod (Life Measurement, Concord, CA, USA). Demografi dan sejarah pelatihan
diperoleh dengan kuesioner.
Peserta diminta untuk mengurangi volume latihan olahraga mereka seolah-olah mempersiapkan perlombaan
sebelum setiap uji coba waktu bersepeda 75 km. Peserta setuju untuk menelan diet karbohidrat sedang selama
periode 3 hari sebelum setiap sesi latihan menggunakan daftar makanan yang membatasi makanan tinggi lemak,
dan untuk mencatat asupan dalam log makanan. Asupan nutrisi dinilai menggunakan sistem perangkat lunak Food
Processor v. 11.1 (ESHA Research, Salem, OR, USA).
Untuk setiap percobaan, peserta melaporkan ke Laboratorium Kinerja Manusia pada 06:45 dalam keadaan puasa
semalaman (tidak ada makanan atau minuman selain air selama minimal 9 jam) dan memberikan darah sebelum latihan.
Nutrisi 2018, 10, 1658 3 dari 8

Sampel. Peserta kemudian menelan 5 mL/kg air saja, atau air dengan 0,4 g/kg karbohidrat dari pisang
Cavendish (tahap kematangan 5 atau 6), atau minuman gula 6% sesuai dengan jadwal acak. Sekitar pukul
07:15, para pengendara sepeda melakukan pemanasan dan bersepeda sejauh 75 km dengan intensitas
kecepatan balapan menggunakan sepeda mereka sendiri di pelatih CompuTrainer Pro Model 8001 (RacerMate,
Seattle, WA, USA). Sistem perangkat lunak CompuTrainer MultiRider (versi 3.0, RacerMate, Seattle, WA, USA)
digunakan untuk mensimulasikan jalur pegunungan sepanjang 75 km yang cukup sulit. Output daya dalam
watt terus dipantau, dengan detak jantung dicatat setiap 30 menit. Konsumsi oksigen dan ventilasi diukur
selama 2 bagian level dari jalur balapan (16 dan 56 km) menggunakan kereta metabolik Cosmed Quark CPET.
Setiap 15 menit, peserta mengkonsumsi 3 mL/kg air, atau air dengan 0. 2 g/kg karbohidrat dari pisang, atau
minuman gula 6%. Tidak ada minuman atau makanan lain yang diizinkan selama uji coba waktu bersepeda dan
pemulihan 1,5 jam. Sampel darah diambil melalui pungsi vena segera, 1,5 jam, dan 21 jam setelah latihan
setelah menyelesaikan masing-masing uji coba waktu 75 km. Sampel 21 jam pasca-latihan diperoleh dari
peserta pada ~ 07.00 dalam keadaan puasa semalam. Semua sampel darah disentrifugasi, dipisahkan, dan
disimpan di-80 ◦C sampai analisis. 3 percobaan dipisahkan oleh 2 minggu, setelah itu peserta menyeberang ke
kondisi acak berikutnya dan mengulangi semua prosedur.

2.3. Metode analitis

2.3.1. Hitung Darah Lengkap, Glukosa, Kortisol

Hitung darah lengkap (CBC) dengan sel darah putih (WBC) diferensial dilakukan menggunakan
Coulter Ac·TTM 5diff Hematology Analyzer (Beckman Coulter Inc., Miami, FL, USA). Pergeseran volume
plasma yang diinduksi oleh olahraga dihitung menggunakan persamaan Dill dan Costill [7]. Glukosa
plasma diukur menggunakan YSI 2300 STAT Plus Glucose and Lactate analyzer (YSI Life Sciences, Yellow
Springs, OH, USA). Kortisol plasma diukur menggunakan platform ultraperformance liquid
chromatography-tandem mass spectrometry (UPLC-MS/MS), Waters Acquity UPLC, dan spektrometer
massa Thermo Scientific Q-Exactive (Thermo Scientific, Waltham, MA, USA).

2.3.2. Uji Sel Pembunuh Alami

Analisis aliran sitometrik aktivitas sitotoksisitas sel pembunuh alami (NKCA) diukur dalam sampel
darah lengkap menggunakan prosedur McBride et al. [8]. Singkatnya, segera setelah setiap pengambilan
darah, populasi murni sel NK diisolasi dari 1 mL darah lengkap yang diberi label CD56+ MicroBeads dan
diproses melalui autoMACS Pro Separator (Miltenyi Biotech, Bergisch Gladbach, Jerman). Jumlah sel NK
diperoleh dengan menggunakan hemositometer. Sel target K562 (Koleksi Budaya Tipe Amerika,
Rockville, MD, USA) diwarnai dengan 3,3kan-diotadecyloxacarbocyanine perchlorate (DiO) dan/atau
propidium iodide (PI) dye, sebagai berikut: sel K562 berlabel DiO- dan PI tersuspensi ulang (double
positive), sel K562 berlabel DiO (hanya DiO), dan sel K562 berlabel PI ( hanya PI). Rasio optimal sel efektor
NK (E) terhadap sel target berlabel K562-DiO (T) diuji dan ditetapkan pada 1:5 E:T. Sel target dan efektor
kemudian digabungkan dalam 500μL media sel NK tanpa interleukin-2 (IL-2) dan 2-mercaptoethanol (2-
ME) (media kultur sel NK tidak lengkap), dan diinkubasi selama 2 jam pada 5% CO2/37 ◦C. Sampel spontan
disiapkan dengan sel K562 berlabel DiO hanya dalam media kultur sel NK yang tidak lengkap.

Setelah inkubasi, sitotoksisitas NK diukur menggunakan Amnis ImageStream®X Mark II

Imaging Flow Cytometer (EMD Millipore, Burlington, MA, USA) (Gambar 1). Kontrol dianalisis
sebelum sampel eksperimental dalam urutan berikut: positif ganda, hanya DiO, dan PI saja. Data
eksperimen diolah menggunakan software IDEAS (aplikasi versi 6.2.64.0). Persentase target mati
dalam sampel spontan dan sampel eksperimental ditentukan dengan menggunakan rumus berikut:
% target mati dalam sampel = (#target mati× 100)/(#target hidup + #target mati).
Sitotoksisitas NK ditentukan dengan menggunakan rumus berikut:

% sitotoksisitas = [(Eksperimen mati - Mati spontan)/(100 - Mati spontan)] × 100. (1)

Nutrisi 2018, 10, 1658 4 dari 8

Gambar 1. Data gambar dikumpulkan dari ImageStream®X Mark II Imaging Flow Sitometer. Di bagian
tengah, sel target (K562) diberi label warna hijau (diotadecyloxacarbocyanine perchlorate, DiO) dan sel
yang sekarat diberi label warna merah (propidium iodide, PI). Gambar di ujung mewakili peristiwa ganda
yang menunjukkan sel pembunuh alami (NK) apoptosis dan target K562 hidup. (SEBUAH) Histogram
analisis sel fokus; (B) scatterplot analisis sel tunggal; (C) plot sebar analisis pewarnaan sel target.

2.4. Prosedur Statistik

Data disajikan sebagai mean ± kesalahan standar (SE). Data imun dianalisis menggunakan 3 (trial)× 4
(waktu) ANOVA ukuran berulang, desain dalam peserta, dengan IBM SPSS Statistics for Windows, Versi 24.0
(IBM Corp., Armonk, NY, USA). Perubahan dari waktu ke waktu dalam uji coba dikontraskan antara uji coba
menggunakan uji-t berpasangan terkoreksi Bonferroni. Perbedaan statistik diterima ketikaP-nilai adalah ≤
0,017. Jumlah peserta studi (n = 20) memberikan daya 84% untuk mendeteksi perbedaan dengan ukuran efek
0,7 pada alfa 0,05 menggunakan berpasangan 2 sisi T-tes.

3. Hasil

Analisis ini melibatkan 20 pengendara sepeda (14 laki-laki, 6 perempuan) yang berhasil mengikuti semua
aspek desain penelitian. Usia pesepeda pria dan wanita tidak berbeda (37,1 .).± 2.5 dan 43,7 ± 2,2 tahun,
masing-masing, P = 0,126), volume pelatihan (118 ± 13.6 dan 136 ± 24,1 km/minggu, P = 0,520), komposisi
tubuh (19,5 ± 1,3% dan 18,8 ± 1,9% lemak, P = 0,763), atau VO2maks (47.0 ± 1,5 dan 46,5 ± 2,8 mL·kg.-1
min-1, P = 0,861). Data untuk pesepeda pria dan wanita digabungkan untuk semua analisis dalam makalah ini. Catatan makanan tiga
hari yang dikumpulkan sebelum masing-masing dari tiga percobaan waktu bersepeda 75 km mengungkapkan tidak ada perbedaan
percobaan yang signifikan dalam asupan energi, karbohidrat, dan zat gizi mikro (data tidak ditampilkan).
Waktu pertunjukan (180 ± 4.8, 176 ± 4,5, 178 ± 3,7 menit), konsumsi oksigen absolut (2,53 ± 0,89, 2,62 ±
1,06, 2,45 ± 0,93 L/mnt), detak jantung (142 ± 2,6, 140 ± 3.4, 143 ± 2,8 denyut/menit), dan volume plasma
menurun (-12.2 ± 1,2%, -8.1 ± 1,0%, -11.1 ± 1,5%) tidak berbeda nyata (semua P > 0,05) selama uji coba BAN dan
SUG dibandingkan dengan kondisi WAT. Data glukosa plasma dan kortisol telah dipublikasikan sebelumnya [6].
Singkatnya, glukosa plasma meningkat secara signifikan selama 1,5 jam pertama pasca-olahraga dalam uji
coba BAN dan SUG dibandingkan dengan uji coba air, dengan peningkatan yang signifikan dalam glukosa
plasma dalam kondisi WAT setelah makan siang (dikonsumsi setelah 1,5 jam pasca-latihan). pengambilan
darah) (efek interaksi,P < 0,001). Perubahan kadar kortisol plasma secara signifikan lebih rendah selama 1,5
jam pertama pemulihan dari latihan dengan BAN (42%) dan konsumsi SUG (32%) dibandingkan dengan WAT
(efek interaksi,P < 0,001).
Pola perubahan jumlah leukosit, neutrofil, limfosit, dan monosit darah pasca latihan secara
signifikan berbeda antara percobaan (semua efek interaksi, P < 0,01), dengan jumlah leukosit dan
neutrofil total yang lebih rendah selama pemulihan 1,5 jam pertama untuk uji coba BAN dan SUG
Nutrisi 2018, 10, 1658 5 dari 8

dibandingkan dengan WAT (Tabel 1). Pola perubahan jumlah sel NK pasca latihan berbeda secara signifikan
antara percobaan (efek interaksi,P < 0,001), dengan peningkatan segera setelah latihan setelah uji coba WAT
(78%) secara signifikan lebih tinggi daripada setelah uji coba BAN (32%) dan SUG (15%) (keduanya kontras, P ≤
0,017) (Gambar 2). Penurunan jumlah sel NK 1,5 jam pasca latihan tidak berbeda secara signifikan setelah WAT
(-46%), BAN (-46%), dan SUG (-51%) percobaan. Pola perubahan NKCA pasca latihan berbeda antara percobaan
(efek interaksi,P < 0,001 (Gambar 3). Penurunan NKCA 1,5 jam pasca latihan masing-masing adalah 23%, 29%,
dan 33% pada uji WAT, BAN, dan SUG, tetapi kontras uji coba tidak berbeda secara signifikan.

Gambar 2. Perubahan jumlah sel pembunuh alami per mililiter darah lengkap setelah bersepeda sejauh 75 km n
= 20 pengendara sepeda (segera, 1,5 jam, dan 21 jam setelah latihan). *P ≤ 0,017 dibandingkan dengan
perubahan dari pra-olahraga dalam kondisi air. Garis vertikal mewakili kesalahan standar. Efek waktu,P < 0,001;
waktu× efek percobaan, P < 0,001.

Gambar 3. Perubahan sitotoksisitas sel pembunuh alami setelah bersepeda sejauh 75 km n = 20 pengendara
sepeda (segera, 1,5 jam, dan 21 jam setelah latihan). Perubahan dari pra-latihan dalam uji coba minuman pisang
dan gula tidak berbeda dari uji coba air. Garis vertikal mewakili kesalahan standar. Efek waktu,P = 0,014; waktu×
efek percobaan, P < 0,001.
Nutrisi 2018, 10, 1658 6 dari 8

Tabel 1. Perubahan jumlah subset leukosit setelah bersepeda sejauh 75 km n = 20 pengendara sepeda (segera, 1,5 jam,
dan 21 jam setelah latihan).

Variabel Air Pisang Cavendish Minuman Gula P-Nilai (Efek Waktu; Efek Interaksi)
Jumlah leukosit darah (109/L)
Pra-latihan 5.15 ± 0,3 5.16 ± 0.4 5.24 ± 0.4 <0,001; <0,001
Segera setelah latihan 1,5 15.6 ± 1.3 10.5 ± 0,7 * 9.70 ± 0,6 *
jam setelah latihan 12.2 ± 1.0 9.11 ± 0,5 * 9.07 ± 0,6 *
21 jam setelah latihan 5.72 ± 0.4 5.09 ± 0,3 5.13 ± 0,3

Jumlah neutrofil (109/L)

Pra-latihan 2.50 ± 0.2 2.48 ± 0.2 2.71 ± 0,3 <0,001; <0,001
Segera setelah latihan 1,5 11.7 ± 1.1 7.34 ± 0,6 * 6.71 ± 0,5 *
jam setelah latihan 10.0 ± 0.9 6.82 ± 0,5 * 6.86 ± 0,5 *
21 jam setelah latihan 3.05 ± 0,3 2.49 ± 0,2 * 2.66 ± 0,2 *

Jumlah limfosit (109/L)

Pra-latihan 1.98 ± 0.1 2.01 ± 0.1 1.87 ± 0.1 <0,001; 0,009
Segera setelah latihan 1,5 2.53 ± 0.1 2.28 ± 0.2 2.11 ± 0.1
jam setelah latihan 1.26 ± 0.1 1.55 ± 0.1 1.46 ± 0.1
21 jam setelah latihan 1.98 ± 0.1 1.94 ± 0.1 1.78 ± 0.1

Jumlah monosit (109/L)

Pra-latihan 0.43 ± 0.1 0.43 ± 0.1 0,42 ± 0.1 <0,001; 0,006
Segera setelah latihan 1,5 1.01 ± 0.1 1.02 ± 0.1 1.12 ± 0,1 *
jam setelah latihan 0,71 ± 0.1 0,80 ± 0,1 * 0,80 ± 0,1 *
21 jam setelah latihan 0,46 ± 0.1 0,50 ± 0.1 0,50 ± 0,1 *
* P < 0,017 dibandingkan dengan perubahan dari pra-olahraga dalam kondisi air.

4. Diskusi

Studi crossover acak ini menggunakan populasi sel NK murni untuk menganalisis perubahan
NKCA setelah uji coba bersepeda 75 km dengan suplementasi karbohidrat dari minuman gula 6%
atau buah pisang dibandingkan dengan air. Data kami menunjukkan bahwa suplementasi
karbohidrat melemahkan peningkatan segera setelah latihan dalam jumlah sel NK tetapi ini tidak
diterjemahkan ke dalam peningkatan sitotoksisitas di seluruh pemulihan. NKCA menurun pasca-
latihan di semua perawatan, dan baik fenolat pisang maupun gula dari karbohidrat melemahkan
respons NKCA pasca-latihan. Ada perbedaan kecil namun signifikan secara statistik dalam pola
perubahan NKCA di seluruh perawatan, meskipun tidak signifikan pada titik waktu tertentu, dan
perbedaannya terlalu kecil untuk signifikan secara klinis. Menggunakan metodologi canggih,

Studi sebelumnya telah melaporkan perubahan signifikan dalam jumlah sel NK dan sitotoksisitas setelah latihan
daya tahan, dan data dalam penelitian ini mengkonfirmasi temuan ini, meskipun pada besaran yang lebih rendah.
Perbedaan metodologi pengujian NKCA, terutama penggunaan populasi sel NK murni dalam penelitian ini, dapat
menjelaskan kontras antara penelitian. Penelitian awal menunjukkan bahwa NKCA berkurang 60% pada 1 jam [2] dan
58% pada 1,5 jam [1] pasca-olahraga, sedangkan data kami mendukung penurunan yang kurang mencolok dari 23%,
29%, dan 33% dalam uji coba WAT, BAN, dan SUG, masing-masing, pada 1,5 jam pasca-latihan, tanpa perbedaan yang
signifikan antara uji coba. Data ini konsisten dengan temuan sebelumnya yang menunjukkan bahwa konsumsi
karbohidrat tidak secara efektif melawan penurunan NKCA pasca-olahraga [1,2,9]. Henson dkk. [10], misalnya,
menemukan bahwa NKCA tidak lebih rendah dengan suplementasi karbohidrat dibandingkan dengan plasebo air
setelah pemulihan 3 jam dari 2,5 jam latihan daya tahan pada 75% VO2maks. Data kami menunjukkan bahwa NKCA
pada 1,5 jam setelah latihan sedikit lebih rendah dengan konsumsi SUG, tetapi ini tidak berbeda secara signifikan dari
uji coba BAN atau WAT. Beberapa tetapi tidak semua peneliti telah menemukan bahwa respons NKCA untuk
melakukan perubahan paralel dalam jumlah sel NK [1,2,9,10]. Dalam penelitian ini, pola perubahan jumlah sel NK
berbeda dari NKCA, menunjukkan lonjakan pasca-latihan langsung yang lebih besar dengan WAT (78%) vs karbohidrat
(32% dalam BAN dan 15% dalam percobaan SUG), meskipun semua pengobatan turun 46-51% di bawah baseline
dengan 1,5 jam pasca-latihan tanpa perbedaan yang signifikan antara percobaan. Sebagian besar penelitian telah
mendukung efek karbohidrat dalam melemahkan lonjakan sel NK pasca-latihan. Setelah 2,5 jam latihan daya tahan,
suplementasi karbohidrat mengurangi respons sel NK pasca latihan menjadi 23–32% di atas baseline vs. peningkatan
81–91% dengan air saat berlari dan bersepeda
Nutrisi 2018, 10, 1658 7 dari 8

uji coba [10,11]. Penelitian telah secara konsisten menunjukkan bahwa 1,5 jam setelah latihan, jumlah sel NK
menurun menjadi 52-65% di bawah baseline tanpa suplementasi karbohidrat, yang mendukung temuan dalam
penelitian ini [1,10,11]. Namun, tidak semua penelitian mendukung efek signifikan karbohidrat pada
konsentrasi sel NK.2,9]. Nieman dkk. [2] menunjukkan bahwa karbohidrat tidak mempengaruhi jumlah sel NK
maupun NKCA setelah 2 jam bersepeda dibandingkan dengan air. Demikian juga, McFarlin et al. [9]
menemukan bahwa karbohidrat tidak mengubah pola sel NK atau NKCA setelah 1 jam siklus; Namun,
karbohidrat memang meningkatkanin vitro Respons sel NK terhadap IL-2.
Konsumsi karbohidrat mengubah beberapa respons imun terhadap olahraga, sebagaimana dibuktikan
oleh pelemahan peningkatan jumlah leukosit, neutrofil, dan sel NK total pasca-olahraga (Tabel 1).
Mengkonsumsi karbohidrat dari 6-8% minuman gula atau buah-buahan padat gula seperti pisang (dengan air)
selama olahraga berat yang berkepanjangan mengurangi konsentrasi epinefrin dan kortisol yang bersirkulasi,
menghasilkan pengurangan peradangan dan modulasi respons sel imun.3]. Pisang kaya akan fenolat yang
meningkatkan asam amino dan metabolit xenobiotik dan telah terbukti meningkatkan penanda antioksidan.5,6
]. Dalam penelitian ini, pisang cocok tetapi tidak melebihi minuman gula dalam memodulasi sel-sel kekebalan,
dan tidak memiliki efek yang signifikan pada NKCA. Konsentrasi sel NK lebih responsif terhadap latihan
daripada limfosit lain, sebagaimana dibuktikan oleh pelepasan sel yang cepat yang diinduksi oleh latihan ke
dalam aliran darah diikuti dengan penghabisan yang cepat setelah aktivitas berhenti.12]. Latihan
menyebabkan lonjakan epinefrin yang bersirkulasi, yang pada gilirannya memobilisasi sel NK ke dalam aliran
darah melalui aktivasi reseptor -adrenergik.13]. Sitokin IL-6 juga dilepaskan selama latihan dan mungkin
memainkan peran dalam redistribusi sel NK dari aliran darah ke jaringan.14]. Sel NK keluar dengan cepat dari
aliran darah [15], dan 1,5 jam setelah latihan telah turun di bawah konsentrasi sebelum latihan (Gambar 2).
Lonjakan epinefrin yang diinduksi oleh olahraga juga berumur pendek, karena penelitian sebelumnya telah
menunjukkan bahwa, meskipun pelemahan karbohidrat segera setelah latihan, konsentrasi epinefrin serupa
dengan dan tanpa suplementasi karbohidrat dan kembali ke dekat baseline dengan 1-1,5 jam setelah latihan.
latihan, menunjukkan efek pasca-latihan sementara [2,10,11]. Pelepasan cepat epinefrin dan sel NK segera
setelah latihan, diikuti oleh redistribusi cepat dari aliran darah, dapat menjelaskan mengapa karbohidrat tidak
melawan penurunan NKCA. Pada 1,5 jam pasca latihan, ketika NCKA mencapai titik nadirnya, konsentrasi sel
epinefrin dan NK telah kembali atau menurun dari awal. Dengan demikian, peningkatan konsentrasi epinefrin
dan sel NK tidak berarti peningkatan sitotoksisitas, sebagaimana dibuktikan dengan tidak adanya efek pada
NKCA.

5. Kesimpulan

Data kami menunjukkan bahwa suplementasi karbohidrat dari minuman gula 6% atau buah pisang selama uji
coba bersepeda 75 km mengurangi peningkatan jumlah leukosit, neutrofil, dan sel NK segera setelah latihan, tetapi
tidak melawan penurunan 1,5 jam dalam sel NK jumlah dan aktivitas sitotoksisitas sel NK terhadap sel target. Temuan
ini mendukung literatur sebelumnya yang menunjukkan bahwa karbohidrat tidak memodulasi pengurangan NKCA
yang diinduksi oleh olahraga menggunakan populasi sel NK murni dan pengujian yang ditargetkan.

Kontribusi Penulis: DCN, NDG, dan LLW menyusun eksperimen; DCN, JEM, NDG, LLW, dan RFW bertanggung
jawab atas metodologi; LMW, DCN, JEM, NDG, dan RFW menyelesaikan analisis formal; DCN dan NDG
menyelesaikan penyelidikan; LLW dan DCN menyediakan sumber daya; DCN, NDG, JEM, dan RFW terlibat dalam
kurasi data; LMW, DCN, dan RFW menulis dan menyiapkan draft aslinya; LMW, DCN, JEM, NDG, LLW, dan RFW
meninjau dan mengedit naskah; DCN, LLW, dan RFW mengawasi proyek; DCN mengelola proyek dan
memperoleh pendanaan.
Pendanaan: Penelitian ini didanai oleh Dole Foods, Inc., Westlake Village, CA, USA.

Konflik kepentingan: Dole Foods memberikan dukungan dalam bentuk gaji untuk NDG tetapi tidak memiliki peran
tambahan dalam desain studi, pengumpulan dan analisis data, keputusan untuk menerbitkan, atau persiapan naskah.
LMW, DCN, JEM, LLW, dan RFW menyatakan tidak ada benturan kepentingan.
Nutrisi 2018, 10, 1658 8 dari 8

Referensi
1. Nieman, DC; Henson, DA; Garner, EB; Butterworth, DE; Warren, BJ; Ucapkan, A.; Davis, JM; Fagoaga, ATAU;
Nehlsen-Cannarella, SL Karbohidrat mempengaruhi redistribusi sel pembunuh alami tetapi tidak aktivitas
setelah berjalan.Med. Sci. Olahraga1997, 29, 1318–1324. [CrossRef] [PubMed]
2. Nieman, DC; Henson, DA; Gojanovich, G.; Davis, JM; Murphy, EA; Mayer, EP; Pearce, S.; Dumke, CL; Ucapkan,
AC; McAnulty, SR; dkk. Pengaruh karbohidrat pada fungsi kekebalan setelah 2 jam bersepeda.
Res. Olahraga Med.2006, 14, 225–237. [CrossRef] [PubMed]
3. Nieman, DC; Wentz, LM Hubungan Menarik Antara Aktivitas Fisik dan Sistem Pertahanan Tubuh. JHS 2018,
dalam pers.
4. Nieman, DC; Fagoaga, ATAU; Butterworth, DE; Warren, BJ; Ucapkan, A.; Davis, JM; Henson, DA; Nehlsen-Cannarella,
SL Suplementasi karbohidrat mempengaruhi granulosit darah dan perdagangan monosit tetapi tidak berfungsi
setelah 2,5 jam atau berjalan.Saya. J.klin. nutrisi1997, 66, 153–159. [CrossRef] [PubMed]
5. Nieman, DC; Gillit, ND; Henson, DA; Sha, W.; Shanely, RA; Knab, AM; Cialdella-Kam, L.; Jin, F. Pisang sebagai
sumber energi selama latihan: Pendekatan metabolomik.PLoS SATU 2012, 7, e37479. [CrossRef] [PubMed]

6. Nieman, DC; Gillit, ND; Sha, W.; Esposito, D.; Ramamoorthy, S. Pemulihan metabolisme dari aktivitas berat setelah
pisang dibandingkan dengan konsumsi minuman gula atau air saja: Sebuah uji coba silang acak. PLoS SATU
2018, 13, e0194843. [CrossRef] [PubMed]
7. Dill, DB; Costill, DL Perhitungan persentase perubahan volume darah, plasma dan sel darah merah dalam
dehidrasi.J Appl Fisiol. 1974, 37, 247–248. [CrossRef] [PubMed]
8. McBride, JE; Meaney, MP; Yohanes, C.; Nieman, DC; Warin, Analisis Sitometrik Aliran RF Aktivitas Litik Sel
Pembunuh Alami dalam Darah Utuh Manusia.J. Eks.2017. [CrossRef] [PubMed]
9. McFarlin, BK; Flynn, MG; Stewart, LK; Timmerman, KL Asupan karbohidrat selama latihan ketahanan meningkatkan
responsivitas sel pembunuh alami terhadap IL-2.J. Aplikasi Fisiol. (1985)2004, 96, 271–275. [CrossRef] [PubMed]
10. Henson, DA; Nieman, DC; Blodgett, AD; Butterworth, DE; Ucapkan, A.; Davis, JM; Sonnenfeld, G.; Morton, DS;
Fagoaga, ATAU; Nehlsen-Cannarella, SL Pengaruh mode latihan dan karbohidrat pada respon imun terhadap
latihan yang berkepanjangan.Int. J. Nutrisi Olahraga.1999, 9, 213–228. [CrossRef] [PubMed]
11. Henson, DA; Nieman, DC; Parker, JC; Air hujan, MK; Butterworth, DE; Warren, BJ; Ucapkan, A.; Davis, JM;
Fagoaga, ATAU; Nehlsen-Cannarella, suplementasi SL Karbohidrat dan respons proliferasi limfosit untuk
lari dengan daya tahan lama.Int. J.Olahraga Med.1998, 19, 574–580. [CrossRef] [PubMed]
12. Bigley, AB; Rezvani, K.; Kunyah, C.; Sekin, T.; Pistillo, M.; Crucian, B.; Tonggak, CM; Simpson, RJ Latihan akut secara istimewa
menyebarkan kembali sel NK dengan fenotipe yang sangat berdiferensiasi dan menambah sitotoksisitas terhadap
limfoma dan sel target multiple myeloma.Perilaku Otak kekebalan.2014, 39, 160-171. [CrossRef] [PubMed]

13. Dimitrov, S.; Lange, T.; Lahir, J. Mobilisasi selektif leukosit sitotoksik oleh epinefrin.J. Imun. 2010, 184, 503–
511. [CrossRef] [PubMed]
14. Pedersen, L.; Idorn, M.; Olofsson, GH; Lauenborg, B.; Tidak, aku.; Hansen, RH; Johannesen, HH; Becker, JC;
Pedersen, KS; Dethlefsen, C.; dkk. Lari Sukarela Menekan Pertumbuhan Tumor melalui Mobilisasi dan
Redistribusi Sel NK yang Bergantung Epinefrin dan IL-6.Metab Sel. 2016, 23, 554–562. [CrossRef] [PubMed]

15. Rooney, BV; Bigley, AB; LaVoy, EC; Tertawa, M.; Pedlar, C.; Simpson, RJ Limfosit dan monosit keluar dari darah
perifer dalam beberapa menit setelah penghentian latihan kondisi mapan: Analisis temporal terperinci dari
ekstravasasi leukosit.Fisiol. perilaku2018, 194, 260–267. [CrossRef] [PubMed]

© 2018 oleh penulis. Penerima Lisensi MDPI, Basel, Swiss. Artikel ini adalah artikel akses
terbuka yang didistribusikan di bawah syarat dan ketentuan lisensi Creative Commons
Attribution (CC BY) (http://creativecommons.org/licenses/by/4.0/).