PROSEDUR KERJA

MIKROBIOLOGI
NAMA: REFLY DJORJI KWESAPUTRA
Prosedur Kerja Waktu
Pembuatan media bakteri: Media
pembenihan Nutrient Agar (NA) dibuat .
dengan cara menimbang Nutrient Agar
(NA) dilarutkan dalam aquadest dan
dimasukkan kedalam Erlenmeyer dan
.
panaskan di atas penangas air sampai
mendidih. Selanjutnya media tersebut
disterilkan dalam autoklaf pada suhu 121ºC
selama 15 menit pada tekanan 1 atm.

Peremajaan Bakteri: Peremajaan

bakteri dilakukan dengan menggunakan
metode gores. Biakan murni bakteri
Propionibacterium acnes diambil satu ose
kemudian diinokulasikan dengan cara
digoreskan pada media NA sebanyak ….
secara aseptik. Kemudian di inkubasi pada
suhu 37ºC selama 24 jam.

Pembuatan suspensi bakteri:

Pembuatan suspensi bakteri dilakukan
dengan cara mengambil 1-2 ose bakteri hasil
peremajaan, kemudian dimasukkan ke
dalam tabung reaksi yang berisi ml larutan
NaCl 0,9% hingga diperoleh kekeruhan
yang sama dengan standar kekeruhan
larutan McFarland (1x108 CFU/ml).

Pembuatan Larutan McFarland:

Standar McFarland dibuat dengan cara
 mencampur 9,95 ml asam sulfur (H2SO4)
1% dengan 0,05 ml barium klorida (BaCl2)
1%. Kemudian tabung disegel dan
digunakan untuk perbandingan suspensi
bakteri dengan standar. Larutan baku 0,5
Mc Farland ekuivalen dengan suspensi sel
bakteri dengan konsentrasi 1 x 108 CFU/ml
(Saeed dan Tariq, 2005).

Pengujian potensi antibakteri:

Sebanyak masing-masing 20µl suspensi
bakteri uji ditambahkan ke dalam cawan
petri kemudian ditambahkan 10 mL media
NA disetiap cawan. Cawan pertama
dimasukkan paper disc yang berisi kontrol
positif (kloramfenikol) dan kontrol negatif
(aquadest) sedangkan cawan yang kedua
berisi larutan putik bunga saffron, larutan
nanopartikel perak dan larutan nanopartikel
perak putik bunga saffron. Kemudian
diinkubasi selama 24 jam pada suhu 37ºC.
Zona hambat akan diamati setelah masa
inkubasi selama 24 jam.

1. Alat
Alat yang digunakan dalam penelitian ini meliputi seperangkat alat gelas
(Erlenmeyer) (1), autoklaf, batang pengaduk, cawan petri (4), inkubator, jarum ose (1),
kapas, lampu spritus, neraca analitik, tabung reaksi (2), oven, pipet.
2. Bahan
Bahan yang digunakan dalam penelitian ini meliputi aquadest, aqua pro injeksi,
bakteri Propionibacterium acnes, etanol 70%, kloramfenikol, Nutrient Agar (NA) (30
ml), larutan putik bunga saffron (Crocus sativus), larutan nanopartikel perak, larutan
nanopartikel perak putik bunga saffron, larutan Mc Farland, paper disk (10), H 2SO4,
BaCl2.