UJI MIKROBIOLOGI PADA BERBAGAI SUMBER AIR

Tujuan
Praktikum ini bertujuan untuk mengetahui kualitas air apakah sudah tercemar bakteri E.
Coli  dalam berbagai air

Alat dan Bahan

Alat yang digunakan dalam praktium ini adalah tabung bertutup, rak tabung, tabung
durham, cawan petri, kaca objek, kawat ose, botol semprot, mikroskop dan tisue.
Bahan yang digunakan adalah air dari berbagai sumber, media tumbuh PDA, air minum
isi ulang, kristal ungu, iodin, alkohol 96%, safranin dan kaldu laktosa .
Prosedur Percobaan
1.      Uji duga (presumptive test)
Uji duga ini menggunakan 3 kelompok tabung. Masing-masing kelompok terdiri dari 5
tabung dan tiap-tiap tabung reaksi pada kelompok satu, dua dan tiga berturut-turut berisi 10, 5, 5
ml medium kaldu laktosa dan tabung Durham yang telah dalam keadaan steril. Kemudian pada
tiap-tiap tabung kelompok 1, 2, dan 3 ditambahkan 10, 1, 0,1 ml sampel air uji secara aseptic
menggunakan pipet ukur. Selanjutnya semua tabung reaksi diinkubasi pada suhu kamar (37° C)
selama 2 x 24 jam. Catatlah banyaknya tabung reaksi pada masing-masing kelompok yang
bernilai positif, gunakan tabel Mc Crady untuk mengetahui nilai MPN kuman coliform tiap 100
ml sampel air uji.
2.      Uji penguat (confirmed test)
Uji penguat yaitu dipilih dari 3 kelompok tabung yang paling banyak terdapat
gelembung udaranya. Kemudian digoreskan pada media PDA, lalu diinkubasi selama 24jam
pada suhu 37° C. Warna hijau metalik menunjukan terdapatnya bakteri E. Coli.
3.      Uji pelengkap (completed test)
Jika pada uji penguat menujukkan hasil positif maka dilakukan pewarnaan gram.
Bagian hijau metalik digoreskan pada gelas preparat, diteteskan kristal ungu dan rendam selama
1 menit, bilas dengan aquades dan kering udarakan. Teteskan iodin rendam 1 menit bilas lagi
dengan aquades dan keringkan. Cuci dengan alkohol 96% rendam 30 detik keringkan, teteskan
safranin rendam 30 detik bilas dengan aquades dan keringkan. Kemudian diamati di bawah
mikroskop.