PEMERIKSAAN HDL - KOLESTEROL

Metode : Oxidase/Peroxidase

No. Dokumen : 20/SOP/Lab-NPI/2016

SOP No. Revisi : 01
Tgl. Terbit : 01 April 2016
Halaman :1-4
UPT. PUSKESMAS
Kepala UPT
NUSA PENIDA I Puskesmas Nusa Penida I

dr. I Ketut Rai Sutapa

NIP. 19790401 200604 1 012

1. Pengertian HDL (High Density Lipoprotein) Kolesterol disebut juga lemak yang
baik karena bisa membersihkan dan mengangkut timbunan lemak
dari dinding pembuluh darah ke hati.
Prinsip Pemeriksaan HDL-Cholesterol :
VLDL ( Very Low Density Lipoprotein ) dan LDL ( low Density
Lipoprotein ) pada sampel akan membentuk presipitate atau endapan
dengan phospotungstate dan ion magnesium. HDL ( High Density
Lipoprotein ) akan membentuk supernatan atau cairan jernih
diatasnya, yang di ukur dengan spektrofotometri. Berikut prinsip
reaksi seperti di bawah ini :

Cholesterol ester + H2O Chol. Esterase Cholesterol + Fatty acid

Cholesterol + ½ O2 + H2O Chol. Oxidase Cholestenone + H2O

H2O2 + 4 – Aminoantipyrine + DCFS

2 Peroxidase Quinonemine + 4
H2 O

Untuk kadar HDL - kolesterol dalam sampel darah yang diperiksa

2. Tujuan

3. Kebijakan
1. SK Kepala Puskesmas Nusa Penida I No. 133 Tahun 2016
Tentang Pemberlakuan Standar Operasional Prosedur unit
Laboratorium UPT. Puskesmas Nusa Penida I
2. SK Kepala Puskesmas Nusa Penida I No. 38 Tahun 2015
Tentang Pelayanan Laboratorium dan Jenis Pemeriksaan
Laboratorium UPT. Puskesmas Nusa Penida I

4. Referensi Brosur Reagen Biosytems S.A Cholesterol prosedur

5. Prosedur A. Persiapan

1. Pasien : Sebaiknya berpuasa selama 10-12 jam sebelum

 pemeriksaan
2. Petugas Laboratorium : menggunakan Alat Pelindung Diri
sebelum melakukkan pemeriksaan.

B. Alat

1. Fotometer BTS 310 + Biosytem

2. Tabung reaksi 3 ml
3. Multipipet 10 – 200 µl,500 µl,1000 µl
4. Spuit 3 cc

C. Sampel

1. Jenis : Serum, Plasma EDTA / Heparin/fluoride, CSF

2. Jumlah : 100 μl
3. Stabilitas : 15-25 0C selama 8 jam
Pada suhu 2-8 0C selama 72 jam
Pisahkan sample dari sel-sel ( centrifuge )
dilakukan dalam 30 menit setelah pengumpulan
sample.
CSF : segera dikerjakan.

D. Kontrol

1. Jenis : - precinorm U dan Precipath U

2. Jumlah : ≤ 5 ml
3. Stabilitas : 2-8 0C sampai kadarluarsa
4. Penyimpanan : Pada suhu 2-8 0C dalam lemari es
sampai tanggal kadaluarsa (sama dengan penyimpanan reagen)

E. Nilai Normal
Resiko Tinggi : >30 mg/dl = 0.91 mmol/L
Resiko rendah : >60 mg/dl = >1.56 mmol/L

F. Cara Pemeriksaan

I. Precipitasi

1. Pipet kedalam tabung centrifuge yang sudah di label :

Sampel 0.2 ml
 Reagen (A) 0.1ml

2. Campur dan biarkan tabung dalam posisi berdiri selama 10

menit suhu ruangan.
3. Masukkan ke dalam centrifuge dan putar minimal 4000 rpm
selama 10 menit.
4. Secara hati-hati pisahkan supernatan.

II. Colorimetri

1. Bawa reagen B ke dalam suhu ruangan.

2. Pipet ke dalam tabung sampel yang sudah berlabel :

Blank Standar Sampel

Aquadest 50 µl - -
HDL-Chol Standar (S) - 50 µl -
Sampel Supernatan - - 50 µl
Reagen B 1.0 ml 1.0 ml 1.0 ml

3. Campur hingga homogen dan inkubasi selama 30 menit

pada suhu ruangan ( 16 – 25 0C ) atau 10 menit pada suhu
37 0C
4. Ukur kadar HDL - cholesterol pada fotometer
5. Baca hasil pada monitor
6. Diagram/
Buat larutan precipitat dengan memipet
Bagan Alir Persiapa sampel serum 0.2 ml dan Reagen A sebanyak
n Alat 0,5 ml, campur dan biarkan dalam posisi
dan tegak berdiri selama 10 menit dan putar
dengan centrifuge 4000 rpm selama 10
menit. Pisahkan suupernatan.

Pipet Reagen B (HDL) Sebanyak 1.0 ml masukkan ke dalam

masing – masing tabung blangko,standar,sampel.

Pipet Aquadest Sebanyak 50 µl masukkan

ke dalam tabung Blangko.

Pipet Standar HDL Sebanyak 50 µl

masukkan ke dalam tabung standar.

Pipet Supernatan HDL Sebanyak 50 µl

masukkan ke dalam tabung sampel.

Campur hingga homogen dan

Baca hasil inkubasi selama 10 menit, Pada
pada monitor suhu 16 – 25 0C atau 5 menit
pada suhu 37 0C

7. Unit Terkait 1. Laboratorium

2. Rawat Jalan
3. Rawat Inap
4. UGD / VK

Nengah Mahendra Risanu,Amd.AK

Koordinator Laboratorium
Dibuat oleh
dr. Agus Putu Agung,S.Ked
Koordinator UKP

dr. I Ketut Apriantara,S.Ked

Disetujui oleh
WMM