METODE SPEKTROFOTOMETRI IR Tujuan : • Mahasiswa mampu melakukan analisis lemak menggunakan metode FTIR. Bahan dan Alat: • Bahan : • Alat : • Jaringan adipose babi • Seperangkat alat • Sampel makanan spektrometer FTIR • Kloroform • Oven • Metanol • Sentrifuge • Vortex • Waterbath • Timbangan analitik • Mikro pipet dan • Alat gelas. 1. Penyiapan Lemak Ditimbang sebanyak 4 gram, dimasukkan ke dalam tabung sentrifugasi
Tambahkan 15 mL kloroform-metanol (1:2). Tutup tabung
sentrifugasi
Panaskan dalam penangas air pada suhu 60o C selama 10 menit
Dikocok kuat-kuat selama 1 menit
Kemudian di votex mixer selama 5 menit
Sentrifugasi pada kecepatan 3000 rpm selama 10 menit
Cairan supernatant dituang ke dalam corong pisah melalui kertas saring
Residu dalam tabung sentrifugasi ditambah 5 mL kloroform,
dikocok menggunakan vortex mixer selama 5 menit
Sentrifugasi pada kecepatan 3000 rpm selama 10 menit
Cairan supernatant dituang ke dalam corong pisah melalui
kertas saring (digabung dengan supernatan pertama)
Tambahkan 5 mL akuadestilata ke dalam corong pisah
dan dikocok perlahan Tampung fase kloroform dalam wadah yang sesuai
Uapkan pelarut kloroform sampai habis
Lemak/minyak yang diperoleh kemudian dianalisis dengan
FTIR 2. Analisis dengan spektroskopi FTIR Sampel lemak ditempatkan pada plat
Lalu diletakkan pada elemen ATR (Kristal ZnSe).
Kemudian discanning sebanyak 32 kali pada kisaran 4000
sampai 650 cm-1 dengan resolusi 4 cm-1
Semua spektra dirasiokan/dikurangkan terhadap background
udara dan dibaca sebagai nilai absorbansi
Hasil scanning kemudian direkam dan dianalisis lebih lanjut