Bilirubin total ditentukan oleh

reaksi dengan asam sulfat

teroksidasi dengan adanya kafein
azopigmen dengan reaksi yang
sama tapi dengan tidak adanya
kafein dapat dihitung bilirubin
secara langsung.
 Serum atau plasma bebas dari
hemolisis . serum bilirubin akan
berkurang 50% dalam waktu 1 jam
jika disimpan pada temperatur
kamar (kurang dari 25°C) dan pada
sinar matahari langsung.
 Sebaliknya, ketika sampel
disimpan dalam gelap atau pada 2
– 8°C akan stabil hingga 3 hari.
Prosedur BL SA
ml ml
Asam salisilat 0,2 0,1
Natruim nitrit - 1 tetes
Kafein 0,2 0,2
campur dan dan biarkan 10 menit pada
temperatur kamar
Tatrat 1,0 1,0
campur dan biarkan 5 menit pada temperatur
kamar
 Panjang gelombang : 578 nm
 Blangko : bahan BL
 Kuvet : 1 cm jalan cahaya
 Stabilitas warna : minimal 1 jam
Perhitungan
O.D.SA x 10,8 = jumlah bilirubin mg/dl
S.I unit
(mg/dl) x 17,1 = µmol/L
Nilai normal
Dewasa lebih dari 1,1 mg/dl
pigmen empedu yang telah diambil
oleh hati dan di konyugasikan
menjadi bilirubin diglukoroid yang
larut dalam air
 ml ml
 Asam sulfanilat 0.2 0,1
 Natrium nitrit - 1 tetes
 Saline 2,0 2,0
 Sampel 0,2 0,2

campur dan biarkan pada temperatur

kamar, baca kira – kira setelah 5 menit.
 Panjang gelombang : 546 nm
 Blangko : bahan BL
 Kuvet : 1 cm jalan cahaya
Perhitungan
O.D.SA x 14,4 = jumlah bilirubin mg/dl
S.I unit
(mg/dl) x 17,1 = µmol/L
Nilai normal
Dewasa lebih dari 0,25 mg/dl
Metode linear ini lebih dari 25 mg/dl
konsentrasi yang lebih tinggi dari 15
mg/dl dapat menghasilkan nilai
absorbansi (O.D > 1500) yang dapat
sulit dibaca pada fotometer nondigital.
Hal ini direkomendasikan pada
beberapa kasus untuk perkalian
diambil pengenceran 1/10 dari sampel
dengan saine, (NaCl 0,9%) dan
kemudian kalikan hasil akhirnya dengan
10.
Untuk menghindari nilai error,
sangat penting ketika pengujian
untuk bilirubin langsung, untuk
menyamakan absorbsi kira – kira 5
menit setelah pereaksi
ditambahkan
 Seriscan normal (kontrol serum
normal)
(Ref. 99 41 48) dan
 Seriscan anormal / kontrol serum
anormal (Ref. 99 46 85)