STERILISASI DAN DISINFEKSI

Conny Riana Tjampakasari

 STERILISASI DAN DISINFEKSI

APA BEDANYA ?

STERILISASI
- Setiap proses baik fisika maupun kimia yang membunuh
semua bentuk hidup terutama mikroorganisme

DISINFEKSI
- Proses membunuh mikroorganisme (kecuali spora kuman)
dengan cara fisik atau kimia
- Dilakukan terhadap benda mati
 Pengertian

 Antisepsis
Mencegah pertumbuhan / aktivitas mikroorganisme
 menghambat / membunuh
contoh : zat-zat kimia  jaringan hidup

 Antiseptik
Zat kimia yang dipakai untuk maksud antisepsis

 Disinfektan
Zat kimia yang dimaksud untuk disinfeksi

 Cide (sid)
Zat yang dipakai bersifat membunuh

 Statik
Zat yang dipakai bersifat menghambat pertumbuhannya
 PENGGUNAAN ANTISEPTIKA
DAN DISINFEKTAN

Hal - hal yang perlu diperhatikan pada disinfeksi secara kimia :

1). Rongga (space) diantara alat-alat yang didisinfeksi

2). Disinfektan  membunuh (germisid)

3). Waktu (lamanya) disinfeksi harus tepat

4). Ventilasi ruangan

5). Pengenceran disinfektan harus sesuai anjuran

6). Hand lotion  setelah kontak dengan disinfektan

ANTISEPTIK KIMIA

Halogen

Komponen Klorin
 Sodium hypochlorite (liquid bleach)
 100 – 10.000 ppm hipoklorit bebas selama 10 – 60 ‘
 broad spectrum, tidak mahal
 pada temperatur  bersifat bakterisid
 toksik, korosif terhadap kulit dan metal
 tidak stabil; efektif pada pH 6,0
 standar pengolahan air minum

 Calcium hypochlorite butir, bubuk dan tablet

NADCC (Sodium dischloroisocyanurate)
 lebih stabil dari hipoklorit
 stabil pada pH 6,0
 toksik, korosif inaktivasi dengan komponen organik
 Chloramine – T (Sodium tosylchloramida)
 lebih stabil, berefek lebih ringan terhadap komponen
organik
 aktivitas sebanding dengan hipoklorit
 mudah rusak dibawah kelembaban, sinar dan panas

 Chlorine dioxide
 aktivitas lebih lama, sedikit korosif dan toksik

Yodium

 30 – 1000 ppm yodium bebas selama 10 – 30 ‘

 berspektrum luas, pH beragam
 tidak berwarna, sedikit toksik dan menyebabkan iritasi
 tidak membunuh spora
 germisid pada sabun dan antiseptik
Non Halogen

 Alkohol
 etanol (CH3CH2OH) 70 – 90 %; Isopropanol ((CH3)2 CHOH)
60 – 95 %; sangat efektif dalam 10 – 30’
 toksisitas rendah, bereaksi cepat, residu rendah, tidak
korosif
 mudah terbakar ; menyebabkan iritasi mata
 dapat merusak plastik dan karet
 dapat membunuh sel vegetatif dalam waktu 10 ‘ kecuali spora

 Fenol
 400 – 50.000 ppm; 10 – 30 ‘
 toleran terhadap komponen organik ; sulit larut dalam air
 menghasilkan residu aktif
 berbau khas, korosif terhadap jaringan, beberapa bentuk toksik
 kurang efektif terhadap spora
 Heksaklorofen (derivat fenol) berguna sebagai antiseptik kulit
(sabun dan lotion)
 standar pembanding aktivitas suatu disinfektan
 Hidrogen peroksida (H2O2)
 3 – 30 % dalam larutan; 10 – 60 ‘
 6 % ; 30 ‘ dapat membunuh spora
 larutan stok menimbulkan iritasi pada kulit dan mata
 reaksi cepat, tidak beresidu, non toksik, aman terhadap
lingkungan

 Komponen ammonium
 500 – 15.000 ppm ; 10 – 30 ‘
 kombinasi antara deterjen dan aktivitas germisid
 stabil dalam kondisi larutan ; toksisitas rendah
 non sporosid ; menghambat aktivitas virus dan
mikobakteria
 mendukung pertumbuhan bakteri formula antiseptik
 Zat Warna
 Derivat akridin dan zat warna rosanilin  bakteriostatik
 Akriflavin  mengobati infeksi traktus urinarius
 Ungu kristal  bakteriostatik ( Gram)
 mengobati kandidiasis dan vaginitis

 Peracetic acid (PAA)

 0,001 – 0,3 % dalam larutan
 fase gas 2 – 4 % ; 5 – 120 ‘
 berspektrum luas, sporosid  pada tekanan rendah
 dapat mentoleransi komponen organik, bereaksi cepat
 non toksik, tidak beresidu
 berbau tajam, korosif terhadap beberapa logam
 larutan stok bersifat iritasi terhadap kulit dan mata
 larutan stok harus terhindar dari panas, cahaya
 fase gas : mengakibatkan iritasi pada saluran napas ;
menimbulkan kebakaran pada suhu 55 oC
 sterilisasi ruang  bebas hama
Aldehida

 Glutaraldehida
 0,5 – 2,5 % dalam larutan ; 2 – 30 ‘ ; > 12 jam membunuh spora
 pH > 7,5
 Staphylococcus dan sel vegetatif (mati 5’)
 Mycobacterium tuberculosis dan virus (mati 10’)

 berspektrum luas ; tidak menimbulkan korosif pada logam

 berbau tajam ; toksik  kulit, mata, saluran napas ; tidak iritatif
 digunakan untuk steril dingin dan fiksasi; dekontaminasi
permukaan; instrumen; perlengkapan dan benda dari kaca

 Formaldehida (gas)
 1 – 3 jam, penetrasi sangat efektif, mudah terbakar
 penetrasi rendah pada lapisan permukaan
 dekontaminasi untuk biological safety cabinet, HEPA filter,
area tertutup
 Uap Formaldehid (formaldehida 37 % dalam air)
 3 -27 % formalin (1 – 10 % formaldehida) dalam 70 – 90 % alkohol ;
selama 10 – 30’
 berspektrum luas, tidak mahal, tidak korosif terhadap logam;
 dapat mentoleransi komponen organik
 berbau tajam
 menyebabkan iritasi pada kulit, mata dan saluran napas
 berpotensi menyebabkan kanker
  24 jam membunuh semua spora
 disinfektan efektif bagi alat-alat dan berbagai bahan yang tercemar
spora atau Mycobacterium tuberculosis

 Ethylene oxide gas (ETO)

 50 – 1.200 mg/L ; 1 – 12 jam
 berspektrum luas, tanpa pemanasan dan tekanan
 mudah terbakar, toksik reaktif ; berpotensi menimbulkan kanker
dan mutasi
 sterilisasi bahan membutuhkan > 24 jam
 mudah menembus plastik dan mensterilkan isi bungkusan
(alat optik, kateter, bantal, kasur dan sepatu)
Logam – Logam Berat

 Logam berat  sebagai antimikroba (Oligodinamik)

 mempresitasikan ensim-ensim atau protein
esensial lain dalam sel
 Umum : Hg, Ag, As, Zn, dan Cu

Hg : - efektif untuk luka-luka kecil/ringan,

- sebagai preservatif di dalam serum dan vaksin
- HgCl2 tidak digunakan lagi karena dapat diinaktifkan oleh
bahan organik

Ag : - AgNO3 (1 %)
 mencegah infeksi gonokokus pada mata bayi yang baru lahir

As : - obat pertama untuk sifilis

- untuk infeksi yang disebabkan oleh protozoa

Zn : - (dalam bentuk pasta)  untuk infeksi oleh kuman / jamur

ANTISEPTIK FISIK DAN DISINFEKTAN

PEMANASAN BASAH

 OTOKLAF
 Udara dalam uap air panas  tekanan  ; suhu   tekanan 1½ atm ;
121 °C / 15 psi  15 - 90 ‘ (gravity displacement autoclave)
 132 oC / 27 psi  4 – 20 ‘ (pre-vacuum autoclave)
 dekontaminasi limbah infeksius
 kontrol penting maintenance dan kualitas
 penetrasi benda kaca, media dan instrumen

 MEREBUS (BOILING)
 Menggunakan uap air dengan tekanan
 teknik disinfeksi termudah dan termurah
 maksimum temperatur  100 oC ; 10 – 30’
 waktu : 15 menit, setelah air mendidih
 Sel vegetatif mati : 5-10 menit
 Spora dan kebanyakan virus, mampu bertahan
 PASTEURISASI
 disinfeksi dengan pemanasan; umumnya 77 oC ; ~ 30 ’
 berguna untuk pemanasan larutan sensitif dan benda medik
 murah, digunakan untuk produk susu dan makanan
 tidak membunuh spora

 TYNDALISASI ( STERILISASI FRAKSI)

 pemanasan untuk 80 – 100 oC ; 30’ dengan periode inkubasi
diantaranya
 pertumbuhan spora akan terhambat dan mati pada hari ke 2 / 3
 dapat digunakan untuk media bakteri, larutan kimia, materi biologi

PEMANASAN KERING

 PEMBAKAR (INCINERATION)
 temperatur hingga 1.000 oC ; 1 – 60 ‘
 volume redusi limbah sampai 95 % ; penggunaannya terbatas (ose)
 semua bentuk hidup akan mati ; dlakukan juga terhadap binatang
percobaan yang mati atau sampah keluarga di tempat pembuangan
sampah
PEMANASAN DENGAN UDARA PANAS
(HOT AIR STERILIZATION)

 Menggunakan  oven, suhu 160-180 C ; 2 – 4 jam

 Digunakan : alat-alat gelas
 piring petri, pipet, tabung reaksi, labu, dsb.
 sedikit korosif terhadap logam dan benda-benda tajam

RADIASI

Lampu Ultraviolet (germicidal lamp)

  : 220 – 290 nm (UV) ; efektif 257 nm
 Daya penetrasinya lemah
 Untuk memperoleh hasil yang baik : bahan-bahan yang
akan disterilkan (cairan, gas/aerosol)  ditempatkan
langsung dibawah UV dalam lapisan - lapisan tipis.
 Dapat merusak kulit dan mata
PENYARINGAN (Filtration)

 Mengalirkan cairan/gas  bahan penyaring, memiliki pori cukup

kecil untuk menahan mikroorganisme dengan ukuran tertentu
 Saringan  tercemar, cairan dan gas yang melalui saringan  steril.
 Saringan umum : tidak dapat menahan virus

 Digunakan untuk : serum, ensim, toksin kuman, ekstrak sel.

MENYARING CAIRAN
 Dapat dilakukan dengan berbagai filter :

- Saringan Seitz  bahan asbestos

- Saringan Berkefeld  tanah diatomae
- Chamberland  porselen
- Fritted glass filter  serbuk gelas
MENYARING UDARA

 Untuk menjaga suatu alat (labu, tabung) yang sudah steril

tidak tercemar oleh kuman

 Untuk menjaga agar suatu biakan tidak tercemar oleh kuman lain

harus ditutup kapas  kapas tidak basah

Untuk mencegah pencemaran udara pada waktu menuang
perbenihan


Laminar flow bench

udara yang masuk disaring dengan saringan khusus

 PENGENDALIAN MIKROBA SECARA FISIK

Membunuh kuman dengan panas (thermal kill)

 mudah, dipercaya dan relatif tidak mahal

Terminologi thermal kill

a). Thermall death point
suhu dimana suatu suspensi organisme telah disterilkan  10 ‘

b). Thermal death time

waktu yang diperlukan bagi suatu suhu tertentu untuk mensterilkan
suatu suspensi organisme

c). D value
waktu yang diperlukan untuk membunuh 90 % dari organisme dalam
suatu suspensi pada suatu suhu tertentu.

d). Z value
jumlah derajat kenaikan suhu yang diperlukan untuk menurunkan
D value sampai menjadi 1/10 nilai semula
 CARA-CARA PENGUJIAN
ANTISEPTIK DAN DISINFEKTAN

 Zat-zat antimikroba uji keefektifan (koefisien fenol)

 Untuk membandingkan aktivitas suatu produk dengan daya bunuh

fenol dalam kondisi tes yang sama

1/80 1/90 1/100 1/110

(Berbagai pengenceran fenol) dan produk yang dicoba, dicampur
dengan suatu volume tertentu biakan Staphylococcus aureus atau
Salmonella typhi

Setelah interval selama 5, 10 dan 15 menit  dari tiap pengenceran

diambil  ditanam pada perbenihan, ± 1 - 2 x 24 jam  tumbuh /
tidak tumbuh.
Koefisien fenol :

ditentukan dengan membandingkan pengeceran tertinggi

tes produk yang membunuh kuman dalam waktu 10 menit,
dengan pengeceran fenol yang memberikan hasil yang sama

Koefisien fenol = titer pengenceran produk

titer pengeceran fenol

KF  1  Disinfektan layak digunakan

Misal :
pengenceran tertinggi tes produk yang membunuh kuman
= 1 : 200

pengeceran fenol = 1 : 90

koefisien fenol = 200 = 2,2

90