PENGOBATAN TERAPI

GEN PENYAKIT KANKER

DAN HIV
NAMA KELOMPOK 4:
1. NUR METI ANISA
2. THUFAILAH FIRDAUSY P
3. DINDA CHAIRUNNISA
4. NUR AFIFAH PULUNGAN
5. JOVAN KARNOVA
6. RARA PRABA ANDARI
7. DEWI ANGGUN LESTARI
8. ADILLA SUCI A
9. ESA FATHIYA M
10. AULIA
 TERAPI GEN

Terapi gen merupakan metode

pengobatan terbaru yang dilakukan
dengan mentransfer atau
menyisipkan gen fungsional tertentu
yang dapat menggantikan fungsi gen
abnormal yang terkait dengan
penyakit target.
Terapi gen dapat dilakukan pada sel
embrional (germ line gene therapy)
maupun sel somatik (somatic cells
gene therapy) pada pasien secara in
vivo maupun ex vivo.
Penyisipan gen pada terapi ini
menggunakan vektor virus
(transduksi) maupun non virus
(tranfeksi).
 BONE MARROW GENE THERAPY FOR
HIV/AIDS
ELENA HERRERA-CARRILLO AND BEN
BERKHOUT
LABORATORY OF EXPERIMENTAL VIROLOGY,
DEPARTMENT OF MEDICAL MICROBIOLOGY,
CENTER FOR INFECTION ANDIMMUNITY
AMSTERDAM (CINIMA), ACADEMIC MEDICAL
CENTER, UNIVERSITY OF
AMSTERDAM,AMSTERDAM 1105 AZ, THE
NETHERLANDS; E-MAIL:
E.HERRERACARRILLO@AMC.UVA.NL
HIV pertama kali diakui pada tahun 1981
dan tetap menjadi salah satu ancaman
utama bagi kesehatan manusia. Secara
global, sekitar 35 juta orang hidup dengan
HIV dan lebih dari 25 juta orang
meninggal karena HIV.

Terapi kombinasi antiretroviral (ART) dapat memperpanjang

kesempatan hidup orang yang terinfeksi HIV secara
signifikan. Beberapa penelitian tidak menemukan bukti
evolusi HIV-1 pada pasien suppressive cART [4], tetapi
laporan lain menunjukkan bahwa cART tidak sepenuhnya
menekan replikasi virus dan tidak menghilangkan reservoir
virus [5,6]. Apalagi toksisitas yang terkait dengan kepatuhan
pemakaian ART jangka panjang, bersama dengan munculnya
varian HIV yang resistan terhadap obat pada beberapa
pasien, mendukung pencarian terus menerus untuk obat baru
dan pendekatan asli untuk melawan HIV [7]. Terapi gen
muncul sebagai pendekatan yang menjanjikan untuk
pengobatan HIV/AIDS karena dapat memfasilitasi
penghambatan replikasi HIV setelah satu intervensi
pengobatan tunggal. Saalah satu buktinya adalah dengan
apa yang disebut "pasien Berlin," yang terdeteksi bebas dari
 PEMILIHAN TARGET
PENGOBATAN
• Reseptor sel T buatan Untuk menghindari pembatasan HLA
Studi awal yang dilakukan buatan TCR, sel T dapat direkayasa
pada awal 1990-an untuk mengekspresikan reseptor
menggambarkan potensi untuk antigen chimeric (CAR), yang
meningkatkan pengenalan sel menggabungkan spesifisitas suatu
yang terinfeksi HIV-1 dengan antibodi dan kapasitas sinyal
mengekspresikan reseptor sel intraseluler dari reseptor sel T. Studi
T kloning molekuler (TCR) praklinis sel T CD8+ yang dirancang
khusus untuk protein HIV, yang untuk mengekspresikan CAR telah
disebut TCR buatan.Studi menunjukkan proliferasi spesifik
praklinis in vivo menunjukkan antigen, penghambatan replikasi HIV,
penekanan HIV pada tikus dan aktivitas sitolitik terhadap sel T
yang diperlakukan seperti yang terinfeksi HIV. Sebuah penelitian
manusia yang disuntik dengan terbaru berdasarkan hasil dari tiga uji
sel T yang mengekspresikan klinis menunjukkan bahwa terapi gen
Gag-SL9 TCR buatan [11]. CAR aman [15]. Namun, tingkat sel
Namun, limfosit T sitotoksik yang dimodifikasi dengan CAR
spesifik HIV spesifik dibatasi ditemukan menurun dari waktu ke
oleh alel HLA kelas I dan waktu, sehingga membatasi daya
 PEMILIHAN TARGET
PENGOBATAN
• Imunisasi Intraseluler
Selama dua dekade terakhir,
beberapa pendekatan terapi gen
anti-HIV telah dikembangkan.
Produk gen anti-HIV akan
mengganggu langkah penting
dari siklus replikasi virus atau
menargetkan faktor seluler yang Baru-baru ini, laboratorium telah
diperlukan untuk replikasi virus. mengembangkan terapi anti-HIV
Awalnya, gen anti-HIV dirancang berdasarkan pada
untuk menghambat transkripsi penghambatan tahap replikasi
atau terjemahan HIV, yang dini, yang mungkin bermanfaat
terjadi selama tahap akhir siklus untuk efek antivirus yang
replikasi. kuatMenurut produk gen yang
digunakan untuk memerangi
infeksi HIV, strategi terapi gen
diklasifikasikan menjadi dua
kelompok: terapi berbasis
protein dan RNA.
Gambar di bawah ini mengilustrasikan langkah-langkah siklus replikasi HIV-1
yang dapat ditargetkan. Siklus replikasi virus secara acak dibagi menjadi
dua tahap: tahap awal mengacu pada langkah-langkah infeksi dari sel yang
mengikat ke integrasi DNA virus ke dalam genom sel, sedangkan tahap
akhir dimulai dengan ekspresi gen virus dari provirus dan lead terintegrasi.
untuk melepaskan virion yang matang yang kemudian menjadi partikel
menular Langkah-langkah siklus replikasi
HIV-1 yang dapat ditargetkan oleh
terapi gen:
1. HIV-1 mengikat membran sel
2. HIV-1 masuk ke sel
3. transkripsi terbalik
4. transportasi genom pro-HIV HIV-1
ke dalam nucleus
5. integrasi genom virus ke dalam
DNA seluler
6. transkripsi genom pro-viral HIV-1
7. terjemahan virus messenger RNA
(mRNA) menjadi protein virus
baruperakitan virion di dalam sel
8. pematangan virion yang belum
matang menjadi partikel yang
sepenuhnya menular.
 TERAPI BERBASIS PROTEIN
Protein dapat direkayasa
untuk menghambat target Protein pertama yang diuji dalam
viral atau seluler. Strategi uji coba terapi gen HIV adalah
berbasis protein termasuk bentuk modifikasi dari protein HIV
protein negatif trans- Rev yang disebut RevM10.RevM10
dominan (bentuk yang adalah mutan Rev dominan yang
berubah dari protein virus mengganggu fungsi Rev normal
atau seluler yang dapat dan dengan demikian mencegah
menghambat fungsi normal ekspor RNA genomik yang tidak
dari rekan tipe liarnya), tersambung dari nukleus ke
inhibitor fusi (protein atau sitoplasma. Sel mengekspresikan
peptida yang RevM10 terbukti memiliki
mempengaruhi proses fusi keuntungan pada kelangsungan
selama masuknya virus ke hidup orang yang terinfeksi HIV,
dalam virus). sel), tetapi tidak ada dampak
intrabodies (antibodi substansial pada muatan virus
rekombinan yang yang diamati
diekspresikan intrasel),
intrakin (termokrin
Beberapa penelitian terbaru yang menarik tentang vektor terapi gen ini
disebut Vectored Immuno Prophylaxis atau VIP dan didasarkan pada
produksi antibodi anti-transgen-encoded anti HIV. VIP menghasilkan
perlindungan imunologi (seperti vaksin), tetapi tanpa secara aktif
menerapkan sistem kekebalan (desain antigen, produksi dan vaksinasi)
[59–61]. Khususnya, VIP menghasilkan ekspresi antibodi ganda yang
berkelanjutan pada tingkat tinggi pada suntikan intramuskular tunggal
pada tikus [62]. Antibodi ini memberi aktivitas anti-HIV dan melindungi
tikus yang diperlakukan
• Pertama, seperti manusia
transkrip melawan
• Jalur miRNA tantangan HIV-1.
ini menghasilkan dupleks
miRNA primer (pri- RNA matang, yang satu untai dari
miRNA) dibuat, di mana sekitar 22 nukleotida yang secara
struktur RNA mirip jepit istimewa dimuat ke dalam enzim
rambut diproses oleh Argonaute (Ago) sebagai bagian dari
kompleks RNA-induced silencing complex
"Mikroprosesor", yang (RISC).
terdiri dari Drosha • Kompleks RISC yang diisi miRNA
nuclease dan mitra menargetkan sebagian transkripsi
pengikat dsRNA-nya mRNA komplementer untuk
DGCR8 degradasi dan / atau penindasan
• Pra-miRNA yang translasi. Mekanisme ini dilestarikan
dihasilkan dibelah dekat di semua eukariota dan dapat
loop terminal oleh Dicer dimanfaatkan untuk pembungkaman
nuclease bekerja sama gen terapeutik. Jalur RNAi kanonis
dengan respon trans- dapat dipicu oleh substrat buatan
 KEAMANAN PRAKLINIS DAN TES
EFIKASI
Keamanan dan kemanjuran Secara khusus, kami
terapi gen berbasis RNAi menggunakan model tikus BRG-
kombinatorial pertama dapat HIS di mana tikus yang baru
diperiksa secara in vitro. Kami lahir imunodefisiensi disuntik
menguji empat kandidat shRNA dengan sel-sel progenitor
dalam uji pertumbuhan sel yang hematopoietik manusia. Tikus-
kompetitif (CCG) berdasarkan tikus ini membangun sistem
pada perbedaan laju proliferasi kekebalan manusia yang cukup
sel yang di-transformasikan oleh lengkap yang terdiri dari garis
ShRNA (GFP-positif) dan tidak keturunan sel yang berbeda,
ditransformasikan dalam termasuk sel T matang. Proses
budaya yang sama. Kami hematopoiesis yang rumit ini
mengamati dampak negatif dari bisa dipantau untuk menyaring
salah satu dari empat shRNA dampak negatif terapi gen HSC
pada pertumbuhan sel in vitro pada perkembangan sel.
[134]. Keamanan pendekatan Sebagai contoh, kami menguji
RNAi kombinatorial ini juga dampak sel-sel shRNA anti-HIV
harus diuji dalam model in vivo yang diinduksi oleh LV dan
yang sesuai untuk mengamati perkembangan
mempersiapkan uji klinis pada normal sistem kekebalan
manusia. manusia dan tidak ada efek
 KLONING FRAGMEN DNA PENGKODE
INTEGRASE (INT) HIV
(HUMANIMMUNODEFICIENCY VIRUS) 1
PADA ESCHERICHIA COLI JM109
HOTMA HUTAPEA, ANTONIUS
OKTAVIANBALAI
PENELITIAN DAN PENGEMBANGAN
BIOMEDIS PAPUA
EMAIL: HOTMAHUTAPEA@GMAIL.COM
Tujuan penelitian ini adalah untuk
memperoleh DNA pengkode
integrase HIV. Tahap integrasi ini
difasilitasi oleh aktivasi enzim
integrase.
HIV adalah partikel virus yang berkaitan erat
dengan penyebab AIDS. Virus ini termasuk
dalam golongan retrovirus dengan materi
genetiknya adalah satu pasang RNA.
Integrasi materi genetik virus ke dalam DNA
sel terinfeksi merupakan proses yang sangat
penting bagi replikasi HIV. Proses integrasi
diperlukan agar virus dapat tereplikasi
karena seluruh komponen replikasi virus
terdapat pada sel inangnya. Proses ini
difasilitasi oleh aktivitas enzim integrase
yang diproduksi bersama-sama protease dan
reverse transcriptase. Protein integrase
diperlukan virus untuk menyisipkan DNA-nya
kedalam genom sel terinfeksi.
 METODE PENELITIAN
2. Kloning Gen Integrase HVI-1
Produk PCR yang diperoleh
selanjutnya dimurnikan dengan cara
RNA virus di ekstraksi dari ekstraksi DNA dari gel. Produk PCR
plasma darah menggunakan yang telah murni selanjutnya diligasi
kit ekstraksi sehingga ke vector cloning pJETclone untuk
diperoleh RNA virus. menghasilkan konstruk pJETintHIV-1.
1. Amplifikasi Gen Pengkode Konstruk yang diperoleh digunakan
Integrase HIV-1Genom HIV- untuk mentrans formasi sel
1 berupa RNA, untuk itu Escherichia coliJM109
perlu dilakukan konversi 3. Transforman diseleksi pada media
RNA menjadi cDNA. LB. Transforman yang tumbuh pada
Selanjutnya cDNA tersebut media seleksi tersebut selanjutnya
digunakan sebagai dikarakterisasi dengan cara
template untuk mengisolasi plasmidnya. Plasmid
mengamplifikasi gen diisolasi menggunakan teknik lisis
pengkode integrase HIV-1 alkali minipresipitasi Plasmid
menggunakan teknik dikarakterisas ilebih lanjut dengan
Polymerase Chain Reaction teknik analisis migrasi, dan
(PCR). penentuan urutan nukleotida dengan
 HASIL PENELITIAN
Teknik transkripsi balik
dilakukan menggunakan
reverse transcriptase dari virus
Moloney Murine Leukimia yang
secara sensitif mampu Klon yang diperoleh dikarakterisasi
mengkonversikan RNA menjadi menggunakan teknik elektroforesis
cDNA. cDNA yang diperoleh gel dan sekuensing.Produk PCR
digunakan sebagai templat yang terkonfirmasi integrase HIV-1
untuk amplifikasi fragmen DNA selanjutnya diligasi ke vektor
integrase HIV dengan teknik kloning pJETclone. Vektor ini
PCR menggunakan enzim Sso7d membawa gen lethal Eco47IR yang
fusion polymerase. Amplifikasi aktivitasnya akan terhambat jika
menggunakan enzim ini akan terdapat DNA sisipan. Hal tersebut
menghasilkan produk PCR, menyebabkan hanya transforman
kemudian diligasi langsung ke yang membawa DNA sisipan yang
vektor kloning pJETclone. dapat tumbuh. Hasil analisis
urutan nukleotida pada plasmid
tersebut menginformasikan bahwa
DNA sisipan tersebut adalah
integrase HIV-1.
 TERAPI GEN PADA PENYAKIT
KANKER TERESA LILIANA
WARGASETIA
BAGIAN BIOLOGI, FAKULTAS
KEDOKTERAN, UNIVERSITAS
KRISTEN MARANATHA, BANDUNG
 TERAPI GEN UNTUK KANKER
PAYUDARA
1. Terapi gen yang digunakan
adalah mengganti gen
supresor yang rusak. Terapi 3. Uji terapi gen yang didasari
juga bisa dilakukan dengan nononkogen atau supresor
menghentikan ekspresi tumor melibatkan transfeksi
onkogen melalui penggunaan dari modulator imun seperti
antisense urutan DNA atau antigen-antigen dan sitokin
gen yang berkaitan dengan seperti halnya proteksi dari
2. Sejumlah
ekspresi onkogen.
gen yang berkaitan sel-sel tunas dengan gen
dengan kanker payudara multidrug resistance (MDR-
dijadikan target dengan 1) atau membersihkan sel-
menggunakan teknik antisense sel tunas dengan gen
pada model preklinis. Terapi proapoptotik bcl-xs atau
gen dengan gen E1A dengan gen herpes virus
adenovirus yang berikatan thymidine kinase (HSV-TK)
dengan promoter HER-2 telah dan gan-cyclovir. (Osborne,
dipelajari dalam bentuk terapi C., et.al., 2004)
antionkogen untuk menurunkan
ekspresi HER-2. Uji fase I dari
gen E1A –liposom pada kanker
payudara dan ovarium memper-
 TERAPI GEN UNTUK KANKER
OTAK
Studi terapi gen pada glioma maligna (kanker otak) adalah melalui
terapi gen interferon-β yang masih pada tahap penelitian dasar dan
sedang dikembangkan untuk aplikasi klinis. Terdapat empat
mekanisme yaitu:

1. Transfer gen interferon-β melalui liposom dapat menginduksi

apoptosis pada sel-sel resisten protein interferon-β. Induksi
apoptosis berkaitan dengan level mRNA interferon-β intrasel,
pemanjangan waktu fosforilasi molekul-molekul pada jalur
transduksi sinyal inter-feron-β, seperti JAK1, Trk2 dan STAT1, dan
aktivasi Dnase γ.
2. Transfer gen interferon-β memproduksi sitokin-sitokin seperti
interleukin (IL)-1 β, IL-6 dan tumor necrosis factor (TNF)-α sebagai
tam-bahan terhadap interferon-β. Gabungan dari sitokin-sitokin
memberikan efek antitumor yang kuat pada sel-sel glioma.
3. Transfer gen interferon-β mengaktifkan respon imun sistemik dan
memfasilitasi infiltrasi sel imun ke dalam tumor otak. Sel-sel yang
menginfiltrasi tumor teruta-ma adalah CD8-positive cytotoxic T
4. Transfer gen interferon-β ke sel-sel glioma juga
memproduksi beberapa faktor-faktor kemotaktik seperti
monocyte chemotactin protein (MCP)-1 dan IP-10.
(Yoshida, J. et al., 2004)

5. Metode dengan keberhasilan yang paling baik adalah

dengan menyuntikkan virus pembawa gen secara
langsung ke dalam tumor yang rela-tif mudah dicapai
seperti pada tumor kepala dan leher. Tantangan dalam
terapi gen diantaranya mencegah gen baru memasuki
DNA sel-sel pada tempat yang salah yang berpotensi
menyebabkan penyakit leukimia serta virus yang
membawa gen dapat menyebabkan inflamasi atau
diserang oleh sistem imun. Terapi gen mungkin menjadi
sangat efektif bila dikombinasikan dengan terapi tipe
lain seperti kemoterapi dan radioterapi. (Moon, C., et.al,
2003)
 KARAKTERISTIK SEL KANKER ORAL BARU
(SP-C1) DAN UJI HAMBATAN PERTUMBUHAN
SEL SP-C1 MENGGUNAKAN TERAPI GEN
PCDNA3.1-P27KIP1 MUTANT TYPE IN VITRO
SUPRIATNO
DEPARTEMEN ORAL MEDICINE
FAKULTAS KEDOKTERAN GIGI, UNIVERSITAS
GADJAH MADA
JL. DENTA SEKIP UTARA, YOGYAKARTA
• Kanker oral merupakan penyakit
dengan karakteristik gangguan
atau kegagalan mekanisme
pengaturan multiplikasi
organisme multiseluler sehingga
terjadi perubahan perilaku sel
yang tidak terkontrol di rongga • Kinase CD (cyclin-
mulut. dependent kinase, CDK)
• Kanker oral disebabkan rusaknya adalah sub-tipe dari enzim
mekanisme pengaturan dasar kinase yang berperan dalam
perilaku sel, khususnya siklus sel, transkripsi DNA
mekanisme pertumbuhan dan dan mRNA
diferensiasi sel. Kanker tersebut • CDK memicu fosforilasi
ditandai dengan kerusakan DNA, pada residu asam amino
menyebabkan pertumbuhan serina dan treonina yang
otonom yang tidak merespons disebut serina kinase.
faktor regulasi pertumbuhan • p27Kip1 adalah
normal. Sel Sp-C1 merupakan sel cyclindependent kinase
kanker primer solid rongga mulut. (CDK) inhibitor yang
mengatur pertumbuhan sel
secara negatif pada fase
G1-S siklus sel dengan
METODE ISOLASI SEL KANKER
SP-C1
 HASIL PENELITIAN
• Jumlah sel Sp-C1 pcDNA3.1-p27Kip1mt
menunjukkan hambatan pertumbuhan
yang bermakna dibandingkan dengan Sp-
C1 pcDNA3.1-neo (P< 0,05)
• Hambatan sel Sp-C1 pcDNA3.1-p27Kip1mt
pada jam ke-48 lebih kuat dibandingkan
jam ke-24. Besarnya hambatan sel Sp-C1
transfektan pada jam ke-24 dan ke-48
berturut-turut sebesar 37% dan 45,4%.

• Perbedaan kekuatan hambatan tersebut

dikarenakan sel Sp-C1 lebih lama berkontak
dengan gen p27Kip1 mt dan paparan dosis
yang lebih tinggi pada jam ke-48,
menyebabkan toksik pada sel kanker oral
tersebut. Selain itu, fungsi p27Kip1 sebagai
regulator negatif siklus sel, menyebabkan
hambatan pertumbuhan yang lebih tinggi
pada jam ke-48.
 TERAPI GEN UNTUK PENGOBATAN
KANKER : DULU, SEKARANG DAN YANG
AKAN DATANG
DEANNA CROSS, PHD AND JAMES K.
BURMESTER, PHD
CLINICAL MEDICINE & RESEARCH |
VOLUME 4, NUMBER 3: 218-227 |
©2006 MARSHFIELD CLINIC |
HTTP://WWW.CLINMEDRES.ORG
 IMUNOTERAPI

• Dulu
Imunoterapi, atau konsep meningkatkan sistem kekebalan untuk
menargetkan dan menghancurkan sel-sel kanker, telah menjadi
tujuan pengobatan kanker selama lebih dari 100 tahun. Saat ini
terapi gen sedang digunakan untuk membuat vaksin kanker
rekombinan. Tidak seperti vaksin untuk agen infeksi, vaksin ini
tidak dimaksudkan untuk mencegah penyakit, tetapi untuk
menyembuhkan atau menahannya dengan melatih sistem
kekebalan pasien untuk mengenali sel-sel kanker dengan
menyajikannya dengan puing-puing seluler antigenik dan
imunostimulan. Awalnya sel-sel kanker diambil dari pasien (sel
autolog) atau dari garis sel kanker (alogenik) dan kemudian
ditanam di vitro . Sel-sel ini kemudian direkayasa agar lebih mudah
dikenali ke sistem kekebalan tubuh dengan penambahan satu atau
lebih gen, yang sering gen sitokin yang menghasilkan molekul
stimulasi kekebalan pro-inflamasi, atau gen protein antigenik yang
sangat tinggi. Sel-sel yang diubah ini tumbuh in vitro dan dibunuh,
dan konten seluler dimasukkan ke dalam vaksin (gambar 1A). 
Imunoterapi juga sedang diupayakan melalui pengiriman gen-gen
imunostimulan, terutama sitokin, ke tumor in vivo . Metode
memperkenalkan gen ke tumor bervariasi dan dibahas secara lebih
rinci di bagian transfer gen tinjauan ini. Sekali dalam sel kanker, gen-
gen ini akan menghasilkan protein yang membuka kedok sel-sel dari
penghindaran kekebalan dan mendorong pengembangan antibodi
Strategi
antitumor imunoterapi
(gambar 1B).  unik lainnya Percobaan awal
yang difasilitasi oleh terapi gen adalah menggunakan vaksin
secara langsung mengubah sistem generasi pertama telah
kekebalan pasien untuk membuatnya menghasilkan hasil yang
peka terhadap sel kanker. Salah satu beragam, menyoroti kedua
pendekatan menggunakan sel-sel potensi untuk terapi ini dan
darah beredar mononuklear atau area yang masih perlu
sumsum tulang yang dikumpulkan disempurnakan sebelum
dari pasien. Antigen tumor, atau gen vaksin kanker rekayasa ini
stimulasi lainnya, kemudian menjadi bagian dari
ditambahkan ke jenis sel yang pengobatan kanker standar.
dipilih. Sel-sel yang diubah ini
sekarang menjadi prima untuk
menyebabkan reaksi kekebalan
terhadap sel-sel kanker yang
mengarah ke pemberantasan kanker
(gambar 1C). Alternatifnya, gen dapat
 Uji klinis lainnya menunjukkan
potensi unmasking tumor dari invasi
• Percobaan klinis Saat Ini
imun menggunakan gen
Vaksin generasi berikutnya immunostimulatory yang dimasukkan
sudah dalam uji klinis untuk langsung ke dalam jaringan
beberapa jenis kanker. Tabel 1 tumor. Misalnya, MDA-7 (IL-24),
memberikan daftar uji klinis sitokin yang menginduksi kematian
yang lebih canggih dalam sel kanker, saat ini dalam uji klinis
bidang ini, termasuk fase, karena kemampuannya untuk
jenis sel yang digunakan dan menyebabkan reaksi kekebalan
gen yang digunakan untuk sistemik pada pasien melanoma
menciptakan tanggapan ganas.
kekebalan yang lebih baik. Percobaan klinis saat ini berusaha
Vaksin menggunakan sel untuk secara langsung merangsang
rekayasa menunjukkan sistem kekebalan tubuh untuk
harapan besar untuk perusakan kanker juga menunjukkan
pengobatan banyak kanker hasil yang menjanjikan. Salah satu
yang berespons buruk contoh dari jenis imunoterapi adalah
terhadap terapi uji klinis saat ini menggunakan vaksin
konvensional. Terapi vaksinasi TRICOM. Vaksin-vaksin ini
untuk kanker paru-paru sel menggabungkan antigen kanker ke
non-kecil adalah contoh dari dalam virus yang dimodifikasi, baik
terapi vaksin autologus yang vaccinia atau fowlpox, yang juga
• Masa yang Akan Datang Salah satu cara menyiasati kendala ini
Meskipun uji klinis saat ini adalah dengan strategi alogenik seperti
berjalan jauh lebih baik GM.CD40L yaitu mencampur vaksin yang
daripada sebelumnya, terdiri dari sel tumor autologous yang
masih ada beberapa area dicampur dengan sel tumor alogenik yang
yang dapat telah direkayasa untuk menghasilkan GM-
ditingkatkan. Sebagai CSF dan CD40L. GM.CD40L saat ini sedang
contoh, banyak dari dalam uji coba fase II untuk pengobatan
vaksin yang paling melanoma maligna. 
menjanjikan bergantung Seperti halnya monoterapi kanker, terapi
pada sel-sel autologus kombinasi menggunakan vaksin mungkin
untuk produksi lebih efektif daripada terapi vaksin
vaksin. Vaksin ini benar- saja. Vaksin kanker yang hanya
benar memberi pasien mempresentasikan respon imun sederhana
vaksin yang mungkin menemukan kegunaan sebagai
dipersonalisasi; namun, terapi adjuvan untuk digunakan setelah
mereka juga dapat operasi atau kemoterapi untuk
menghadirkan masalah menghilangkan sel kanker yang
jangka panjang karena tersisa. Dengan putaran uji klinis yang
biaya dan upaya yang sedang berlangsung saat ini, potensi
diperlukan untuk vaksin kanker terapi gen hampir dapat
membuatnya. Hanya terpenuhi. Fase awal pengembangan
sedikit rumah sakit yang vaksin sedang diselesaikan dan
 AGEN ONKOLITIK
Percobaan awal dari terapi oncolytic
• Dulu telah menyoroti kekuatannya yang
Bidang lain yang berkembang luar biasa, serta hambatan unik
dari terapi terapi gen untuk untuk implementasi
kanker adalah penggunaan pengobatan. Model mamalia dari
vektor oncolytic untuk terapi gen oncolytic telah bekerja
pengrusakan kanker. Seperti dengan sangat baik. Dalam model
imunoterapi, ini adalah konsep murine, kanker usus besar dan
yang telah ada selama hampir kandung kemih telah menunjukkan
satu abad dan, seperti manfaat kelangsungan hidup dan
imunoterapi, itu sedang mengurangi metastasis
mengalami renaissance karena menggunakan agen virus oncolytic
terapi gen. Vektor terapi gen Namun, ada beberapa rintangan
Oncolytic umumnya virus yang unik untuk viroterapi oncolytic pada
telah direkayasa secara genetik manusia. Kebanyakan orang
untuk menargetkan dan memiliki antibodi terhadap virus
menghancurkan sel-sel kanker umum yang digunakan untuk
sementara tetap tidak pengembangan terapi yang sering
berbahaya ke seluruh tubuh. mengarah pada respons imun yang
Vektor oncolytic dirancang untuk membersihkan agen virus sebelum
menginfeksi sel kanker dan ia sempat menginfeksi sel. Selain
• Percobaan klinis Saat Ini
Bahkan dalam tahap awal ini, terapi
virus oncolytic telah menunjukkan
beberapa keberhasilan. Kedua virus
yaitu adenovirus dan agen virus herpes
memiliki uji klinis yang sedang
berlangsung untuk kanker yang sulit
ditangani. Terapi adenoviral yang paling
terkenal adalah terapi virus ONYX-
015. ONYX-015 adalah adenovirus yang
telah direkayasa Jenisuntuk
keduakekurangan
dari oncolytic virotherapy
protein E1B virus.yang menjalani uji klinis menggunakan
virus herpes simpleks tipe 1 (HSV-1). Dua
vektor, G207 dan NV1020, saat ini dalam
fase I dan percobaan fase II untuk
pengobatan kanker yang keras.
• Masa yang Akan Datang
Karena virotherapy oncolytic
belum menjadi teknologi yang
matang, ada banyak ruang untuk Namun, begitu faktor-faktor ini
memperbaiki vektor diatasi, ada banyak manfaat untuk
pengobatan. Agar virotherapy terapi oncolytic. Sifat selektif dari
menjadi sukses, tingkat produksi virotherapy memastikan bahwa
partikel virus dalam sel kanker jaringan sehat akan berdampak
yang terinfeksi harus melampaui minimal. Selain itu, ketika
laju pertumbuhan sel kanker dikombinasikan dengan ekspresi
yang tidak terinfeksi. T- nya gen sitotoksik, terapi ini dapat
mungkin sulit dicapai dengan mempengaruhi tidak hanya sel-sel
tumor didirikan besar 54 dan yang membelah dengan cepat,
mungkin berarti bahwa tetapi mereka di jaringan
virotherapy harus sekitarnya membuat lingkungan
dikombinasikan dengan terapi mikro kurang menguntungkan
yang ada, seperti operasi, untuk untuk pertumbuhan
mengurangi jumlah sel-sel kanker. Kombinasi sifat membunuh
kanker dalam pengobatan yang kuat dari vektor-vektor ini
awal. Selain itu, metode dikombinasikan dengan
pemberian pengobatan yang selektivitas menjadikan mereka
paling efektif belum jalan yang menarik untuk
 TRANSFER GEN
• Dulu
Salah satu perawatan paling menarik Kesulitan dalam tranfer gen
yang muncul dari konsep terapi gen ini adalah mengirimkan gen
adalah transfer gen atau penyisipan. Ini terapeutik ke sel target. Uji
adalah paradigma pengobatan baru coba transfer gen
yang melibatkan pengenalan gen asing sebelumnya mengalami
ke dalam sel kanker atau jaringan di pembungkaman gen
sekitarnya. Gen dengan sejumlah fungsi sehingga bahkan jika gen
yang berbeda telah diusulkan untuk itu secara efektif
jenis terapi ini, termasuk gen bunuh diri dimasukkan ke dalam sel,
(gen yang menyebabkan kematian itu tidak diekspresikan atau
seluler saat diekspresikan), gen diekspresikan hanya untuk
antiangiogenesis dan gen stasis seluler waktu yang terbatas. 
(gambar 3). Sejumlah vektor virus yang Meskipun rintangan ini,
berbeda telah digunakan dalam uji klinis tumor padat seperti
untuk menghasilkan gen-gen ini, tetapi prostat, paru-paru dan
paling sering menggunakan adenovirus tumor pankreas telah
yang tidak memiliki replikasi. Metode berhasil diobati pada model
nonviral, termasuk transfer DNA hewan menggunakan
telanjang dan pelapis DNA berbagai gen dan metode
oligodendromer, serta elektroporasi juga transfer.
 Agen terapi terapi gen yang menarik
• Percobaan klinis Saat Ini lainnya adalah Rexin-G, agen terapi
Karena teknologi transfer gen gen suntik pertama yang mencapai
mencakup beragam pilihan terapeutik status orphan drug dari Food and
seperti itu, tidak mungkin untuk Drug Administration untuk
mendeskripsikan contoh untuk setiap pengobatan kanker
perawatan. Namun, sebagian daftar pankreas. 68 Agen terapi gen ini
perawatan dalam uji klinis signifikan mengandung gen yang dirancang
saat ini dengan deskripsi singkat untuk mengganggu gen cyclin G1
masing-masing disajikan dalam tabel 2. dan disampaikan melalui vektor
TNFerade adalah salah satu pilihan retroviral. Rexin-G juga sedang
pengobatan yang saat ini dalam uji dievaluasi untuk kanker usus besar
coba tahap II. Agen ini adalah replikasi yang telah bermetastasis ke hati.
vektor adenoviral tidak kompeten yang Teknologi transfer gen yang
memberikan gen necrosis menunjukkan janji besar adalah
factor- α (TNF -α ) di bawah kontrol replikasi adenovirus yang tidak
transkripsional dari promotor yang kompeten yang
diinduksi radiasi. TNF- α adalah sitokin mengirimkan gen HSVtk ke tumor
dengan potensi sifat ticancer dan yang diikuti oleh pengobatan
toksisitas sistemik tinggi, dan terapi gansiklovir. 
gen TNF- α menyediakan cara untuk Beberapa agen yang menggunakan
menargetkan molekul ini hanya ke sel replikasi vektor adenoviral yang
kanker melalui penggunaan injeksi tidak kompeten untuk
intratumoral dan promotor yang mengantarkan gen p53 ke sel
diaktifkan oleh terapi radiasi. kanker juga saat ini dalam uji coba
Pada pasien dengan histologi fase II dan III. Gen p53 merupakan
• Masa yang Akan Datang
Transfer gen, sementara jenis pengobatan
baru yang radikal, juga merupakan satu-
satunya produk terapi gen untuk
mendapatkan persetujuan regulasi di pasar
global apa pun, seperti yang ditunjukkan
oleh persetujuan Gendicine Cina tahun
2003 untuk penggunaan klinis. Sejak
disetujui, ribuan pasien telah dirawat di
China; beberapa dengan suntikan
berulang. Hingga kini, hasil uji coba
kemanjuran skala besar belum
Teknologi transfer gen memungkinkan
dipublikasikan; hasil yang ditunggu-tunggu.
keragaman kemungkinan perawatan yang
luar biasa. Studi-studi ini telah
memberikan tanda-tanda yang sangat
menggembirakan bahwa penelitian saat ini
berada di jalur yang benar. Metode
pengiriman baru dan kaset ekspresi gen
yang lebih canggih akan menciptakan
alternatif terapeutik yang lebih baik untuk
membuat tujuan pengobatan kanker dan
pemberantasan dapat dicapai.
PENGOBATAN KANKER MELALUI METODE
GEN TERAPI
CINDY APRILLIANIE WIJAYA, MUCHTARIDI
MUCHTARIDI
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS PADJADJARAN
SUMEDANG, JAWA BARAT, INDONESIA
 STRATEGI TERAPI GEN PADA
PENGOBATAN KANKER
1. Gene Replacement
(Penggantian Gen)
Strategi ini dilakukan dengan
melihat kemungkinan
menggantikan gen yang termutasi
dengan gen yang normal melalui
rekombinasi homolog in situ. Ini 2. Modifikasi Gen
merupakan cara yang lebih baik Strategi ini dilakukan dengan
untuk mengobati atau bahkan langsung mengubah gen
menyembuhkan penyakit termutasi dan merehabilitasi
monogenik, tetapi jarang fungsi sel target. Ini merupakan
digunakan untuk terapi gen kanker cara yang ideal untuk terapi
karena keterbatasan teknis dan gen tetapi memiliki kesulitan
perubahan genetik yang kompleks besar. Jarang ditemukan
pada kanker. (Weichselbaum, penelitian dengan strategi ini
1997) (Ahrendt, 2003)
3. Augmentasi Gen
Dilakukan dengan mentransfer gen
terapeutik eksogen ke dalam sel
yang kekurangan dan membiarkan
produk hasil ekspresi menggantikan
kekurangan tersebut. Titik utama
teknologi ini adalah pemilihan gen
terapi dan sistem pengiriman gen.
(Reid, 2002)
4. Blokade Gen
Strategi ini bertujuan untuk mencegah
transkripsi dan translasi gen terkait kanker
tertentu dengan menggunakan urutan
nukleotida pendek yang mengikat DNA atau
RNA secara komplementer, yang dapat
memblokir sinyal jalur transduksi yang
menyimpang dan menginduksi diferensiasi
tumor dan apoptosis. Hal ini juga dikenal
sebagai terapi gen antisense. Bahan yang
umum digunakan dalam strategi ini mencakup
oligonukleotida antisense, ribozymes dan
small interfering RNAs (siRNAs). (Soares, 2012)
 METODE TERAPI GEN
1. Penghantaran Ex vivo
Dalam sistem ini, sel-sel 2. Penghantaran In vivo
penerima yang sebelumnya Dalam sistem ini, vektor gen
diambil dari jaringan target atau yang membawa gen terapeutik
sumsum tulang dikultur secara secara langsung dimasukkan ke
in vitro dan kemudian jaringan target atau organ,
dimasukkan kembali kedalam melalui injeksi sistemik, injeksi
tubuh pasien setelah transfer in situ, obat oral atau
gen terapeutik. Untuk semprot,dimana teknik injeksi
meningkatkan keberhasilan in situ lokal pada jaringan tumor
terapi, sel yang telah paling sering dilakukan. Hampir
ditransfeksi secara positif semua uji klinis in vivo pada
diseleksi dari total sel untuk terapi gen kanker didasarkan
implantasi, yang merupakan pada metode ini, yang meliputi
kelebihan dari pemberian secara injeksi intratumoral yang
ex vivo. Namun, kekurangan dari dimediasi oleh CT atau USG.
sistem penghantara ex vivo (Bartholomae, 2012)
adalah prosesnya kompleks dan
kelangsungan hidup sel yang
 VEKTOR DALAM TERAPI GEN

Sistem vektor ini dapat dibagi menjadi dua kategori: sistem vektor
non viral dan viral. Keduanya telah diteliti dan masing-masing
memiliki keuntungan dan kelemahan yang berbeda. Metode Viral
biasanya menawarkan efisiensi transduksi yang lebih tinggi dan
ekspresi gen jangka panjang, tetapi mungkin dapat terkait dengan
toksisitas, imunogenisitas, mutagenisitas, ketidakmampuan untuk
mentransfer gen ukuran besar dan biaya tinggi. Metode non-viral
memberikan keuntungan relatif aman, kemampuan untuk
mentransfer gen ukuran besar, toksisitas kurang dan persiapan
mudah; mereka juga dapat dimodifikasi dengan ligan untuk
jaringan atau target spesifik sel. Namun, metode non-viral
menunjukkan keterbatasan efisiensi transfeksi rendah dan
ekspresi transgen yang rendah. (Raty, 2008)