Kromatografi cair

kinerja tinggi (HPLC)

DISUSUN OLEH :
FITRIA NUR ANISSA
K H AI R U WAR D A H Z E B U A
SELASA, 29 OKTOBER 2019
KELOMPOK 6
1 KIA
 PENGERTIAN

Kromatograf i Cair Kinerja Tinggi (KCKT)

atau High Performance Liquid
Chromatography (HPLC) merupakan salah
satu metode fisikokimia berdasarkan pada
teknik kromatografi di mana fase geraknya
berupa cairan dan fase diam dapat dalam
bentuk cair atau padat.

Metodeinisangatbermanfaat di bidang farmasi untukmenganalisis secara

simultan beberapaanalitdalammartikssederhana maupunkompleks.
Kromatografi cairkinerjatinggimerupakan suatumetode pemisahan
canggihdalamanalisisfarmasi yang dapatdigunakan sebagaiujiidentitas,
ujikemurnian danpenetapan kadar. Titikberatnyaadalahuntukanalisis
senyawa-senyawa yang tidakmudah menguap dantidakstabilpadasuhu
tinggi, yang tidakbisadianalisis denganmetode KG
Secara umum KCKT digunakan
dalam kondisi-kondisi berikut:

1. Pemisahan berbagai senyawa organik

maupun anorganik, ataupun spesimen biologis
2. Analisis ketidakmurnian (impurities)
3. Analisis senyawa-senyawa yang tak mudah
menguap (non-volatil)
4. Penentuan molekul-molekul netral, ionik
maupun zwitter ion
5. Isolasi dan pemurnian
6. Pemisahan senyawa-senyawa dengan
struktur kimia yang mirip
7. Pemisahan senyawa-senyawa dalam jumlah
kecil (trace elements)
JENIS – JENIS HPLC :

1. KROMATOGRAFI ADSORBSI
2. KROMATOGRAFI FASE
TERIKAT (KROMATOGRAFI
PARTISI)
3. KROMATOGRAFI PENUKAR
ION
4. KROMATOGRAFI PASANGAN
ION
5. KROMATOGRAFI EKSKLUSI
UKURAN
6. KROMATOGRAFI AFINITAS

Logo here
 Instrument HPLC

Instrumentasi HPLC pada

dasarnya terdiri atas: wadah fase
gerak (Reservoir) , pompa, alat
untuk memasukkan sampel
(tempat injeksi), kolom,
detektor, wadah penampung
buangan fase gerak, dan suatu
komputer atau integrator atau
perekam.
 Prinsip Kerja HPLC
Adapun prinsip kerja dari
KCKT adalah suatu tekhnik
yang mana solut atau zat
terlarut terpisah perbedaan
• HPLC dapat menganalisa
kecepatan elusi, dikarenakan
secara kualitatif dan
solut-solut ini melewati suatu
kuantitatif. Pada proses
kolom kromatografi. Pemisahan
kualitatif cara yang paling
solut-solut ini diatur oleh
umum untuk
distribusi solut dalam fase gerak
mengidentifikasi adalah
dan fase diam
dengan melihat Retention
Kerja HPLC pada prinsipnya time (RT).
adalah pemisahan analit-analit
berdasarkan kepolarannya, • Kemudian melalui analisa
alatnya terdiri dari kolom kuantitatif dapat diketahui
(sebagai fasa diam) dan larutan kadar komponen yang
tertentu sebagai fasa geraknya. dianalisis di dalam sampel.
Yang paling membedakan HPLC
dengan kromatografi lainnya • Setelah komponen dalam
adalah pada HPLC digunakan sample berhasil dipisahkan,
tekanan tinggi untuk mendorong
tahap selanjutnya adalah
fasa gerak. Campuran analit
akan terpisah berdasarkan proses identifikasi.
kepolarannya, dan kecepatannya
untuk sampai ke detektor (waktu
retensinya) akan berbeda, hal ini
akan teramati pada spektrum
yang puncak-puncaknya terpisah.
6
 Kelebihan Dan Kekurangan Metode
Analisis Dengan HPLC
Kelebihan itu antara lain:
a. Mampu memisahkan molekul-
molekul dari suatu campuran
b. Mudah melaksanakannya
c. Kecepatan analisis dan
kepekaan yang tinggi
d.Dapat dihindari terjadinya
dekomposisi / kerusakan
bahan yang dianalisis ü
Resolusi yang baik
e. Dapat digunakan bermacam-
macam detektor
f. Kolom dapat digunakan
kembali
kekurangannya adalah:
a.Larutan harus dicari fase
diamnya terlebih dahulu
b.Hanya bisa digunakan untuk
asam organic
c.Harus mengetahui kombinasi
yang optimum antara pelarut,
analit, dan gradient elusi
d.Harganya mahal sehingga
penggunaannya dalam lingkup
penelitian yang terbatas
7
THANK YOU
KELOMPOK 6

FITRIA NUR ANISSA

KHAIRU WARDAH ZEBUA

1 KIA
 PERTANYAAN DARI AUDIENS :
1. Berbagai macam jenis HPLC salah satunya Kromatografi Penukar Ion , sebutkan kelebihan dari Kromatografi Penukar Ion !
( pertanyaan dari saudari ANNISA SHAFIRA)
2. Jelaskan fungsi dari masing – masing komponen HPLC!
( pertanyaan dari saudara ARIF SANGDA BAHANA )
3. Bagaimana detektor dapat dikatakan baik, dan detektor apa yang paling umum digunakan ?
( pertanyaan dari NURI AMSO SIREGAR)
4. Berikan contoh penggunaan metode HPLC dibidang farmasi dan kesehatan !
( pertanyaan dari DESTI NUR WAHYUNITA )
5. Jelaskan dibidang apa saja Kromatografi Afinitas digunakan !
( pertanyaan dari WINDA MANIZA PUTRI )