KELOMPOK 4

Hafifah AK1018016
Nor Khalida Hasanah AK1018040
Sindy Cahya Wulandari AK1018054
Escherichia coli
 Pengertian
 Escherichia coli merupakan bakteri gram negatif
bersifat anaerob fakultatif dan tidak daoat
membentuk spora.Bakteri ini dapat hidup pada
berbagai substat dengan melakukan fermentasi
anaerobik menghasilkan asam laktat, suksinat,
asetat, etanol, dan karbondioksida
Alat Pemeriksaan dan Pengelolaan Terstandar

Ose
Tabung reaksi

Lampu spiritus
Tabung
durham
Petridish

Mikroskop
Beaker glass
 Setiap alat yang akan dioperasikan itu harus benar-benar dalam
kondisi:
 a. siap untuk dipakai (ready for use)
 b. bersih
 c. berfungsi dengan baik
 d. terkalibrasi
 e. Peralatan yang ada juga harus disertai dengan buku petunjuk
pengoperasian.
Media Reagensia dan Standar Pengelolaan Media Reagensia

Media
MediaEMB
EMB
Selenit
SelenitBroth
Broth
Media
Mediagula-gula
gula-gulapanjang
panjang
Kapas
Kapas
Swab
Swabsteril
steril
NaCl
NaCl0,9%
0,9%
 Agar media mempunyai kualitas seperti yang
diharapkan perlu dilakukan, yaitu :
 uji kualitas
 uji sterilitas
 uji spesifitas.
 Prosedur Kerja Pemeriksaan

 1. Pembiakkan
 Untuk sampel yang berasal dari makanan/minuman, siapkan bahan
pemeriksaan berupa sampel makanan/minuman sebanyak 3-5 gr/ml ke
dalam media enrichment yaitu selenith broth (untuk pemeriksaan
E.coli), eramkan dalam inkubator selama 1 x 24 jam pada suhu 370C
 Untuk sampel yang berasal dari faeces/rectal swab, sampel uji
langsung ditanam pada media enrichment yaitu selenith broth (untuk
pemeriksaan E.coli), eramkan dalam inkubator selama 1 x 24 jam pada
suhu 370C
 2. Isolasi media selektif
 panaskan jarum ose hingga merah membara secara tegak lurus
 ambil 1 ose bakteri dari tabung biakan bakteri E.coli
 tanamkan pada media isolasi yaitu endo (EMB) agar secara zig
zag atau garis lurus
 eramkan dalam inkubator selama 1x24 jam pada suhu 370C
dengan posisi terbalik

 3. Uji biokimia
 ambil media isolasi yang telah dieramkan dalam inkubator
 lihat koloni yang tumbuh pada media isolasi dengan ciri-ciri
sebagai berikut :
 Media isolasi Ciri-ciri koloni positif (+)
Endo agar berwarna merah tua metalik, besar-besar, cembung,
  smooth
MC (Mac Conkey) Agar Berwarna merah, keruh, smooth, sedang-besar,
  keeping- cembung
EMB (Eosyn Methylen Berwarna hijau metalik tengah berwarna ungu tua,
Blue) Agar sedang, keping, smooth
  
 dari koloni tersangka E.coli, ambil 1 koloni kemudian ditanam
pada media biokimia yaitu gula-gula panjang (glukosa, laktosa,
manitol, maltosa, sakarosa, AP indol, MR, VP, citrat, SIM, TSIA)
 eramkan dalam inkubator selama 1x24 jam pada suhu 370C
 4. Tes serologi
 baca hasil yang tumbuh pada test biokimia dan bandingkan
dengan tabel hasil pemeriksaan identifikasi Escherichia coli
dengan gula-gula panjang
TERIMAKASIH