TUGAS BIOFARMASETIKA

RANCANGAN FORMULASI SEDIAAN NANOPARTIKEL

Oleh :

AFRIYANI
1821012027

DOSEN PENGAMPU
Dr. Muslim Suardi, MS,Apt

PROGRAM PASCASARJANA
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS ANDALAS
pendahuluan

Nanopartikel adalah partikel berukuran 1-100 nanometer dan

kebanyakan metode menyarankan sebaiknya ukuran diameter partikel
antara 200 dan 400 nm. Dalam bidang farmasi, terdapat dua
pengertian nanopartikel yaitu senyawa obat melalui suatu cara dibuat
berukuran nanometer (nanokristal) dan suatu obat dienkapsulasi
dalam suatu sistem pembawa berukuran nanometer, yaitu
nanocarrier (Rachmawati, 2007).
Tujuan nanopartikel
untuk mengatasi mengurangi efek iritasi
kelarutan zat aktif yang zat aktif pada saluran
sukar larut. cerna

memperbaiki
bioavailabilitas yang
buruk

memodifikasi sistem meningkatkan stabilitas

penghantaran obat zat aktif dari degradasi
sehingga obat dapat lingkungan (penguraian
langsung menuju daerah enzimatis, oksidasi,
yang spesifik hidrolisis

(Mohanraj and Chen, 2006)

Keuntungan

1. karakteristik nanopartikel memudahkan mencapai penargetan obat aktif setelah pemberian parenteral.

2. Permukaan partikel nano dapat dimodifikasi untuk diubah biodistribusi obat-obatan dengan pembersihan selanjutnya obat sehingga
mencapai terapi maksimal dengan efek samping minimal obat. 

3. Pelepasan terkendali dan karakteristik degradasi partikel dapat dengan mudah dimodulasi oleh pilihan matriks konstituen.

4. Pengisian obat-obatan relatif tinggi dan obat dapat dimasukkan ke dalam sistem tanpa reaksi kimia hal ini merupakan faktor penting untuk
menjaga aktivitas obat.

5. Penargetan spesifik situs dapat dicapai dengan menargetkan ligan ke permukaan partikel atau menggunakan magnet

6. Liposom dan nanopartikulat berbasis polimer umumnya biodegradable, tidak menumpuk di dalam tubuh dan resiko sedikit .

7. Nanopartikel berukuran kecil dapat menembus kapiler lebih kecil yang memungkinkan akumulasi obat secara efisien ke target .

8. Berbagai rute administrasi tersedia termasuk oral, hidung, parenteral, intra okular dll.

Konwar Ranjit et al. Int. Res. J. Pharm. 2013, 4 (4)

Kekurangan
• Disamping kelebihannya, nanopartikel juga memiliki beberapa kekurangan,
antara lain: nanopartikel susah dalam penanganan dan penyimpanan karena
mudah teragregasi, nanopartikel tidak cocok untuk obat dengan dosis besar;
karena ukurannya kecil, nanopartikel dapat memasuki bagian tubuh yang tidak
diinginkan yang dapat menimbulkan akibat yang berbahaya, misalnya dapat
menembus membran inti sel dan menyebabkan kerusakan genetik yang tidak
diinginkan atau mutasi (Rawat et al., 2006).
Jenis-jenis Nanopartikel

nanokristal

Nanocarrier
(nanotube, liposom, misel)
nanokristal
• Nanokristal  gabungan dari banyak molekul
yang membentuk suatu kristal, merupakan
senyawa obat murni penyalutan tipis
menggunakan surfaktan. Nanokristal tidak
membutuhkan banyak surfaktan agar stabil
karena gaya elektrostatik sehingga mengurangi
kemungkinan keracunan oleh bahan tambahan
(Rawat et al., 2006).
• Nanokristal memungkinkan pengembangan
formulasi melalui rute pemberian dimana ukuran
partikel merupakan faktor kritis, seperti obat
tetes mata, cairan infus, dan obat suntik
(Rachmawati, 2007)
Nanocarrieer
• Nanotube adalah lembaran atom yang diatur menjadi bentuk tube dalam skala nanometer, memiliki
rongga di tengah dan struktur yang menyerupai sangkar berbahan dasar karbon

• Nanotube berdinding tunggal digunakan sebagai sistem penghantaran obat dalam gen karena
Nanotube bentuknya menyerupai asam nukleat

• Nanotube berdinding ganda digunakan sebagai pembawa untuk transformasi sel bakteri dan untuk
elektroporasi sel (Rawat et al., 2006).

Nanoliposom •Liposom merupakan konsentrat vesikel lapis ganda yang terdapat cairan di dalamnya dengan dibungkus membrane lipid lapis ganda
yang terbuat dari fosfolipid alam umumnya (Rawat et al., 2006)
•Liposom biasanya digunakan sebagai pembawa obat sediaan kosmetik untuk mempertahankan kelembaban kulit (Rachmawati,
2007).

Nanopartikel Lipid Padat •Nanopartikel lipid padat adalah pembawa koloidal berbahan dasar lipid dengan
ukuran 20-1000 nanometer yang terdispersi dalam air atau larutan surfaktan
dalam air, berisi inti hidrofob padat disalut oleh fosfolipid lapis tunggal.
 Misel
• Misel merupakan agregat molekul ampifatik dalam air dengan bagian
nonpolar di dalam dan polar di luar pada bagian yang terpapar air.
• obat yang bersifat hidrofob terdisposisi di bagian dalam inti misel sehingga
cocok sebagai pembawa obat yang tidak larut air (Rawat et al., 2006).

• Dendrimer merupakan makromolekul yang terdiri atas cabang-cabang di sekeliling

inti pusat yang bentuk dan ukurannya dapat diubah sesuai yang diinginkan.
• Dendrimer cocok untuk zat penyalut untuk perlindungan dan penghantaran obat
menuju target yang spesifik sehingga dapat mengurangi tokisitas (Rawat et al., 2006;
Rachmawati, 2007)

• Nanopartikel polimerik terbagi menjadi nanokapsul dan nanosfer. Nanokapsul

Nanopartikel Polimerik terdiri dari polimer yang membentuk dinding yang melingkupi inti dalam di
mana obat dijerat. Nanosfer terbuat dari matrik polimer padat dan senyawa
obat terdispersi di dalamnya (Delie, 2005).

Nanopartikel cross link Nanopartikel cross link merupakan

nanopartikel yang terbentuk dari proses sambung silang
antara elektrolit dengan pasangan ionnya. Ikatan sambung
silang ini terjadi secara ionik maupun kovalen
nanotube missel

dendrime
Nanopartikel
Polimerik
Type of nanoparticle

Konwar Ranjit et al. Int. Res. J. Pharm. 2013, 4 (4)

 MEKANISME PEMBUATAN NANOPARTIKEL
• Pemilihan metode pembuatan
nanopartikel bergantung dengan
karakter fisikokimia dari polimer
dan obat yang akan dimasukkan.
Adapun metode yang telah
dilakukan dalam pabrik (lihat
gambar 3), namun yang paling
banyak digunakan adalah metode
double emulsion dan evaporasi
serta solvent evaporation.
Konwar Ranjit et al. Int. Res. J. Pharm. 2013, 4 (4)
Karakterisasi Nanopartikel

Sifat Organoleptis

Ukuran dan Distribusi Ukuran Nanopartikel

Morfologi Nanopartikel

Potensial zeta

Persen Transmitan (%T)

Persen Penjeratan Zat Aktif

Konwar Ranjit et al. Int. Res. J. Pharm. 2013, 4 (4)
“Formulation and evaluation of folic acid conjugated gliadin nanoparticles of curcumin for targeting
colon cancer cells”
pendahuluan
•Paparan yang terlalu lama untuk hampir semua agen provokatif di Indonesia lingkungan (radiasi, bahan kimia, virus, peradangan, dll dapat menyebab kanker (Seyfried dan Shelton, 2010)

•Formulasi nano merupakan bidang paling maju untuk pemberian obat konvensional yang memiliki keterbatasan seperti kekurangan penargetan yang ditentukan, kelarutan dalam air yang lebih rendah, bioavaibilitas oral yang buruk dan penurunan indeks terapeutik (Gelperinaetal ., 2005).

•Sesuai literatur reseptor folat telah dieksplorasi memberikan racun protein, kemoterapi rendah berat molekul agen, agen pencitraan radio, agen kontras MRI, agen terapi, liposom yang mengandung obat kemoterapi obat, oligonukleotida antisense, ribozim, dan agen imunoterapi untuk sel kanker (Duthie, 1999)

Sonekar et al. 2016

 Proliferasi kanker usus meningkat dari hari ke hari
di negara maju (Pisani et al., 2002).

Penelitian pra-klinis Penelitian menggunakan curcumin telah

terbukti mengurangi berbagai kanker sel karena penghambatan
NF-κB dan COX-2, asam arakidonat metabolisme melalui
lipoksigenase, memulung radikal bebas, ekspresi sitokin
inflamasi IL1b, IL-6, TNF-a dan regulasi enzim (Jobin et al., 1999;
Huang et al.,1991; Cho et al., 2007; Liu et al., 1993)
Sonekar et al. 2016
 curcumin (CUR)
Studi juga
adalah bis-R, -tidak
jenuh-diketon (biasa Hal menghambat dilakukan dalam
disebut proliferasi dalam berbagai model
diferuloylmethane)
berbagai sel tumerogenetik
yang menunjukkan (Tuttle et al.,
tautomerisme keto- kanker yang
2012). Curcumin
enol yang memiliki diisolasi dari
keto dominan dalam memblokir jalur
keganasan
larutan asam dan NFkB yang
netral dan bentuk seperti leukemia,
bertanggung
enol stabil di media tumor payudara, jawab
alkali diperoleh dari paru-paru,
rimpang ramuan kelangsungan
abadi Curcuma longa, prostat dan usus hidup dan
dapat membalikkan besar (Anand et metastasis sel
fenomena resistensi al., 2008).
multi-obat (Bansal et Sonekar ettumor (Srimal dan
al. 2016
al., 2011). Dhawan, 1973)
 d
la
m
efn
P
eo
m
sm
p
n
e
l
i
t
i
a

ef
n
i
n
i

ram
n
t
u
k

m
e

tb
r
a
n
c
a
n
g

ai
d
a
n
m
e

d
h
n

w
g
e
m
b
a
n
g

al
k
a
n

g
l
i

i
n
a
d
i
n
n
a

kn
m
n
o
p
a
r
t
i

alo
k
e
l
k
u
r

il
n
k
u
m
i
n
u

n
n

e
t
u
k
p
e

ko
n
g
i
r
i
m
a

alu
n

o
b
a
t

ro
o

l
r
a
l
u
n

al-
t
u
k
m
e
n

km
a
r
g
e
t
k
a

t(o
n

s
e
l
k

eK
a

l
n
k
e
r

re
p

Sonekar et al. 2016

a
d
a
u
s

iD
u

k
s
b
e
s
a

s-u
r
Identifikasi dan karakterisasi kurkumin

• Spektrum penyerapan inframerah obat, polimer, folat konjugasi asam (FA-

CUR-GNP) dan non-konjugasi asam folat (CUR-GNP) landasan dan
menyebar dalam KBr menggunakan spektroskopi FTIR dilakukan pada
Spectrum 65 (Perkin Elmer).

• Spektrum direkam antara rentang 4000 dan 600 cm − 1. Spektrum

serapan IR dari obat, polimer, FA-CUR-GNP dan CUR-GNP, menunjukkan
panjang gelombang maksimum yang sama dengan standar referensi.
Sonekar et al. 2016
Spektroskopi massa

Spektrum massa Ionisasi Semprot Elektron (ESI-MS) dari Curcumin.

NMR spectrum of curcumin Kurkumin obat murni (5 mg) dilarutkan dalam 1

ml CD3OD dan dilakukan analisis NMR
Sonekar et al. 2016
Solubility studies
Kelarutan dapat ditentukan
pelarut (METANOL, AIR, ETANOL, ASETON)
Timbang setara dari jumlah obat + pelarut
Shaker selama 24 jam dan suhu 25°C
(N=3)
Sonekar et al. 2016
Kelarutan curcumin
disentrifugasi pada 2000 rpm, dan
ianalisis dengan HPLC untuk
disaring dengan filter membran
(0,45μm)
mengukur kandungan obat terlarut.
Curcumin tidak larut dalam air, sedikit
larut dalam metanol, etanol, minyak
kedelai, asam oleat dan vitamin E asetat
tetapi larut dalam aseton secara bebas.
 Profil kelarutan gliadin

Gliadin  prolamin yang hanya larut jika sesuai

rasio fase air dan organik

1% larutan gliadin dibuat dengan menggunakan rasio etanol yang Kelarutan tertinggi Gliadin ditemukan dalam etanol
Tentukan nilai absorbansi dari spektrofotometer UV pada 283 nm
berbeda dan air (70% v / v).

Sonekar et al. 2016

Koefesien Partisi
Koefisien partisi antara n- 10 ml n-oktanol dan 10 ml air suling +5 mg •campuran kemudian
obat, campurannya
oktanol / air pada suhu kemudian dikocok dengan diaduk selama
dipindahkan ke corong pisah
dan biarkan selama 6 jam.
kamar(30 ˚C). 24 jam dengan shaker pada suhu kamar

•Kandungan obat dalam

Fase air dan oktanol dipisahkan dan
disaring melalui membran
fase air dianalisis dengan
spektrofotometer UV-
Visible.
Kandungan obat dalam fase air dianalisis dengan
spektrofotometer UV-Visible.

Sonekar et al. 2016

Sonekar et al. 2016
Entrapment efficiency

Obat + dengan gliadin

polimer dalam campuran alkohol 70%.

Rasio obat dan polimer disiapkan untuk berbagai batch nanopartikel.

Efisiensi obat (Moradhaseli et al., 2013) ditentukan dengan mendispersikan suspensi nanopartikel dalam etanol 70% dan obat
diekstraksi setelah disentrifugasi. Konsentrasi kurkumin dalam supernatan ditentukan dengan bantuan spektrofotometer UV (Perkin
Elmer, USA) pada 549 nm dan diukur dengan bantuan kurva kalibrasi yang menggambarkan hubungan absorbansi dan konsentrasi.

Sonekar et al. 2016

• Efisiensi penjebakan F5 dan F6 adalah yang
tertinggi (52% dan 56%) di antara CUR-GNPS
dan FACUR GNPs.
• Di antara enam formulasi, F-3 dan F-4
dipilih sebagai formulasi yang dioptimalkan
karena ukuran distribusi partikel kecil serta
efisiensi yang baik dan dapat dievaluasi untuk
pelepasan obat dan pengambilan in vivo

Sonekar et al. 2016

Folic acid conjugation method
• FA-CUR-GNPS disiapkan dengan metode tiga langkah.
• Pertama, gugus fenolik CUR mudah melekat pada amino kelompok GNP membentuk CUR-
NH2 yang stabil.
• Kedua, EDC dulu digunakan untuk mengaktifkan gugus karboksil gliadin membentuk EDC-
karboksilat.
• Ketiga, gugus karbonil yang diaktifkan selanjutnya bereaksi dengan gugus amino bebas dari
asam folat yang dihasilkan dalam pembentukan FA-CUR-GNPS.
• Untuk metode konjugasi asam folat; Asam folat (5 mg) dilarutkan dengan natrium hidroksida
konsentrasi 20% sebanyak (10 ml) dan larutan yang terbentuk ditambahkan 10 ml suspensi
buffer fosfat (pH 7,4) mengandung 20 mg gliadinNPs
• Produk yang dikumpulkan adalah dicuci 3-4 kali dengan air deionisasi, disentrifugasi dengan
20.000 rpm selama 15 menit jam 4°C, dan keringkan untuk mendapatkan bubuk.
Sonekar et al. 2016
Metodologi persiapan nanopartikel
Partikel nano Gliadin dibuat dengan sederhana metode desolvation (Coester et al., 2000). Metode ini
meliputi pembuatan fase berair A dan fase non-berair B. Phase B mengandung konsentrasi gliadin
berbeda yang dilarutkan pada 250C dalam 20 ml campuran etanol 70% / air 70%.

Diperlukan obat (curcumin) pada fase ini jumlah. Fase-A mengandung konsentrasi
surfaktan PF-68 0,5% dalam 40 ml air suling. Fase ini disaring (Millipore 0,45 μ).

Kemudian fase-B ditambahkan setetes demi setetes dengan bantuan

jarum suntik sekali pakai selama 1 jam.
Konsentrasi Suspensi nanopartikel diuapkan dengan rotary evaporation dan
dimurnikan dengan sentrifugasi selama 15 menit pada 20.000 rpm pada 4 0C.

Supernatan yang terbentuk dipisahkan dari pelet dan ditambahkan

dalam 2 ml air suling.
Akhirnya diliofilisasi dengan menggunakan manitol 5% sebagai
pelindung menangis.
Sonekar et al. 2016
 FACUR-GNPs dan CUR- Asam folat memiliki
Persiapan asam GNPs dipertimbangkan Dengan endositosis yang
folat terkonjugasi dengan cermat. Asam folat biokompatibilitas dimediasi reseptor, telah
juga terkonjugasi dengan atau tidak membuktikan bahwa
Gliadin polimer yang membantu konjugat asam folat
imunogenisitas,
nanopartikel target
stabilitas tinggi dan
memediasi internalisasi
pengiriman obat ke sel yang lebih cepat
kurkumin kanker karena banyak sel biaya ekonomi kinetika daripada
berhasil kanker mengekspresikan
(Bhattacharya et pendekatan lain melalui
asam folat pada membran seluler
diformulasikan. permukaannya. al., 2011).

Sonekar et al. 2016

Optimization of folic acid conjugated and non-conjugated
nanoparticle
• formulasi yang terbaik memiliki ukuran partikel dan zeta potensial dipilih untuk
penelitian ini. Sampel dimasukkan ke cuvette 1cm2 dalam ruang termostat dan
ukuran partikel ditentukan (Tabel 1).

Sonekar et al. 2016

Characterization of nanoparticles
Morfologi partikel TEM

• Karakterisasi nanopartikel FACUR-GNPs dan

CUR-GNPs diperoleh dari ukuran kisaran
160–190 nm (Gbr. 4).

• Partikel-partikel ikatan silang terkonjugasi

asam folat menunjukkan morfologi bulat
dengan peningkatan ukuran.

• Mikroskopi elektron transmisi telah menjadi

metode yang disukai untuk melihat serapan
nanopartikel.
• Karena tingginya resolusi TEM dapat Sonekar et al. 2016
melihat invaginasi membran,pembentukan
vesikel dan organel (Song et al., 2010).
 Zeta potensial
• Formulasi F-3 dan F-4 nilai potensial zeta lebih
tinggi (-16,5 dan -24,4 mV).

• Semakin besar potensi zeta, semakin besar

stabilitasnya. Zeta potensial adalah indikator
yang dapat diandalkan dalam prediksi stabilitas
partikel dalam medium cair dan
kemungkinan interaksi dengan bahan lain.

Sonekar et al. 2016

In-vitro release studies
• Pelepasan nanopatikel CUR-GNP lebih
cepat yaiu 30% dan FA-GNP 10%
• Setelah 12 jam FA-GNP lebih cepat
dibandigkan CUR-GNP dapat dilitah
berdasaran nilai pelepasan komulatif dai
kedua formula f3 dan f5 masing-masing
92,92% dan 94%
• Hal ini disebabkan karena degradasi
polimer

Sonekar et al. 2016

Studi toksisitas in-vivo

Grafik disamping menunjukkan

formulasi F-3 dan F-4 aman,
kompatibel

uji patologis klinis pada hewan

untuk pengembangan obat baru
dalam studi toksisitas (Leissing
et al ., 1985).

Buffer fosfat digunakan sebagai

medium untuk invivo karena
tidak mempengarruhi aktivitas
biologis dari nanopartikel

Sonekar et al. 2016

Kesimpulan
1. Kanker usus merupakan kanker ketiga yang dapat menyebabkan kematian.
Perkembangan resistensi multidrug pada kanker sehingga penelitian memiliki
keinginan untuk menjadikan curcumin untuk mengobati kanker usus besar
2. Kelarutan cuccumin lebih rendah dapat diatasi dengan meningkatkannya
bioavailabilitas, melindunginya dari degradasi dan metabolisme, dan
meningkatkan kapasitas penargetannya terhadap tumor kanker.
3. Pengembangan konjugat kurkumin-gliadinolat merupakan efesiensi saat ini. FA-
CUR-GNP menunjukkan pelepasan obat in vitro yang tinggi dan stabilitas formulasi
juga dipertahankan
4. studi toksisitas in vivo juga menyatakan bahwa formulasi tidak beracun
  Sonekar et al. 2016
 Daftar pustaka
• Mohanraj, V.J. and Y. Chen. 2006. Nanoparticles : A Review. Tropical Journal of Pharmaceutical Research, 5 :1
• Rachmawati, H., Reker-Smit, C., Hooge, M.N.L., Loenen-Weemaes, A.M.V., Poelstra, K., Beljaars, L. 2007. Chemical
Modification of Interleukin-10 with Mannose 6-Phosphate Groups Yield a Liver-Selective Cytokine. DMD, 35 : 814-
821.
• Rawat, M.D., Singh, and S. Saraf. 2006. Bioactive Drugs. Biological and Pharmaceutical Bulletin, 29 Nanocarriers:
Promising Vehicle for
• Sonekar et al. 2016. Formulation and evaluation of folic acid conjugated gliadin nanoparticles of curcumin for targeting colon
cancer cells. ournal of Applied Pharmaceutical Science Vol. 6 (10), pp. 068-074, October, 2016.
• Song MM, Song WJ, Bi H, Wang J, Wu WL, Sun J, Yu M. Cytotoxicity and cellular uptake of iron nanowires. Biomaterials,
2010; 31:1509-1517
• Swarbrick, J., 2007, Encyclopedia of Pharmaceutical Technology, Third Edition, Volume 2, Informa Healthcare, New York
• Konwar Ranjit et al. 2014. Nano particle : an overview of preparation , characterization and application. International
research journal of pharmacy