Pengujian Toksisitas Lingkungan

Gambaran Pengujian tosisitas lingkungan Toksikologi telah diperbincangkan selama bertahun-tahun mengenai kebijaksanaan hasil ekstrapolasi dari uji toksisitas pada tikus ( dan spesies lainnya ) ke manusia . Perbincangan ini berpusat pada sesuatu spesies tertentu apakah spesies tersebut merupakan contoh yang baik untuk manusia . Kesimpulan dari perbincangan ini adalah dengan satu satunya menggunakan tes uji diri dalam toksisitas pada manusia.Ini, tentu saja,menimbulkan masalah tentang kesukuan oleh karena itu ini sangat membahayakan dan melanggar sederetan pengujian toksisitas menggunakan spesies binatang yang berbeda untuk menilai keamanan obat baru dan pengujian puncak dengan pengujian klinis yang dikontrol dengan hati-hati ketika ahli toksikologi tidak memiliki alasan untuk percaya bahwa obat tersebut akan memberikan pengaruh pada relawan atau relawan yang sakit . Hal itu perlu dilakukan untuk menyelesaikan pengujian toksisitas obat baru dengan 'test ' pada spesies yang dimaksudkan untuk obat tersebut . Aturan ini juga berlaku untuk obat hewan , meskipun dalam situasi kasus ini berbeda ketika dan itu dianggap tepat untuk menguji obat pada spesies target yang sangat jauh lebih awal dalam nya program pembangunan daripada kasus untuk obat-obatan manusia. Pada akhir periode pengujian perusahaan meminta Persetujuan untuk Pemasaran Aplikasi untuk Departemen Kesehatan ( Departemen Kesehatan ) melalui Badan Perizinan Obat ( MLA ) untuk obat-obatan manusia atau Departemen Pertanian , Perikanan dan Pangan ( MAFF ) melalui Obat Hewan Direktorat ( VMD ) untuk obat-obatan hewan. Paket mencakup penilaian luas tentang keamanan obat . Jika dokumen ini ini disetujui dan obat dilisensi untuk dipasarkan i i merupakan maksud agar bisa menjadi obat. ( Obat A adalah farmakologi zat aktif , obat-obatan yang digunakan untuk mengobati penyakit. Persetujuan untuk pestisida juga sama,itu juga termasuk dengan pertimbangn dari(laporan panitia tentang pestisida ) paket toksikologi agar persetujuan diperbolehkan untuk dipasarakan. Kebutuhan untuk menilai risiko obat-obatan dan pestisida terhadap lingkungan adalah asumsi penting yang sangat besar . Kebutuhan tersebut

terbesar untuk pestisida karena mereka sering digunakan langsung ke lingkungan ( misalnya insektisida disemprotkan ke tanaman ) dan pastilah memiliki efek mencemari pada ekosistem .Obat hewan adalah urutan yang berikutnya dalam rangka dampak penting lingkungan karena mereka dikonsumsi ( misalnya ectoparasiticides seperti dips domba ) atau diberikan kepada ( misalnya anthelmintics ) hewan yang kemudian menetes bahan aktif dari obat yang dikonsumsi ( misalnya Ops di dips domba ) atau mengeluarkan obat dan metabolitnya ( misalnya ivermectin di beberapa anthelmintics ) ke lingkungan . Jumlah ini sangat jauh lebih kecil daripada pestisida yang diterapkan langsung ke ladang yang sebenarnya dirancang untuk membunuh bidang alami habitat tersebut. Di bagian bawah daftar prioritas , mengenai dengan risiko terhadap lingkungan , adalah obat-obatan manusia. Ketika kita mengkonsumsi obat dan mengeluarkan metabolitnya dalam bentuk urin dan tinja dan ini mungkin jalan mereka ke lingkungan melalui proses pengolahan limbah . Banyak proses pengolahan telah dilakukan , khususnya di bidang obat antikanker , untuk menyelidiki kontaminasi potensi lingkungan oleh obat-obatan manusia. Umumnya, mikroorganisme dalam kotoran pengobatan bekerja memecahkan masalah dengan merendahkan obat dan metabolitnya . Risiko terhadap lingkungan karena itu kecil . Ketika kita menjadi lebih peduli tentang efek aktivitas manusia pada lingkungan kita menghargai kebutuhan untuk memprediksi dampak potensial dari pestisida dan obat-obatan pada ekosistem . Ini sekarang menjadi persyaratan perizinan berwenang bahwa paket data keamanan mencakup pengujian toksisitas lingkungan dan penilaiaan dibuat. Lingkup dan Batasan Pengujian Toksisitas Lingkungan Ketika kita mempertimbangkan toksisitas lingkungan kita prihatin tentang kesejahteraan dari 107 spesies mulai dari organisme bersel tunggal sampai hewan kompleks seperti ikan paus biru ( Balaenoptera musculus ) , tentu saja , kita tidak boleh lupa ada manusia di sini , karena mereka juga merupakan bagian dari lingkungan. Ini agak ironis , manusia memproduksi bahan kimia yang mungkin memiliki efek merusak pada ekosistem mereka sendiri dan begitu berpengaruh buruk pada mereka. Kebutuhan untuk menilai efek dari pestisida dan obat-obatan ( dan bahan kimia industri , meskipun ini tidak termasuk dalam struktur tunggal legislatif)

pada cangkupan yang luas dari hewan dan tanaman merupakan masalah berbeda yang hampir tak dapat diatasi . Hal ini jelas tidak mungkin untuk melakukan pengujian sasaran spesies .Memang dalam banyak kasus akan menimbulkan hal tidak diinginkan karena spesies sasaran sering terancam ( misalnya elang ) dan kita akan menggunakan lebih banyak individu dalam rejimen pengujian toksisitas mungkin terpengaruh oleh bahan kimia bila digunakan . Hal ini merupakan alsan filosofi pengujian toksisitas lingkungan yang berbeda untuk penilaian risiko manusia. 3.3 Filsafat Pengujian Toksisitas Lingkungan Penilaian risiko pengujian toksisitas lingkungan bergantung pada tingkat trofik sasaran ( lihat Bab 1 ) pengujian toksisitas . Spesies Perwakilan tingkat trofik dikenakan pengujian toksisitas dan hasil ekstrapolasi ke lainnya untuk anggota tingkat trofik yang sama . Ada kesepakatan yang menyeluruh antara toksikologi tentang validitas dari pendekatan ini , itu tidak valid , tapi apa lagi yang bisa kita lakukan? Hal ini dimungkinkan untuk menggambarkan kurangnya validitas oleh salah satu contoh yang ekstrim . Tingkat trofik 2 ( konsumen primer) diwakili oleh Daphnia magna di pengujian toksisitas lingkungan . Daphnia ( lihat Gambar 3.1 ) adalah hewan air kecil yang mudah untuk dikembangbiakan di laboratorium dan karena itu mudah untuk dilakukan pengujian toksisitas . Di ujung dari spektrum yang lain , kuda nil ( Hippopotamus amphibius ) juga dalam tingkat trofik 2 . Oleh karena itu kami menggunakan Daphnia untuk mewakili kuda nil . Jelas ini konyol . ini sangat penting bahwa penilai risiko dengan membuat contoh yang ekstrim seperti dalam pikiran ketika berunding degan data pengujian toksisitas lingkungan . Kami akan kembali ke pendekatan tingkat trofik pengujian toksisitas kemudian (lihat Bab5). Dari diskusi sejauh ini jelas bahwa pengujian toksisitas sendiri penuh dengan masalah, karena alasan lain ini sifat dari molekul yang sedang dipelajari digunakan dalam penilaian akhir. Jika semua sifat dan batas pengujian toksisitas, Kesimpulan yang sama oleh ahli toksikologi lingkungan bisa lebih pasti dalam menarik kesimpulan tertentu, jika tidak mungkin ia harus berpikir ulang. Sifat fisikokimia (lihat Bab 6 untuk diskusi pentingnya sifat fisikokimia) dari molekul dan analogi struktural kimia untuk mengetahui pengaruh (hubungan antara struktur aktivitas ) 3.4 Proses Penilaian Risiko Lingkungan 3.4.1 Sifat fisiko kimia

Salah satu sifat yang paling penting dari molekul dalam memberikan toksisitas pada lingkungan adalah kecenderungan untuk berkonsentrasi dalam rantai makanan. Jika molekul larut dalam lemak itu akan berada di dalam membran biologis yang mengelilingi semua sel (lihat Bab 1) dan ketika 'host' dimakan molekul maka akan mencari konsumen membran biologis dan membentuk residu jangka panjang di sana. Proses ini berlanjut pada rantai makanan yang mengakibatkan konsentrasi dan meningkatkan potensi untuk hewan di puncak rantai makanan yang terpengaruh oleh bahan kimia yang bersangkutan (mis. raptors dan DDT, lihat Bagian 2.2.1). Memprediksi potensi obat baru atau pestisida untuk mencari sel lipid adalah bagian yang sangat penting dari Strategi penilaian risiko pada lingkungan. Sifat fisikokimia dibahas lengkap dalam Bab 6. 3.4.2 Hubungan antara Struktur - Aktivitas Kelompok bahan kimia tertentu memberikan sifat khusus untuk molekul . Sebagai contoh, jika molekul memiliki kelompok karboksil ( -COOH ) itu akan memiliki sifat asam. pada tingkat toksikologi itu juga diketahui bahwa beberapa kelompok ( atau gugus sering disebut ) berhubungan dengan sifat-sifat toksikologi tertentu . Sebagai contoh, aldehida gugus ( - CHO ) berhubungan dengan sensitivitas imunologi pada mamalia . itu contoh mekanisme adalah bahwa aldehida yang mengandung molekul kecil ( yaitu terlalu kecil untuk respon terlarang pada imunologi itu sendiri ) dapat bereaksi dengan terminal gugus amino dari residu lisin dalam protein untuk membentuk dasar Schiff ( - C ( O ) NHCH 2 - ) . Ini berarti bahwa protein telah dimodifikasi dan tampak asing ke tubuh mamalia ( yakni adalah kompleks hapten - carrier) . Sistem kekebalan hewan menghasilkan antibodi yang diarahkan terhadap bahan kimia asing yang masuk. Jika mamalia tersebut reexposed dengan bahan kimia itu akan segera menjadi sensitif dan mungkin memulai respon imunologi ( yaitu proses sensitisasi ) . Ada banyak lagi contoh LAK , khususnya di bidang karsinogenesis . LAK bisa sangat spesifik , tidak hanya mengandalkan suatu bagian tertentu menjadi bagian dari struktur molekul , tetapi membutuhkan untuk berada dalam posisi tertentu atau konformasi pada molekul . Hal ini digambarkan dengan baik dengan mempertimbangkan aromatik gugus amino dan karsinogenesis ( lihat Gambar 3.2 ) . Berikut gugus amino harus berada di akhir planar panjang ( yaitu datar ) struktur aromatik ( misalnya benzidin , lihat Gambar 3.2 ) untuk mengarahkan ke posisi yang benar dari molekul DNA di mana ia dapat memulai kerusakan dan mengakibatkan karsinogenesis .

Benzidine adalah salah satu zat yang paling dikenal karsinogenik, memang penggunaannya di Inggris dilarang. Ini adalah molekul planar dengan dua kelompok amino aromatik.

Planarity molekul ini memfasilitasi intercollation ke DNA dan posisi dari gugus amino mungkin memungkinkan interaksi tertentu dengan basis DNA (mungkin guanin) yang mengakibatkan kerusakan DNA ireversibel dan akhirnya karsinogenesis.Berdasarkan filosofi ini yang bisa memprediksi anilin menjadi karsinogen kuat juga.

Namun, itu tidak. The SAR untuk aromatik senyawa amino karsinogenesis karena itu membutuhkan wilayah aromatik hidrofobik planar ukuran yang signifikan (misalnya, dua benzena cincin) ditambah satu, atau mungkin dua, kelompok amino. Kita dapat menguji hipotesis prediksi ini menggunakan 2,4 'biphenyldiamine (2,4-BD).

Worng! 2,4 '-Biphenyldiamine Salah! 2,4 '-BD bukanlah karsinogen. Hipotesis kami harus dimodifikasi: mungkin kelompok amino harus berada di posisi 4. Hal ini dapat diuji menggunakan biphenylamine (BPA).

Benar! BPN adalah karsinogenik, tapi tidak ampuh karsinogen sebagai benzidin. Tampaknya bahwa jika kelompok amino non-4-posisi hadir ini mencegah gugus planar amino aromatik dari menjadi karsinogenik. Ini adalah properti prediktif penting dan karena itu hipotesis harus diuji lebih lanjut.

Aromatik planar dye amino, chrysodine, membuktikan titik baik karena tidak karsinogenik.

Gambar 3.2Gambar 3.2 Hubungan Struktur-aktivitas untuk amino dan nitro senyawa aromatik dan karsinogenesis menunjukkan pentingnya posisi kelompok dalam memberikan karsinogenisitas. Dari I.C.Shaw dan J.Chadwick 1995, SEPULUH, 2, 84. Contoh-contoh di atas bukan efek lingkungan yang spesifik , tapi tentu saja keduanya terjadi pada banyak spesies dan begitu memiliki arti ke lingkungan .Toksikologi lingkungan baru sekarang mulai mengembangkan LAK untuk efek lingkungan, mungkin contoh terbaik adalah untuk xenooestrogens lingkungan . Efek estrogenik bahan kimia di lingkungan yang memang sangat berpotensi serius. Kami telah menyaksikan buaya ( Alligator mississippiensis ) di Everglades di Florida di Amerika Serikat kehilangan penis mereka , whelks anjing betina ( Nucella lapillus ) penis dan laki-laki mengalami penurunan yang signifikan dalam menghitung sperma yang tumbuh . Efek dari fenomena ini pada kapasitas reproduksi dan karenanya kelangsungan hidup spesies memang bisa sangat sedikit. penting bahwa kita mampu untuk memprediksi apakah molekul baru ( misalnya pestisida ) mungkin memiliki aktivitas estrogenik . Mekanisme oestrogenicity lingkungan melibatkan estrogen diduga pas estrogen reseptor ( ER ) dalam hewan inang . Jika molekul cocok dan memiliki tepat molekul untuk mengaktifkan reseptor itu akan ' menipu ' reseptor melihatnya sebagai estrogen ( misalnya 17 - estradiol ) dan karena itu ellicit respon estrogen ( yaitu feminisasi ) . Sebuah pengetahuan yang terperinci dari ER akan memungkinkan toksikologi untuk menentukan yang aspek dari estrogen 'nyata ' yang diperlukan untuk 'menghidupkan ' reseptor . Pekerjaan ini dalam masa pertumbuhan , tetapi jelas bahwa daerah elektronegativitas ( misalnya gugus hidroksil ) yang dipisahkan oleh daerah hidrofobik panjang diperlukan ( lihat Gambar 3.3 ) . Molekul dengan molekul konfigurasi yang sama to17 - estradiol cenderung untuk memenuhi dan mengaktifkan UGD . ada

banyak contoh yang dikenal xeno - estrogen ( estrogen alami maupun asing xeno adalah dari bahasa Yunani untuk asing ) yang dapat digunakan untuk menguji hipotesis ini (lihat Gambar 3.4 ) .Program komputer yang sedang dikembangkan saat ini yang akan memungkinkan molekul baru yang akan diteliti untuk menentukan apakah struktur molekul dan konfigurasi mungkin memfasilitasi yang mengaktifkan UGD . Ini akan membantu menjadi signifikan dengan toksikologi lingkungan , tetapi penting bahwa mereka tidak digunakan dengan membabi buta karena idiosynchratic xeno - estrogen mungkin terlewatkan . 3.4.3 Tes Oestrogenicity 3.4.3.1 In Vitro Tes Sebagaimana dibahas di atas oestrogenicity tergantung molekul dan mengaktifkan eseptor estrogen . Sekarang ada oestrogenicity tes yang memanfaatkan sel-sel ragi yang mengekspresikan reseptor estrogen manusia (nya) . Reseptor ini digabungkan ke enzim galaktosidase sehingga ketika dia ditempati oleh senyawa estrogenik galaktosidase diproduksi . Sebuah galactoside pewarna kuning termasuk dalam media kultur ragi dan ketika estrogen hadir dalam galaktosidase yang dihasilkan memotong unit galactoside melepaskan kromofor yang menjadi merah dalam keadaan bebas ( lihat Gambar 3.5 ) . Oleh karena itu ragi menjadi merah di tambahdengan estrogen ( lihat Gambar 3.6 ) .

Gambar 3.5 Skema representasi dari uji ragi oestrogenicity menunjukkan reseptor estrogen diduduki oleh senyawa estrogenik dengan aktivasi konsekuen galaktosidase. Hasilnya adalah galactoside berwana kuning yang dibelah untuk melepaskan kromofor merah. 3.4.3.2 Pengujian In Vivo Ikan jantan menghasilkan vitellogenin protein telur ( protein telur biasanya diproduksi hanya pada betina ) bila terkena estrogen . Protein ini cukup mudah untuk mengukur dan membentuk dasar dari bioassay untuk oestrogenicity . Ikan jantan ( rainbow trout ( Salmo gairdneri ) atau zebra Danio ( Brachidanio rerio ) ) yang terkena estrogen dalam air mereka jangka waktu yang cukup lama paparannya ( minggu atau bulan ) vitellogenin diukur dalam

jaringan mereka . Sebuah analisis positif untuk vitellogenin menandakan adanya estrogen . 3.4.4 Pengujian Toksisitas pada Hewan dan Tanaman Seperti telah dibahas sebelumnya pengujian toksisitas lingkungan bergantung pada trofik suatu tingkat Pendekatan menggunakan perwakilan dari setiap tingkat trofik dalam toksisitas spesifik tes ( lihat Tabel 3.1 ) . Tes berkonsentrasi pada ekosistem perairan air tawar ; Namun , tes individu pada organisme darat dan laut sering dilakukan untuk memberikan indikasi yang lebih baik dari dampak lingkungan yang lebih luas dari tes kimia.

Level tropic satu Alga Selenastrium capricornatum, Scendesmus subspicatus and Chlorella vulgaris adalah alga yang sering digunakan utuk mewakili level tropic karena mereka cepat tumbuh dan mudah untuk dikembangbiakkan, uji produksi biomassa pada setelah 2 hari itu meningkat uji kimia.

Tes ini sangat mudah, alga diinokulasi kedalam kultur dan inkubasi pertumbuhan ganggang ditentukan dengan menyaring ganggang menggunakan filter sebelum ditimbang, menimbang kembali filter ditambah ganggang dan sebagainya menentukan biomassa dari alga yang dihasilkan selama periode kultur. Biomassa alga diplot terhadap konsentrasi uji kimia dan konsentrasi di mana biomassa adalah 50 persen dari nilai kontrol ditentukan, ini adalah EC50 (lihat Gambar 3.7). Nilai EC50 sangat berguna karena memungkinkan toksikologi lingkungan menilai konsentrasi bahan kimia tes yang akan memiliki efek yang merugikan pada lingkungan. Sebagai contoh, jika EC50 = 1,2 mg dm3 dan konsentrasi prediksi

suatu bahan kimia tertentu di sungai ( misalnya ini mungkin pestisida yang digunakan di ladang sebelah sungai ) , adalah 0,001 mg dm - 3 , dampak dari uji kimia pada sungai mungkin akan diabaikan karena konsentrasi kasus terburuk diprediksi di sungai sangat jauh lebih rendah dari EC50 tersebut . Kasus terburuk perkiraan konsentrasi di sungai akan menjadi total jumlah pestisida diterapkan pada bidang dibagi dengan volume perkiraan sungai berdekatan dengan ldang . Ini adalah kasus terburuk karena tidak memperhitungkan aliran sungai dan mengasumsikan bahwa semua pestisida akan masuk ke sungai . ahli toksikologi lingkungan sering menggunakan skenario kasus terburuk karena situasi ' nyata' hanya bisa menjadi lebih baik. 3.4.4.2 Pengujian TinggiTanaman Tes tanaman terestrial yang lebih tinggi sering dilakukan . Tanaman pangan ( lihat Tabel 3.2 ) yang umumnya digunakan untuk menilai efek dari uji kimia pada pertumbuhan tanaman . Tes ini memiliki dua fungsi : terutama untuk menilai efek dari bahan kimia uji pada pertumbuhan tanaman uji , tetapi juga untuk memungkinkan residu bahan tes kimia dalam tanaman yang akan ditentukan . Data terakhir yang digunakan untuk menilai risiko tes kimia (misalnya pestisida ) kepada konsumen dari tanaman . Tiga parameter biasanya diukur : frekuensi yaitu perkecambahan , akar elongasi dan pucuk . Hasilnya biasanya dinyatakan sebagai konsentrasi bahan kimia tes di mana retardasi pertumbuhan atau germinasi jelas .

3.4.4.3 Trophic Level 2 Untuk ekosistem perairan air tawar kutu air ( Daphnia magna ; lihat Gambar 3.1 ) hampir selalu digunakan dan untuk sistem laut ,udang air asin ( Artemia salina ) sering digunakan . Kedua spesies ini mudah dibudidayakan di laboratorium . Artemia sangat menarik dan cocok untuk kultur laboratorium karena telur-telurnya akan mudah dikeringkan dan penyimpanan untuk jangka waktu yang lama . ketika telur kering yang ditaburi ke air laut dan diinkubasi pada sekitar 23 C menetas dalam satu atau dua hari dan siap untuk digunakan dalam pengujian kadar racun lingkungan . Tes ini dilakukan dalam banyak cara

yang sama seperti tingkat trofik 1 tes , sebuah EC50 adalah hasil . Di tingkat trofik 2 tes parameter yang diukur bukan pertumbuhan ( yaitu biomassa ) , melainkan efek dari uji kimia pada hewan uji individu . Kultur Pembuluh ( gelas yang berisi air tawar aerasi untuk Daphnia atau air laut untuk Artemia ) disusun dengan medium kultur yang mengandung konsentrasi meningkat bahan tes kimia ( ditambah kontrol tanpa bahan kimia test) . Untuk pembuluh ditambahkan Organisme uji 10 . Mereka diinkubasi dalam terang untuk waktu tertentu . Pada akhir masa inkubasi jumlah organisme dihentikan dan ditentukan . sekarang sulit untuk memutuskan apakah Daphnia atau Artemia mati itulah sebabnya penghentian digunakan sebagai titik akhir . Tes ini biasanya dilakukan dalam rangkap tiga karena jumlah organisme uji yang kecil digunakan per konsentrasi uji kimia , yang memungkinkan untuk variasi statistik dalam penghentian diperhitungkan . EC50 dihitung dengan memplot proporsi ( biasanya sebagai persentase dari total ) hewan uji terhadap konsentrasi bahan kimia tes . Perhitungan itu adalah sama dengan yang untuk EC50 ganggang ( lihat Gambar 3.7 ) . Uji Daphnia dibagi menjadi dua bagian : 1 . uji Akut EC50 : Daphnia yang terkena bahan kimia uji selama 24 jam dan imobilisasi ditentukan . 2 . Uji Reproduksi : Daphnia yang terkena bahan kimia uji selama 14 hari . itu peningkatan jumlah Daphnia dihitung . Pengaruh bahan kimia uji pada reproduksi ditentukan demikian . 3.4.4.4 Perwakilan dari trofik level 3 tidak termasuk dalam cara pengujian toksisitas lingkungan. Hal ini karena biokimia dan fisiologi mungkin beranggapan terhadap Trophic Level 3bahan kimia beracun mirip dengan hewan dari tingkat trofik 4 . Ini adalah pernyataan menyapu karena keragaman spesies dalam trofik level 3 ( seperti dalam semua tingkat trofik ) sangat besar , tetapi jika hewan tertentu dari trofik level 3 dibandingkan dengan spesies serupa dari tingkat trofik 4 titik dibuat . Sebagai contoh, Daphniaeating yang laba-laba air ( Araneida spp . ) dalam trofik level 3 , sedangkan Portia spp . , yang labalaba melompat dari Asia tenggara yang memakan laba-laba lainnya , berada dalam tingkat trofik 4 .mereka berdua laba-laba ada kemungkinan akan serupa respon mereka terhadap bahan kimia beracun.

3.4.4.5 Trophic Level 4 Tingkat trofik 4 diwakili oleh ikan . Ikan yang digunakan paling sering oleh toksikologi lingkungan adalah trout pelangi ( Salmo gairdneri , spesies yang sangat sensitif yang menuntut kemurnian air dan oksigenasi tinggi ) atau sunfish gilled biru ( Lepomis macrochirus , ikan danau Amerika Utara dan sungai yang mengalir lambat ) , namun , banyak jenis ikan lainnya juga digunakan ( lihat Tabel 3.3 ) . Ikan yang baik terkena tes kimia dalam air mereka di berbagai konsentrasi dan kematian dipantau dan LC50 ( konsentrasi yang membunuh 50 persen dari populasi) ditentukan , atau ikan yang tertutup dengan bahan kimia tes, baik melalui suntikan atau penggabungan ke pellet makanan . Kematian ini dipantau , tapi kali ini sebuah LD50 ( dosis yang diperlukan untuk membunuh 50 per persen dari populasi ) ditentukan . Sejauh prosedur yang paling umum digunakan adalah tes LC50 .

Tes akut melibatkan paparan bahan kimia tes untuk total 96 jam. mobilitas ikan dicatat pada interval 24 jam dan LC50 kumulatif dihitung . Uji toksisitas kronis mencakup periode 14 - hari dengan paparan terus-menerus untuk uji kimia . Sayangnya tes ini tidak menyelidiki konsumen sekunder air sepenuhnya karena mereka tidak memperhitungkan dari asupan bahan tes kimia dalam bentuk rantai - terkonsentrasi residu makanan . 3.4.4.6 Trophic Level 5 Konsumen kuartener berada di puncak rantai makanan. Secara ekologis mereka adalah spesies yang paling berisiko dari efek buruk dari lingkungan polutan . Masalahnya adalah mereka langka ( mungkin karena aktivitas manusia sebelumnya) dan karena itu tidak dapat diterima untuk menggunakan spesies ini per se dalam pengujian kadar racun lingkungan . contoh elang peregrine ( Falco Peregrinus ) adalah trofik level 5 , maka yang terancam punah dan tidak dapat

digunakan dalam pengujian toksisitas . Ini akan menjadi kasus untuk sebagian besar perwakilan dari trofik level 5 . Untuk alasan ini spesies dari keluarga yang sama yang tidak dalam trofik level 5 digunakan untuk mewakili tingkat trofik ini . Mungkin yang paling berisiko kelompok trofik level 5 adalah raptor ( burung pemangsa ) . Mereka adalah anggota keluarga Aves ( burung ) dan itu adalah alasan bahwa toksikologi lingkungan memilih burung , sering bobwhite yang puyuh ( Colinus virginianus ) (lihat Tabel 3.4 ) , untuk mewakili tingkat trofik . Puyuh adalah jauh dari menjadi raptor ( itu adalah burung pemalu ) , tetapi metabolisme dan kerentanan toksisitas yang mungkin mirip dengan yang dari kerabat , para raptor . Tes ini dilakukan baik dengan pemberian tes kimia untuk burung-burung di diet atau dengan menyuntikkan ke mereka (biasanya intraperitoneal , yaitu ke dalam perut rongga ) . Ada dua cara untuk melanjutkan. Yang pertama adalah dengan menggunakan kematian sebagai titik akhir untuk menentukan LD50 . Yang kedua ( dan lebih manusiawi ) adalah dengan menggunakan end point yang ke uji kimia yang telah memiliki efek pada burung , baik fisiologis ( misalnya efek pada tingkat pertumbuhan ) atau biokimia ( misalnya efek pada enzim darah ) . di hal ini NEL atau NOEL ( lihat Bab 5 ) ditentukan . Baik NEL ( atau NOEL ) dan LD50 menandakan dosis di mana uji kimia memiliki efek merusak pada burung uji dan penting dalam penilaian dampak lingkungan .

Selain di atas uji toksisitas akut juga diperlukan untuk melaksanakan beberapa tes generasi toxicty yang mirip dengan uji toksisitas reproduksi pada mamalia (lihat Bab 5 ) . The mallard bebek ( Anas platyrhynchos ) atau puyuh umumnya digunakan untuk studi ini . Burung-burung yang diberikan dengan uji kimia ( biasanya dalam pakan mereka ) setidaknya selama 20 minggu selama musim bertelur ( ini dapat artifisial dengan cahaya buatan) . Telur dikumpulkan dan diinkubasi . Telur menetas ' efisiensi ' dan kelangsungan hidup anak-anak ayam atau anak itik bertekad untuk memastikan apakah bahan uji kimia dapat mempengaruhi potensi reproduksi burung jika mencemari lingkungan . Selain itu, anak-anak ayam yang diamati selama periode 14 - hari . A NOEL

berdasarkan parameter seperti jumlah telur , ketebalan kulit telur dan penetasan. Ini adalah tes penting karena memastikan bahwa kita tidak menghadapi lain DDT / cangkang masalah penipisan dan membawa kita penuh lingkaran , karena itu Masalah DDT yang membuat kita menyadari pentingnya pengujian toksisitas lingkungan . 3.4.4.7 Pengujian Toksisitas Terrestrial Sebagian besar uji toksisitas mempelajari ekosistem perairan ( hanya tes burung jatuh di luar generalisasi ini ) , namun , ekologi terestrial dianggap baik oleh Hasil ekstrapolasi dari sistem perairan ( dengan asumsi kerentanan beracun serupa antara air dan anggota terestrial dari tingkat trofik tertentu ) dan dengan melakukan percobaan pada organisme terestrial . Yang paling umum dari tes ini dilakukan di cacing tanah ( Eisenia foetida ) . Tes ini dibagi menjadi dua bagian : 1 . Uji akut kontak kertas : disini cacing tanah yang terkena selama 48 jam disaring dalam kertas direndam dalam konsentrasi yang berbeda dari bahan tes kimia . Sebuah LC50 adalah ditentukan 48 jam setelah dimulainya paparan . 2 . Uji kronis tanah buatan : cacing tanah yang terkena berbagai konsentrasi tes kimia dalam persiapan tanah buatan standar (ini memungkinkan adsorpsi dan desorpsi yang dibakukan ) . Sebuah LC50 ditentukan setelah terpapar 7 atau 14 hari . 3.4.4.8 Pengujian Cepat Eko Alasan utama dengan kadar racun lingkungan strategi pengujian berbasis tingkat trofik adalah bahwa dibutuhkan waktu yang lama untuk menguji bahan kimia baru dan sangat mahal ( untuk lengkap baterai dari tes itu akan biaya 1001000s ) . Tes skrining cepat karena itu diperlukan untuk memiliki cepat ' melihat ' di sebuah kompleks baru untuk memutuskan apakah untuk melanjutkan studi yang lebih mahal . Jelas itu tidak mungkin untuk menghasilkan jawaban pasti dari tes tersebut , tetapi indikasi potensi dampak lingkungan bahan kimia tes akan diberikan . Microtox ( diproduksi oleh Microbics UK Ltd ) adalah tes skrining berdasarkan neon bakteri laut Photobacterium phosphoreum . Jika organisme berfluoresensi ( yaitu menghasilkan cahaya oleh reaksi biokimia seluler ) itu masih hidup dan baik ; fluoresensi meluruh ketika terpengaruh oleh tantangan kimia. Properti penting dari organisme digunakan untuk efek yang baik dalam menilai toksisitas

lingkungan yang potensial bahan kimia baru . Selain itu, tes ini berguna karena memungkinkan kombinasi bahan kimia untuk dipelajari dan kemungkinan sinergi untuk diselidiki . Ada banyak kontroversi atas penggunaan microtox dan tes serupa lainnya ; jelas mereka hanya dapat digunakan sebagai layar umum dan tidak harus menggantikan konvensional prosedur pengujian ekotoksisitas . Microtox , bagaimanapun, telah terbukti untuk mencerminkan baik Data toksisitas kimia tertentu dalam sistem tes yang lebih tinggi , memang beberapa negara (misalnya Kanada ) menerima microtox data sebagai bagian dari paket regulasi yang digunakan untuk tujuan persetujuan . Microtox tes sederhana dan cepat untuk melaksanakan . Tes kimia serial diencerkan sampai 15 tabung yang masuk ke mesin ( lihat Gambar 3.8 ) , sebuah suspensi P. phosphoreum ditambahkan ke masing-masing tabung dan tabung kemudian diinkubasi

pada 15 C (bakteri berasal dari laut beriklim dingin dan membutuhkan inkubasi kondisi). Setelah pendek (5 atau 15 menit tes biasanya dilakukan) inkubasi periode pendar bakteri secara otomatis diukur oleh microtox mesin dan diplot terhadap konsentrasi bahan kimia uji (lihat Gambar 3.9) dan EC50 dihitung dari data.

Hal ini jauh di luar cakupan buku ini untuk menutupi analisis mengenai dampak lingkungan secara rinci. Hal ini dibahas di sini dalam konteks bagaimana hasil tes kadar racun lingkungan yang digunakan untuk menilai dampak potensi pencemar lingkungan tertentu pada lingkungan. Kami akan menggunakan contoh nyata dari sebuah obat hewan untuk menggambarkan prinsip analisis mengenai dampak lingkungan (obat telah diberi nama palsu), ini Perhitungan yang digunakan sebagai bagian dari Persetujuan obat untuk Pemasaran. Tujuan dari perhitungan ini adalah untuk menentukan apakah bahan kimia uji (dalam hal ini obat hewan Atonin) mungkin mencapai konsentrasi dalam tertentu ekosistem (dalam hal ini kolam) yang mungkin deleteriously mempengaruhi anggota ekosistem.