RESUME

Praktikum Mikrobiologi
BLOK 11
PANACEA

Pemeriksaan Kultur
Metode : TPC (Total Plate Count) dengan urin
diencerkan 5x
Alat dan Bahan :
- Urin probandus
- Aquadest
- Media : agar NA (Nutrient Agar)
- 5 tabung reaksi
- bulb dan pipet
- Mikropipet (blue tip)
- Vortex

Alat dan Bahan

1) Urin probandus

2) Aquadest

3) Media : agar NA (Nutrient Agar) :

media non selektif untuk kuman, jadi
fungsinya untuk menghitung jumlah
kuman

4) 5 tabung reaksi

5) Bulb dan pipet

6) Mikropipet dan blue tip

7)vortex

Cara Kerja
1) Tiap tabung isi dengan 9 ml
aquadest

9 ml
aquade
st

9 ml
aquade
st

Tabung
1

Tabung
2

9 ml
aquade
st

Tabung
3

9 ml
aquade
st

Tabung
4

9 ml
aquade
st

Tabung
5

2) Isi tabung 1 dengan urin 1 ml

dengan menggunakan mikropipet
yang blue tip diocok dicampur
dengan vortex

9 ml
Aquade
st
+
1 ml
urin
(di
vortex)

9 ml
aquade
st

Tabung
1

Tabung
2

9 ml
aquade
st

Tabung
3

9 ml
aquade
st

Tabung
4

9 ml
aquade
st

Tabung
5

3) Ambil 1 ml masukkan ke tabung 2

Ambil 1 ml tetesi ke media agar NA
1 ml

9 ml
Aquade
st
+
1 ml
urin
(di
vortex)

Tabung
1

9 ml
aquade
st

Tabung
2

1 ml

Media agar
NA

4) Ratakan urin pada agar dengan

menggeserkan dengan berputar
buang sisa urin dengan memiringkan
dan membuka sedikit tutup cawan
petri ambil sedikit-sedikit dengan
mikropipet asumsi urin yang
menempel
pada agar : 0,1 ml
Sudah terisi urin (asumsi 0,1
ml)
Media agar
NA
Diinkubasi 24
jam

5) Lakukan hal yang sama dengan

langkah di atas pada tabung 2
sampai tabung 5
1 ml

9 ml
Aquade
st
+
1 ml
urin
(di
vortex)

Tabung
2

9 ml
aquade
st

Tabung
3

1 ml

Media agar
NA

Hasil Pengamatan
Setelah diinkubasi 24 jam, terbentuk
koloni kuman seperti di bawah ini :

before

after

Hasil kultur
Tampak depan

tampak belakang

Pembahasan
Hasil kultur
Hasil kultur yang bisa dilakukan adalah
perhitungan koloni bakteri :
- Tampak koloni bakteri
- renggang-renggang
Hasil kultur dipengaruhi oleh:
- Cara pengambilan sample urin
- Tidak adanya kontaminasi
- Jumlah pengenceran dengan 10x pengenceran
terbentuk hasil kultur bakteri yang mudah dihitung
koloni bakterinya. (semakin banyak pengenceran
semakin mudah penghitungan koloni bakteri)

Penghitungan koloni bakteri

1
koloni
bakter
1 koloni
i
bakteri

1 koloni bakteri :
Suatu bentukan koloni yang tidak terpisah dengan koloni lainnya
(bulat/bergerombol)

 hitung total bakteri :

Apabila jmlah angka kuman dalam petri adalah Q,
maka jumlah kuman per milimeter urin (cfu/ml):
- Untuk urin asli : Q x 10 x 1 ml
- Untuk pengenceran 1 kali (1/10) : Q x 10 x 10 x 1
ml
- Untuk pengenceran 2 kali (1/100) : Q x 10 x 100 x
1 ml
- Jadi rumusnya :
Jumlah koloni dalam plate x pengenceran x 10 x 1ml
Asumsi dalam plate ada 0,1 ml
jumlah koloni dalam 1 plate antara 30-300 koloni

Setelah dilakukan penghitungan

bakteri, dilakukan :
- hari 1 : identifikasi kuman dengan
media BAP ( Blood Agar Plate)
mengetahui jenis bakteri
berdasarkan kemampuan hemolisis
- hari 2 : dengan menggunakan
media selektif (misal : media Mc
Conkey untuk E.coli, Proteus)
- hari 3 : biokimia

Jangan lupa baca petunjuk praktikum juga

ya, mungkin saja keluar
Kalau ada yang salah mohon koreksi,
Kata dr.eni yg keluar hitung koloni kuman
itu
Semoga blok 11 dapat A semua
Amin