EPIDERMAL GROWTH FACTOR (EGF)

DALAM PROSES
PENYEMBUHAN LUKA

 Epidermal Growth Factor dapat menekan produksi Nitrite Oxide dan

Hidrogen Peroksida yang dihasilkan oleh keratinosit.
Pada keratinosit manusia, y-IFN dan TNF-a ditemukan dengan mudah
menstimulasi produksi dari oksida nitrat. Produksi oksida nitrat oleh keratinosit
tergantung pada kehadiran Ca2+ dalam media kultur. Bakteri yang berasal dari
LPS (1PG / ml), yang juga aktivator makrofag yang kuat, ditemukan untuk
meningkatkan (10-20%) produksi oksida nitrat oleh y-IFN-keratinosit yang
diperlakukan.
Oksida nitrat dihasilkan melalui NADPH dan l-Arginine
dependent enzyme, oksida nitrat sintase. Produksi oksida nitrat
juga ditekan oleh NMMA, inhibitor kompetitif oksida nitrat
sintase. Aktivitas oksida nitrat synthase keratinosit murine juga
tergantung pada kehadiran NADPH serta FAD. Aktivitas enzim
maksimal dalam keratinosit memerlukan Ca2+ dan calmodulin
serta

tetrahydrobiopterin.

Aktivitas

maksimal

enzim

juga

diperoleh dengan glutathione ansduperoxide dismutase.

Oksida
berfungsi

nitrat

dalam

yang

dihasilkan

pertahanan

host

oleh
non

keratinosit
spesifik

dapat
selama

penyembuhan luka, nitrat oksida, baik sendiri dan/atau dalam

kombinasi dengan intermediet oksigen reaktif, adalah sitotoksik.
Nitrat oksida juga mungkin penting dalam regulasi proliferasi sel
epidermal,

oksida

nitrat

telah

dilaporkan

untuk

menekan

proliferasi T limfosit, proliferasi sel sumsum tulang, serta

pertumbuhan sel tumor.
Penting untuk dicatat bahwa infiltrasi makrofag luas
selama penyembuhan luka juga dapat berfungsi sebagai sumber
lokal oksida nitrat yang dapat bertindak atas keratinosit.
Makrofag luka dari kulit menghasilkan sejumlah besar TGF-a,
homolog struktural EGF. Kedua TGF-a dan EGF mengikat reseptor
EGF dengan afinitas yang sama dan mitogenik ampuh untuk
keratinosit. Pengobatan baik keratinosit manusia dan tikus
dengan EGF mengakibatkan penurunan produksi oksida nitrat.
Berbeda

dengan

hasil

ini,

TGF-B,

yang

telah

dilaporkan

menghambat

produksi

oksida

nitrat

oleh

makrofag,

tidak

berpengaruh pada produksi dari mediator ini oleh keratinosit.

EGF menghambat produksi nitrat oksida dengan menghalangi
induksi oksida nitrat sintase.
Semua sel mamalia, termasuk keratinosit, menghasilkan
oksigen reaktif intermediet oleh berbagai proses metabolisme
seperti oksidasi enzimatik dan respirasi aerobik. Pengobatan sel
dengan y-IFN dan LPS nyata meningkatkan konten intraseluler
dari hidrogen peroksida. Seperti yang diobservasi dengan oksida
nitrat, produksi hidrogen peroksida oleh sel ditekan secara
bermakna oleh EGF. Katalase dan superoksida dismutase, yang
menurunkan

produksi

hidrogen

peroksida

oleh

sel,

tidak

mempunyai efek pada y-IFN dan LPS-penginduksi inhibisi dari

proliferasi keratinosit. Didapatkan penemuan yang mengimplikasi
oksida nitrat sebagai mediator inhibisi pertumbuhan keratinosit.
Penelitian menunjukkan bahwa keratinosit menanggapi
mediator inflamasi dengan memproduksi oksida nitrat dan
hidrogen

peroksida.

Kami

mengusulkan

bahwa

selama

penyembuhan luka, EGF bertindak tidak hanya sebagai sinyal

untuk merangsang proliferasi keratinosit tetapi juga untuk
mengurangi produksi sel reaktif nitrogen dan oksigen intermediet
reaktif yang dapat mengganggu proses regeneratif. Intermediet
oksigen reaktif merupakan mediator penting dari peradangan,
kemampuan

EGF

untuk

menekan

pembentukan

mediator

tersebut di kulit selama perbaikan luka mungkin penting dalam

resolusi peradangan yang terkait dengan penyembuhan luka.
(Heck, et al, 1992)
Efek Epidermal Growth Factor pada tikus.
Sebuah fenomena umum yang dapat diamati di antara
mamalia adalah menjilati luka. Perilaku naluriah ini terjadi lebih

jelas apabila terjadi cedera/luka dan telah diasumsikan bahwa

proses

lisosomal

antibakteri selama

ditemukan

dalam

saliva

sebagai

agen

pembersihan luka. Bukti-bukti ditemukan

bahwa pengunaan air liur untuk daerah yang terluka mungkin

memiliki
dimediasi,

implikasi

sebagai

setidaknya

respon

sebagian,

fisiologis

oleh

faktor

untuk

cedera,

pertumbuhan

epidermal (EGF).
Beberapa bukti menunjukkan bahwa efek EGF dalam air
liur pada penutupan luka lebih dimediasi oleh penjilatan secara
komunal daripada pengaliran darah secara sistemik ke daerah
yang terluka, meskipun kedua mekanisme dapat memberikan
kontribusi pada penutupan luka.
Percobaan pada tikus memberikan dasar untuk melibatkan
EGF di tikus jantan sebagai faktor penyembuhan luka secara
fisiologis yang penting melalui penjilatan komunal. Temuan yang
sama ditemukan pada tikus betina yang diberi pengobatan
testosteron. Spekulasi yang ada adalah perbedaan seks dalam
tingkat penyembuhan luka yang telah ditunjukkan dalam model
eksperimental tikus mungkin mencerminkan bahwa mekanisme
perbaikan akut pada tikus laki-laki lebih agresif. (Niall, et al,
1982)
Percepatan penyembuhan luka dengan topikal Epidermal Growth Factor.
Regenerasi epidermal adalah suatu proses yang kompleks yang mana sel
epitel sisa berproliferasi secara terintegrasi untuk meregenerasi epidermis menjadi
intak. Luka superficial yang tidak menyebabkan hilangnya seluruh tebal kulit
tetapi menyisakan lapisan dermis, sembuh secara primer dengan regenerasi
epidermal.
Mekanisme molekular yang meregulasi regenerasi epidermal belum
sepenuhnya dimengerti, tetapi kemungkinan peptida dari faktor pertumbuhan
yang berperan melalui mekanisme autokrin dan parakrin.

Banyak growth factor yang ada di tubuh, salah satu yang utama dipelajari
adalah epidermal growth factor. Epidermal growth factor terbukti mempercepat
laju penyembuhan luka dari luka kulit partial thickness.(Brown, et al, 1989)
Peran Platelet-Derived Growth Factor pada penyembuhan luka : sinergis
dengan Growth Factor lainnya.
Platelet-derived growth factor (PDGF) in vitro dapat merangsang sintesis
DNA dan kemotaksis fibroblas dan sel-sel otot polos dan merangsang kolagen,
glikosaminoglikan, dan produksi kolagenase oleh fibroblas. Pada In vitro
menunjukkan bahwa PDGF, disampaikan oleh trombosit ke lokasi cedera in vivo,
mungkin memainkan peran penting dalam inisiasi proses perbaikan luka. Studi
menunjukkan bahwa penambahan PDGF murni ke situs luka yang melibatkan
epidermis dan dermis memiliki pengaruh yang kecil pada morfologi atau biokimia
dari penyembuhan luka. Sebaliknya, penambahan dengan tergantung dosis PDGF
yang dimurnikan sebagian mengakibatkan peningkatkan lebar jaringan ikat baru
yang disintesis dan lapisan epidermis.
Autoradiografi menggunakan [3H] timidin mengungkapkan
peningkatan jumlah sel berlabel pada jaringan ikat baru dan
lapisan epitel. Selanjutnya, penambahan PDGF yang dimurnikan
sebagian mengakibatkan peningkatan yang signifikan dalam
tingkat protein dan DNA sintesis dan isi total komponen dalam
biopsi yang diambil dari situs luka. Efek serupa diperoleh ketika
insulin-like growth factor I ditambahkan dalam kombinasi dengan
PDGF
murni.
Kombinasi
faktor
tersebut
menyebabkan
peningkatan 2,4 kali lipat dalam pembentukan lebar lapisan
jaringan ikat yang baru dan peningkatan 95% di ketebalan
epidermis dibandingkan dengan kontrol. Insulin-like growth factor
I ketika sendirian tidak menimbulkan perubahan morfologi yang
signifikan. Epidermal growth factor sendiri atau dengan
kombinasi dengan PDGF mengakibatkan penebalan hanya pada
epidermis. Hasil ini menunjukkan bahwa tindakan sinergis dari
faktor-faktor lain dengan PDGF penting dalam modulasi dari
proses penyembuhan luka. (Lynch, et al, 1987)

Ekspresi dari Vascular Permeability Factor (Vascular Endothelial Growth

Factor) oleh epidermal keratinosit selama proses penyembuhan luka.
Penyembuhan luka adalah response yang terkoordinir ketika terdapat luka
yang terdiri dari beberapa fase penyembuhan luka, yaitu inflamasi akut, migrasi

sel, angiogenesis dan deposisi matriks. Sesaat setelah luka terjadi suatu
hiperpermeabilitas mikrovaskular yang persisten yang merupakan bagian dari
penyembuhan luka normal. Keadaan ini dapat menyebabkan extravasasi dari
fibrinogen yang menghasilkan klot dari fibrin, yang nantinya akan memicu
angiogenesis.
Hiperpermeabilitas ini dirangsang oleh vascular permeability factor (VPF)
yang dikenal pula sebagai Vascular Endothelial Growth Factor (VEGF). Penelitian
menunjukkan keratinosit adalah sumber utama dari VPF, di mana VPF
berhubungan dengan kondisi hiperpermeabilitas dan angiogenesis. Sehingga dapat
disimpulkan bahwa VPF adalah sitokin penting dalam proses penyembuhan luka.
(Brown, et al, 1992)
Peran Growth Factor dan respond penyembuhan luka pada age-related
macular degeneration.
Growth Factors (GF) merupakan komponen penting dalam pathogenesis
dari Age-related Macular Disease (AMD). Pada Choroidal Neo Vascularization
(CNV) dalam AMD, GF juga ikut berperan penting seperti pada proses
penyembuhan luka di kulit. Seperti granulasi jaringan kulit, CNV memiliki
karakteristik berupa pembekuan, inflamasi, angiogenesis dan fibrosis. Seperti
pada luka di kulit, VEGF, angiopoetin, PDGF, TGF-B yang merupakan bagian
dari GF, dihasilkan.
AMD sering menyebabkan hilangnya pengelihatan pada usia tua.
Pemahaman pathogenesis AMD diperlukan untuk prevensi dan intervensi. GF,
sitokin, factor neutropik dan kemokin disekresikan oleh autokrin dan parakrin. GF
berperan dalam proses pertahanan, pertumbuhan, kematian, angiogenesis,
permeabilitas pembuluh darah, inflamasi dan proses lainnya. Sebagai contoh,
Vascular Endothelial Growth Factor A (VEGF A), sejatinya berperan sebagai
factor permeabilitas pembuluh darah, yang kemudian terindikasi berperan dalam
angiogenesis, mediator adesi leukosit dan sebagai factor neurotropik dari susunan
saraf pusat. Baru-baru ini, inhibisi pada VEGF terbukti bermanfaat pada pasien
AMD.
Studi histology CNV menunjukkan bahwa penyembuhan jaringan
menyerupai granulasi jaringan pada kulit yang terluka. Proses penyembuhan luka
di kulit memiliki karakteristik berupa inflamasi, angiogenesis, fibrosis. Monosit,
fibrosit dan sel pregonitor endotel ikut berkontribusi dalam pembentukan jaringan
granulasi. GF diproduksi oleh makrofag, miofibroblas, sel endotel, perisit dan
keratinosit.

Pada angiogenesis, anggota VEGF dilepaskan oleh makrofag dan platelet

saat awal migrasi dan proliferasi dari pertumbuhan pembuluh darah dan limfe.
Keseimbangan angiogenesis pada awalnya akan mengarah ke proses angiogenesis
dan kemudian akan berhenti setelah proses penyembuhan luka selesai.
(Schlingemann, 2004)

Hipoksia dapat mendorong penyembukan luka dari stem sel turunan sel
adiposa dengan mendorong proliferasi stem sel dan up-regulasi dari
Vascular Endothelial Growth Factor (VEGF) dan basic Fibroblast Growth
Factor (bFGF).
Regenerasi jaringan menggunakan stem cells tubuh sendiri dan growth
factors merupakan strategi yang baik untuk jaringan yang rusak (misalnya, selama
dan setelah peradangan).
Oksigen
kemampuan

adalah
untuk

molekul

sinyal

mempengaruhi

kuat

yang

karakteristik

memiliki

dasar

dari

berbagai sel. Dalam keadaan kekurangan oksigen, hipoksia,

dapat menyebabkan gangguan fungsi. Ketika sel tidak dapat
mengekstrak oksigen yang cukup, tekanan parsial oksigen dalam
sel menurun, yang mengarah ke penurunan respirasi mitokondria
dan metabolisme oksidatif. Namun, respon seluler terhadap stres
hipoksik tergantung pada jenis sel, kematangan, dan kondisi
lingkungan. Misalnya, sel mesenchymal (MSC) in vivo berada di
daerah hipoksia dalam tubuh kita dan ketika mereka dikultur
dalam keadaan hipoksia in vitro, kemampuan proliferasi dan
pembaharuan diri meningkat secara signifikan. Pengurangan
tekanan oksigen atmosfer secara signifikan dapat mengubah
metabolisme stem cells.
Pada penelitian dengan menggunakan Adipose Derived
Stem Cells (ADSC) dalam keadaan hipoksia, ternyata didapatkan
bahwa hipoksia dapat meningkatkan proliferasi ADSCs dan
memperbesar

fungsi

penyembuhan

luka

ADSCs

dengan

meningkatkan Vascular Derived Growth Factor (VEGF) dan basic

Fibroblast Growth Factor (bFGF). (Lee, et al, 2009)

DAFTAR PUSTAKA
Niall, Margaret, et al. 1982. The Effect of Epidermal Growth Factor on Wound
Healing in Mice. Journal of Surgical Research. Vol 33. p 164-169.
Lee, Eun Young, et al. 2009. Hypoxia-enhanced wound-healing function of adiposederived stem cells : Increase in stem cell proliferation and up-regulation of VEGF and bFGF.
Wound Repair and Regeneration. Vol 17. p 540-547.
Heck, Diane E, et al. 1992. Epidermal Growth Factor Suppresses Nitric Oxide and
Hydrogen Peroxide Production by Keratinocytes. The Journal of Biological Chemistry. Vol
267. No. 30. Issue 25. pp. 21277-21280.
Lynch, Samuel E, et al. 1987. Role of platelet-derived growth factor in wound
healing : Synergistic effects with other growth factors. Proc. Nat. Acad. Sci. USA. Medical
Sciences. Vol 84. pp. 7696-7700.
Schingemann, Reinier O. 2004. Role of Growth Factors and the wound healing
response in age-related macular degeneration. Graeme's Arch Clin Exp Ophthalmol. 242:91101.
Brown, Lawrence F. 1992. Expression of Vascular Permeability Factor (Vascular
Endothelial Growth Factor) by Epidermal Keratinocytes during Wound Healing. Downloaded
from em.rupress.org on November 18, 2014.
Brown, Gregory L, et al. 1989. Enhancement of Wound Healing by Topical
Treatment with Epidermal Growth Factor. The New England Journal of Medicine.
Downloaded from nejd.org on April 30, 2013.