Oxygen Radical Absorbance Capacity (ORAC)

Gambar 1. ORAC aktivitas antioksidan sampel diuji dinyatakan sebagai daerah bersih di bawah kurva
(AUC).
Pengukuran ORAC menghambat radikal peroxyl radikal oksidasi yang disebabkan oleh antioksidan
sehingga merefleksikan klasik radikal rantai-pemutus aktivitas antioksidan melalui transfer atom H.
Dalam uji dasar, peroxyl radikal bereaksi dengan probe neon untuk membentuk produk nonfluorescent,
yang dapat dihitung secara kuantitatif dengan mudah oleh fluoresensi. Kapasitas ditentukan oleh tingkat
penurunan dan jumlahproduk yang terbentuk dari waktu ke waktu:

Ferric Reducing Antioxidant Power (FRAP)

Merupakan uji yang digunakan untuk pemeriksaan antioksidan dalam tumbuhan. Reaksi ini
dapat mendeteksi senyawa dengan potensial redoks <0.7 V (Potensial redoks pada Fe3+-TPTZ),
Sehingga FRAP digunakan melalui kemampuannya untuk mempertahankan status redoks dalam
sel atau jaringan. FRAP assay dilakukan pada pH asam 3,6 untuk mempertahankan kelarutan
besi. Hasil FRAP dapat sangat bervariasi tergantung pada skala waktu analisis. Kecepatan reaksi
fenol yang mengikat besi atau memecah senyawa dengan rendah atau perbedaan reaktifitas lebih
baik dianalisis dengan waktu reaksi yang singkat, misalnya, 4 menit.

2,2-Diphenyl-1-picrylhydrazyl (DPPH)

Radikal DPPH adalah salah satu dari beberapa radikal nitrogen organik yang stabil, yang
dikenakan warna ungu. Uji ini didasarkan pada pengukuran kemampuan mengurangi antioksidan
terhadap DPPH. Kemampuan tersebut dapat dievaluasi dengan resonansi spin elektron (EPR)
atau dengan mengukur penurunan absorbansi nya. Tes antioksidan ini didasarkan pada
pengukuran dari hilangnya warna DPPH pada max=515 nm setelah terjadi reaksi dengan
senyawa uji, dan dipantau menggunakan spektrometer.
DPPH: DPPH. + ArOH DPPH + ArO. + H+ (20)
Persentase DPPH sisanya dihitung sebagai: % DPPH*REM = 100 x [DPPH*]REM/[DPPH*]T=0

Total Reactive Antioxidant Potential (TRAP)

Gambar 4: Aktivitas antioksidan dengan TRAP.

A) Perbandingan aktivitas kinetik dari kontrol
positif (Trolox) pada konsentrasi 200 dan
500nm. (B) Perbandingan sampel dari
Lastreopsis amplissima, dari negara bagian Rio
Grande do Sul (RS) dan So Paulo (SP), pada
lima konsentrasi yang berbeda. (a), (b) dan (c)
Menunjukkan nilai-nilai yang secara statistik
berbeda dari semua sampel lainnya; P <0,05
TRAP: Merupakan metode yang paling
banyak digunakan untuk mengukur kapasitas
antioksidan total plasma atau serum selama
dekade terakhir. Metode ini memonitor
kemampuan senyawa antioksidan mengganggu
reaksi antara radikal peroksil yang dihasilkan
oleh peroxyl radicals generated by AAPH or
ABAP
[2,2-azobis(2-amidinopropane)
dihydrochloride] dan probe target. Variasi
berbeda dari metode ini adalah menggunakan
oksigen, fluorescence of R-phycoerythrin atau
penyerapan
dari
2,2-azinobis(3ethylbenzothiazoline-6-suslfonic acid (ABTS) sebagai reaksi probe. Uji TRAP melibatkan
inisiasi peroksidasi lipid dengan menghasilkan radikal peroksil yang larut dalam air dan sensitif
terhadap semua rantai yang dikenal memutus antioksidan, tetapi relatif kompleks dan memakan
waktu untuk melakukannya, serta membutuhkan tingkat keahlian dan pengalaman yang tinggi.

Trolox Equivalent Antioxidant Capacity (TEAC)

ABTS/TEAC: ABTS + K2S2O8 ABTS.+ (18)

max=734 nm
ABTS.+ + ArOH ABTS + ArO. + H+ (19)
ABTS (nama lain TEAC): 2,2-azino-bis(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid). Dalam
pengujian ini, ABTS teroksidasi oleh radikal peroksil atau oksidan lain yang radikal kation,
ABTS+, yang sangat berwarna. Uji ini dapat dilakukan pada pH asam, namun lebih baik jika
dilakukan pada pH netral. Maxima penyerapan (IMAX) dari ABTS+ dapat terbukti pada panjang
gelombang 415, 645, 734, dan 815 nm. Namun panjang gelombang 415 dan 734 nm diadopsi
oleh sebagian besar peneliti untuk spektrofotometri dalam rangka memantau reaksi antara
antioksidan dengan ABTS+.