Rifqianingrum A. P.

(15131000
Harira Yunita P.

(1514100067)

ABSTRAK
Perubahan dan modifikasi merupakan proses yang berkesinambungan dalam kemajuan
teknologi.Penelitian sedang dilakukan untuk memahami dasar seluler dan molekuler dari segala
penyakit.Sebagian besar metode konvensional untuk mengobati penyakit belum memberikan hasil
yang memuaskan, sehingga saat ini ada peningkatan fokus pada terapi gen untuk mengobati berbagai
macam penyakit warisan dan diperoleh. Terapi gen adalah penggunaan gen sebagai obat. Ini adalah
metode yang gen yang rusak diganti atau diperbaiki oleh gen terapeutik. Terapi gen dapat digunakan
untuk mengobati berbagai macam penyakit mulai dari gangguan gen tunggal untuk gangguan multigen. Ini memiliki berbagai aplikasi di bidang kedokteran gigi seperti dalam kondisi kanker dan
prakanker, gangguan kelenjar ludah, penyakit autoimun, perbaikan tulang, vaksinasi DNA, perbaikan
tulang dll kelenjar ludah minor dan keratinosit hadir dalam mukosa mulut situs target yang sangat
baik untuk gen terapi karena dapat dengan mudah dicapai dengan cara invasif minimal. Hal ini
membuat dokter gigi sebagai kandidat yang cocok untuk terapi gen. Tujuan artikel ini adalah untuk
fokus secara singkat pada prinsip-prinsip dasar terapi gen, aplikasi di bidang kedokteran gigi dan
keterbatasan dan kekurangan.

PENDAHULUAN
Para ilmuwan berusaha untuk memberantas penyakit dengan mengubah gen yang
bertanggung jawab untuk itu. Proses di mana hal ini dilakukan disebut terapi gen. Joshua Lederberg
dan Edward Tatum ditata prinsip dasar untuk terapi gen [1]. Kemajuan teknologi biologi molekuler
seperti teknologi DNA rekombinan telah membuat para peneliti untuk memanipulasi gen lebih
mudah. Gen adalah unit fungsional terkecil dari sistem genetik, yang mengontrol perkembangan dan
fungsi dari semua organisme. Sebuah gen adalah urutan linear DNA yang kode untuk protein tertentu
[2].Protein adalah molekul besar yang melakukan berbagai fungsi penting dalam tubuh. DNA
konstituen gen terdiri dari 4 basa: adenin, guanin, sitosin dan timin. Basis-basis ini diperintahkan
untuk membuat bahasa gen [3]. Ketika gen yang berubah, protein yang dikodekan tidak dapat
melaksanakan fungsi normal mereka mengakibatkan penyakit.
Gen terutama berkaitan dengan dua jenis fungsi-menentukan struktur ribuan protein yang
berbeda yang hadir dalam tubuh manusia dan mengendalikan di mana, kapan dan berapa jumlah
masing-masing protein dibuat [4]. terapi gen didasarkan pada prinsip bahwa gen normal dimasukkan
untuk mengimbangi gen nonfungsional dan gen abnormal dapat diperbaiki melalui mutasi terbalik
selektif.Menggunakan persiapan dimurnikan dari gen atau sebagian kecil dari gen untuk mengobati
penyakit.Para ilmuwan mulai meneliti terapi gen dengan bakteri pada tahun 1980 dan pertama terapi
gen pada manusia dilakukan pada tahun 1990 untuk mengobati imunodefisiensi gabungan yang parah
yang bekerja untuk hanya beberapa bulan [2]. Awalnya pada tahun 1980 terapi gen dikenal sebagai
terapi pengganti gen. Penyakit genetik seperti cystic fibrosis, kelainan darah, distrofi otot dan diabetes
dll dapat berusaha untuk disembuhkan dengan terapi gen [5]. Terapi gen dalam beberapa hari terakhir
telah berkembang dengan pesat dan aplikasinya dalam kedokteran gigi mencakup perbaikan tulang,
pengobatan penyakit kelenjar ludah, penyakit auto imun, kanker dan lesi prakanker, nyeri, vaksinasi
DNA (penyakit periodontal, karies) dan gangguan dermatologis [2 , 4, 6].Hal ini digunakan untuk
menggantikan gen yang rusak atau untuk memperkenalkan gen baru yang berfungsi untuk
menyembuhkan atau untuk menguntungkan memodifikasi perjalanan klinis kondisi.gen yang
ditransfer dapat digunakan baik untuk reparatif atau tujuan farmakologis.

Prinsip-prinsip Terapi Gen

Terapi gen adalah penggantian materi genetik yang rusak seseorang dengan materi genetik
yang normal untuk mengobati atau menyembuhkan penyakit atau kondisi medis yang tidak normal
(US Food and Drug administrasi) [7] an prosedur yang terlibat dalam terapi gen mencakup:

Menentukan gen yang diinginkan,

Mendapatkan salinan normal gen (gen terapeutik) oleh enzim endonuklease restriktif
(pemotongan dan penyambungan) dan
Akhirnya kloning gen terapeutik menjadi vektor, yang merupakan wahana untuk memberikan
gen yang diinginkan [2].

Gen Transfer khasiat dan pengujian sistem keamanan harus dilakukan sebelum terapi [5].
Gen yang rusak dapat diperbaiki dengan beberapa metode [3] antara lain:

Peraturan gen tertentu (sejauh mana gen diaktifkan atau off) dapat diubah
gen rusak dapat diganti untuk gen normal melalui rekombinasi homolog.
gen normal dimasukkan ke dalam lokasi spesifik dalam genom untuk mengganti gen
nonfungsional.
gen abnormal diperbaiki melalui mutasi terbalik selektif yang mengembalikan gen untuk status
fungsional normal.

PRINSIP-PRINSIP UMUM TRANSFER GEN

Konsep terapi gen melibatkan pengenalan gen eksogen ke dalam sel somatik yang
membentuk organ-organ tubuh untuk menghasilkan efek terapi yang diinginkan. fragmen DNA yang
dipilih pertama dibelah menggunakan endonuklease restriksi. Kemudian vektor atau kendaraan siap
untuk mentransfer materi genetik. vektor terisolasi, dimurnikan dan dibelah untuk memungkinkan
penyisipan fragmen DNA. Fragmen DNA kemudian harus bergabung ke ujung dibelah dari vektor,
secara efektif menutup molekul. Ini penyisipan sukses dari molekul DNA eksogen ke dalam hasil
vektor dalam chimera DNA. konstruksi vektor ini merupakan dasar dari teknik DNA
rekombinan.Langkah berikutnya melibatkan pengenalan construct ke dalam sel, yang memungkinkan
produksi garis sel yang identik secara genetik yang mengandung urutan DNA diperkenalkan oleh
vektor. Hal ini memungkinkan produksi massal sel dengan dirancang khusus genetik make-up [1, 3,
4].
Vektor dapat diberikan secara intravena atau disuntikkan langsung ke dalam jaringan tertentu
dalam tubuh, di mana ia diambil oleh sel target individual. Atau sel perwakilan pasien yang
dikeluarkan dari tubuh bisa terkena vektor di laboratorium. Sel-sel yang sekarang berisi vektor
diperkenalkan kembali ke pasien untuk tindakan terapeutik. Vektor memberikan gen terapeutik ke
target pasien. Sel target menjadi infektif dengan gen terapeutik melalui vektor. protein fungsional
dibuat dari gen terapeutik menyebabkan sel untuk kembali ke tahap yang normal [3, 4].

Persyaratan untuk Vector

Persyaratan ideal untuk vektor adalah [1, 2, 4]

Tidak harus diidentifikasi oleh sistem kekebalan tubuh (non-imunologi)

Harus stabil dan mudah untuk mereproduksi
Harus memiliki umur panjang ekspresi
Harus memiliki efisiensi tinggi (100% sel transfected)
spesifisitas tinggi dan toksisitas rendah

 Ini harus dapat untuk melindungi dan memberikan DNA di membran sel ke dalam inti. Ini harus
dapat menargetkan pengiriman gen ke sel-sel spesifik
itu harus mudah untuk diproduksi dalam jumlah besar dan menjadi murah
Saat ini tidak ada jenis vektor tunggal akan memenuhi semua kebutuhan untuk semua
jaringan, yang vektor yang berbeda akan dibutuhkan untuk aplikasi klinis yang berbeda.

Jenis Vector untuk terapi gen

Vektor dapat berupa Viral atau Non-Viral.

Viral vektor-Umumnya digunakan vektor virus yang Adenovirus, Adeno terkait virus (AAV),
virus Retro dan Herpes simplex virus. Di antaranya, adenovirus yang umum digunakan, karena dapat
dibudidayakan dengan mudah dan lebih rendah patogenisitas [2]. Virus ini dilemahkan untuk transfect
gen, tetapi mereka tidak bisa meniru atau menyebabkan infeksi.
Menghilangkan kemampuan mereka untuk meniru melalui manipulasi genetik dari virus tipe
liar menghilangkan patogenesitas virus [4] .A berbagai vektor virus yang telah digunakan untuk
memberikan gen memiliki kelebihan dan kekurangan mereka sendiri. transfer gen dimediasi oleh
vektor virus yang disebut sebagai transduksi [8].

Adenovirus
Mereka menginfeksi sel membelah dan sel non pemisah. Adenovirus tidak mengintegrasikan
DNA asing ke dalam sel inang; bukan DNA asing ada secara independen dalam nukleus. Adeno terkait
virus, yang terkecil dari tiga vektor terdaftar, hanya dapat menampung sekitar setengah sebanyak
DNA asing seperti yang lain. vektor ini dapat menyisipkan materi genetik mereka di situs tertentu dari
kromosom 19 [9] .Disadvantage vektor ini terletak pada aktivasi kedua bagian bawaan dan adaptif
dari sistem kekebalan tubuh penerima bila diterapkan dalam vivo [10].

Retrovirus
Retrovirus menginfeksi hanya membagi sel. Mereka secara permanen mengintegrasikan DNA
asing ke dalam kromosom sel inang dan dengan demikian menyebabkan ekspresi stabil. Namun,
penyisipan gen tidak terkontrol, dan itu terjadi dengan cara seperti menyebabkan mutasi
sel. Retroviral vektor membutuhkan pembelahan sel mitosis untuk transduksi [11].

Virus herpes simpleks

Double stranded virus yang menginfeksi jenis sel tertentu yaitu neuron [9, 12].

Non Viral Vectors- lebih lanjut dapat diklasifikasikan ke dalam vektor fisik dan kimia. transfer gen
dimediasi oleh vektor non virus disebut sebagai transfeksi [8].

Vektor fisik
Electrophoration, injeksi dan penggunaan partikel Balistik [6].
Vektor Kimia
Sertakan vektor kalsium, lemak dan protein kompleks.
Electrophoration
Dalam metode ini, arus listrik menciptakan lubang sementara di membran sel melalui mana DNA
dapat ditransfer.

Injeksi
Dalam metode ini, DNA diperkenalkan dalam satu sel
Penggunaan Balistik Partikel: The DNA plasmid dilapisi ke tungsten atau emas partikel. gaya
dipercepat dihasilkan oleh tegangan tinggi spark elektronik, atau debit helium untuk mendorong
manik-manik ke dalam jaringan.
Kalsium Vector: Ukuran ultra-rendah, sangat monodispersed partikel DNA didoping kalsium fosfat
nano melindungi dari lingkungan DNAse eksternal dapat digunakan secara aman untuk mentransfer
DNA dikemas di bawah in vitro dan in vivo kondisi.

Lipid Vektor: Penciptaan bola lipid buatan dengan inti berair, liposom - membawa DNA terapi melalui
membran. Mereka diproduksi dengan kombinasi DNA plasmid dan solusi yang menghasilkan
pembentukan liposom. Ini sekering dengan membran sel dari berbagai jenis sel, memperkenalkan
DNA plasmid ke dalam sitoplasma dan di mana ia transien diungkapkan [1, 2].

Protein Complex: Beberapa kelompok mengembangkan sistem pengiriman DNA sel-spesifik yang
memanfaatkan reseptor permukaan sel yang unik pada sel target. Dengan melampirkan ligan diakui
oleh reseptor tersebut ke DNA transfer, DNA ligan kompleks menjadi selektif terikat dan akan
diinternalisasikan ke dalam sel target [4].

Pilihan Non-Viral lainnya termasuk,

Pengenalan langsung dari DNA terapi - Kerugian yang dapat digunakan hanya dengan jaringan
tertentu dan membutuhkan banyak DNA [3] Mencoba untuk memperkenalkan kromosom 47 [2] kromosom ini akan bersama kromosom 46 dan bertindak secara otonom tanpa mempengaruhi fungsi
atau menyebabkan mutasi. Keuntungan adalah bahwa itu dapat membawa sejumlah besar kode
genetik dan juga karena otonomi, sistem kekebalan tubuh tidak akan menyerang. Kelemahan adalah
kesulitan dalam memperkenalkan molekul besar seperti ke dalam inti dari sel target [3].
Metode non viral menyajikan kelebihan tertentu atas metode viral, dengan sederhana produksi
skala besar dan imunogenisitas tuan rendah menjadi hanya dua. Sebelumnya, rendahnya tingkat
transfeksi dan ekspresi gen diadakan metode nonviral dirugikan; Namun, kemajuan terbaru dalam
teknologi vektor telah menghasilkan molekul dan teknik dengan efisiensi transfeksi mirip dengan
virus. Selain vektor virus, sel induk juga digunakan dalam terapi gen. Sel induk yang dimanipulasi di
laboratorium untuk membuat mereka menerima gen baru yang dapat mengubah fungsi mereka [4, 5].

Jenis terapi gen [2, 3]

Germ baris terapi gen: Memperbaiki atau mengganti gen yang rusak dalam sel garis kuman. gen
yang dimodifikasi akan diwariskan.
terapi gen somatik: Memperbaiki atau mengganti gen yang rusak di beberapa atau semua sel-sel
tubuh dari seorang individu. Namun perubahan tersebut tidak diteruskan ke generasi berikutnya

Jenis pengiriman
In vivo: pengiriman gen berlangsung dalam tubuh. Selama in vivo transfer gen, gen asing
disuntikkan ke pasien dengan metode viral load dan non.
Ex vivo: pengiriman terjadi di luar tubuh dan sel-sel ditempatkan kembali ke tubuh. Ex vivo transfer
gen melibatkan gen asing tertransduksi ke sel-sel jaringan dibudidayakan di laboratorium di luar
tubuh, dan kemudian menghasilkan sel rekayasa genetika yang ditransplantasikan kembali ke pasien.

Terapi gen yang sukses membutuhkan [1]

sifat genetik dari penyakit ini benar-benar dipahami

Gen dapat dikirim ke sel target jaringan yang terkena / organ
gen transfected harus aktif untuk durasi dimaksudkan
efek samping Berbahaya jika dilihat harus dikelola

Kesulitan dalam terapi gen meliputi [9]

Kesulitan untuk memberikan gen di beberapa situs seperti sel paru-paru
Gen mungkin mengintegrasikan di situs mana ia dapat mempengaruhi fungsi lain gen
Vektor
dapat diakui sebagai -foreign oleh sistem kekebalan tubuh memicu respon imun
vektor virus dapat menyebabkan keracunan, respon inflamasi dan mungkin memulihkan kemampuan
mereka untuk menyebabkan penyakit
gangguan
multigene sulit untuk mengobati dengan gen terapi
Gene terapi mahal

Reaksi merugikan yang paling sering diamati untuk terapi gen adalah proses peradangan berat
dan koagulopati, umumnya dalam kaitannya dengan vektor virus yang digunakan [10, 13, 14].

Aplikasi dalam kedokteran gigi

Perbaikan tulang
Keropos tulang yang disebabkan oleh trauma, neoplasia, bedah rekonstruksi, cacat bawaan
atau penyakit periodontal merupakan masalah kesehatan utama di seluruh dunia. Regenerasi struktur
tulang ini akan sangat besar berguna dalam pengobatan anomali kraniofasial dan lainnya tulang, gigi,
temporomandibular dan penyakit sendi lainnya, amputasi traumatik dan konsekuensi dari tumor
reseksi [15, 16]. Protein morphogenic tulang (BMP) memungkinkan pembentukan jaringan tulang
selama embriogenesis, pertumbuhan, dewasa, dan penyembuhan. Mungkin BMP (BMP 2, 4 dan 7)
adalah satu-satunya faktor pertumbuhan yang secara tunggal dapat menginduksi pembentukan tulang
de novo baik in vitro dan pada situs heterotopic. cacat tulang di daerah mulut dan maksilofasial dapat

diperbaiki oleh gen mentransfer pengkodean BMP (Bone Morphogenik Protein) [17]. Ini akan mungkin
untuk langsung memberikan gen BMP-2 in vivo untuk jaringan melalui vektor virus adeno untuk
menyembuhkan cacat tulang [2, 5]. Dalam satu studi rekayasa genetika sel induk mesenchymal
mengekspresikan BMP-2 yang diinduksi pembentukan peningkatan pembuluh darah baru serta tulang
baru [6]. kelompok riset Michigan telah menemukan non osteogenik fibroblast (gingiva, pulpa gigi)
mengungkapkan BMP-7 gen setelah terinfeksi dengan vektor virus adeno. BMP adalah agen mapan di
induksi baik pembentukan tulang orthotopic dan ektopik. Dalam ex vivo studi, peneliti mencapai
transfer gen yang sebenarnya dalam lingkungan kultur jaringan dan kemudian menempatkan sel-sel
ditransduksi membawa gen asing kembali ke host [6] .Transferring platelet-derived growth factor gen
ke sel periodontal hasil dalam sintesis DNA dan proliferasi sel. Pengiriman PDGF oleh transfer gen
telah ditunjukkan untuk merangsang fibroblast gingiva, PDL dan sel gigi-lapisan (cementoblast)
mitogenesis dan proliferasi atas bahwa administrasi PDGF terus menerus in vitro. PDGF juga telah
menunjukkan efek positif dalam regenerasi tulang di sekitar gigi dan implan gigi [18]. Ini akan
memfasilitasi regenerasi lokal dari tulang untuk prosedur bedah periodontal dan oral. Tulang
sialoprotein (BSP) adalah protein kolagen non utama dalam tulang dan jaringan termineralisasi
lainnya. Dengan pengiriman in vivo dari gen BSP menjadi cacat tulang, telah ditunjukkan untuk
regenerasi tulang alveolar periodontal [4]. Studi telah menunjukkan potensi penggunaan pengiriman
gen untuk regenerasi tulang alveolar dan sementum sekitar gigi dan tulang alveolar yang terkait
dengan perlengkapan implan gigi [18].

Ex vivo Gene transfer untuk Perbaikan Tulang

Keuntungan dari ex vivo pendekatan transfer gen adalah bahwa sel-sel spesifik seperti sel-sel
sumsum tulang atau sel induk dapat dipilih sebagai kendaraan pengiriman selular untuk masalah klinis
tertentu. Selain itu, ex vivo strategi memiliki efisiensi tinggi transduksi sel. Hal ini dimungkinkan untuk
memanen sel dari pasien, memiliki waktu yang sangat singkat infeksi dan reimplant sel ditransduksi di
lokasi anatomi yang tepat. Sel-sel yang telah menerima paling menarik sebagai kendaraan pengiriman
seluler sel batang mesenchymal, sel-sel induk otot yang diturunkan, sel induk adiposa yang
diturunkan, buffy sel mantel dari sumsum tulang atau darah dan kulit fibroblast [4, 6] .Delivery dari
beberapa gen dapat meningkatkan perbaikan tulang

Rekayasa jaringan
Konstruksi gen, seperti DNA plasmid atau partikel virus secara fisik terjebak dalam
matriks. Ketika matriks ini / perancah ditanamkan ke dalam kerusakan jaringan, sel inang bermigrasi
ke implan, mengambil konstruk gen dan mulai memproduksi protein dikodekan [16].

Rasa sakit
Mengelola atau menghilangkan rasa sakit adalah bagian utama dari praktek dokter
gigi. Penggunaan teknologi transfer gen menawarkan pendekatan berpotensi baru untuk memanipulasi
tertentu, terlokalisasi jalur biokimia yang terlibat dalam generasi nyeri. transfer gen mungkin sangat
berguna untuk mengelola dan rasa sakit kronis keras. Beberapa penelitian pada hewan model
menunjukkan bahwa transfer dimediasi virus gen yang mengkode peptida opiat ke neuron perifer dan
sentral dapat menyebabkan efek antinociceptive. Penelitian lebih lanjut diperlukan sebelum transfer
gen dapat diuji secara klinis sebagai strategi untuk manajemen nyeri kronis. Penggunaan transfer gen
di tempat pengiriman obat untuk mencapai rilis terus menerus peptida bioaktif berumur pendek di
atau dekat dorsal horn spinal mendasari strategi yang paling umum untuk terapi gen sakit. injeksi
intratekal vektor berasal dari adenovirus, AAV atau lipid dikemas plasmid coding neuron interleukin10, pentransduksi dari punggung Akar Ganglia dengan suntikan vektor berdasarkan herpes simplex

virus ke dalam kulit dan menyuntikkan virus vektor yang membawa gen untuk opioid endogen telah
dicoba untuk mengontrol rasa sakit kronis. Juga pengiriman gen langsung ke permukaan artikular
sendi temporomandibular telah ditemukan untuk menjadi layak. Penelitian dalam hal ini dapat
mengakibatkan strategi pengobatan baru untuk sakit temporomandibular kronis [4, 6].

DNA Vaksinasi
Ilmuwan gigi telah mencoba menggunakan teknologi vaksinasi klasik untuk memberantas
karies gigi atau penyakit periodontal, sejauh mencapai keberhasilan yang beragam. Fokus modern
secara langsung memberikan DNA dalam plasmid daripada administrasi tradisional dari protein
dimurnikan atau mikroba yang dilemahkan. Kemampuan untuk menginduksi respon imun terhadap
antigen protein dengan pemberian DNA plasmid encoding antigen yang telah berhasil menunjukkan
pada model binatang. Aplikasi vaksinasi DNA berada dalam tahap awal penggunaannya dengan
jaringan oropharyngeal. vaksinasi DNA akan memainkan peran dalam strategi masa depan untuk
mencegah penyakit periodontal dan karies gigi. Imunisasi kelenjar ludah menggunakan DNA plasmid
yang mengkodekan Porphyromonas gingivalis gen fimbrial mengarah ke produksi protein fimbrial lokal
di jaringan kelenjar ludah dengan produksi akibat dari saliva spesifik immunoglobulin A, atau IgA, dan
immunoglobulin G, atau IgG, antibodi dan antibodi serum IgG . Juga generasi limfosit T sitotoksik
spesifik antigen dapat dicapai sehingga perlindungan dari P. gingivalis. Juga setiap disekresikan
protein fimbrial dalam air liur bisa mengikat komponen pelikel dan juga menghambat perlekatan P.
gingivalis untuk plak berkembang. Telah dilaporkan bahwa plasmid PCIA-P encoding gen pac dari
S.mutans bisa menginduksi antikaries pelindung respon imun pada tikus dengan sasaran imunisasi
kelenjar ludah [4, 6] strategi penelitian .Future harus diarahkan ke arah ini untuk mencegah penyakit
periodontal dan karies gigi.

Keratinosit
Keratinosit adalah sel yang hadir dalam mukosa mulut. Beberapa fitur membuat epidermal dan
mukosa keratinosit, menarik untuk mengobati gangguan jaringan lokal dan sebagai terapi gen
sistemik. Kehadiran sel induk dalam keratinosit juga keuntungan. Mereka mudah diakses dan
pemantauan dapat akurat. penilaian praklinis dapat dilakukan secara akurat karena model budaya
ditetapkan. Prosedur untuk tanam lembar keratinosit ditetapkan karena aplikasi mereka untuk pasien
luka bakar. Hal ini reversibel karena jaringan rekayasa genetika dapat dipotong. keratinosit lisan
berbudaya telah dicangkokkan ke cacat bedah mulut. Mereka bertahan di situs tersebut dan
menunjukkan morfologi epitel normal. Ekspresi gen terapeutik dapat dicapai dengan penggunaan agen
topikal. Kemampuan keratinosit manusia ditransduksi untuk mensintesis dan mensekresikan protein
rekombinan biologis aktif telah dibuktikan. hormon pertumbuhan manusia, apolipoprotein E dan
koagulasi cascade faktor IX yang berhasil disampaikan oleh keratinosit yang dimodifikasi secara
genetik. Terapi gen dapat digunakan untuk mengobati gangguan keratinosit dan gangguan
dermatologi seperti ichthyosis dan epidermolisis bulosa [2, 4, 6]. Kemajuan dalam penelitian terapi
gen masa depan bisa memanfaatkan keratinosit untuk mengobati penyakit

Kelenjar ludah
Ludah Kelenjar menghasilkan sejumlah besar protein dan situs mudah diakses untuk transfer
gen dengan invasif minimal melalui kanulasi intraductal. Pembukaan saluran utama dalam rongga
mulut cannulated dan vektor pengiriman gen, virus atau nonviral, diresapi dengan injeksi
retrograde.kelenjar ludah dikemas yang meminimalkan akses yang tidak diinginkan dari vektor
diberikan dan transgen ke jaringan lain. Tujuan adalah untuk memberikan terapi gen untuk pasien
yang menderita disfungsi kelenjar ireversibel saliva yang dihasilkan baik dari iradiasi untuk kanker
kepala dan leher atau kerusakan autoimun terjadi dengan sindrom Sjgren dengan menambah sekresi
saliva dengan mentransfer gen yang mengkode protein sekretori ke kelenjar ludah. Protein

selanjutnya disekresikan secara eksokrin. kelenjar ludah adalah jaringan sekretori dan lokal (oral,
faring dan esophagus) aplikasi terapi gen dapat dicapai melalui sekresi eksokrin produk transgen
dalam air liur. kelenjar ludah juga dapat digunakan untuk terapi gen untuk sistemik single-protein
gangguan defisiensi [2, 4, 6]. Sebuah penelitian menunjukkan bahwa terapi gen menggunakan IL-27
ameliorates sindrom seperti autoimun exocrinopathy Sjgren [19]

Kanker mulut
Strategi umum dalam pengobatan kanker adalah untuk mengekspresikan produk gen yang
akan mengakibatkan kematian sel kanker. Hal ini dapat dicapai dengan [1, 2, 20]
Penambahan gen supresor tumor (gen terapi Selain);
Penghapusan sebuah gen yang rusak tumor (gen terapi eksisi);
Down-regulasi ekspresi gen yang merangsang pertumbuhan tumor;
Peningkatan surveilans kekebalan (immunotherapy);
Aktivasi pro-obat yang memiliki efek kemoterapi dan menyebabkan keracunan hanya untuk sel
tumor ( "bunuh diri" terapi gen);
Pengenalan gen untuk menghambat angiogenesis tumor;
"vaksinasi Kanker" dengan gen untuk antigen tumor [21]
Tujuan dari terapi gen pada kanker adalah untuk memperkenalkan materi genetik baru ke
dalam sel kanker yang selektif akan membunuh sel-sel kanker, tidak menyebabkan toksisitas pada
sekitar sel-sel normal. perhatian utama tentang menggunakan vektor transfer gen dengan pasien,
yang memiliki penyakit autoimun, adalah kemungkinan reaksi imunologis terhadap vektor. Vektor
seperti adenovirus berguna untuk terapi gen dari kanker kepala dan leher. Adeno terkait vektor Virus
jauh lebih imunogenik dari vektor adenoviral. p53 gen penekan tumor adalah gen yang dihapus atau
bermutasi di lebih dari 50% dari kanker pada manusia. Insiden mutasi p53 di kepala dan leher kanker
diyakini lebih tinggi pada penyakit berulang. Menggantikan gen p53 yang bermutasi dengan wild type
(normal) gen p53 adalah pendekatan yang potensial untuk kepala dan pengobatan kanker leher. gen
supresor tumor lain yang bisa diganti dalam terapi kanker kepala dan leher adalah p16, karena dalam
Karsinoma Sel skuamosa kanker Kepala dan Leher 80% sampai 90% kasus menunjukkan p16
inaktivasi. Inaktivasi p16 diyakini menjadi salah satu langkah pertama dalam kepala dan
karsinogenesis kanker leher, dan karena itu mungkin merupakan target ideal untuk terapi penggantian
gen. transfer gen dari p27 gen ditemukan untuk menghambat siklus sel sel tumor, menginduksi
apoptosis dan memicu penekanan pertumbuhan tumor [20]. Telah menunjukkan bahwa p27 gen
mutasi sangat terkait dengan munculnya kanker lidah. Gen supresor tumor p16, p21, p27, dan Rb
sering bermutasi pada kanker kepala dan leher, dan oleh karena itu target potensial terapi gen [4, 6]
metode baru .A adalah terapi enzim-prodrug gen-diarahkan. Dalam hal ini virus rekombinan yang
dihasilkan yang mengkode enzim prodrug-mengaktifkan seperti nitroreductase, timidin kinase atau
sitosin deaminase. Setelah disampaikan ke sel tumor, enzim ini mampu mengkonversi prodrug
berbahaya (diberikan secara lokal atau sistemik) menjadi obat sitotoksik yang sangat beracun. Salah
satu contohnya adalah gen kinase timidin dari Herpes Simplex Virus (HSV) mengubah gansiklovir ke
gansiklovir fosfat. Obat diaktifkan mampu lintah dari sel yang terinfeksi virus untuk membunuh sekitar
sel yang tidak terinfeksi, menciptakan efek bystander 'pada kanker.Beberapa virus seperti virus
stomatitis vesikuler memiliki kemampuan alami untuk menginfeksi dan bereplikasi secara selektif pada
sel tumor. terapi gen dengan jenis vektor virus yang dilemahkan dengan promotor tumor tertentu
terintegrasi di dalamnya dapat menyebabkan oncolysis. mutasi genetik sudah ada dalam hasil sel
tumor di replikasi virus, lisis sel, virus menyebar dan kehancuran tumor [13]. Meningkatkan
sensitivitas tumor dengan proses terapi normal dengan menekan aktivitas NF-kB dengan penggunaan
terapi gen juga baik approach.NF-kB tampaknya berkontribusi terhadap perkembangan dan
metastasis dari berbagai kanker, termasuk OSCC, karena penghambatan mungkin menjadi
pengobatan coadjuvant berguna dalam terapi kanker mulut [20]. Studi masa depan dapat
memanfaatkan strategi multigene menargetkan beberapa jalur di sel-sel kanker [21].

Pergerakan orthodontik gigi

Pergerakan gigi tergantung pada remodeling tulang alveolar, yang dikendalikan oleh osteoklas
dan osteoblas. terapi gen dengan osteoprotegerin (OPG) dan RANKL telah digunakan untuk
menghambat dan mempercepat pergerakan gigi ortodontik pada model tikus. transfer gen RANKL
lokal ke jaringan periodontal dipercepat pergerakan gigi ortodontik oleh sekitar 150% setelah 21 hari,
tanpa memunculkan efek sistemik. Dengan demikian dapat membantu untuk memperpendek
perawatan ortodontik dan juga untuk bergerak gigi ankylosed. transfer gen OPG lokal dihambat
pergerakan gigi sekitar 50% setelah 21 hari dari aplikasi paksa [6]. Dalam prosedur serupa di masa
depan dapat digunakan oleh dokter gigi untuk mengurangi waktu perawatan dan meningkatkan hasil.

Terapi gen untuk tumbuh gigi yang baru

Pendekatan ini umumnya disajikan dalam menambah molekul untuk menginduksi de novo gigi
inisiasi di mulut. Mungkin dikombinasikan dengan regenerasi gigi gen-dimanipulasi; yaitu, sel gigi
endogen in situ dapat diaktifkan atau ditekan dengan teknik gen-pengiriman untuk menghasilkan
gigi. Lebih dari 200 gen yang diketahui diekspresikan selama perkembangan gigi. Baylor College of
Medicine telah menemukan PAX 9, gen induk penting untuk perkembangan gigi. de novo represi atau
aktivasi gen seperti Runx2 atau USAG-1 dapat digunakan untuk merangsang pertumbuhan gigi ketiga
untuk menginduksi pembentukan gigi baru di mouse [22]. peneliti gigi juga dapat berharap untuk
tumbuh gigi di laboratorium yang dapat ditanamkan ke dalam mulut pasien yang telah kehilangan gigi
mereka dengan cara lain. gigi ini akan tanpa saraf dan pembuluh darah, tetapi mereka akan dibuat
dari bahan yang sama seperti gigi manusia. Dalam rangka untuk mencapai hal ini, peneliti harus
menemukan gen yang bertanggung jawab untuk membangun 25 protein utama yang membentuk
struktur gigi. Selain itu, mungkin ada puluhan gen lain yang terlibat dalam menginstruksikan tubuh
kapan, bagaimana dan di mana untuk membentuk gigi tertentu. Mungkin ada sebanyak 10% dari total
jumlah gen entah bagaimana terlibat dalam pembentukan gigi [4].Harapannya adalah peneliti akan
dapat bioengineer gigi manusia untuk penggantian di masa depan.

Bedah gigi sebagai terapis gen

Peran dokter bedah gigi dalam terapi gen dapat dipertahankan. Keuntungan utama untuk
dokter gigi dalam studi terapi gen adalah aksesibilitas siap jaringan mulut. Rongga mulut berfungsi
sebagai jendela nyaman untuk tubuh. Jika aplikasi transfer gen lisan diperluas untuk penyakit
sistemik, penyedia perawatan kesehatan mulut di masa depan secara rutin bisa menjadi "terapis gen"
dengan target terapi baik di luar rongga mulut. dokter gigi telah mendapat pendekatan yang mudah
ke daerah-daerah seperti kelenjar ludah dan keratinosit (epitel oral). kelenjar ludah situs target yang
sangat baik untuk transfer gen, mudah dicapai dengan cara invasif minimal. Ada sekitar 500-1000
kecil kelenjar ludah di rongga mulut. kelenjar ludah menghasilkan sejumlah besar protein dan itu
adalah sebuah situs di mana transfer gen dapat segera dicapai dengan cara invasif minimal. kelenjar
ludah bisa digunakan untuk aplikasi terapi gen dengan kekurangan protein tunggal. Ireversibel ludah
disfungsi kelenjar karena penyakit autoimun dan iradiasi juga dapat diperbaiki dengan menggunakan
terapi gen. Keratinosit adalah sel yang hadir dalam mukosa mulut. Beberapa fitur membuat epidermal
dan mukosa keratinosit, menarik untuk mengobati gangguan jaringan lokal dan sebagai terapi gen
sistemik. Ekspresi gen terapeutik dapat dicapai dengan penggunaan agen topikal. dokter gigi dapat
menjadi yang terbaik profesional pas untuk mengelola terapi gen dalam rongga mulut yang dikenakan
kelenjar ludah minor dan keratinosit. Juga dengan penelitian masa depan dan kemajuan pada pasien
terapi gen dengan nyeri keras di bagian manapun dari tubuh dapat berjalan di klinik gigi untuk
mendapatkan / nya rasa sakit lega melalui terapi gen. Di dokter gigi di masa depan akan memiliki
peran yang tak terpisahkan dalam bidang terapi gen [2, 4, 6, 23].

KESIMPULAN DAN ARAH MASA DEPAN

Terapi gen pada dasarnya terdiri dari memperkenalkan materi genetik tertentu ke dalam sel
target tanpa menghasilkan efek toksik pada jaringan di sekitarnya. halangan utama untuk
keberhasilan penerapan terapi gen untuk pengobatan berbagai penyakit tidak kekurangan gen terapi,
tetapi kurangnya sistem pengiriman gen beracun efisien. Penelitian harus difokuskan pada generasi
vektor kurang imunogenik dengan mengurangi sifat imunogenik dan untuk mencegah respon inflamasi
yang dimediasi oleh vektor. Masa depan terapi gen sangat baik dan menggembirakan. Terapi gen
memiliki potensi dan menjanjikan modalitas pengobatan sejumlah penyakit terutama untuk kanker
kepala dan leher. Ada banyak kondisi-non-mengancam kehidupan yang mempengaruhi kualitas hidup
pasien, yang tidak ada pengobatan yang efektif. Kemampuan virus herpes simplex untuk tinggal di
neuron dalam keadaan laten tanpa mempengaruhi fisiologi sel normal dapat digunakan dalam
pengobatan gangguan neurologis di masa depan. gigi ketiga yang mungkin secara lokal diinduksi oleh
terapi gen untuk menggantikan gigi yang hilang menyajikan konsep yang menarik dan tantangan bagi
para peneliti. Memahami mekanisme pembentukan gigi supernumerary yang secara harfiah
merupakan gigi ketiga dan menerapkannya dalam terapi gen akan membantu menghilangkan masalah
hilang gigi. Kurangnya perawatan yang cocok telah diizinkan morbiditas menjadi dasar rasional untuk
memperluas ruang lingkup terapi gen.